CN1323166A - 动物饲料中的抗微生物酶 - Google Patents

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Abstract

公开了在单胃或非反刍动物中应用两种抗微生物酶改善家禽、猪、小牛和鱼的生长和饲料转化率。这能使农场主避免使用生长促进抗生素。所述酶具有抗细菌活性,其中一种能破坏细菌的细胞壁(例如溶菌酶)而另一种产生对细菌有毒的化合物(例如氧化酶)。通过包含一种多不饱和脂肪酸(PUFA)例如花生四烯酸增强这些酶的功效。

Description

动物饲料中的抗微生物酶 
本发明涉及抗微生物酶(例如氧化酶和溶菌酶)和多不饱和脂肪酸(PUFA)在(单胃和非反刍)动物饲料中的应用，用于改善猪、家禽、鱼和小牛的生长和饲料转化率。
为了生产肉、鱼和蛋，使动物(例如猪、家禽、小牛和鱼)充分生长。给这些动物喂食含各种动物和/或植物来源的原料的食物以提供能量和蛋白质。消耗的大多数饲料是由配合饲料工业商业法生产的，但相当一部分是在农场上生产的并直接喂食。饲料中补充了维生素和矿物质以满足动物对这些必需营养物的需要。在家禽的情况下，饲料还补充有抑球虫剂以预防球虫病。用工业法生产的酶作饲料添加剂几乎已成为常规的做法。这类酶的例子包括植酸酶、α-淀粉酶、蛋白酶和各种植物细胞壁降解酶例如β-葡聚糖酶、木聚糖内切酶和甘露聚糖酶。
这些酶用于改善生长和饲料转化率以及减少由猪、家禽和鱼的粪肥造成的环境污染。然而，饲料成本是动物生产中最重要的成本因素。
在二十世纪五十年代，人们认识到，向动物饲料中添加少量抗生素会在单胃动物中导致改善了的动物工艺结果。现在，常规使用抗生素作为饲料添加剂。这些抗生素对改善生长和饲料转化率的作用方式仍没有被完全理解。这类饲料添加剂的通用术语是生长促进剂。生长促进剂的例子包括维吉霉素，泰洛星，黄霉菌素和阿伏帕星。
人病原性细菌对抗生素的抗性正迅速提高。这已使得更难治愈患细菌感染的病人。很多专家指责抗生素在动物饲料中的广泛应用，认为会加速对各种抗生素的抗性的积累。这已导致瑞典禁止所有抗生素作为生长促进剂在动物饲料中使用，丹麦禁止使用某些特定的抗生素例如阿伏帕星。其它国家可能将由于消费者和卫生组织的压力而效仿这些先例。因此，饲料工业对具有生长促进效果而没有任何对人的治疗用途的天然添加剂特别感兴趣。
已知某些酶是有活性的抗微生物剂，它们可用于食品的保藏。还提出了葡糖氧化酶用于青贮饲料和青贮谷物的保藏(WO-A-98/01694,SuomenSokeri Oy)。
植物细胞壁降解酶(例如甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶)被用作含大量β-葡聚糖和甘露聚糖的食物的饲料添加剂以降低由这些非淀粉多糖引起的单胃动物胃肠道中的粘度。这些酶还具有某种抗真菌活性但不表现任何抗细菌活性。
已经把抗细菌酶溶菌酶作为生长促进剂添加到单胃动物的饲料中(Latvietis,J.等，参见：Vitamine Zusatzstoffe in der Ernaehrungyon Mensch und Tier.Symposium 5th(1995).Rainer Schubert等编，Jena,September 28-29.ISBN 3.00.000361-4)。这些作者把从蛋清制备的溶菌酶添加到适合于煎烤的雏鸡和小牛的饲料中。据说改善了生长和饲料转化率。然而，尚未公开过使用抗细菌酶和酶增强剂(例如PUFAs)的混合物的构思。
因此，鉴于消费者和卫生组织等的要求，农场主和配合饲料工业都希望以得到准许的方式，以最小的成本获得最佳生长和饲料转化率。
本发明提供了一种动物饲料添加剂组合物，它包含可显示协同效果的抗微生物酶的混合物。所述或每种酶的效果可以通过一种或多种PUFAs的存在而得以增强。这使得可以改善动物例如猪、家禽、小牛和水生动物或海洋动物(例如鱼)的生长和饲料转化率，还可使人们不再用抗生素作生长促进剂。
本发明的第一个方面涉及一种适用于单胃或非反刍动物的动物饲料添加剂组合物，该组合物包含至少两种抗微生物酶和(作为酶增强剂的)一种多不饱和脂肪酸(PUFA)。
优选地，所述酶中的一种或两种是抗细菌酶。这些酶可能是不同类型的和/或可能具有不同的活性。一种酶(例如第一种酶)可能能够破坏细菌的细胞壁。该酶可能是一种可以攻击或降解肽聚糖的酶。例如，该酶可能能够裂解肽聚糖。用于该目的的一种优选的酶是溶菌酶。该(第一种)酶可以一定的浓度存在，给出50,000-150,000，例如70,000-130,000，优选90,000-110,000 Shugar单位/千克(或单位)动物饲料。因此，以重量计，该第一种酶可以一定的量存在，在动物饲料中给出的浓度为1-8克/千克饲料，优选2-7克/千克饲料，最优选3-5克/千克饲料。
所述第二种酶可能能够产生一种对细菌有毒的化合物。这可能是与细胞壁被第一种酶破坏或降解的细菌相同或不同的细菌。所述化合物优选是一种过氧化物，例如过氧化氢。因此优选的酶是氧化酶。特别优选的是葡糖氧化酶。该第二种酶可以一定的浓度存在，给出500-1,500，优选700-1,300，最优选900-1,100Sarett U/千克(或单位)饲料。因此优选的是，该第二种酶可以一定的重量存在，给出在动物饲料中的最终浓度为1-8克/千克饲料，优选2-7克/千克饲料，最优选3-5克/千克饲料。
所述酶可以如下方式起抗微生物剂的作用：
a)破坏细胞壁；
b)产生毒性化合物；
c)除去必需营养物；或
d)使生长所必需的酶失活。
上述每一点将被依次讨论。
a)对于真菌、酵母、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌来说，微生物细胞壁结构是不同的。为破坏这些不同类型的微生物的细胞壁，人们可需要不同的酶。例如，真菌和酵母细胞壁可以被甘露聚糖酶、壳多糖酶和β-葡聚糖酶破坏。然而，细菌细胞壁由于不同类型的结构而对这些酶不敏感。革兰氏阳性菌具有被某种蛋白质覆盖的肽聚糖层，但基本上仅由肽聚糖组成。该底物可以由溶菌酶(1,4-b-乙酰基胞壁质酶)的作用降解，所述溶菌酶将N-乙酰基胞壁酸的C1和N-乙酰基葡糖胺的C-4之间的肽聚糖裂解。
在革兰氏阴性菌中，肽聚糖层被紧密的脂多糖-蛋白质-二价阳离子-磷脂层覆盖。该层可以阻碍溶菌酶在革兰氏阴性菌中的效能。能破坏该紧密的脂多糖层的作用剂通过使该酶接近肽聚糖层而刺激溶菌酶的作用。
b)氧化酶能够产生对大多数微生物致死性的过氧化氢。例如，葡糖氧化酶催化葡萄糖向葡糖酸和过氧化氢的转化。乳中存在的黄嘌呤氧化酶也能产生过氧化氢。
可以通过酶促法产生的其它抗微生物化合物包括hypothiocyanate(由乳过氧化物酶产生)、氯胺(由髓过氧物酶产生)、游离脂肪酸(由脂肪酶产生)、多不饱和脂肪酸、溶血磷脂酰胆碱(由磷脂酶A2产生)和木糖醇-5-磷酸酯(由木糖醇磷酸化酶产生)。然而，该列举决非穷举。
c)可以借助氧化酶(例如葡糖氧化酶)从培养基中除去氧。氧的完全脱除阻止了需氧微生物的生长。
d)可借助其它酶使微生物生长所必需的酶失活。例如，巯基氧化酶能够使那些活性取决于活性巯基的酶失活。
所述组合物可以包含酶增强剂，例如，能优选以协同方式显著改善所述或每种抗微生物(例如，抗细菌)酶的活性的化合物。所述酶增强剂可以包含一种或多种多不饱和脂肪酸，或者称作PUFAs。所述或每种PUFA可以是n-3或n-6家族的。它优选是C18、C20或C22 PUFA。所述PUFA可以游离脂肪酸的形式、作为脂肪酸酯(例如甲酯或乙酯)、作为磷脂和/或以甘油三酯的形式提供。
优选的PUFAs包括花生四烯酸(ARA)，二十二碳六烯酸(DHA)，二十碳五烯酸(EPA)和/或γ-亚油酸(GLA)。其中ARA是优选的。
所述PUFAs可以得自天然(例如，植物或海洋)来源或者可以得自单细胞或微生物来源。特别是，所述PUFA可以由细菌、真菌或酵母生产。真菌是优选的，尤其是毛霉目(Mucorales)的真菌，例如，被孢霉属(Mortierella),Pythium或Entomophora。ARA的优选来源是得自高山被孢霉(Mortierella alpina)或Pythium insidosum。
所述PUFA可以油的形式存在。包含ARA的合适的油可得自DSMN.V.,Wateringseweg 1,P.O.Box 1,2600 MA Delft,The Netherlands，商标为VEVODARTM。另一种可商购的油是ARASCOTM，得自MartekCorporation,6480 Dobbin Road,Columbia,MD 21045，美国。其它PUFAs也是可以得到的，例如呈DHA油形式的DHA(Martek Corporation的DHASCOTM或者Pronova,Norway的DHA，商标为EPAXTM)。
所述PUFA优选有一定的浓度，该浓度使其能添加到动物饲料中而给出最终浓度为0.1或1-1000，例如0.5-50或1-100，优选1-10克/千克(或单位)饲料。
所述全部抗微生物酶可以在工业规模上生产和/或是重组体。溶菌酶是可商购的，分离自蛋清，或者可以是重组体。所述或每种酶可以是天然产生的或者可以是其一种(例如，重组的)变体或突变体。
所述或每种抗细菌酶优选是重组法生产的，例如，通过在适宜的生物体中表达一种异源基因或cDNA，或者通过适宜的内源基因的同源(超量)表达。例如，已经在重组体系统中超量表达了葡糖氧化酶基因(WO-A-89/12675,Chiron)。通过基因在黑曲霉(Aspergillus niger)中的表达，可以重组法表达溶菌酶(得自蛋清)(Archer,D.B.等，Bio/Technology 8:741-745(1990)。还可使用溶菌酶突变体(通过蛋白质工程生产的)，它们具有更好的热稳定性和更强的抗微生物作用。
本发明中使用的抗微生物酶通常将是这些酶：它们不是动物饲料的天然组分，或者它们以不同于其天然浓度的浓度存在于饲料中。
本发明的第二个方面涉及一种动物饲料组合物，它包含至少两种抗微生物酶和一种PUFA。如同所述添加剂组合物一样，第一种酶可能能够破坏细菌的细胞壁，而第二种酶可能能够产生一种对细菌有毒的化合物。
本发明的第三个方面涉及一种制备动物饲料组合物的方法，该方法包括，向一种或多种可食用的饲料物质或组分中添加两种或两种以上抗微生物酶和一种PUFA，或者一种所述第一方面的添加剂。
所述酶和/或PUFA可以与饲料物质或组分分开地、各自地或者与其它饲料添加剂一起添加到动物饲料组合物中。备选地，或者除此之外，所述酶或每种酶可以是饲料物质之一的一个组成部分。这一方面既包括用两种酶和PUFA制备饲料组合物，也包括给现有的饲料组合物补充这些化合物。
用于向动物饲料(外源性)添加抗微生物酶的一种特别优选的方法是，以转基因植物材料和/或(例如，转基因)种子的形式添加所述酶或每种酶。因此，所述酶可能已经通过异源基因表达而合成，例如，可以在适宜的植物表达信号的控制下，将编码所需酶的基因克隆入植物表达载体中，所述植物表达信号例如是组织特异性启动子(例如种子特异性启动子)。随后，可将含有编码该酶的基因的表达载体转化入植物细胞，而通过针对再生成完整植物而对转化过的细胞进行选择。可以使这样获得的转基因植物生长并收获，可以将植物的含有异源(对该植物而言)酶的那些部分包含于所述组合物之一，或原样包含或经进一步处理之后包含。此处提及WO-A-91/14772，它公开了在(转基因)植物中(异源)表达酶的一般方法，包括种子特异性表达酶的方法。异源酶可含于转基因植物的种子中，或者它可含于其它植物部分中，例如根，茎，叶，木质，花，树皮和/或果实中。
添加呈转基因植物材料(例如，含有抗微生物酶的转基因种子)形式的酶可能需要加工该植物材料，以便获得该酶，或者至少改善其利用率。这类加工方法可包括各种机械(例如研磨和/或粉碎)方法或热机处理(例如挤出或膨胀)。
所述抗细菌酶可以一定浓度添加到饲料组合物中，该浓度作为食物组成、酶类型和目标动物种类的函数而变化。
本发明的组合物优选不包含任何抗生素。本发明的组合物可能还不含矿物组分(例如锌和/或碘)和/或免疫调制剂(例如抗坏血酸)。尽管这两种酶中的每一种和所述PUFA都可由微生物产生，但优选的是该组合物不含产生这些化合物中任一化合物的微生物(或链霉菌属(Streptomyces)的微生物)。而且，该组合物可以没有那些在动物体内产生乳酸的微生物(例如，那些乳杆菌属(Lactobacillus)或肠球菌属(Enterococcus)的微生物)。
本发明的第四个方面涉及一种促进单胃或非反刍动物的生长和/或饲料转化的方法，该方法包括，给所述动物喂食至少两种抗微生物酶和一种PUFA或者第一方面或第二方面的饲料组合物或者可通过第三方面制备的饲料组合物。
合适的动物包括农畜、单胃动物和/或非反刍动物，例如，猪(或小猪)、家禽(例如雏鸡，火鸡)、小牛或牛犊或者水生(例如海洋)动物(例如鱼)。
第五个方面涉及第一个方面的组合物作为单胃或非反刍动物饲料组合物的添加剂的用途。
本发明一个方面的优选特征和特点，如做适当变动，也适用于另一个方面。
现将参照如下实施例以举例的方式描述本发明，提供这些实施例只是为了阐述本发明而不是对本发明范围的限制。对比实施例1至4和实施例5抗细菌酶产品的表征
获得了商品形式的葡糖氧化酶(EC1.1.3.4)，它是一种能产生过氧化氢的氧化酶，商标为FERMIZYME GOTM，得自DSM/Royal Gist-brocades,Bakery Ingredients Division,PO Box 1,2600 MA DELFT,TheNetherlands。该酶制品表现的活性为500Sarett单位/克。一个Sarett单位是这样的酶量：在30℃，磷酸盐缓冲液pH5.9中，过量氧和3.3％葡萄糖一水合物的存在下，在Warburg测压计中，引起每分钟吸收10mm3氧的酶量。该酶是由真菌黑曲霉产生的。
获得了商品形式的得自鸡蛋清的溶菌酶，商标为DELVOZYMETM，得自DSM/Royal Gist-brocades,Dairy Ingredients Group,PO Box 1,2600MA DELFT,The Netherlands。该产品含5.1×106 Shugar单位/ml产品。一个Shugar单位定义为这样的酶量：在25℃，得自Sigma Chemieals的溶壁微球菌(Micrococeus lysodeikticus)悬浮液(0.25mg/ml)中，在pH6.2和450nm的条件下，引起每分钟吸光度降低0.001的酶量。花生四烯酸的表征
花生四烯酸(ARA)也得自DSM/Royal Gist-brocades，商标为VEVODARTM。它呈微生物油的形式(ARA含量至少为35％)，是通过培养真菌高山被孢霉得到的。抗细菌酶在家禽用动物饲料中的应用
用适合于煎烤的雏鸡进行试验，研究葡糖氧化酶和溶菌酶单独的功效以及两者组合的功效。我们用标准食物从第1天到第五天喂养适合于煎烤的雄性雏鸡(Ross)。第五天，我们从该组选择动物，将它们分入各个鸡笼。测定动物的重量及其变化。平均重量及其偏差对每笼而言是相等的。将15只动物在一个鸡笼中喂养。这些鸡笼置于人工加热、通风并有光照的鸡舍中。每个鸡笼的底面积为0.98m2，有铁丝底部。鸡舍每天光照24小时。实验期间，光强逐渐降低。温度逐渐从实验第一周期间的28℃降低到最后一周期间的23℃。实验期间，鸡舍内的湿度大约为60％。动物已经在一个月零十四天大小时接过种以抗新城病(使用喷雾法)。实验持续33天，包括5天的预试验期和28天的试验期。
不限量地给动物提供实验食物。水可自由得到。以3毫米的直径将饲料冷法造粒(温度保持在65℃以下)。
实验包括如下处理：
1)基本食物(阴性对照)
2)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)
3)基本食物+溶菌酶(100.000Shugar单位/kg饲料)
4)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100.000 Shugar单位/kg饲料)
5)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)+花生四烯酸(ARA)，使最终浓度为1g/kg饲料。
每种处理重复六次(总计每种处理90只鸡)。测定增重和饲料转化率。所用饲料(基本食物)的组成如下：
           成分                         含量(％)
黑麦                                      10
小麦                                      40
豆油                                       1
动物脂肪                                   6
木薯淀粉                                 4.3
大豆粉(45.4％粗蛋白)                      22
全脂烤大豆                                10
饲料用肉骨粉(58％粗蛋白)                   3
维生素/预混物                              1
石灰石                                   0.9
磷酸一钙                                 1.2
盐(NaCl)                                 0.3
D,L-甲硫氨酸                             0.2
ME适合于煎烤的雏鸡(KCal/kg)             2850
粗蛋白(％)                              21.4
粗脂肪(％)                              10.5
赖氨酸(可获得的，％)                 1.23(1.04)
甲硫氨酸+半胱氨酸(可获得的，％)      0.90(0.79)
通过先将该基本食物与一种载体混合而将所述酶和花生四烯酸添加到该基本食物中。
下表1表示了抗细菌酶和花生四烯酸对5-33天大小的适合于煎烤的雏鸡的生长量和饲料转化率的影响。
表1
 实施例       食物     饲料摄入量(g)    生长量(g)     饲料转化率   饲料转化率的改善
    1     基本食物     2,760     1,540     1.79      -
    2     基本食物+葡糖氧化酶     2.750     1,554     1.77    -0.02
    3     基本食物+溶菌酶     2,748     1,553     1.77    -0.02
    4     基本食物+葡糖氧化酶+溶菌酶     2,731     1,589     1.72    -0.05
    5     基本食物+氧化酶+溶菌酶+花生四烯酸     2,710     1,595     1.70    -0.09
添加一种类型的抗细菌酶或添加不同类型的抗细菌酶的组合物都改善了适合于煎烤的雏鸡的生长量和饲料转化率。然而更重要的是，发现了葡糖氧化酶和溶菌酶的组合对饲料转化率的协同效果，在含抗细菌酶的食物中包含花生四烯酸导致了更进一步的改善。对比实施例6至9和实施例10抗细菌酶在猪用动物饲料中的应用
该实验中使用年龄和体重相似的杂交种猪(相等的阉公猪和未成年母猪；n=100)。将它们养在环境受控的房间里，始终可不限量地获得饲料和水。室温最初设定为29℃，在第2周之后降低室温大约2℃/周。将这些猪分配到五个处理组之一。每栏有两头猪，每个处理组有10个重复(重量组)。
每周测定体重和栏饲料消耗量。
基本食物是如下组成的典型美国式食物：
           原 料                    含量(％)
玉米                                 63.6
大豆粉                               30.9
维生素预混物                         0.25
微量矿物预混物                       0.1
硒预混物                             0.05
磷酸二钙                             1.2
盐(NaCl)                             0.3
石灰石                               3.6
饲料中没有添加抗生素。
该实验包括如下的处理组(实施例6至10)：
a)基本食物(阴性对照)；
b)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)；
c)基本食物+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)；
d)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)；
e)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)+花生四烯酸，使最终浓度为1g/kg饲料。
下表2显示了用饲料摄入量、生长量和饲料转化率表示的结果。
表2
抗细菌酶和ARA对生长中的猪(23-54kg体重)的生长量和饲料转化率的影响。
实施例     食物  每日饲料摄入量(g)    每日增重量(kg)    饲料转化率 饲料转化率的改善
    6    基本食物     2.20     0.90     2.44      -
    7    基本食物+葡糖氧化酶     2.15     0.90     2.39    -0.05
    8    基本食物+溶菌酶     2.14     0.89     2.40    -0.04
    9    基本食物+葡糖氧化酶+溶菌酶     2.10     0.94     2.23    -0.21
    10    基本食物+氧化酶+溶菌酶+花生四烯酸     2.05     0.95     2.16    -0.28
添加一种类型的抗细菌酶或添加不同类型的抗细菌酶的组合物都显示了对每日增重量和饲料转化率的有利效果。然而，两种不同类型的抗细菌酶的组合(例如，葡糖氧化酶和溶菌酶)对饲料转化率产生意外的协同效果，向含抗细菌酶的饲料中添加花生四烯酸导致了进一步的改善。对比实施例11至14和实施例15抗细菌酶在鱼营养中的应用
用鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)研究了补充的抗细菌酶对生长量和饲料转化率的影响。
所用的食物组成如下：
             原 料                       含量(％)
大豆粉                                      43
大豆，加压蒸煮过的                          20
小麦面筋                                    20.5
鱼油                                        12
L-赖氨酸-HCl                                0.8
D,L-甲硫氨酸                                0.2
维生素/矿物预混物                           3.5
饲料中没有添加生长促进抗生素。
用平均初始体重为8.8g/鳟鱼的200条鳟鱼进行实验，这些鳟鱼被分配成五个相同的组。在53天的期间内，用食物喂养这五组鳟鱼。保持水温恒定在15℃。每日喂两次食物，喂饱但避免饲料损失。测定增重和饲料转化率。
该实验包括如下的处理组(实施例11至15)：a)基本食物(阴性对照)；b)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)；c)基本食物+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)；d)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)；和e)基本食物+葡糖氧化酶(1000Sarett U/kg饲料)+溶菌酶(100,000Shugar单位/kg饲料)+花生四烯酸，使最终浓度为1g/kg饲料。
下表3显示了用生长量和饲料转化率表示的所得结果。
表3
用补充了抗细菌酶+/-花生四烯酸的食物喂养了53天的鳟鱼的增重、饲料摄入量和饲料转化率。
实施例     食物    饲料摄入量(g/鳟鱼)  增重量(g/鳟鱼)    饲料转化率 饲料转化率的改善
    11     基本食物     18.5     12.5     1.48      -
    12     基本食物+葡糖氧化酶     20.6     14.1     1.46    -0.02
    13     基本食物+溶菌酶     20.4     14.1     1.45    -0.03
    14     基本食物+葡糖氧化酶+溶菌酶     21.5     16.4     1.31    -0.17
    15     基本食物+氧化酶+溶菌酶+花生四烯酸     22.9     18.4     1.24    -0.24
所得结果证实了一种类型的抗细菌酶或者抗细菌酶的组合物对鳟鱼生长量和饲料转化率的有利效果。不同类型的抗细菌酶的组合显示出对饲料转化率的协同效果，而向含抗细菌酶的食物添加花生四烯酸则得到进一步的改善。

Claims (23)

1．一种动物饲料添加剂组合物，它包含至少两种抗微生物酶和一种多不饱和脂肪酸(PUFA)。
2．一种动物饲料组合物，它包含至少两种抗微生物酶和一种多不饱和脂肪酸(PUFA)。
3．根据权利要求1或2的组合物，其中所述或每种抗微生物酶是抗细菌酶。
4．根据权利要求3的组合物，其中一种或多种所述抗细菌酶包括葡糖氧化酶、巯基氧化酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶或溶菌酶。
5．根据权利要求1或2的组合物，其中所述酶之一能够破坏细菌的细胞壁和/或另一种酶能够产生一种对细菌有毒的化合物。
6．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述酶是溶菌酶和氧化酶。
7．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述PUFA包括n-3或n-6C18、C20或C22 PUFA。
8．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述PUFA呈游离脂肪酸、脂肪酸酯、磷脂或甘油三酯的形式。
9．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述PUFA包括花生四烯酸(ARA)。
10．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述或每种抗细菌酶得自动物、动物产品、植物或微生物。
11．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述或每种抗细菌酶是微生物来源的和/或是重组蛋白质。
12．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述或每种酶得自微生物、由微生物产生或存在于微生物中，所述微生物例如是细菌、酵母或(丝状)真菌。
13．根据权利要求11的组合物，其中所述微生物是链霉菌属、芽孢杆菌属、埃希氏菌属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、Yarrowia、假丝酵母属、曲霉属、木霉属、青霉属、毛霉属、镰孢属或腐质霉属的微生物。
14．根据权利要求13的组合物，其中所述微生物是浅青紫链霉菌、大肠埃希氏菌、地衣芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母、黑曲霉或高山被孢霉。
15．根据前述任一权利要求的组合物，其中所述酶含于植物材料中，所述植物材料任选得自转基因植物。
16．根据权利要求15的组合物，其中所述抗细菌酶葡糖氧化酶和/或溶菌酶含于转基因植物的种子中。
17．根据前述任一权利要求的组合物，它适合于包含10-10,000Sarett单位的葡糖氧化酶/kg饲料和1000-1,000,000 Shugar单位的溶菌酶/kg饲料。
18．根据前述任一权利要求的组合物，它包含1-1000g花生四烯酸/kg饲料。
19．一种生产用于单胃或非反刍动物的饲料组合物的方法，该方法包括，将两种抗微生物酶和一种PUFA添加到一种或多种可食用的饲料物质或组分中，或者将根据权利要求1或3至18任一项的饲料添加剂组合物与一种或多种可食用的饲料物质或组分混合。
20．一种动物饲料组合物，它包含一种根据权利要求1或3至18任一项的添加剂组合物和一种或多种可食用的饲料物质或组分。
21．一种促进单胃或非反刍动物的生长和/或饲料转化的方法，该方法包括，给所述动物喂食至少两种抗微生物酶和一种PUFA或者如权利要求1至18或20任一项所定义的组合物。
22．根据权利要求21的方法，其中所述动物是猪、家禽(雏鸡，火鸡)、小牛或水生动物。
23．根据权利要求1,3至18任一项的组合物作为单胃动物饲料组合物的添加剂的用途。
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