CN1660284A - 一种治疗心脑血管疾病的三七和红花复方制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种治疗心脑血管疾病的中药复方制剂和其有效部位的复方制剂。该复方制剂由三七和红花两味药材，或者由从三七中提取得到的三七总皂苷与从红花中提取得到的红花黄色素按一定的配比组合制成。本发明的复方药物可制成各种制剂，用于治疗脑梗塞、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等，使用安全、有效、稳定、可控、方便。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的中药复方制剂，具体说是由中药三七和红花两味药材，或从三七、红花中提取的得到的有效部位或有效成分按照一定的配比制成的组合物。
背景技术
红花活血通经、化瘀止痛，用于多种血液循环障碍疾病。临床上以水煎液入药，其主要水溶性组分为红花黄色素。
三七是一味传统的散瘀止血、消肿定痛的中药。大量的研究表明，三七的有效成分为三七总皂苷。用传统的提取方法提取的三七总皂苷含量不高，杂质较多，病人用药后的不良反应较多，特别是注射用药时，该问题就显得尤为重要。
中风、冠心病、心绞痛等心脑血管疾病严重威胁人类的生命和健康，我国13亿人口中，心脑血管疾病患者已超过了4000万。而冠心病已成为我国3大病死原因之一，所以进行治疗药物的研究非常必要，也是国内外研究的热点。中医认为气滞血瘀是心脑血管病发病的一个主要原因，以三七、红花组成的中药复方用于气滞血瘀心脑血管病，疗效显著。但传统的中药复方存在着成分不清、机理不明、质量难控、疗效不稳的缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种由中药三七、红花两味药材或者从二者中提取得到的有效部位或有效成分组成的药物组合物。
本发明的中药组合物，该组合物是由下述重量份的原料药组成：
三七 0.1～150份
红花 1份
或者由三七和红花的有效部位以下述重量份组成：
三七总皂苷 0.1-25份，
红花黄色素 1份。
有效部位组份的重量配比优选为：
三七总皂苷 1-10份，
红花黄色素 1份。
本发明提出的中药复方制剂，可以由二味药材直接粉碎入药或者经常规方法提取制得。
上述中药组合物所治的心脑血管疾病包括：脑梗塞、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等。
将上述2种组份按配比再配上相应的各种辅剂，即可制得各种复方制剂。
所述制剂可以是注射剂、输液、粉针剂、片剂、胶囊剂、缓释片、滴丸、冲剂、微粒剂等。
所述辅助为各种制剂的常规辅料。
本发明中三七总皂苷的提取纯化工艺如下：
三七总皂苷可溶于水和乙醇，考虑到三七中含有大量淀粉，不宜采用水和低浓度的乙醇，以免糊化。故选择浓度为55％～95％乙醇作为提取溶剂，采取以下三种提取方法：渗漉法、浸渍法、水煎醇沉法，在此基础上选定乙醇浓度、提取方法和乙醇用量作为考察的3个因素，进行三因素三水平L9(33)试验。结果表明影响最大的是提取方法，其次是乙醇浓度，而乙醇用量则影响很小，渗漉法的效果最好。
上述提取液(如渗漉提取液)，浓缩到原体积的1/8-1/12左右后，加少量水稀释，按比吸附量1∶1(树脂量与药材量)通过大孔树脂柱，先以去离子蒸馏水洗脱，再以10倍以上(一般10-15倍)柱体积浓度为20-40％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩即得。其中，人参皂苷Rg1、Rb1、R1占50％以上。
红花的有效部位红花黄色素可按通常方法提取。
三七总皂苷和红花黄色素组合物的药效学试验：
(一)对犬心肌梗塞模型的治疗作用
为了考察不同配比的三七总皂苷和红花黄色素的药效，找到最佳疗效的组方，设计不同试验，观察三七总皂苷和红花黄色素对犬冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型的治疗作用。实验选择的配比(红花黄色素/三七总皂苷)为25/0、1/1、1/5、1/10、1/15、1/25、0/25，其给药剂量总的均为2mg/kg；另加阴性对照生理盐水组、阳性对照恬尔心组，共9组。
试验按有关文献报告的方法进行。分别在给药后30min、60min、90min、120min、180min记录心外膜电图的变化。心外膜电图观察指标：以ST段升高2mV以上的导联数(NST)和ST段升高值的总和(∑ST)为指标观察给药前后的变化，并计算心肌缺血程度(∑ST)和范围(NST)。以用药后不同时间实测值与用药前进行比较，以用药后不同时间变化百分率(用药前为100％)进行组间比较。
每组动物数为5条，给红花黄色素/三七总皂苷2mg/kg(临用前用生理盐水新鲜配制)，阳性对照药剂量为0.5mg/kg，阴性对照组给1ml/kg的生理盐水，三者均静脉注射单次给药。观察犬心外膜电图，观察时间为给药后0～3小时。
实验结果如下：
1、对心肌缺血程度(心外膜电图∑ST)的影响：冠脉结扎后，心外电图ST段总和(∑ST)明显升高。生理盐水组120min时∑ST升高达26.5±12.1％；红花黄色素和三七总皂苷静脉给药后均能减轻心肌缺血程度，其中1/1、1/5、1/10及阳性对照组∑ST显著下降(P＜0.01)，并有一定的剂量关系。作用从给药持续至180min，各时间点与生理盐水组比较均有显著差异(P＜0.01)。实验结果见表1。
实验结果表明，红花黄色素和三七总皂苷静脉给药对犬冠脉结扎引起的急性心肌缺血程度有显著的治疗作用，且该作用与药物配比有关。
给药前后变化的统计检验用各组不同时间点变化值与生理盐水组同一时间点变化值作组间方差分析检验。
2、对心肌缺血范围(心外膜电图N-ST)的影响：红花黄色素和三七总皂苷能缩小心肌缺血范围，降低N-ST值，作用可持续180min。其中1/1、1/5、1/10组及阳性对照组与生理盐水组同时间点比较，有显著差异(P＜0.05)或极显著差异(P＜0.01)，1/10组仅在60min时差异显著(P＜0.05)。实验结果见表2。
实验结果表明，红花黄色素和三七总皂苷静脉注射能显著降低心肌缺血范围，且该作用与药物配比有关。
3、对心肌梗塞范围的定量组织学检测的影响：用定量组织学检测心肌梗塞范围即用N-BT染色显示红花黄色素和三七总皂苷对心肌梗塞范围的影响与心外膜电图测定的结果一致。红花黄色素和三七总皂苷静脉注射均能减少心肌梗塞范围。其中1/1、1/5、1/10组及阳性对照组与生理盐水组比较，有显著差异(P＜0.05)或极显著差异(P＜0.01)，1/15组仅对“梗塞区/全心”差异显著(P＜0.05)。实验结果见表3。
实验结果表明，红花黄色素和三七总皂苷静脉给药对犬冠脉结扎引起的心肌梗塞范围有显著的改善作用，且该作用与药物配比有关。实验结果证明，红花黄色素和三七总皂苷静脉注射能显著降低冠脉结扎犬的心肌缺血的程度，缩小心肌缺血范围，定量组织学检测与心外膜电图测定的结果一致，与生理盐水对照组比较，梗塞区显著缩小，证明红花黄色素和三七总皂苷静脉注射对犬冠状动脉结扎引起的心肌梗塞有明显的治疗作用。实验结果还证明，红花黄色素和三七总皂苷的配比对药效有影响，从实验结果分析，红花黄色素和三七总皂苷的最佳配比应为1/1～1/10。
(二)对大鼠脑缺血再灌注损伤的治疗作用
为了考察不同配比的三七总皂苷和红花黄色素的药效，找到最佳疗效的组方，设计不同试验，观察三七总皂苷和红花黄色素对尼龙线栓塞大鼠大脑中动脉制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的治疗作用。实验选择的配比(红花黄色素/三七总皂苷)为10/0、1/1、1/5、1/10、1/15、1/25、0/10，其给药剂量总的均为2mg/kg；另加阴性对照生理盐水组、阳性对照己酮可可碱注射液组，共9组。
将大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，根部结扎该分枝。在颈内动脉近端备线，远端放置动脉夹，颈总动脉分叉处切口，插入直径为0.22mm尼龙线，其深度为17～20mm，栓线进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹，扎紧备线，外留1cm长线头，缝合皮肤。缺血0.5小时后尾静脉注射给药或尾静脉注射给溶剂对照生理盐水。继续缺血1.5小时后再灌注，勿需再次麻醉和切开皮肤，轻轻提拉所留线头至有阻力时提示尼龙线头端已至颈总动脉切口处，血流再通。假手术组除不插线外，其余步骤同上。存活鼠再灌注24后，观察大鼠行为变化，进行行为评分。参考Zea Longa的5分制评分标准：0分，正常，无神经损伤症状；1分，不能完全伸展对侧前爪；2分，向外侧转圈；3分，向对侧倾倒；4分，不能自发行走，意识丧失。一部分(每组10只)分别称左右脑半球湿重，置160℃烤箱内24小时后称干重，按以下公式计算脑组织含水量：脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％；一部分(每组10只)快速断头取鼠大脑，切下厚约2mm冠状脑片，立刻置于2％TTC溶液中，37℃孵育30分钟。梗塞区呈现白色，非梗塞区呈现红色。数码相机拍摄记录，用Medbrain 2.0软件(南京美易科技公司)测定全脑片总体积及梗塞区体积，并计算梗塞区占整个脑组织的百分比(％)；另一部分(每组5只)作组织形态学观察：脑组织经固定后，冠状切取大脑，常规脱水，石蜡包埋制片，HE染色，光镜检验。
1、对大鼠行为的影响
假手术组大鼠均无异常症状，行为评分为0；大鼠局灶性脑缺血2h再灌注24h损伤模型组(脑缺血0.5h尾静脉注射溶剂)，出现不能完全伸展对侧前爪或向外侧转圈或向对侧倾倒的神经损伤症状，行为评分为1.8±0.79。脑缺血0.5h后尾静脉注射红花黄色素和三七总皂苷药液1/1、1/5、1/10剂量组均可显著降低行为评分，分别为0.8±0.54、0.7±0.19、0.6±0.21，同模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01)。阳性对照己酮可可碱注射液组行为评分为0.80±0.79，显著低于模型对照组(P＜0.01)。
2、对脑梗塞体积的影响
假手术组脑组织无梗塞，模型对照组缺血侧脑组织有梗塞现象，梗塞区占整个脑组织的百分比为28.7±3.03％，1/1、1/5、1/10、1/15四个剂量组和阳性对照己酮可可碱注射液组均可显著缩小缺血侧脑组织梗塞体积，与模型对照组相比差异非常显著(P＜0.01)，分别降低了36.2％，54.0％，70.0％，46.3％及65.2％。实验结果见表5。
药效学试验结果表明：红花黄色素和三七总皂苷的最佳配比为1/1～1/10。
具体实施方式
实施例1：
精密称取红花黄色素2g，三七总皂苷2g混合后加适量注射用水溶解，再加入4g甘露醇，溶解后过0.15μm的微孔滤膜，滤液分装后冻干，即得注射用冻干粉。
实施例2：
精密称取红花黄色素1g，加适量注射用水溶解；精密称取三七总皂苷7g，加适量注射用水溶解。合并两部分溶液，按常规方法制备成1000ml药液，过滤，精滤，灌封，灭菌，检验，得20ml/支注射剂共50支。
实施例3：
取红花药材1kg，粉碎，干燥，过100目筛；取三七药材0.1kg，粉碎，干燥，过60目筛。将二药材粉末混合均匀，装入胶囊壳中，制成5000粒胶囊。
表1 犬冠脉结扎对心外膜电图ST段总和(∑ST)的影响(mV，
x±SD，n＝5)
| 组别 | 剂量 | 指标 | 0min | 30min | 60min | 90min | 120min | 180min |
| 生理盐水恬尔心10/01/11/51/101/151/250/10 | 1ml/kg0.5mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg | x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％x±SD变化％ | 332.8±120.5278.9±124.6319.5±100.8282.9±65.2262.7±111.9256.3±118.0249.5±100.8251.0±127.1271.5±115.0 | 366.0±133.210.6±6.0180.0±134.0-42.4±21.3***287.6±104.83.1±1.9204.0±85.7-49.1±17.9***230.0±96.1-26.1±14.7***141.7±98.7-46.2±18.2***218.2±78.912.9±5.2203.0±101.923.0±11.8232.9±85.318.0±8.7 | 411.9±178.522.2±12.4177.4±140.7-43.8±21.1***249.3±107.37.8±5.2212.4±117.9-42.8±25.4***219.5±97.8-30.1±9.5***148.1±83.2-49.3±20.8***201.8±121.418.0±5.6194.9±131.821.7±12.1244.7±112.024.6±11.7 | 412.0±185.021.8±15.0176.6±155.0-45.0±24.0***301.8±92.115.8±9.5220.1±102.7-44.5±31.8***222.7±98.9-32.0±10.8***140.9±80.6-52.0±24.9***217.1±102.821.8±11.0185.0±111.822.9±9.5250.8±91.821.0±12.2 | 422.8±172.326.5±12.1177.5±135.9-42.7±18.5***261.2±75.89.3±6.2226.8±86.7-41.7±21.9***216.8±89.7-33.7±12.0***170.9±89.6-46.0±20.2***211.2±98.619.2±6.7160.9±99.727.1±11.7275.4±109.713.9±8.7 | 398.4±140.123.0±20.6204.3±146.8-33.0±24.0***248.9±88.912.0±7.9233.7±98.7-39.7±18.9***205.7±81.0-36.8±13.1***150.3±93.8-52.8±19.5***207.8±95.917.1±5.5218.3±129.619.8±12.0238.7±71.113.1±7.5 |
与生理盐水组比较：**P＜0.05，***P＜0.01
表2 犬冠脉结扎对心肌梗塞范围(N-ST)的影响(点，
x±SD，n＝5)
| 组别 | 剂量 | 0min | 30min | 60min | 90min | 120min | 180min |
| 生理盐水恬尔心10/01/11/51/101/151/250/10 | 1ml/kg变化％0.5mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％2mg/kg变化％ | 28.4±1.326.6±2.126.4±3.527.0±1.426.8±2.028.0±1.728.6±2.627.0±1.928.2±4.2 | 28 .6±2.10.6±3.018.8±5.0-29.9±13.8***22.3±3.5-14.9±11.822.1±6.8-25.9±10.1***19.1±5.2-23.0±10.8***17.8±3.5-26.1±9.5***23.1±5.6-12.2±10.726.1±7.6-7.2±10.723.9±4.5-14.0±12.0 | 28.6±1.70.7±2.918.0±3.7-32.3±13.2***23.0±3.2-12.4±11.223.2±7.0-22.0±9.2***18.1±6.1-24.1±11.2***16.7±3.5-27.8±11.5***25.6±7.4-13.2±5.5**25.9±6.4-10.1±12.124.7±4.5-11.2±10.1 | 28.4±1.10.2±7.417.6±4.9-34.0±17.3***23.8±2.5-10.8±12.124.9±4.7-15.7±8.6**17.5±5.4-24.5±10.7***18.1±5.5-25.9±10.8***26.5±7.3-8.8±10.024.7±9.0-11.3±10.124.6±3.9-9.2±8.9 | 28.4±1.50.2±8.117.4±3.8-34.8±12.5***21.9±2.2-15.2±13.222.4±6.8-25.0±9.8***14.1±4.2-28.3±8.2***17.6±3.6-27.1±10.2***27.1±8.5-7.6±11.226.1±8.5-8.0±14.023.6±4.0-13.5±10.7 | 27.8±1.5-1.8±10.017.2±5.4-35.4±19.4***23.3±2.6-11.9±9.522.6±4.8-23.7±13.5***13.0±5.2-31.2±7.5***16.9±4.1-29.7±9.1***24.6±8.1-15.0±13.027.8±7.1-1.4±6.524.2±4.6-10.9±11.0 |
与生理盐水组比较：**P＜0.05，***P＜0.01
表3 犬冠脉结扎后的心肌梗塞范围(
x±SD，n＝5)
| 组别 | 剂量 | 梗塞区/全心(％) | 梗塞区/左心室(％) |
| 生理盐水恬尔心10/01/11/51/101/151/250/10 | 1ml/kg0.5mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg2mg/kg | 13.7±2.16.7±1.5***10.5±5.110.8±1.9**9.5±2.4**7.2±1.8***11.1±2.5**12.1±4.911.8±5.2 | 22.8±3.510.9±2.0***16.2±7.914.9±2.6**11.1±5.0**9.3±2.5***18.6±7.917.2±7.419.1±6.1 |
表4 对大鼠脑缺血2h再灌注24h的神经病学评分的影响(
x±SD)
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(只) | 行为评分 |
| 假手术组模型对照组10/01/11/51/101/151/250/10己酮可可碱 | ----22222222 | 10101010101010101010 | 0.0±0.001.8±0.791.5±0.870.8±0.54*0.7±0.39**0.6±0.21**1.4±0.921.4±0.851.5±0.920.8±0.79** |
与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，
表5 对大鼠脑缺血再灌注的脑梗塞体积的影响(％，
x±SD)
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(n) | 梗塞体积百分比(％) |
| 假手术组模型对照组10/01/11/51/101/151/25己酮可可碱 | ----2222222 | 101010101010101010 | 028.7±3.0324.1±0.7918.3±0.65*13.2±0.46**8.62±0.53**15.4±0.47**23.0±1.2310.0±6.32** |
与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，
Claims (4)
1、一种治疗心脑血管疾病的中药组合物，其特征在于该组合物是由下述重量份的原料药组成：
三七 0.1～150份
红花 1份
或者是由三七和红花的有效部位以下述重量份组成：
三七总皂苷 0.1-25份，
红花黄色素 1份。
2、根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于有效部位组份的重量配比为：
三七总皂苷 1-10份，
红花黄色素 1份。
3、根据权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于加入相应辅料，制成注射剂、输液、粉针剂、片剂、胶囊剂、缓释片、滴丸、冲剂、微粒剂等。
4、一种如权利要求1、2或3所述的中药组合物，其特征在于在制备治疗脑梗塞、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等心脑血管疾病药物中的应用。
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