CN1400303A - 光合细菌制剂的制备方法 - Google Patents
光合细菌制剂的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1400303A CN1400303A CN 02135435 CN02135435A CN1400303A CN 1400303 A CN1400303 A CN 1400303A CN 02135435 CN02135435 CN 02135435 CN 02135435 A CN02135435 A CN 02135435A CN 1400303 A CN1400303 A CN 1400303A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- photosynthetic
- bacterium
- strain
- bacterium liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
本发明提供一种光合细菌制剂的制备方法，即：光合细菌与菌种培养液按容积比为(0.6～1)∶(1～1.4)的比例混合并搅拌，得混合液；混合液在温度为25～32℃、光照强度为1000～2500LX、PH为7～7.5的厌氧条件下并经定时搅拌，培养73～99小时；将培养出的菌液在光照强度低于50LX、敞开体系中，适时添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1600ppm以上，在温度为22～32℃、好氧充气条件下培养121～143小时，使菌液的活菌浓度达到2.8×109个/ml以上。光合细菌接种于菌种培养液中时经过搅拌，混合液在厌氧培养过程中经常处于流动状态，故在这两个过程中，混合液中菌体的遮光效应和贴壁性均相当轻微，从而使光合细菌制剂的菌体得率高、品质稳定。
Description
技术领域
本发明提供一种光合细菌制剂的制备方法。
技术背景
目前，光合细菌制剂的制备方法种类繁多、互不相同。其中，有代表性的一种制备方法为：在菌种培养液中接种30％以上的浑球红假单胞菌(Rhodopseudomonas Sphaeroides)P4株和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas Palustris)1号株的混合菌群，接种后的培养液在温度为26～32℃、光照强度为3000～5000LX、PH为6～8的厌氧条件下培养48～72小时，然后将培养出的菌液在敞开体系中、自然光照下，根据菌液中的碳源残存量适时添加一次以上的碳源，在温度为20～35℃、好氧充气条件下培养72～120小时后，收集菌液分装，制成液体微生物混合制剂。众所周知，菌液中的菌体存在遮光效应和贴壁性。因上述制备方法中混合菌群接种于菌种培养液中时未经过搅拌，且接种后培养液的厌氧培养过程为一种静置培养方式，换言之，所述培养液在厌氧培养过程中始终处于静止、不流动状态，故在接种及厌氧培养过程中，菌体的遮光效应和贴壁性相当显著，从而使该方法制备的液体微生物混合制剂，菌体得率低、品质不稳定。
发明内容
本发明的目的在于提供一种菌体得率高、品质稳定的光合细菌制剂的制备方法。
本发明所提供的光合细菌制剂的制备方法依次包括以下工艺步骤：光合细菌与菌种培养液按容积比为(0.6～1)∶(1～1.4)的比例混合并搅拌，得混合液；混合液在温度为25～32℃、光照强度为1000～2500LX、PH为7～7.5的厌氧条件下并经定时搅拌，培养73～99小时：将培养出的菌液在光照强度低于50LX、敞开体系中，适时添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1600ppm以上，在温度为22～32℃、好氧充气条件下培养121～143小时，当菌液的活菌浓度达到2.8×109个/ml以上时，制成光合细菌制剂。
所述光合细菌至少为CGMCC № 0192混合菌群中任意一属的菌株，所述混合菌群中含有9株光合细菌，分别为：红螺菌属(Rhodospirillium)1株，红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)2株，红细菌属(Rodobacter)2株，着色菌属(Chromatium)1株，绿杆菌属(Chlorobium)1株，红硫细菌2株。在公开号为CN1108944A、CN1101498A的两份中国发明专利申请公开说明书中对上述混合菌群的菌种保藏情况进行了披露，上述两项专利申请的申请人—太原康强生物技术开发公司已于1993年2月 22日将上述混合菌群在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)进行了保藏，保藏编号为№0192。
所述菌种培养液的组成为：乙酸钠4～4.8kg，乙酸铵0.4～0.48kg，磷酸二氢钾0.5～1kg，氯化铵1～1.5kg，氯化镁0.4～0.8kg，氯化钙0.2～0.4kg，三氯化铁0.01～0.02kg，氯化钠0.6～1.2kg，酵母浸膏0.6～0.8kg，生物素2～4kg，维生素B1 0.02kg，水1000升。
所述光合细菌与菌种培养液混合时的搅拌时间为20～30分钟。
所述混合液定时搅拌的方式为：每隔20～30分钟搅拌一次，每次搅拌的时间为5～7分钟。
每次在每升菌液中按乙酸钠与丙酸钠的重量为10∶2的比例添加碳源。
所述好氧充气的条件为：每升菌液中每分钟的充气量为0.04～0.06升。
以上所说的敞开体系是指敞口的培养容器。
以上所说的菌种培养液，其组成成分之一的水采用净清河水、井水、自来水中任意一种均可，但净清河水、井水中诸如悬浮物含量、BOD值、大肠杆菌数等各项指标，均需符合出厂自来水的标准。
采用以上的方法后，因光合细菌与菌种培养液混合并搅拌而得混合液，即光合细菌接种于菌种培养液中时经过搅拌，故在厌氧培养过程前，混合液中菌体的遮光效应和贴壁性相当轻微；又因所述混合液是在厌氧条件下并经定时搅拌进行培养，这样混合液在厌氧培养过程中经常处于流动状态，故在厌氧培养过程中，混合液中菌体的遮光效应和贴壁性也相当轻微。从而使本发明所述方法制备的光合细菌制剂，菌体得率高、品质稳定。
具体实施方式
下面通过实施例更好地说明本发明，但它们不是对本发明的限定。
实施例一：
光合细菌采用CGMCC №0192混合菌群。
配制菌种培养液，其组成为：乙酸钠4.8kg，乙酸铵0.48kg，磷酸二氢钾1kg，氯化铵1.5kg，氯化镁0.8kg，氯化钙0.4kg，三氯化铁0.02kg，氯化钠1.2kg，酵母浸膏0.8kg，生物素4kg，维生素B10.002kg，净清河水1000升。
将上述的光合细菌与菌种培养液按容积比为0.6∶1.4的比例混合并置于洁净的带盖搅拌桶中，搅拌30分钟得混合液，带盖搅拌桶可外购(以下实施例同此)；混合液在温度为25℃、光照强度为1000LX、PH为7的厌氧条件(即盖紧所述搅拌桶的桶盖，以下实施例同此)下并经定时搅拌，培养73小时，所述混合液定时搅拌的方式为：每隔20分钟搅拌一次，每次搅拌的时间为7分钟(需要说明的是，每次搅拌的时间-7分钟是计算在每次间隔的时间-20分钟之内的，以下实施例同此)：将培养出的菌液在光照强度为20LX、敞开体系(即掀开所述搅拌桶的桶盖，以下实施例同此)中，每次在每升菌液中按乙酸钠与丙酸钠的重量为10∶2的比例添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1900ppm，在温度为22℃、好氧充气(每升菌液中每分钟的充气量为0.06升)条件下培养121小时，当菌液的活菌浓度达到5×109个/ml时，制成光合细菌制剂。
实施例二：
光合细菌采用CGMCC №0192混合菌群中红螺菌属(Rhodospirillium)的1株菌株、红细菌属(Rodobacter)的2株菌株。
配制菌种培养液，其组成为：乙酸钠4.4kg，乙酸铵0.44kg，磷酸二氢钾0.8kg，氯化铵1.3kg，氯化镁0.6kg，氯化钙0.3kg，三氯化铁0.015kg，氯化钠0.9kg，酵母浸膏0.7kg，生物素3kg，维生素B10.02kg，自来水1000升。
将上述的光合细菌与菌种培养液按容积比为0.8∶1.2的比例混合并置于洁净的带盖搅拌桶中，搅拌25分钟得混合液；混合液在温度为28℃、光照强度为1750LX、PH为7.3的厌氧条件下并经定时搅拌，培养86小时15分钟，所述混合液定时搅拌的方式为：每隔25分钟搅拌一次，每次搅拌的时间为6分钟；将培养出的菌液在光照强度为30LX、敞开体系中，每次在每升菌液中按乙酸钠与丙酸钠的重量为10∶2的比例添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1800ppm，在温度为27℃、好氧克气(每升菌液中每分钟的充气量为0.05升)条件下培养132小时，当菌液的活菌浓度达到3.5×109个/ml时，制成光合细菌制剂。
实施例三：
光合细菌采用CGMCC №0192混合菌群中红螺菌属(Rhodospirillium)的1株菌株。
配制菌种培养液，其组成为：乙酸钠4kg，乙酸铵0.4kg，磷酸二氯钾0.5kg，氯化铵1kg，氯化镁0.4kg，氯化钙0.2kg，三氯化铁0.01kg，氯化钠0.6kg，酵母浸膏0.6kg，生物素2kg，维生素B10.02kg，井水1000升。
将上述的光合细菌与菌种培养液按容积比为1∶1的比例混合并置于洁净的带盖搅拌桶中，搅拌20分钟得混合液；混合液在温度为32℃、光照强度为2500LX、PH为7.5的厌氧条件下并经定时搅拌，培养99小时，所述混合液定时搅拌的方式为：每隔30分钟搅拌一次，每次搅拌的时间为5分钟；将培养出的菌液在光照强度为40LX、敞开体系中，每次在每升菌液中按乙酸钠与丙酸钠的重量为10∶2的比例添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1700ppm，在温度为32℃、好氧充气(每升菌液中每分钟的充气量为0.04升)条件下培养143小时，当菌液的活菌浓度达到2.9×109个/ml时，制成光合细菌制剂。
Claims (7)
1、光合细菌制剂的制备方法，它依次包括以下工艺步骤：
(1)光合细菌与菌种培养液按容积比为(0.6～1)∶(1～1.4)的比例混合并搅拌，得混合液；
(2)混合液在温度为25～32℃、光照强度为1000～2500LX、PH为7～7.5的厌氧条件下并经定时搅拌，培养73～99小时；
(3)将(2)中培养出的菌液在光照强度低于50LX、敞开体系中，适时添加碳源，以保证菌液中的碳源含量始终维持在1600ppm以上，在温度为22～32℃、好氧充气条件下培养121～143小时，当菌液的活菌浓度达到2.8×109个/ml以上时，制成光合细菌制剂。
2、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：所述光合细菌至少为CGMCC № 0192混合菌群中任意一属的菌株，所述混合菌群中含有9株光合细菌，分别为：红螺菌属(Rhodospirillium)1株，红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)2株，红细菌属(Rodobacter)2株，着色菌属(Chromatium)1株，绿杆菌属(Chlorobium)1株，红硫细菌2株。
3、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：所述菌种培养液的组成为：乙酸钠4～4.8kg，乙酸铵0.4～0.48kg，磷酸二氢钾0.5～1kg，氯化铵1～1.5kg，氯化镁0.4～0.8kg，氯化钙0.2～0.4kg，三氯化铁0.01～0.02kg，氯化钠0.6～1.2kg，酵母浸膏0.6～0.8kg，生物素2～4kg，维生素B10.02kg，水1000升。
4、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：所述光合细菌与菌种培养液混合时的搅拌时间为20～30分钟。
5、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：所述混合液定时搅拌的方式为：每隔20～30分钟搅拌一次，每次搅拌的时间为5～7分钟。
6、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：每次在每升菌液中按乙酸钠与丙酸钠的重量为10∶2的比例添加碳源。
7、根据权利要求1所述的光合细菌制剂的制备方法，其特征在于：所述好氧充气的条件为：每升菌液中每分钟的充气量为0.04～0.06升。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02135435 CN1400303A (zh) | 2002-08-25 | 2002-08-25 | 光合细菌制剂的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02135435 CN1400303A (zh) | 2002-08-25 | 2002-08-25 | 光合细菌制剂的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1400303A true CN1400303A (zh) | 2003-03-05 |
Family
ID=4748200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 02135435 Pending CN1400303A (zh) | 2002-08-25 | 2002-08-25 | 光合细菌制剂的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1400303A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102061279A (zh) * | 2010-11-22 | 2011-05-18 | 河北省微生物研究所 | 高密度发酵生产沼泽红假单胞菌发酵液的方法 |
| CN104651282A (zh) * | 2015-03-04 | 2015-05-27 | 蒋常德 | 一种复合光合细菌制剂的制备方法 |
| CN105087412A (zh) * | 2014-05-15 | 2015-11-25 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
| CN105087384A (zh) * | 2014-05-15 | 2015-11-25 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
-
2002
- 2002-08-25 CN CN 02135435 patent/CN1400303A/zh active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102061279A (zh) * | 2010-11-22 | 2011-05-18 | 河北省微生物研究所 | 高密度发酵生产沼泽红假单胞菌发酵液的方法 |
| CN105087412A (zh) * | 2014-05-15 | 2015-11-25 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
| CN105087384A (zh) * | 2014-05-15 | 2015-11-25 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
| CN105087412B (zh) * | 2014-05-15 | 2018-02-23 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
| CN105087384B (zh) * | 2014-05-15 | 2018-02-23 | 中国石油化工股份有限公司 | 培养光合微生物的方法和生产油脂的方法 |
| CN104651282A (zh) * | 2015-03-04 | 2015-05-27 | 蒋常德 | 一种复合光合细菌制剂的制备方法 |
| CN104651282B (zh) * | 2015-03-04 | 2017-11-07 | 广州市鱼来鱼旺生物科技有限公司 | 一种复合光合细菌制剂的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105347511B (zh) | 一种水产养殖用复合微生物制剂及方法 | |
| CN105174476B (zh) | 用于废水处理的活性污泥与微藻耦合颗粒化系统及其构建和运行方法 | |
| CN108660090A (zh) | 一种水产养殖用复合微生物制剂及方法 | |
| CN108277184A (zh) | 产褐藻胶裂解酶的芽孢杆菌及其制备方法和应用 | |
| CN111040970A (zh) | 一种复合微生物菌剂及其制备方法和在黑臭水体修复中的应用 | |
| CN105002110B (zh) | 复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用 | |
| CN1400303A (zh) | 光合细菌制剂的制备方法 | |
| CN101153294B (zh) | 琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺 | |
| CN106544293A (zh) | 一种使用毕赤酵母发酵菌泥生产丁酸梭菌的方法 | |
| CN114231471B (zh) | 一株化工溶剂降解菌弯曲假单胞菌ph-2及其在化工废水处理中的应用 | |
| CN1163618C (zh) | 循环利用发酵废液生产天然β-胡萝卜素的新工艺 | |
| CN102776239A (zh) | 利用酵母废水和啤酒废水生产的微生物絮凝剂及方法 | |
| CN104556405B (zh) | 一种含三价铁离子的生物复配絮凝剂及其用途 | |
| CN1733901A (zh) | 光合细菌制剂的制备方法 | |
| CN106085923B (zh) | 一种解淀粉芽孢杆菌及其生物絮凝剂的制备方法和应用 | |
| CN1023409C (zh) | 一种营养液的生产方法 | |
| CN1233658A (zh) | 高产长链二元酸的假丝酵母的筛选方法 | |
| CN107814440A (zh) | 一种用于污水处理的菌藻复合剂及其制备方法 | |
| CN113564087B (zh) | 一种生物除藻剂及其制备方法和应用 | |
| CN1234849C (zh) | 一种肠杆菌及其制备方法和应用 | |
| CN107118965A (zh) | 一种海洋活性污泥产品及其制备方法和水处理应用 | |
| CN1384188A (zh) | 光合细菌制剂的制备方法 | |
| Begom et al. | Culture optimization for mass production of Rhizobium using bioreactor made of readily available materials and agitated by air flow | |
| CN105154344A (zh) | 一种制备适盐酵母菌菌剂的方法及适盐酵母菌菌剂 | |
| CN105505777A (zh) | 一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |