CN1350871A - 一种提高花粉变应原疫苗效价的方法 - Google Patents
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Abstract
一种提高花粉变应原疫苗效价的方法,主要涉及一种花粉变应原疫苗的提取,将康氏振荡提取法改为远红外磁力搅拌加玻璃棒搅拌交替提取,避免了康氏提取法因温度升高而降低了花粉抗原的效价。本发明方法简单可行,花粉有效成份不易散失,生物利用率高,花粉变应原疫苗效价明显高于传统提取法。
Description
本发明属于生物制药技术领域，涉及一种变应原疫苗，特别是花粉变应原疫苗的提取方法。
现有技术的花粉变应原疫苗的提取，一般采用康氏振荡提取法。即是将脱脂花粉按一定比例加入碱性盐水提取液，在6～8℃冰箱内浸泡提取72小时。提取过种中每24小时用康氏振荡器振荡2小时，这种提取方法由于振荡幅度大振荡时间长，花粉浸液在提取器内因温度升高而受热，提取液水温达18～20℃，花粉有效成份散失部分生物活性物质失活，抗原效价降低。
本发明的任务是提供一种有效成份不易散失，生物利用率，及抗原效价高的花粉变应原疫苗的提取方法，以弥补现有技术的不足。
本发明的任务是这样实现的：将脱脂花粉按一定比例加入碱性盐水提取液，在6～8℃冰箱内浸泡提取72小时，提取过程中每12小时用远红外磁力搅拌器与玻棒交替搅拌1小时，每隔15～20分钟交替一次。使提取液水温控制在10±0.5℃。
本发明花粉变应原疫苗的基本组方如下：
1、早春脱脂花粉：
取杨树、柳树、榆树、柏树花粉等重量，按重量体积比加入1∶20碳酸氢盐—盐水提取液；
2、晚春脱脂花粉：
取桑树、臭椿、菠菜、核桃、桦树、松树、苔草花粉等重量，
3、夏秋脱脂花粉：
取葎草、玉米、菠菜、核桃、桦树、松树、苔草花粉等重量，按重量体积比加入1∶20碳酸氢盐——盐水提取液；
4、蒿取脱脂花粉：
取黄蒿、青蒿花粉等重量，按重量体积比1∶25碳酸氢盐—盐水提取液。
本发明的花粉变应原疫苗提取方法简单可行，疫苗效价高。将康氏振荡提取法改为远红外磁力搅拌加玻璃棒交替搅拌提取，避免了康氏振荡提取法的振荡时间过长，致使提取液因温度升高而降低了花粉变应原疫苗的效价，减弱了其生物活性，影响了脱敏治疗效果。
下面将描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。
实施例1：
称取已脱脂的杨树、柳树、榆树、柏树早春花粉各2.5g，按1∶20比例(1克花粉加入20毫升提取液)加入碳酸氢盐——盐水提取液置于6～8℃冰箱提取72小时，本提取过程中，每隔12小时用YJS-5型远红外磁力搅拌器与玻璃棒交替搅拌1小时，每隔15～20分钟交替搅拌一次，控制提取液水温达10±0.5℃。随后过滤所期望的产物并除菌纯化。
实施例2：
花粉取桑树、臭椿、菠菜、核桃、桦树、松树、苔草晚春花粉各3g，其他同实施例1。
实施例3：
花粉取葎草、玉米、蓖麻、苍耳、向日葵、大麻夏秋花粉各3.5g，其他同实施例1。
实施例4：
花粉取黄蒿，青蒿蒿属花粉各5g，按1∶25比例加入碳酸氢盐—盐水提取液，其他同实施例1。
本发明人曾选择2000例18～55岁过敏病人其中试验组1000人、对照组1000人，试验组注射本发明实施例1早春花粉变应原疫苗，对照组注射现有技术方法制备的早春花粉变应原疫苗皮内注射0.01～0.02ml浓度为1∶100，15分钟后，根据皮试引起的风团直径和红晕强度，测其风团几何面积，见表1、表2、表3
表1受试者风团直径比较皮试液分类 风团直径(cm) 皮试人数(例) 占实验人数的％
＜0.5 299 14.95
0.5～1.0 221 11.05传统方法 1.0～1.5 278 13.90(对照组) ＞1.5 101 5.05
＞1.5痒感 64 3.20
＞1.5憋气 37 1.85
＜0.5 3 0.15
0.5～1.0 29 1.45发明方法 1.0～1.5 440 22.00(实验组) ＞1.5 284 14.20
＞1.5痒感 193 9.65
＞1.5憋气 51 2.55Ridit分析u＝21.146，p＜0.01，R＝对0.3639，R实＝0.6365表2皮试红晕强度比较皮试液分类 红晕强度 皮试人数(例) 占实验人数的％
- 298 14.90
± 222 11.10对照组 + 277 13.85
++ 102 5.10
+++ 63 3.15
++++ 38 1.90
- 2 0.10
± 32 1.60实验组 + 438 21.90
++ 284 14.20
+++ 193 9.65
++++ 51 2.55Ridit分析u＝21.089，p＜0.01，R＝对0.3639，R实＝0.6361表3皮试效应结果判定反应级另 - ± + ++ +++ ++++ R实验组 0 56 488 358 89 9 0.6374对照组 260 444 176 70 43 7 0.3624Ridit分析u＝9.535，p＜0.01
实验表明本发明实验组明显优于对照组，花粉变应原疫苗皮内试验它反映的是过敏原真正的效价强度，任何一种过敏原标化方法都需要与生物效价相比较，以它为依据。
Claims (6)
1、一种提高花粉变应原疫苗效价的方法，其特征在于脱脂花粉加入碱性盐水在提取过程中每12小时用远红外磁力搅拌器与玻璃棒交替搅拌1小时。
2、根据权利要求1所述的提高花粉变应原疫苗效价的方法，其特征在于所说的远红外磁力搅拌器与玻璃棒交替搅拌，每隔15～20分钟交替一次。
3、根据权利要求1所述的提高花粉变应原疫苗效价的方法，其特征在于所说的脱脂花粉为：杨树、柳树、榆树、柏树早春花粉。
4、根据权利要求1所述的提高花粉变应原疫苗效价的方法，其特征在于所说的脱脂花粉为：桑树、臭椿、菠菜、核桃、桦树、松树、苔草晚春花粉。
5、根据权利要求1所述的提高花粉变应原疫苗效价的方法，其特征在于所说的脱脂花粉为：葎草、玉米、蓖麻、苍耳、向日葵、大麻夏秋花粉。
6、根据权利要求1所述的提高花粉变应疫苗效价的方法，其特征在于所说的脱脂花粉为黄蒿、青蒿蒿属芬粉。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 00129833 CN1350871A (zh) | 2000-10-30 | 2000-10-30 | 一种提高花粉变应原疫苗效价的方法 |
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| CN 00129833 CN1350871A (zh) | 2000-10-30 | 2000-10-30 | 一种提高花粉变应原疫苗效价的方法 |
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| CN1350871A true CN1350871A (zh) | 2002-05-29 |
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Family Applications (1)
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|---|---|
| CN (1) | CN1350871A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100457180C (zh) * | 2005-11-09 | 2009-02-04 | 浙江我武生物科技有限公司 | 用于治疗过敏性疾病的药物组合物及其制备方法 |
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2000
- 2000-10-30 CN CN 00129833 patent/CN1350871A/zh active Pending
Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| CN100457180C (zh) * | 2005-11-09 | 2009-02-04 | 浙江我武生物科技有限公司 | 用于治疗过敏性疾病的药物组合物及其制备方法 |
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