CN1628684A - 一种含三七二醇皂苷的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

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张平
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Abstract

本发明公开了一种含三七二醇皂苷的药物组合物及其制备方法，其特征在于从中药三七中得到的有效部位三七二醇皂苷与药用辅料混合，制备成固体制剂、注射制剂；其特征还在于三七二醇皂苷中人参皂苷Rb1的含量不低于60％药理实验表明，本发明的各组制剂，具有更好的药理作用。

Description

一种含三七二醇皂苷的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种含三七二醇皂苷的药物组合物及其制备方法。
技术背景
风湿性关节炎和类风湿性关节炎，属于中医风湿病范畴，，在临床上，风湿性关节炎和类风湿性关节炎所表现的症状均为肿和痛由于该病病程较长，且易复发，需要长期服药加以控制，用西药进行治疗，往往导致药害，给患者带来巨大的痛苦；近几年医药工作者，根据中医学理论，开发出不少治疗该病的系列产品，如寒湿痹冲剂、湿热痹冲剂、寒热痹冲剂、瘀血痹冲剂等，还有以中药八角麻、祖师麻为原料制备的制剂，但在临床应用中都存在着这样或者那样的缺点。
三七是一种名贵中药，具有散瘀止血、消肿定痛的功效，用于止血、镇痛和跌打损伤。三七有效成分为三七总皂苷，三七总皂苷分为三七二醇皂苷、三七三醇皂苷，根据文献报道，三七二醇皂苷是一类具有广泛生理活性的物质(人参皂苷的生物活性汇总材料)，对炎症病理的三个过程，即炎症第一期的血管通透性亢进，炎症第二期白细胞游走和炎症第三期的肉牙形成、组织增生，均有很好的抑制作用(朱惠兰等《中药材》1989.12(9)：38)；三七二醇皂苷以人参皂苷Rb1为主，属于中药有效部位，可以开发成中药创新药；非极性大孔吸附树脂对中药皂苷类有效部位的纯化具有非常好的效果，文献报道和我们实验研究，三七总皂苷的提取纯化的洗脱液为55％-75％的乙醇，通过实验，我们发现，先采用40％乙醇进行洗脱，高效液相色谱仪控制终点，除去三七三醇皂苷，再利用55％-75％的乙醇洗脱，得到三七二醇皂苷有效部位，运用该方法分离三七总皂苷中三七二醇皂苷、三七三醇皂苷，得率高、操作简单、适用于工业化生产；传统应用三七植物的根，经过我们实验研究发现，三七茎叶中也含有大量的有效成分，为了充分利用现有资源，我们在选用原料药材时，用三七根、茎叶进行提取分离，得到的有效部位相同。
查阅文献和专利，多为利用三七粗提物或总皂苷并且都用于心脑血管疾病的治疗，未有专利报道开发三七二醇皂苷进行治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎。
发明内容
基于上述原因，本发明采用乙醇提取，大孔吸附树脂纯化的方法，得到三七二醇皂苷，与药用辅料混合，制备成片剂、胶囊剂、水针剂、输液剂、粉针剂，用于治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎，药理实验表明，本发明的各组制剂具有更好的药理作用。
本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法
(1)取三七，粉碎，用4-8倍70％-80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用8-12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用3-5倍柱体积的55％-75％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷20-40重量份，药用辅料60-80重量份，胶囊剂组成为三七二醇皂苷20-40重量份，药用辅料60-80重量份，水针剂组成为三七二醇皂苷5-10重量份，输液剂组成为三七二醇皂苷10-20重量份，药用辅料30-40重量份，粉针剂组成为三七二醇皂苷5-10重量份，药用辅料40-45重量份；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂、胶囊剂；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂；
(6))取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂。片剂、胶囊剂的药用辅料为淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁的一种或几种的混合物。
输液剂的药用辅料为氯化钠、葡萄糖的一种。
粉针制剂的制备中赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖中的一种或几种。
二.检测分析
有效部位三七二醇皂苷中人参皂苷Rb1的含量检测
照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；乙晴-水(20∶80)为流动相。
对照品溶液制备：取经干燥24小时的人参皂苷Rb1对照品适量，精
                密称定，加流动相稀释成1ml中含人参皂苷
                Rb10.8mg的溶液，即得对照品溶液。
供试品溶液的制备：取本品约100mg，精密称定，置25ml容量瓶中，
                  加流动相稀释至刻度，摇匀，得到供试品溶液。
测定方法：精密量取对照品溶液和供试品溶液10ul，分别注入高效
          液相色谱仪中，按照外标法以峰面积计算含量，即得。(实
          验三次)
实验结果：见表1。
        表1  三七二醇皂苷中人参皂苷Rb1的含量
实验次数          人参皂苷Rb1的含量        平均值
                  (％)                     (％)
1                 78.3
2                 80.6                     80.0
3                 81.2
结论：通过检测分析实验表明，本发明的三七二醇皂苷中人参皂苷Rb1含量超过60％，充分说明本发明工艺具有实际意义。
三.药理实施例
实施例1
对小鼠棉球肉芽肿的影响
实验动物：实验用ICR小鼠，雌雄各半，体重20±2g。
实验药物：本发明各组制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)
          风湿性关节炎片(山西德元堂药业有限公司)
          骨肽注射液(哈尔滨圣泰制药有限公司)
          蒸馏水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)；
实验方法：用脱脂棉制作成形状大致相同的棉球，灭菌后分别埋植小
          鼠关节下，于手术后次日口服药灌胃给药，注射药尾静脉
          给药(将粉针剂加注射用水配制成水针剂浓度，输液剂浓
          缩到水针剂浓度)，连续7日，处死，取出肉芽组织，干
          燥，电子天平称重，计算埋植后棉球重量差值，结果见表
          2、表3：
                 表2  固体制剂对小鼠棉球肉芽肿的影响
                    剂量             鼠数             肉芽肿重量
组别
                    (g/kg)           (只)             mg
蒸馏水组            -                10               0.3381±0.0090
风湿性关节炎片      25               10               0.3012±0.0051**
本发明片剂          25               10               0.2745±0.0032**[*]
本发明胶囊          25               10               0.2739±0.0029**[*]
注：与蒸馏水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较[*]＜0.05
                 表3  注射制剂对小鼠棉球肉芽肿的影响
组别                剂量             鼠数             肉芽肿重量
                    (ml/kg)          (只)             mg
蒸馏水组            -                10               0.3396±0.0089
骨肽注射液          50               10               0.2651±0.0021**
本发明水针剂        50               10               0.2436±0.0019**
本发明输液剂        50               10               0.2459±0.0021**
本发明粉针剂        50               10               0.2421±0.0019**
                   注：与蒸馏水组比较**P＜0.01
实施例2
扭体法镇痛试验
实验动物：实验用ICR小鼠，雌雄各半，体重20±2g。
实验药物：本发明各组制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)
          风湿性关节炎片(山西德元堂药业有限公司)
          骨肽注射液(哈尔滨圣泰制药有限公司)
          蒸馏水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)；
实验方法：各组分别给药连续7天，口服药灌胃给药，注射药尾静脉
          给药(将粉针剂加注射用水配制成水针剂浓度，输液剂浓缩
          到水针剂浓度)，腹腔注射0.8％醋酸0.2ml/只，记录5～
          20min内扭体次数。结果见表4、表5。
                  表5  固体制剂对小鼠扭体实验
组别                鼠数(只)      扭体次数(n)        抑制率(％)
蒸馏水组            10            34.87±13.59       -
风湿性关节炎片      10            24.26±10.21*      30.43
本发明片剂          10            19.22±9.89**      44.88
本发明胶囊          10            18.97±9.64**      45.60
                   注：*P＜0.05，**P＜0.01
                  表6  注射制剂对小鼠扭体实验
组别                鼠数(只)      扭体次数(n)        抑制率(％)
蒸馏水组            10            34.57±12.98       -
骨肽注射液          10            15.22±9.12**      55.97
本发明水针剂        10            13.21±8.91**      61.79
本发明输液剂        10            12.99±8.64**      62.42
本发明粉针剂        10            12.96±8.51**      62.51
                   注：与蒸馏水组比较**P＜0.01
结论：通过以上药理实验表明本发明的各组制剂具有更好的药理作用。
三.制备实施例
实施例1
(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用4倍70％乙醇提取3次，每次0.5小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上D101型大孔吸附树脂柱，先用8倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用6倍柱体积的40％乙醇进行洗脱，洗脱液弃去，再用3倍柱体积的55％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷20克，药用辅料淀粉80克，胶囊剂组成为三七二醇皂苷20克，药用辅料淀粉80克，水针剂组成为三七二醇皂苷5克，输液剂组成为三七二醇皂苷10克，药用辅料氯化钠40克，粉针剂组成为三七二醇皂苷5克，药用辅料甘露醇45克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6))取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例2
(1)取干燥三七茎叶10000克，粉碎，用8倍80％乙醇提取5次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用5倍柱体积的75％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷40克，药用辅料淀粉、葡萄糖60克，胶囊剂组成为三七二醇皂苷40克，药用辅料淀粉、葡萄糖60克，水针剂组成为三七二醇皂苷10克，输液剂组成为三七二醇皂苷20克，药用辅料葡萄糖30克，粉针剂组成为三七二醇皂苷10克，药用辅料蔗糖40克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例3
(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用5倍75％乙醇提取4次，每次0.6小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上NKA型大孔吸附树脂柱，先用9倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用4倍柱体积的60％进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷25克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁75克，三七二醇皂苷25克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁75克，水针剂组成为三七二醇皂苷6克，输液剂组成为三七二醇皂苷12克，药用辅料葡萄糖38克，粉针剂组成为三七二醇皂苷6克，药用辅料乳糖44克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例4
(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用6倍75％乙醇提取3次，每次0.7小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上D101型大孔吸附树脂柱，先用10倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用3倍柱体积的65％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷30克，药用辅料葡萄糖、硬脂酸镁70克，胶囊剂组成为三七二醇皂苷30克，药用辅料葡萄糖、硬脂酸镁70克，水针剂组成为三七二醇皂苷7克，输液剂组成为三七二醇皂苷14克，药用辅料氯化钠36克，粉针剂组成为三七二醇皂苷7克，药用辅料甘露醇、乳糖43克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例5
(1)取干燥三七茎叶10000克，粉碎，用7倍80％乙醇提取4次，每次0.8小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用11倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用5倍柱体积的65％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷35克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁65克，胶囊剂组成为三七二醇皂苷35克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁65克，水针剂组成为三七二醇皂苷8克，输液剂组成为三七二醇皂苷16克，药用辅料葡萄糖34克，粉针剂组成为三七二醇皂苷8克，药用辅料甘露醇、蔗糖42克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。
实施例6
(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用7倍75％乙醇提取5次，每次0.8小时，合并提取液，回收乙醇至尽，浓缩液上NKA型大孔吸附树脂柱，先用10倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用4倍柱体积的70％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本发明制剂的处方为：
片剂组成为三七二醇皂苷35克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁65克，胶囊剂组成为三七二醇皂苷35克，药用辅料淀粉、葡萄糖、硬脂酸镁65克，水针剂组成为三七二醇皂苷9克，输液剂组成为三七二醇皂苷18克，药用辅料氯化钠32克，粉针剂组成为三七二醇皂苷9克，药用辅料甘露醇、蔗糖、乳糖41克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷与药用辅料，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂1000片、胶囊剂1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂1000支；
(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂1000瓶；
(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂1000瓶。

Claims (5)

1.一种含三七二醇皂苷的药物组合物，其特征在于它是由下述方法制备而成的：
(1)取三七饮片，粉碎，用4-8倍70％80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小时，合并提取液，回收乙醇至尽；
(2)浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用8-12倍柱体积水洗，洗脱液弃去，再用的40％乙醇进行洗脱，用高效液相仪控制终点，洗脱液弃去，再用3-5倍柱体积的55％-75％乙醇进行洗脱，保留洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位，其中三七二醇皂苷中人参皂苷Rb1的含量不低于60％，即为该药物组合物。
2.根据权利要求1所述的含三七二醇皂苷的药物组合物，其中三七原料是指三七的茎叶和三七根。
3.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂。
4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征将上述三七二醇皂苷制成片剂、胶囊剂、水针剂、输液剂或粉针剂：
(1)取三七有效部位三七二醇皂苷20-40重量份与药用辅料60-80重量份，按照片剂、胶囊剂的常规方法制备成片剂、胶囊剂；
(2)取三七二醇皂苷5-10重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到水针剂；
(3)取三七二醇皂苷10-20重量份，药用辅料30-40重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺调PH值为5-8，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液进行灌装，检验，得到输液剂；
(4)取三七二醇皂苷5-10重量份，药用辅料赋形剂40-45重量份，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔滤膜过滤，滤液干燥，得到粉针剂。
5.根据权利要求1或4所述的药物组合物在制备治疗风湿性和类风湿性关节炎的药物中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100423727C (zh) * 2006-01-19 2008-10-08 云南天秀植物科技开发有限公司 一种抗肿瘤的药物组合物及其制备工艺
CN101007035B (zh) * 2007-01-25 2010-12-01 上海中药创新研究中心 三七二醇皂苷在制备治疗记忆力减退药物中的应用

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