CN1513463A

CN1513463A - 知母皂苷aiii作为制备治疗ⅱ型糖尿病药物的应用

Info

Publication number: CN1513463A
Application number: CNA021601518A
Authority: CN
Inventors: 黄成钢; 王新亮; 张振秋; 张亮; 施松
Original assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Current assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date: 2002-12-31
Filing date: 2002-12-31
Publication date: 2004-07-21
Anticipated expiration: 2022-12-31
Also published as: CN1265797C

Abstract

本发明涉及从中药知母中提取分离的有效成分知母皂苷A_III，经药理试验证明可降低血糖和治疗II型糖尿病，可在制备降血糖和治疗II型糖尿病的药物中应用。

Description

知母皂苷AIII作为制备治疗II型糖尿病药物的应用

技术领域

本发明涉及从中药知母中提取分离的有效成分经药理试验证明对II型糖尿病治疗有效，更具体指从中药知母中提取分离的有效成分知母皂苷A_III，它可在制备治疗II型糖尿病药物中应用。

背景技术

糖尿病是由于人体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的一种临床常见病，血中葡萄糖浓度升高，进而糖大量从尿中排出，并出现多饮、多尿、多食、消瘦、头晕、乏力等症状。进一步发展则引起全身各种严重的急、慢性并发症，威胁身体健康。其中I型糖尿病患者完全失去产生胰岛素的功能，依赖胰岛素治疗且需终身使用；II型糖尿病患者体内胰岛素处于相对缺乏状态，不必完全依赖胰岛素而可以用其它药物治疗。在糖尿病患者中，II型糖尿病占了大多数。糖尿病是现代社会中的常见病、高发病，严重威胁人类的健康和生命。

目前西医治疗糖尿病的主要方法为胰岛素治疗和口服磺脲类、双胍类等降血糖药物，但胰岛素治疗价格昂贵，而其它类型药物或疗效有限，或毒副作用明显。

近年来，大量研究表明，中药在II型糖尿病的临床治疗中显示出很大优势，但现有中成药大多有效成分不清，作用机理不明，剂型落后，急待开发出有效成分和作用机理清楚、质量稳定可控、剂型先进、服用携带方便的中药制剂。

中药知母清热泻火，生津润燥，主要具有抗菌、抗病毒、解热、降血糖等作用，但未见其治疗II型糖尿病的有效部位和有效成分的报道。知母皂苷A_III(萨尔萨皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(→2)-β-D-吡喃半乳糖苷)单体成分的药理作用也未见报道。

发明内容

本发明目的是克服常规中药存在的不足之处，采用化学方法从中药知母中分离出有效成分——知母皂苷A_III，经药理试验，使该化合物在制备治疗II型糖尿病的药物中应用。

本发明采用中药知母药材用乙醇回流提取3次，将滤液减压回收，制成知母浸膏，再以少量水溶解，用水饱和正丁醇萃取，正丁醇层用甲醇拌样上硅胶柱，用正丁醇-氯仿(1∶1)洗脱，分离得到纯化合物知母皂苷A_III。结构式如下：

它的分子式为C₃₉H₆₄O₁₃，分子量为740，化学名为萨尔萨皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷。

本发明采用上述方法提取得到的知母皂苷A_III首先进行常规的药效试验。

雄性KKAy小鼠(自发型糖尿病小鼠，II型糖尿病的良好动物模型)测定随机和空腹血糖，根据测定结果将小鼠分为3组。

1、空白对照组：正常喂食；

2、阳性对照组：口服给予罗格列酮(ROS，葛兰素史克(天津)公司，批号：02060041。罗格列酮是噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，剂量小，疗效显著，可增加细胞能耗和改善葡萄糖代谢，是目前国内外临床使用较广泛的降血糖药)；

3、给药组：口服给予本发明药物(知母皂苷A_III，HHG-001)。

每日一次，连续给药23天，在给药前、给药13天、给药23天时采用葡萄糖测定试剂盒测定KKAy小鼠的空腹血糖。空腹血糖的测定主要是用来衡量基础血糖水平，空腹血糖高，说明该小鼠血糖高，是糖尿病的症状之一。结果表明，本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠的空腹血糖。

给药结束后进行葡萄糖耐量试验，测定给糖前和给糖后的血糖值。葡萄糖耐量是衡量糖代谢的主要指标之一。正常小鼠进食后一定时间内血糖可以恢复到基础值，而患病鼠在相同时间内血糖不能恢复到基础值。结果表明，本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠给糖前和给糖后的血糖值，明显改善其糖负荷。

在给药结束时进行胰岛素耐量试验。胰岛素耐量也是衡量糖代谢的指标。患病鼠一般具有胰岛素抗性，即胰岛素正常生理作用的效应不足，表现为外周组织尤其是肌肉、脂肪组织对葡萄糖的利用障碍，是促使高血压、高血脂等并发症发生发展的重要原因。若药物有效，患病鼠给药后对胰岛素的敏感程度提高，从而促进血糖下降。结果显示，本发明药物可提高KKAy糖尿病小鼠对胰岛素的敏感程度，促进血糖下降。

给药前后分别测定小鼠体重。正常情况下，给药后，小鼠体重不应出现明显变化，若体重下降，说明小鼠体质下降；而体重上升，即使小鼠血糖下降，也说明该药有增加体重的副作用。实验结果表明，本发明药物对KKAy糖尿病小鼠的体重无明显影响，而阳性药ROS使小鼠体重明显增加。

在给药结束时测定小鼠血脂。糖尿病患者在高血糖的同时往往伴有高血脂。测定血脂主要是观察该药在降血糖的同时是否还有降血脂的作用。实验结果显示，本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠的血脂，阳性药ROS无此效果。

本发明研究证明，知母皂苷A_III具有良好的降低空腹血糖和血脂，提高葡萄糖耐量和对胰岛素的敏感程度，同时不影响患者体重的功效。

空腹血糖、血脂、葡萄糖耐量、胰岛素耐量是衡量II型糖尿病的重要指标。空腹血糖的测定主要是用来衡量基础血糖水平，空腹血糖高，说明患者基础血糖高，这是糖尿病的症状之一，此外，糖尿病患者在出现高血糖的同时往往伴有高血脂。葡萄糖耐量是衡量糖代谢的指标之一，健康者的血糖在进食后一定时间内可以恢复到基础值，而糖尿病患者在相同时间内血糖不能恢复到基础值。胰岛素耐量也是衡量糖代谢的指标。糖尿病患者一般具有胰岛素抗性，即胰岛素执行其正常生物作用的效应不足，表现为外周组织尢其是肌肉、脂肪组织对葡萄糖的利用障碍，这是促使高血压、高血脂等并发症发生发展的重要原因。通过药理试验及其结果说明知母皂苷A_III可作为制备治疗糖尿病药物中应用。

附图说明

图1为知母皂苷对KKAy糖尿病小鼠葡萄糖耐量的影响试验结果图，其中—◆—表示空白对照组，—■—表示阳性对照组，—△—表示药物试验组，与空白对照组相比，^**P＜0.01

图2为知母皂苷对KKAy糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响试验结果图，其中—◆—表示空白对照组，—■—表示阳性对照组，—△—表示药物试验组，与空白对照组相比，^**P＜0.01

有益效果：

1、本发明发掘了已知化合物知母皂苷在作为制备治疗II型糖尿病药物中的新用途，开拓了新的应用领域。

2、本发明的知母皂苷不仅有显著的降血糖、血脂，提高葡萄糖耐量及胰岛素耐量的药理功效，且对体重无明显影响，副作用小。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的阐述，但不对其有任何限制。

实施例1本发明药物对KKAy糖尿病小鼠空腹血糖的影响试验

15只雄性KKAy小鼠饲养于清洁级动物房的层流柜中，适应2周后测定随机和空腹血糖，根据测定结果将15只小鼠分为3组，每组5只，分别正常喂食(空白对照组)，口服给予4mg/kg罗格列酮(阳性对照组，ROS)，和400mg/kg本发明药物(给药组)。每日一次，连续给药23天，在给药前、给药13天、给药23天时采用葡萄糖测定试剂盒测定小鼠的空腹血糖。空腹血糖的测定主要是用来衡量基础血糖水平，空腹血糖高，说明该小鼠血糖高，是糖尿病的症状之一。

结果：本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠的空腹血糖，见表1。

表1本发明药物对KKAy糖尿病小鼠空腹血糖的影响试验

空腹血糖

组别

给药前给药13天给药23天

空白对照组 16.58±4.99 18.66±3.72 17.88±1.75

ROS组 16.58±6.33 11.24±2.22^** 12.06±4.89^*

HHG-001组 17±5.91 12.5±5.52^* 11.46±3.66^**

^*P＜0.05^**P＜0.01与空白对照相比

实施例2本发明药物对KKAy糖尿病小鼠葡萄糖耐量的影响试验

分组及试验方法同实施例1，给药结束后进行葡萄糖耐量试验。口服给予2.5g/kg葡萄糖，测定空白对照组和给药组给糖前后的血糖值。葡萄糖耐量是衡量糖代谢的指标之一。正常小鼠进食后一定时间内血糖可以恢复到基础值，而患病鼠在相同时间内血糖不能恢复到基础值。

结果：本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠给糖前和给糖后的血糖值，明显改善其糖负荷，见图1。

实施例3本发明药物对KKAy糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响试验

分组及试验方法同实施例1，在给药结束时进行胰岛素耐量试验，分别测定皮下注射胰岛素前后的血糖值。胰岛素耐量也是衡量糖代谢的指标。患病鼠一般具有胰岛素抗性，若药物有效，患病鼠给药后对胰岛素的敏感程度提高，从而促进血糖下降。

结果：本发明药物可提高KKAy糖尿病小鼠对胰岛素的敏感程度，促进血糖下降，见图2。

实施例4本发明药物对KKAy糖尿病小鼠体重的影响试验

分组及试验方法同实施例1，在给药前后分别测定小鼠体重。正常情况下，给药后，小鼠体重不应出现明显变化，若体重下降，说明小鼠体质下降，而体重上升，即使小鼠血糖下降，也说明该药有增加体重的副作用。

结果：本发明药物对KKAy糖尿病小鼠的体重无明显影响，而阳性药ROS使小鼠体重明显增加，见表2。

表2本发明药物对KKAy糖尿病小鼠体重的影响试验

体重

组别

给药前给药后增加值

空白对照组 42.2±3.16 43.8±2.68 1.8±0.84

ROS组 41.0±2.35 48.4±4.28^* 7.4±3.36

HHG-001组 40.6±3.44 40.4±3.78 -0.2±1.64

^*P＜0.05与给药前相比

实施例5本发明药物对KKAy糖尿病小鼠血脂的影响试验

分组及试验方法同实施例1，在给药结束时测定小鼠血脂。测试血脂主要是观察该药在降血糖的同时是否还有降血脂的作用。

结果：本发明药物可显著降低KKAy糖尿病小鼠的血脂，阳性药ROS无此效果，见表3。

表3本发明药物对KKAy糖尿病小鼠血脂的影响试验

组别血脂

空白对照组 192.39±33.41

ROS组 214.98±69.85

HHG-001组 120.16±45.97^*

^*P＜0.05与空白对照相比

Claims

1、一种从知母中提取分离的有效成分具有如下结构的知母皂苷A_III，其特征在于它在制备降血糖和治疗II型糖尿病的药物中应用。

2、根据权利要求1所述的知母皂苷A_III，其特征在于在降血糖、血脂、提高葡萄糖耐量及胰岛素耐量方面的应用。