CN108124854A - 一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用 - Google Patents

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孙建
李迎梅
安同伟
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients

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Abstract

本发明涉及一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，该组合物的组分及其重量组份比为：果糖1‑10份；聚乙烯基吡咯烷酮(10％)1‑10份；叠氮化钠0.01‑0.1份；硫酸(98％)0.01‑0.05份；灭菌水50‑98份。本发明配方组成科学合理，工艺简单，使用方便，成本极低，对粪便中的球虫卵囊保护效果较好。本发明保护剂利用果糖等成份作为鸡球虫疫苗生产中鸡粪便的保护剂可以有效保持鸡粪便中球虫卵囊的活性，延长粪便保存时间，利于规模化生产，提高生产效率。用该保护剂保存的粪便常温下保存4天后，其中的卵囊活性与新鲜粪便中的卵囊活性相比没有变化。

Description

一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用
技术领域
本发明属于兽用生物制品领域，尤其是一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保 护剂的制备方法及其应用。
背景技术
随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题越来越受到人们的重视。 而鸡肉和鸡蛋作为动物性蛋白质的主要来源屡次被舆论推至风口浪尖，究其 原因还是药物残留问题。鸡的球虫病是每一个养鸡从业者都绕不开的一种常 见病，该病的防治目前主要依靠饲料中添加盐霉素等化学药物来预防，发病 时使用磺胺药等抗生素进行治疗，这些化学药物不仅在生产和使用中对环境 造成污染，更会在鸡肉中造成药物残留。随着欧美等发达国家有限制外，我 国也出台了相关限制性法律法规。未来鸡球虫病的防治将越来越依赖于球虫疫苗。在球虫疫苗生产中，往往要收集5天甚至10天的鸡粪便从中提取卵囊， 新鲜粪便在存放过程中会出现卵囊活力逐渐下降的现象，而当天收取新鲜粪 便当天提取卵囊又会造成很大的人力、物力、时间浪费。如何寻求一种合适 的方法既能延长粪便的保存期又能保持粪便中球虫卵囊的活性成为球虫疫苗 生产中需要迫切解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的组合物。 本发明配方组成科学合理，工艺简单，使用方便，成本极低，对粪便中的球 虫卵囊保护效果较好。本发明保护剂利用果糖等成份作为鸡球虫疫苗生产中 鸡粪便的保护剂可以有效保持鸡粪便中球虫卵囊的活性，延长粪便保存时间， 利于规模化生产，提高生产效率。用该保护剂保存的粪便常温下保存4天后， 其中的卵囊活性与新鲜粪便中的卵囊活性相比没有变化。
本发明的另一个目的在于提供一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制 备方法及其应用。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，其保护剂的 组分及其重量份数比为：
而且，该保护溶液组分及其最优重量份数比分别为：
一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，其制备方法 的步骤为：
(1)按重量配比称取灭菌水(总量的1/2)和果糖，先将所用灭菌水的 放入配液罐内，再将全部果糖缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至果糖全 部溶解。
(2)按重量配比称取聚乙烯基吡咯烷酮，缓慢加入上述步骤(1)配液 罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(3)按重量配比称取叠氮化钠，用灭菌水(总量的1/10)溶解，把所得 溶液缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(4)将硫酸(98％)用灭菌水(总量的1/10)稀释并冷却至常温，把所 得溶液缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(5)把剩余灭菌水(总量的3/10)加入配液罐，搅拌均匀。所得混合液 灌装至灭菌容器内封存备用，即可得到一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便的保护 剂。
本发明所涉及的鸡粪便保护剂是通过以下方法应用于实际生产的：每天 定时收集一次粪便并称重，粪便和保护剂按重量比1:1的比例充分混合后封存 于灭菌容器内。连续收集5天粪便，前4天按以上方法处理，把第5天的新 鲜粪便与前4天的粪便和保护剂混合物合并，集中进行卵囊提取。
本发明的优点及有益效果是：
1.本发明配方组成科学合理，工艺简单，使用方便，成本极低，对粪便 中的球虫卵囊保护效果较好
2.本发明保护剂利用果糖等成份作为鸡球虫疫苗生产中鸡粪便的保护剂 可以有效保持鸡粪便中球虫卵囊的活性，延长粪便保存时间，利于规模化生 产，提高生产效率。用该保护剂保存的粪便常温下保存4天后，其中的卵囊 活性与新鲜粪便中的卵囊活性相比没有变化。
3.本发明通过果糖维持卵囊的活性，避免因自身代谢造成活力下降。
4.本发明通过聚乙烯基吡咯烷酮、叠氮化钠、硫酸三者合适浓度的配比来 防止粪便的腐败变质，为球虫卵囊提供一个合适的生存环境。
具体实施方式
本发明通过以下实施例进一步详述。需要说明的是：下述实施例是说明 性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明组分中的果糖、聚乙烯基吡咯烷酮(10％)、叠氮化钠、 硫酸(98％)均可以在市场上购买得到。
实施例1
一种鸡球虫卵囊保护溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：
果糖8kg、聚乙烯基吡咯烷酮(10％)4kg、叠氮化钠0.06kg、硫酸(98％) 0.04kg；灭菌水87.9kg。
一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，该制备方法 的步骤为：
(1)称取灭菌水43.95kg和果糖8kg，先将所用灭菌水的放入配液罐内， 再将全部果糖缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至果糖全部溶解。
(2)称取聚乙烯基吡咯烷酮，缓慢加入上述步骤(1)配液罐中，边加 边搅拌，直至混匀。
(3)称取叠氮化钠，用灭菌水8.79kg溶解，把所得溶液缓慢加入配液罐 中，边加边搅拌，直至混匀。
(4)将硫酸(98％)用灭菌水8.79kg稀释并冷却至常温，把所得溶液缓 慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(5)把剩余灭菌水8.79kg加入配液罐，搅拌均匀。所得混合液灌装至灭 菌容器内封存备用，即可得到一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便的保护剂。
实施例2
一种鸡球虫卵囊保护溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：
果糖12kg、聚乙烯基吡咯烷酮(10％)5kg、叠氮化钠0.09kg、硫酸(98％) 0.06kg；灭菌水82.85kg。其制备方法的步骤同实施例1。
实施例3
一种鸡球虫卵囊保护溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：
果糖6kg、聚乙烯基吡咯烷酮(10％)3kg、叠氮化钠0.04kg、硫酸(98％) 0.03kg；灭菌水90.93kg。其制备方法的步骤同实施例1。
临床应用
试验一，卵囊孢子化率对比试验：
用柔嫩艾美尔球虫疫苗株接种50只30日龄AA肉鸡，1万个孢子化卵囊/ 只。收集接种后第7天的粪便30kg，把30kg粪便混匀后平分为3份。
第一组10kg粪便，当天提取卵囊，当天孢子化，孢子化完成后标记为1 号卵囊；
第二组10kg粪便，用本发明的保护剂保存4天后提取卵囊并孢子化，孢 子化完成后标记为2号卵囊；
第三组10kg粪便，常温下保存4天后提取卵囊并孢子化，孢子化完成后 标记为3号卵囊。
注：三组粪便所提取的卵囊均在相同条件下进行孢子化。
孢子化率分别为：
第一组91份，第二组90份，第三组82份。
试验二，卵囊产出量对比试验：
30日龄AA肉鸡30只，随机分为3组，10只/组，三组同时接种：
第一组：接种1号卵囊，1万个孢子化卵囊/只；
第二组：接种2号卵囊，1万个孢子化卵囊/只；
第三组：接种3号卵囊，1万个孢子化卵囊/只。
分别收取三组7-10天的粪便，并提取卵囊，各组卵囊产量如下:
第一组：1250万卵囊/只；
第二组：1235万卵囊/只；
第三组：838万卵囊/只。
试验三，卵囊免疫原性对比试验：
3日龄无球虫感染AA肉鸡90只，随机分为3组,30只/组
第一组：接种1号卵囊，3日龄接种5000个孢子化卵囊/只，10日龄接 种10000个孢子化卵囊/只
第二组：接种2号卵囊，3日龄接种5000个孢子化卵囊/只，10日龄接 种10000个孢子化卵囊/只
第三组：接种3号卵囊，3日龄接种5000个孢子化卵囊/只，10日龄接 种10000个孢子化卵囊/只
17日龄用柔嫩艾美尔球虫强度株对所有鸡只进行攻毒，8万卵囊/只，攻 毒后第4天剖检所有鸡只进行病变记分，结果如下：
第一组平均分值1.8分/只；
第二组平均分值1.8分/只；
第三组平均分值2.3分/只；
附注
柔嫩艾美耳球虫记分标准(两侧盲肠病变不一致时，以严重一侧为准)。
0分无肉眼可见病变。
+1分盲肠内容物正常，肠壁黏膜面可见少量散在出血点或出血斑。
+2分盲肠内容物带血，肠壁黏膜面出血点或出血斑数量较为密集，肠壁 增厚。
+3分盲肠轻度肿大，肠腔内没有正常的盲肠粪便，肠道黏膜增厚，盲肠 腔内充满暗红色血液或出现盲肠芯(呈灰白色干酪样香蕉型块状物)。
+4分 盲肠高度肿大，盲肠腔内没有盲肠粪便或已被包在肠芯中，肠腔内 充满坏死凝血块和盲肠黏膜碎片。本球虫致死的鸡记为+4分。

Claims (3)

1.一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，其特征在于：该组合物的组分及其重量份数比为：
2.根据权利要求1所述的一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，其特征在于：该保护溶液组分及其最优重量份数比分别为：
3.一种如权利要求1所述的一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便保护剂的制备方法及其应用，其特征在于：该制备方法的步骤为：
(1)按重量配比称取灭菌水(总量的1/2)和果糖，先将所用灭菌水的放入配液罐内，再将全部果糖缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至果糖全部溶解。
(2)按重量配比称取聚乙烯基吡咯烷酮，缓慢加入上述步骤(1)配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(3)按重量配比称取叠氮化钠，用灭菌水(总量的1/10)溶解，把所得溶液缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(4)将硫酸(98％)用灭菌水(总量的1/10)稀释并冷却至常温，把所得溶液缓慢加入配液罐中，边加边搅拌，直至混匀。
(5)把剩余灭菌水(总量的3/10)加入配液罐，搅拌均匀。所得混合液灌装至灭菌容器内封存备用，即可得到一种鸡球虫疫苗生产中鸡粪便的保护剂。
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