CN1294905C

CN1294905C - 一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物

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Publication number: CN1294905C
Application number: CNB2004100084588A
Authority: CN
Inventors: 陈迪华; 斯建勇; 潘瑞乐; 赵晓宏; 孙兰; 岳赟; 杨京; 沈连钢
Original assignee: Institute of Basic Medical Sciences of CAMS; Institute of Medicinal Plant Development of CAMS and PUMC
Current assignee: Institute of Basic Medical Sciences of CAMS; Institute of Medicinal Plant Development of CAMS and PUMC
Priority date: 2004-03-12
Filing date: 2004-03-12
Publication date: 2007-01-17
Anticipated expiration: 2024-03-12
Also published as: CN1666745A

Abstract

本发明公开了一种新的用于治疗骨质疏松症的药物组合物，该药物组合物含有下列重量份配比的活性成分：木豆素95～105、木豆素A3～13、木豆素C2～7、球松素55～65、牡荆素55～65、柚皮素二甲醚2～7、水杨酸15～25。本发明药物组合物加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型。本发明药物组合物具有促骨形成和抗骨吸收作用，可有效治疗更年期(或因病切除卵巢后)妇女、老年人和使用激素药物引起的骨质疏松症。本发明药物组合物同时具有消炎抗渗出作用，可用于外伤、烧伤和口疮的治疗。

Description

一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物，尤其涉及一种以植物中所提取的活性成分为原料制备而成的药物组合物及其制备方法。

背景技术

骨质疏松症是一种与内分泌功能有关的生理性退行性疾病，患者呈现骨组织显微结构受损、骨质变薄、骨脆性增加等病理改变，在老年人群、更年期妇女中临床发病率很高，给患者带来很大的痛苦。

目前，临床治疗骨质疏松症主要采用钙制剂和雌激素类两类药物，这两类药物，前者临床疗效不够理想，后者长期服用会有明显的毒副作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种能有效治疗骨质疏松症的无毒副作用的药物组合物。

本发明的目的是通过以下途径来实现的：

本发明药物组合物含有下述重量配比的活性成分：木豆素95～105，木豆素A 3～13，木豆素C 2～7，球松素55～65，牡荆素55～65，柚皮素二甲醚2～7，水杨酸15～25。

本发明药物组合物各活性成分的重量配比是：木豆素98～102，木豆素A 6～10，木豆素C 2～4，球松素58～62，牡荆素58～62，柚皮素二甲醚2～7，水杨酸15～25。

本发明药物组合物各活性成分的优选重量份是：木豆素100，木豆素A 8，木豆素C 2，球松素60，牡荆素62，柚皮素二甲醚2，水杨酸20。

本发明药物组合物的各活性成分可采用本领域的常规方法从木豆的全植物或树皮、叶、花、根、茎等部分中提取、分离、纯化得到。

本发明药物组合物各活性成分的一种优选的提取方法包括下列步骤：

将木豆的全植物或树皮、叶、花、根、茎等部分粉碎、撕碎或捣碎，用过面80％乙醇加热回流提取，每次1小时，将乙醇提取液合并后减压浓缩得乙醇浸膏，用热水(60～70℃)处理过滤，得滤液(A)和绿色粘膏状滤渣(B)。A部分以乙酸乙酯提取后得提取物，将该提取物以丙酮搅拌过滤，所得滤渣呈土黄色粉末状，即为牡荆素(粗品)，将滤液蒸干后溶于20mL氯仿，并以2％氢氧化钠提取，碱提取液加盐酸酸化后过滤，滤饼为水杨酸。

将绿色粘膏状物B加入200g层析粗硅胶拌匀晾干，研细后置预先装入100g硅胶的连续提取器内，先后以石油醚(30-60℃°)和二氯甲烷连续洗脱，依次得到C，D₁和D₂三种洗脱液。D₂部分有结晶析出，以少量冷二氯甲烷搅拌过滤，所得滤饼即为木豆素，将滤液蒸干后与D₁合并，加入适量丙酮搅拌过滤，弃去滤饼。滤液以硅胶柱层析，以石油醚-二氯甲烷(1∶9，1∶1)洗脱，先得木豆素A后得球松素。再用二氯甲烷洗脱硅胶柱先后得到E和F部分，将F部分加入适量石油醚，放置析晶，过滤，所得滤饼即为木豆素C，母液放入冰箱数天析晶过滤得柚皮素二甲醚。

本发明药物组合物的各活性成分的化学结构式及理化特性如下：

木豆素A 木豆素木豆素C

球松素牡荆素柚皮素二甲醚水杨酸

木豆素：C₂₁H₂₂O₄，白色结晶，熔点176-178℃(正己烷-CH₂Cl₂)、EIMS m/z338「M」⁺；¹H NMR(CDCl₃)δ：1.73，1.79(各3H，s，C＝C(CH₃)₂)，3.38(2H，d J＝7Hz，ph-CH₂-3.97(3H，s.OCH₃)，5.20(1H，t，J＝7Hz，-CH-C-)，6.62(1H，s，H-6)，6.80，7.82(各1H，d，J＝16Hz，-CH＝CH-)，7.20-7.60(5H，m，B环H)。

木豆素的乙酰化物：熔点158-160℃，EIMS m/z 380[M]⁺。

木豆素A：C₂₀H₂₂O₂。白色针晶，熔点76-78℃(正己烷-CH₂Cl₂)；

EIMS m/z 294「M」⁺；¹HNMK(CDCl₃)δ：1.76，1.83(各3H，s，C＝C(CH₃)₂)，3.43(2H，d J＝7Hz，ph-CH₂-)，3.90(3H，s.OCH₃)，5.28(1H，t，J＝7Hz，C＝CH)，6.69(2H，s，-CH＝CH)，7.08(2H，s，H-2，H-6)，7.30-7.62(5H，m，B环H)。

木豆素A的乙酰化物：熔点69～70℃；¹HNMR δ2.32(3H.s.OAc)。

木豆素C：C₂₀H₂₂O₂。白色针晶，熔点98-99℃(正己烷-CH₂Cl₂)；

EIMS m/z 294「M」⁺；¹HNMK(CDCl₃)δ：1.68，1.80(各3H，s，C＝C(CH₃)₂)，3.43(2H，d J＝7Hz，ph-CH₂-)，3.80(3H，s.OCH₃)，5.13(1H，t，J＝7Hz，-CH＝CH-)，6.40，6.71(各1H，d，J＝2.5，H-4，H-6)，6.84，7.38(各1H，d，J＝16Hz，-CH＝CH-)，7.21～7.58(5H，m，B环H)。

木豆素C的乙酰化物：熔点60～62℃；EIMS m/z 336[M]⁺；¹H NMR δ2.34(3H，s，OAc)。

球松素：C₁₀H₁₄O₄。白色片晶，熔点100-101℃(甲醇)；

EIMS m/z 270「M」⁺；¹HNMK(CDCl₃)δ：2.67-3.28(2H，m，J_AB＝17Hz，J_AX＝11Hz，J_BX＝5Hz，CH₂-3)，3.80(3H，s，OCH₃)，5.43(1H，dd，J_AX＝11Hz，J_BX＝5Hz，H-2)，6.08(2H，s，H-6，H-8)，7.45(5H，s，B环H)

球松素乙酰化物，熔点150～152℃(甲醇)；EIMS m/z 312[M]⁺；

牡制素：C₂₁H₂₀O₁₀。黄色细微方晶，熔点258-260℃(水-吡啶)；

EIMS m/z 414「M-H₂O」⁺；1HNMR(DMSO-d₆)δ：3.83(6H，br，s，葡萄糖基H)，4.65(1H，d，J＝8Hz，糖端基H)，6.28(1H，s.H-3)，6.79(1H，s，H-6)，6.90，8.03(各2H，d，J＝9Hz，B环H)，10.40，10.88，13.20(各1H，s，加D₂O消失，OH)牡荆素全乙酰化物，白色结晶，熔点256～258℃(HAc-EtOH)。

水杨酸：C₇H₆O₃，细微白色针晶，熔点160℃，EIMS m/z 133[M]⁺。

将提取纯化后的各活性成分研成细粉，按所述重量份数混合均匀，即得本发明药物组合物。本发明药物组合物可以单独使用，也可以用不同赋形剂加工成不同的剂型应用，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、酊剂、气雾剂、膏剂、滴丸剂、膜制剂等。优选为口服制剂。这些赋形剂包括制药工艺中常用的稀释剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、抗氧剂等

本发明药物组合物具有促进骨细胞形成及抑制骨细胞吸收作用，因而可以有效治疗妇女更年期(或卵巢切除)，老年人或药物引起的骨质疏松症。此外，本发明药物组合物还具有消炎、抗渗出作用，可用于外伤、烧伤和口疮的治疗。本发明药物组合物每天一次口服药，有效剂量为50～150mg/Kg。

以下通过具体实施方式对本发明有益效果作进一步说明，以下实施方式仅用以说明本发明，不限制本发明的范围。

具体实施方式

试验例1体外试验

用3H-胸腺嘧啶掺入法，用人的类成骨细胞HOSTE85与本发明药物组合物作用48小时，结果本发明药物在浓度为10^-8g/mL时显示受试细胞的增殖作用，与不给药的空白对照组比较有明显差异，P＜0.05。

试验例2体内试验

采用“肾虚骨质病变试验法”。即摘除受试雌性大鼠双侧卵巢致大鼠骨质疏松为模型(分为给药和未给药组)，以股骨抗弯强度(I)、矿物质含量(股骨灰分)(II)和子宫重量(II)为观察指标，摘除卵巢8天后给药，每日一次剂量为150、100、50(mg/kg)，连续灌胃给药28天，结果比较给药组(上述三种剂量)与未给药的对照组的指标I、II、III均有显著的差异，三个剂量组的P值分别为0.001，0.01和0.05，显示出量效关系。组织学检查，给药组骨质增厚，小梁骨明显增多。

试验例3消炎试验

小白鼠36只(由中国医学科学院动物中心提供、每只体重25g左右)分三组，每组12只，分别为给药组(I)、阳性对照组(II)和空白对照组(III)、小鼠禁食过夜(24小时)后灌胃给药，I组给本发明药物组合物120mg/kg(蒸馏水制成乳液)、II组给水杨酸118mg/kg、III组给等量蒸馏水，1小时后各组均用巴豆油致炎(每只0.05ml)，4小时后以角膜环取左右两耳、称重，统计结果表明，I组炎症抑制率为41.4％，II组为25.7％，与III组比较有明显差异，P值分别为0.01和0.05。

试验例4抗渗出试验

雄性小白鼠(20-22g)，随机分为空白对照组(8只)、给药组(10只)、禁食过夜(24小时)后灌胃给药(120mg/kg)，30分钟后由尾静脉注射2％靛蓝烟脂红(0.2ml/10g)，即时腹腔注射0.2ml/10g(0.41％醋酸)，30分钟后腹腔注射蒸馏水(2ml/10g)，即时处死。按摩40次/只，取腹水1mL，加入三氯醋酸(0.1mL)离心，取上清液，以分光光度计660nm波长下进行比色。结果表明，给药组的光密度与对照组有明显差异P＜0.05。

实施例本发明药物组合物各活性成分的提取、分离、纯化。

将木豆叶1kg粉碎后，用过面80％乙醇加热回流提取，每次1小时，合并的乙醇提取液减压浓缩得乙醇浸膏250g，以热水(60～70℃)处理过滤，得滤液(A)和绿色粘膏状滤渣(B)。A部分以乙酸乙酯提取得9g提取物，该提取物以丙酮搅拌过滤得310mg土黄色粉末状牡荆素(粗品)，滤液蒸干后溶于20mL氯仿，并以2％氢氧化钠提取，碱提取液加盐酸酸化后过滤，得100mg水杨酸。

绿色粘膏状物B加入200g层析粗硅胶拌匀晾干，研细后置预先装入100g硅胶的连续提取器内，先后以石油醚(30-60°)和二氯甲烷连续洗脱，依次得到C(3g)，D₁(11g)和D₂(14g)。

D₂部分有结晶析出，以少量冷二氯甲烷搅拌过滤，得木豆素(510mg)，滤液蒸干后与D₁合并，加入适量丙酮搅拌过滤，弃去滤饼。滤液以硅胶柱层析，以石油醚-二氯甲烷(1∶9，1∶1)洗脱依次得木豆素A(40mg)和球松素(300mg)。继用二氯甲烷洗脱硅胶柱得E和F部分，后者加入适量石油醚，放置析晶，过滤得木豆素C(12mg)，母液放入冰箱数天析晶过滤得柚皮素二甲醚(13mg)。

将所得的上述重量的各活性成分研成粉末，混合均匀，即得本发明药物组合物。也可加入不同的赋形剂，按本领域常规方法加工制成适宜的剂型。

Claims

1、一种治疗骨质疏松症的药物组合物，其特征在于由下列重量配比的各组分组成：木豆素95～105，木豆素A 3～13，木豆素C 2～7，球松素55～65，牡荆素55～65，柚皮素二甲醚2～7和水杨酸15～25。

2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于各组分的重量配比为：木豆素98～102，木豆素A 6～10，木豆素C 2～4，球松素58～62，牡荆素58～62，柚皮素二甲醚2～7，水杨酸15～25。

3、根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于各组分的重量份为：木豆素100，木豆素A8，木豆素C2，球松素60，牡荆素62，柚皮素二甲醚2，水杨酸20。

4、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物的剂型为口服制剂。

5、权利要求1、2或3中的药物组合物在制备治疗骨质疏松症药物中的用途。

6、权利要求1、2或3中的药物组合物在制备治疗外伤药物中的用途。

7、权利要求1、2或3中的药物组合物在制备治疗烧伤药物中的用途。

8、权利要求1、2或3中的药物组合物在制备治疗口疮药物中的用途。