CN1285751A - 用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物 - Google Patents

用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN1285751A
CN1285751A CN98812891A CN98812891A CN1285751A CN 1285751 A CN1285751 A CN 1285751A CN 98812891 A CN98812891 A CN 98812891A CN 98812891 A CN98812891 A CN 98812891A CN 1285751 A CN1285751 A CN 1285751A
Authority
CN
China
Prior art keywords
dezyribonucleoside
mentioned
method described
excipient
source
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN98812891A
Other languages
English (en)
Inventor
R·W·冯布斯特尔
F·罗曼瑟夫
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
PRONEURON Inc
Pro Neuron Inc
Original Assignee
PRONEURON Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by PRONEURON Inc filed Critical PRONEURON Inc
Publication of CN1285751A publication Critical patent/CN1285751A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/004—Aftersun preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/606—Nucleosides; Nucleotides; Nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

公开了一种促进皮肤中DNA修复、减小DNA损伤以及降低突变频率的方法,该方法的目的是减小暴露在日光或紫外线照射下所造成的影响。本方法包括对皮肤施用一种将其浓度足以增强DNA的修复或降低突变频率的脱氧核糖核苷制备在一赋形剂中的组合物,其中上述的赋形剂能将有效量的脱氧核糖核苷运送至需要的皮肤细胞。

Description

用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物
发明领域
总体上本发明涉及治疗和预防皮肤或其它组织由于暴露在日光或紫外线照射或其它诱变因素下而造成的光损伤、基因损伤和肿瘤发生，包括对哺乳动物例如人施用脱氧核糖核苷或脱氧核糖核苷的酯。当在暴露于诱变射线或化学诱变剂之前、当时或之后局部使用时，这些组合物能降低DNA损伤、突变频率和肿瘤发生。
发明背景
皮肤暴露在紫外线(或电离)射线中会损伤DNA，这种损伤如果没有修复或修复不正确，会导致癌症的发生并加速老化过程。DNA损伤和随之而来的基因组不稳定是癌发生及生物老化的明显特征。患有DNA修复能力缺陷疾病(象着色性干皮病)的患者表现出过早的皮肤老化，而且在暴露于阳光的皮肤部分上患皮肤癌的几率非常高(Robbins和Moshell，J.Inv.Dermatol.，73：102-107，1979)。迄今为止，在药理上对由日光或紫外线照射引起的皮肤损伤的防护，很大程度上局限于用如遮光剂或自由基清除剂等药剂来阻止损伤，或者是用如视黄酸或羟基乙酸等药剂来重构辐射损伤皮肤的表面，此时并未必需要涉及细胞或组织损伤的最基本的机理并在基因组完整性水平上进行修复。
事实上，如使用遮光剂这样的防护措施并不完全有效，而且暴露于阳光下并不是经常可以预料得到的。在美国，皮肤癌的发病率接近每年1，000，000例。因此，需要有一种治疗剂，它能够降低发展皮肤癌或其它由皮肤光损伤引起的后果的风险，即使是在已经晒过阳光之后使用该治疗剂。在此类状况下，遮光剂和可以诱使或促进皮肤晒成褐色的试剂是没有用的，因为它们仅在暴露于紫外线照射之前使用才有效。而且，在一些情况中，遮光剂和甚至内源性黑色素实际上可以通过光动力致敏作用来增强紫外线诱导的DNA损伤。
已经有一些尝试被用于在损伤已经发生之后，提高或加速皮肤细胞内DNA的修复并降低DNA损伤的后果。DNA修复首先主要的步骤是检测并切除DNA上受损的部分。在一些形式的DNA损伤中，病毒酶T4核酸内切酶V可以完成这一步。已有报道显示，当把T4核酸内切酶V包装在可穿透表皮的脂质体中时，它可以在体内加速小鼠光损伤皮肤中嘧啶二聚体(最普遍的光损伤形式)的切除速度(Yarosh等，CancerRes.52：4227-4231，1992)。已经报道有一种细茵提取物加快暴露于紫外线之后的皮肤中期外DNA合成的速度，这种效果常常被用作DNA修复活性的指标(Kludas和Heide，美国专利4464362)；然而，这一效果并没有在随后的一项研究中得到确证(Natarajan等，Mutation Research 206：47-54，1988)。
然而，DNA修复的关键问题未必是损伤切除的速度，而是修复的保真性。如果细胞无法以可与DNA损伤片段切除速度相匹配的速度进行准确修复合成的话，那么加速DNA修复中切除步骤的试剂实际上会加速损伤(Collins和Johnson，J.Cell Physiol.99：125-137，1979)。
脱氧核糖核苷或脱氧核糖核苷酸已经被加入培养的细胞中，这些细胞已经过辐射并存在可变的或分歧的对DNA损伤或突变的作用。有一些细胞类型，如淋巴细胞，其脱氧核糖核苷酸的重新合成能力是有限的。据报道，在此类细胞中，在紫外线辐射(Yew和Johnson，Biochim.Biophys.Acta，562：240-251，1979；Green等，Mutation Research，350：239-246，1996)或电离辐射(Petrovic等，Int.J.Radiat.Biol.，18：243，1970)之后，外源脱氧核糖核苷提高细胞的成活率；在紫外线照射过的正常人成纤维细胞中加入脱氧核糖核苷之后并未发现成活率有明显升高(Green等，Mutation Research，350：239-246，1996)。关键的一点是在由紫外线辐射或其它诱变因素引起基因组损伤之后，细胞成活率的提高未必是合乎需要的。程序性细胞死亡或凋亡的过程是与检测DNA损伤的细胞机制结合为一体的。因此，本身不足以引起细胞死亡的基因组损伤可以激发凋亡，一种活跃的细胞自杀程序，这样该细胞中的DNA损伤就不会在下一代细胞中持续，否则随着基因组损伤的积累就可能发生肿瘤。检测DNA损伤和诱导凋亡的机制包括细胞周期调节蛋白，如肿瘤抑制蛋白p53。因此，提高照射之后的细胞成活率(如通过抑制凋亡)的试剂未必是抗癌的，而且可能实际上通过允许了原本可以被凋亡除掉的受损细胞的存活而增强了突变频率和恶性转化的风险。这一原则的一个重要例子是以下的证明：在子宫内暴露于电离射线的p53剔除的胚胎期小鼠与野生型对照相比具有较高的存活率(胎儿安全出生)，但也有高得多的先天缺陷频率(Norimura等，Nature Medicine，2：577-580)。
关于外源性脱氧核糖核苷对紫外线照射过的细胞突变频率的影响已经进行了明确的研究，得到了各种不同的结果。Bianchi和Celotti(Mutation Research 146：277-284，1985)报道高浓度的胸苷或脱氧胞苷增加紫外线照射过的V79中国仓鼠细胞的突变率；在加入任何浓度的核苷时均没有发现突变频率的降低。Musk等(Mutation Research 227：25-30，1989)报道一种脱氧核糖核苷的混合物(其中包括相对于其它核苷过量的脱氧胞苷)降低紫外线C(254nm)照射的MM96L黑素瘤细胞的突变频率，该细胞系已知含有超过构建所需的过量的嘌呤脱氧核糖核苷酸。在同一研究中，外源脱氧核糖核苷对另一种暴露于紫外线C辐射之后的肿瘤细胞系(人海拉细胞)的突变频率没有影响。重要的是注意紫外线C辐射并不是地球表面太阳辐射的成分之一，因为它被大气层有效阻挡了(Pathak，1974，Sunlight and Man，T.B.Fitzpatrick编著，University of TokyoPress，东京，日本，第815页)。脱氧核糖核苷对暴露于太阳辐射或紫外线辐射(以存在于太阳辐射中的波长)中的细胞的突变频率的影响没有被检测到，作者们对他们的讨论精确地做出结论说“…与紫外线C照射相比，阳光[照射]的MM96L细胞[突变]频率较低，这意味着阳光没有扰乱脱氧核糖核苷库，或者它所引起的细胞应答对核苷水平不敏感。”
除了抑制凋亡或促进DNA修复以足以允许细胞存活、但未必能纠正潜在的肿瘤发生突变的试剂之外，生长因子(包括参与正常伤口愈合应答的因子，如TGF-β或PDGF)通常具有肿瘤促进因子的功能。
美国专利5，246，708公开了包括将脱氧核糖核苷混合物用于促进创伤、溃疡和灼伤(包括由紫外线或阳光辐射引起的伤口)愈合的方法和组合物。
脱氧核糖核苷的酰基衍生物已被讲授是一种促进脱氧核糖核苷进入皮肤的传递分子，如美国专利申请系列编号466，379中所公开的。据所公开的，脱氧核糖核苷的酰基衍生物可以在皮肤受辐射损伤之后提高细胞修复和细胞存活。
低聚脱氧核糖核苷酸被建议用作黑素原生成的刺激物，其所基于的思想是DNA的损伤或DNA损伤的切除产物可能作为细胞信号提高皮肤中黑色素的产生以帮助保护其不受随之而来的损伤。Gilchrest等(美国专利5，470，577；WO申请系列编号95/01773)提出外源的DNA光损伤产物可能激活黑素原生成，并不需要经过一个对细胞DNA真正造成损伤的必需的中间环节。所述的意图是模仿环丁烷嘧啶二聚物或其它DNA光损伤产物的存在，目的是给细胞提供假的DNA损伤信号，这样可能可以在不存在真正的DNA损伤情况下激活诱导黑素原生成。用胸酰二核苷酸体外处理黑素瘤细胞和体内处理几内亚猪皮肤导致黑色素产生的增加。作者们陈述他们相信DNA片段完整地进入细胞、甚至它们的核内。他们提出通过持续几周地局部施用低聚脱氧核糖核苷酸(尤其是胸苷二核苷酸)以使皮肤不经阳光照射而变成褐色，这样可以通过诱导黑色素的合成来保护皮肤，这样随后就可使进入和穿过皮肤的紫外线辐射减少。
Wiskemann(1974；Sunlight and Man，T.B.Fizpatrick编著，University of Tokyo Press，东京，日本，第51页)报导全身性(腹膜内)施用胸苷脱氧核苷或核糖核苷和同类的腺苷、环腺苷单磷酸、尿苷、胞啶增加了在暴露于紫外线后头几小时内在皮肤中全身施用的伊文思蓝(Evan’s Blue)染料溢出的潜伏期，这表明由紫外线诱导的急性水肿减轻了。在这个系统中，在照射之后施用的DNA对染料的溢出不产生影响。作者们还明确地说明结合到药膏中的核酸碱基并不穿透人表皮的角质层(角质层，即去核的角质形成细胞的外层，它组成皮肤的主要的水分障碍)。
本发明的目的
本发明的一个目的是提供一些组合物和方法，用于减少皮肤的突变频率、光老化(photaging)以及肿瘤发生，从而减轻暴露于阳光和紫外线辐射以及其它诱变剂，包括内源性氧化剂，所导致的后果。
本发明的一个目的是提供一种组合物，用于增强DNA的修复并防止诱变剂辐射的后果，甚至是在已经发生损伤或已经暴露于射线或者其它诱变剂之后施用。
本发明的一个首要目的是提供一些组合物和方法，用于有效地防止或治疗皮肤暴露于阳光和紫外线辐射和其它环境诱变剂的后果。
本发明的另一个目的是提供一些组合物和方法，用于提高化学遮光剂的活性。
本发明的另一个目的是提供一些组合物和方法，用于减少遮光剂和其它外源性和内源性的用于充当紫外线诱导的皮肤损伤的光敏或光力学增强剂的化合物所造成的有害影响。
本发明的另一个目的是提供一些组合物和方法，用于减少发炎性皮肤或粘膜疾病，包括牛皮癣、皮炎、以及炎性肠病，的一些后果。
本发明概述
本发明涉及一些方法和组合物，用于通过局部施用含有有效量的脱氧核苷源的组合物来改善暴露于紫外线辐射、电离辐射或化学诱变剂之后的皮肤的DNA修复(或基因组保真度)以及减少光损伤。该组合物能够把脱氧核苷递送到需要的靶细胞。此类组合物在皮肤暴露于阳光、紫外线或电离辐射、或化学诱变剂(包括但不局限于内源性或外源性的自由基或氧化氮源)之前、期间、以及之后施用于皮肤上。用本发明的组合物进行治疗改善了DNA修复的净保真度并从而减少了阳光或紫外线辐射或其它诱变剂所引起的突变的频率以及肿瘤发生的风险。
本发明提供了一些方法和组合物，用于把其浓度足以支持并改善受损DNA修复以及减少皮肤暴露于辐射或化学诱变剂的有害后果的脱氧核苷递送给皮肤细胞。
本发明的化合物和组合物除了防止暴露于阳光的后果以外，还用于治疗皮肤由阳光造成的皮肤损害，如光化角质或光痣。
脱氧核苷或者作为游离脱氧核苷施用，或者作为其衍生物施用，该衍生物在施用到皮肤之后被转化为脱氧核苷。这类衍生物包括脱氧核糖核苷酸、寡核苷酸、DNA本身、以及脱氧核苷的酰基化衍生物或脱氧核苷的其它的可被内源性酶转化为游离脱氧核苷的衍生物。
本发明的方法和组合物同时还改善了其它施用于皮肤上用于预防、治疗或化妆目的的药剂的活性并减少了它们的副作用，这些药剂包括但不局限于遮光剂、视黄醛、α-羟基酸、甲基黄嘌呤、以及DNA修复酶。
本发明还涉及一些组合物和方法，用于减少内源性和外源性具光化学活性的化合物或色素(它们充当由阳光或紫外线辐射造成的DNA损伤的光敏剂或光力学增强剂)的有害后果(如细胞损伤，特别是DNA损伤，这可导致基因组突变或其它潜在的致癌性损伤的可能性增加)
                  *        *       *
通过参阅读下面的实施例中所讨论的实验结果，从下面的详细描述中将更清楚、更完整地理解本发明以及本发明其它的目的、特征和优点。
本发明的详细说明
DNA的损伤和修复参与皮肤癌和光老化的发展过程。本发明提供了可以成功地改善DNA修复的净保真度的化合物。本发明将对卫生保健产生重要的影响并将改善皮肤的化妆性外观。
A．定义
术语“脱氧核苷”指的是DNA的四种基本核苷成分的任意一种：脱氧腺苷、脱氧胞苷、脱氧鸟苷、以及胸苷。术语“核糖核苷”指的是RNA的四种主要核苷成分的任意一种：腺苷、胞啶、鸟苷、以及尿苷。
术语“脱氧核苷的酰基化衍生物”指的是含有来源于羧酸的酰基取代基的脱氧核苷(其改变了游离脱氧核苷的药物动力学和生物利用度)，如美国专利申请序列号466，379中所公开的，该发明的全部内容作为参照结合于本发明中。
在本发明的上下文中，术语“至少一种脱氧核苷源”或“脱氧核苷源”指的是脱氧核苷本身或脱氧核苷的衍生物，这些衍生物能被内源性酶，特别是酯酶，转化为脱氧核苷。例子包括：脱氧核苷的酰基化衍生物(羧酸酯)、脱氧核糖核苷酸的酰基化衍生物(磷酸酯)、或寡脱氧核糖核苷酸的酰基化衍生物(磷酸二酯)。由于酯酶活性(包括能够剪切羧酸酯和磷酸酯的各种不同的酶)在哺乳动物组织，包括皮肤，中是到处存在的，所以这些脱氧核苷的酯在被施用到皮肤时被转化为脱氧核苷。类似地，“至少一种核糖核苷源”指的是一种核糖核苷或核糖核苷的酯，包括核糖核苷酸、寡核糖核苷酸、或者核糖核苷的酰基化衍生物。
术语“脱氧核苷的酯”(或脱氧核苷酯)指的是一种如上所述的脱氧核苷酰基化衍生物或一个或多个脱氧核苷的磷酸酯，如脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、或多聚脱氧核糖核苷酸。
在本发明的上下文中，术语“光致敏作用”指的是光吸收(紫外线或可见光)分子把激发态(通常是三重线态)能量直接传递给一个目标分子，导致DNA或其它细胞结构损伤的过程。目标分子可以是DNA本身，也可以是另外一个导致DNA损伤的目标，如溶酶体的膜成分，它含有脱氧核糖核酸酶。
本发明中的术语“光力学敏化作用”指的是吸收紫外线的分子由于受到紫外线或可见光辐射的激活而产生自由基或其它可以扩散的反应中间体的过程。
术语“遮光剂”指的是一种旨在被用作遮光剂产品中的活性组分用于减少皮肤暴露于阳光辐射的紫外线成分中的紫外线吸收化学物质。目前如在商业产品中使用的遮光剂的例子包括：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基己基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlamine salicylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate O(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。
术语“能量清除剂”指的是一种化合物，它吸收DNA损伤的遮光剂或内源性光致敏或光力学增强剂的激发态的能量，减少了对目标生物分子，如DNA，的损伤。在本文中，能量清除剂在有效浓度时应该是无毒的，而且当存在于紫外线辐射(有DNA损伤的光致敏剂或光力学增强剂存在下)时应该可以对DNA的损伤有净减少。在本发明的上下文中，“能量清除剂”具体指的是其能量少于或等于基因组DNA核苷酸碱基成分的具有最低的三重态的化合物。本发明的能量清除剂的首要特质是，由于光化学能量状态的性质，或质量作用(浓度)，它们防止了基因组DNA的损伤，这些损伤否则会因为激发态色素(不管是内源性的，如黑色素，或外源性的，如遮光剂)的能量转移而发生。具有与DNA结构成分类似的光化学性质的能量清除剂是有利的，而且包括至少一种脱氧核苷或核糖核苷，如脱氧核苷、酰基化脱氧核苷、脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、核糖核苷、核糖核苷酸、寡核糖核苷酸以及酰基化核糖核苷源。
此处所用的术语“有害后果”指的是由诱变剂造成的哺乳动物细胞的损伤，特别是基因组的损伤，导致发展皮肤癌或其它皮肤损伤，如光痣、光化角化症、或其它的光老化表征(如皮肤皱纹或“老年斑”)的机会增加。能够导致这些有害后果的诱变剂包括阳光辐射、紫外线辐射、电离辐射、自由基(不管是对具光化学活性的色素进行照射的结果产物，或者是来自一些其它的来源，包括正常的代谢过程)、氧化氮、以及环境诱变剂。
B．本发明的化合物
本发明的化合物主要是那些主要的DNA的脱氧核苷成分：脱氧腺苷、脱氧胞苷、脱氧鸟苷、以及胸苷。本发明还包括使用有效量的这些脱氧核苷的前体，如寡脱氧核糖核苷酸、DNA、脱氧核糖核苷酸、以及这些脱氧核苷的酰基化衍生物，而且具体地，用于把光力学感光剂以及光致敏剂对DNA、核糖核苷、以及它们的同类物，如寡核糖核苷酸、核糖核苷酸、以及核糖核苷的酰基化衍生物，的影响减到最小。
2-脱氧核糖以及2-脱氧核糖的酰基化衍生物也是本发明的有用的化合物。把它们用于治疗现有的由阳光诱导皮肤损伤，如光化角化症，是特别有利的。
不受任何理论的限制，本发明的进入细胞的活性剂被认为是脱氧核苷或脱氧核苷的酰基化衍生物，因为脱氧核糖核苷酸或寡脱氧核糖核苷酸的阴离子磷酸根部分阻碍其穿越细胞膜。磷酸化的脱氧核苷前体在施用于皮肤之前或之后，在进入细胞之前被通过酶解或非酶解的方式降解转换为游离的脱氧核苷。
脱氧核糖核苷可以通过几种方法中的任意一种来制备。它们可以通过从生物来源(如鱼的精子)的DNA降解制得、或通过化学合成或通过发酵的技术制得。
本方法也包括上述化合物的药理上可接受的盐。
C．本发明的组合物
本发明包括用于提高DNA修复的纯保真度以及保护皮肤以防备诱变剂的药物组合物。该组合物包括1)有效量的一种或多种的脱氧核糖核苷来源，以及任选地2)有效量的药理上可接受的局部用载体，该载体能将脱氧核糖核苷或它们的前体在体内条件下运送至皮肤中合适的靶细胞。
虽然个体的脱氧核糖核苷，尤其是脱氧胞苷(见实施例7)具有一定的减弱紫外线诱导的肿瘤发生的活性，但是在本发明的一种配方中，典型地包含有两种或更多的脱氧核糖核苷，或者优选地包含有所有的四种。本发明中所包括的组合物含有脱氧腺苷、脱氧胞苷、脱氧鸟苷或胸苷，它们或者作为单独的试剂，或者可能是两种、三种或四种这些化合物的组合。含有脱氧胞苷的组合物是特别有利的。本发明中所包含的组合物中各脱氧核糖核苷的浓度，不管是单独存在或与其它脱氧核糖核苷或脱氧核糖核苷的前体(如脱氧核糖核苷酯)相结合，并标准化到游离核苷或在脱氧核糖核苷的磷酸盐或寡核苷酸或药物前体如脱氧核糖核苷酰基化的衍生物中核苷部分的量，变化范围为0.1至10毫克/毫升，优选的是1至5毫克/毫升。
对于去氧核糖或去氧核糖的酰基化衍生物，在本发明组合物中合适的浓度变化范围为0.1至100毫摩尔，优选的是10到50毫摩尔。
为了使脱氧核糖核苷及其本发明中的相关化合物能够进入较深层的皮肤细胞，可以提高它们穿过皮肤外层(如角质层)的渗透力的赋形剂是有用的。可以提高本发明的化合物穿透进入皮肤的能力的赋形剂成分包括但不局限于：乙醇、异丙醇、乙二醇醚如：二甘醇一乙基醚、azone(1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮、油酸、亚油酸、丙二醇、高渗浓度的甘油、乳酸、羟基乙酸、柠檬酸和苹果酸。
本发明组合物中二甘醇一乙基醚的合适的浓度范围为2至20％，优选的是5至15％(w/w)。
除了促进试剂被皮肤吸收外，使用局部用α-羟基酸(如乳酸和羟基乙酸)可以影响皮肤减少紫外线进入表皮易受伤害的基底层的能力。因此，对减少使用AHA(如用于促进表皮细胞脱落)的人暴露于阳光或紫外线的后果的药剂的需求在增加。由于吸收紫外线的遮光剂穿透到皮肤中是所不期望的，因为它可能会对由紫外线诱导的细胞损伤产生光致敏及光力学增强作用，所以本发明的化合物独特地适用于与AHA相结合(在同一配方中或在分开的配方中均可)，以改善皮肤对阳光或紫外线辐射损伤作用的抵抗力。
本发明的一个实施方案是一种水凝胶配方，包括一种水的或水-醇介质和一种胶化剂，以及一种脱氧核苷源。合适的胶化剂包括但不局限于甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆(聚羰乙烯)、hypan、聚丙烯酸酯以及甘油聚丙烯酸酯。
胶化剂的浓度是根据它们对粘度以及药物或化妆特性的影响来选择的。一种卡波姆胶化剂，如卡波姆934P，的合适浓度为1至15％之间，优选地是在2至10％之间(w/w)。
脂质体是微型的脂质小泡，它们可以含有药物活性剂，要么包裹在小泡中的水空间中，要么包裹在脂质膜本身中，据该药剂的亲脂性而定。脂质体能够把一种药剂递送穿越角质层进入较深层的皮肤，因此是本发明的化合物和组合物的合适的赋形剂。
Niosomes是类似于脂质体的脂质小泡，它的膜大量地由非离子脂质组成，它的一些形式对于把化合物输送穿越角质层是有效的。
在本发明的一个实施方案中，脱氧核苷的亲脂性酰基化衍生物，如脱氧核苷的油酸或棕榈酸酯，除了被包裹在小胞膜中之外(或作为其替代)，被结合到niosome或脂质体膜的膜中。
有利于结合到本发明组合物中的其它药剂包括皮质类固醇，特别是浓度为0.05至1％的氢化可的松、其它的治疗有效量的抗炎性皮质类固醇、局部麻醉剂包括但不局限于苯佐卡因、利多卡因、苯甲醇、芦荟油(aloe vera)、aloe barbadensis、视黄醛、抗氧化剂(如维生素C和E)、黄素、多酚(如从绿茶或红茶中提取的)、尿囊素、脂质体DNA修复酶、抗茵剂(如季铵盐化合物、杆菌肽、新霉素、多粘菌素)、锌盐、以及甲基黄嘌呤。所列的所有药剂在治疗或减缓由紫外线辐射或发炎性皮肤疾病引起的各种不同方面的皮肤伤害或不适中都有一定的用途，因此是对本发明脱氧核苷的单一作用的补充。
已知苯甲醇具有麻醉及防腐的性质，它出乎意料地具有改善相对不溶解的嘌呤脱氧核糖核苷、脱氧腺苷以及脱氧鸟苷的水溶性的作用；在脱氧核苷的局部用配方中，苯甲醇的优选浓度为0.5至5％。这对于使本发明的脱氧核苷以高浓度稳定地结合到水赋形剂中是很重要的。
遮光剂
本发明的化合物被有利地结合到与吸收紫外线的化学遮光剂相同的配方中，例如：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基已基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlaminesalicylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate O(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。
可选地，本发明的化合物被配制在一种适用于在施用遮光剂之前或之后施用于皮肤上的基质中。本发明的这一实施方案使得脱氧核苷在减少紫外线损伤后果以及减弱由遮光剂本身所造成的细胞损伤的光力学增强作用的优点在与广泛的各种不同的商品遮光剂产品结合使用中获得。
D．本发明化合物及组合物的治疗使用
减少皮肤暴露于紫外线或阳光辐射的有害后果
本发明的化合物以及组合物，当在哺乳动物皮肤暴露于诱变性辐射之前、期间、或之后施用时，出乎意料地改善DNA修复的净保真度，从而减少了突变的频率、光老化以及发展皮肤癌的机会。
DNA修复分几步进行。DNA修复系统检测到DNA中发生化学损伤，其可能是由紫外线辐射、电离辐射、自由基、或化学诱变剂造成的。包含有受损区域的一个核苷酸片段(通常还含有一些周围的核苷酸)被剪切下来。被剪切的链被用游离的脱氧核糖核苷酸，使用完整的DNA链当模板，重新合成。
通常认为皮肤细胞(如角质细胞、黑素细胞、成纤维细胞)DNA修复的改善需要参与DNA损伤的检测和剪切的酶或其它蛋白的活性有所改变。因此，人们企图通过由局部施用的脂质体递送DNA修复酶来改善皮肤中DNA的修复(美国专利(Yarosh等，Cancer Res.52：4227-31，1992)。
比损伤初始剪切率远远更为重要的是修复的保真度或准确性。如果细胞无法以与受损DNA片段的剪切速率相当的速率进行准确的修复合成的话，加速DNA修复的剪切步骤的药剂实际上能使损伤加剧(Collins和Johnson，J.Cell Phvsiol.99：125-137，1979)。
本发明的化合物和组合物，当在暴露于阳光或紫外线辐射或其它的环境诱变剂之前、期间或之后施用时，减少由诱变剂诱导的突变频率(实施例1)。这减少了由诱变剂造成的细胞的损伤，也减少了发展皮肤癌的机会，如实施例2及7中所示。对基因组保真度的影响大体上是由单一细胞修复的保真度的实际改善或发生不可修复DNA损伤的细胞的消除的改善来介导的。任何一种机制都导致暴露于诱变剂的皮肤基因组保真度的净改善。
本发明的化合物当与其它的已知对皮肤护理的各种不同的发面有用的药剂(包括但不局限于遮光剂、甲基黄嘌呤、视黄醛、DNA修复酶、脱落剂、以及蛋白酶抑制剂，皮质类固醇以及非类固醇类抗炎剂)结合施用时，具有出乎意料的益处。
本发明的化合物及组合物，当在暴露于紫外线或阳光辐射之后足够短的时间内(如约3天内)施用，则改善细胞及大分子损伤的修复并提高净余的基因组保真度，从而减少了发展此类暴露所造成的肉眼可见的有害后果(包括但不局限于光老化、晒黑综合症、光化角化症、光痣、“老年斑”和皮肤癌，如基底细胞癌、鳞细胞癌、黑素瘤)的机会及其严重程度。本发明的化合物以及组合物也可以可选地在暴露于阳光或紫外线辐射之前或期间施用以缩短损伤与本发明化合物发挥修复增强作用之间的时间间隔。
用本发明的化合物及组合物对皮肤进行治疗结果减少发展皮肤癌及其它的暴露于阳光或紫外线的有害后果(如光老化)的机会，甚至在本发明的化合物是在甚至辐射之后，如在意外地暴露于潜在损伤剂量的阳光照射之后，施用。这种类型的活性是传统的遮光剂或可能通过增强黑素生成起作用的药剂所不具有的，它们仅在照射之前施用才有用。
本发明的化合物及组合物进而对治疗现有的发炎性或过度增殖的皮肤损伤，特别是那些由暴露于阳光或紫外线辐射所造成的，包括但不局限于光化角化症、光痣、以及皱纹，是有用的。实施例9详细说明了这种活性在一个患者中的表现，其中局部施用本发明的组合物导致一种现有的光化角化症的完全退却。
遮光剂活性的改善以及遮光剂对紫外线损伤的光力学增强的减弱作用
遮光剂典型地是以防止由阳光诱导的红斑为基础而设计和试验的。虽然红斑和遮光剂对红斑的减弱作用是一种重要的短期效应，但是遮光剂对红斑以及炎性的减弱并不一定意味着它们对DNA产生了一种成比例的保护(或者对皮肤癌和一些DNA损伤的继发的光老化特征产生成比例的防护)。固然遮光剂在防止一些光老化特征以及与紫外线有关的癌发生中是有用的，但它们并没有提供完全的防护，而且在一些情形中，可能会实际上通过充当光力学致敏剂而加剧了光损伤(见实施例3)。
化学遮光剂旨在通过吸收其波长可导致诱变(或产生红斑)的光子来起作用，从而产生一种短寿命的单一激发态；返回到基态伴随着更大波长的光子的发射，它被认为比入射辐射危害性更小。在一个分子从单一激发态迅速返回基态的过程中所发生的光子发射已知为“荧光”。然而遮光剂或其它的外源性或内源性紫外线吸收分子也可以被激发到长寿命的三重态，这可以便利进一步的反应(在一个分子从三重激发态返回基态的过程中所发生的能量发射已知为“磷光”，其发生的时间间距典型地比荧光长很多)。结果是，一些紫外线吸收剂，特别是具有最低三重态(这种三重态比基因组DNA成分的最低三重态的能量水平更高)的那些，能吸收光子并实际上通过直接或间接的能量转移(如从三重激发态)，而不是通过简单的荧光或无害波长的光子的发射，来加剧DNA的损伤。
二苯甲酮是二苯甲酮-3的一个结构很接近的类似物。它增加了在经紫外线照射的DNA中链断裂及嘧啶二聚体的产量，而且已知在紫外线照射时产生自由基(Charlier等，Photochemistry andPhotobiology，15：527-536，1972)。在实施例3、4、5及6中所给出的结果表明经核准的遮光剂成分同样也发生类似的现象，同时表明本发明的脱氧核苷减少了施用遮光剂所带来的这一有害后果。
当遮光剂的浓度以足以阻断紫外线辐射进入细胞的浓度存在时，它是具保护性的。然而，如果光子吸收剂(包括通常的遮光剂成分)以不足以充分地阻断紫外线的传输的非常低的浓度存在时，它可以充当能量传输分子，直接地(光致敏作用)或通过催化形成活性氧自由基(光力学致敏作用)有效地吸取紫外线的能量并把其转移到细胞成分中。这样，低浓度的二苯甲酮，例如，增强由紫外线辐射诱导的DNA损伤，而在足以完全阻断紫外线进入细胞或它们总共的中间微环境的较高的浓度下，它则保护DNA免受损伤(见实施例3)。
预期的体内活性是一种含有二苯甲酮-3的遮光剂，如果施用足以完全阻断光线进入靶细胞的一层，则可以保护细胞免受损伤。然而，在不足以防止紫外线辐射穿透进入靶细胞的较低浓度下，特别是在已经有一些二苯甲酮-3通过角质层或毛囊被吸收进入决定性的细胞层的时候，它将对DNA产生潜在的体内损伤。在用含有二苯甲酮-3的商品化遮光剂局部处理的小鼠中，在暴露于紫外线之后确实观察到与这种假设一致的影响(见实施例6)。除了二苯甲酮衍生物以外的其它类别的遮光剂，当在照射时以低浓度存在时，也会加剧由紫外线诱导的DNA损伤。
最近，已经发展了一种很容易受各种不同致癌物(包括紫外线辐射)的影响的转基因小鼠品系(v-HA-ras转基因TG.AC小鼠)(Leder等，Proc.Nat.Acad.Sci.USA，87：9178-9182，1990)。在暴露于相对较小的紫外线辐射之后，这些小鼠在几周的时间内可靠地发展出皮肤乳头状瘤。当在这种小鼠的背上施用一商购遮光剂圆贴片时，被保护区域的中心发生由紫外线诱导的乳头状瘤的几率确实比未被保护的区域低，但是，在施用遮光剂的空白处，乳头状瘤的发生率常常非常高(有时比未受保护区域的还要高)(见实施例6)。一层足以阻断紫外线进入靶细胞的遮光剂是具保护性的，但是低浓度的遮光剂，如在遮光剂贴片的空白处，可以充当光致敏剂，增加了由紫外线诱导的皮肤癌的发生率(比完全“未被保护的”皮肤还高)。在正常施用遮光剂的过程中，必定会使有关的皮肤细胞暴露于低的、具光致敏作用(而不是保护作用)的浓度的遮光剂中，如在施用的遮光剂贴片的空白处，或者在一层保护性的遮光剂被洗去或被损耗时。
在常规的遮光剂配方(或含有遮光剂的其它化妆品)中添加的脱氧核苷或其相关化合物的优点除了支持DNA修复以外，还在于它们能够通过充当能量清除剂与传统的遮光剂相配合协助，吸取由遮光剂(和细胞靶物即DNA具化学类似性)发射的能量或产生的自由基。外源性脱氧核苷除了直接吸收紫外线能量以外，还充当由遮光剂或其它光致敏剂捕获的能量的“诱惑剂”(〃decoys〃)，否则这些能量会被转移给细胞靶物，包括DNA。这样，脱氧核苷提供了一种与剂量相关的紫外线辐射对细胞DNA的损伤的减少，这种损伤是在有低浓度的光致敏剂(如二苯甲酮-3或其它的遮光剂)存在的情况下发生的(实施例4)。
适合的能量清除剂的一个判定性的特征是它们的最低三重能量态与原位DNA成分的相等或更低。因为脱氧核苷(或脱氧核糖核苷酸、酰基化脱氧核苷、或寡脱氧核糖核苷酸)的物化性质与基因组DNA是类似的，所以本发明的化合物特别适合充当能量清除剂，以保护基因组DNA免受因为能量从光致敏剂或光力学感光剂传送而造成的损伤。在这一实施方案中，核糖核苷、核糖核苷酸、寡核糖核苷酸以及核糖核苷的酰基化衍生物是归属于本发明范围内的。此类清除剂在用于局部施用的组合物中的合适的浓度范围为0.1至100mg/ml(在核苷酸或寡核苷酸或核苷酰基化衍生物的情形中，标准化到游离核糖核苷的数量)。优选地，此类清除剂的浓度范围为0.1至20mg/ml或特别地1至5mg/ml。
不仅仅是遮光剂存在对DNA损伤产生光力学增强作用的问题。其它的化合物，包括皮肤中的内源性分子，能吸收一些其波长并不一定显著地对DNA直接产生损伤的紫外线，并把能量传送给细胞靶物，包括DNA，或者产生损伤细胞DNA的自由基。内源性光致敏或具光力学活性的皮肤成分(具光化学活性的色素)的例子包括但不局限于吡咯紫素、色氨酸、核黄素、以及黑色素。外源性的具光力学活性的化合物包括补骨脂素，它存在于一些芳香油(香柠檬油)中，实际上被用于通过加剧细胞的损伤来增强由阳光诱导的晒黑以及牛皮癣的紫外线光线治疗。许多治疗药物或它们的代谢物是具光化学活性的色素，它们在患者暴露于阳光、可见光、或紫外线辐射时会产生有害的皮肤反应。化妆品中的色素以及其它的光吸收成分也是具光化学活性的色素，它们可以加剧细胞的光损伤。
本发明的脱氧核苷以及相关的化合物(如脱氧核糖核苷酸、寡核苷酸、或DNA本身)对减少由激发态的光吸收分子(包括外源性的具光化学活性的色素，如遮光剂以及化妆品色素，以及来源于内源性色素，如色氨酸、吡咯紫素、咪唑丙烯酸以及黑色素)引起的细胞损伤是有用的。
进而，因为由二苯甲酮衍生物引起的对DNA损伤的光力学增强作用部分是由自由基的产生所介导的(Charlier等，Photochemistryand Photobiology，15：527-536，1972)，所以本发明的化合物和组合物对于保护皮肤及粘膜层免受自由基的损伤(不管自由基，如氢氧根自由基、过氧化物自由基、或脂过氧化物自由基，是否是通过光力学现象开始或产生的)是有用的。实施例3、4、5和6提供了本发明的脱氧核苷保护DNA免受由自由基引起的损伤的证据。
本发明的脱氧核苷以及相关的化合物被有利地结合到化学遮光剂的同一配方中，这些遮光剂包括但不局限于：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基己基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlamine salicylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate O(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。这类遮光剂在配方中的浓度与管理的指导方针以及标准使用是一致的。
类似地，在本发明的另一个实施方案中，本发明的化合物被结合到含有具光化学活性的色素的化妆品中，以把皮肤暴露于阳光或紫外线辐射以及此类化妆品成分两者相结合的有害结果减到最低。
可选地，可把本发明的化合物以分开的组合物，如喷雾剂、洗剂、辊动剂(roll-on*)、杆剂、或凝胶，在施用遮光剂产品或化妆品之前或之后施用到皮肤上。
甲基黄嘌呤
甲基黄嘌呤，如咖啡因、茶碱、氨基茶碱或异丁基甲基黄嘌呤，已经被提议作为“无阳光”晒黑剂，它通过调控黑素产生的生物化学途径中的活性而起作用。它们被提议的机制涉及环腺苷单磷酸磷酸二酯酶的抑制作用，从而增强了环腺苷单磷酸在途径调控的黑素产生中的生物活性。甲基黄嘌呤可以增强黑素细胞中黑色素的生产，它可以单独起作用，或者与晒黑刺激剂，如紫外线或阳光照射，结合起作用。然而，已知甲基黄嘌呤也加剧由紫外线辐射造成的DNA损伤，这导致DNA修复的损伤或细胞周期控制机制的崩溃(Kastan等，CancerResearch，51：6304-6311，1991)。
本发明的化合物可被用于减少甲基黄嘌呤对因为皮肤暴露于紫外线或阳光辐射而造成的DNA损伤的有害影响。本发明的化合物因此改善了含有甲基黄嘌呤作为活性成分的皮肤晒黑产品的安全性。本发明的化合物可以分开施用，或者也可以与甲基黄嘌呤配方结合施用。
脱落剂
含有α-羟基酸(AHA)，如乳酸、羟乙酸、柠檬酸、或苹果酸，的化妆品被广泛使用。它们具有湿润和脱落的性质。含有高浓度AHA的产品也被用于产生更激烈的“脱皮剂”，主要通过化学烧伤把表皮的外层除去。生长在里面的新的上皮通常比被除去的皮肤层更柔软更光滑。β-羟基酸，如水杨酸，也是有用的脱落剂。视黄酸也被用于通过它的脱落作用以及通过激活上皮细胞翻覆和上皮代谢变更来实现类似的目的。
据报道，脱落剂可以减少角质层阻挡阳光的能力，并且增加皮肤对其它试剂的通透性。因此，需要把紫外线保护和AHA结合使用。然而，由于AHA造成皮肤通透性的增强，所以在选择防阳光保护剂时要谨慎，因为被吸收的遮光剂会对DNA损伤产生光力学增强作用。本发明的化合物可以有效地减少使用脱落剂的人暴露于阳光或紫外线辐射或其它的环境诱变剂，包括但不局限于α-羟基酸、β-羟基酸以及retinoids，之后的有害后果。
非类固醇类抗炎剂
非类固醇抗炎剂通常被用于治疗关节炎和其它的抗炎剂。另外，这一类中的一些成员，如二氯芬酸(乙酸2，6-二氯-苯基-氨基-苯酯)正在被研究用作减少皮肤光损伤的一些方面的局部用药剂。
这一类药物的一个原型成员，对乙酰氨基酚(acetaminophen)，通过抑制核糖核苷酸还原酶(它把核糖核苷二磷酸转换为脱氧核苷二磷酸)来抑制由紫外线辐射造成的损伤后的DNA的修复(Hongslo等，Mutagenesis，8：423-429，1993)。通过给接受非类固醇类抗炎剂口服或局部治疗的患者的皮肤，特别是给总体上暴露于阳光的皮肤部位，提供脱氧核苷，本发明的组合物克服了与这类广泛使用的药物相关的有害后果。
鸟氨酸脱羧酶抑制剂
皮肤经紫外线照射的一个后果是细胞增殖率以及细胞增殖所需的酶(其中一种酶是鸟氨酸脱羧酶(ODC))的活性的提高。二氟甲基鸟氨酸(DFMO)是ODC的一种抑制剂，ODC是多胺合成所必需的，而多胺则是DNA复制所必需的。DFMO对减少皮肤癌以及癌前光化损伤是有用的。在暴露于阳光或紫外线辐射之后抑制细胞的周期可以给细胞更多的时间在诱变性损伤被细胞分裂固定之前修复DNA，但是细胞周期停滞同时也通常导致脱氧核苷水平的降低，而脱氧核苷却是DNA损伤的修复所必需的。因此，脱氧核苷与DFMO以及其它的抗增殖剂(它们通过不直接涉及脱氧核苷混合物的诱导性耗损或失衡的机制起作用)结合使用是有用的。可选地，本发明的脱氧核苷可以被结合到DFMO(或其它的通过不同于DNA前体合成损伤的途径起作用的皮肤细胞增殖的抑制剂)的同一配方中。
在暴露于内源性氧化氮的过程中对皮肤进行治疗
氧化氮(NO)是一种具生物活性的调节物质，由内皮细胞、巨噬细胞以及其它类型的细胞分泌，特别是在发生炎症时。氧化氮同时还是与暴露于紫外线相关联的红斑的一种重要的调节物质。NO合成酶的抑制剂在暴露之后减少了皮肤血流量的增加(Deliconstantinos等，J Cardiovasc Pharmacol 20 Suppl 12：S63-5，1992；Deliconstantinos等，Br J Pharmacol 114(6)：1257-65，1995；Warren，FASEB Journal，8(2)：247-51，1995)。
氧化氮是核糖核苷酸还原酶(RR)的一种强有力的抑制剂。RR是脱氧核糖核苷酸重新合成的一种关键酶(Kwon等，J Exp Med174(4)：761-7，1991；Lepoivre等，J Biol Chem 269(34)：21891-7，1994)。氧化氮的抗增殖效果部分导致核糖核苷酸还原酶的抑制。这在对感染性微生物或肿瘤作出炎性反应中是有利的，但对需要DNA修复能力的细胞，如暴露于由暴露于紫外线所引出的炎性调节物质的皮肤，是有害的。从巨噬细胞释放的NO的数量足以抑制核糖核苷酸还原酶，从而诱导了附近细胞的白细胞郁积。
最熟知的RR的抑制剂是羟基脲(HU)，它与N-ω-羟基-1-精氨酸(一种NO生产过程中的生理学中间物)的结构是类似的。羟基脲可以充当类似于NO的亚硝基化反应物(LePoivre等，J Biol Chem269(34)：21891-7，1994)。N0和羟基脲都通过淬灭一个在酶活性位点的酪氨酰基来抑制RR。
这里首次公开NO通过与外源性脱氧核苷可逆性机制使细胞对由紫外线诱导的DNA损伤敏感的发现(见实施例8)。另外，在没有暴露于紫外线的情况下，NO本身导致DNA的损伤，这种损伤可以通过本发明的化合物来防止或逆反(实施例8)。
对紫外线暴露的发炎性反应(这在与紫外线相关的免疫抑制过程中也起着重要的作用)，通过由NO抑制核糖核苷酸还原酶，加剧了紫外线暴露的诱变性和细胞毒性作用。本发明提供了一种用于补偿NO这种有害作用的方法。外源性的脱氧核苷是在核糖核苷酸还原酶的下游进入DNA代谢的，它补偿了减少了的RR的活性。虽然NO在需要脱氧核糖核苷酸的细胞中是有害的，但是它在暴露于阳光的皮肤中却有一些有利的作用。NO生产的抑制剂也削弱了被暴露于过量紫外线辐射(即，紫外线的剂量产生了足够严重的晒黑以致伤口康复过程被启动)所损伤的皮肤的康复能力(Benrath等，Neurosci Lett，1995)。因此，NO对组织的修复是有用的(可能通过改善血流，也可能通过刺激从巨噬细胞或角质形成细胞释放生长因子)，但它也可能会同时通过减弱细胞生产用于DNA修复的脱氧核糖核苷酸的能力加剧与紫外线相关的DNA的损伤。
由NO介导的RR的抑制提供了一种解释了在重复暴露于强的太阳光的过程中，DNA损伤发生不成比例的增加，而暴露于阳光的其它症状却没有相应地增加的机制。局部施用本发明的化合物和组合物提供了一种改善此种形式的有条件的过敏症的方法。
NO参与了皮肤的发炎性反应，这种反应并不一定涉及暴露于阳光或紫外线辐射。NO是从被激活的巨噬细胞中释放的，它是大多数发炎性反应的一个成分。本发明的化合物和方法提供了一种克服NO在发炎性皮肤疾病(包括但不局限于牛皮癣、皮炎、过敏性皮炎、接触性皮炎(如对有毒的常春藤和有毒的栎木的反应)、湿疹以及痤疮)中的一些有害作用的方法。在这些疾病中，NO通过抑制脱氧核糖核苷酸的合成使一些类型的细胞对由紫外线诱导的DNA损伤产生敏感性。本发明的化合物和组合物减弱了紫外线暴露和发炎性皮肤疾病相结合的这种有害后果。由于NO和引起DNA损伤的其它的内源性氧化剂甚至在没有显著地暴露于紫外线辐射的时候仍存在于发炎性皮肤疾病(如牛皮癣或皮炎)中，所以本发明的脱氧核苷对保护在发炎性疾病中的皮肤细胞的遗传完整性是有用的。本发明的化合物防止或修复了单纯由NO引起的(未暴露于紫外线辐射)DNA损伤(实施例8)。
脱氧核苷同时对治疗发炎性皮肤和粘膜疾病是有用的，部分通过为脱氧核苷还原酶提供更高浓度的脱氧核苷酸底物。核糖核苷(或核糖核苷的酯)在本发明中的用法和脱氧核苷的是一样的。优选地，在局部施用的组合物中，脱氧核苷结合有核糖核苷(或核糖核苷的酯)，后者的浓度为0.1至20mg/ml，优选地1至5mg/ml。胸苷对发炎性疾病的治疗是特别有用的。
用羟基脲抑制DNA前体的合成导致水解性的溶酶体酶活性的增强和泄漏，溶酶体酶参与细胞外损伤，如在发炎性皮肤疾病或光损伤中(Malec等，Chem.Biol．Interact.，57：315-324，1986)。本发明的化合物防止了发炎性组织损伤的这一成分，特别是当DNA前体合成的这种抑制是由内源性产生的NO(它的功能与羟基脲是类似的)介导的时候。
对基因组的另一个损伤是细胞暴露于紫外线辐射导致酶(包括脱氧核糖核酸酶)从溶酶体中释放出来。存在于溶酶体中的脱氧核糖核酸酶Ⅱ是一种核酸内切酶，它在溶酶体崩溃之后使核DNA的链断裂。在一般的发炎性疾病中，酶也会从溶酶体中泄漏出来。本发明的化合物和组合物对在发炎性皮肤疾病中，由从溶酶体释放的脱氧核糖核酸酶引起染色体损伤之后，以及在皮肤暴露于阳光或紫外线辐射之后，保存基因组的完整性是有用的。
通过限制皮炎症的一些有害的后果，本发明的化合物及组合物可被用作抗炎剂，而且可选地与其它的局部或全身性抗炎剂，包括但不局限于皮质类固醇样氢化可的松及其同类物，结合施用(作为分开的组合物施用，或优选地，制备于同一配方中)。
类似地，本发明所包括的化合物及组合物对治疗粘膜炎症疾病，包括但不局限于炎性肠病、溃疡性结肠炎、局部性肠炎、或胃肠道任何一个地方的粘膜炎，是有用的。优选的治疗方式是局部施用，在此种情形中通过灌肠剂或栓剂，为此把本发明的脱氧核苷以及其它的化合物掺入到合适的赋形剂中。
暴露于电离辐射的皮肤和粘膜组织的治疗
接受电离(或X射线或γ射线)辐射治疗(如用于治疗癌症)的患者，其覆盖内在肿瘤的皮肤会遭受损伤，导致脱落和康复不良。本发明的化合物和组合物对治疗由故意的或意外的电离辐射暴露造成的皮肤和粘膜表面的损伤是有用的。用于治疗皮肤时，本发明的组合物在辐射治疗之前或之后局部施用。用于治疗如嘴、胃肠道、尿道或阴道中的粘膜表面时，本发明的合适的组合物也是局部进行施用。用于治疗粘膜表面的合适的组合物包括凝胶、洗液、软膏、栓剂、口服胶囊、丸剂或糖衣丸或溶液。
E．本发明的化合物和组合物的施用方法及其配方
本发明的化合物被配制于配药可接受的赋形剂中，赋形剂把其浓度适合实现减少突变频率和致癌机会目的的化合物递送到需要的皮肤中的细胞群落。
本发明的组合物是在暴露于阳光或其它诱变剂之前、期间、或之后施用的。把含有脱氧核苷(0.1至10mg/ml，优选地1至5mg/ml)的洗液或水凝胶以薄膜的形式施用于皮肤。组合物应该在暴露于损伤剂量的阳光或紫外线辐射后的大约48或72小时之内施用以便在辐射后第一次细胞分裂之前支持DNA的修复，但是在暴露于强太阳光之前、期间、或之后12小时内施用是优选的。在暴露于辐射或其它诱变剂之前施用本发明的组合物也是有效的，只要如此提供的脱氧核苷或其组成代谢物在暴露于诱变剂时存在于需要它们有益作用的细胞中。优选地，本发明的组合物在皮肤暴露于阳光或其它诱变剂前大约12小时之内施用。
本发明的组合物优选地是作为日用皮肤治疗剂进行施用，每日施用一至多次，特别是施用于身体暴露于阳光的部位或者是炎性皮肤疾病的发生部位。暴露于阳光辐射导致皮肤光损伤和光老化通常是一个积累的过程，包括反复暴露于阳光，甚至是每天，持续一年的时间。在本发明中，用本发明的化合物和组合物来防止或治疗皮肤的光损伤包括对由过去的阳光暴露所造成的现有的皮肤损伤进行治疗，以及对现在的或将来的由暴露于阳光或其它诱变剂所造成的损伤进行防止，或减弱其严重程度。
通过经由细胞分裂来修复进行中的DNA的分子损伤或在基因组损伤永久性确定之前对其进行修复，或者通过经由能量清除来防止最初的损伤，本发明的组合物防止或延缓了辐射、自由基、或化学诱变剂的有害后果，如很容易用肉眼看到的皮肤损伤、光老化、光化角化症、以及皮肤癌，的发生。因此，本发明的组合物和方法减少了皮肤光损伤表征的发生率，特别是当有规律地施用，如每日施用的时候，或尤其在暴露于阳光辐射之前、期间、或之后施用的时候。
本发明的组合物同时对促进已有的由阳光诱导的和其它的发炎性和过度增殖性的皮肤损伤，如光化角化症、接触性皮炎、牛皮癣、湿疹、或痤疮、或皮肤癌，如黑素瘤、基底细胞癌、或鳞状细胞癌的康复是有用的。在此类疾病中，把局部性使用的凝胶、乳霜、软膏或洗液根据需要每日一至两次施用于受影响的区域。
在本发明的一个实施方案中，在施用遮光剂之前把一种含有脱氧核苷的组合物施用于皮肤，由此来替代含有传统遮光剂和脱氧核苷或本发明相关的化合物的配方的使用。
当治疗结肠粘膜炎症，如炎性肠病，时，把本发明的组合物作为一种栓剂或灌肠剂施用，根据临床需要大约每日一次。体积为10至500ml的含有脱氧核苷的合适的灌肠剂组合物适用于治疗炎性肠病，如溃疡性结肠炎或局部性肠炎。当治疗胃肠道其它部位，如嘴，中的粘膜炎时，使用该种给药途径的标准的配药可接受的赋形剂，如漱口液或粘性水状凝胶。
F．本发明化合物的合成
脱氧核苷是DNA的成分，它存在于所有的生物体中，因此原理上可以从各种不同的来源中提取。实际上，目前最方便的生物来源是鱼精，它含有相当高浓度的DNA。把鱼精囊匀浆，把其中所含的DNA部分纯化并用脱氧核糖核酸酶和磷酸酶处理以把其降解到核苷的水平，随后再把其用层析或重结晶进行纯化。
由于在本发明的一些实施方案中使用的是脱氧核苷的混合物，所以把经过纯化的脱氧核苷按合适的比例重新进行组合。可选地，在把脱氧核苷从其它的鱼精成分(或，当DNA是源于其它的生物来源时，是其它的污染物)中纯化出来的过程中并不把各种脱氧核苷相互分开；如果需要，可以把适量的单种脱氧核苷添加到这种混合物中，以调节脱氧核苷的相对比例。
脱氧核苷也可以从更简单的前体进行化学合成。
脱氧核苷的酰基化衍生物，如美国专利申请序号466，379中所公开的，在以下是有用的：1).通过皮肤中非特异性的酯酶逐渐的去酰化作用源源不断地提供脱氧核苷，以及2)。改善通过疏水性生物膜或细胞外介质，如表皮角质层的胞间脂质的穿透性。
对于熟悉本领域的人士，显然可以用其它的合成方法来制备本发明的化合物。
                      *   *   *
以下实施例是解释性的，并不局限本发明的方法和组合物。其它对各种不同的在临床治疗中正常都会遇到的条件和参数所进行的合适的修改或改变(它们对于本领域的技术人员是显而易见的)都归属于本发明的精神和范围之内。
实施例1：在暴露于UVB之后辐射后局部施用脱氧核苷改善了小鼠皮肤DNA的修复
用〃Big Blue〃转基因小鼠试验系统来确定皮肤对紫外线辐射产生应答而发生的突变。这些小鼠在每个细胞中带有约40个拷贝的λ噬茵体穿梭载体，其中每个含有一个作为突变目标的lacⅠ基因，以及lacⅠ增强子、lac启动子和αlacZ报告基因。
把小鼠暴露于紫外线辐射并用本发明的化合物或赋形剂进行治疗，然后提取皮肤样品中的基因组DNA，穿梭载体被包裹在λ病毒的头部。把含有穿梭载体的λ噬茵体病毒接种在带有颜色试剂X-Gal的大肠杆菌平板中。X-Gal在半乳糖苷酶(αlacZ基因的产物)的酶学改变时变为蓝色。含有未突变的lacⅠ基因的病毒产生白色的噬茵斑，lacⅠ基因的突变产生蓝色的噬茵斑。通过计算白色和蓝色噬茵斑的相对数目来确定突变的频率。
把Stratagene BigBlueTM转基因小鼠(每组7只)剃毛，隔天用UVB进行照射(313nm，85％的能量)，1．25KJ/m2。
在照射30分钟以后局部施用脱氧核苷(“dNsides”，脱氧腺苷、脱氧胞苷、脱氧鸟苷、以及胸苷每种各4mg/ml)或赋形剂(丙二醇)，重复5天。
在照射后的第5天处死小鼠。从被照射的背部以及未被照射的腹部的皮肤提取DNA，把其包裹在λ噬茵体中并接种在含有X-Gal的大肠杆菌平板中。突变的茵落是蓝色的。在每一组中计数到＞200，000个茵落。
表1：局部的脱氧核苷减少了被紫外线照射的皮肤的突变频率：
自发突变频率(未经照射的皮肤)：
平均：   4.5×10-5
经UVB照射的皮肤的突变频率：
总体     因UV而产生的增量
对照     34.9×10-5    30.4×10-5
脱氧核苷 7.8×10-5     3.3×10-5
如表1中所示，在照射后用脱氧核苷进行局部治疗减少了由UV-B辐射诱导的突变的发生率，在本实验中减少近10倍(30.4×10-5比3.3×10-5)
实施例2：在照射后给v-Ha-ras转基因TG.AC小鼠局部施用脱氧核苷防止由紫外线诱导的乳头状瘤的发展
实施例1证明了在照射后进行局部治疗可以通过支持和改善DNA的修复过程来减小”Big Blue”转基因小鼠的一个报告基因由紫外线诱导的突变的频率。对类似于致癌物的紫外线辐射产生应答而发生突变的频率的减少的一个后果应该是由紫外线诱导的肿瘤发生的减少。
已经发展了一种对致癌物极度敏感的转基因小鼠系。这使得可以对各种不同的化学剂和其它的治疗的致癌可能性进行快速确定。需要把正常的小鼠重复暴露于紫外线辐射好几周才能使其可靠地发展皮肤瘤。不同的是，vHa-ras TG.AC转基因小鼠在单次或少量几次暴露于紫外线辐射之后即可迅速发展肿瘤。
在9只暴露于UV-B辐射(0.3-1.25KJ/m2 x3 q2d)随后在辐射后用赋形剂(丙二醇)治疗的小鼠中，在暴露的四周后发现了总共35个乳头状瘤。
在7只暴露于同样剂量的UV-B辐射并在辐射后再接受脱氧核苷(每种主要的脱氧核苷4mg/ml，溶于丙二醇中)治疗的小鼠中，仅发现一个乳头状瘤(表2)。
表2：局部脱氧核苷减少了UV诱导的肿瘤发生
对照：              3.89个肿瘤/小鼠
经脱氧核苷治疗：    0.14个肿瘤/小鼠
脱氧核苷对减少由紫外线诱导的肿瘤发生的有利影响势必是因为细胞修复或细胞校正得到了改善，或者是因为肿瘤的促进作用被抑制，而不是防止了初始损伤，因为脱氧核苷是在照射之后才施用的。这一观察显示在暴露于UV-B辐射之后(或假定地在暴露期间)用脱氧核苷进行治疗对肿瘤发生有重要的抑制作用，这是基因组保真度的维持得到改善的结果)。
由报道过的脱氧核苷在加速伤口愈合的效力(美国专利5，246，708)来看，局部施用脱氧核苷(甚至是在照射之后施用)的抗肿瘤发生作用是特别令人吃惊的，因为已知的加速伤口愈合的其它的生长因子，如血小板衍生生长因子(PDGF)或转化生长因子β(TGF-β)，充当着肿瘤增强因子的作用。
当在把细胞暴露于紫外线或电离辐射之后施用脱氧核苷时，脱氧核苷对培养基中细胞的生存有有利的影响，由这一点来看，本实验中的脱氧核苷的抗肿瘤发生作用也是出乎意料的。防止受损细胞的凋亡预期应该增加肿瘤发展的可能性，如在具有缺陷性p53相关机制的动物中所发生的。
实施例3：低浓度的二苯甲酮-3使由紫外线诱导的DNA损伤恶化
把T25细颈瓶中的汇合人成纤维细胞用HBSS(Hank’s BalancedSalt Solution，汉克氏平衡盐溶液)洗3次并与赋形剂或各种不同浓度的二苯甲酮-3(OB)一起保温2小时。抽出培养基并用一层1mm厚的HBSS覆盖细胞，从上面照射UV-B(50J/m2)。抽出培养基并把细胞用2mM的羟基脲保温3小时。再抽出培养基，用0.25％胰蛋白酶/EDTA对细胞进行胰酶消化。把细胞在4℃离心，用50微升HBSS重悬，用200微升1N NaOH在室温下保温15分钟。用碱性蔗糖梯度离心来评估DNA损伤(单链断裂)。在蔗糖梯度中“拟核位置”与DNA单链断裂的数目是成比例的。
没有二苯甲酮-3的紫外线辐射导致拟核位置比基线增加3-4倍(表3)。二苯甲酮-3在所测验的较高浓度，20及200微摩尔，保护细胞DNA免受紫外线辐射的损伤，因为这些组别的拟核位置与未经照射的细胞的接近。然而，暴露于2微摩尔OB的细胞比未经OB照射的细胞损伤还要大，其拟核位置的数值比未经照射的细胞大10倍。因此，低浓度的二苯甲酮-3强烈增加DNA的损伤，而在较高浓度，它则对细胞有保护作用。在实践中，即使是在恰当使用遮光剂的情况下，总是有一些皮肤部位暴露于低的、潜在有害的遮光剂浓度下，或者是在施用了遮光剂贴片的边缘，或者是所施用的遮光剂层在经过一天之后已经消耗了。
表3：低浓度的二苯甲酮-3增强由紫外线诱导的DNA损伤
组别                拟核的位置(mm)
无紫外线                 3
紫外线50J/M2             11
紫外线50J/M2+2μM OB     32
紫外线50J/M2+20μM OB    4
紫外线50J/M2+200μM OB   3
实施例4：脱氧核苷减少由二苯甲酮-3引起的DNA损伤的光力学增强作用
把汇合的人成纤维细胞暴露于2微摩尔的二苯甲酮-3(OB)中，如实施例3中，然后再暴露于UV-B辐射(50J/m2)中。同时也把不同瓶的细胞暴露于浓度递增的脱氧核苷中。在一个蔗糖密度梯度中对细胞进行处理以确定拟核(nucleoid)的位置，这是DNA单链断裂的一种测量方法。
如表4中所示，脱氧核苷使由UV辐射加2μMOB诱导的DNA单链断裂的产生量发生剂量依赖性的减少。浓度为2μM的脱氧核苷稍微减少DNA的损伤。当脱氧核苷的浓度为200μM时，它几乎完全消除了DNA的损伤。
表4：脱氧核苷减少了由紫外线加二苯甲酮-3造成的DNA损伤的光力学增强作用
组别                      拟核的位置(mm)
紫外线+2μM OB                 56
紫外线+2μM OB+2μM脱氧核苷    47
紫外线+2μM OB+20μM脱氧核苷   23
紫外线+2μM OB+100μM脱氧核苷  22
紫外线+2μM OB+200μM脱氧核苷  7
实施例5：单个的与组合的脱氧核苷对由光力学增强的、由紫外线诱导的DNA损伤的影响的比较
人成纤维细胞如实施例4中所述进行制备和处理。确定了单一的脱氧核苷对由光力学增强的DNA损伤(2μM二苯甲酮-3)的影响。在20μM的浓度对单一的脱氧核苷进行试验，同时也对含有脱氧胞苷、脱氧鸟苷、脱氧腺苷、以及胸苷所有四种脱氧核苷每种各20μM的混合物进行试验。
表5：单个的与组合的脱氧核苷对紫外线诱导的DNA损伤的影响的比较：
组别                       DAN链断裂
                        断裂部位/47 MDa)
对照(无紫外线)                .0
紫外线+赋形剂                 .325
紫外线+胸苷                   .13
紫外线+脱氧胞苷               .12
紫外线+脱氧腺苷               .17
紫外线+脱氧鸟苷               .17
紫外线+脱氧核苷(每种20μM)    .01
如表5中所示，每种单一的脱氧核苷都可减少DNA损伤；所有四种脱氧核苷相结合比任何一种单一化合物都更有效。
实施例6：由遮光剂诱导的紫外线诱导的肿瘤发生的恶化以及用脱氧核苷对这种恶化的预防
把一圆贴片的商购遮光剂(Coppertone SPF 8，含有二苯甲酮-3)在暴露于125J/m2的UV-B辐射之前施用于TG.AC小鼠的背部。
在第10天，在于辐射时覆盖有遮光剂的区域的圆形边缘处周围发现每只小鼠有8个乳头状瘤。未经遮光剂处理的小鼠每只出现3个肿瘤。在施用了添加有脱氧核苷的同种商购遮光剂然后暴露于紫外线照射的小鼠中没有产生乳头状瘤(表6)。
表6：脱氧核苷减少了经紫外线及遮光剂处理的小鼠的肿瘤发生
紫外线辐射：                       3个肿瘤/小鼠
遮光剂+紫外线辐射：                8个肿瘤/小鼠
含脱氧核苷的遮光剂+紫外线辐射：    0个肿瘤/小鼠
因此，在施用了遮光剂的贴片的边缘处遮光剂的浓度迅速减少到零，在这些地方导致肿瘤发生的紫外线损伤实际上是被遮光剂增强，而不是减少了，这导致所形成的恶化前的乳头状瘤比根本不施用遮光剂的皮肤的还要多。
在商售遮光剂中添加脱氧核苷消除了遮光剂对肿瘤发生的有害影响。
实施例7：单个的与组合的脱氧核苷对由紫外线诱导的肿瘤发生的影响的比较
把30只12周龄的v-Ha-ras TG.AC小鼠剃毛并暴露于紫外线辐射中，在第0、6、8、11天分别照射1．25kJ/m2，剂量率为12.5W/m2。
把小鼠每5只分为一组并在照射30分钟后开始用以下进行处理：
1．赋形剂(丙二醇)
2．dNsides-脱氧核苷(脱氧胞苷、脱氧鸟苷、脱氧腺苷、以及胸苷每种各4mg/ml)
3．dC-脱氧胞苷(4mg/ml)
4．dG-脱氧鸟苷(4mg/ml)
5．dA-脱氧腺苷(4mg/ml)
6．dT-胸苷    (4mg/ml)
观察动物8周，在8周的时间内观察到乳头状瘤的发展
表7：单个的与组合的脱氧核苷对紫外线诱导的肿瘤发生的影响的比较：在第8周末了每只小鼠上的乳头状瘤数目：赋形剂      1．8脱氧核苷    0.0dC          0.25dG          1.0dA          0.67dT          1.6
如表7中所示，四种脱氧核苷的混合物就防止肿瘤发展而言，提供有最佳的活性。脱氧胞苷也起保护作用。脱氧腺苷和脱氧鸟苷保护作用较差但是还有活性。胸苷没有显著的保护作用。
实施例8：氧化氮通过一种脱氧核苷可逆的机制导致并增强DNA的损伤
氧化氮是由紫外线诱导的红斑的一个中介体，它也存在于炎性皮肤疾病中。氧化氮是诱变性的，可能会使由紫外线诱导的DNA损伤恶化，这部分是通过抑制核糖核苷酸还原酶(即负责把核糖核苷酸转换为脱氧核糖核苷酸的酶)来实现的。
把人黑素细胞暴露到160μM DETA NONOate(Alexis Corporation，Cat#430-014-M005，一种当暴露于水中时即自发产生氧化氮的试剂)中。把细胞暴露于单一的氧化氮、或氧化氮加剂量增加的紫外线辐射(50及300J/m2)中。同时也把多组细胞在暴露于氧化氮或氧化氮+紫外线辐射之前，或之前及之后，暴露于本发明的脱氧核苷中；对照组除了不加脱氧核苷之外，所受的处理都是一样的。
把DNA从细胞中提取出来并用脉冲电场凝胶电泳来确定其DNA链的断裂情况。
如表8中所示，单一的氧化氮造成显著的DNA链的断裂。当把其暴露于紫外线辐射时，断裂进一步增加。本发明的脱氧核苷强烈地减少由氧化氮造成的DNA链的断裂的发生率，以及那些由氧化氮和紫外线辐射结合所造成的断裂。
表8：脱氧核苷减少了由氧化氮诱导的DNA损伤组别                                              DNA链断裂
                                              断裂/105MDa对照                                               0.00氧化氮                                             0.13氧化氮+紫外线50J/m2                                0.21氧化氮+紫外线300J/m2                               0.51氧化氮+脱氧核苷在紫外线辐射之前及之后                0.00氧化氮+紫外线50J/m2+脱氧核苷在紫外线辐射之前/之后     0.03氧化氮+紫外线300J/m2+脱氧核苷在紫外线辐射之前/之后    0.03氧化氮+脱氧核苷紫外线辐射之后                        0.06氧化氮+紫外线50 J/m2+脱氧核苷在紫外线辐射之后         0.06氧化氮+紫外线300J/m2+脱氧核苷在紫外线辐射之后         0.03
实施例9：局部用脱氧核苷对现有的光化角化症的治疗
光化角化症(AK)是真皮内瘤的一种形式，它是一种由阳光诱导的损伤，可发展变成鳞状细胞癌。有一个46岁的妇女在其前额浅色的皮肤上有一个玫瑰色的、表面粗糙的持久的损伤，尺寸有5×10mm。这一损伤被一个广泛认可的皮肤科医生诊断为光化角化症。这个医生给她开5-氟尿嘧啶用于治疗。由于5-氟尿嘧啶是一种光化角质症的标准治疗剂，会产生疼痛以及难看的皮肤腐蚀，这种腐蚀要花几周的时间才能痊愈而且对基因组还有潜在的毒性，所以光化角质症的首选的治疗是局部施用脱氧核苷(脱氧胞苷、脱氧鸟苷、脱氧腺苷、以及胸苷每种各4mg/ml)，采用水凝胶配方，每天在损伤处施用两次，每次0.1ml。在10天内，可以看到在她前额的光化角质症开始退缩，而且3周后，再也看不到光化角质症的痕迹了，而且在治疗期间或之后都没有任何疤痕或不适。这样就不需要用5-氟尿嘧啶或其它的痛苦的或侵略性的措施，如切除或用液氮冷冻，来进行治疗了。在六个多月以后，光化角质症没有再度发生。
实施例10：本发明组合物的配方
本发明组合物的一种适合临床使用的配方含有以下成分。批量的大小可以根据需要的体积随意选择。
1．    2’-脱氧胞苷盐酸              0.4640g
2．    2’-脱氧腺苷一水合物          0.4290g
3．    2’-脱氧鸟苷一水合物          0.4270g
4．    胸苷                          0.4000g
5．    乙二胺四乙酸二钠二水合物，USP 0.0100g
6．    苄索氯铵，USP                 0.0250g
7．    丁基化羟基甲苯，NF            0.0005g
8．    卡波姆934P，NF                0.7200g
9．    甘油，USP                     10.000g
10．   乙醇，USP                     5.000g
11．   二甘醇单乙基酯                10.000g
12．   NaOH，NF(1N溶液)              根据调pH值的需要
13．   HCI，NF(IN溶液)               根据调pH值的需要
14．   纯净水，USP                   补充到100.00g
配制：
1．把第8项(卡波姆934P)溶解在35g的纯净水中。
2．把第5项溶解在该溶液中。
3．把第9、10、11项与15g纯净水在另一个容器中相混合。
4．把第1、2、3、4、6以及7项溶解在步骤3的溶液中。
5．把步骤2和4中的溶液混合在一起。
6．把8.85g的第12项加到步骤5的溶液中。
7．把所得的凝胶混合15分钟，而且如果需要，用第12或13项把pH调节到7.0+/-0.5。
8．把这一批次的最终重量用纯净水补足到100g，然后缓慢混合15分钟。
                *         *       *
上述内容旨在解释本发明，并不是限制性的。可以作各种各样的变化和修改而不致脱离本发明的实质思想和范畴。

Claims (157)

1．一种促进哺乳动物皮肤或粘膜DNA修复的方法，该方法包括对上述哺乳动物施用至少一种脱氧核糖核苷、脱氧核糖核苷酸、或寡脱氧核糖核苷酸。
2．如权利要求1中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是局部施用的。
3．如权利要求1中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷选自脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷。
4．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷。
5．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧腺苷。
6．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧鸟苷。
7．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是胸苷。
8．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
9．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1.0至5毫克每毫升。
10．如权利要求3中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
11．如权利要10中所述的方法，其中上述脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
12．如权利要10中所述的方法，其中上述脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1至5毫克每毫升。
13．一种降低暴露在诱变因素下的哺乳动物皮肤的突变频率的方法，该方法包括对上述皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷的来源。
14．如权利要13中所述的方法，其中上述诱变因素选自紫外线或阳光辐射、化学诱变剂、自由基或电离辐射。
15．如权利要13中所述的方法，其中上述来源选自至少一种游离的或酰基化的脱氧核糖核苷。
16．如权利要13中所述的方法，其中上述来源选自脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸和多聚脱氧核糖核苷酸。
17．如权利要13中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是在一种赋形剂中施用，浓度为从1.0至20毫克每毫升。
18．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧胞苷。
19．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧腺苷。
20．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧鸟苷。
21．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的胸苷。
22．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
23．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1．0至5毫克每毫升。
24．如权利要求15中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
25．如权利要求24中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
26．如权利要求24中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1至5毫克每毫升。
27．一种降低哺乳动物因暴露于诱变因素下而发展成皮肤癌几率的方法，该方法包括对上述哺乳动物的皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷的来源，其中施用所述来源使得上述至少一种脱氧核糖核苷在上述哺乳动物暴露于所述诱变因素当时或之后，以足以降低上述暴露的有害后果的剂量存在于所述哺乳动物的皮肤上。
28．如权利要求27中所述的方法，其中上述来源在暴露于诱变因素之后的3天以内施用。
29．如权利要求28中所述的方法，其中上述诱变因素选自阳光、紫外线或电离辐射。
30．如权利要求27中所述的方法，其中上述来源选自至少一种游离或酰基化的脱氧核糖核苷。
31．如权利要求27中所述的方法，其中上述来源选自脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸和多聚脱氧核糖核苷酸。
32．如权利要求27中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是在一种赋形剂中施用，浓度为从1.0至20毫克每毫升。
33．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧胞苷。
34．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧腺苷。
35．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧鸟苷。
36．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的胸苷。
37．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
38．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1.0至5毫克每毫升。
39．如权利要求30中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
40．如权利要求39中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
41．如权利要求39中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷1至5毫克每毫升。
42．如权利要求27中所述的方法，其中上述皮肤癌选自基底细胞癌、黑素瘤和鳞状细胞癌。
43．一种用于降低哺乳动物皮肤光老化速度的方法，该方法包括对上述哺乳动物的皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷。
44．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷。
45．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧腺苷。
46．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧鸟苷。
47．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是胸苷。
48．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
49．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1.0至5毫克每毫升。
50．如权利要求43中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
51．如权利要求50中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
52．如权利要求50中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1至5毫克每毫升。
53．一种用于降低哺乳动物光化性角化病发生几率的方法，该方法包括对上述哺乳动物的皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷的来源。
54．如权利要求53中所述的方法，其中上述来源选自脱氧核糖核苷、脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酰基化衍生物。
55．一种用于降低哺乳动物皮肤内由于内源性或外源性的具光化学活性的生色团引起的光敏作用或光动力致敏作用所引发的有害后果的方法，该方法包括对上述皮肤施用一种能量清除剂，该清除剂具有最低的小于或等于DNA碱基所具有的三重线态能量。
56．如权利要求55中所述的方法，其中上述外源生色团是一种遮光剂试剂。
57．如权利要求56中所述的方法，其中上述生色团选自：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基己基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlamine salicylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate O(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。
58．如权利要求55中所述的方法，其中上述能量清除剂试剂选自：DNA、寡脱氧核糖核苷酸、核糖核苷、脱氧核糖核苷、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸、酰基化的脱氧核糖核苷和酰基化的核糖核苷。
59.如权利要求58中所述的方法，其中上述能量清除剂试剂是以0.1至20mg/ml的含量在赋形剂中施用。
60．如权利要求58中所述的方法，其中上述能量清除剂是含有游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
61．如权利要求60中所述的方法，其中上述混合物是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
62．一种用于降低哺乳动物的皮肤因暴露于诱变因素下而引起的不利后果的方法，该方法包括对上述哺乳动物施用至少一种脱氧核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或寡脱氧核糖核苷酸。
63．如权利要求62中所述的方法，其中上述诱变因素是阳光或紫外线辐射。
64．如权利要求62中所述的方法，其中上述诱变因素是电离辐射。
65．如权利要求62中所述的方法，其中上述诱变因素是一种自由基。
66．如权利要求62中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是局部施用。
67．如权利要求62中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷选自脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷。
68．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷。
69．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧腺苷。
70．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧鸟苷。
71．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是胸苷。
72．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
73．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1.0至5毫克每毫升。
74．如权利要求67中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
75．如权利要求74中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
76．如权利要求74中所述的方法，其中上述脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1至5毫克每毫升。
77．一种用于降低皮肤因暴露于内源性产生的氧化氮而引起的有害后果的方法，该方法包括对上述皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷的来源。
78．如权利要求77中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源选自脱氧核糖核苷、脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸或酰基化的脱氧核糖核苷。
79．如权利要求77中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是以浓度为1.0至20毫克每毫升在一种赋形剂中施用。
80．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧胞苷。
81．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧腺苷。
82．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的脱氧鸟苷。
83．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离或酰基化的胸苷。
84．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
85．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1.0至5毫克每毫升。
86．如权利要求78中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是游离的或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
87．如权利要求86中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从0.1至10毫克每毫升。
88．如权利要求86中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是在一种赋形剂中施用的，该赋形剂含有每种脱氧核糖核苷从1至5毫克每毫升。
89．一种用于治疗哺乳动物皮炎症的方法，该方法包括对上述发炎皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷或核糖核苷的来源。
90．如权利要求89中所述的方法，其中上述皮炎症选自皮炎、牛皮癣、湿疹和痤疮。
91．如权利要求89中所述的方法，其中上述皮炎症是由于暴露于阳光或紫外线的辐射。
92．如权利要求89中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷或核糖核苷的来源选自DNA、寡脱氧核糖核苷酸、核糖核苷、脱氧核糖核苷、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸、酰基化的脱氧核糖核苷和酰基化的核糖核苷。
93．如权利要求92中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷或核糖核苷的来源是以0.1至20mg/ml含量在赋形剂中施用的。
94．如权利要求92中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是含有游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
95．如权利要求89中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是脱氧胞苷。
96．如权利要求89中所述的方法，其中上述至少一种核糖核苷的来源是腺苷。
97．如权利要求89中所述的方法，其中上述腺苷是以0.1至10mg/ml含量在赋形剂中施用的。
98．一种用于治疗哺乳动物粘膜炎症的方法，该方法包括对上述粘膜炎症施用至少一种的脱氧核糖核苷或核糖核苷的来源。
99．如权利要求98中所述的方法，其中上述粘膜皮炎症选自炎症性肠疾病、溃疡性结肠炎、局限性肠炎、口炎或粘膜炎。
100．如权利要求98中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷或核糖核苷的来源选自DNA、一种寡脱氧核糖核苷酸、一种核糖核苷、一种脱氧核糖核苷、一种核糖核苷酸、一种脱氧核糖核苷酸、一种酰基化的脱氧核糖核苷和一种酰基化的核糖核苷。
101．如权利要求100中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是以0.1至20mg/ml含量在赋形剂中施用的。
102．如权利要求100中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是含有游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
103．如权利要求98中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是脱氧胞苷。
104．一种用于减低哺乳动物由于暴露于阳光或紫外线辐射而引起的癌症的发生几率的方法，该方法包括局部施用一种含有一种遮光剂试剂和一种能量清除剂试剂的组合物。
105．如权利要求104中所述的方法，其中遮光剂试剂选自：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基己基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlamine salieylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate 0(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。
106．如权利要求104中所述的方法，其中上述能量清除剂选自DNA、寡脱氧核糖核苷、核糖核苷、脱氧核糖核苷、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸、酰基化的脱氧核糖核苷和酰基化的核糖核苷。
107．如权利要求106中所述的方法，其中上述能量清除剂试剂是以0.1至20mg/ml含量在赋形剂中施用的。
108．如权利要求106中所述的方法，其中上述能量清除剂试剂是含有游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
109．含有a)至少一种脱氧核糖核苷和b)一种增强上述至少一种的脱氧核糖核苷进入皮肤能力的试剂的组合物。
110．如权利要求109中所述的组合物，其中上述皮肤是人的皮肤。
111．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是脱氧胞苷。
112．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是脱氧腺苷。
113．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是脱氧鸟苷。
114．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷的来源是胸苷。
115．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷存在的浓度为每种脱氧核糖核苷0.1至10毫克每毫升。
116．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷存在的浓度为每种脱氧核糖核苷1.0至5毫克每毫升。
117．如权利要求109中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是含有游离的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷和胸苷的混合物。
118．如权利要求117中所述的组合物，其中每种脱氧核糖核苷存在的浓度为0.1至10毫克每毫升。
119．如权利要求117中所述的组合物，其中每种脱氧核糖核苷存在的浓度为1至5毫克每毫升。
120．如权利要求109中所述的组合物，其中上述增强渗透力的试剂选自：乙醇、异丙醇、azone(1-十二烷基氮杂环庚-2-酮)、油酸、亚油酸、丙二醇、高渗甘油、乳酸、羟基乙酸、柠檬酸、苹果酸和二甘醇一乙基醚。
121．如权利要求120中所述的组合物，其中上述增强渗透力的试剂是二甘醇一乙基醚。
122．如权利要求121中所述的组合物，其中上述二甘醇一乙基醚存在的浓度为2至20％。
123．如权利要求121中所述的组合物，其中上述二甘醇一乙基醚存在的浓度为5至15％。
124．如权利要求109中所述的组合物，其中上述组合物是水凝胶。
125．如权利要求124中所述的组合物，其中上述水凝胶的凝胶剂选自：甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆(carbomer)、Hypan、聚丙烯酸酯和甘油聚丙烯酸酯。
126．如权利要求124中所述的组合物，其中上述水凝胶的凝胶剂是卡波姆。
127．如权利要求126中所述的组合物，其中上述卡波姆的浓度为2至10％。
128．一种组合物，包括
a)．脱氧鸟苷和脱氧腺苷以及
b)．苯甲醇
129．如权利要求128中所述的组合物，其中上述苯甲醇的浓度在0.1和5％之间。
130．如权利要求128中所述的组合物，其中脱氧鸟苷和脱氧腺苷的浓度在0.1和10毫克/毫升之间。
131．如权利要求128中所述的组合物进一步含有脱氧胞苷和胸苷。
132．如权利要求131中所述的组合物，其中脱氧胞苷和胸苷的浓度在0.1和10毫克/毫升之间。
133．一种含有一种甲基黄嘌呤和至少一种脱氧核糖核苷来源的组合物。
134．如权利要求133中所述的组合物，其中上述至少一种脱氧核糖核苷来源选自至少一种脱氧核苷和至少一种脱氧核苷酰基衍生物。
135．一种组合物，包含：
a)．一种遮光剂
b)．一种能量清除剂
136．一种如权利要求135中所述的组合物，其中上述的遮光剂选自：avobenzone(t-丁基二甲氧基二苯甲酰基甲烷)、oxybenzone(二苯甲酮-3)、dioxybenzone(二苯甲酮-8)、sulisobenzone(二苯甲酮-4；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸)、octocrylene(丙烯酸2-乙基己基-2-氰基-3，3-联苯酯)、甲氧基肉桂酸辛酯(对-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯)、水杨酸辛酯(水杨酸2-乙基己酯)、homosalate(水杨酸高薄荷酯)、throlamine salicylate(水杨酸三乙醇胺)、联苯咪唑磺酸、PABA(对氨基苯甲酸)、roxadimate(4-二羟基丙基氨基苯甲酸乙酯)、lisadimate(对-氨基苯甲酸甘油酯)、Padimate O(二甲基PABA辛酯)、邻氨基苯甲酸薄荷酯、和Parsol 1789(丁基甲氧二苯甲酰甲烷)。
137.一种如权利要求135中所述的组合物，其中上述的能量清除剂选自至少一种脱氧核糖核苷来源。
138．一种如权利要求137中所述的组合物，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷来源选自脱氧核苷、脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、或一种酰基化脱氧核糖核苷。
139．一种如权利要求138中所述的组合物，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷是一种含有游离的或酰基化脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷、以及胸苷的混合物。
140．一种如权利要求138中所述的组合物，其中上述的每种脱氧核糖核苷的浓度为0.1至10mg/ml。
141．一种如权利要求138中所述的组合物，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷是游离的或酰基化的脱氧胞苷。
142．一种如权利要求141中所述的组合物，其中上述的游离的或酰基化的脱氧胞苷的浓度为0.1至100mg/ml。
143．一种如权利要求135中所述的组合物，其中上述的能量清除剂选自至少一种核糖核苷来源。
144．一种如权利要求143中所述的组合物，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷来源选自核糖核苷、核糖核苷酸、寡核糖核苷酸、或酰基化核糖核苷。
145．一种用于减少暴露于太阳光或紫外线辐射的哺乳动物皮肤光损伤发展速率的方法，包括给上述哺乳动物的皮肤施用至少一种脱氧核糖核苷来源，其中施用上述来源以使上述脱氧核糖核苷在上述哺乳动物暴露于上述辐射的过程中或之后以足以减少上述暴露的有害后果的量存在于皮肤上。
146．一种如权利要求145中所述的方法，其中上述的来源选自至少一种游离或酰基化脱氧核糖核苷。
147．一种如权利要求145中所述的方法，其中上述的来源选自脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、以及多聚脱氧核糖核苷酸。
148．一种用于减少暴露于太阳光或紫外线辐射的哺乳动物皮肤光损伤发展速率的方法，包括局部施用一种包含遮光剂和能量清除剂的组合物。
149．如权利要求148中所述的方法，其中上述能量清除剂选自DNA、寡脱氧核糖核苷酸、核糖核苷、脱氧核糖核苷、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸、酰基化的脱氧核糖核苷和酰基化的核糖核苷。
150．一种诱导由于暴露于阳光或紫外线辐射下而引起的炎症性的或过度增殖性的皮肤病损的复原的方法，该方法包括局部施用一种含有至少一种脱氧核糖核苷或脱氧核糖的来源的组合物。
151．如权利要求150中所述的方法，其中上述皮肤病损选自光化角化症、太阳痣、牛皮癣、皮炎、湿疹、黑素瘤、基底细胞癌、以及鳞状细胞癌。
152．如权利要求150中所述的方法，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷来源选自脱氧核糖核苷、脱氧核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、或酰基化脱氧核苷。
153．如权利要求152中所述的方法，其中上述至少一种脱氧核糖核苷是一种含有游离或酰基化的脱氧胞苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷、以及胸苷的混合物。
154．如权利要求152中所述的方法，其中每种脱氧核糖核苷的浓度为0.1至10mg/ml。
155．如权利要求152中所述的方法，其中上述的至少一种脱氧核糖核苷是游离的或酰基化的脱氧胞苷。
156．如权利要求155中所述的方法，其中上述的游离或酰基化脱氧胞苷的浓度为0.1至100mg/ml。
157．如权利要求150中所述的方法，其中上述的去氧核糖在局部用配方中的浓度为为0.1至100毫摩尔。
CN98812891A 1997-11-04 1998-11-03 用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物 Pending CN1285751A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/963,831 US20020006913A1 (en) 1997-11-04 1997-11-04 Antimutagenic compositions for treatment and prevention of photodamage to skin
US08/963,831 1997-11-04

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1285751A true CN1285751A (zh) 2001-02-28

Family

ID=25507775

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN98812891A Pending CN1285751A (zh) 1997-11-04 1998-11-03 用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物

Country Status (9)

Country Link
US (6) US20020006913A1 (zh)
EP (1) EP1032405A4 (zh)
JP (1) JP2001521901A (zh)
CN (1) CN1285751A (zh)
AU (1) AU748771B2 (zh)
CA (1) CA2308385A1 (zh)
IL (2) IL135951A0 (zh)
NZ (1) NZ504113A (zh)
WO (1) WO1999022741A1 (zh)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7776838B1 (en) * 1987-10-28 2010-08-17 Wellstat Therapeutics Corporation Treatment of chemotherapeutic agent and antiviral agent toxicity with acylated pyrimidine nucleosides
BR9908713A (pt) * 1998-03-16 2000-11-21 Somerset Pharmaceuticals Inc Uso de selegilina ou desmetil-selegilina para tratamento de feridas, queimaduras e danos dermatológicos
SE521031C2 (sv) * 1999-05-05 2003-09-23 Srinivas Uppugunduri Nya specifika inhibitorer av akut och kronisk inflammation
US7149193B2 (en) 1999-12-15 2006-12-12 Nortel Networks Limited Dynamic, dual-mode wireless network architecture with a split layer 2 protocol
PT1411954E (pt) 2000-10-18 2011-03-16 Pharmasset Inc Nucleosídeos modificados para o tratamento de infecções virais e proliferação celular anormal
JP2004520388A (ja) * 2001-01-25 2004-07-08 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション しわを治療するためのｎｏｓ阻害剤
US20030129208A1 (en) * 2002-01-07 2003-07-10 Alberts David S. Topical application of alpha-DFMO and anti-inflammatory drug for treatment of actinic keratoses
US20030143165A1 (en) * 2002-01-25 2003-07-31 Allan Evans NSAID-containing topical formulations that demonstrate chemopreventive activity
US20030199584A1 (en) * 2002-04-11 2003-10-23 Ahluwalia Gurpreet S. Reduction of hair growth
ES2428027T3 (es) * 2002-05-20 2013-11-05 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Composición que comprende adenosín-monofosfato para el tratamiento del melasma
US20060029555A1 (en) * 2002-10-31 2006-02-09 Bernstein Eric F Compositions and methods for prevention of photoaging
US7691905B2 (en) * 2002-12-24 2010-04-06 New York University Inhibition of melanogenesis and melanoma metastasis with p-aminobenzoic acid (PABA)
US20050100537A1 (en) * 2003-11-10 2005-05-12 Evans Gregory S. Methods and kits for reducing cellular damage, inhibiting free radical production, and scavenging free radicals in mammals
US8586090B2 (en) * 2004-10-05 2013-11-19 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Melanin nanoshells for protection against radiation and electronic pulses
GB0501476D0 (en) * 2005-01-25 2005-03-02 Heptagen Ltd Treatment for mucositis
KR100743499B1 (ko) 2005-11-24 2007-07-30 재단법인서울대학교산학협력재단 항염증용 조성물
FR2897513B1 (fr) * 2006-02-20 2010-08-20 Macanthy Lab Composition pour complement alimentaire a administration orale, destinee a la prevention de l'acne et a la photoprotection
KR100793236B1 (ko) 2006-05-11 2008-01-10 재단법인서울대학교산학협력재단 대장염 치료용 약학적 조성물
US20080152592A1 (en) * 2006-12-21 2008-06-26 Bayer Healthcare Llc Method of therapeutic drug monitoring
WO2008115224A2 (en) * 2007-03-20 2008-09-25 Bayer Healthcare Llc Method of analyzing an analyte
US20090324705A1 (en) * 2008-02-13 2009-12-31 Nina Vikhrieva Phytonutrient compositions for topical use
JP2011520451A (ja) 2008-05-14 2011-07-21 ダームテック インターナショナル 核酸解析による黒色腫および日光黒子の診断法
WO2011162416A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Agent for suppressing the formation of abnormal skin cells caused by exposure to light
EP2601930A4 (en) * 2010-08-03 2016-05-18 Hayashibara Co MEANS FOR INCREASING A BLEACHING EFFECT AND APPLYING THEREOF
CN102172359A (zh) * 2011-03-02 2011-09-07 张始状 腺苷与核苷组合在制备治疗肿瘤药物中的应用
FR2975595B1 (fr) * 2011-05-24 2013-08-02 Oreal Utilisation de la guanosine comme agent anti-irritant.
US8580770B2 (en) * 2011-05-26 2013-11-12 Bryan Burney Method of treating actinic keratosis and basal cell carcinoma
US10532040B2 (en) 2011-11-18 2020-01-14 Regents Of The University Of Minnesota Methods of treating cancer with herbacetin
EP2802573A1 (en) 2012-01-13 2014-11-19 Regents of the University of Minnesota Agents that prevent or repair skin damage
US20140066837A1 (en) 2012-07-26 2014-03-06 Ronald L. Moy Skin care compositions and methods
GB201304041D0 (en) * 2013-03-06 2013-04-17 Water Jel Europ Llp Treatment and prophylaxis of radiation dermatitis
US10596094B2 (en) * 2013-03-08 2020-03-24 Yale University Compositions and methods for reducing skin pigmentation
US10314770B2 (en) * 2014-06-06 2019-06-11 Mary Kay Inc. Multi-purpose cosmetic water-in-silicone emulsion
FI3302499T3 (fi) * 2015-06-05 2023-05-04 Fundacio Hospital Univ Vall Dhebron Institut De Recerca Mitokondriotautien hoitaminen
ITUB20155754A1 (it) * 2015-11-20 2017-05-20 Mastelli S R L Composizione per il trattamento di malattie imfiammatorie intestinali.
US11976332B2 (en) 2018-02-14 2024-05-07 Dermtech, Inc. Gene classifiers and uses thereof in non-melanoma skin cancers
IL303153A (en) * 2020-11-24 2023-07-01 Dermtech Inc Evaluation of the burden of mutations in the skin
CN118175986A (zh) * 2021-10-07 2024-06-11 雅玛山酱油株式会社 皮肤外用组合物及其利用、以及皮肤外用组合物原料

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3797494A (en) 1969-04-01 1974-03-19 Alza Corp Bandage for the administration of drug by controlled metering through microporous materials
ZA7469B (en) * 1973-01-16 1974-11-27 J Voorhees Compositions and treatment of proliferative skin diseases with-c-amp analogs
US3937809A (en) 1974-05-01 1976-02-10 Kolmar Laboratories, Inc. Addition compound of a nucleotide and an amino acid and the use thereof in protection against actinic radiation
CA1165240A (en) 1980-07-09 1984-04-10 The Procter & Gamble Company Penetrating topical pharmaceutical compositions
US4701321A (en) * 1982-05-06 1987-10-20 Soft Sheen Products, Inc. Liquid detergent with sunscreen agent
US4537776A (en) 1983-06-21 1985-08-27 The Procter & Gamble Company Penetrating topical pharmaceutical compositions containing N-(2-hydroxyethyl) pyrrolidone
US4557934A (en) 1983-06-21 1985-12-10 The Procter & Gamble Company Penetrating topical pharmaceutical compositions containing 1-dodecyl-azacycloheptan-2-one
US7173017B1 (en) 1987-10-28 2007-02-06 Wellstat Therapeutics Corporation Pyrimidine nucleotide precursors for treatment of systemic inflammation and inflammatory hepatitis
US7307166B1 (en) 1987-10-28 2007-12-11 Wellstat Therapeutics Corporation Oxpurine nucleosides and their congeners, and acyl, derivatives thereof, for improvement of hematopoiesis
DE3855513T2 (de) * 1987-10-28 1997-01-09 Pro Neuron Inc Acyl deoxyribonukleosid-derivate und deren verwendungen
US5246708A (en) * 1987-10-28 1993-09-21 Pro-Neuron, Inc. Methods for promoting wound healing with deoxyribonucleosides
US6020322A (en) 1993-11-09 2000-02-01 Pro-Neuron, Inc. Acyl deoxyribonucleoside derivatives and uses thereof
ZA892928B (en) * 1988-04-25 1991-01-30 Pro Neuron Inc Pharmaceutical compositions containing deoxyribonucleosides for wound healing
FR2634374B1 (fr) * 1988-07-19 1993-10-15 Laboratoires Serobiologiques Agents photoprotecteurs, cytophotoprotecteurs cutanes ayant une activite photoprotectrice des cellules constitutives, fonctionnelles de la peau, en particulier des cellules de langerhans, a base de composes nucleiques : nucleoprotides, ribonucleotides et desoxyribonucleotides, ribonucleosides et desoxyribonucleosides, compositions cosmetiques ou dermo-pharmaceutiques contenant un tel agent ainsi que des nouveaux composes en soi
US5091379A (en) 1989-08-31 1992-02-25 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Topical antinflammatory compositions with minimal systemic absorption
FR2668366B1 (fr) 1990-10-30 1993-01-29 Oreal Utilisation cosmetique d'une composition ayant une activite antierythemale et composition correspondante.
EG20380A (en) 1991-10-16 1999-02-28 Richardson Vicks Inc Enhanced skin penetration system for improved topical delivery of drugs
US5246748A (en) * 1991-12-23 1993-09-21 Hoechst Celanese Corp. Thin film optical medium of a multiple amphiphilic bilayer composite
PT679160E (pt) 1992-12-08 2005-02-28 Wellstat Therapeutics Corp Precursores de nucleotidos de pirimidina para o tratamento da hepatite inflamatoria
US5654286A (en) * 1993-05-12 1997-08-05 Hostetler; Karl Y. Nucleotides for topical treatment of psoriasis, and methods for using same
WO1994026761A1 (en) 1993-05-14 1994-11-24 Pro-Neuron, Inc. Treatment of chemotherapeutic agent and antiviral agent toxicity with acylated pyrimidine nucleosides
US5470577A (en) 1993-07-07 1995-11-28 Trustees Of Boston University Stimulation of tanning by DNA fragments or single-stranded DNA
DE4323615A1 (de) * 1993-07-12 1995-01-19 Schreiner Edelgard Mittel gegen vorzeitiges Altern der Haut
CN101066276A (zh) 1994-07-01 2007-11-07 威尔斯塔特医疗公司 用于治疗全身性炎症和炎性肝炎的嘧啶核苷酸前体
US5519059A (en) 1994-08-17 1996-05-21 Sawaya; Assad S. Antifungal formulation
DE69611230T2 (de) * 1995-01-09 2001-04-05 Thorel Jean Noel Nährstoff für epidermale zellkultur und verwendung
BR9607884A (pt) 1995-03-17 1998-07-14 Ciba Sc Holding Ag Absorvedores lipossomogênicos de UV
WO1996033703A2 (en) * 1995-04-25 1996-10-31 Oridigm Corporation S-adenosyl methionine regulation of metabolic pathways and its use in diagnosis and therapy
US6472378B2 (en) 1998-08-31 2002-10-29 Pro-Neuron, Inc. Compositions and methods for treatment of mitochondrial diseases

Also Published As

Publication number Publication date
NZ504113A (en) 2002-07-26
US6403565B1 (en) 2002-06-11
US20010044419A1 (en) 2001-11-22
US20010044421A1 (en) 2001-11-22
IL135951A (en) 2007-03-08
USRE39573E1 (en) 2007-04-17
EP1032405A4 (en) 2007-05-02
AU1298099A (en) 1999-05-24
JP2001521901A (ja) 2001-11-13
EP1032405A1 (en) 2000-09-06
US6255290B1 (en) 2001-07-03
US20020006913A1 (en) 2002-01-17
WO1999022741A1 (en) 1999-05-14
US6417170B2 (en) 2002-07-09
CA2308385A1 (en) 1999-05-14
US6465440B2 (en) 2002-10-15
IL135951A0 (en) 2001-05-20
AU748771B2 (en) 2002-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1285751A (zh) 用于治疗和预防皮肤光损伤的抗诱变剂组合物
JP6865193B2 (ja) 寿命を拡大させ、かつ加齢関連疾患の発症を遅らせるための方法
Rojas et al. Neuroprotective effects of near-infrared light in an in vivo model of mitochondrial optic neuropathy
Hanada et al. Possible role of 1, 25-dihydroxyvitamin D3-induced metallothionein in photoprotection against UVB injury in mouse skin and cultured rat keratinocytes
CN1547475A (zh) 采用电子转移试剂的磷酸酯衍生物进行皮肤治疗
Niwa et al. The ratio of lipidperoxides to superoxide dismutase activity in the skin lesions of patients with severe skin diseases: an accurate prognostic indicator
CN1310032C (zh) 用于改善瘙痒、皮肤粗糙或皮肤敏感或用于增白的药物
Vuillaume et al. Striking differences in cellular catalase activity between two DNA repair-deficient diseases: xeroderma pigmentosum and trichothiodystrophy
CN1261803A (zh) 抗氧化剂增强对细胞过度增生性疾病的治疗
WO2002090934A2 (en) Evaluation of ultraviolet radiation damage to skin using new genemarkers, methods and compositions related thereto
CN1942169A (zh) 用防晒产品处理皮肤的美容方法以及防晒产品组合
Applegate et al. DNA damage is involved in the induction of opacification and neovascularization of the cornea by ultraviolet radiation
WO2008145849A2 (fr) Composition pharmaceutique et/ou cosmetique contenant des peptides derives de l'aconitase
JP2005132823A (ja) 自然な日光暴露なる条件下で誘発される膠原繊維の分解を防止する及び／又はこれに抗するための組成物
Schleier et al. Photodynamic therapy of virus-associated epithelial tumours of the face in organ transplant recipients
JPH09291023A (ja) 皮膚外用剤
CN113143784B (zh) Fto抑制剂在制备皮肤保护及修复产品中的新应用
CN1561220A (zh) 炎症的治疗方法
Mathews-Roth [42] Erythropoietic protoporphyria: Treatment with antioxidants and potential cure with gene therapy
Djavaheri-Mergny et al. UV-A irradiation induces a decrease in the mitochondrial respiratory activity of human NCTC 2544 keratinocytes
CN1329482A (zh) 波尔多提取物在美容或皮肤病学产品中的应用
CN1419435A (zh) 皮肤外用剂
FOLSO et al. Ornithine decarboxylase induction in psoralen‐treated mouse epidermis used as a test of UV‐A sunscreen potency
CN1108532A (zh) 皮肤癌治疗
WO2008145848A2 (fr) Composition pharmaceutique et/ou cosmetique contenant des peptides derives de l ' aconitase

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication