CN1277546C - 一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物及其制备方法，属于医药技术领域，其中药提取物，其所含有效成分及其比例(重量)为：木樨草素0.1～50、芹菜素0.1～30、槲皮素0.1～20、芦丁0.1～10、异槲皮素0.1～30、杨梅素0.1～20、异鼠李素0.1～40、黄芪皂甙1～60。其方法是：以柳叶、黄芪天然中草药为原料，其重量配比为：柳叶60～95、黄芪5～40，按下列步骤制备：柳叶用乙醇回流提取；黄芪加水煎煮，加稀酸调制过滤，得沉淀物；将沉淀物与柳叶提取物合并，减压干燥，粉碎成细粉。其有益效果是：中药提取物应用于治疗脂肪肝、肥胖症，不但具有抗脂肪肝病毒作用，而且起到保肝降酶作用，疗效确切，无毒副作用。

Description

一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物及其制备方法

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及一种治疗脂肪肝、肥胖症类的中药提取物及制备方法改进。

背景技术：

肝脏是脂肪代谢的重要场所。当肝脏对脂肪合成能力增加和/或转运入血的能力下降时，脂类物质(主要为三酰甘油)在肝内蓄积过多，超过肝脏重量的5％，或在组织学上50％以上的肝实质脂肪化时，即为脂肪肝。脂肪肝不是一个独立的疾病，而是由多种疾病和原因引起的肝脏脂肪性变。最常见原因为肥胖、酒精中毒、糖尿病；其次为营养失调、药物中毒、妊娠、遗传等。

随着人类物质生活的不断改善，脂肪肝的发病率逐年升高，在我国已占到平均人口的10％，在肥胖、嗜洒和糖尿病人群中可高达50％～60％，其中约25％的患者发生肝纤维化，1.5％～8.0％的患者发展为肝硬化。因此，脂肪肝的防治对阻止慢性肝病进展和改善预后是十分重要的。迄今为止，市场上缺乏治疗脂肪肝、肥胖症疗效确切，又无副作用的药物。

发明内容：

本发明的目的是：提供一种其活性成分明确，质量可控，其用于治疗脂肪肝、肥胖症疗效可靠，并且无毒副作用的一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物。

本发明另一目的是：提供该中药提取物的制备方法，该中药提取物可与药用辅料配制成临床上可以接受的任何药剂。

柳属中药(Salix)为杨柳科木本中药，该属种类繁多，分布广泛，全世界约有500多种，仅在我国分布的柳属中药就有210种，是我国绿化栽培的重要树种之一，资源丰富。柳树有多种用途，但其在民间作为药用历史悠久。李时珍在《本草纲目》中记载：柳为本经下品，其性苦寒、无毒，可治疗风水黄疽，疮痈肿痛，痰热淋疾，湿痹等疾症。柳树作为药用主要是以垂柳(Salix babylonicaL.)的根及须根(柳根)、枝(柳枝)、根的韧皮(柳白皮)、叶(柳叶)、花(柳花)、及具毛的种子(絮)等入药。近些年来，国内外对柳叶的化学成分、药理作用的研究较为活跃，但对柳叶与黄芪配合在一起使用治疗脂肪肝、酒精肝的研究报道还未见到。

国内外学者对数十种柳树的叶、枝或根皮进行过研究，已分离的化合物主要有黄酮类、酚甙类、多糖、有机酸类化合物及其他化合物。成分含量测定方法主要有比色法、紫外分光光度法、薄层扫描法及高效液相色谱法等。研究资料表明，柳属中药普遍含有黄酮类化合物。对已发现的柳属中药中黄酮类化合物进行归类，主要有黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类、双黄酮及黄烷醇类等。柳属中药中黄酮类主要有：木樨草素(Luteolin)、芹菜素(Apigenin)及相应的糖苷和衍生物等。资料表明：木樨草素及其糖苷广泛存在于柳属中药中；柳属中药中黄酮醇类主要有槲皮素(quercetin)、芦丁(rutin)、异槲皮素(isoquercetin)山奈酚(kaempferal)、杨梅素(myticetin)、异鼠李素(isorhamnein)以及相应的糖苷等；柳属中药中已发现的黄烷醇主要有儿茶素(catechins)、原青定(procyanidins)等；目前已报道的柳属中药中双黄酮类主要有柏黄酮(cupressuflavone)、穗花杉黄酮(amenloflovone)等；据报道1987年Koiima用甲醇提取龙江柳叶后，经乙醚和乙酸乙酯分别萃取分离得到二氢黄酮醇类为二氢杨梅素(dihydromyricetin)，其中乙酸乙酯部分用硅胶柱分离得二氢杨梅黄酮；据报道有多种柳属中药中含有酚糖类物质，其中柳醇(水杨苷Salicin)是最为普遍的一类酚糖苷成分。不同种类的柳树，酚糖苷的类型亦不同，这些化合物无一定的分类规律。经柳属中药的文献调查研究表明：柳属中药中普遍存在黄酮类化合物，而且含量较高。鉴于黄酮类化合物具有多方面生物活性，如：免疫调节作用，降压作用，抗血栓、抗动脉硬化作用，抗炎作用，抗菌、抗病毒作用等，柳属中药的药用价值及资源的开发具有很大的潜力。

本发明提供的治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物，其所含有效成分及其比例(重量)为：木樨草素(Luteolin)0.1～50、芹菜素(Apigenin)0.1～30、槲皮素(quercetin)0.1～20、芦丁(rutin)0.1～10、异槲皮素(isoquercetin)0.1～30、杨梅素(myticetin)0.1～20、异鼠李素(isorhamnein)0.1～40、黄芪皂甙(membranous Saponin)1～60。

本发明中药提取物的有效成分中木樨草素(Luteolin)、芹菜素(Apigenin)、槲皮素(quercetin)、芦丁(rutin)、异槲皮素(isoquercetin)、杨梅素(myticetin)、异鼠李素(isorhamnein)、黄芪皂甙(membranous Saponin)的检测采用了高效液相法。

上述治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物的制备方法，以柳叶、黄芪天然中草药为原料，其重量配比为：柳叶60～95、黄芪5～40，按下列步骤制备：

(1)柳叶用5～20倍量40～90％乙醇回流提取，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.02～1.08，静置，取滤液用稀盐酸调pH至酸性后，用醋酸乙酯萃取，合并萃取液，回收醋酸乙酯，得柳叶提取物；

(2)黄芪加水煎煮，合并煎煮液，浓缩至1∶4，即每1ml相当于4g药材，用稀盐酸调pH至1～2，静置，过滤，取沉淀加水溶解，用NaOH调pH至7-8，过滤，滤液加稀盐酸调pH至1～2，静置，过滤，得沉淀物；

(3)取上述沉淀物与柳叶提取物合并，减压干燥，粉碎成细粉，即得。

在步骤(2)中稀酸为稀盐酸，碱液为35-45％NaOH溶液。

在步骤(2)中浓缩液及过滤液加稀酸调pH至1～2后，均在70-85℃保温1小时。

本发明中药提取物，可与一种或多种药学上可接受的载体(辅料)配制成药剂。

本发明的有益效果是：

中药提取物应用于治疗脂肪肝、肥胖症，不但具有抗脂肪肝病毒作用，而且起到保肝降酶作用，疗效确切，无毒副作用。

具体实施方式：

下面通过具体实施例及主要药效学试验对本发明作进一步的说明。

本发明所述的载体是指药学领域常规的药物载体或辅料，例如：稀释剂、赋形剂和水等，填充剂如淀粉、糊精、蔗糖、甘露醇、乳糖，微晶纤维素等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如甘油：崩解剂如甲基淀粉钠，羟丙纤维素，交联羧甲基纤维素，琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇、吐温80、十二烷基硫酸钠；吸附载钵如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶和聚乙二醇等。另外在药剂中还可以含有其它辅剂如香味剂、甜味剂等。

本发明中药提取物药剂可通过口服、直肠或肠胃外给药的方式施用于患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂等，制成液体制剂如水或油悬浮剂其它液体制剂如糖浆、合剂、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、粉针、水或油性悬浮剂等。本发明优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、颗粒剂、合剂和粉针、注射液。

本发明的中药提取物及其药剂的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量以中药提取物计算可以是1mg/kg～600mg/kg体重，优选5mg/kg～400mg/kg体重。可以一次或多次施用。

实施例1中药提取物的制备：

①取柳叶中药15kg，用8倍量75％乙醇回流提取二次，每次回流提取1小时，过滤，合并滤液，回收尽乙醇，并浓缩至相对密度为1.02～1.08，静置，过滤，高速离心，用稀盐酸调pH至2～3，用6倍量浓缩液体积的醋酸乙酯萃取，合并萃取液，回收醋酸乙酯即得柳叶提取物。②另取黄芪2kg，加10倍量水煎煮二次，每次煎煮1小时，合并煎煮液，浓缩至1∶4(每1ml相当于4g药材)，用稀盐酸调pH至1～2，80℃保温1小时，静置，过滤，沉淀加适量的水溶解，用40％NaOH调pH至7-8，过滤，滤液加稀盐酸调pH至1～2，80℃保温1小时，静置，过滤，得沉淀物。③取上述沉淀物与柳叶提取物合并，减压干燥，粉碎，过80目筛，即得本发明中药提取物。

实施例2中药提取物粉针剂的制备：

实施例1中药提取物    15克

           甘露醇    20克

取实施例1中药提取物，置适宜容器中，加注射用水约900ml，加入甘露醇搅拌均匀，再加注射用水至1000ml，用0.22um的微孔滤膜过滤，在无菌条件下，灌装于西林瓶中，部分塞上丁橡胶塞，装盘，冷冻干燥。冻干结束后压塞、压盖即得。

实施例3中药提取物注射液液的制备

实施例1中药提取物    15g

       吐温-80       1ml

       注射用水      加至1000mt

取实施例1中药提取物，用900ml注射用水溶解，再用1％的氢氧化钠溶液调pH至6～7，加1ml吐温-80，补加注射用水至1000ml，静置，用0.22um微孔滤膜过滤，灌封，流通蒸汽灭菌，即得。

实施例4中药提取物胶囊剂的制备

实施例1中药提取物        600g

       糊精              350g

       羧甲基纤维素钠    50g

       硬脂酸镁          15g

取实施例1中药提取物、糊精、羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁混合均匀，过80目筛，用干式制粒机制粒，用60目筛整粒，灌于胶囊中，即得。

本发明提供的是一种新型的治疗脂肪肝、肥胖症的天然药物—中药提取物及其药剂，为证明其治疗脂肪肝、酒精肝效果及安全性，发明者使用按上述实施例1中提供的方法制备得到的中药提取物，进行了毒理和药效学实验，研究结果如下：

一、急性毒性试验

为观察本发明中药提取物的急性毒性，对小鼠进行了iv与ip两种给药途径的试验，结果表明本品iv的半数致死量(LD₅₀)为3.76g/kg(95％可信为1.96～2.68g/kg)，小鼠ip给药未能测出半数致死量度(LD₅₀)，测得最大耐受量(MTD)为3.87g/Kg。

二、主要药效学试验

目的：研究本发明药物对酒精性脂肪肝以及药物性脂肪肝的作用，并探讨两种脂肪肝的发病机理。方法：建立酒精性脂肪肝和药物性脂肪肝大鼠模型并分为治疗组(80mg/kg)和对照组。4周后处死，分别测定肝功能，血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂酯(HDL)、血清及肝组织丙二醛(MDA)、肝脂酯(HL)、脂蛋白脂酶(LPL)及肝脏病理变化。

1、一般情况实验

实验前称体重一次，观察食欲行为、状态、毛发及动物死亡情况；实验结束处死动物时称量体重、肝脏湿重。一般情况实验中模型组较正常组体重增长迅速，且性情较为温顺，不喜动，各组均无动物死亡发生。实验结束时模型组动物的体重较正常组超重20％以上，其体重、肝指数(肝湿重/体重×100％)比正常组显著增高(P分别＜0.05和0.01)。说明本发明药物具有治疗肥胖症作用。

2、生物化学指标

(1)酒精性脂肪肝治疗后生化指标的变化：

酒精模型组在应用本发明药物后，可以显著降低血清TG、血清和肝组织MDA含量、减少肝内脂质，同时明显升高血清以及肝组织内HL、LPL的活性，血清中HDL的水平也明显增高。同时血清ALP、ALT以及AST降低。

(2)CCl₄性脂肪肝治疗后生化指标的变化：

本发明药物治疗CCl₄性脂肪肝可以显著降低血清TG、血清和肝组织MDA含量、减少肝内脂质，同时明显升高血清以及肝组织内HL、LPL的活性，血清中HDL的水平也明显增高。同时血清ALP、ALT以及AST降低。

3、保肝退黄作用

采用异硫氰酸-1-萘酯(ANIT)大鼠黄疸模型，连续iP五日本发明中药提取物，结果表明本发明中药提取物能明显降低血清胆红素(TBil)的含量，多者达56％，病理学检查表明大鼠肝细胞和胆管上皮细胞的病变，比模型细胞的明显要轻。

4、病理观察

正常肝脏肉眼观察呈鲜红色，边缘锐利、表面光滑，酒精性脂肪肝肉眼观体积增大，边缘变钝，颜色呈黄褐色，与周围组织有粘连，切面油腻感，光镜下观察，可见肝脏小叶结构消失，炎症反应剧烈，细胞崩解坏死，出现Molloray’s小体，细胞内可见弥漫性小泡性脂肪滴。CCl₄性脂肪肝肝脏体积增大，颜色呈黄褐色，与周围组织粘连严重，光镜下观察，可见中央静脉周围肝细胞广泛气球样变性，但在病变细胞之间尚存在正常的肝脏组织。酒精性和药物性脂肪肝治疗组肝脏病理明显改善，肝内脂肪滴完全消失，炎症细胞浸润减轻。

Claims (2)

1、一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物，以柳叶、黄芪天然中草药为原料，其重量配比为：柳叶60～95、黄芪5～40，按下列步骤制备：

(a)柳叶用5～20倍量40～90％乙醇回流提取，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.02～1.08，静置，取滤液用稀盐酸调pH至酸性后，用醋酸乙酯萃取，合并萃取液，回收醋酸乙酯，得柳叶提取物；

(b)黄芪加水煎煮，合并煎煮液，浓缩至1∶4，即每1ml相当于4g药材，用稀盐酸调pH至1～2，静置，过滤，取沉淀加水溶解，用NaOH调pH至7-8，过滤，滤液加稀酸调pH至1～2，静置，过滤，得沉淀物；

(c)取上述沉淀物与柳叶提取物合并，减压干燥，粉碎成细粉，即得。

2、根据权利要求1所述的一种治疗脂肪肝、肥胖症的中药提取物，其特征是：中药提取物可与一种或多种药学上可接受的载体辅料配制成药剂。