CN1317391C - 采用固体发酵提取灵芝多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，本方法通过配制灵芝母液、在培养基中进行固体发酵并进行无菌培养、原料水浴、真空浓缩、醇析脱水、真空干燥、二次醇析脱水、冷冻干燥、粉碎包装等工艺步骤制成灵芝多糖成品。本发明的方法具有产量高、容量大、周期短、质量好、效益高，适合多种真菌类多糖的提取。
Description
技术领域
本发明涉及一种采用固体发酵提取灵芝多糖的方法。
背景技术
目前，我国采用生物技术提取多糖的方法有两种，一种是从灵芝实体中提取多糖即生物分离技术，第二种是采用菌种液体发酵技术提取多糖即液体发酵技术，上述第一种方法虽然能够将多糖提取出来，但是无法将灵芝在生长中培养基所带来的污染及农药残留物去除掉，而且多糖的收益率也非常低，只有8-15％。第二种液体发酵技术虽然克服了第一种中的污染和农药残留，但是其存在的不足是设备投资大、占地面积大，特别是用水量相当大，多糖的收益率也不高，最高的一般能达到45％左右，一般的只能达到20％左右，而且活性成分损失大，多糖的生产量低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种设备投资小、节水且多糖收益率高的采用固体发酵提取灵芝多糖的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，该方法步骤下：
I、采用灵健2号灵芝菌株为菌种，配制成母液待用；
II、取重量份数比的玉米粉190-210份、磷酸二氢钾0.95-1.05份、蔗糖19-21份、琼脂19-21份、蛋白胨2.85-3.15份、硫酸镁0.2-0.8份、硫酸铵0.3-0.6份、酵母粉0.7-1.3份混合均匀制成培养基；
III、取上述菌种母液及培养基，将其按重量份数比为菌种母液∶培养基＝1∶(1.7-2)的比例充分混合并搅拌均匀，然后放入固体发酵箱中发酵，进行无菌培养，发酵温度为28-30℃，pH值为5，发酵时间为21天，发酵比风量1∶(0.5-1.0)；
IV、将上述发酵无菌培养后的原料放入50℃的水中进行水浴，水浴时间为2-6小时，同时以15-30转/分的速度进行搅拌，将多糖溶于水中；
VI、将上述水浴后的原料渣水分离后，将水放入浓缩罐中进行真空浓缩，直至浓缩成膏状物；
VII、将上述浓缩后的膏状物放入于膏状物2倍的95％的乙醇中脱水，形成多糖浓膏；
VIII、将上述多糖浓膏在50℃以下进行低温真空干燥；
IX、将上述经过真空干燥的多糖浓膏使用高速离心机脱水进行第二次醇析；
X、使用冷冻干燥机将上述二次醇析脱水后的多糖浓膏进行干燥；
XI、将上述冷冻干燥后的多糖浓膏进行粉碎包装即成灵芝多糖成品。
本发明采用上述方法以后，很好地解决了以往液体发酵技术中设备投资大、用水量大以及多糖收益率低的问题，具有投资少、用水量小、多糖的质高，收益率高，一般大于70％，在70-81％之间，比现行标准提高了12％的含糖量，特别是在节约用水方面起到了明显的效果。本工艺对设备的要求不高，投资的安全性能比为97％，比较适合中小企业对多糖物质的生产。另外，本发明的产量高、容量大、周期短、质量好、效益高，适合多种真菌类多糖的提取。
以下结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
实施例一：
采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，该方法步骤如下：
I、采用灵健2号灵芝菌株为菌种，配制成母液待用；
II、取重量份数比的玉米粉190g、磷酸二氢钾0.95g、蔗糖19g、琼脂19g、蛋白胨2.85g、硫酸镁0.2g、硫酸铵0.3g、酵母粉0.7g混合均匀制成培养基；
III、取上述菌种母液及培养基，将其按重量份数比为菌种母液∶培养基＝1∶1.7的比例充分混合并搅拌均匀，然后放入固体发酵箱中发酵，进行无菌培养，发酵温度为28℃，pH值为5，发酵时间为21天，发酵比风量1∶0.5；
IV、将上述发酵无菌培养后的原料放入50℃的水中进行水浴，水浴时间为2小时，同时以15转/分的速度进行搅拌，将多糖溶于水中；
VI、将上述水浴后的原料渣水分离后，将水放入浓缩罐中进行真空浓缩，直至浓缩成膏状物；
VII、将上述浓缩后的膏状物放入于膏状物2倍的95％的乙醇中脱水，形成多糖浓膏；
VIII、将上述多糖浓膏在50℃以下进行低温真空干燥；
IX、将上述经过真空干燥的多糖浓膏使用高速离心机脱水进行第二次醇析；
X、使用冷冻干燥机将上述二次醇析脱水后的多糖浓膏进行干燥；
XI、将上述冷冻干燥后的多糖浓膏进行粉碎包装即成灵芝多糖成品。
实施例二：
采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，该方法步骤如下：
I、采用灵健2号灵芝菌株为菌种，配制成母液待用；
II、取重量份数比的玉米粉210g、磷酸二氢钾1.05g、蔗糖21g、琼脂21g、蛋白胨3.15g、硫酸镁0.8g、硫酸铵0.6g、酵母粉1.3g混合均匀制成培养基；
III、取上述菌种母液及培养基，将其按重量份数比为菌种母液∶培养基＝1∶2的比例充分混合并搅拌均匀，然后放入固体发酵箱中发酵，进行无菌培养，发酵温度为30℃，pH值为5，发酵时间为21天，发酵比风量1∶1.0；
IV、将上述发酵无菌培养后的原料放入50℃的水中进行水浴，水浴时间为6小时，同时以30转/分的速度进行搅拌，将多糖溶于水中；
VI、将上述水浴后的原料渣水分离后，将水放入浓缩罐中进行真空浓缩，直至浓缩成膏状物；
VII、将上述浓缩后的膏状物放入于膏状物2倍的95％的乙醇中脱水，形成多糖浓膏；
VIII、将上述多糖浓膏在50℃以下进行低温真空干燥；
IX、将上述经过真空干燥的多糖浓膏使用高速离心机脱水进行第二次醇析；
X、使用冷冻干燥机将上述二次醇析脱水后的多糖浓膏进行干燥；
XI、将上述冷冻干燥后的多糖浓膏进行粉碎包装即成灵芝多糖成品。
实施例三：
采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，该方法步骤如下：
I、采用灵健2号灵芝菌株为菌种，配制成母液待用；
II、取重量份数比的玉米粉205g、磷酸二氢钾1.03g、蔗糖20.5g、琼脂20.5g、蛋白胨2.9g、硫酸镁0.7g、硫酸铵0.5g、酵母粉0.9g份混合均匀制成培养基；
III、取上述菌种母液及培养基，将其按重量份数比为菌种母液∶培养基＝1∶1.9的比例充分混合并搅拌均匀，然后放入固体发酵箱中发酵，进行无菌培养，发酵温度为29℃，pH值为5，发酵时间为21天，发酵比风量1∶0.8；
IV、将上述发酵无菌培养后的原料放入50℃的水中进行水浴，水浴时间为4小时，同时以25转/分的速度进行搅拌，将多糖溶于水中；
VI、将上述水浴后的原料渣水分离后，将水放入浓缩罐中进行真空浓缩，直至浓缩成膏状物；
VII、将上述浓缩后的膏状物放入于膏状物2倍的95％的乙醇中脱水，形成多糖浓膏；
VIII、将上述多糖浓膏在50℃以下进行低温真空干燥；
IX、将上述经过真空干燥的多糖浓膏使用高速离心机脱水进行第二次醇析；
X、使用冷冻干燥机将上述二次醇析脱水后的多糖浓膏进行干燥；
XI、将上述冷冻干燥后的多糖浓膏进行粉碎包装即成灵芝多糖成品。
Claims (1)
1、采用固体发酵提取灵芝多糖的方法，其特征在于：该方法步骤如下：
I、采用灵健2号灵芝菌株为菌种，配制成母液待用；
II、取重量份数比的玉米粉190-210份、磷酸二氢钾0.95-1.05份、蔗糖19-21份、琼脂19-21份、蛋白胨2.85-3.15份、硫酸镁0.2-0.8份、硫酸铵0.3-0.6份、酵母粉0.7-1.3份混合均匀制成培养基；
III、取上述菌种母液及培养基，将其按重量份数比为菌种母液∶培养基＝1∶(1.7-2)的比例充分混合并搅拌均匀，然后放入固体发酵箱中发酵，进行无菌培养，发酵温度为28-30℃，pH值为5，发酵时间为21天，发酵比风量1∶(0.5-1.0)；
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