CN1337459A - 一种微生物(a405)及其制备方法 - Google Patents
一种微生物(a405)及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1337459A CN1337459A CN 00109995 CN00109995A CN1337459A CN 1337459 A CN1337459 A CN 1337459A CN 00109995 CN00109995 CN 00109995 CN 00109995 A CN00109995 A CN 00109995A CN 1337459 A CN1337459 A CN 1337459A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- trichoderma
- soil
- plants
- microorganism
- substratum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 19
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 15
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241000223262 Trichoderma longibrachiatum Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 9
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 6
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 6
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 3
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims description 3
- LKPLKUMXSAEKID-UHFFFAOYSA-N pentachloronitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl LKPLKUMXSAEKID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000009736 wetting Methods 0.000 claims description 3
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 abstract description 2
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 abstract description 2
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 abstract description 2
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 abstract description 2
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 abstract description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 abstract description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 abstract description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 abstract 1
- 241000223260 Trichoderma harzianum Species 0.000 abstract 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 abstract 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract 1
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 230000000443 biocontrol Effects 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明是一种微生物及其制备方法。其特征在于它是用于植物真菌病害生物防治的木霉菌A405(Trichoderma longibrachiatum),其保藏登记号为CGMCCNO.0441。采用本发明的拮抗性微生物进行生物防治,一方面可以利用产生的代谢产物如纤维素酶、几丁质酶等分解土壤中植物残体的纤维素、几丁质,增加土壤中的营养成分含量,促进土壤中有机质转化,产生的植物生长素又有益于植物根系的发育,促进植物生长,诱导植物抗病性反应。又可以改善土壤肥力,减少化肥、农药造成的环境污染,对人畜无害,研究周期短,投入低,易于产业化商品化开发,为农业可持续发展创造条件。
Description
本发明涉及微生物技术领域,具体地说是一种微生物及其制备方法。
由于目前大多数植物包括烟草、花卉、蔬菜缺乏对真菌病害的抗病品种,植物真菌病害的防治目前仍是以化学农药防治为主。然而连续用药造成农药残留进而对人体产生危害以及病原菌抗药性的产生引起人们极大的关注。国际上已逐渐采取措施限制某些巨毒农药的使用、注册及更新注册。美国农业部通过法规文件指出;“当面临病虫害问题时,只要有可能,生物防治总是优先选择的方法。”目前还没有一种对于烟草、花卉、蔬菜等植物真菌病害的有效的生物防治方法。
本发明的目的是针对目前没有有效的拮抗性微生物用于防治植物真菌病害,而提供一种从土壤中筛选培养出特定的拮抗性微生物来防治植物真菌病害,本发明还提供了该微生物的制备方法。
植物病害的生物防治,就是利用拮抗性微生物来防治植物的病害。为了有效地分离筛选到能对上述各种植物真菌病害的病菌有抑制作用的生防菌株,本发明采取了特殊的土壤诱捕法,通过用病菌本身作诱饵及选择培养基、对峙培养法筛选到木霉菌A405(Trichoderma longibrachiatum),该菌种已在中国专利局指定的保藏单位(中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心)保藏,其保藏登记号为CGMCC NO.0441。
A405菌株具有下述性质:
培养特征:
在MA培养基上25℃5-10天观察,菌落扩散生长,气生菌丝少,形成点片样的产孢丛束区,最初灰白色很快变为绿色,老熟时呈现橄榄绿色,反面为明显的黄色,在PDA培养基25℃3-10天培养,菌落匍匐生长,形成多而坚实的产孢丛束,早期灰白色,继而淡黄绿,老熟后为暗绿色,反面浅色。
镜检形态:
菌丝透明、壁光滑无色、有隔、分枝少、直径2.5-8μm宽,厚坦孢子较多,间生或顶生,光滑透明、有内含物、多为洋梨形,7-12μm×5-7μm;
分生孢子梗:分枝简单,主枝延长生长、直立,常见二级分枝,主枝上端多为单瓶梗着生,主枝中下端二级分枝以不等间距着生,直角伸出、很少再次分枝;
瓶梗:单生或2-4个轮生,其部稍微渐窄、呈圆柱状、顶部明显变细,有的上端渐宽后突然变细并弯曲呈“角状”,终极梗基部不缢缩,其下着生许多间生瓶梗,8-12.5×2-2.6μm,常见7-11μm×2μm;
分生孢子:大小不等,壁光滑,淡绿色,倒卵形、椭圆形顶部有一平截基部,3.2-5.6×2.2-3.6μm。
上述微生物的土壤分离方法是:
用长满相应病菌菌丝体的尼龙网片做诱饵紧贴于无菌水润湿的土壤表面,每天光照12-15小时,25-28℃下培养5-8天后,将网片移到马丁洋菜培养基上,在培养基内加入青霉素、五氯硝基苯、利福平,使每个培养皿(约15-20ml培养基)分别含上述抗菌素达50ppm,培养得该木霉菌。
上述微生物的液体发酵生产方法,其特征在于该生产方法按以下步骤进行:
1)试管培养基:采用固体PDA马铃薯培养基,将该木霉种接种在试管培养基上,27-29下培养46-50小时;
2)扩大培养基:采用液体PDA马铃薯培养基,将试管中木霉菌接种在锥形瓶中,置于摇床上27-29振荡光照培养72-76小时作为种子液;
3)液体发酵培养基:采用理查氏酵母膏培养液,121灭菌30分钟左右,待灭菌培养液冷却至27.5℃时,将锥形瓶中的培养物按5-7%的比例接入发酵液,27.5℃培养48小时得到相应拮抗菌的菌浆。
上述所得的木霉菌经一定的工艺流程制成微生物杀菌剂,用来防治植物真菌病害。
采用本发明的拮抗性微生物进行生物防治,一方面可以利用产生的代谢产物如纤维素酶、几丁质酶等分解土壤中植物残体的纤维素、几丁质,增加土壤中的营养成分含量,促进土壤中有机质转化,产生的植物生长素又有益于植物根系的发育,促进植物生长,诱导植物抗病性反应。另外它们又可以产生抑菌物质,抑制病原菌的生长,并能在未经消毒的土壤中广为传播,因而改善土壤肥力,减少化肥、农药造成的环境污染,对人畜无害,研究周期短,投入低,易于产业化商品化开发,为农业可持续发展创造条件。
实施例:
用长满相应病菌菌丝体的尼龙网片做诱饵,紧贴于无菌水润湿的土壤表面,每天光照12小时,25℃下培养天后,将网片移到马丁洋菜培养基上,在培养基内加入青霉素、五氯硝基苯、利福平,使每个培养皿(约15ml培养基)含上述各抗菌素分别达50ppm,以此作为选择培养基,筛选培养出该木霉菌。
微生物的液体发酵生产方法是:
1)试管培养基:采用固体PDA马铃薯培养基,将该木霉种接种在试管培养基上,27-29℃下培养46-50小时;
2)扩大培养基:采用液体PDA马铃薯培养基,将试管中木霉菌接种在锥形瓶中,置于摇床上27-29℃振荡光照培养72-76小时作为种子液;
3)液体发酵培养基:采用理查氏酵母膏培养液,l2l℃高压灭菌30分钟左右,待灭菌培养液冷却至27.5℃时,将锥形瓶中的培养物按6%的比例接入发酵液,27.5℃培养48小时得到相应拮抗菌的菌浆。
将上述木霉菌经一定的工艺流程制成微生物杀菌剂,用来防治植物真菌病害。
Claims (4)
1、一种微生物,其特征在于它是用于植物真菌病害生物防治的木霉菌A405(Trichoderma longibrachiatum),其保藏登记号为CGMCC NO.0441。
2、按权利要求1所述的微生物的培养方法,其特征在于上述木霉菌按以下方法培养:用长满相应病菌菌丝体的网片做诱饵紧贴于无菌水润湿的土壤表面,每天光照12-15小时,25-28℃下培养5-8天后,将网片移到马丁洋菜培养基上,在培养基内加入青霉素、五氯硝基苯、利福平,使每个培养皿分别含上述抗菌素达50ppm,培养得该木霉菌。
3、按权利要求1或2所述的微生物的液体发酵生产方法,其特征在于该生产方法按以下步骤进行:
1)试管培养基:采用固体PDA马铃薯培养基,将木霉接种在试管培养基上,27-29℃下培养46-50小时;
2)扩大培养基:采用液体PDA马铃薯培养基,将试管中木霉菌接种在锥形瓶中,置于摇床上27-29℃振荡光照培养72-76小时作为种子液;
3)液体发酵培养基:采用理查氏酵母膏培养液,121℃高压灭菌30分钟左右,待灭菌培养液冷却至27.5℃时,将锥形瓶中的培养物按5-7%的比例接入发酵液,27.5℃培养48小时得到相应拮抗菌的菌浆。
4、按权利要求1所述的微生物的应用,其特征在于将木霉菌用来防治植物真菌病害。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 00109995 CN1337459A (zh) | 2000-08-09 | 2000-08-09 | 一种微生物(a405)及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 00109995 CN1337459A (zh) | 2000-08-09 | 2000-08-09 | 一种微生物(a405)及其制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1337459A true CN1337459A (zh) | 2002-02-27 |
Family
ID=4580032
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 00109995 Pending CN1337459A (zh) | 2000-08-09 | 2000-08-09 | 一种微生物(a405)及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1337459A (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101693879B (zh) * | 2009-09-27 | 2011-07-20 | 东北林业大学 | 一种长枝木霉真菌菌株 |
EP2910127A1 (en) * | 2014-02-21 | 2015-08-26 | Koppert B.V. | Bioactive protein, use thereof and method for its production |
US10875898B2 (en) | 2014-02-21 | 2020-12-29 | Koppert B.V. | Bioactive protein, use thereof and method for its production |
-
2000
- 2000-08-09 CN CN 00109995 patent/CN1337459A/zh active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101693879B (zh) * | 2009-09-27 | 2011-07-20 | 东北林业大学 | 一种长枝木霉真菌菌株 |
EP2910127A1 (en) * | 2014-02-21 | 2015-08-26 | Koppert B.V. | Bioactive protein, use thereof and method for its production |
US10875898B2 (en) | 2014-02-21 | 2020-12-29 | Koppert B.V. | Bioactive protein, use thereof and method for its production |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101485336B (zh) | 一种防治作物土传病害的木霉菌制剂 | |
CN1932006A (zh) | 防治蔬菜疫病的生防菌株与制剂的制备方法 | |
CN103103152B (zh) | 一种珊瑚球菌及其应用 | |
CN101928673A (zh) | 哈茨木霉菌 | |
Miftahurrohmat | Utilization of trichoderma sp. and pseudomonas fluorescens as biofertilizer in shade-resistant soybean | |
CN1354252A (zh) | 以玻璃珠为培养基质的丛枝菌根真菌的培养 | |
CN106591168B (zh) | 一种烟嘧磺隆降解赤红球菌ymhl-1及其应用 | |
CN111733083B (zh) | 新种内生真菌菌株pg2及其应用 | |
CN1335388A (zh) | 一种微生物(tv-1)及其制备方法 | |
CN1926994A (zh) | 一种微生物抗稻瘟病剂及其制备方法和应用 | |
CN1468954A (zh) | 防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株及其生产方法和应用 | |
CN108587969B (zh) | 可防治棉花黄萎病的大丽轮枝菌的菌株hcx-01的制备及其应用 | |
CN1274807C (zh) | 蜡蚧轮枝菌及其培养方法与应用 | |
CN1337459A (zh) | 一种微生物(a405)及其制备方法 | |
CN1846505A (zh) | 一种微生物抗烟草赤星病剂及其制备方法和应用 | |
CN102533566B (zh) | 一种烟曲霉及其应用 | |
CN105462882A (zh) | 一种用于防治作物黄萎病的铜绿假单胞菌及其应用 | |
CN102719364B (zh) | 一株哈茨木霉菌株及其在防控辣椒疫病中的应用 | |
CN102599196B (zh) | 苏云金芽孢杆菌发酵液对高羊茅生长的调节方法 | |
CN105733984B (zh) | 枯草芽孢杆菌及其在防治玉米小斑病方面的应用 | |
CN1337460A (zh) | 一种微生物(Tr13)及其制备方法 | |
CN101040617A (zh) | Trichothec-9-en-4-o1,12,13-epoxy-,acetate,(4β)-(8CI,9CI)在防治蕃茄早疫病或菜豆炭疽病中的应用 | |
CN1337458A (zh) | 一种微生物(t918)及其制备方法 | |
CN1386845A (zh) | 一种农药残留降解菌剂及其生产方法 | |
CN102676403B (zh) | 一种具有诱导抗性的木霉菌株及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |