CN1583121A - 菊蓝抗流感胶囊的制备方法及质量控制技术 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种菊蓝抗流感胶囊的制备方法及质量控制技术，将人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花用80％乙醇回流提取有效成分，浓缩得稠膏；取板蓝根用乙醇回流提取有效成分，浓缩成稠膏；将稠膏分别干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉，板蓝根干浸膏粉，配研加入人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林及适量辅料，混合，灌入胶囊，即得。本发明通过测定胶囊中的各组分的有效成分进行质量控制。临床研究显示对发热、恶风、头痛、口干渴具有良好的疗效；质量标准中各项指标基本能控制本品质量，稳定性试验结果也表明本品稳定性能达到18个月要求。

Description

菊蓝抗流感胶囊的制备方法及质量控制技术

技术领域

本发明属于一种中药，具体的说是一种治疗流行性感冒中药的制备方法及其质量控制技术

背景技术

流行性感冒是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，是人类面临的主要公共健康问题之一。

流感的临床症状包括畏寒、高热、头痛、头晕、全身酸痛、乏力等，这些症状严重影响了人们的工作、生活、学习。如果引起并发症，如肺炎、中耳炎、支气管炎、心肺疾病的恶化、充血性心力衰竭和哮喘等，往往造成严重后果，其中流感病毒肺炎继发细菌性肺炎常可危及生命。目前，抗流感药市场多为新康泰克、白加黑、百服宁、快克等西药品种，但此类药物服用后易产生嗜睡、头晕、乏力等症状，不利于工作和生活。

《卫生部药品标准》中药成方制剂中有“菊蓝抗流感片”，但该片剂生产工艺粗糙，野菊花、板蓝根均为水提且含部分生药粉，质控标准中仅有试管反应定性鉴别，提取工艺与质控措施均与其单味药基础研究水平相差甚远。这既不符合现代中药标准，又无法满足病患者与市场需求。

发明内容

本发明的目的是提供一种菊蓝抗流感胶囊的制备方法及其质量控制技术，对菊蓝抗流感片进行了进一步研究开发。改革原剂型生产工艺中提取部分的不合理因素，由水提改为醇提，并制成胶囊剂。

菊蓝抗流感胶囊的制备方法，原料处方中含用野菊花、板蓝根、水牛角浓缩粉、人工牛黄、阿司匹林五味药，其特征在于：

(1)、配方重量比例为：

野菊花747          板蓝根632      人工牛黄11.5

水牛角浓缩粉23     阿司匹林23

(2)、将人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花用80％乙醇回流提取有效成份，浓缩得稠膏；取板蓝根用乙醇回流提取有效成份，浓缩成稠膏；将稠膏分别干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉，板蓝根干浸膏粉，配研加入人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林及适量辅料，混合，灌入胶囊，即得。

所述的菊蓝抗流感胶囊的制备方法，其特征在于将人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花用80％乙醇回流提取2~3次、每次1~2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇，滤过，继续浓缩成稠膏；另取板蓝根用80％乙醇回流提取2~3次、每次1~2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇，并继续浓缩成稠膏；将稠膏分别干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉，板蓝根干浸膏粉，配研加入人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林及适量淀粉，混合，灌入胶囊，即得。

本药处方由野菊花、板蓝根、水牛角浓缩粉、人工牛黄、阿司匹林五味药组成。其方证为感受风热病邪或时行疫毒，以邪在肺卫为病变中心，但在疾病发展过程中可入里而变生他证。微寒清热，入肺经而疏散肺经风热毒邪，清利咽喉。入肝经，散肝经风火，清肝疏风。《山西中药志》谓其能“疏风热，清头目，降火解毒。治清风眩晕，头痛，目赤肿毒。”板蓝根味苦性寒，入心胃二经，能清解心。胃二经实热火毒，可治温病发热、头痛及热毒炽盛所致温毒发斑、痄腮，丹毒等证。《上海常用中草药》谓其能“治感冒发热”，《广西中草药》“治乙脑，流感……”。在本方中，与野菊花相须为用，相辅相成，共为君药；方中水角牛浓缩粉，为水牛角的半浓缩粉，功同水牛角，味苦咸性寒，其苦能泻火，咸以入血，寒能清热，入心肝二经血分，可凉营血，散郁热，泄气热使气血两清，为清热解毒，凉血消斑之要药。《陆川本草》云其能“凉血解毒，止衄”，用为臣药，以加强君药清解气分热毒，兼凉营分血热之功效；人工牛黄系从牛胆汁或猪胆汁经提取加工而成的天然牛黄代用品，性味功效均同天然牛黄，其味苦性凉，入心肝二经，功具清热解毒，尚可息风止痉，化痰开窍，用为佐使药。上四药合用，在透解疏散肺卫风热表邪的同时，又兼顾了风热表邪，易进一步化热入里或风温热毒入营入血的特点。

阿司匹林为发汗解热镇痛药，有类似中药发散解表的功能。此功效亦符合中医治疗感冒当从汗解的大法。该药还可以辅佐诸药达表，增强诸药疏风清热解毒之效。

原剂型“菊蓝抗流感片”标准中，板蓝根、野菊花采取了水提工艺并保留了部分生药粉。经研究表明，采用水提板蓝根存在诸多不合理因素，其主要成份(靛玉红等)提取率极低，且大量胶质，鞣质等无效成份却被大量溶出，给制剂工作带来困难，“菊蓝抗流感胶囊”采用醇提，克服了这一缺点，其靛玉红含量是水提工艺的40倍左右而水溶性成分氨基酸的含量基本一致；野菊花清热解毒有效成分以黄酮类为主，故本药提取工艺采用醇提方式进行。板蓝根和野菊花均采取全浸膏投料，不再保留部分生药以利于发挥药效。研究结果又表明将板蓝根和野菊花合并提取制成胶囊后，经薄层层析检测靛玉红含量仍然很低，而单味药提取则很明显，说明混合提取影响了板蓝根成分的提取，从所含成分推断可能是野菊花所含的油脂成分、腊质等吸附了板蓝根中脂溶性成分，经滤过后损失所致。因此申请人将提取工艺改为将板蓝根和野菊花分别进行提取。

药效学研究

根据《中药新药研究指南》“治疗外感热症中药的药效学研究”有关规定对该新药进行了主要药效学研究，结果显示：(1)抗菌作用采用液体试管法对菊蓝抗流感胶囊进行体外抗菌试验，结果表明，菊蓝抗流感胶囊对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌，肺炎双球菌，大肠杆菌，流感杆菌，变形杆菌均具有对抗作用，且对乙型溶血性链球菌，肺炎双球菌的作用强于菊蓝抗流感片。(2)抗炎、镇痛和解热作用：分别采用小鼠扭体、热板、二甲苯诱导小鼠耳片肿胀、10％蛋清诱导大鼠踝关节肿胀及蛋白胨诱导大白鼠体温升高模型，研究了菊蓝抗流感胶囊(1.5、3g/kg，ig×7d)的抗炎、镇痛及解热作用。结果表明，菊蓝抗流感胶囊可减少小鼠扭体次数，延长小鼠热板蓝痛反应的潜伏期，减轻小鼠耳肿胀度及降低蛋白胨引起的大鼠体温升高作用，但对10％蛋清诱导大鼠踝关节肿胀模型没有影响。证明菊蓝抗流感胶囊短期给药(7d)具有一定的抗菌、抗炎、镇痛和解热作用。临床前药效学试验显示，本品可降低流感病毒FM1型感染小鼠的肺指数，降低乙型链球菌感染小鼠的死亡率，抑制鲜啤酒母所致大鼠体温升高。

毒理学研究

参照《中药新药研究指南》，对药蓝抗流感胶囊进行了急性毒性试验和长期毒性试验。小鼠急性毒性试验表明，一次灌胃菊蓝抗流感胶囊52g/kg，相当于人临床用量的520倍，连续观察七天，未出现明显毒性反应，亦未发现动物死亡。大鼠长期毒性试验表明，各大鼠活动自如，体重自然增长，血常规，肝、肾功能化验结果与空白对照组比较未见显著性差异，病理解剖学及病理组织学检查未见病理性改变，也未出现动物死亡。

临床研究表明

将受试者分为治疗组和对照组：治疗组100例，对照组60例。治疗组男性71例，女性29例；对照组男性42例，女性18例。治疗组年龄最大65岁，最小18岁；对照组年龄最大61岁，最小19岁。治疗组口服菊蓝抗流感胶囊5粒/次，2次/日。对照组口服菊蓝抗流感片5片/次，2次/日。两组均以3天为一疗程，观察受试者一个疗程。

治疗组中临床治愈47例，占47％，显效33例，占33％，有效15例，占15％，痊显率80％，总有效率95％；对照组中临床治愈24例，占40％，显效15例，占25％，有效16例，占26.7％，痊显率65％，总有效率91.7％。治疗组在主要症状方面与对照组比较，对发热、恶风、头痛、口干渴疗效有显著性差异，对其痊显率治疗组与对照组相比P＜0.05，有显著性差异。

结论

菊蓝抗流感胶囊组方合理，药效学试验表明具有抗菌、抗炎、镇痛和解热作用，临床前药效学试验显示，本品可降低流感病毒FM1型感染小鼠的肺指数，降低乙型链球菌感染小鼠的死亡率，抑制鲜啤酒母所致大鼠体温升高。

毒理试验结果未见明显毒性反应，临床研究显示对发热、恶风、头痛、口干渴具有良好的疗效；质量标准中各项指标基本能控制本品质量，稳定性试验结果也表明本品稳定性能达到18个月要求。

本发明工艺制得的药品具有如下优点：1、为纯中药制剂，不含苯丙醇胺(PPA)；2、剂型合理，可掩盖部分药物的不适气味；3、剔除原工艺中的板蓝根、野菊花部分生药粉，采用更为合理的生产工艺提取板蓝根、野菊花的有效成分，使方中各药更易发挥药效；4、增加了新的质控指标，提高了该药的质量标准水平，使产品的质量能得到控制以保证疗效；5、具有更高的技术含量和技术附加值。

具体实施方式

处方

菊蓝抗流感胶囊

野菊花747g     板蓝根632g        人工牛黄11.5g

阿司匹林23g    水牛角浓缩粉23g

                                 制成1000粒

片剂用量一日2次，本新药规格为每粒装0.45g，每次服用5粒。

制法

人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花8倍用量80％乙醇加热回流提取三次、每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)的稠膏；另取板蓝根用6倍用量80％乙醇加热回流提取三次、每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)的稠膏；将稠膏分别减压真空干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉、板蓝根干浸膏粉加入上述细粉，与淀粉160g混合，装入胶囊，制成1000粒，即得。

所述菊蓝抗流感胶囊的质量控制技术：

规定本品性状为胶囊剂，内容物为棕褐色至黄棕色粉末，气微香，味苦；通过下列反应进行各组分质量控制，

一、鉴别：

(1)、水牛角浓缩粉成分反应，取本品1g，加水10ml使溶解，滤过，取滤液2ml，加茚三酮试液1ml，置沸水浴中加热5分钟，显蓝紫色；

(2)、野菊花黄酮类成分反应，取鉴别(1)项下的滤液1滴，点于滤纸上，晾干，喷洒2％三氯化铝乙醇试液，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，显黄绿色荧光；

(3)、板蓝根成分薄层层析图谱，取本品2.5g，加氯仿回流提取，每次30ml，提取1小时，滤过，滤液合并，置分液漏斗中，加5％碳酸钠溶液洗涤二次，每次10ml，静置，分层，弃去水洗液；将氯仿液置水浴上蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取靛玉红对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；

(4)、人工牛黄成分薄层层析图谱，取本品2.5g，加入5％冰醋酸乙醇溶解30ml，回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加5％碳酸钠处理，乙醚提取去除干扰成分后，碱液加稀盐酸调至酸性，再加氯仿提取，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-正己烷-甲醇-醋酸(25∶20∶3∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

(5)、阿司匹林薄层层析图谱，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取“(三)、含量测定，阿司匹林”项下的供试品溶液3μl、对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以正戊醇-环己烷-冰醋酸(8∶2∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇液，置80℃加热5分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；

二、检查

应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录IL)；

三、含量测定

(1)、本品每粒含人工牛黄胆酸(C₂₄H₄O₅)计，不得少于0.3mg；

人工牛黄，取本品内容物约0.5g，研细，精密称定，加水20ml搅拌使溶化，置分液漏斗中，加乙醚提取4次，每次30ml，静置，分层，分取乙醚液，合并，回收溶剂至适量，加乙醚稀释至50ml，移入分液漏斗中，加1％碳酸钠溶液提取3次，每次30ml，静置，分取碱液层，合并，用稀盐酸调节PH值至3，加乙醚提取4次，每次30ml，静置，分取乙醚层，合并，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，移入2ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，密塞，摇匀，作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl与3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-正己烷-冰醋酸-甲醇(16∶3∶0.5∶0.3)为展开剂，展开，取出，于105℃加热2分钟，喷以15％磷铝酸乙醇液，置105℃加热至斑点显色清晰，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λ_S＝685、λ_R＝550nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

(2)、本品每粒阿司匹林(C₉H₈O₄)应为标示量的85％-115％。

取本品内容物约0.5g，研细，精密称定，置具塞三角瓶中，加氯仿20ml超声提取10分钟，滤过，药渣及滤器用氯仿5ml洗涤，合并氯仿液，蒸干，残渣用乙醇溶解，定容至5ml，作为供试品溶液；另取阿司匹林对照品，加乙醇制成每1ml含10mg溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液3μl，对照品溶液2μl与4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正戊醇-环己烷-冰醋酸(8∶2∶0.2)为展开剂，展距10cm，取出，热风吹干至无醋酸味，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，置80℃加热5分钟，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λ_S＝580mm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

Claims (3)

1、菊蓝抗流感胶囊的制备方法，原料处方中含用野菊花、板蓝根、水牛角浓缩粉、人工牛黄、阿司匹林五味药，其特征在于：

(1)、配方重量比例为：

野菊花 747           板蓝根 632        人工牛黄 11.5

水牛角浓缩粉 23      阿司匹林 23

(2)、将人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花用80％乙醇回流提取有效成份，浓缩得稠膏；取板蓝根用乙醇回流提取有效成份，浓缩成稠膏；将稠膏分别干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉，板蓝根干浸膏粉，配研加入人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林及适量辅料，混合，灌入胶囊，即得。

2、如权利要求1所述的菊蓝抗流感胶囊的制备方法，其特征在于将人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林分别研细；取野菊花用80％乙醇回流提取2~3次、每次1~2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇，滤过，继续浓缩成稠膏；另取板蓝根用80％乙醇回流提取2~3次、每次1~2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇，并继续浓缩成稠膏；将稠膏分别干燥，粉碎成细粉；取野菊花干浸膏粉，板蓝根干浸膏粉，配研加入人工牛黄、水牛角浓缩粉、阿司匹林及适量淀粉，混合，灌入胶囊，即得。

3、如权利要求1所述过菊蓝抗流感胶囊的质量控制技术，其特征在于规定本品性状为胶囊剂，内容物为棕褐色至黄棕色粉末，气微香，味苦；通过下列反应进行各组分质量控制，

一、鉴别：

(1)、水牛角浓缩粉成分反应，取本品1g，加水10ml使溶解，滤过，取滤液2ml，加茚三酮试液1ml，置沸水浴中加热5分钟，显蓝紫色；

(2)、野菊花黄酮类成分反应，取鉴别(1)项下的滤液1滴，点于滤纸上，晾干，喷洒2％三氯化铝乙醇试液，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，显黄绿色荧光；

(3)、板蓝根成分薄层层析图谱，取本品2.5g，加氯仿回流提取，每次30ml，提取1小时，滤过，滤液合并，置分液漏斗中，加5％碳酸钠溶液洗涤二次，每次10ml，静置，分层，弃去水洗液；将氯仿液置水浴上蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取靛玉红对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；

(4)、人工牛黄成分薄层层析图谱，取本品2.5g，加入5％冰醋酸乙醇溶解30ml，回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加5％碳酸钠处理，乙醚提取去除干扰成分后，碱液加稀盐酸调至酸性，再加氯仿提取，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-正己烷-甲醇-醋酸(25∶20∶3∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

(5)、阿司匹林薄层层析图谱，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取“(三)、含量测定，阿司匹林”项下的供试品溶液3μl、对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以正戊醇-环己烷-冰醋酸(8∶2∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇液，置80℃加热5分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；

二、检查

应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录IL)；

三、含量测定

(1)、本品每粒含人工牛黄胆酸(C₂₄H₄O₅)计，不得少于0.3mg；

人工牛黄，取本品内容物约0.5g，研细，精密称定，加水20ml搅拌使溶化，置分液漏斗中，加乙醚提取4次，每次30ml，静置，分层，分取乙醚液，合并，回收溶剂至适量，加乙醚稀释至50ml，移入分液漏斗中，加1％碳酸钠溶液提取3次，每次30ml，静置，分取碱液层，合并，用稀盐酸调节PH值至3，加乙醚提取4次，每次30ml，静置，分取乙醚层，合并，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，移入2ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，密塞，摇匀，作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl与3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-正己烷-冰醋酸-甲醇(16∶3∶0.5∶0.3)为展开剂，展开，取出，于105℃加热2分钟，喷以15％磷铝酸乙醇液，置105℃加热至斑点显色清晰，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行扫描，波长λ_s＝685、λ_R＝550nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

(2)、本品每粒阿司匹林(C₉H₈O₄)应为标示量的85％-115％。

取本品内容物约0.5g，研细，精密称定，置具塞三角瓶中，加氯仿20ml超声提取10分钟，滤过，药渣及滤器用氯仿5ml洗涤，合并氯仿液，蒸干，残渣用乙醇溶解，定容至5ml，作为供试品溶液；另取阿司匹林对照品，加乙醇制成每1ml含10mg溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液3μl，对照品溶液2μl与4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正戊醇-环己烷-冰醋酸(8∶2∶0.2)为展开剂，展距10cm，取出，热风吹干至无醋酸味，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，置80℃加热5分钟，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λ_s＝580mm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。