CN1646092A - 用于平衡混合性皮肤的大豆组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明的特征是提供了豆荚类产品、包含这种豆荚类产品的组合物和局部施用这种豆荚类产品的方法，用于处理混合性皮肤，保持面部皮肤的平衡。

Description

用于平衡混合性皮肤的大豆组合物
发明领域
本发明涉及处理混合性皮肤的组合物和方法，以提供平衡皮肤的油性区和干性区的好处，使得油性区域显得不那么光亮，而干性区域看上去和觉得更湿润。
发明背景
大部分成年人都认为他们的面部皮肤是有干性区域和油性区域的混合性皮肤。目前还缺少能针对这种皮肤需要的有效的皮肤护理产品。
混合性皮肤的定义是包含干性区域和感觉过分油性的区域的面部皮肤，这种皮肤在处理和外观上常常处于两难境地。具有混合性皮肤的人常常试图处理油性区，以防生痤疮，同时消除油光。但是，这种处理和配制品往往会造成皮肤干燥，还会刺激本来干燥的皮肤区域。类似地，如果通过施涂润湿组合物来着手处理干燥皮肤，这种组合物往往会堵塞毛孔，增加本来油性区的油性，产生黑头粉刺，因为这种组合物通常包含大量的润肤剂和油。这种处理的不良后果是皮肤生疹子或痤疮。而在面部和颈部的不同区域施涂不同的组合物又太费时、费钱，而且不方便。
因此，最好有能针对混合性皮肤的状况可以仅用一种组合物处理混合性皮肤的组合物和处理方法。还希望这种组合物能平衡皮肤状况，使皮肤看上去既不太油，也不太干。
发明概述
本发明涉及选择性平衡人皮肤的油性和干性的组合物和方法。通过施涂含有非变性的豆荚产品的组合物，具有“混合性皮肤”(即具有油性区和干性区邻近的皮肤)的使用者可使皮肤的油性区产生较少的皮脂和“油”，而使干性区变得润湿。业已表明，含大豆的局部用制剂能提供显著的皮肤护理益处。这种含大豆的制剂宜包含“全大豆(totalsoy)”，或者包含非变性蛋白质的大豆产品。这种组合物在同时待审的2001年2月28日提交的美国专利申请09/796054和2001年2月28日提交的美国专利申请09/795762中提交作为示例，该专利申请在此均引为参考。
我们认为，“全大豆”组分能有助于改善混合性皮肤。实际上，全大豆包含均衡的全部营养成分，如大豆蛋白、脂肪酸、多糖、维生素、矿物质、类黄酮和能提供多功能皮肤护理益处的活性成分。我们认为，其他含全豆荚类组合物也具有与非变性“全大豆”的组合物同样的好处。
豆荚类产品
“豆荚类产品”是指得自豆荚果实的物质。豆荚是豆科植物，它具有裂果如菜豆、豌豆或小扁豆。豆荚的例子包括(但不限于)菜豆类如大豆、小扁豆、豌豆和花生。
豆荚类产品可包含整个豆荚果实(例如磨成粉的豆荚果实)或仅包含一部分豆荚(例如豆荚的提取物)。豆荚类产品可以是流体形式(例如豆荚果实和水的混合物)，也可以是固体形式(例如豆荚果实粉末)。如果呈流体形式，术语“豆荚类产品”指由豆荚制成的流体中的固体部分。
本发明组合物包含安全有效量的豆荚产品(例如大豆产品)。在一个实施方式中，该组合物包含约0.001-50wt％豆荚产品(例如大豆产品)，更宜包含约1-30wt％，最好包含约2-20wt％。
大豆产品/“全大豆”
“大豆产品”或“全大豆”是指得自大豆的物质。大豆产品可以仅包含大豆的一部分(例如大豆的提取物，如低脂类大豆粉或过滤豆浆)，也可包含整个大豆(例如磨成粉的豆荚)。大豆产品可以是流体形式(例如豆浆)，也可以是固体形式(例如豆粉或豆浆粉)。如果呈流体形式，术语“大豆产品”指由大豆制得的流体中的固体部分。
在一个实施方式中，大豆产品是豆粉。豆粉可通过研磨干大豆制成。在一个实施方式中，大豆粉的平均粒度约小于150微米，也可以小于约10微米。在一个实施方式中，大豆粉的含湿量小于约10％，更宜小于约5％。在一个实施方式中，大豆粉可以低压冻干即冷冻干燥。
在一个实施方式中，大豆产品是豆浆或豆浆粉。豆浆是得自大豆的固体和水的混合物，其混合物滤去了部分或全部不溶组分。豆浆粉由豆浆蒸发而成，在一个实施方式中，它呈低压冻干或喷雾干燥形式。生产豆浆的方法包含(但不限于)以下三个方法。首先，将大豆投入水中，使它们吸收水，然后将膨胀的豆子磨成粉，再加水，然后过滤该混合物除去不溶残渣，制到豆浆。其次，豆浆也可以由大豆粉制备。将大豆粉与水彻底混合(例如至少搅拌1小时)，然后通过过滤方法除去不溶残渣。第三，豆浆也可由豆浆粉加水制成。在一个实施方式中，豆浆包含约1-50wt％(例如约5-20wt％)的来自大豆的固体。
“安全有效量”指化合物或组合物(例如豆荚类产品)的量足以导致积极改善要调节或处理对象的状况，但又低到足以避免严重副作用。化合物或组合物的安全有效量取决于以下因素：待处理对象的特定状况，最终使用者的年龄和身体状况，待处理/防护对象的状况的严重程度，处理持续的时间，其他处理特性，所采用的具体化合物或产品/组合物，所用特定的化妆上可接受的载体等。
这里所用“局部施涂”指用手或涂布器如擦布、吹涂器、滚涂器或喷涂器等直接铺展或涂抹在外部皮肤上。
这里所说“化妆上可接受的”指该词所描述的产品或化合物适合与组织(例如皮肤)接触，而不会引起过分的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。此词没有将它所描述的成分/产品限定在只用作化妆品(例如这些成分/产品可以用作药物)。
这里所用“局部载体”指一种或多种相容的固体或液体填料稀释剂，适合局部施用在哺乳动物身上。局部载体的例子包括(但不限于)水、蜡、油、润肤剂、乳化剂、增稠剂、胶凝剂和它们的混合物。
这里所用“胰蛋白酶抑制活性”指浓度为0.1％(w/w)的豆荚类产品抑制胰蛋白酶活性的能力，这可通过实施例2所述试验测定。在一个实施方式中，本发明的豆荚类产品的胰蛋白酶抑制活性至少约为15％。在另一个实施方式中，本发明的豆荚类产品的胰蛋白酶抑制活性至少约为25％，如至少约为50％。但是，根据本发明的方法使皮肤达到平衡不一定需要存在高的胰蛋白酶抑制活性。
“有害微生物含量”指存在于豆荚类产品中对人体有害的细菌、真菌和酵母的量，包括(但不限于)大肠菌、大肠杆菌、沙门氏菌、喜温孢子、芽孢杆菌、肠道球菌、葡萄球菌、粪便链球菌和《消毒、杀菌和防腐》(第4版，SeymourS.Block，pp.887-888，1991，Lea & Febiger，Malvem，PA)所列微生物。
这里所用“局部施涂”指用手或涂布器如擦布、吹涂器、滚涂器或喷涂器等直接铺展或涂抹在外部皮肤上。
这里所说“化妆上可接受的”指该词所描述的产品或化合物适合与组织(例如皮肤)接触，而不会引过分的起毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。
这里所用“局部载体”指一种或多种相容的固体或液体填料稀释剂，适合局部施用在哺乳动物身上。局部载体的例子包括(但不限于)水、蜡、油、润肤剂、乳化剂、增稠剂、胶凝剂和它们的混合物。
这里所用的“安全有效量”指化合物或组合物(例如豆荚类产品)的量足以导致积极改善要调节或处理对象的状况，但又低到足以避免严重副作用。化合物或组合物的安全有效量取决于以下因素：待处理对象的特定状况，最终使用者的年龄和身体状况，待处理/防护对象的状况的严重程度，处理持续的时间，其他处理特性，所采用的具体化合物或产品/组合物，所用特定的化妆上可的载体等。
适用于本发明组合物和方法的组合物例子见述于同时待审的美国专利申请09/110409(提交于1998年7月6日)、09/206249(提交于1998年12月7日)、09/361429(提交于1999年7月27日)、09/621565(提交于2000年7月21日)和09/698454(提交于2000年10月27日)，它们在此均引为参考。
类似于“全大豆”中营养的其他营养源可包含在如下植物物种中：茄科(例如土豆、番茄、tomatilla等)；禾本植物(例如稻米、荞麦、高粱、小麦、大麦、燕麦等)；葫芦科(例如黄瓜、南瓜、葫芦、丝瓜等)；宜为豆科(例如菜豆、豌豆、小扁豆、花生等)。
在本发明组合物和方法中是活性的化合物可通过本领域技术人员已知的方法局部施用。如果局部用活性药剂或美容剂的施涂参数需要，则本发明的局部用活性组合物宜进一步包含药用或化妆上可的赋形剂，该赋形剂可起施用体系的作用，使局部用活性试剂渗入皮肤。
局部施用本发明某些组合物，特别是蛋白质如胰蛋白酶和STI的一种可接受的赋形剂可包含脂质体。脂质体更宜为非离子的，且包含a)二月桂酸甘油酯(含量宜在约5-70wt％之间)；b)含有胆固醇中类固醇主链的化合物(含量宜在约5-45wt％之间)；c)一种或多种约含12-18个碳原子的脂肪酸醚(总含量宜在约5-70wt％之间)，其中脂质体的组成化合物的比例宜约为37.5∶12.5∶33.3∶16.7。最好是由二月桂酸甘油酯/胆固醇/聚氧乙烯-10-硬脂醚/聚氧乙烯-9-月桂醚组成的脂质体(GDL脂质体)。以组合物总体积计，脂质体的量宜约为10-100mg/ml，更宜约为20-50mg/ml。最好的比例是37.5∶12.5∶33.3∶16.7。合适的脂质体宜根据实施例1所述方法制备，但也可以采用本领域常用的其他方法。上述组合物可这样制备：在合适的容器中混合所需组分，在环境条件下用本领域熟知的来制备非离子脂质体的常规高剪切混合设备使之混合，如Niemiec等在《非离子脂质体组合物对缩氨酸药局部进入毛上脂(Pilosebacious)单元的影响：用仓鼠耳模型进行的活体研究》(12 Pharm.Res.1184-88(1995)(Niemiec))中所述，其全部内容在此引为参考。我们已经发现，本发明组合物中存在这些脂质体可提高本发明某些组合物的脱色素能力。
其他合适的制剂宜包含，例如，直接由豆荚类植物或其他合适植物得到的豆浆或其他液体制剂。例如，这种制剂可包含大部分豆浆、保持豆浆物理稳定性的乳化剂和任选的螯合剂、防腐剂、润肤剂、湿润剂和/或增稠剂或胶凝剂。
本领域技术人员已知的水包油乳液、油包水乳液、溶剂基制剂和水凝胶也可以用作施用本发明组合物的赋形剂。
要配制的活性化合物的来源一般取决于化合物的具体形式。小有机分子和肽基片段可通过化学方法合成，得到高纯形式，适合应用于药物/化妆品。天然提取产品可用本领域已知的方法加以纯化。本领域的普通技术人员也很容易得到各种化合物的重组来源。
在另一个实施方式中，局部用活性药物或化妆品组合物可任选与其他成分组合使用，如增湿剂、化妆品辅剂、抗氧化剂、漂白剂、酪氨酸酶抑制剂和其他已知脱色素剂、表面活性剂、发泡剂、调节剂、湿润剂、香料、粘度调节剂(viscosifier)、缓冲剂、防腐剂、防晒剂等。本发明组合物还可包含有效量的维生素A类(即可与维生素A类受体系列中任何一种受体结合的化合物)，包括例如维生素A酸、维生素A、维生素A酸和/或维生素A的酯等。
直接由植物或植物原料得到的液体衍生物和天然提取物可以约1-99％(w/v)的浓度应用于本发明组合物。天然提取物和天然活性成分如STI的含量可以有不同的较佳范围，约为该组合物的0.01-20％，更宜约为1-10％。当然，本发明活性试剂的混合物可混合后用在同一制剂中，也可以连续用在不同制剂中。
本发明组合物宜包含约20-99％的植物原料提取物，约1-20％的天然提取物和天然活性成分(如蛋白酶抑制剂，例如大豆胰蛋白酶抑制剂等，以及活性成分的混合物)，在一定时期内一天用1-2次，直到皮肤外观变得更平衡。
此后，一旦获得皮肤外观改变，含约10-90％植物原料的液体衍生物和提取物、约0.01-5％天然提取物和天然蛋白酶抑制剂如STI或其混合物的活性成分可以低的浓度和剂量施用，且施用频次下降，例如约每天一次到约每周两次。本发明活性试剂的效果可以逆转，因此，为维持这些效果，应进行连续施用。在本文得到适当说明的本发明，可用本文具体说明的组分、成分或步骤进行实施。
本发明方法中的有效组合物包含安全有效量的、非变性的豆荚类产品，最好是大豆产品。适用于本发明的局部用组合物涉及适用于局部施涂在皮肤上的制剂。
豆荚类产品的抗微生物处理
荚果表面常包含大量微生物。因此，在人们使用之前需要对豆荚类产品进行处理，以减少或清除这些微生物。
在一个实施方式中，本发明豆荚类产品的微生物总含量约少于10000菌落形成单位(cfu)/克。在另一个实施方式中，本发明大豆产品的微生物总含量约少于1000cfu/g豆荚类产品(如少于约100cfu/g)。
在一个实施方式中，本发明豆荚类产品的有害微生物总含量约少于300cfu/g，例如少于150cfu/g。在另一个实施方式中，至少1克(例如至少10克)本发明豆荚类产品中有不可检测量有害微生物。
在一个实施方式中，豆荚类产品受到γ-射线辐射。在另一个实施方式中，豆荚类产品受到约2-30kGy，例如约5-10kGyγ-射线的辐射。本发明申请者意外发现，这种处理减少了豆荚类产品中微生物的含量，同时能保持其生物活性(例如丝氨酸蛋白酶抑制活性)。本发明申请者还发现，用γ-射线处理豆荚类产品能保持豆荚类产品的化妆美观，例如能保持它的天然颜色，并且不会引起明显的臭味。
同样能保持豆荚类产品的蛋白酶抑制活性的其他抗微生物方法可单独采用，也可与γ-射线组合使用，这样的方法包括(但不限于)x-射线辐射、高能电子或质子束辐射、紫外线辐射、液静压处理。也可以加入具有抗微生物活性的化学试剂，还可以联合使用这些方法。减少微生物含量的方法的完整说明见《消毒、杀菌和防腐》(第4版，Seymour S.Block，pp.887-888，1991，Lea &Febiger，Malvem，PA)。
本发明申请者发现，用热处理方法会使蛋白酶抑制活性显著损失，因而应谨慎使用。例如，本发明申请者发现，加热豆浆到100℃仅10分钟即可使豆浆的胰蛋白酶抑制活性从86％(保持在4℃时)减少到46％。本发明申请者发现，加热豆浆还会改变大豆产品的颜色或气味。
局部用组合物
适用于本发明的局部用组合物包含适合局部施涂于皮肤的制剂。在一个实施方式中，所述组合物包含大豆产品和化妆上可接受的局部载体。在一个实施方式中，化妆上可接受的局部载体约占组合物50-99.99wt％(例如，约占80-95wt％)。
所述组合物可制成许多类型的产品，包括(但不限于)洗液、霜、凝胶、棒涂剂、喷雾剂、剃须膏、软膏、液体清洗剂和固体清洗条、香波、糊剂、粉剂、摩丝、剃须膏、擦拭物、纱布膏药、指甲油、创伤敷料和粘合绷带、水凝胶、膜和化妆品，如粉底、睫毛油和唇膏。这些类型的产品可包含几种类型的化妆上可接受的局部载体，包括(但不限于)溶液、乳液(例如微乳液和纳米乳液)、凝胶、固体和脂质体。以下是这些载体的非限制性例子。其他载体可由本领域普通技术人员配制。
适用于本发明的局部用组合物可配成溶液。溶液一般包含水性溶剂(例如约50-99.99％或90-99％化妆上可接受的水性溶剂)。
适用于本发明的局部用组合物可配制成包含润肤剂的溶液。这种组合物宜包含约2-50％的润肤剂。这里所用“润肤剂”指用于预防或缓解干燥程度，同时保护皮肤的物质。许多合适的润肤剂是已知的，可用于本发明。Sagarin，化妆品、科学与技术(第2版，卷1，pp.32-43(1972))和国际化妆成分词典和手册(Wenninger和McEwen编，pp.1656-61，1626和1654-55，化妆品、卫生用品和香料协会，华盛顿特区，第7版，1997)(以下称“ICI手册”)包含合适材料的许多例子。
用这种溶液可制备洗液。洗液通常包含约1-20％(例如约5-10％)润肤剂和约50-90％(例如约60-80％)水。
可由溶液配制的另一种产品是霜。霜一般包含约5-50％(例如约10-20％)润肤剂和约45-85％(例如约50-75％)水。
可由溶液配制的另一种产品是软膏。软膏可仅包含动物油或植物油或半固态烃基料。软膏可包含约2-10％润肤剂和约0.1-2％增稠剂。对适用于本发明的增稠剂或增粘剂的更完全说明见Sagarin化妆品、科学与技术(第2版，卷1，pp.72-73(1972))和ICI手册，pp.1693-1697。
适用于本发明的局部用组合物可配成乳液。如果载体是乳液，则约载体的1-10％(例如约2-5％)为乳化剂。乳化剂可以是非离子、阴离子或阳离子乳化剂。合适的乳化剂见述于例如美国专利3755560、4421769、McCutcheon的洗涤剂和乳化剂(北美版，pp317-324(1986))和ICI手册，PP.1673-1686。
洗液和霜可配成乳液。这种洗液一般包含0.5-5％乳化剂。这种霜一般包含约1-20％(例如约5-10％)润肤剂；约20-80％(例如约30-70％)水；约1-10％(例如约2-5％)乳化剂。
水包油和油包水型单乳液皮肤护理制剂，如洗液和霜，在化妆品行业是众所周知的，可用于本发明。多相乳液组合物，如美国专利4254105和4960764所介绍的水包油包水型组合物，也可用于本发明。一般，这种单相或多相乳液包含水、润肤剂乳化剂和作为必需组分。
本发明的局部用组合物也可配成凝胶(例如采用合适胶凝剂的水凝胶)。适用于水凝胶的胶凝剂包括(但不限于)天然胶、丙烯酸和丙烯酸酯聚合物和共聚物，以及纤维素衍生物(例如羟甲基纤维素和羟丙基纤维素)。合适的油用(如矿物油)胶凝剂包括(但不限于)氢化丁烯/乙烯/苯乙烯共聚物和氢化乙烯/丙烯/苯乙烯共聚物。这种凝胶一般约占胶凝剂0.1-5wt％。本发明局部用组合物也可配制成固体制剂(例如石蜡基棒、肥皂釜组合物、粉末或含粉擦拭物)。
除上述组分外，适用于本发明的局部用组合物可包含许多额外的油溶性物质料和/或水溶性物质，它们常用于皮肤、头发和指甲用的组合物中，它们的含量在该行业中已有规定。
其他化妆用活性试剂
在一个实施方式中，除豆荚类产品外，局部用组合物还包含另一种化妆用活性试剂。“化妆用活性试剂”指对皮肤、头发或指甲有化妆或治疗效果的化合物，例如肤色变浅(liphtening)剂、增黑剂如自行变黑剂、防痤疮剂、光亮控制剂、抗微生物剂、消炎剂、抗霉菌剂、杀寄生虫剂、外部止痛剂、防晒剂、防光剂、抗氧化剂、角质层分离剂、洗涤剂/表面活性剂、湿润剂、营养剂、维生素、能量增强剂、防汗剂、收敛剂、脱臭剂、去毛剂、固化剂、防变硬剂和调理毛发、指甲和/或皮肤的试剂。
在一个实施方式中，所述试剂选自(但不限于)羟基酸、过氧苯甲酰、雷琐酚硫、抗坏血酸、D-泛酰醇、氢醌、甲氧基肉桂酸辛酯、二氧化钛、水杨酸辛酯、水杨酸三甲环己酯、阿伏苯宗、多酚、类胡萝卜素、自由基清除剂、自旋阱(spintrap)、维生素A类如维生素A和棕榈酸视黄酯、神经酰胺、多不饱和脂肪酸、必需脂肪酸、酶、酶抑制剂、矿物质、激素如雌激素、类固醇如氢化可的松、2-二甲基氨基乙醇、铜盐如氯化铜、含肽铜如Cu：Gly-His-Lys、辅酶Q10、如PCT专利申请WO00/15188所述的肽、硫辛酸、氨基酸如脯氨酸和酪氨酸、维生素、乳糖酸、乙酰辅酶A、烟酸、核黄素、硫胺、核糖、电子运输剂如NADH和FADH2和其他植物提取剂如芦荟和它们的衍生物及混合物。化妆用活性剂在本发明组合物中的含量一般约为0.001-20wt％，例如约0.01-10wt％，如约0.1-5wt％。
维生素的例子包括(但不限于)维生素A，维生素B如维生素B3、维生素B5和维生素B12，维生素C，维生素K和维生素E及其衍生物。
羟基酸的例子包括(但不限于)羟基乙酸、乳酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸和酒石酸。例如，可参见欧洲专利申请273202。
抗氧化剂的例子包括(但不限于)水溶性抗氧化剂如巯基化合物及其衍生物(例如焦亚硫酸氢盐和N-乙酰-巯基丙氨酸)、硫辛酸和二氢硫辛酸、白藜芦醇、乳铁素和抗坏血酸及抗坏血酸衍生物(例如抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸多肽)。适用于本发明组合物的油溶性抗氧化剂包括(但不限于)丁基化羟基甲苯、维生素A类(例如维生素A和棕榈酸视黄酯)、维生素E(例如生育酚乙酸酯)、生育三烯酚和泛醌。适用于本发明组合物的含抗氧化剂天然提取物包括(但不限于)含类黄酮和异类黄酮及其衍生物的提取物(例如染料木素和diadzein)、含白藜芦醇的提取物等。这种天然提取物的例子包括葡萄籽、绿茶、松树皮和蜂胶。其他抗氧化剂的例子见ICI手册第1612-13页。
其他物质
本发明组合物中也可包含其他各种物质，包括保湿剂、蛋白质和多肽、防腐剂和碱剂。这种试剂的例子见ICI手册第1650-1667页。本发明组合物还可包含螯合剂(例如EDTA)和防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯)。合适的防腐剂和螯合剂的例子见ICI手册第1626和1654-55页。此外，适用于本发明的局部用组合物可包含传统化妆辅剂，如染料、遮光剂(例如二氧化钛)、颜料和香料。
矿泉水
本发明的豆荚类产品(例如豆浆)和组合物可用矿泉水制备。在一个实施方式中，矿泉水至少含矿物质约200mg/L(例如约300-1000mg/L)。在一个实施方式中，矿泉水包含至少约10g/mL钙和/或至少约5mg/L镁。
含有本发明组合物的组合物和制剂可用普通技术人员熟知的方法制备。
实施例1：豆荚类产品的γ-射线辐射
发明申请者发现，豆浆粉在进行任何抗微生物处理，如用γ-射线照射之前，具有较高的微生物含量，可高达50000cfu/g。还发现这些产品包含可检测量的有害微生物，如粪便链球菌，其含量达20000cfu/g。
发明者使各种量(例如约1-200g)的豆浆粉受到1-16kGy的γ射线辐射。要将微生物总含量减少到低于约100cfu/g，γ-射线的剂量约需10kGy。经测定，粪便链球菌下降一个对数值所需剂量约为3kGy，要将10克豆浆粉样品中的此微生物含量稳定降低到检测不到的水平，约需要5kGy的剂量。但是，用在豆荚类产品上的γ-射线量最终取决于微生物的含量和要处理的大豆产品的大小。
实施例2：豆荚类产品的胰蛋白酶抑制活性
对荧光酪蛋白肽的胰蛋白酶诱导分裂的抑制作用可用EnzChekTM蛋白酶化验试剂盒按照厂家说明进行测定(EnzChekTM蛋白酶化验试剂盒产品信息，1999年3月15日修改；分子探针，Eugene OR)。总之，先在1X消化缓冲液(试剂盒中有)中稀释各种大豆制剂，将1000单位胰蛋白酶(Sigma，St.Louis，MO)溶解在1X消化缓冲液中，在不同浓度下培养。用纯丝氨酸蛋白酶抑制剂(大豆胰蛋白酶抑制剂，来自Sigma，St.Louis，MO)作为0.1％、0.01％和0.001％(w/v)正对照样品。接着，在装有此底物的小瓶(试剂盒中有)中加入0.2mL去离子水，制备1.0mg/ml BODIPY FL酪蛋白储备液，然后在消化缓冲液中制成最终的工作浓度10μg/ml。无论是否加入测试物，胰蛋白酶用BODIPY FL荧光酪蛋白底物于室温下培养1小时，然后在SpectraMax Gemini微睛滴定板读数计(Molecular Devices Corporation，Sunnyvale，CA)上测定(激发485nm/发射530nm)，采用Softmax Pro 3.0软件(Molecular Devices Corporation)。每个个复制样品上进行，并重复两次。
此实验在经过7种不同方式处理的大豆产品上进行。样品A是磨成粉的大豆(Sunlight Foods Corporation，Taipei County，Taiwan)。样品B是样品A经约8-15kGyγ-射线辐射后得到的大豆粉。样品C是萃取掉大豆粉中的油之后得到的大豆粉(Central Soya Company，Inc.，Fort Weyne，IN生产的Soyafluff 200W)。样品D是用去壳大豆和水制成的豆浆粉，然后过滤、加热并喷雾干燥(DevansoyFarms，Carroll，Iowa)，并受到约7-9kGyγ-射线的辐射。样品E是通过混合大豆和水，加热混合物一夜，然后在该混合物中加入1，3-丁二醇得到的豆浆粉(Flavosterone SB，购自Ichimam Pharcos Co.，Ltd，Gifu Japan)。样品F是通过混合大豆和水，加热混合物一夜，然后在该混合物中加入乙醇得到的豆浆粉(Flavosterone SB，购自Ichimaru Pharcos Co.，Ltd，Gifu Japan)。样品G是大豆蛋白质的提取物(Vegeseryl HGP LS 8572，购自Laboratories SerobiologiquesS.A.，Pulnoy，France)。这些大豆产品均与大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)(Sigma)比较。
不同的大豆制剂对底物胰蛋白酶分裂的抑制百分比用Microsoft Excel软件计算，结果列于表1。
                   表1
    测试产品     浓度 ％胰蛋白酶抑制百分数
    STI     0.01     43.0
    STI     0.1     76.1
    样品A     0.01     32.8
    样品A     0.1     67.1
    样品B     0.01     31.5
    样品B     0.1     67.2
    样品C     0.01     22.7
    样品C     0.1     36.2
    样品D     0.01     8.92
    样品D     0.1     17.4
    样品E     0.01     7.83
    样品E     0.1     10.8
    样品F     0.01     4.87
    样品F     0.1     5.99
    样品G     0.1     6.85
如表1所示，STI可以剂量响应的方式对胰蛋白酶诱导分裂进行抑制。作为大豆粉的样品A也显著抑制了胰蛋白酶的活性。经γ-射线处理后的大豆粉(即样品B)尽管减少了大豆粉中微生物的含量，但意外地对大豆粉的胰蛋白酶抑制活性没有明显影响。但是，对样品C-G进行加热和/或提取操作显著降低了大豆粉的胰蛋白酶抑制活性。
局部用组合物
本发明的局部用组合物包括适合局部施用在皮肤上的制剂。
所述组合物宜包含非变性大豆产品和局部化妆上可接受的载体。所述局部化妆上可接受的载体宜占组合物重量的约0.1-99.99wt％(更宜占组合物重量的约80-95wt％)。本发明的局部用组合物可配制成包含一种或多种润肤剂的溶液。这种组合物宜包含约2-50％润肤剂。由这种溶液可制备洗液。洗液通常包含约1-20％(例如约5-10％)润肤剂和约50-90％(更宜约60-80％)水。霜通常包含约5-50％(更宜约10-20％)润肤剂和约45-85％(更宜约50-75％)水。本发明的局部用组合物可配制成乳液。如果载体是乳液，则载体的约1-10％(更宜约2-5％)由至少一种乳化剂组成。乳化剂可以是非离子、阴离子或阳离子的。
适用于本发明方法的组合物中非变性大豆产品的含量宜约为组合物的0.001-99.9wt％。该含量更宜约为0.01-50％，最好约为0.5-50％。本发明组合物可制成粉末形式，此时组合物中大豆产品的含量约为1-99％。大豆产品可以是由豆浆粉制成的豆浆或大豆或豆浆粉或大豆粉，如参考专利申请所述。
其他化妆活性剂包括抗老化剂、防刺激剂、抗蜂窝炎剂、肤色变浅剂、增黑剂如自行变黑剂、防痤疮剂、光亮控制剂、抗微生物剂、杀菌剂、消炎剂、抗霉菌剂、杀寄生虫剂、外部止痛剂、防晒剂、防光剂、抗氧化剂、角质层分离剂、湿润剂、营养剂、维生素、能量增强剂、防汗剂、舒肤(skin caluing)剂、皮肤保护剂、皮肤愈合剂、润肤剂、收敛剂、脱臭剂、去毛剂、固化剂、防变硬剂和调理毛发、指甲和/或皮肤的试剂、AHA、防腐剂、精油、蛋白质、硅氧烷等。
令人惊奇的是，当将本发明组合物在皮肤上涂一次或多次后，既能平衡皮肤的水分含量，也能平衡皮肤的皮脂含量。同样施涂本发明组合物，既可使皮肤干性区具有水分，又可减少皮肤油性区的皮脂产生。因此，它能根据需要选择地增加某些区域的水分，同时降低要求降低油性的区域的油性。
以下实施例阐述了(但不限制)本发明组合物和方法的范围。
实施例3：用于平衡皮肤的全大豆洗液
为评价新型全大豆洗液可能平衡混合性皮肤和影响触觉性质，我们设计了临床研究。在23个皮肤为混合性(Fitzpatrick I-II型)、年龄在20-35岁之间的女性受试者身上进行了为期5周的半面部双盲无效剂对照临床研究。“混合性皮肤”定义为在每半个脸上都至少有一个油性区和一个干性区的面部皮肤。油性区和干性区由皮脂测定值分别大于200g/cm2和小于66g/cm2确定。受试者每天在指定的那一侧脸上施涂大豆洗液或无效对照剂达5周。在起始第1、3、5周在前额、面颊和颜部上测定。脱皮情况、润湿情况、油性和光滑性利用仪器测定和数码照相法进行评价。结果表明，与无效对照剂(p＜0.05)相比，此全大豆制剂明显减少了油性区的皮脂(p＜0.05，颜部)，同时提高了干性区的润湿性。用单面胶带剥离，或者在数码照相法观察，都没有发现明显的脱皮变化。受试自我评定表明，皮肤的光滑性提高，油性下降，这与仪器测量结果是有关联的。约70％的受试者指出用大豆处理过的那一侧脸部皮肤有改善，而只有17％的受试者说用无效对照剂处理的那一侧脸部的皮肤在整体肤色和纹理上有改善。总之，此临床研究表明，全大豆制剂通过调节皮肤的油性区和干性区，即选择地降低油性区的油性和提高干性区的润湿性，平衡了混合性皮肤的触觉性质。
参数
·干性/脱皮情况
·润湿性
·油性
·光滑性
方法
5周半面部双盲无效剂对照研究
受试者标准
·成年女性，年龄：20-35岁
·Fitzpatrick皮肤类型I&II(n＝23)
·用皮脂分析进行预筛选
产品的施用
·预调理——最开始用液体清洁剂洗涤3天
·用分脸方式使用全大豆洗液-无效对照洗液
·每天下午施用全大豆洗液和无效对照洗液，连续5周
全大豆洗液包含以下成分：
成分 W/W百分比
去离子水 72.43％
螯合剂 1.2％
防腐剂 1.6％
甘油 3％
溶剂 5％
抗氧化剂 0.1％
乳化剂 4.9％
硅氧烷皮肤调理剂 8.15％
增稠剂 1％
豆浆粉 2.5％
大豆异黄酮提取物(65％) 0.12％
评定
在第0、1、3和5周用以下仪器进行测定：
-用Novameter测定皮肤保湿作用(hydration)
-用Sebumeter进行皮脂分析
所有受试者还记日记。
测定方法
用皮脂测定仪测定皮脂：
测定皮脂所选用的技术设备是SM810型Courage & Kzahaka皮脂测定仪。皮脂测定仪的原理涉及使用光度测定法，光度计在手持盒中有特殊的不透明塑料膜。此膜上积聚或沉积的皮脂越多之后，该膜就变得越透明。测定皮脂时，将盒子放在测试区30秒，吸收表面皮脂。测定膜的透光度，皮脂含量越高，读数越高。所得皮脂测定值的标准单位是μg皮脂/cm2。
用Nova DPM 9003测定润湿性：
人们已经认识到，水在控制和改进角质层的物理性质中起重要的作用。皮肤的电学性质用其使电流流过的电阻表示。所述电阻的测定方法是在两个表面部位施加外电压，寻找电流在这两个部位之间沿皮肤流动的瞬时和/或稳态模式。测定量可以是电阻、电导或阻抗。有证据表明，这些电信号与皮肤表面的保湿作用相关。利用电学方法的市售测定装置可定量测定皮肤功能和润湿性。这种仪器包括Skicon、Comeometer和Dermal Phase Meter(DPM)。在本研究中，Nova DPM 9003通过对不同交流电频率下的所选测定值积分，给出基于阻抗的电容读数。电容读数或DPM读数越高，皮肤保湿作用越高。
混合性皮肤的标准
如果受试者的每半个脸上都至少有一个油性区(皮脂量＞200mg/cm2)和一个干性区(皮脂量＜66mg/cm2)，则可将她归为“混合性皮肤”。图1所示面部评价模板说明了对每个受试者如何进行评定。
图1显示了受试者面部上的不同部位。面罩是设计的，用于评价。
如图2所示，与无效对照剂相比，经全大豆洗液处理的干性部位润湿性增加(p＜0.05)。测定在局部施用后12-24小时进行。图3所示为干性皮肤区经全大豆洗液平衡后的皮脂含量与无效对照剂对比的情况(平均±SD；p＜0.05)。图4所示为油性皮肤区经全大豆洗液处理平衡后的情况(平均±SD)。与无效对照剂相比，全大豆洗液选择地降低了颏部油性区的皮脂含量(p＜0.05)，如图5所示。
                      表2：受试者评价
    无效对照试剂     全大豆
    生诊子/痤疮     35.3％     5.9％
    皮肤光滑性/柔软性提高     5.9％     35.3％
    皮肤油性/笑纹/泛红明显减少     17.6％     58.8％
在研究结束时(第5周)，从那些已经报告的受试者测定情况看，全大豆更加优于无效对照剂。约60％的受试者指出经大豆处理的那一侧脸有改善，而只有17％的受试者说经无效对照剂处理的那一侧脸在整体肤色和纹理上有改善。这些改善之处也包含细皱纹减少。显然，“全大豆”还额外改善了肤色、纹理和柔软性，减少了皱纹，如上述同时待审专利申请所述。这些组合物见述于同时待审的1998年7月6日提交的美国专利申请09/110409、1998年12月7日提交的09/206249、1999年7月27日提交的09/361429、2000年7月21日提交的09/621565和2000年10月7日提交的09/698454，它们在此引为参考。
在使用无效对照剂的受试者中，报告生痤疮或疹子的人(35.3％)，明显多于用全大豆的受试者(5.9％)(见上面表2)。这些结果是非常明显的。我们以为，油性皮肤或过多的皮脂是皮肤易生痤疮的必要条件。减少油性区的过多皮脂引起减少生痤疮。可用全大豆处理易生痤疮的皮肤，减少生痤疮的可能性。
本发明组合物全大豆包含广谱非疫性的活性组分，它们能为皮肤护理提供许多好处。在本发明对混合性面部皮肤的研究中，我们了解到：
·全大豆洗液可湿润干性皮肤区
·全大豆洗液有选择地减少面部油性区的皮脂含量
·全大豆洗液在临床上能平衡混合性面部皮肤上的干性/油性区
·全大豆洗液能有效地平滑和软化面部皮肤纹理
全大豆的减少皮脂和润湿的双重功能，据信是因为它包含高达40-50％蛋白质、20-30％甘油三酸酯和20-30％碳水化合物以及少量大豆异黄酮、植物甾醇类、维生素和矿物质等组分，其中甘油三酸酯由长链脂肪酸(C16-C20和C22)构成，且大部分是多不饱和脂肪酸。这些组分可有助于减少油性或油脂性皮肤区的过多皮脂，同时赋予干性区保湿作用。

Claims (10)

1.一种平衡混合性皮肤外观的组合物，它包含豆荚类产品。
2.权利要求1所述的组合物，其特征在于所述豆荚是大豆。
3.权利要求2所述的组合物，其特征在于所述大豆是全大豆。
4.一种平衡混合性皮肤外观的方法，它包括在含油性区和干性区的皮肤上施用豆荚类产品。
5.权利要求4所述的方法，其特征在于所述豆荚是大豆。
6.权利要求5所述的方法，其特征在于所述豆荚是全大豆。
7.一种处理皮肤的方法，所述皮肤至少有一个初始皮脂含量至少约为200μg/cm2的区域和至少一个初始皮脂含量小于约66μg/cm2的区域，该方法包括在所述皮肤上施用包含全大豆的组合物，每天至少用一次，时间要足够长，获得以平衡的外观，减少所述至少一个初始皮脂含量至少约为200μg/cm2的区域的皮脂含量，增加所述至少一个初始皮脂含量小于约66μg/cm2的区域的皮脂含量。
8.权利要求7所述的方法，其特征在于它还包括每天施用所述全大豆组合物至少两次的步骤。
9.权利要求8所述的方法，其特征在于至少在3周时间内施用所述全大豆组合物。
10.一种处理皮肤的方法，所述皮肤至少有一个初始皮脂含量至少约为150μg/cm2的区域和至少一个初始皮脂含量小于约100μg/cm2的区域，该方法包括在所述皮肤上施用包含全大豆的组合物，每天至少用一次，时间要足够长，以获得平衡的外观，减少所述至少一个初始皮脂含量至少约为150μg/cm2的区域的皮脂含量，增加所述至少一个初始皮脂含量小于约100μg/cm2的区域的皮脂含量。
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