CN1289590A

CN1289590A - 防止感染血吸虫病的防护剂

Info

Publication number: CN1289590A
Application number: CN00116061A
Authority: CN
Inventors: 刘绍明; 戴裕海; 周鸿勇
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2000-09-30
Filing date: 2000-09-30
Publication date: 2001-04-04

Abstract

一种防止感染血吸虫病的防护剂,特征是它包括从麻枫树籽中提取的基质油和苯甲酸苄酯、邻苯二甲酸二丁酯以及乙醇,其中,苯甲酸苄酯的含量为5～10%重量,邻苯二甲酸二丁酯含量为3～5%重量,乙醇含量为3～5%重量,其余为从麻枫树籽中提取的基质油。本发明是一种毒副作用很低的生物制剂,它对血吸虫病感染具有很好的预防保护作用。

Description

防止感染血吸虫病的防护剂

本发明涉及防护剂，具体地说是一种防止感染血吸虫病的防护剂。

血吸虫病广泛分布于世界74个国家和地区，其中70％在热带和亚热带国家中流行，受威胁人口达三亿多，我国流行的是日本血吸虫病。在我国南方有12省(市、自治区)共391个县(市、区)流行血吸虫病，受威胁的人口占全球1／3，达1．13亿以上。据统计，我国现有钉螺面积34．7亿m²，血吸虫病人76．2万人。南方五省(湖北、湖南、江西、安徽、江苏)的局部地区因水位不能控制，人畜血吸虫病感染率高，“晚血、急感”病例仍有成批发生，血吸虫病的严重流行，仍是我国疫区人民群众脱贫致富的阴霾，经济发展的隐患。

血吸虫病的感染途径主要由皮肤、口腔粘膜以及胎内(母婴)传播而感染。做好个体防护是血吸病综合治理中的重要环节之一。具体来说，就是如何杀灭血吸虫尾蚴与防止尾蚴侵入人体，形成感染的问题。

近几十年来，国内外先后对血吸虫的防护剂有过不少的发明创造，在杀灭血吸虫尾蚴上虽有一定作用，但均为化学试剂。如邻苯二酸酯类、苯甲酸苄酯制剂等皆为常用的昆虫驱邂剂。七十年代，科技工作者发现以苯甲酸苄酯、邻苯二甲酸二丁酯和松节油加适当的基质合成的制剂(皮避敌)，动物试验证明防护效果达82％以上，但经不起水冲耐磨(泥磨擦仅维持5分钟)，防护效果不理想。

本发明的目的在于提出一种防止感染血吸虫病的外用涂擦防护剂，使其长时间在水冲洗的泥浆磨擦下能经济有效防制血吸虫感染，以保护人们免受血吸虫尾蚴侵袭。

本发明的上述发明目的是通过如下技术方案实现的。一种防止感染血吸虫病的防护剂，其特殊之处是它包括从麻枫树籽中提取的基质油和苯甲酸苄酯、邻苯二甲酸二丁酯以及乙醇，其中，苯甲酸苄酯的含量为5～10％重量，邻苯二甲酸二丁脂含量为3～5％重量量，乙醇含量为3～5％重量，其余为从麻枫树籽中提取的基质油。

上述从麻枫树籽中提取的基质油采用的是将清洗干净的麻枫树籽在50～60℃温度下烘干至含水量≤10％，然后在压榨设备上用压榨的方法而提取的基质油。

本发明的另一发明目的是提出一种防止感染血吸虫病的防护剂的制备方法，以期能方便制备该防护剂。

本发明的这一发明目的是通过如下技术方案实现的，一种防止感染血吸虫病的防护剂制备方法，其特征是它采用如下步骤：

1)在常温下向基质油内加入苯甲酸苄酯，搅拌10～20mm；

2)加入邻苯二甲酸二丁酯，静置15～30mm；

3)加入乙醇，静置15～30分钟；

4)最后一起搅拌10～20分钟即可。

本发明所述防止感染血吸虫病的防护剂杀灭日本血吸虫尾蚴作用机理为：

1、干扰日本血吸虫尾蚴细胞信息通道，影响日本血吸虫尾蚴钻腺的分泌；

2、激活血吸虫尾蚴蛋白酶e，导致尾蚴Ca⁺⁺浓度下降，从而使尾蚴活力减弱，尾叉断折。

对于本发明所述的防护剂，我们委托同济医科大学农药毒理研究中心作了毒性试验报告，结果如下：

一、大鼠急性经口毒性试验

(一)材料与方法：

1、受试物：防护剂，橙色液体，无异味。

2、动物：受试动物为健康成年Wistar大鼠，共50只，雌、雄各半，体重180～220克。由同济医科大学动物实验中心提供。

3、动物分组和剂量：将雌、雄大鼠各随机分成5组，每组5只。雌、雄大鼠各设立464mg／kg、1000mg／kg、2150mg／kg、4640mg／kg及5000mg／kg五个剂量组。

4、试验操作步骤：动物给药前隔夜禁食但不禁水。称重后按剂量一次经口灌胃，染毒后观察中毒症状及死亡情况。观察时间为2周。

5、结果评价：用Horn氏法计算LD₅₀。

(二)试验结果：

1、结果：大鼠染毒后30分钟开始出现中毒症状，主要表现为，呆滞，对外界反应迟钝。但未见死亡。48h后逐渐恢复正常。

2、小结：本次送检防护剂对大鼠经口LD₅₀雌、雄均大于5000mg／kg，属低毒性。

二、大鼠急性经皮毒性试验

(一)材料与方法：

1、受试物：同经口。

2、动物：受试动物为健康成年Wistar大鼠，共40只，雌、雄各半，体重200～300克。由同济医科大学动物实验中心提供。

3、动物分组和剂量：将雌、雄大鼠各随机分成4组，每组5只。雌、雄大鼠各设立215mg／kg、464mg／kg、1000mg／kg、2150mg／kg四个剂量组。

4、试验操作步骤：给药前24h背部去毛4×5cm²。称重后，按剂量在略小于剃毛区面积内涂药，然后覆盖一个与脱毛区面积相当的盒式罩，再以胶布固定，观察中毒症状和死记情况。涂药4h后取下盒罩，温水洗去农药，观察时间为2周。

5、结果评价：用Horn氏法计算LD₅₀。

(二)实验结果：

1、结果：给药1h后出现中毒症状，主要表现为呆滞，对外界反应心钝。但各组未见死亡。48h后逐渐恢复正常。

2、小结：本次送检防护剂对大鼠经皮LD₅₀雌、雄均大于5000mg／kg，属低毒性。

从上述实验可以看出本防护剂生物毒性低，无环境污染。

对于本发明所述的防护剂我们还进行了预防血吸虫病感染效果观察实验，实验过程如下：

一、观察方法及实施过程：

1、观察地点概况及分组：鄂州市芦州村属血吸虫病湖沼型州垸亚型流行区，钉螺面积139亩，钉螺阳性率为1．96％，阳性钉螺密度为0．006只／0．11m²，人口总数为3312人，人群感染率为6．49％。其中芦州村2组人数为250人，人群感染率为5．6％，作为对照组；芦州村3组人数为217人，人群感染率为7．37％，作为实验组。

2、观察对象的病原学处理及选择：观察前通过对芦洲村2组和3组6～65岁的居民采用粪便常规沉孵法进行检查，对查出的病人进行病原治疗(吡喹酮剂量：60mg／kg，60kg为限)，对粪检阴性的居民，采用询检法化疗进行病原处理(吡喹酮剂量：40mg／kg，60kg为限)，然后将经过病原学处理的芦州村2组的66人和3组和70人分别作为对照组和实验组的观察对象。

3、防护剂的涂抹方法和时间：

3．1实验组不同年龄、性别和职业人群在接触疫水之前，可根据当天身体接触疫水部位的深浅程序，每隔4小时均匀涂抹防护剂于身体的相应部位。

3．2对照组不加任何防护措施，仅做人群接触疫水方式、频率、频度等情况的观察。

4、防护剂的毒副作用观察：对实验组的人群每次接触疫水之前涂抹防护剂的方法、面积以及涂抹防护剂后1h、3h、24h、48h、72h的症状，体征进行观察，观察其涂抹防护剂后的毒副作用的表现。(附：涂药面积计算：1、至双踝8％；2、双膝19％；3、双胯37％；4、腰部42％；5、双腕6％；6、双肘12％；7、双肩20％；8、颈部88％；9、全身100％。)

5、防护药对人群接触疫水情况影响观察：通过对实验组发放防护剂外用预防药物，对照组不发放任何外用药物，观察其对实验组、对照组人群接触疫水的比率、方式、频率、频度等情况有无影响。(指数A=∑{[持续时间(h)×接触面积(％)]／调查日数(d)}，指数B=∑[持续时间(h)／调查日数(d)]，其中指数A代表暴露强度，指数B代表暴露持续时间。)

6、防护效果：实验组和对照组的人群在末次接触疫水后的第4周，采用粪便常规沉孵法进行检查，然后统计分析实验组和对照组的人群感染率及人群预防保护率，考核防护剂的预防效果。[预防保护率=(对照组阳性率-实验组阳性率)×100％对照组阳性率]。

三、结果：

1、疫水接触及涂抹药物情况：通过对经过病原处理的芦州村3组70人涂抹防护剂，芦州村2组的66人不涂抹防护剂进行疫水接触情况及涂药情况观察，结果：实验组70人有36人接触疫水，其中每次接触疫水前均涂抹防护剂完全的有30人，涂药不完全的有6人，对照66人有28人接触疫水。具体情况见表1。表1：实验组、对照组接触疫水及涂抹防护剂情况表组别人口病原处理人数接触疫涂药完未涂药或不完总数 (观察人数) 水人数全人数全涂药人数芦州2组(对照组) 250 66 28 0 28芦州3组(实验组) 217 70 36 30 6

2、防护剂对疫水接触情况影响：实验组70人发放防护剂后，接触疫水人数为36人，接触疫水人数占实验组的51．43％；对照组66人不发放任何防护药物，接触疫水人数为28人，接触疫水人数占对照组42．42％。两者之间无明显性差异(X²=1．11 P＞0．05)。

实验组的暴露强度为2．33，暴露持续时间为5．98h／d；对照组的暴露强度为0．21，暴露持续时间为1．28h／d。实验组的暴露强度、暴露持续时间均明显高于对照组。

3、防护剂的毒副作用：通过对芦州村3组经过病原学处理的70人发放防护剂后，观察他们每次接触疫水前涂抹防护剂的方法、面积，以及涂抹防护剂后1h、3h、24h、48h、72h的毒副作用，结果实验组涂抹防护剂的人数为36人。其中涂抹面积小于或等于62％的34人，涂抹面积大于或等于88％的2人。涂抹面积小于或等于62％的人群在涂抹防护剂后72h内未发现过敏、胸闷以及其他毒副作用的反应；涂抹面积大于或等于88％的2人在涂抹防护剂后1h左右出现轻微的胸闷症状，无其他毒副作用的表现，以后逐渐缓解，24h完全消失。

4、防护效果：实验组70人通过采用粪便常规沉孵法查出病人1人(属涂药不完全者)，人群感染率为1．43％，涂药完全的人群感染率为0，有接触疫水史的人群感染率为2．78％；对照组66人，查出病人6人，人群感染率为9．09％，有接触疫水史的人群感染率为21．43％。结果实验组只要涂药完全其人群感染率明显低于对照组(X²=6．65P＜0．01)，有疫水接触史的人群感染率实验组也明显低于对照组(X²=5．62 P＜0．05)。结果见表2。表2：实验组、对照组的人群感染率情况组别人数查出人群感染未涂药或涂药完全接触疫接触疫水人群病人数率(％) 的人群感染率(％) 水人数感染率(％)对照组 66 6 9．09 9．09 28 21．43实验组 70 1 1．43 0 36 2．78

5、防护剂的预防保护率：实验组的人群血吸虫病感染率为1．43％，涂抹防护剂完全的人群感染率为0；对照组的人群感染率为9．09％

防护剂的预防保护率为84．27％

涂抹防护剂完全的人群预防保护率为100％。

通过本次观察结果表明：本发明所述防护剂是一种毒副作用很低的生物制剂，并且只要按照要求涂抹完全，该防护剂对疫区人群血吸虫病的感染具有很好的预防保护作用。

综上所述，本发明所述防止感染血吸虫病的防护剂具有如下特点：

A、对血吸虫尾蚴有直接杀灭作用；

B、可阻止血吸虫尾蚴侵入皮肤；

C、可防止水蛭(马蝗)叮咬；

D、对皮肤无刺激，无特殊不适感，长期使用不致中毒；

E、价格低廉，资源充足，使用方便。

下面将描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。

实施例1：

将清洗干净的麻枫树籽在50～60℃温度下烘干至含水量≤10％，然后在压榨设备上压榨出基质油。取基质油89kg，在常温下加入苯甲酸苄酯5kg，搅拌10～20分钟；再加入邻苯二甲酸二丁酯3kg，静置15～30min。再加入乙醇3kg，静置15～30分钟，最后一起搅拌10～20分钟即制成100kg重量的防止感染血吸虫病的防护剂。

实施例2：

基质油的提取与实施例1相同，取基质油80kg、苯甲酸苄酯10kg、邻苯二甲酸二丁酯5kg、乙醇5kg，按实施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸虫病的防护剂。

实施例3：

基质油的提取与实施例1相同，取基质油86．5kg、苯甲酸苄酯7．5kg、邻苯二甲酸二丁酯3kg、乙醇3kg，按实施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸虫病的防护剂。

实施例4：

基质油的提取与实施例1相同，取基质油86kg、苯甲酸苄酯6kg、邻苯二甲酸二丁酯4kg、乙醇4kg，按实施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸虫病的防护剂。

取上述实施例1、实施例2、实施例3和纯基质油各300mL样品，分别标号为FHJ1、FHJ2、FHJ3和FHJ0，对这四种样品进行实验室杀灭尾蚴试验。

测试条件：

1、实验室温湿度：24±1℃，RH65±5％；

2、日本血吸虫尾蚴为钉螺饲养室饲养的阳性钉螺逸出。

测试方法：

1、即时接触实验

用实验样品FHJ1、FHJ2、FHJ3和FHJ0防护剂，以1mg／cm²剂量分别均匀涂抹在聚乙烯食用薄膜上，取尾蚴30±2条，滴去氯水数滴，使尾蚴与防护剂充分接触，在解剖镜下观察，记录尾蚴的反应和死亡时间。空白对照为去氯水。

2、延迟接触实验

样品按剂量1mg／cm²均匀涂抹在薄膜上后，用流水不间断地冲洗，分别于4h、6h和8h时取出，按即时接触实验方法进行测试。

样品对日本血吸虫尾蚴的效果观察分为四个等级：尾蚴头尾正常协同活动为无作用，用“-”表示，尾蚴头尾伸长性活动为有作用，用“+”表示；尾蚴头尾伸长性活动减弱为作用较强，用“++”表示；尾蚴活动停止为作用强，用“+++”表示；尾蚴死亡为作用最强，用“++++”表示。

测试结果：

防护剂接触实验对日本血吸虫尾蚴的效果(见表3)：表3防护剂接触实验对日本血吸虫尾蚴的效果

上述实验可以看出，本防护剂对日本血吸虫尾蚴的效果，依次为FHJ2＞FHJ1＞FHJ3＞FHJ0。以防护剂FHJ2效果最佳。即时接触实验防护剂FHJ1、FHJ2、FHJ3样品4、6、8小时的有效率均为100％；其尾蚴接触实验3min显作用，8min100％死亡。这说明本发明杀蚴效果强，显效时间快。

Claims

1、一种防止感染血吸虫病的防护剂，其特征是它包括从麻枫树籽中提取的基质油和苯甲酸苄酯、邻苯二甲酸二丁酯以及乙醇，其中，苯甲酸苄酯的含量为5～10％重量，邻苯二甲酸二丁脂含量为3～5％重量量，乙醇含量为3～5％重量，其余为从麻枫树籽中提取的基质油。

2、按照权利要求1所述防止感染血吸虫病的防护剂，其特征是所述从麻枫树籽中提取的基质油采用的是将清洗干净的麻枫树籽在50～60℃温度下烘干至含水量≤10％，然后在压榨设备上用压榨的方法而提取的基质油。

3、一种防止感染血吸虫病的防护剂制备方法，其特征是它采用如下步骤：

1)在常温下向基质油内加入苯甲酸苄酯，搅拌10～20mm；

2)加入邻苯二甲酸二丁酯，静置15～30mm；

3)加入乙醇，静置15～30分钟；

4)最后一起搅拌10～20分钟即可。