CN1316511A - 食用菌液体菌种生产方法和设备 - Google Patents

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Abstract

食用菌液体菌种生产方法和设备。1、培养基是土豆汁、红糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸氢二钾、硫酸锌、VB1、琼脂等，pH7.0。2、培养器是在罐体内有空气提升管，提升管下面是空气喷嘴，罐体内有电加热捧。空气通过压缩机、缓冲罐、过滤器进入罐内对培养基进行搅拌，经3－5天培养，生产出合格的菌种。

Description

食用菌液体菌种生产方法和设备
本发明涉及工业化食用菌液体制种的工艺及相应的培养器。
食用菌液体培养基一般用玉米面、淀粉、麸皮等，因其分子量大，菌丝体在培养初期难以利用，因而在培养初期生长缓慢。另外，生产液体菌种的培养器都采用机械搅拌原理，这使培养器造的很大，成本增加，容易产生污染。这些问题都不利于食用菌液体菌种的工业化生产。
本发明的目的就是为了解决现有问题而提供一种食用菌液体菌种生产方法和设备。
本发明的目的可以通过以下措施来达到：
Ⅰ、培养基生产
a、土豆汁的制作：
土豆汁洗净切丁，加5-10倍水磨浆，将土豆浆加热至60-90℃，然后加入土豆量万分之三的α-淀粉酶，反应30-60分钟，间歇搅拌，反应结束后过滤，取滤液备用。
b、液体培养基配方：以1000ml为单位
土豆汁20-80％、红糖1-5％、蛋白胨0.2-1％、硫酸镁0.08-0.2％、磷酸氢二钾0.08-0.2％、硫酸锌0.001-0.01％、VB1 0.005-0.02％、琼脂0.05-0.5％、余量为水，PH值为7.0。
Ⅱ、液体菌种生产
a、一级菌种生产：
取新鲜斜面菌种，在无菌操作下将1-2cm2的斜面菌块接入通过121℃30分钟灭菌并已冷却至室温的盛有液体培养基的三角瓶内，三角瓶规格1000ml，装量250ml，接种后将三角瓶放入摇瓶培养，培养条件是往复式摇瓶机振幅80mm，往复次数90次/分，温度26-28℃，振荡培养7-10天，形成菌球，经检验无杂菌污染后，以10％的接种量接入二级种子瓶。
b、二级菌种生产：
二级种子瓶的配方、装量、培养条件同一级种子瓶相同，经振荡培养3-5天，形成菌球，经检验无污染后，并瓶备用。
c、液体菌种生产：
使用空气提升搅拌培养器，通过空气搅拌培养基生产液体菌种。打开该培养器罐体的投料口，洗净后，投入50-60L的液体培养基。①灭菌处理：对培养基先加热到100℃，然后向罐体内输入2kg/cm2压力的蒸汽，使培养基温度提高到121℃，排气，维持30分钟。②发酵处理：即罐体夹套通过冷却水使培养基降温到100℃时，通过罐体底部的空气喷咀向培养基充气搅拌，输入无菌空气，维持罐压0.3kg/cm2，待温度降至30℃时，开启罐体投料口，并用火焰圈保护投料口，通过火焰圈投入3-6L的二级成熟菌种，立即盖上投料口，恢复罐压至0.3kg/cm2，保持温度20-30℃，通无菌空气培养3-5天，形成菌球。经检验合格后，即可通过灭菌后的接种枪，将液体菌种注入到栽培袋内。
Ⅲ、生产液体菌种的空气提升搅拌生物培养器
这种培养器包括支架、罐体、冷却水套、加热器、电子测温、手动测温、投料口、排料口、进水口、排水口、取样口、控制箱、压缩机、过滤器，具体结构是在罐体(3)内设置有空气提升管(7)，空气提升管下面是空气喷咀(13)，空气喷咀上罩有分子塞(12)，空气提升管上端内设置有固定板(26)，固定板通过螺杆(27)与分流板(6)连接在一起，分流板与空气提升管上端有间隙，在罐体里面下部设置有电加热管(11)，在罐体外包有一层冷却水套(9)。
空气提升管的高度与其周围罐体内径之比是4∶1。
空气提升管直径为20-100毫米。
空气喷咀直径为0.5-5毫米。
圆形罐体上粗下细，罐体内的喷咀通过进气管(16)、过滤器(17)、缓冲罐(19)接压缩机(18)；在细罐体外面包有一层冷却水套(9)，水套上设置进水口(15)和排水口(8)；在细罐体设置取样口(10)；在粗罐体顶部设置有压力表(4)、放气阀(5)、安全阀(22)、观察孔(21)、投料口(20)，在其侧面设置有观察孔(25)。
控制箱(1)内的电路是启动按扭通过继电器K1接通温空器WSK，指示灯XD1亮，WSK接通加热器KM1，指示灯XD2亮，同时转换开关使加热器KM2工作，XD3亮，当温度达到上限值时，WSK断开，KM1停止工作，KM2照常工作，当温度低于下限值时，WSK闭合，KM1工作。计时器SJ接蜂鸣器FM。气泵M由开关NK2控制。
附图说明：
图1是本发明的总体示意图，其中(1)控制箱，(2)电子测温，(3)罐体，(4)压力表，(5)放气阀，(6)分流板，(7)空气提升管，(8)排水口，(9)冷却水套，(10)取样口，(11)电热管，(12)分子塞，(13)空气喷咀，(14)温度计，(15)进水口，(16)进气管，(17)过滤器，(18)压缩机，(19)缓冲罐。
图2是图3中A-A剖示图，其中(22)安全阀。
图3是图1中Ⅰ向视图，其中(20)投料口，(21)观察孔。
图4是图1中罐体的侧示图，其中(23)支架，(24)排料口，(25)观察孔。
图5是图1中空气提升示意图，其中(28)固定支架。
图6是图1中分流板示意图，其中(27)螺杆。
图7是图5中Ⅱ向视图，其中(26)固定板。
图8是图1中控制箱内的电路原理图。
本发明具有如下优点：
1、生产周期短，一般需3-5天。
2、菌龄同步，出菇整齐。
3、成本低，是固体菌种的1/2。
4、接种简便，减少污染。
5、便于工业化生产。
下面对本发明做进一步说明：
这种生物培养器可以进行各种液体菌种的培养，主要技术是采用空气搅拌式原理，即在罐体内部固定有空气提升管，培养量在空气作用下进行搅拌，空气喷咀上罩有分子塞，可以使空气进入，而水份被隔离。
这种培养器对培养基的加热及温度控制由控制电路完成，电路的工作原理是总电源开关合上以后，按一下启动按扭，K1继电器动作，K1由常开点变成常合点XD1工作指示灯亮，WSK温控器给电工作，WSK由常开点变成常合点，KM1加热管1工作，XD2灯亮，由转换开关在灭菌侧，所以KM2、XD2加热管2也同时工作。
当灭菌温度到达上限值后，WSK由常合变成常开，加热管1停止加热，加热管2照常工作，当温度低于限值时，WSK由常开变常合，加热管1又工作，自动巡环控制，温度在灭菌要求温度内工作，工作选择开关打到灭菌时SJ计时器开始计时，当灭菌时间达到设定值时，SJ由常开变常合SM蜂鸣器给电工作报警，按停止按扭FM继电报警停止。
M气泵由NK2开关控制，给电或断开。
液体培养基配方：
土豆汁50％、红糖2％、蛋白胨0.5％、硫酸镁0.15％，磷酸氢二钾0.15％、硫酸锌0.007％、VB110mg/L、琼脂0.1％、余量为水，至1000ml。PH7.0。

Claims (7)

1、食用菌液体菌种生产方法，其特征是：
Ⅰ、培养基生产
a、土豆汁的制作：
土豆汁洗净切丁，加5-10倍水磨浆，将土豆浆加热至60-90℃，然后加入土豆量万分之三的α-淀粉酶，反应30-60分钟，间歇搅拌，反应结束后过滤，取滤液备用；
b、液体培养基配方：以1000ml为单位
土豆汁20-80％、红糖1-5％、蛋白胨0.2-1％、硫酸镁0.08-0.2％、磷酸氢二钾0.08-0.2％、硫酸锌0.001-0.01％、VB1 0.005-0.02％、琼脂0.05-0.5％、余量为水，PH值为7.0；
Ⅱ、液体菌种生产
a、一级菌种生产：
取新鲜斜面菌种，在无菌操作下将1-2cm2的斜面菌块接入通过121℃30分钟灭菌并已冷却至室温的盛有液体培养基的三角瓶内，三角瓶规格1000ml，装量250ml，接种后将三角瓶放入摇瓶机培养，培养条件是往复式摇瓶机振幅80mm，往复次数90次/分，温度26-28℃，振荡培养7-10天，形成菌球，经检验无杂菌污染后，以10％的接种量接入二级种子瓶；
b、二级菌种生产：
二级种子瓶的配方、装量、培养条件同一级种子瓶相同，经振荡培养3-5天，形成菌球，经检验无污染后，并瓶备同；
c、液体菌种生产：
使用空气提升搅拌培养器，通过空气搅拌培养基生产液体菌种，打开该培养器罐体的投料口，洗净后，投入50-60L的液体培养基，①灭菌处理：对培养基先加热到100℃，然后向罐体内输入2kg/cm2压力的蒸汽，使培养基温度提高到121℃，排气，维持30分钟；②发酵处理：即罐体夹套通过冷却水使培养基降温到100℃时，通过罐体底部的空气喷咀向培养基充气搅拌，输入无菌空气，维持罐压0.3kg/cm2，待温度降至30℃时，开启罐体投料口，并用火焰圈保护投料口，通过火焰圈投入3-6L的二级成熟菌种，立即盖上投料口，恢复罐压至0.3kg/cm2，保持温度20-30℃通无菌空气培养3-5天，形成菌球；经检验合格后，即可通过灭菌后的接种枪，将液体菌种注入到栽培袋内。
2、生产液体菌种的空气提升搅拌生物培养器，它包括支架、罐体、冷却水套、加热器、电子测温、手动测温、投料口、排料口、进水口、排水口、取样口、控制箱、压缩机、过滤器，其特征在于是在罐体(3)内设置有空气提升管(7)，空气提升管下面是空气喷咀(13)，空气喷咀上罩有分子塞(12)，空气提升管上端内设置有固定板(26)，固定板通过螺杆(27)与分流板(6)连接在一起，分流板与空气提升管上端有间隙，在罐体里面下部设置有电加热管(11)，在罐体外包有一层冷却水套(9)。
3、根据权利要求2所说的培养器，其特征是空气提升管的高度与其周围罐体内径之比是4∶1。
4、根据权利要求2所说的培养器，其特征是空气提升管直径为20-100毫米。
5、根据权利要求2所说的培养器，其特征是空气喷咀直径为0.5-5毫米。
6、根据权利要求2所说的培养器，其特征是圆形罐体上粗下细，罐体内的喷咀通过进气管(16)、过滤器(17)、缓冲罐(19)接压缩机(18)；在细罐体外面包有一层冷却水套(9)；水套上设置进水口(15)和排水口(8)；在细罐体设置取样口(10)；在粗罐体顶部设置有压力表(4)、放气阀(5)、安全阀(22)、观察孔(21)、投料口(20)，在其侧面设置有观察孔(25)。
7、根据权利要求2所说的培养器，其特征是控制箱(1)内的电路是启动按扭通过继电器K1接通温空器WSK，指示灯XD1亮，WSK接通加热器KM1，指示灯XD2亮，同时转换开关使加热器KM2工作，XD3亮，当温度达到上限值时，WSK断开，KM1停止工作，KM2照常工作，当温度低于下限值时，WSK闭合，KM1工作，计时器SJ接蜂鸣器FM，气泵M由开关NK2控制。
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