CN1488639A - 从组织样品中分离rna的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明一种从组织样品中分离RNA的方法，所述的方法包括如下步骤：首先进行脱蜡，脱蜡的方法采用二甲苯洗涤石蜡包埋样品，然后利用低级醇的水溶液进行再水化和均质化，所述的低级醇优选的为乙醇，再水化法方法是用浓度逐渐降低的乙醇水溶液逐步洗涤，样品与醇溶液充分混合并且离心，然后再均质化，样品在硫氰酸胍离液剂的存在下进行均质化，均质化的样品加热到90－100℃，然后从溶液中回收RNA，使用的方法采用已有技术中的苯酚氯仿抽提法，接着RNA可以采用已有技术中的抽提、电泳、层析、沉淀或其他适用的技术进一步纯化。
Description
技术领域：
本发明涉及生化领域，特别涉及生物组织样品中RNA、DNA和蛋白质的纯化领域，具体来说是一种从组织样品中分离RNA的方法。
背景技术：
现有技术中，大多数病理样品往往不是制备成冰冻样品形态，更常规的是福尔马林固定、石蜡包埋的，以便于进行组织学分析和档案存储。在这种固定、包埋的样品中，可以使用免疫组织化学染色来测定蛋白表达水平，从而半定量地、间接地测定基因表达水平。由于石蜡包埋的样品是广泛使用的，因此需要一种快速可靠的方法来从样品中分离核酸，尤其是RNA。目前已存在许多从生物样品中纯化RNA的技术，但没有一种可靠地从福尔马林固定的、石蜡包埋的组织样品中分离出RNA的方法。
发明内容：
本发明所要解决的技术问题是：由于现有技术中，没有一种可靠地从福尔马林固定的、石蜡包埋的组织样品中分离出RNA的方法，本发明为解决已有技术中的上述技术问题，所采用的技术方案是提供一种从组织样品中分离RNA的方法，所述的方法包括如下步骤：首先进行脱蜡，脱蜡的方法采用二甲苯洗涤石蜡包埋样品，然后利用低级醇的水溶液进行再水化和均质化，所述的低级醇优选的为乙醇，再水化法方法是用浓度逐渐降低的乙醇水溶液逐步洗涤，样品与醇溶液充分混合并且离心，然后再均质化，样品在硫氰酸胍离液剂的存在下进行均质化，均质化的样品加热到90-100℃，然后从溶液中回收RNA，使用的方法采用已有技术中的苯酚氯仿抽提法，接着RNA可以采用已有技术中的抽提、电泳、层析、沉淀或其他适用的技术进一步纯化。
本发明的方法所分离获得的RNA在分子生物学上可以有许多的应用，包括使用随机引物反转录以制备cDNA文库。通过反转录、多聚酶链反应(RT-PCR)扩增。
本发明和已有技术相对照，采用本发明获得RNA其活性更高，而且方便，简单实用。
具体实施方式：
本发明一种从组织样品中分离RNA的方法，所述的方法包括如下步骤：首先进行脱蜡，脱蜡的方法采用二甲苯洗涤石蜡包埋样品，然后利用低级醇的水溶液进行再水化和均质化，所述的低级醇优选的为乙醇，再水化法方法是用浓度逐渐降低的乙醇水溶液逐步洗涤，样品与醇溶液充分混合并且离心，然后再均质化，样品在硫氰酸胍离液剂的存在下进行均质化，均质化的样品加热到90-100℃，然后从溶液中回收RNA，使用的方法采用已有技术中的苯酚氯仿抽提法，接着RNA可以采用已有技术中的抽提、电泳、层析、沉淀或其他适用的技术进一步纯化。
Claims (2)
1.一种从组织样品中分离RNA的方法，其特征在于：所述的方法包括如下步骤：首先进行脱蜡，脱蜡的方法采用二甲苯洗涤石蜡包埋样品，然后利用低级醇的水溶液进行再水化和均质化，再水化法方法是用浓度逐渐降低的乙醇水溶液逐步洗涤，样品与醇溶液充分混合并且离心，然后再均质化，样品在硫氰酸胍离液剂的存在下进行均质化，均质化的样品加热到90-100℃，然后从溶液中回收RNA，使用的方法采用已有技术中的苯酚氯仿抽提法，接着RNA可以采用已有技术中的抽提、电泳、层析、沉淀或其他适用的技术进一步纯化。
2.如权利要求1所述的一种从组织样品中分离RNA的方法，其特征在于：所述的低级醇为乙醇。
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Family Applications (1)
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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2002
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