CN1313594C - 药食两用真菌细胞液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备药食两用真菌细胞液的方法。将采用常规深层发酵所制得的真菌活体菌液pH值调至6.1-6.7,升温至40-50℃,保持15-5小时,真菌活体菌液中自身产生的生物酶使其细胞壁破解,得到破壁真菌细胞液原液,细胞液原液经初滤、精滤、真空减压脱气、装瓶封盖、灭菌后制得真菌细胞液成品。本发明的方法适用于如冬虫夏草、猴头、灵芝、牛排菌、羊肚菌、虎奶菌、灰树花、茯苓、香菇、密环菌、雷丸、北虫草等所有珍稀真菌的活体菌液的细胞破壁而制得其细胞液。本发明的制备方法工艺简单,制备的药食两用真菌细胞液有效成分接近天然真菌,其营养丰富,药效稳定,易于被人体吸收,服用安全。本发明易于工业化生产应用。
Description
技术领域
本发明涉及药食两用真菌细胞液的制备方法,属于生物工程技术领域。
背景技术
随着社会的进步,崇尚健康、提高生活质量已经成为当今时尚,保持健康体魄、延缓衰老、延长生命更是所有人的追求,于是乎,一些保健药品、健康食品应运而生。人们在享受现代文明带来的便利生活的同时没有忘记大自然对人类的恩赐,近年来,一些天然、绿色食品成为餐桌上的新宠,特别是一些药食两用真菌类食品、制剂更是倍加受到青睐。国内外对此类保健制品的研究开发工作正方兴未艾,特别是国内,在这方面的研究开发更是如火如荼。这些药食两用真菌制剂,不但能够增强体魄,在治疗心血管疾病、肝脏疾病、肾脏疾病、呼吸系统疾病、血液病以及作为抗肿瘤治疗的辅助用药等方面均取得了令人满意的疗效。上述制剂中最具代表性的是药食两用真菌类口服液。现有技术中公开的药食两用真菌类口服液的制备过程中,对深层发酵液的处理方法是使用化学试剂将真菌细胞与培养物残基结合物一并沉淀,取上清液为口服液原液。该制备方法存在的缺陷是:化学试剂的加入破坏了药食两用真菌的成分并使其改变品质,给服用者带来不适应和不安全性,而且还失去了药食两用真菌的天然性,沉淀物造成了有效成分的损失;其次,现有技术中公开的以药食两用真菌的菌丝体为主要原料生产的药食两用制剂不利于人体吸收,尤其对年老体弱或病人来说,其疗效和保健功能不明显。上述缺陷的存在,影响了药食两用真菌保健价值的正常发挥,影响了以药食两用真菌为主要原料的产品开发和产业发展。
发明内容
本发明的目的是提供一种药食两用真菌细胞液的制备方法,所制得的产品近似药食两用真菌天然性,解决了有效成分的安全性以及含量的稳定性问题并提高了药食两用真菌的药效、保健作用和服用的安全性。
本发明的构思是这样的。本发明的特点是:对经常规深层发酵制得的活体菌液的处理不使用如醋酸锌等化学试剂,以保证真菌中的特殊化学成分不受破坏和改性,保证了其药效和安全性。此外,本发明摒弃了以往的超微粉碎观念使真菌细胞液成为破壁细胞液。因为超微技术适用于固体介质,而不适合于对活体菌液细胞壁的破解。特别是超微粉碎产生一定温度将在某种程度上破坏加工物的有效成分。本发明的技术创新点是活体真菌液在一定温度条件下,真菌活体菌液中的培养液自身产生生物酶将细胞连键—氢键阻断,使真菌细胞壁得以破解,由此得到真菌破壁细胞液。
具体地,本发明的方法描述为:
将采用常规深层发酵所制得的真菌活体菌液pH值调至6.1-6.7,升温至40-50℃,保持15-5小时,由真菌活体菌液中自身产生的生物酶将其细胞壁破解,得到破壁真菌细胞液原液,细胞液原液经初滤、精滤、真空减压脱气、装瓶封盖、灭菌后制得真菌细胞液成品。
本发明的方法适用于如冬虫夏草、猴头、灵芝、牛排菌、羊肚菌、虎奶菌、灰树花、茯苓、香菇、密环菌、雷丸、北虫草等所有珍稀真菌的活体菌液的细胞破壁而制得其细胞液。
本发明取得的效果是:利用本发明的方法制得的真菌菌丝体的含量超过国家药典标定含量的8.3倍;本发明制得的细胞液原液超过国家药典标定含量的2.7倍;真菌细胞液既可根据需要稀释,还可根据需要浓缩,并可以根据需要添加其它液剂;本发明的方法还可以方便提取其中某一专用成分或综合使用其全部有效成分,加工成各种剂型的药食两用制剂,以满足不同用途的需要。
具体实施方式
以下通过制备冬虫夏草真菌细胞液为例来说明本发明。
(1)冬虫夏草斜面菌种的培养
培养基组成成分为:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、蚕蛹粉0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、琼脂2%,其余为无菌水(可用灭菌的自来水);
培养条件为:温度20℃,培养时间15天;
取天然冬虫夏草进行组织分离,在培养基上进行培养,制得斜面菌种;
(2)液体菌种的制备
按培养液总质量1公斤计,其组成为:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、1克蚕蛹粉的水提液,其余为无菌水(可用灭菌的自来水);
取上述培养基装三角瓶约1/4,121℃灭菌30分钟后冷却至25℃,将固体菌种1cm2若干块在无菌条件下接入,经7天左右则成菌悬液并显示菌丝片段和大量菌丝球充满发酵变清液,即为液体菌种:
(3)深层发酵扩大培养
将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养器中,接入量为培养液的10%,培养液经灭菌后在无菌条件下接入。而后的二级、三级深层发酵培养依此类推,当培养液变清并有大量菌丝片段和菌丝球出现时中止再进行下一个程序;
(4)活体菌液细胞破壁
将活体菌液pH值调至6.1后,升温至40℃,保持15小时,得到破壁细胞液原液;
(5)过滤、脱气、装瓶、灭菌
将上述细胞液原液经过过滤机初滤、精滤、真空减压脱气、脱炭处理,即可装瓶灭菌得到可直接服用的冬虫夏草口服液原液。
该原液可添加红枣汁或酸枣汁等调节口感。
实施例2
(1)冬虫夏草斜面菌种的培养
培养基成分:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、蚕蛹粉0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、琼脂2%,其余为无菌水(可用经灭菌的自来水);
培养条件为:温度24℃,培养时间10天;
取天然冬虫夏草进行组织分离,在培养基上进行培养,制得斜面菌种;
(2)液体菌种的制备
按培养液总质量1公斤计,组成为:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、5克蚕蛹粉水提液,其余为无菌水(可用灭菌的自来水);
取上述培养基装三角瓶约1/4,121℃灭菌30分钟后冷却至25℃,将固体菌种1cm2若干块在无菌条件下接入,经7天左右则成菌悬液并显示菌丝片段和大量菌丝球充满发酵交清液,即为液体菌种:
(3)深层发酵扩大培养
将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养器中,接入量为培养液的10%,培养液经灭菌后在无菌条件下接入。而后的二级、三级深层发酵培养依此类推,当培养液变清并有大量菌丝片段和菌丝球出现时中止再进行下一个程序;
(4)活体菌液细胞破壁
将活体菌液pH值调至6.4后,升温至45℃,保持10小时,得到破壁细胞液原液;
(5)过滤、脱气、装瓶、灭菌
将上述细胞液原液经过过滤机初滤、精滤、真空减压脱气、脱炭处理,即可装瓶灭菌得到可直接服用的冬虫夏草口服液原液。
该原液可添加红枣汁或酸枣汁等调节口感。
实施例3
(1)冬虫夏草斜面菌种的培养
培养基成分为:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、蚕蛹粉0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、琼脂2%,其余为无菌水(可用灭菌的自来水);
培养条件为:温度26℃,培养时间7天;
取天然冬虫夏草进行组织分离,在培养基上进行培养,制得斜面菌种;
(2)液体菌种的制备
按培养液总质量1公斤计,组成分:葡萄糖2%、蛋白胨0.1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、10克蚕蛹粉水提液,其余为无菌水(可用灭菌的自来水);
取上述培养基装三角瓶约1/4,121℃灭菌30分钟后冷却制25℃,将固体菌种1cm2若干块在无菌条件下接入,经7天左右则成菌悬液并显示菌丝片段和大量菌丝球充满发酵变清液,即为液体菌种:
(3)深层发酵扩大培养
将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养器中,接入量为培养液的10%,培养液经灭菌后在无菌条件下接入。而后的二级、三级深层发酵培养依此类推,当培养液变清并有大量菌丝片段和菌丝球出现时中止再进行下一个程序;
(4)活体菌液细胞破壁
将活体菌液pH值调至6.7后,升温至50℃,保持5小时,得到破壁细胞液原液;
(5)过滤、脱气、装瓶、灭菌
将上述细胞液原液经过过滤机初滤、精滤、真空减压脱气、脱炭处理,即可装瓶灭菌得到可直接服用的冬虫夏草口服液原液。
该原液可添加红枣汁或酸枣汁等调节口感。
将上述实施例中的冬虫夏草换成如猴头、灵芝、牛排菌、羊肚菌、虎奶菌、灰树花、茯苓、香菇、密环菌、雷丸、北虫草等珍稀真菌中的一种,通过采用常规方法制备固体菌种、液体菌种、深层发酵扩大培养,将制得的活体菌液,采用如上述实施例中的步骤(4)、(5)相同的方法即可制得相应的药食两用真菌细胞液成品。
Claims (2)
1、药食两用真菌细胞液的制备方法,其特征是:将采用常规深层发酵所制得的药食两用真菌活体菌液pH值调至6.1-6.7,升温至40-50℃,保持15-5小时,活体菌液中自身产生的生物酶使其细胞壁破解,得到破壁细胞液原液,细胞液原液经初滤、精滤、真空减压脱气、装瓶封盖、灭菌后得真菌细胞液成品。
2、按权利要求1所述的真菌细胞液的制备方法,其特征是:所说的药食两用真菌为冬虫夏草、猴头、灵芝、牛排菌、羊肚菌、虎奶菌、灰树花、茯苓、香菇、密环菌、雷丸、北虫草。
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蒙古口蘑不同菌株及不同处理菌液对小麦、甘蓝促进生长效应的研究 阎伟 等,内蒙古农业大学学报,第23卷第4期 2002 * |
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