CN1563084A

CN1563084A - 水稻OsGLR1基因及其应用

Info

Publication number: CN1563084A
Application number: CN 200410017446
Authority: CN
Inventors: 吴平; 朱世华; 李靖; 周洁; 宋昕薇; 刘红家
Original assignee: Zhejiang University ZJU
Current assignee: Zhejiang University ZJU
Priority date: 2004-03-31
Filing date: 2004-03-31
Publication date: 2005-01-12
Anticipated expiration: 2024-03-31
Also published as: CN1247612C

Abstract

本发明公开了一种从水稻中分离出来的蛋白质和DNA分子，一种包含上述DNA序列的转基因植物细胞。生产此种生产转基因植物的方法，将带有上述的DNA序列的所表达外源基因的载体转移进植物体内，表现为植物与野生型植物生长发育相比发生了变化；或者是植物的根与野生型植物生长发育相比发生了变化。利用本发明基因可以构建与野生型根系生长发育相比发生了变化的植物，从而提高植物吸收水分和各种养分的能力，提高合成各种有机物的能力，从面促进植物的生长和发育，如提高作物的耐旱能力，提高作物的产量。

Description

水稻OsGLR1基因及其应用

技术领域：

本发明属于基因工程领域，具体地讲，本发明涉及一种新的、功能明确的水稻基因核苷酸序列；更具体地说，本发明涉及水稻OsGLRl基因的cDNA序列，该cDNA编码的蛋白属于离子通道型谷氨酸受体类。发明还涉及由该核苷酸序列编码的多肽，及这些多聚核苷酸和多肽的应用。

背景技术：

根物的根系不但固定植株，并且是植物从土壤中吸收水分和各种养分的重要器官，同时也是合成多种重要有机物的重要器官，农业生产实验证明，任何作物的稳产高产都要有一个生长发育良好的根系，根系是重要的农艺性状之一。因此通过基因工程等生物技术改造植物根系来提高它的吸收能力不但对于旱作的作物，尤其是水稻的旱种等具有重要的意义。

一类离子通道型谷氨酸受体基因家族iGluRs(ionotropic glutamatereceptors)，在动物中这一类离子通道型谷氨酸受体是谷氨酸配体的门控离子通道，通过谷氨酸作为神经递质在大脑中介导神经突触的兴奋传递，在神经元的跨膜信号转导中起着重要作用。这类离子通道基因的异常将导致中枢神经系统的紊乱并产生各种神经疾病(Dingledine et al.1999)。在细菌里也有一种类似蛋白受体GluR0，具有被谷氨酸和谷氨酰胺激活的钾离子通道活性(Chenet al.，1999)。

植物方面：在拟南芥中已发现有20个GLRs，并且在其它植物中也广泛存在此类基因。拟南芥中这类家族基因都具有与动物共同的保守结构：有“3+1”的跨膜结构域和二个与配体结合的结构域，这些结构域的氨基酸序列高度保守。(Lam et al.1998，Chiu et al.2002，Davenport 2002)。拟南芥幼苗发育早期，在光照培养条件下加入动物iGluR的拮抗物DNQX[6，7dinotropuinoxaline 2，3(1H，4H)dione]引起拟南芥幼苗下胚轴的伸长及叶绿素的减少(Lam et al.1998)，加入iGluR的的兴奋剂BMAA[S(1)-b-methyl-a，b-diaminopropionic acid]也能使下胚轴的伸长，并抑制子叶的张开，提供外源谷氨酸和谷氨酰胺可以消除这种效应(Brenner et al.2000)，但在黑暗培养下都没有这种效应。说明在植物中此类受体基因可能参与植物的光信号传导。

在完整的拟南芥的根尖中，谷氨酸可以刺激根尖细胞的胞内钙离子快速增加，并引起细胞膜的去极化，说明此类受体基因可能参与细胞内钙离子的调控(Dennison and Spalding 2000)。通过转入此类受体基因AtGLR2，在拟南芥过度表达使植株产生钙离子缺乏症状，提供过量的Ca²⁺能消除缺钙症状正常生长，该基因的启动子融合GUS基因转化拟南芥后，GUS主要在维管组织中表达(Kim，et al.2001)，通过蛋白免疫方法也证明AtGLR3.2主要在分裂旺盛和维管组织中表达(Turano et al.2002)。表明该基因可能与植株的钙离子的运输和分布有关。此外，这类受体基因的AtGLR1.1可能调节C和N的代谢，并通过改变体内的植物激素ABA控制拟南芥种子的萌发。(Kang and Turano 2003)

因此，植物中离子通道型谷氨酸受体基因家族iGluRs(ionotropic glutamatereceptors)的功能到目前为止还没有被真正揭示。在本发明之前，除了AtGLR1.1和AtGLR3.2通过转基因发现与缺钙症状和种子萌发相关外，其它此类基因的功能都没有被阐明。

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发明内容：

本发明提供了一种新的与水稻苗期根生长发育有关的基因：OsGLRl基因，及其应用方法。

本发明目的之一是：提供一种分离出的DNA分子，它编码一个与水稻早期根系发育基因，属于iGluR类基因。

本发明目的之二是：提供一种能分离出的蛋白质，该蛋白属于离子通道型谷氨酸受体蛋白。

本发明的目的之三是：提供一种利用分离出的DNA分子或蛋白对植物或细胞进行改造，培养出与野生型生长发育相比发生变化了的植物或根系方法。

本发明还提供了这种分离出的DNA及蛋白的应用。

本发明为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的：提供一种从水稻中分离出来的蛋白质，它包含由SEQ ID NO：2所示氨基酸序列。

一种从水稻中分离出来的蛋白质，具有与SEQ ID NO：2所示氨基酸序列至少60％的同源性。

一种从水稻中分离出来的蛋白质，包含编码具有与SEQ ID NO：1中的核心结构域至少有60％相似性的氨基酸。

一种从水稻中分离出来的DNA分子，此DNA包含选自下组中的一组：

(a)、该序列包含SEQ ID NO：1共3399个碱基的核酸序列；

(b)、该序列包含与SEQ ID NO：2所示氨基酸序列至少60％同源性的核酸序列；

(c)、该序列包含与SEQ ID NO：1所示核酸序列至少60％相似性的核酸序列。

一种转基因植物细胞，此细胞中包含上述的DNA序列。

一种生产转基因植物的方法，将带有上述的DNA序列的所表达外源基因的载体转移进植物体内。此植物为水稻。表现为植物与野生型植物生长发育相比发生了变化；或者是植物的根与野生型植物生长发育相比发生了变化。

SEQ ID NO：1中下划线部分序列为与动物的iGluRs同源的保守结构域。其中虚划线的中配体结合结构域，实线为跨膜结构域。

本发明属于一类离子通道型谷氨酸受体iGluR，是通过从T-DNA插入的水稻中花11突变体库中筛选到的苗期短根突变体，并克隆到该基因，其功能经Southern印迹的协同分离验证和转包含有OsGLRl基因所在的基因组DNA片段的回复互补实验得到确认。该基因位于水稻第四条染色体上，属于单拷贝基因。经5’RACE与3’RACE克隆出该全长基因。其cDNA编码的4个跨膜结构域和2个配体结合结构域与动物和拟南芥的iGluR具有高度保守序列，与该类受体基因其他成员一致。RT-PCR表明，OsGLRl基因在禾本科模式植物水稻中是组成型表达，在地上部表达强于地下部根的表达。

本发明是第一个发现控制植物苗期根系生长发育的此类基因，由于根系是植物吸收水分和养分的重要器官，因此在分子育种中具有极大的应用潜力。

本发明的优点在于，利用本发明基因可以构建与野生型根系生长发育相比发生了变化的植物，从而提高植物吸收水分和各种养分的能力，提高合成各种有机物的能力，从面促进植物的生长和发育，如提高作物的耐旱能力，提高作物的产量。

附图说明：

图1是野生型(WT)、突变体(SR)和转OsGLRl基因回复突变体(SSR)的根系形态图；

图2是野生型(WT)、突变体(SR)培养约35天后根系的形态图；

图3是WT和SR的总DNA经限制性内切酶酶切后与OsGLRl基因的部分DNA片段杂交的放射自显影图；

图4是野生型(WT)、突变体(SR)和转OsGLRl基因回复突变体(RSR)的总DNA经限制性内切酶Ecol I酶切后与PCR扩增的NPII的DNA片段杂交的放射自显影图；

图5是互补回复株系的RT-PCR图；

图6是OsGLRl基因结构图；

图7是OsGLRl基因的表达图；

图8是OsGLRl受体蛋白序列与动物和拟南芥iGLRs同源性分析。

具体实施方式：

参照上述附图，对发明的具体实施方式进行详细说明。需要说明的是：

图1是在种子萌发后水中培养6天，温度为25-28℃，12小时光照，Bar＝1cm状态下所得。

图2是种子萌发后在水种培养6天后移入水稻培养液中继续培养，温度为25-28℃，12小时光照。Bar＝10cm时所得。

图3中的1和2分别为WT和SR总DNA用EcoRI酶切，3和4分别为WT和SR总DNA用HindII酶切。

图5中的5和6分别为中花11野生型的叶和根，7和8分别为转OsGLRl基因的回复突变体的叶和根，9短根突变体全株苗。

图7中结果显示OsGLRl基因可能为组成型表达，且在叶中表达比根强。

在T-DNA插入构建的中花11水稻突变体库中，筛选到一苗期短根的突变体，如图1所示，该突变体的种子萌发后，在光照12小时、温度25-28℃左右的水中生长6天的根长只有野生型的约1/3长度。6天后移入水稻培养液(国际水稻所配方)，35天左右后突变体的根长能恢复到野生型相同长度，如图2所示。用Tail-PCR方法从短根突变体的总DNA中扩增出插入的旁邻DNA序列，经测序和水稻基因组序列比较，发现插入于水稻的第4染色体上，将延伸的序列进行功能预测后发现其属于一类离子通道型谷氨酸受体iGluR，T-DNA插入到该基因的启动子结构区内。通过Southern印迹实验，该短根性状与插入T-DNA和插入的预测基因分离协同。设计引物扩增包含预测的基因组基因和它的启动子共7.8kb的DNA片段，克隆到pCAMBIA2300载体，电转化到农杆菌EHA105中，用基因枪法转化到短根突变体的水稻愈伤组织中，进行转基因互补恢复实验，结果转入该基因后突变体的根长在萌发生长6天后的根长约比突变体增长一倍，能恢复到野生型根长的约2/3长度，如图1所示，从而进一步确认了是该基因控制苗期根长的功能。该基因位于水稻第四条染色体上，属于单拷贝基因，如图3所示。经5’RACE与3’RACE克隆出该全长基因(SEQ ID No：1)，共3399个碱基，我们名为OsGLRl。该cDNA编码938个氨基酸(SEQ ID No：2)。蛋白结构分析其含有高度同源的iGluR四个跨膜结构域和2个配体结合结构域，如图8所示。OsGLRl的基因结构通过对比基因组序列与cDNA序列分析，发现它有6个外显子，3’和5’端前后都有非编码序列，如图6所示。为研究OsPTFl基因在植物作用，设计了一对特异性扩增该基因cDNA序列的引物进行半定量RT-PCR分析。结果发现，该基因在叶根中均为组成型表达，在叶中表达强于根中，如图7所示。

由这些结果表明，我们克隆的水稻OsGLRl基因具有调控植物苗期根系生长发育的作用，有很高的应用价值。我们可以通过利用该基因来调控根系的生长发育，从而提高根系的吸收水分和各种养分的能力，进而提高作物的耐旱性和产量。

实施例1，短突变体的筛选和表型：

将T-DNA插入的中花11水稻突变库T₁代种子于37℃浸种催芽后播种到水中，在温度为25-28℃左右、光照12小时条件下，水中培养6天后观察它们的根系表型，从一个T₁代株系群体中筛选到分离的短根突变体，如图1所示，该突变体的主根和不定根都比野生型短。6天后用营养液(溶液培养配方为国际水稻所标准配方)代替水培养，35天左右后，短根突变体的根能恢复到野生型一样的长度，如图2所示。

实施例2，OsGLRl基因是单拷贝基因：

应用Southern印迹实验对OsGLRl基因拷贝数进行了检测。抽提WT和SR的总DNA，经限制性内切酶酶切，OsGLRl基因的部分DNA片段用引物1(5’GTTGCGGATGGTGACCTGAG TG 3’)和引物2(5’CAGAGATGTTTTGGCTTTGTGC 3’)扩增野生型中花11的包含T-DNA插入位置长度为2217个bp的DNA片段为探针，进行分子杂交，如图3所示。结果显示OsGLRl基因是单拷贝基因，在短根突变体中由于T-DNA的插入，表型为二带型。

实施例3，基因组OsGLRl基因的转基因互补：

为了确认该短根性状是否是OsGLRl基因因T-DNA插入引起的突变结果，进行了OsGLRl基因的转基因互补回复实验。用引物3(5’AGAAACTAGTGTAGAAGGCAATGGGATC AGTACGG 3’)和引物4(5’GCTATCTAAACTAATGTAACACGCATGTGGACGG 3’)扩增包含启动子的全长OsGLRl基因的长度7410个bp的基因组DNA片段，克隆到PUC-T载体，用HindIII和KPNI酶切该克隆和pCAMBIA2300，将基因组OsGLRl基因亚克隆入pCAMBIA2300中。构建好的质粒电转化到农杆菌EHA105中，用基因枪法转化到短根突变体的水稻愈伤组织中，得到转基因互补苗。转入OsGLRl基因后，短根的性状能在苗期得到大部分恢复，从原来只有野生型的约1/3长，恢复到约2/3长，根长增加一倍，如图1所示。用引物5(5’CGGTGCCCTGAATGAA CTCCAG 3’)和引物6(5’GCCATGTGTCACGACGAGATCCTC 3’)扩增pCAMBIA2300上的NPII的385个bp作为探针，Southern印迹证实通过转基因在SR突变体中转入了一单拷贝OsGLRl基因，如图4所示，。对水中培养6天的转OsGLRl基因的回复突变体进行RT-PCR(方法见实施例5)，证实其在SR突变体中表达，如图5所示。说明短根突变体确实是由于T-DNA插入到OsGLRl基因导致的，同时也说明了OsGLRl基因控制水稻的苗期根系的生长发育。

实施例4，水稻OsGLRl的cDNA序列的克隆和测定：

针对该基因的基因组序列，设计引物用于快速扩增cDNA末端(RACE)。引物7(5’CACAT TGGTGAGGCTTCGGGAG 3’)用于3’端RACE扩增，引物8(5’TCATAGTAGGTCGTGCCGTTTTAG 3’)用于5’端RACE扩增。RACE扩增采用Clontech公司的SMART RACE eDNA Amplification Kit。PCR产物采用Clontech公司的PCR Cloning Kit克隆于pT-Adv载体，转化后提取质粒进行测序，最后用电脑软件拼接顺序，获得全长cDNA序列，共3399bp。详细序列见SEQ ID No.1。根据得到的全长cDNA序列推导出OsGLRl的氨基酸序列，共938个氨基酸残基，其氨基酸序列详见SEQ ID No.2。其中有与iGluR同源的4个跨膜结构域和2个配体结合结构域。OsGLRl的基因结构通过对比基因组序列与cDNA序列分析，发现它有6个外显子，3’和5’端前后都有非编码序列，如图6所示。

实施例5，OsGLRl受体蛋白序列与动物和拟南芥iGLRs同源性分析：

通过与已知动物和拟南芥的离子通道型谷氨酸受体蛋白的同源性分析，具有与它们相似的保守结构域：4个与iGluR同源的跨膜结构域M1、M2、M3和M4，2个与配体结合的结构域GlnH1和GInH2，如图8所示，，说明OsGLRl是属于离子通道型谷氨酸受体类基因。

实施例6，OsGLRl的半定量RT-PCR：

分别取野生型中花11水稻30℃浸泡24小时的胚，萌发后培养3、7、14、21、35天的根和地上部及突变体的7天全株为材料，用Gibco公司的Trizol试剂分别提取总RNA。每份材料各取5μg总RNA用于逆转录。逆转录过程如下：在1.5μl的离心管中加入5μg的RNA，1μl Oilgo(dT)₁₅(Promega公司)，加无RNA酶水至8μl，在70℃水浴变性5分钟，冰上冷却5分钟，稍离心后加入4μl 5×First Strand Buffer(Invitrogen公司)、2μl 0.1DTT(Invitrogen公司)、4μl 2.5mMdNTPs(Takara公司)、1μl Rasin(40unit/μl)(Promega公司)及1μlSuperScript RT II(Invitrogen公司)，用枪混匀，42℃空气浴1小时，70℃15分钟，终止反应。逆转录产物用于PCR扩增。分别采用OsGLRl的特异性引物特异性引物7和引物9(5’TGACAGCAGCA AG ACGGCAAC 3’)，及肌动蛋白的特异性引物10(5’GGAACTGGTATGGTCA AGGC)和引物11(5’AGTCTCATGGATACCCGCAG 3’)。扩增体系为：在50μl的反应体积中含有50mmol/L KCl，10mmol/L Tris-Cl，(pH8.5)，1.5mmol/L MgCl₂，200μmol/LdNTP，10pmol引物，0.5U的Taq DNA聚合酶(Clontech公司)。扩增条件为：OsGLRl 94℃30秒，58℃30秒，72℃45秒作30个循环；肌动蛋白94℃30秒，58℃30秒，72℃45秒作30个循环。等量的PCR产物电泳检测。结果发现，该基因在叶根中可能均为组成型表达，在叶中表达强于根中，如图7所示。

最后还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均认为是本发明的保护范围。

序列表

SEQ ID NO：1

1 CCTGAGAAAG TGACACCTAG GGAGTAGGGA CACTCAGTCG TAACATTTCA GGCGGTCATT

61 AACCCATTTT AGTATCTGGG CTCCAAACAG TTGCCATGAT ATAGCTAGGC GAACTGCAAG

121 CGAGGTCTTG AGAAACAGAA CCCGCTGCAG TGGCACATTT GGTGAGGCTT CGGGAGGTCA

181 CCAGAATTGT TCCTGTTCAC ACGGGCTGCT AGTTCTTCAC AGCTATCTCG TGTCATCCGA

241 GCAGAAGCAA CTACCTACCA ATAAGAGGTT GCTTCAGACC CAAATGGCAT CGTCAGGAAT

301 TTTTCCTCGG TTATTCCAGC ATGTGCGTTG TTACGTTGAA GGATGAATTC CAAAAGAGCA

361 CTACATTAAT CCTCTAGGTC ACTTTGTCAC CATGAAGTTC ATTTTCTATC TGTTCAGTAT

MetLysPhe IlePheTyr LeuPheSerIle

421 TTTCTGTTGT CTGTGTTCCT GCGCACAAAG CCAAAACATC TCTGGGAGGC CCGATGCAGT

PheCysCys LeuCysSer CysAlaGlnSer GlnAsnIle SerGlyArg ProAspAlaVal

481 GAGAATTGGA GCTCAGTTCG CAAGGAATTC AACAATTGGG AGAGTTGCCG CAGTTGCCGT

ArgIleGly AlaGlnPhe AlaArgAsnSer ThrIleGly ArgValAla AlaValAlaVal

541 CCTTGCTGCT GTCAATGACA TCAACAATGA TTCGAATATC CTTCCGGGAA CAAAGCTGGA

LeuAlaAla ValAsnAsp IleAsnAsnAsp SerAsnIle LeuProGly ThrLysLeuAsp

601 TCTTCATATG CATGATTCCA GTTGCAATCG CTTTCTTGGC ATTGTGCAAG CCTTGCAATT

LeuHisMet HisAspSer SerCysAsnArg PheLeuGly IleValGln AlaLeuGlnPhe

661 CATGGAGAAA GATACAGTGG CAATCATCGG CCCATTGTCT TCTACCACCG CCCATGTCCT

MetGluLys AspThrVal AlaIleIleGly ProLeuSer SerThrThr AlaHisValLeu

721 TTCTCATCTT GCAAATGAAC TCCACGTACC TCTGATGTCC TTTTCTGCAA CTGATCCAAC

SerHisLeu AlaAsnGlu LeuHisValPro LeuMetSer PheSerAla ThrAspProThr

781 TCTTTCGTCA CTTGAGTATC CGTTCTTTGT GCGGACTACC GTCAGTGATC AATTTCAAAT

LeuSerSer LeuGluTyr ProPhePheVal ArgThrThr ValSerAsp GlnPheGlnMet

841 GACTGCTGTT GCTGACTTAG TTGAGTATTA TGGGTGGAAG CAAGTGACAA CCATATTTGT

ThrAlaVal AlaAspLeu ValGluTyrTyr GlyTrpLys GlnValThr ThrIlePheVal

901 GGATAATGAT TATGGAAGAA ATGCAATATC CTCTTTAGGC GATGAACTTT CCAAGAGGCG

AspAsnAsp TyrGlyArg AsnAlaIleSer SerLeuGly AspGluLeu SerLysArgArg

961 ATCTAAGATC CTGTATAAAG CTCCATTTAG GCCAGGAGCA AGCAACAATG AAATAGCTGA

SerLysIle LeuTyrLys AlaProPheArg ProGlyAla SerAsnAsn GluIleAlaAsp

1021 TGTGCTGATC AAGGTTGCAA TGATGGAGTC TCGGGTCATC ATCCTGCATG CGAATCCCGA

ValLeuIle LysValAla MetMetGluSer ArgValIle IleLeuHis AlaAsnProAsp

1081 CTCTGGACTT GTGGTTTTCC AACAAGCACT CAAACTTGGC ATGGTATCCA ATGGGTATGC

SerGlyLeu ValValPhe GlnGlnAlaLeu LysLeuGly MetValSer AsnGlyTyrAla

1141 GTGGATTGCA ACAGATTGGC TCACTTCATA CCTTGATCCA TCGGTACATC TCGACATTGG

TrpIleAla ThrAspTrp LeuThrSerTyr LeuAspPro SerValHis LeuAspIleGly

1201 ATTACTGAGC ACAATGCAGG GTGTTCTTAC ATTGCGTCAC CACACTGAAA ATACCAGAAG

LeuLeuSer ThrMetGln GlyValLeuThr LeuArgHis HisThrGlu AsnThrArgArg

1261 GAAGAGTATG TTGTCTTCAA AATGGAGTGA ATTGCTTAAG GAGGATAGTG GTCACAGCAG

LysSerMet LeuSerSer LysTrpSerGlu LeuLeuLys GluAspSer GlyHisSerArg

1321 ATTCTTGCTT AGTACTTATG GCCTGTATGC TTATGATACT GTCTGGATGC TTGCTCATGC

PheLeuLeu SerThrTyr GlyLeuTyrAla TyrAspThr ValTrpMet LeuAlaHisAla

1381 GCTGGATGCA TTTTTCAATA GTGGCGGAAA CATTTCTTTC TCTCCTGACC CCAAACTAAA

LeuAspAla PhePheAsn SerGlyGlyAsn IleSerPhe SerProAsp ProLysLeuAsn

1441 TGAAATTTCA GGAAGAGGGT TGAATTTGGA AGCATTGAGT GTCTTTGACG GCGGACAGCT

GluIleSer GlyArgGly LeuAsnLeuGlu AlaLeuSer ValPheAsp GlyGlyGlnLeu

1501 GCTACTAGAA AAAATCCACC AGGTAGACTT CTTGGGTGCA ACTGGCCCAG TAAAATTTGA

LeuLeuGlu LysIleHis GlnValAspPhe LeuGlyAla ThrGlyPro ValLysPheAsp

1561 TTCAGGTGGT AATCTTATCC AGCCTGCATA TGACATTGTC AGCATAATAG GATCTGGTTT

SerGlyGly AsnLeuIle GlnProAlaTyr AspIleVal SerIleIle GlySerGlyLeu

1621 GCGGACAGTT GGTTACTGGT CCAACTATTC TGGGCTATCA GTTATATCTC CTGAGACTCT

ArgThrVal GlyTyrTrp SerAsnTyrSer GlyLeuSer ValIleSer ProGluThrLeu

1681 CTACAAGAAA CCAGCAAATC GTACTAGAGA AACTCAAAAA CTTCATGATG TGATCTGGCC

TyrLysLys ProAlaAsn ArgThrArgGlu ThrGlnLys LeuHisAsp ValIleTrpPro

1741 AGGTGAGACT ATAAATAAGC CTCGGGGATG GGTTTTTCCT AACAATGGAA ATGAGATAAA

GlyGluThr IleAsnLys ProArgGlyTrp ValPhePro AsnAsnGly AsnGluIleLys

1801 GATTGGAGTT CCCGATAGGG TAAGTTACCG TCAATTTGTA TCAGTTGATA GTGAAACTGG

IleGlyVal ProAspArg ValSerTyrArg GlnPheVal SerValAsp SerGluThrGly

1861 AATGGTGCGG GGACTCTGTA TTGATGTGTT TGTCGCTGCA ATAAACTTGT TAGCATATCC

MetValArg GlyLeuCys IleAspValPhe ValAlaAla IleAsnLeu LeuAlaTyrPro

1921 AGTTCCGTAT AGGTTTGTAC CTTTTGGGAA CAACAGGGAG AATCCAAGCT ATTCGGAGCT

ValProTyr ArgPheVal ProPheGlyAsn AsnArgGlu AsnProSer TyrSerGluLeu

1981 TATCAATAAAATTATAACAG ATGACTTTGA TGCTGTGGTA GGCGATGTAA CTATCATCAC

IleAsnLys IleIleThr AspAspPheAsp AlaValVal GlyAspVal ThrIleIleThr

.....................................

2141 AAATCGAACA AAGGTTGTTG ATTTCACTCA GCCATATGTG TCGTCTGGGC TTGTGGTCCT

AsnArgThr LysValVal AspPheThrGln ProTyrVal SerSerGly LeuValValLeu

..................................................................

2201 TACCTCTGTT AAGAGGCAGA ACTCGGGTGG ATGGGCCTTT CTGCAGCCAT TCACGATCAA

ThrSerVal LysArgGln AsnSerGlyGly TrpAlaPhe LeuGlnPro PheThrIleLys

.......

2261 GATGTGGACC GTCACTGGAC TGTTCTTTCT TATCATAGGG ACAGTAGTTT GGATGCTTGA

MetTrpThr ValThrGly LeuPhePheLeu IleIleGly ThrValVal TrpMetLeuGlu

2321 ACATAGAATC AATGATGAAT TCCGTGGCCC TCCTGCGAAA CAGCTTATTA CTGTGTTCTG

HisArgIle AsnAspGlu PheArgGlyPro Pro AlaLys GlnLeuIle ThrValPheTrp

2381 GTTCAGTTTC TCAACTCTGT TTTTCGCACA CAGAGAGGAC ACCAGGAGCA CTCTCGGCCG

PheSerPhe SerThrLeu PhePheAlaHis ArgGluAsp ThrArgSer ThrLeuGlyArg

2441 CTTCGTGATC ATCATATGGC TGTTCGTCGT TCTGATCATC CAGTCGAGCT ACACTGCCAG

PheValIle IleIleTrp LeuPheValVal LeuIleIle GlnSerSer TyrThrAlaSer

2501 CCTGACCTCC ATACTCACCG TGCAGCAGCT CACGTCGCCG ATCACCGGGA TCGACAGCTT

LeuThrSer IleLeuThr ValGlnGlnLeu ThrSerPro IleThrGly IleAspSerLeu

2561 GATCACCAGC GACGTTCCCA TCGGGTTTCA GGTCGGGTCC TTCGCGGAGA ACTACCTCGC

IleThrSer AspValPro IleGlyPheGln ValGlySer PheAlaGlu AsnTyrLeuAla

2621 CCAGGAGCTC GGCGTTGCCC ACTCGAGGCT TAAGGCGCTC GGCTCACCAG AGGAGTACAA

GlnGluLeu GlyValAla HisSerArgLeu LysAlaLeu GlySerPro GluGluTyrLys

2681 GAAGGCACTT GACCTTGGCC CCAGCAAAGG AGGCGTTGCG GCCATCGTCG ACGAGCGCCC

LysAlaLeu AspLeuGly ProSerLysGly GlyValAla AlaIleVal AspGluArgPro

..................................................................

2741 GTACATTGAG CTCTTCTTGT ATCAGAACCC TAAGTTCGCC GTCGTGGGCT CCGAGTTCAC

TyrIleGlu LeuPheLeu TyrGlnAsnPro LysPheAla ValValGly SerGluPheThr

......

2801 CAAGAGCGGC TGGGGCTTCG CGTTCCCGAG GGACTCGCCG CTGTCAGTGG ACCTGTCGAC

LysSerGly TrpGlyPhe AlaPheProArg AspSerPro LeuSerVal AspLeuSerThr

..................................................................

2861 GGCGATCCTG GAGCTGTCGG AGAACGGCGA CCTGCAGAGG ATCCACGACA AGTGGCTGGC

AlaIleLeu GluLeuSer GluAsnGlyAsp LeuGlnArg IleHisAsp LysTrpLeuAla

...............................................................

2921 GAGCGACATG TCGTCCATGT CGCAGGCCAG CGAGCTGGAT CAGGATCCGG ACCGGCTGGA

SerAspMet SerSerMet SerGlnAlaSer GluLeuAsp GlnAspPro AspArgLeuAsp

2981 CGTGTACAGC TTCTCGGCGC TGTTCCTCAT CTGCGGCCTC GCCTGCATCT TCGCCCTCGC

ValTyrSer PheSerAla LeuPheLeuIle CysGlyLeu AlaCysIle PheAlaLeuAla

3041 CATACACGCC TGCAACCTCT TCTACCAGTA CTCCCGCCAC GCCGCGGAGG AGGACCCCGC

IleHisAla CysAsnLeu PheTyrGlnTyr SerArgHis AlaAlaGlu GluAspProAla

3101 TGCGCTGCAG CCGTCCGCCA GCGACGGCAG CCGCTCCCTC TCCCGGCGCA GCAAGCTCCA

AlaLeuGln ProSerAla SerAspGlySer ArgSerLeu SerArgArg SerLysLeuGln

3161 GTCCTTCCTG TCCTTCGCCG ACCGCCGGGA AGCCGACATC CGGAGGGCGG CCAAGGAGAA

SerPheLeu SerPheAla AspArgArgGlu AlaAspIle ArgArgAla AlaLysGluLys

3221 GGCGTCTGGT CTGGGCGGCA GCGGAGGGTC CATGAGCGGC GTCAGCTTCA CGTCAAGCGG

AlaSerGly LeuGlyGly SerGlyGlySer MetSerGly ValSerPhe Thr SerSerGly

3281 CAGCGGCAGC ACCACCGCTT CATGCTAAAG CCTTGATAAT TAGTTAATTT TCAGGTTAAT

SerGlySer ThrThrAla SerCys

3341 TACTTTACCT CTCCTTGTGC TGCAGAATTG TAGAGATACG TAAGCACATT GGAACTTTTG

3401 CTGCGCTCCG GCGCTTACTG AAACACTAGT ATAGCAATAT ACTGAAACAC ATTGGAGTAA

3461 CATTTTGATC GACTAAAACG GCACGACCTA CTATGATCASEQ ID NO：2

1 MKFIFYLFSI FCCLCSCAQS QNISGRPDAV RIGAQFARNS TIGRVAAVAV LAAVNDINND

61 SNILPGTKLD LHMHDSSCNR FLGIVQALQF MEKDTVAIIG PLSSTTAHVL SHLANELHVP

121 LMSFSATDPT LSSLEYPFFV RTTVSDQFQM TAVADLVEYY GWKQVTTIFV DNDYGRNAIS

181 SLGDELSKRR SKILYKAPFR PGASNNEIAD VLIKVAMMES RVIILHANPD SGLVVFQQAL

241 KLGMVSNGYA WIATDWLTSY LDPSVHLDIG LLSTMQGVLT LRHHTENTRR KSMLSSKWSE

301 LLKEDSGHSR FLLSTYGLYA YDTVWMLAHA LDAFFNSGGN ISFSPDPKLN EISGRGLNLE

361 ALSVFDGGQL LLEKIHQVDF LGATGPVKFD SGGNLIQPAY DIVSIIGSGL RTVGYWSNYS

421 GLSVISPETL YKKPANRTRE TQKLHDVIWP GETINKPRGW VFPNNGNEIK IGVPDRVSYR

481 QFVSVDSETG MVRGLCIDVF VAAINLLAYP VPYRFVPFGN NRENPSYSEL INKIITDDFD

541 AVVGDVTIIT NRTKVVDFTQ PYVSSGLVVL TSVKRQNSGG WAFLQPFTIK MWTVTGLFFL

601 IIGTVVWMLE HRINDEFRGP PAKQLITVFW FSFSTLFFAH REDTRSTLGR FVIIIWLFVV

661 LIIQSSYTAS LTSILTVQQL TSPITGIDSL ITSDVPIGFQ VGSFAENYLA QELGVAHSRL

721 KALGSPEEYK KALDLGPSKG GVAAIVDERP YIELFLYQNP KFAVVGSEFT KSGWGFAFPR

781 DSPLSVDLST AILELSENGD LQRIHDKWLA SDMSSMSQAS ELDQDPDRLD VYSFSALFLI

841 CGLACIFALA IHACNLFYQY SRHAAEEDPA ALQPSASDGS RSLSRRSKLQ SFLSFADRRE

901 ADIRRAAKEK ASGLGGSGGS MSGVSFTSSG SGSTTASC

Claims

1、一种从水稻中分离出来的蛋白质，其特征在于：它包含由SEQ ID NO：2所示氨基酸序列。

2、根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质具有与SEQID NO：2所示氨基酸序列至少60％的同源性。

3、一种从水稻中分离出来的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质包含编码具有与SEQ ID NO：1中的核心结构域至少有60％相似性的氨基酸序列。

4、一种从水稻中分离出来的DNA分子，其特征在于：所述DNA包含选自下组中的一组：

(a)、该序列包含SEQ ID NO：1共3399个碱基的核酸序列；

(b)、该序列包含如权利要求2所述氨基酸系列的核酸序列；或

(c)、该序列包含如权利要求3所述氨基酸系列的核酸序列。

5、一种转基因植物细胞，其特征在于：所述细胞中包含如权利要求4所述的DNA分子。

6、一种生产转基因植物的方法，其特征在于：将带有如权利要求4所述的外源基因的载体转移进植物体内，并进行培育，表现为植物与野生型植物生长发育相比发生了变化；或者是植物的根与野生型植物生长发育相比发生了变化。

7、根据权利要求6所述的生产转基因植物的方法，其特征在于：所述植物为水稻。