CN1297285C - 治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 - Google Patents
治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1297285C CN1297285C CNB021119961A CN02111996A CN1297285C CN 1297285 C CN1297285 C CN 1297285C CN B021119961 A CNB021119961 A CN B021119961A CN 02111996 A CN02111996 A CN 02111996A CN 1297285 C CN1297285 C CN 1297285C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- serratia marcescens
- treatment
- resisting
- serratia
- seedling
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明治疗用粘质沙雷氏菌菌苗，用于抗肿瘤及调节免疫功能。该药物可以治疗癌性胸腹水和肿瘤，对一些免疫性疾病有辅助的治疗作用。粘质沙雷氏菌是一种具有抗肿瘤作用的菌种，其抗肿瘤作用诱导内原性抗肿瘤免疫因子，菌种本身对肿瘤细胞有中等强度的直接细胞毒。研究资料提供了粘质沙雷氏菌菌苗治疗与免疫功能密切相关的一些疾病疗效，粘质沙雷氏菌抗原有抗过敏作用，有提高细胞免疫及体液免疫的功能，有广泛药用开发前景。
Description
本发明涉及用粘质沙雷氏菌制备的药物及其用途。
本研究室从蜚蠊内脏中分离纯化出一株粘质沙雷氏菌S311株。该菌株为革兰氏阴性杆菌，周身鞭毛，有动力，无荚膜及芽胞，该菌在一般需氧条件下，37℃普通培养基上生长良好，在普通琼脂平板上，菌落光滑湿润，凸起，边缘整齐，呈圆形，生化反应：能发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇、苦杏仁甙，产酸不产气。不发酵鼠李糖、阿拉伯糖、密二糖。能产生胞外脱氧核糖核酸酶。菌种编号：CGMCCNO.0744，分类命名：粘质沙雷氏菌Serratia marcescens.
粘质沙雷氏菌具有抗肿瘤作用，采用分离动物肠道细菌，对有抑瘤作用的细菌比较筛选发现，肠道菌中粘质沙雷氏菌有直接杀伤肿瘤细胞的作用。粘质沙雷氏菌灭活后的菌苗仍然保持有中等的直接细胞毒。粘质沙雷氏菌苗或者粗提物(细胞膜性结构及其核糖体等)可以制成抗肿瘤的免疫调节剂。用粘质沙雷氏菌制备的治疗药物或免疫制剂的治疗范围包括：抗肿瘤、治疗癌性胸腹水、免疫调节、辅助放化疗治疗、升高白细胞、治疗牛皮癣、治疗尖锐湿疣、治疗红斑狼疮发热及皮肤红斑、治疗白塞氏综合症。
1.粘质沙雷氏菌苗是很好的免疫诱导剂
1.1对脾脏的激活作用
S311菌苗主要对网状内皮系统有免疫促进作用，能引起免疫小鼠脾脏肿大。小鼠腹腔一次性给药250亿/kg(8mg/kg)，3天起脾指数开始增加，7-14天达最高峰，(见表1)。
表1 S311菌苗免疫天数与脾指数的关系
| 免疫天数 | 脾重(mg)/体重(g) | 脾指数 | P | |
| 对照组 | 实验组 | |||
| 37101420 | 5.75±0.533.87±0.424.75±0.674.08±0.584.50±0.68 | 8.52±0.758.05±0.639.35±0.886.65±0.556.22±0.72 | 1.482.081.971.631.38 | ＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05 |
1.1.2对巨噬细胞吞噬功能的作用
S311菌苗可以增强小鼠巨噬细胞吞噬功能。按125亿/kg(4mg)/kg体重，腹腔一次给药，7天后C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力增加6.31倍，与对照组比较呈非常显著性差异(P＜0.01)，不同给药剂量与吞噬指数的关系见表2。
表2 S311对C57 BL/6小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
| 药物 | 剂量亿/kg | 动物数(只) | 腹腔巨噬细胞数×104/ml | 细胞吞噬剂量ug/5×104细胞 | 吞噬指数 |
| NSS311S311S311S311 | 0.5ml31.2562.5125250 | 1010101010 | 102.0±25.3120.0±27.8143.5±32.1178.1±29.9168.0±25.1 | 0.118±0.1960.370±0.175**0.540±0.196**0.745±0.177***0.660±0.180*** | 3.144.586.315.59 |
注释：与对照组比较 **P＜0.05 ***P＜0.01
1.2诱导肿瘤坏死因子(TNF)的作用
S311菌苗可以体外诱导小鼠巨噬细胞TNF-α的产生。在C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液中加入5×106菌数/ml，诱导TNF杀伤活性最高，与基因重组TNF-α样品比较，相当于2000U/ml剂量范围。经S311菌苗刺激3小时的巨噬细胞上清液即可测出TNF的杀伤活性，12小时产生的活性最高，以后随时间增加活性不再增加，反而逐渐下降，见图1。
1.3诱生小鼠干扰素的结果
S311菌苗具有较强的诱导小鼠脾细胞产生干扰素的能力。体内试验，将S311菌苗免疫4天的小鼠脾细胞体外培养，干扰素活性出现，免疫7天达高峰(7.47log2U±0.31log2U/ml)，以后逐渐下降。体外试验，正常小鼠脾细胞体外培养，加0.1亿菌苗/ml，12小时可以测出干扰素活性，48小时达到高峰(8.23log2U/ml±0.30log2U/ml)。
1.4对造血系统影响的研究
小鼠升白试验：按中国生物制品规程2000年版暂行规定，第20页金黄色葡萄球菌滤液制剂制造及检定规程附录3《升白细胞试验》进行。结果：环磷酰胺对照组与正常对照组比较白细胞下降，统计学有非常显著性差异，S311菌苗给药组与环磷酰胺对照组比较，给药组白细胞上升，统计学有非常显著性差异，连续2批小白鼠试验结果一致。
2粘质沙雷氏菌苗有抗肿瘤作用
2.1抑瘤试验
2.1.体外肿瘤细胞增殖抑制试验：对人体肠癌M7609、小鼠白血病P388、人体肺腺癌LAX、髓性白血病K562、人体卵巢癌ao10/17，IC剂量(半数致死剂量)分别为3.94亿(126μg/ml)、3.3亿(105.55μg/ml)、5.5亿(176.63μg/ml)、5.2亿(168.68μg/ml)、及7.8亿(250.4μg/ml)。结论：粘质沙雷氏菌苗对肿瘤细胞有中等疗效的直接细胞毒作用。
2.2.1体内抑瘤试验：粘质沙雷氏菌苗按62.5亿/kg、125亿/kg、187.5亿/kg三个剂量隔日给药5次，三种瘤谱的三次重复试验结果如下：
2.1.2对艾氏腹水癌的抑制：生命延长率分别为46.28％±2.83％；54.17％±5.66％；57.71％±6.02％。按死亡抑制率计算，腹腔给药的抑制率为90％。静脉给药抑瘤效果不显著。
2.1.3对P388白血病腹水癌的抑制：腹腔给药生命延长率为48.72％±8％；60.00％±11.44％；61.36％±4.74％。静脉给药效果不显著。
2.1.4对B16黑色素瘤肺转移的抑制；腹腔给药生命延长率分别为46.08％±5.27％；51.68％±6.00％；57.73％±3.18％。静脉给药生命延长率分别为50.39％±6.51％；58.25％±8.01％；65.03％±7.48％。
2.1.5腹腔内给药对小鼠肝癌HCA脾接种肝转移生命延长率分别为42.6％、49％、56.8％。
2.1.6小鼠取脾接种HCA肝癌细胞，采用定量逆转录-聚合酶链反应技术(reverse transcriptase-polymerase chain reaction RT-PCR)检测粘质沙雷氏菌苗给药组与生理盐水对照组nm23基因、Tiam-1基因的表达水平。结果：粘质沙雷氏菌苗可明显抑制小鼠肝癌HCA肿瘤转移相关基因nm23-1和Tiam-1的表达。S311菌苗给药组与生理盐水对照组小鼠比较，肿瘤原发灶及转移灶nm23-1癌转移相关基因表达的抑制率分别为45.2％、46.1％。Tiam-1基因表达的抑制率分别为29.1％、28.7％。表明粘质沙雷氏菌苗对小鼠HCA肝转移的抑制作用与nm23-1、Tiam-1癌基因的表达抑制有关。
3、临床研究
3.1由上海医科大学附属肿瘤医院、江苏省肿瘤医院、浙江省肿瘤医院、天津室肿瘤医院、北京市肿瘤医院、中山医科大学附属肿瘤医院、北京胸部肿瘤医院开展的粘质沙雷氏治疗癌性胸水250例临观察，有效率92.1％，高于目前现有治疗癌性胸水的药物。
3.2南京鼓楼医脑外科采用Omaya化疗囊瘤内注射粘质沙雷氏菌苗的治疗恶性神经胶质瘤的人体实验证明，采用粘质沙雷氏苗苗疗效非常显著，随访术后1～4年的18例患者，13例存活，其中3例存活3.5年，4例存活4.5年，其中恶性程度很高的9例II～III级和IV级患者，随访8例存活，而同等级同期对照组肿瘤患者1年内无一例存活(附图)。恶性神经胶质细胞是一种常见的预后不良的严重疾病，防治效果难以令人满意，死亡率高。粘质沙雷氏菌苗的局部应用，为恶性神经胶质细胞瘤的治疗提供了一种新的提高手术存活率的有效方法。
3.3南京鼓楼医院化疗介入科用粘质沙雷氏菌苗治疗癌性腹水10例，有效率(CR+PR)8例。治疗后9例病人KPS评分升高，生活质量得到改善。其中5例病人腹腔化疗失败者，经S311抗癌菌苗治疗后1例CR，1例PR。用粘质沙雷氏菌苗瘤内注射治疗实体瘤9例，肿瘤完全消退1例，肿瘤缩小50％以上4例，肿瘤缩小50％以内2例。
3.4上海中医大学附属岳阳医院肿瘤科，用粘质沙雷氏菌苗治疗晚期肿瘤病人16例，有效率7例，其中一例病人肺癌肝转移灶5枚2枚消失。
3.5海军401医院用粘质沙雷氏菌苗治疗银屑病42例，总有效率90.5％，治疗前后IgG、IgA、IgM有显著差异。结果表明，粘质沙雷氏菌苗治疗银屑病与免疫功能增强有关。
3.6湖北荆门第二人民医院血免科，用粘质沙雷氏菌苗治疗红斑狼疮56例，证明粘质沙雷氏菌苗有消退红斑狼疮皮肤红斑和治疗红斑狼疮高热的作用。并且在治疗干燥综合症及白塞氏综合症上取得疗效。
37海宁市性病检测中心用粘质沙雷氏菌苗治疗尖锐湿疣10例，痊愈有8例，有效2例，总有效率100％。目前南京中科院皮肤病研究所用粘质沙雷氏菌苗做免疫诱导剂，正在探讨粘质沙雷氏菌苗治疗尖锐湿疣的机理。
本发明具有创新性，其特点是：
该项研究成果获得国家生物制品一类新药证书，编号：国药证字(2000)S-05号。
用粘质沙雷氏菌苗研究成功治疗癌性胸腹水及肿瘤的药物，产品具有创新性。治疗用粘质沙雷氏菌菌苗对银屑病、红斑狼疮皮肤红斑、红斑狼疮性高热、尖锐湿疣、白塞氏综合正、干燥综合症有治疗作用，该研究结果，不仅为上述疾病的治疗提供了新方法，而且为这些疾病的研究提供了新思路。
粘质沙雷氏菌苗生产工艺简单。该研究结果除了部分已经发表论文外，大部分内容没有公开发表。
Claims (1)
1.治疗用粘质沙雷氏菌菌苗在制备治疗恶性神经胶质瘤药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB021119961A CN1297285C (zh) | 2002-06-05 | 2002-06-05 | 治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB021119961A CN1297285C (zh) | 2002-06-05 | 2002-06-05 | 治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1465353A CN1465353A (zh) | 2004-01-07 |
| CN1297285C true CN1297285C (zh) | 2007-01-31 |
Family
ID=34141831
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB021119961A Expired - Lifetime CN1297285C (zh) | 2002-06-05 | 2002-06-05 | 治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1297285C (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1331535C (zh) * | 2005-11-03 | 2007-08-15 | 中国人民解放军海军医学研究所 | 粘质沙雷氏菌菌苗在制备治疗支气管哮喘药物中的应用 |
| CN105726580B (zh) * | 2016-03-28 | 2020-01-03 | 蔡剑前 | 粘质沙雷氏菌菌苗在制备预防和/或治疗免疫系统功能缺陷类疾病及糖尿病药物中的应用 |
| CN105820973B (zh) * | 2016-03-28 | 2019-08-13 | 蔡剑前 | 一种粘质沙雷氏菌菌苗及其制备方法与应用 |
| CN105695365B (zh) * | 2016-03-28 | 2019-12-10 | 蔡剑前 | 一株粘质沙雷氏菌及其在抑制肿瘤中的应用 |
-
2002
- 2002-06-05 CN CNB021119961A patent/CN1297285C/zh not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1465353A (zh) | 2004-01-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Liu et al. | Tumor inhibition and improved immunity in mice treated with flavone from Cirsium japonicum DC | |
| Cho et al. | In vitro and in vivo anti-tumor effects of Astragalus membranaceus | |
| Tseng et al. | Antitumor and immunostimulating effects of Anoectochilus formosanus Hayata | |
| Namba | Maitake D-fraction: healing and preventive potential for cancer | |
| WO2019056404A1 (zh) | 脆弱拟杆菌在制备用于治疗和预防肿瘤的药物中的应用 | |
| CN114344325A (zh) | 脆弱拟杆菌及其两性离子荚膜多糖在制备用于防治生殖泌尿系统肿瘤的药物中的应用 | |
| CN1297285C (zh) | 治疗用粘质沙雷氏菌菌苗 | |
| Lin et al. | Antitumor effect of Ganoderma (Lingzhi) mediated by immunological mechanism and its clinical application | |
| CN111450124B (zh) | 阿克曼粘菌或普氏菌在增加肿瘤微环境γδT细胞积累并增强抗肿瘤免疫功能药物中的应用 | |
| CN115216423B (zh) | 一种动物双歧杆菌sf及其在医药和食品中的应用 | |
| CN105999096A (zh) | 一种用于增强免疫力的组合物与应用 | |
| CN103393711B (zh) | 磷酸酯化龙眼肉多糖在制药中的应用 | |
| CN101590092B (zh) | 一种用于治疗白血病的中药组合物及其制备方法 | |
| Hadad et al. | In vivo evidence: Repression of mucosal immune responses in mice with colon cancer following sustained administration of Streptococcus thermophiles | |
| CN1064836C (zh) | 当归内酯作为生物反应调节剂在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN101590103B (zh) | 一种用于治疗白血病的中药组合物及其制备方法 | |
| CN109078162A (zh) | 一种防治鼻癌的生物配制方法 | |
| CN1939311A (zh) | 一种新的人参皂苷苷元衍生物制剂及其用途 | |
| CN1302798C (zh) | 用于治疗与预防辐射线损伤的药物 | |
| CN1723956A (zh) | 一种治疗慢性胃炎、胃癌的药物及其制备方法 | |
| Huang et al. | Chemical components and cancer immunotherapy of Ganoderma | |
| JPH11228440A (ja) | 抗癌剤や免疫賦活剤などの薬剤及び健康飲食物 | |
| Yan et al. | Critical review on intestinal mucosal barrier protection effects of dietary polysaccharides | |
| CN1273173C (zh) | 用于治疗与预防辐射线损伤药物的用途 | |
| CN1951449B (zh) | 升高病人外周血白细胞数量的药物及用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20170605 Address after: 100027, No. 2, gate 3, 4, East Hospital, No. 13 South Sanlitun, Beijing, Chaoyang District Co-patentee after: Jin Feifei Patentee after: Jin Hai Address before: 100101 Beijing, Asian Sports Village, Chaoyang District overseas Chinese apartment 7-1-1501 Patentee before: Jin Hai |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CX01 | Expiry of patent term |
Granted publication date: 20070131 |
|
| CX01 | Expiry of patent term |