CN1907432A - 天麻多糖在保健品和药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
一种天麻多糖是自天麻中用水提醇沉法提取得到的多糖类化合物。用天麻多糖对CCl4致小鼠肝损伤和红星二锅头致小鼠肝损伤进行的动物试验表明,天麻多糖具有明显的保肝、护肝的药理作用,可以制成保健品用于人们肝部保健,也可以制成保肝药物用于临床治疗肝病。天麻多糖可同常用的辅料一起加工成各种制剂。
Description
一、技术领域
本发明涉及一种已知物质的新的用途,特别涉及植物中草药活性成分的新的医药用途,具体地说是天麻多糖在保健品和药物中的应用。
二、背景技术
天麻(Gastrodia elata)又名赤箭、定风草、独摇芝,是我国著名的常用中草药之一。有平肝熄风、通络止痛之功效,临床上用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫抽搐、高血压、破伤风症等。目前对天麻的临床药理研究仍侧重并停留在天麻素为主的活性成分上。
天麻在国内已被广泛种植,仅安徽省就有金寨、岳西、霍山、太湖、青阳、绩溪等地规模化的种植基地,其产量逐年上升。开发天麻新的医药用途将有利于天麻种植业的进一步发展,也有利于推动中药应用的现代化。
天麻中除天麻素外还含有大量的天麻多糖,迄今为止对天麻多糖的药理作用鲜有人研究。
三、发明内容
本发明对天麻多糖的药理作用进行了深入的研究,旨在拓展天麻的应用范围,所要解决的主要问题是天麻多糖的提取以及将其加工成可供临床应用多种剂型。
本发明所称的天麻多糖是自天麻中用水提醇沉法提取得到的提取物,提取得率达24%。经DNS(3、5-二硝基水杨酸)比色法和苯酚硫酸法测定,该提取物属多糖类化合物,称天麻多糖(GEP),外观白色粉末状。当用离子交换法吸附、分离、纯化后得到三种多糖单体,分别称GEP-1、GEP-2和GEP-3。GEP-1白色,海绵样薄状片,GEP-2、GEP-3白色粒状晶体,GEP-2晶粒较大,且有光泽。
本发明用GEP对CCl4致小鼠肝损伤和红星二锅头致小鼠肝损伤进行了动物模型试验,结果表明GEP具有明显的保肝、护肝的药理作用,相对来说,其保肝、护肝作用GEP-2最好,余次之。
本发明还对天麻多糖进行急性毒性试验,结果表明十分安全。
取健康昆明小鼠20只,雌雄各半,体重18~22g,禁食(自由饮食12h),次日上午、下午各灌胃一次GEP,浓度为200mg/ml,容量为0.5ml/10g体重,连续7d,正常饲养并观察给药间隔及给药动物反应和死亡情况。结果:给药后小鼠在30min内活动减少,随后恢复正常,摄食、粪便、毛发等均无明显异常,亦无一小鼠死亡。结果示:GEP灌胃小鼠一日二次,灌胃的最大耐受量都>20g/kg,相当于天麻生药材2kg左右。提示GEP安全性良好。
鉴于天麻多糖具有显著的保肝、护肝作用及良好的安全性,这就是说天麻多糖可制成养肝保健品(食品)用于人们肝部保健,特别是嗜酒人群的肝脏保健,,也可以制成保肝药物用于临床以治疗肝病。
实验证明,天麻多糖有良好的加工性,可同常规的辅料一起加工成供临床使用的各种制剂,如口服液、普通片、缓释片、崩解片、颗粒剂、胶囊剂、注射液、粉针剂等。保健品通常亦加工成口服液、片剂、冲剂、胶囊等口服剂型。
本发明中天麻多糖的提取工艺简单,可同常规的辅料用公知的工艺制备各种制剂用于肝部保健或临床治疗肝病。这不仅拓展了天麻的应用范围,同时也提升了天麻的应用水平,为中医药现代作出了应有的贡献。
四、附图说明
图1天麻多糖GEP对CCL4致小鼠肝损伤肝病理组织学照片(×100)
图2天麻多糖GEP对红星二锅头致小鼠酒精肝损伤病理组织学照片(×100)
如附图所示,正常对照组小鼠肝组织结构完整;CCl4和酒精肝损伤模型组肝细胞排列紊乱,肿胀及气球样变,肝中央静脉周围有大范围的肝细胞变性坏死,细胞核明显大小不等,呈不同程度的固缩,坏死灶分布于肝小叶中央静脉周围和肝被膜下,小叶内可见灶性坏死区,坏死区内有较多淋巴细胞和浆细胞浸润,汇管区内有单核细胞浸润;与模型组比较,天麻多糖GEP低、中、高剂量组肝细胞病变明显减少,坏死灶明显减少,偶见散在点状分布,坏死区内损肝细胞较模型组明显减少,随天麻多糖GEP剂量的增大,对肝细胞的保护作用也随之增强,高剂量组小鼠肝损伤程度明显减轻;阳性对照药联苯双酯和三普解郁肝舒胶囊也显示了较好的保肝作用。
五、具体实施方式
现以水提醇沉法制备的天麻多糖为例,非限定实施例叙述如下。
(一)、天麻多糖的制备
取新鲜天麻洗净、去皮、制匀浆,加水于60~80℃条件下浸提1~3小时后分离,浸提2~3次,合并每次分离得到的滤液,负压浓缩或旋转蒸发浓缩,以提高多糖的浓度,加95%食用酒楂醇沉过夜,让多糖完全析出,最后分离,沉淀干燥便是天麻多糖GEP。
(二)、天麻多糖的动物模型试验
1、天麻多糖对CCL4致小鼠肝损伤的作用
实验方法:小鼠正常饲养2天,随机分成6组,每组10只,即:正常对照组、CCL4模型组、联苯双酯(100mg/kg)阳性对照组、天麻多糖GEP低剂量组(25mg/kg)、中剂量组(50mg/kg)、高剂量组(100mg/kg)。正常对照组ig 0.4ml生理盐水/天,CCL4模型组ig 0.4ml CCL4/天(CCL4浓度2.5mg/ml),其它实验组小鼠ig相应剂量药物+0.4mlCCL4/天,共5天。末次给药后禁食16h,称重,摘除眼球取血,分离血清,测定ALT、AST;同时,脱颈椎处死小鼠,立即破腹取肝脏,用4℃生理盐水冲尽残血,滤纸拭干,称重,计算肝脏指数;取肝脏左叶相同部位,大小1.0cm×1.0cm×0.2cm,用10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋,HE染色,作病理检查;取肝脏右叶用冷生理盐水制备5%肝匀浆,测定MDA和SOD的含量。
实验结果:
表1天麻多糖GEP对CCL4诱导的小鼠肝损伤的保护作用(
x±s)
组别(U/L) | ALT(U/L) | AST(U/mg Pro) | SOD(n mol/mg Pro) | MDA(g/kg) | 肝脏指数 |
正常对照组CCL4模型组GEP-低剂量组GEP-中剂量组GEP-高剂量组联苯双酯 | 98.65±41.9217.79±70.1##156.59±53.3▲132.71±37.0▲▲99.68±50.0▲▲141.01±53.7▲ | 143.13±58.4338.32±135.7##214.73±78.9▲165.25±65.6▲▲145.66±60.6▲▲180.87±75.8▲▲ | 442.51±23.5383.27±43.0##406.86±41.3426.21±31.0▲445.42±51.3▲▲435.09±23.6▲ | 9.06±3.117.98±6.4##12.09±5.0▲10.14±1.8▲▲9.66±1.6▲▲11.55±3.9▲▲ | 52.43±5.162.19±2.8##59.75±3.755.52±6.8▲54.24±2.6▲▲55.35±5.1▲ |
与正常组比较:##P<0.01;与模型组比较:▲▲P<0.01,▲P<0.05
GEP低、中、高剂量均可使小鼠CCL4肝损伤血清ALT、AST升高的水平降低,并能降低肝脏MDA的水平,提高SOD的活性,同时降低升高的肝脏指数。与模型组比较,低剂量组ALT、AST、MDA有显著差异(P<0.05),中、高剂量组ALT、AST、MDA有极显著差异(P<0.01),中剂量组SOD、肝脏指数有显著差异(P<0.05),高剂量组SOD、肝脏指数有极显著差异(P<0.01)。
2、天麻多糖对红星二锅头致小鼠肝损伤的作用
实验方法:小鼠正常饲养2天,随机分成6组,每组10只,即:正常对照组、酒精模型组(0.25ml二锅头)、三普解郁肝舒胶囊(800mg/kg)阳性对照组、天麻多糖GEP低剂量组(25mg/kg)、中剂量组(50mg/kg)、高剂量组(100mg/kg)。正常对照组ig 0.4ml生理盐水/天,酒精模型组ig 0.25ml二锅头/天,其它实验组小鼠ig相应剂量药物+0.25ml二锅头/天,共10天。末次给药后禁食16h,称重,摘除眼球取血,分离血清,测定ALT、AST、TG;同时,脱颈椎处死小鼠,立即破腹取肝脏,用4℃生理盐水冲尽残血,滤纸拭干,称重,计算肝脏指数;取肝脏左叶相同部位,大小1.0cm×1.0cm×0.2cm,用10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋,HE染色,作病理检查;取肝脏右叶用冷生理盐水制备5%肝匀浆,测定MDA和SOD的含量。
实验结果:
表2天麻多糖GEP对二锅头诱导小鼠酒精性肝损伤的保护作用(
x±s)
组别 | ALT(U/L) | AST(U/L) | SOD(U/mg Pro) | MDA(n mol/mg Pro) | TG(m mol/L) | 肝脏指数(g/kg) |
正常对照组酒精模型组GEP低剂量组GEP中剂量组GEP高剂量组三普肝舒胶囊 | 22.42±8.943.20±8.9##36.03±11.530.39±5.423.59±8.5▲▲20.72±7.8▲▲ | 102.79±36.7219.91±55.4##172.15±20.0170.24±14.0140.68±49.2▲▲134.44±38.3▲▲ | 484.33±6.2431.52±33.4##469.75±11.2▲477.70±12.1▲▲481.02±7.8▲▲482.61±35.7▲▲ | 19.60±6.129.87±3.8##22.55±4.317.44±6.0▲▲15.79±4.6▲▲21.70±2.3 | 1.62±0.35205±0.18##1.81±0.231.77±0.291.51±0.21▲▲1.55±0.27▲▲ | 44.52±1.953.36±5.0##47.37±4.646.05±4.1▲44.72±1.2▲▲45.39±7.0▲▲ |
GEP低、中、高剂量均可使小鼠酒精肝损伤血清ALT、AST、TG升高的水平降低。并能降低肝脏MDA的水平,提高SOD的活性。同时降低升高的肝脏指数。与模型组比较,低剂量组SOD有显著差异(P<0.05),中剂量组SOD、MDA有极显著差异(P<0.01),肝脏指数有显著差异(P<0.05),高剂量组均具有极显著差异(P<0.05)。
实验结果表明,GEP低、中、高剂量对CCL4和二锅头致小鼠肝损伤均具有明显保护作用,且存在剂量依赖关系。GEP中剂量(50mg/kg)与阳性对照药联苯双酯(100mg/kg)和三普解郁肝舒胶囊(800mg/kg)对小鼠两种肝损伤的保护作用相当,高剂量综合指标优于阳性对照药物。实验中还发现联本双酯对肝脏有一定的副作用,在取出肝脏时发现联苯双酯组小鼠肝脏色泽灰暗发白,病理检查结果如图1可看出其保肝效果欠佳,实验结果显著性分析也可看出其保肝效果明显不如GEP高剂量组。三普解郁肝舒胶囊组与GEP高剂量组综合指标最为接近,但从表2 MDA结果分析可看出,三普解郁肝舒胶囊在抗脂质过氧化方面明显不如GEP。CCL4和乙醇均可使小鼠体内产生大量的自由基,而肝脏极易受到自由基的侵害而发病,造成肝损伤。实验结果显示GEP明显升高肝匀浆中降低的SOD活力,降低升高的MDA水平,表明天麻多糖GEP可提高机体超氧化物歧化酶活力,清除体内CCL4和乙醇代谢产生的自由基,减少脂质过氧化产物的生成,具有很强的抗脂质过氧化功能。另外,GEP可使CCL4和二锅头诱导的小鼠肝损伤血清ALT、AST、TG升高的水平降低,表明GEP对细胞膜的完整性也具有很好保护作用。
(三)、天麻多糖制剂的制备
1、口服液
取GEP 500g,炼蜜300g,枸橼酸钠30g,山梨酸20g,香精适量,溶于2000ml水中,灭菌封装,每支10ml。
2、普通片剂
取GEP 500g,微晶纤维素500g,糊精450g,低取代羟丙甲纤维素75g,70%乙醇75ml,硬脂酸镁5g,用湿法制粒压片法压2000片。
3、颗粒剂
取GEP 500g、糊精1400g,糖粉100g,酒石酸50g,50%乙醇适量,用湿法制粒经过筛、混合制软材、挤压成粒,60℃以下干燥,整粒后包装,每袋2~5克。
4、胶囊剂
取GEP 500g,淀粉625g,混合过80目筛,加适量70%乙醇制软材、制粒过20目筛,干燥、整粒、装胶囊2000粒。
Claims (2)
1、一种天麻多糖在保健品中的应用,其特征在于:天麻多糖在制备养肝保健品中的应用。
2、一种天麻多糖在药物中的应用,其特征在于:天麻多糖在制备保肝药物中的应用。
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009024026A1 (fr) * | 2007-08-17 | 2009-02-26 | Shanghai Institute Of Materia Medica, Chinese Academy Of Sciences | Polysaccharide de gastrodia elata, son dérivé sulfaté et leur préparation et utilisation |
CN103242461A (zh) * | 2012-02-06 | 2013-08-14 | 陕西理工学院 | 一种同时提取天麻多糖和天麻素的新方法 |
CN105859899A (zh) * | 2016-04-10 | 2016-08-17 | 黄河水利职业技术学院 | 天麻多糖提取的方法 |
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2006
- 2006-08-16 CN CNA2006100409786A patent/CN1907432A/zh active Pending
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