CN1454664A - 愈肝胶囊 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种愈肝胶囊口服药,是根据中医、民族医专家多年的临床经验组成了一枝蒿、贯叶金丝桃组成的治疗病毒性肝炎及肝病的口服药。该胶囊采用分别对一枝蒿和贯叶金丝桃进行粉碎处理、提取、过滤、用喷雾干燥法制备浸膏,将一枝蒿浸膏进行脱色,洗脱、浓缩后与贯叶金丝桃浸膏合并灌装胶囊即可;该药经体内外抗病毒试验,其结果表明:在治疗病毒性肝炎及肝病和艾滋病等方面具重要的利用前景。愈肝胶囊在临床上用于治疗病毒性肝炎及肝病效果明显。
Description
技术领域
本发明涉及一种愈肝胶囊口服药,用于治疗病毒性肝炎及肝病的口服药
背景技术
目前国内外病毒性疾病的发病率逐年增加,并出现艾滋病等新的免疫缺陷病。用于治疗这类疾病的药物品种大体分为两类类:1.抗病毒药,2.免疫调节药,但都有其自身的问题,并且达不到治愈目的。因此研制出抗病毒效果好、副作用小的治疗药物,使医药界一个迫切的需要。
病毒性肝炎是一种世界性的常见病,我国属流行“重灾区”。据预测我国感染乙型肝炎者有1亿人以上,由乙型肝炎引起的肝功能不止常患者约3000万人,此外绝大部分肝癌患者有慢性肝炎病史,各种病毒性肝炎正严重的威胁着国人的健康,故慢性肝炎的治疗成为一个迫切需解决的重大问题。目前国内外用于病毒性肝炎及肝病治疗的药物品种大体分为三类:(1)抗病毒药,主要有干扰素和几种核苷类似物,此类药物在停药后约6个月至1年内大部分病人会复发且药费昂贵;(2)免疫调节药,如转移因子、白细胞介素—2、胸腺肽等,此类药物治疗慢性肝炎疗效尚待肯定,药费昂贵且有副作用。(3)改善肝功能药,又称保肝药或抗肝细胞损伤药,如甘草甜素、联苯双酯、水飞蓟素等,复方甘草甜素制剂。
发明内容
本发明目的在于,根据国内外文献资料和中医、民族医专家多年的临床经验组成了以一枝蒿、贯叶金丝桃组成的治疗病毒性肝炎及肝病的复方制剂愈肝胶囊。该药采用分别对一枝蒿和贯叶金丝桃进行粉碎处理、提取、过滤、用喷雾干燥法制备浸膏,将一枝蒿浸膏进行脱色,洗脱浓缩后与贯叶金丝桃浸膏合并灌装胶囊即可;该药经体内外抗病毒试验,其结果表明:一枝蒿AR在5ug/ml对HBV DNA的平均抑制率为57.0±22.1%,其IC50为3.4±0.5ug/ml,阳性药1μM的拉米夫定(3TC)对HBV DNA的抑制率为67.2±16.4%。同时贯叶金丝桃的活性成分在治疗抑郁症、病毒性肝炎及肝病和艾滋病以及抗癌等方面具重要的利用前景。
本发明所述的愈肝胶囊,以一枝蒿、贯叶金丝桃组成,其中原料配比为:一枝蒿为6-18克、贯叶金丝桃3-12克;将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;
将一枝蒿浸膏和贯叶金丝桃浸膏混合后即可灌装胶囊即可。
一种愈肝胶囊口服药的制备方法,按下列步骤进行:
a、一枝蒿6-18克,将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,温度为30~60℃,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
b、贯叶金丝桃有效部位的提取:贯叶金丝桃3-12克,将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;
c、将一枝蒿浸膏与贯叶金丝桃浸膏混合后灌装胶囊即可。
一种愈肝胶囊口服药作为制备治疗病毒性肝炎及肝病的应用,该胶囊是纯中药一枝蒿、贯叶金丝桃组成,其中原料配比为:一枝蒿为6-18克、贯叶金丝桃3-12克;将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;将一枝蒿浸膏和贯叶金丝桃浸膏混合后即可灌装胶囊即可;该药用于治疗病毒性肝炎及肝病的中药。
本发明所述的愈肝胶囊,大量临床资料表明,一枝蒿具有解毒、抗过敏、抗菌、抗病毒及保肝等功效。维吾尔医学临床用于肝炎、感冒、咽炎、扁桃体炎、眼炎的治疗。其中对肝炎和感冒的疗效更为显著。文献报道一枝蒿全草含有黄酮类、酮酸类、氨基酸类、甙类、多糖类、挥发油、多肽、生物碱等化合物,其中黄酮类含量为1.33%,其次是酮酸类。
贯叶金丝桃(HERBA HYPERICI PERFORAFI)为藤黄科植物贯叶金丝桃Hypericum peHoratum L.干燥的全草。夏季花盛开时,割取地上部分,晾干,切段,除去杂质。本品三级干热。功能与主治1软化寒湿,通经利尿。用于寒性肿痛,小便不通,肺不利,腰腿疼痛,外敷可治烧伤及关节炎等。
该药材分布于中国新疆、中亚、欧洲等地,而我区是主要产区,而且新疆干燥少雨,日照充足、气温波动大,处于日照长、辐射强烈、紫外线丰富、水气量低,加之日温差大,夜间温度低,植物呼吸作用低微,所耗能量极少,因而光合作用有效积累高,相应活性成份也高。
本发明所述的愈肝胶囊,该胶囊体内外抗病毒试验为:
摘要:愈肝胶囊是新疆维维吾尔医研究所研制的,为研究其抗乙型肝炎病毒的作用,本实验在乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌细胞系2.2.15细胞中,研究其对细胞的毒性和对HBV DNA分泌的抑制效果。两次试验表明:愈肝胶囊320ug/ml开适2倍稀释,加入细胞培养8天,对细胞半数中毒浓度TC50为14.1ug/ml,最大无毒浓度TC0为5ug/ml。最大无毒浓度5ug/ml对HBV DNA的抑制率为54.1±9.7%,其半数抑制浓度IC50为3.57±0.53ug/ml。
目的:为研究愈肝胶囊抗乙型肝炎病毒的作用,本实验用愈肝胶囊在乙型肝炎病毒转染的人肝癌细胞2.2.15细胞系培养中,检测其对乙型肝炎病毒HBV DNA的影响。材料和方法
一.药物:愈肝胶囊为棕褐色粉末。实验时用DMSO配成20mg母液4℃保存,使用时用2.2.15细胞培养液配成所需浓度。
二.2.2.15细胞:乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆转染人肝癌细胞(Hep G2)的2.2.15细胞系,美国Mount Sinal医学中心构建,我室引进后自行传代培养。细胞用含胎牛血清10%,3%谷氨酚胺1%,G418 380μg/ml,卡那霉素50U/ml的Eagle′s MEM培养液,在37℃5%CO2温箱中培养,大约一周传代一次。
三.试剂及仪器:放射性同位素α32P dCTP为亚辉生物医学工程公司,比活度:111TBq/nmol;探针标记用的缺日标记试剂盒购自Promerga公司。酶标仪:BIO-RAO 3550型;γ-计数仪为美国DPC公司产品。
四.实验方法:
1.药物对细胞毒性试验药物愈肝胶囊为棕盒色粉末,用DMSO配成20mg/ml母液,使用时用2.2.15细胞培养液配成所需浓度,然后用培养液对倍稀释从320ug/ml加至2.5ug/ml加入96孔细胞培养板,每浓度3孔,每4天换同浓度药液,设无药物细胞对照组。以观察细胞病变为指标,8天显微镜下观察细胞病变,完全破坏为4;75%为3;50%为2;25%为1;无病变为0。计算每浓度药液平均细胞病变程度和抑制%。按Reed&Muench法计算半数有毒浓度(TC50) 最大无毒浓度(TC0)
2.药物对HBV DNA的抑制试验
3、选择指数(SI):SI=TC50/IC50结果
1.愈肝胶囊在2.2.15细胞培养中的细胞毒性
为观察愈肝胶囊对乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌2.2.15细胞的毒性,在接种2.2.15细胞后24小时,加对倍稀释药液,实验自320ug/ml开始:320;160;80;40;20;10;5;2.5ug/ml,同时设正常细胞对照。4天换一次药液,维持8天,用显微镜观察细胞病变,按公式计算半数有毒浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0)见表1。TC50两批实验分另为14.1ug/ml,14.1ug/ml,平均半数有毒浓度(TC50)为14.1ug/ml,最大无毒浓度(TC0)为5ug/ml。
表1.愈肝胶囊,2,3在2.2.15细胞培养内的毒性实验 实验 不同药物浓度mg/ml细胞病变 TC50 TC0批次 方法 320 160 80 40 20 10 5 2.5 (ug/ml)1 CPE 4 4 4 4 1 1 0 0 14.1 5
4 4 4 4 1 1 0 0
4 4 4 4 1 1 0 0
破坏% 100 100 100 100 25 25 0 02 CPE 4 4 4 4 1 1 0 0 14.1 5
4 4 4 4 1 1 0 0
4 4 4 4 1 1 0 0
破坏% 100 100 100 100 25 25 0 0两批平均 14.1 5
2.愈肝胶囊在2.2.15细胞培养中对HBN DNA的抑制作用
愈肝胶囊5 ug/ml;2.5ug/ml;1.25ug/ml,加入2.2.15细胞中培养,第8天对HBV DNA的抑制率:愈肝胶囊最大浓度5ug/ml对HBV DNA的抑制率为54.1±9.7%,其半数抑制浓度IC50为3.57±0.53ug/ml。选择指数SI为3.9。表2.愈肝胶囊在2.2.15细胞中第8天对HBV DNA的抑制作用实验批次 药物浓度 A值(X±SD) HBV DNA
(ug/ml) 抑制% IC50(ug/ml)I 5 0.324±0.005** 44.4 4.10
2.5 0.462±0.036 20.8
1.25 0.464±0.073 20.4
3TC 1μM 0.200±0.019* 65.7
细胞对 0.583±0.061II 5 0.273±0.068 63.8 3.04
2.5 0.451±0.023 40.3
1.25 0.594±0.099 21.3
3TC 1μM 0.191±0.007 74.7
细胞对照5 0.755±0.136结果 3.55注:试验组与照组比较 **P<0.01,*P<0.05结论:
1、愈肝胶囊对2.2.15细胞培养的毒性:愈肝胶囊加入2.2.15细胞中培养8天,以细胞病变为指标,两批实验平均:半数中毒浓度TC50为14.1ug/ml,最大无毒浓度TC0为5ug/ml。
2、愈肝胶囊在2.2.15细胞培养内对HBV DNA的抑制作用:愈肝胶囊在2.2.15细胞中培养8天,最大无毒浓度5ug/ml对HBV DNA的抑制率为54.1±9.7%,阳性药1μM的拉米夫定(3TC)对HBV DNA的抑制率为70.2±4.5%。表3.愈肝胶囊对HBV DNA的抑制作用总结表细胞霉性(ug/ml) HBV DNA HBV DNATC50 TC0 IC5.0ug/ml SI14.1 5 3.57 3.9
具体实施方式
实施例1
a、一枝蒿6克,将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,温度为30℃,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50%,备用;
b、贯叶金丝桃有效部位的提取:贯叶金丝桃3克,将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类(包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素等)和黄酮类(包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁等)含量为50%;浸膏真空干燥备用;
c、将一枝蒿浸膏与贯叶金丝桃浸膏混合后灌装胶囊即可。
实施例2
a、一枝蒿10克,将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,温度为45℃,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为65%,备用;
b、贯叶金丝桃有效部位的提取:贯叶金丝桃8克,将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类(包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素等)和黄酮类(包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁等)含量为65%,浸膏真空干燥备用。
c、将一枝蒿浸膏与贯叶金丝桃浸膏混合后灌装胶囊即可。
实施例3
a、一枝蒿18克,将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,温度为60℃,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为80%,备用;
b、贯叶金丝桃有效部位的提取:贯叶金丝桃12克,将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类(包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素等)和黄酮类(包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁等)含量为80%,浸膏真空干燥备用;
c、将一枝蒿浸膏与贯叶金丝桃浸膏混合后灌装胶囊即可。
组方中各味药材及其成分均有抗病毒的研究报道,制剂组方符合维医理论。前期基础研究已经证明愈肝胶囊在临床上用于治疗病毒性肝炎及肝病等疾病效果明显。
Claims (3)
1.一种愈肝胶囊,其特征在于以一枝蒿、贯叶金丝桃组成,其中原料配比为:一枝蒿为6-18克、贯叶金丝桃3-12克;将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;
将一枝蒿浸膏和贯叶金丝桃浸膏混合后即可灌装胶囊即可。
2、一种愈肝胶囊口服药的制备方法,其特征在于按下列步骤进行:
a、一枝蒿6-18克,将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,温度为30~60℃,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
b、贯叶金丝桃有效部位的提取:贯叶金丝桃3-12克,将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;
c、将一枝蒿浸膏与贯叶金丝桃浸膏混合后灌装胶囊即可。
3、一种愈肝胶囊口服药作为制备治疗病毒性肝炎及肝病的应用,其特征在于该胶囊是纯中药一枝蒿、贯叶金丝桃组成,其中原料配比为:一枝蒿为6-18克、贯叶金丝桃3-12克;将一枝蒿全草粉碎,用乙醇回流提取,滤液减压回收乙醇至相对密度为1.20~1.25的清膏,喷雾干燥法制备浸膏粉,置索氏提取器中,加石油醚,脱脂至无色,弃取醚液,残渣加醋酸乙酯萃取,合并醋酸乙酯液,减压回收醋酸乙酯得油状物,加到硅胶柱中,用石油醚∶乙酸乙脂3∶1为洗脱剂洗脱,收集洗脱液,减压浓缩、真空干燥,其中一枝蒿有效部位总黄酮和酮酸类含量为50-80%,备用;
将贯叶金丝桃全草粉碎,用乙醇回流提取,得贯叶金丝桃浸膏,其中贯叶金丝桃有效部位苯并二蒽酮类和黄酮类,苯并二蒽酮类:包括金丝桃素、伪金丝桃素,异金丝桃素和它们的前体原金丝桃素;黄酮类:包括槲皮素、金丝桃甙、阿曼托黄素、芦丁,含量为50-80%;浸膏真空干燥备用;将一枝蒿浸膏和贯叶金丝桃浸膏混合后即可灌装胶囊即可;该药用于治疗病毒性肝炎及肝病的中药。
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