FR2828687A1 - Nouveaux peptides et leur utilisation comme medicaments contre l'infection par le fiv chez le chat - Google Patents
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Abstract
Peptides contenant au moins 25 motifs peptidiques consécutifs inclus dans l'une des séquences 649-696 et 710-782 de la protéine gp36 d'une souche de FIV, ou d'une séquence consensus correspondante, et contenant au plus 40 motifs peptidiques consécutifs de la protéine gp36 de FIV. Ces peptides sont utilisables comme médicaments l'infection par le FIV chez le chat.
Description
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La présente invention concerne de nouveaux peptides utilisables comme médicaments permettant de lutter contre l'infection par le virus de l'immunodéficience féline (FIV) chez le chat.
On sait que l'infection par le FIV est une infection répandue et ancienne qui pose d'importants problèmes de santé chez le chat domestique dans le monde entier ; voir par exemple G. Pancino et al., Annales de l'Institut Pasteur 5 (1), 25-34 (1994), et M.
Bendinelli et al., Clinical Microbiology Reviews, 8 (1), 87-112 (1995).
On a maintenant découvert de nouveaux peptides utilisables en thérapeutique vétérinaire pour traiter les infections par le FIV chez le chat.
Ces peptides ont la propriété d'inhiber le phénomène de fusion membranaire qui est le processus-clé permettant au virus FIV de pénétrer dans ses cellules cibles (principalement les lymphocytes T).
On sait que dans le traitement du SIDA humain, on utilise actuellement un traitement dit"trithérapie"dont le prix de revient est très élevé, et dont l'efficacité est remise en question par l'apparition de souches virales résistantes.
Il n'est pas possible d'envisager en pratique l'utilisation des trithérapies pour traiter les infections à FIV chez le chat, compte tenu de leur coût prohibitif.
Au contraire, les peptides constituent des principes actifs de faible coût. En outre, les peptides utilisables selon l'invention ont des séquences correspondant à certaines zones de la protéine transmembranaire d'enveloppe du FIV qui sont hautement conservées. Il n'y a donc pratiquement pas de risques d'apparition de souches virales résistantes, car ces zones hautement conservées correspondent à des séquences peptidiques qui sont très utiles, voire indispensables au virus, et dont certains acides aminés-clés ne peuvent en aucun cas être mutés sans compromettre l'entrée du virus, et donc sa réplication, dans les cellules cibles.
On peut mettre en évidence l'effet d'inhibition de l'entrée du virus FIV dans ses cellules cibles par divers tests connus, en particulier le test d'inhibition de la formation de syncitia. On peut opérer par exemple de la façon décrite par S. Lombardi et al., Virology, 220,274-284 (1996), qui utilise une lignée cellulaire fibroblastoïde de rein de félin Crandell désignée en abrégé par CrFK. Les cellules sont cultivées de façon connue. On ajoute le peptide étudié, à une concentration finale variant de 0,01 à 25 u. g/ml, à des fractions de 0,8 ml contenant 2. 104 cellules CrFK, puis on ajoute le virus
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FIV, isolé chez un chat séro-négatif à FELV (détection à l'aide du snap-test IDEXX), et multiplié de façon connue. Le sigle FELV désigne le virus de la leucémie féline. Après six jours de culture, on compte au microscope le nombre de syncitia formés. Pour les essais témoins, on ajoute, à la place du peptide testé, soit un peptide de même composition en acides aminés, mais de séquence aléatoire, soit un neuropeptide commercialisé par la firme NEOSYSTEM (Strasbourg, France) sous la dénomination SC371.
Les peptides de l'invention inhibent la formation des syncitia, cette inhibition étant fonction de la dose de peptide.
Les peptides constituant le principe actif des médicaments selon l'invention correspondent à des séquences incluses dans la séquence de la protéine gp36 de FIV. Ces peptides ont une séquence peptidique contenant au moins 25 motifs peptidiques consécutifs (résidus d'acides aminés), et en particulier au moins 30 motifs peptidiques consécutifs inclus dans l'une des séquences 649-696 et 710-782 de la protéine gp36 d'une souche de FIV ou d'une séquence consensus correspondante, et lesdits peptides contiennent au plus 40 motifs peptidiques.
Dans le Tableau 1 annexé, on a représenté les séquences 649-782 de la protéine gp36 de diverses souches connues du FIV en utilisant les symboles conventionnels de représentation des acides aminés. Ces séquences sont accessibles notamment auprès de la base de données SWISSPROT. Les codes SWISSPROT de ces souches sont mentionnés dans le Tableau 1. On peut donc aisément identifier à l'aide du Tableau 1 les séquences qui sont mentionnées dans la description de la présente demande.
Dans le Tableau 2 annexé, on a représenté une séquence consensus 649-782 correspondante en utilisant les symboles conventionnels de représentation des acides aminés.
Dans les séquences qui viennent d'être mentionnées, on peut remplacer K par R ou par Q, on peut remplacer R par K ou par Q, et on peut remplacer I par L et inversement.
Les peptides de l'invention peuvent également être utilisés sous la forme de leurs dérivés N-acétylés ou sous la forme de leur dérivés hydroxylés lorsque dans leur séquence ils comprennent au moins un résidu de prolin.
La N-acétylation et l'hydroxylation de ces peptides, de même que le
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remplacement par un résidu de glutamin (Q) d'un ou de plusieurs résidus de lysine (K) ou d'arginine (R) a généralement pour effet d'augmenter la résistance de ces peptides à une dégradation enzymatique.
Les peptides tels que définis ci-dessus peuvent être utilisés comme médicaments dans le traitement des infections à FIV chez le chat. Ils peuvent être administrés par exemple à des doses allant de 0,1 à 2 mg/kg de poids corporel.
Le médicament de l'invention, qui contient au moins un peptide tel que défini ci-dessus, et éventuellement un excipient et/ou un véhicule pharmaceutique approprié, peut être administré notamment par voie orale, rectale ou parentérale. En vue d'une administration par injection, le médicament de l'invention peut se présenter en particulier sous la forme de solution ou suspension injectable ou sous la forme de poudre lyophilisée contenant le peptide utilisé comme principe actif, avec éventuellement un adjuvant de lyophilisation classique. La poudre lyophilisée permet de reconstituer une solution ou suspension injectable.
L'invention concerne en outre l'utilisation d'au moins un peptide tel que défini ci-dessus dans la préparation d'un médicament destiné à lutter contre l'infection par le virus de l'immunodéficience féline chez le chat.
L'exemple suivant illustre l'invention.
Exemple :
On a préparé par synthèse le peptide correspondant à la séquence 742-777 du Tableau 2.
On a préparé par synthèse le peptide correspondant à la séquence 742-777 du Tableau 2.
On prépare une poudre lyophilisée à partir d'une solution aqueuse, stérile et apyrogène de ce peptide.
La solution injectable peut être reconstituée à partir de la poudre lyophilisée avec du sérum apyrogène pour former une solution isotonique injectable.
On peut remplacer le peptide correspondant à la séquence 742-777 du Tableau 2 par un peptide correspondant à l'une des séquences 742-777 du Tableau 1, ou par un peptide correspondant à l'une des séquences 654-691 du Tableau 1 ou du Tableau 2, ou par un peptide correspondant à l'une des séquences 716-755 du Tableau 1 ou du Tableau 2, ou bien encore par un peptide correspondant à l'une des séquences 734- 762 du Tableau 1 ou du Tableau 2.
On peut aussi remplacer le peptide correspondant à la séquence 742-777 du
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Tableau 2 par un peptide correspondant à l'une des séquences 723-747 du Tableau 1 ou du Tableau 2.
On peut également associer un peptide choisi parmi ceux des séquences 742- 777 avec un peptide choisi parmi ceux des séquences 734-762 et/ou avec un peptide choisi parmi ceux des séquences 716-755 et/ou avec un peptide choisi parmi ceux des séquences 654-691 des Tableaux 1 et 2 ci-après.
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TABLEAU 1 GP36 FIVPE HQE : AIEKVTGALKINNLRLVTLEEQVLVIGL. KVEAMEKFL YTAFAMQELGCN . GP366FIVU1 QQEAIEKVTEALKITNLRLVTLEHQVLVIGLKVEAMEKFLYTAFAMQELGCN GP366FIVWO HQEAIEKVTEALKINNLRLVTLEHQVLVIGLKVEAMEKFLYTAFAMQELGCN GP36-FIVU2'HQETIEKITEALKVNNLRLVTLEHQVLVIGLKVEAIEKFLYTAFAMQELGCN GP 3 6 FIVU 3 HQETIEKVTEALKINNLRLVTLEHQVLVIGLKVEAMEKF YTAFAMQELGCN GP36-FIVSD HQEALDKITEALKINNLRLVTLERQMLVIGLKVEAIEKFLYTAFAMQELGCN GP36-FIVT2 HQQALEKITEALKINNLRLITLEHQVLVIGLRVEAIEKFLYAFAMQELGCN GP36 FIVPE QNQFFCKIPLELWTRYNMTINQTIWNHGNITLGEWYNQTKDLQQKFYEIIMDIEQNNVQG GP36-Frvul QNQFFCKVPPELWRRYNMTINQTIWNHGNITLGEWYNQTKDLQKKFYGIIMDIEQNNVQG GP36 FIWO QNQFFCKVPSALWERYNMTINQTIWNHGNITLGEWYNQTKDLQQRFYEI IMDIEQNNVQG GP36 FIVU2 QNQFFCKVPPELWQ-RYNMTINQTIWNHGNITLGEWYNQTKDLQQKFY'EllMDXEQNMVQG GP36 FIVU3 QNQFFCKVPPELWKRYNMTINQTIWNHGNITLGEWYNQTKELQQKFYEIIMNIEQNNVQV GP36-FIVSD QNQFFGEIPKELWLRYNMTLNQTINNHGNITLGEWYNQTKYLQQKFYEIIMDIEQNNVQS GP3 6FI'VT2 QNQFFCKIPPSLWSMYNMTLNQTIWNHGNISLGNWYNQTRDLQNKFYEI IMDIEQNNVQG GP36 FIVPE KTGIQQLQKWEDWVRWIGNIPQ GP36-PIVUl KKGLQQLQKWEDWVGWIGNIPQ GP3 6 FIVWO KKGLQQLQEWEDWVGWIGNIPQ GP36 FIVU2-RKGLQQLQEWEDWVGWLGNIPR GP36-FIVU8 KKGLQQLQEEDWVGMIGNIPQ GP 36- FIVS D KQGLQKLQNWQDWMGWIGKI'PQ GP36FIVT2 KTGIQQLQKNENWVGWIGKI PQ
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TABLEAU 2
H Q E A I E K V T E A L K I N N L Numérotation 649 650 651 652 653 654 655 656 657 658 659 660 661 662 663 664 665 RLVTLEHQVLVIGLKVE Numérotation 666 667 668 669 670 671 672 673 674 675 676 677 678 679 680 681 682 A M E K F L Y T A F A M Q E L G C Numérotation 683 684 685 686 687 688 689 690 691 692 693 694 695 696 697 698 699
N Q N Q F F C K V P P E L W T R Y Numérotation 700 701 702 703 704 705 706 707 708 709 710 711 712 713 714 715 716 NMTINQTIWNHGNITLG Numérotation 717 718 719 720 721 722 723 724 725 726 727 728 729 730 731 732 733 E W Y N Q T K D L Q Q K F Y E Numérotation 734 735 736 737 738 739 740 741 742 743 744 745 746 747 748 749 750 M D I E Q N N V Q G K K G I Q Q L Numérotation 751 752 753 754 755 756 757 758 759 760 761 762 763 764 765 766 767
QKWEDWVGWIGNIPQ Numérotation 768 769 770 771 772 773 774 775 776 777 778 779 780 781 782
H Q E A I E K V T E A L K I N N L Numérotation 649 650 651 652 653 654 655 656 657 658 659 660 661 662 663 664 665 RLVTLEHQVLVIGLKVE Numérotation 666 667 668 669 670 671 672 673 674 675 676 677 678 679 680 681 682 A M E K F L Y T A F A M Q E L G C Numérotation 683 684 685 686 687 688 689 690 691 692 693 694 695 696 697 698 699
N Q N Q F F C K V P P E L W T R Y Numérotation 700 701 702 703 704 705 706 707 708 709 710 711 712 713 714 715 716 NMTINQTIWNHGNITLG Numérotation 717 718 719 720 721 722 723 724 725 726 727 728 729 730 731 732 733 E W Y N Q T K D L Q Q K F Y E Numérotation 734 735 736 737 738 739 740 741 742 743 744 745 746 747 748 749 750 M D I E Q N N V Q G K K G I Q Q L Numérotation 751 752 753 754 755 756 757 758 759 760 761 762 763 764 765 766 767
QKWEDWVGWIGNIPQ Numérotation 768 769 770 771 772 773 774 775 776 777 778 779 780 781 782
Claims (7)
1. Peptides contenant au moins 25 motifs peptidiques consécutifs inclus dans l'une des séquences 649-696 et 710-782 de la protéine gp36 d'une souche de FIV, ou d'une séquence consensus correspondante, et contenant au plus 40 motifs peptidiques consécutifs de la protéine gp36 de FIV, étant entendu que dans la séquence desdits peptides, K peut être remplacé par R ou par Q, R peut être remplacé par K ou par Q, et 1 peut être remplacé par L et inversement.
2. Peptides selon la revendication 1, contenant au moins 30 motifs peptidiques consécutifs inclus dans lesdites séquences 649-696 et 710-782.
3. Peptides selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lesquels lesdites séquences 649-696 et 710-782 sont choisies parmi les séquences SEQIDN là 15.
4. Peptides selon l'une quelconque des revendications précédentes, contenant au moins 25 motifs peptidiques consécutifs choisis dans l'une des séquences 654-691, 716- 755,742-777 et 734-762, et en particulier ayant la séquence 723-747.
5. Peptides selon l'une quelconque des revendications précédentes, lesdits peptides étant sous la forme de dérivés N-acétylés et/ou sous la forme de dérivés hydroxylés lorsque lesdits peptides comportent au moins un résidu de prolin.
6. Médicament contenant au moins un peptide tel que défini dans l'une quelconque des revendications précédentes, et éventuellement un excipient et/ou un véhicule pharmaceutique.
7. Utilisation d'un peptide tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5 dans la préparation d'un médicament destiné à lutter contre l'infection par le virus de l'immunodéficience féline chez le chat.
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2003015814A1 (fr) | 2003-02-27 |
| FR2828687B1 (fr) | 2003-12-12 |
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