CN1276759C - 一种治疗心脑血管疾病的注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗心脑血管疾病的注射液及其制备方法，它是以丹参、三七、冰片为原料，根据每味中药效应成分的不同理化性质，分别以不同的物理或化学方法处理后制备而成。本发明临床上用于治疗心脑血管疾病效果显著。

Description

一种治疗心脑血管疾病的注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药注射液，具体地说是以中药材丹参、三七、冰片为原料，制备而成的注射液，同时涉及该药物的制备方法。

背景技术

心脑血管疾病是目前工业化国家的第一大死因，其发病率甚至比癌症还要高，仅在美国每年患病人数就高达100万人次以上。随着我国社会进步及人民生活水平的日益提高，心脑血管疾病已经成为威胁我国人民身心健康的主要疾病之一，因此，对心脑血管疾病的预防与治疗就具有极其重要的现实意义。

心血管药物也是新药研究中最为活跃的一个领域。据统计，平均每年进入临床研究的新药约有20余种，使心脑血管疾病的药物治疗达到了较高的水平。目前对本病的治疗主要依靠药物治疗，大体包括β受体阻断剂、钙拮抗药、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素转化酶抑制剂、抗心衰药、抗血小板药等。这些药物大多价格昂贵，且有较明显的副作用，且普遍存在停药后反弹的弊端。

近年来，特别是在我国，人们加大了中药治疗心脑血管疾病的研究，主要是从传统组方中进行筛选，取得了一定的成就，已有多个品种用于临床，口服药物有复方丹参片、复方丹参滴丸等，其中复方丹参滴丸由于其疗效好，作用迅速广泛应用与临床但由于其为固体制剂存在着固体制剂无法克服的缺点。注射用药物仅有血塞通、复方丹参注射液(丹参、香附)、丹参注射液、川芎嗪注射液等但疗效均不太理想。本处方中冰片在临床上的应用极为广泛，但由于冰片中的龙脑、樟脑等属于单萜类成分在水中溶解度小，因而冰片属于小分子脂溶性单萜类物质，目前只能制造出丸剂、片剂等固体制剂，一直无法应用于注射液等液体制剂。《中国药典》2000版公开了复方丹参滴丸的处方，中国专利01136155公开了种预防和治疗冠心病心绞痛的药物及其制备方法和其它用途，它也是只能制备成固体制剂--复方丹参滴丸，无法制成注射液；

因此，可以这样认为，目前临床心脑血管疾病的发病率很高，但缺乏安全速效的药物，如果将复方丹参滴丸改剂型成注射剂将成为全世界的福音。

发明内容

本发明的目的是提供一种有效治疗心脑血管疾病的中药注射液，本发明的另一个目的提供该中药注射液的制备方法。

为达到上述目的，我们采用了以下的技术方案：

本发明中药注射液是由下述重量比的原料制成的：

丹参49.0％-93.6％    三七6.2％-50％    冰片0.01％-2.7％。

制备本发明中药注射液的原料的重量比可优选为：

丹参59.5％-89.5％    三七10％-40％    冰片0.05％-1.0％。

制备本发明中药注射液的原料的重量比可优选为：

丹参69.8％-85％    三七14.8％-30％    冰片0.1％-0.4％。

如上所述的注射液其中有效成分含有：丹参总酚酸0.1-25毫克/毫升，三七总皂苷1-40毫克/毫升优选为丹参总酚酸0.5-10毫克/毫升，三七总皂苷5-20毫克/毫升。

本发明注射液所含的三七总皂苷在酸性减性条件下均易水解，如药液PH选择不当，药液中会产生白点、白块甚至絮状沉淀，影响产品质量和疗效，因而本制剂生产和储存过程中选择合适PH值并保持PH的相对稳定，是至关重要的问题，因而将本产品PH值定在在4.0～9.0之间，

冰片为龙脑香科植物龙脑香树脂的加工品或菊科植物艾纳香叶提取的结晶，或以樟脑、松节油等为原料，经化学方法合成的精制品。冰片主要含龙脑、异龙脑、樟脑等成分。目前冰片在临床上的应用极为广泛，但由于龙脑、樟脑等属于单萜类成分在水中溶解度小，因而冰片属于小分子脂溶性单萜类物质，一直无法应用于注射液等液体制剂。在实验中我们加入醇、脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸、聚氧乙烯脂肪醇醚等助溶剂成功解决了上述问题，上述助溶剂优选为乙醇、丙二醇、甘油低级醇类，又以丙二醇和/或乙醇助溶效果最好。

本发明制剂制备工艺为：

(1)丹参，加入5-12倍量水煎煮1-5次，每次煎煮0.5-3小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达40％-85％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药0.5-5g，用盐酸调节PH至1-6，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5-8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用40％-85％乙醇回流提取2-6次，每次0.5-3小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入醇超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。上述制备工艺中(3)可用如下方法代替：

取冰片加入聚山梨酯，研匀，慢慢加入注射用水，不断研匀；丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

本发明药物组合物，疗效好、毒副作用少。为表明本发明药物的治疗作用和毒副作用，我们做了大量的实验研究，下面实验例用于进一步说明本发明。

一、对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的影响

【试验目的】观察本发明注射液对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的抑制作用。

【受试药物】

1、药物：本发明注射液。鲁南制药股份有限公司提供。

2、对照药品：复方丹参注射液，安徽大东方药业有限公司提供。

【动物】

1、来源，种属，品系，合格证：安徽医科大学实验动物中心提供，昆明种小鼠，远交封闭系，皖医动准第01号。

2、动物数：100只，每组20只。

【试剂及仪器】

1、胶原蛋白：上海源聚生物科技有限公司。

2、80-2离心沉淀器，上海手术器械厂产品。

3、盐酸肾上腺素注射液：上海禾丰制药有限公司生产。

4、手动匀浆器，手术器械若干。

【试验方法】

1、胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂的配制：称取胶原蛋白30mg，浸泡于3～4ml生理盐水中2h以上，手动匀浆(要求研磨充分，看不到颗粒或悬浮物)，加生理盐水40ml，离心(3000rpm，10min)，取上清液。另取1mg/2ml肾上腺素注射液1支加入上述上清液中，加生理盐水至50ml即成。

小鼠体内血栓形成模型建立的标准为生理盐水对照组血栓形成率大于90％。实验开始时应首先根据血栓模型建立的标准摸索出混合诱导剂的合适注射量，一般为0.3～0.5ml/只。

2、参照文献方法，取健康小鼠100只，体重18～22g，雌雄各半，随机分成5组，每组20只，分别为生理盐水组，复方丹参注射液组(5ml/kg)，本发明注射液小、中、大剂量组(分别相当于临床用量的5、10、20倍)，用生理盐水稀释到各组所需浓度，分别尾静胲注射给予0.1ml/10g相应供试液，连续给药7天，于第7天给完药1小时后尾静脉注射胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂，注射后立即观察5min内小鼠死亡数、15min内小鼠偏瘫恢复数及未恢复数，进行X2检验。

【试验结果】

由试验可知，小鼠经静脉注射胶原蛋白-肾上腺素联合诱导剂后，体内血栓形成率大于90％，说明采用此方法可造成动物急性体内血栓形成模型。给予复方丹参注射液组和本发明注射液小、中、大剂量后，造模后5min内小鼠死亡数降低，15min内小鼠偏瘫恢复数增加，其中本发明注射液小、中、大剂量组造模后5min内小鼠死亡数与模型组相比较，有显著意义(分别P＜0.01和P＜0.01)；本发明注射液和复方丹参注射液相比具有更强的药理作用。说明本发明注射液可以抑制模型小鼠的体内血栓形成，具有一定的抗血栓形成作用。结果见表1

表1本发明注射液对小鼠体内血栓形成抑制率的影响( x±SD)

组别	动物数(只)	5min死亡数(只)	15min恢复数(只)	15min未恢复数(只)
					生理盐水	20	18	1	1
复方丹参注射液	20	6*	8*	6
					本发明小剂量	20	5*	9*	6
本发明中剂量	20	3**	12*	5
					本发明大剂量	14	2**	14**	4

二、对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响

【试验目的】观察本发明注射液对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响。

【受试药物】

1、药物名称：本发明注射液由鲁南制药股份有限公司提供。

2、对照药品：复方丹参注射液，安徽大东方药业有限公司提供。

【动物】

1、来源，种属，品系，合格证：安徽医科大学实验动物中心提供，昆明种小鼠，远交封闭系，皖医动准第01号。

【试剂及仪器】

钠石灰。

【试验方法】

实验选用健康昆明种小白鼠，体重22-24g，雌雄各半，雌性未孕。随机配对分为空白对照组、复方丹参注射液对照组、本发明注射液高、中、低三个剂量组。各组静脉注射给药后10分钟，将动物放于250ml广口磨口瓶内，瓶内置25g钠石灰，并以滤纸覆盖，每瓶放入一只小白鼠，立即以凡士林封闭并计时，记录自小白鼠投入后至死亡的时间，结果进行统计学处理后，列于表2。

【试验结果】

表2结果显示：本发明注射液大、中剂量给小白鼠尾静脉注射，对小白鼠常压缺氧的存活时间有明显的延长作用，并随剂量加大作用逐渐增强，复方丹参注射液组作用低于本发明注射液同等剂量组，与空白对照组比较，有显著性差异(p＜0.01)。

表2本发明注射液对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响( x±SD)

组别	动物数(只)	存活时间(min)
			生理盐水组	15	35.27±4.17
阳性对照组	15	41.15±4.56*
			小剂量组	15	42.30±4.97
中剂量组	15	44.22±3.99*
			大剂量组	15	46.36±4.05**

注：与模型组相比较^*P＜0.05 ^**P＜0.01

三、对结扎冠状动脉引起大白鼠心肌缺血的影响

【试验目的】观察本发明注射液对结扎冠状动脉引起大白鼠心肌缺血心电图ST段、梗塞面积及血清中LDH、CPK的影响。

【受试药物】

1、药物名称：本发明注射液由鲁南制药股份有限公司提供。

2、对照药品：复方丹参注射液，安徽大东方药业有限公司提供。

【动物】

1、来源，种属，品系，合格证：安徽医科大学实验动物中心提供，Wister大鼠，远交封闭系。

【试剂及仪器】

1、N-BT染色剂。

2、LDH试剂盒。

3、CPK试剂盒。

4、手动匀浆器，手术器械若干。

5、心电图机。

6、AT-738半自动生化分析仪，上海安泰分析仪器有限公司生产。

【试验方法】

实验选用健康雄性wistaur大白鼠，体重250-300g，随机分为模型对照组(舌下静脉注射生理盐水0.5ml/100g体重)和本发明注射液高、中、低三个剂量组(剂量分别相当于临床用量的5、10、20倍)。各组大鼠在乌拉坦0.65g/kg腹腔浅静脉麻醉下，背位固定。先测标准肢体导联心电图(1mv＝10mm，纸速50mm/秒)。胸部去毛、消毒，沿左锁骨中线纵形切开皮肤约2cm在第四或第五肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，请压右侧胸廓，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸壁。10分钟后，用同样方法测标准肢体导联心电图。然后按上述分组和剂量给药一次(于结扎后4小时再给药一次)，并于给药后不同时间测心电图变化，观察ST段改变情况，并进行自身前后和组间比较，实验结束后，取血测定磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)，取出心脏，用生理盐水洗尽血液后置扭力天平上称重，然后将心室剪开不剪断，置N-BT液中染色，在37℃恒温水浴中染色15分钟，正常心肌染暗蓝色，梗塞区心肌不着色，用重量法计算心肌梗塞区占全心脏的重量百分率，结果进行统计学处理。

【试验方法】

结果可以看出，大鼠冠状动脉结扎后，心肌缺血可以持续8小时以上。本发明注射液给药后0.5小时心电图就有改变；其高剂量组、中剂量组和复方丹参注射液在给药2小时后心电图ST段改变与模型对照组比较p＜0.05～p＜0.01，其高剂量组、中剂量组在给药2小时后心电图ST段改变优于复方丹参注射液；其他各组的心电图ST段均有明显改善，但统计学无显著性差异。

同时本发明注射液可以缩小梗塞面积，并可降低因心肌缺血所造成血清中LDH、CPK的长高，经统计处理本发明注射液中、高剂量与生理盐水组相比较p＜0.05～p＜0.01。见表3、4。

                         表3本发明注射液对结扎大鼠冠状动脉引起心肌

                                 缺血所致心电图ST段变化的影响

组别	动物数(只)	给药后不同时间心电图ST段变化(mv)
									结扎后	0.5h	1.0h	2.0h	4.0h	8.0h	12.0h
		生理盐水	10	0.227±0.082	0.362±0.121	0.330±0.123	0.321±0.160	0.287±0.148								0.253±0.133	0.238±0.150
阳性药	10								0.198±0.130	0.202±0.104**	0.202±0.132*	0.182±0.118*	0.170±0.103*	0.151±0.078*	0.160±0.087

小剂量	10	0.191±0.098	0.182±0.070**	0.215±0.081*	0.223±0.093	0.204±0.079	0.201±0.132	0.190±0.193
									中剂量	10	0.211±0.111	0.154±0.082***	0.151±0.074**	0.105±0.068**	0.116±0.068**	0.155±0.084*	0.138±0.106
大剂量	10	0.201±0.075	0.146±0.022***	0.127±0.024**	0.103±0.026**	0.108±0.045**	0.127±0.043*	0.113±0.57

                    表4本发明注射液对结扎大鼠冠状动脉引起心肌缺血所致

                               梗塞面积及血清LDH、CPK的影响

组别	动物数(只)	梗塞范围	LDH	CPK
					％	U/L	U/L
		生理盐水	10	10.03±1.93				257.99±67.42	303.50±82.14
阳性药	10				7.64±1.38**	193.63±50.18*	215.52±88.76**
		小剂量	10	7.35±2.03**				201.55±23.17*	180.71±115.40*
中剂量	10				6.73±1.94**	168.17±63.99**	205.37±87.91*
		大剂量	10	5.21±1.40**				132.46±44.27**	225.41±81.73*

四、活血化瘀作用——血液流变学试验

对血瘀模型大鼠红细胞压积、全血粘度、血浆粘度的影响

【试验目的】观察本发明注射液对血瘀模型大鼠红细胞压积、全血粘度、血浆粘度的影响。

【受试药物】

1、药物：本发明注射液由鲁南制药股份有限公司提供。

2、对照药品：复方丹参注射液，安徽大东方药业有限公司提供。

【动物】

1、来源，种属，品系，合格证：安徽医科大学实验动物中心提供，Wister大鼠，远交封闭系，皖医动准第03号。

【试剂及仪器】

1、Liang-100型血液粘度计(全套设备)，中国上海医科大学实验仪器厂出品。

2、80-2离心沉淀器，上海手术器械厂产品。

3、盐酸肾上腺素注射液：上海禾丰制药有限公司生产。

4、肝素钠：上海第一生代药业有限公司。

5、手术器械若干。

【试验方法】

1、血瘀模型的制备：参照文献方法，每天(舌下或尾)静脉给予相应的供试液，连续7天，于第7天皮下注射Adr(盐酸肾上腺素)0.08ml/100g体重共2次，两次间隔4小时，在两次注射Adr之间(前后各间隔2小时)将大鼠浸入冰水内5分钟。处置后停食，次晨给药1小时后检测。

2、参照文献方法(具体仪器操作见李仪奎主编，中药药理实验方法学，上海科技出版社，P50)选用体重250～300g的大鼠60只，随机分成6组，分别为生理盐水组，模型组，复方丹参注射液(2.50ml/kg)，本发明注射液小、中、大剂量组(分别相当于临床用量的2.5、5、10倍)，连续给药7天，第7天按上方法造模，停食后次晨取血测红细胞压积、全血粘度、血浆粘度，计算各组之均值与标准差，并作t检验，比较组间差异显著性。

【试验结果】

由试验可知，大鼠经给予肾上腺素和冰水处理后，造成全血粘度和血浆粘度升高，模型组全血粘度及血浆粘度值与生理盐水组相比较有非常显著意义(分别为P＜0.001和P＜0.001)；模型组红细胞压积值增加，与生理盐水组相比较有非常显著意义(为P＜0.001)，说明采用此方法已造成了急性血瘀模型。给予本发明注射液及复方丹参注射液后，动物红细胞压积值降低，其中本发明注射液中、大剂量组红细胞压积值与模型组相比较，有显著意义(分别为P＜0.01和P＜0.01)；动物全血粘度及血浆粘度值降低，其中本发明注射液中、大剂量组全血粘度高切变率值与模型组相比较，有显著意义(分别为P＜0.05和P＜0.05)；本发明注射液中、大剂量组全血粘度低切变率值与模型组相比较，有显著意义(分别为P＜0.01和P＜0.05)；本发明注射液中、大剂量组血浆粘度值与模型组相比较，有显著意义(分别为P＜0.01和P＜0.05)。本发明注射液与复方丹参注射液相比具有同等的药理作用。说明本发明注射液可以降低模型大鼠的血液粘稠度，具有一定的活血化瘀作用。结果见表5。

表5本发明注射液对血瘀模型大鼠血液流变学的影响

组别	动物数(只)	红细胞压积(HCT％)	血浆粘度	全血粘度
						低切变率	高切变率
				生理盐水	10			49.2±2.2	1.55±0.12	10.42±1.55	6.03±1.12
模型组	10	53.9±2.0###	2.33±0.22###			16.68±2.85###	10.35±1.97##
				复方丹参注射液	10			50.1±2.2**	1.85±0.21*	13.34±2.69*	7.69±1.63**
本发明小剂量	10	51.9±2.8	2.02±0.29			14.33±1.80	9.39±1.35
				本发明中剂量	10			49.7±2.5**	1.75±0.11**	12.75±2.01**	8.44±1.79*
本发明大剂量	10	49.9±2.3**	1.83±0.32*			13.35±2.21*	8.57±1.61*

五、对外源性自由基所致心律失常的影响

【试验目的】观察本发明注射液对外源性自由基所致心律失常有无保护作用。

【受试药物】

1、药物：本发明注射液由鲁南制药股份有限公司提供。

2、对照药品：复方丹参注射液，安徽大东方药业有限公司提供。

【动物】

1、来源，种属，品系，合格证：安徽医科大学实验动物中心提供，Wister大鼠，远交封闭系。

【试剂及仪器】

XD7100心电图机

501型超级恒温水浴，上海医疗器械五厂

Langendorff灌流装置。

【试验方法】

1、模型的制备：用2％戊巴比妥钠(0.2ml/100g体重)和1％肝素钠(0.5ml/100g体重)同时腹腔注射。动物麻醉后，取仰卧位固定，开胸，在距主动脉起始部3～4mm处取下心脏，迅速放入预冷0℃灌流液中停跳，冲洗心腔和血管内的残留血液后，将心脏迅速移置到Langendorff灌流装置进行非循环不作功灌流，灌流压0.82kPa。灌流液为Krebs-Henseleit缓冲液，其组成为(mmol/L)：NaCl118，KC14.7，MgSO₄·7H2O1.2，KH₂PO41.2，NaHCO325.0，CaCl22.5，Glucose11.0，渗透压300moslm/L。灌流前以95％O₂+5％CO₂混合气平衡15min，灌流中持续通气。在整个灌流过程中，用恒温水浴器使灌流液保持在37℃。

选用体重250～300g的大鼠50只，随机分成5组，对照组：离体心脏预灌15min·后，灌流液中加入硫酸亚铁(0.25mmol/L)/抗坏血酸(1.0mmol/L)持续灌注30min，观察心电图变化。复方丹参注射液组：灌流液中以2.50mg/L浓度加入异博定预灌15min后，灌流液中加入硫酸亚铁(0.25mmol/L)/抗坏血酸(1.0mmol/L)持续灌注30min，观察心电图变化。本发明注射液组：灌流液中加入本发明注射液(分别相当于临床剂量2.5、5、10倍)预灌15min后，灌流液中加入硫酸亚铁(0.25mmol/L)/抗坏血酸(1.0mmol/L)持续灌注30min，观察心电图变化。

【试验结果】

由实验可知：以硫酸亚铁(0.25mmol/L)/抗坏血酸(1.0mmol/L)作为外源性自由基生成系统可导致离体灌流大鼠心脏发生心律失常，在灌流液中预先加入本发明注射液和复方丹参注射液可使外源性自由基生成系统所致的心律失常发生率明显降低。结果见表6。

表5本发明注射液对外源性自由基所致心律失常的的影响( x±SD)

组别	动物数(只)	房室分离		室性早搏		室速		室颤		总心率失常
												例数	％	例数	％	例数	％	例数	％	例数	％
		模型组	10	7	70	6	60	4	10	4	40											10	100
复方丹参注射液	10											2	20	1	10	2	20	0	0	3	30
		本发明小剂量	10	2	20	1	10	1	10	0	0											3	30
本发明中剂量	10											1	10	1	10	0	0	0	0	2	20
		本发明大剂量	10	1	10	0	0	0	0	0	0											1	10

下述实施例为进一步公开本发明，需要说明的是这些实施例仅为本发明的优选方式，并不限制本发明要求保护的范围。

实施例1

丹参49.0g          三七50g             冰片1g

(1)丹参，加入12倍量水煎煮3次，每次煎煮3小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达85％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用60％乙醇回流提取3次，每次2小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入10倍量丙二醇超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌，检验，即得。

实施例2

丹参49g    三七48.3g    冰片2.7g

(1)丹参，加入5倍量水煎煮1次，每次煎煮0.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达75％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药5g，用盐酸调节PH至3，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用75％乙醇回流提取2次，每次3小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入乙醇5倍量超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌，检验，即得。

实施例3

丹参93.6g    三七6.2g    冰片0.2g

(1)丹参，加入8倍量水煎煮5次，每次煎煮1小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达60％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药2g，用盐酸调节PH至3，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用40％乙醇回流提取6次，每次0.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取1次，正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入甘油超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌，检验，即得。

实施例4

丹参49g    三七50g    冰片1g

(1)丹参，加入6倍量水煎煮4次，每次煎煮1.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达50％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药3g，用盐酸调节PH至1，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至6，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用50％乙醇回流提取2次，每次2小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入聚山梨酯80，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例5

丹参49g    三七48.3g    冰片2.7g

(1)丹参，加入8倍量水煎煮3次，每次煎煮2.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达55％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至1，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用75％乙醇回流提取5次，每次2.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入吐温-80，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌，检验，即得。

实施例6

丹参49.99g    三七50g    冰片0.01g

(1)丹参，加入6倍量水煎煮2次，每次煎煮2小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1.5g，用盐酸调节PH至4，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至6，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用70％乙醇回流提取4次，每次1.0小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入司盘-65，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例7

丹参93.6g    三七6.39g    冰片0.01g

(1)丹参，加入10倍量水煎煮3次，每次煎煮2小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药3g，用盐酸调节PH至1，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用70％乙醇回流提取3次，每次2.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入卖泽-45，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例8

丹参59.5g    三七40g    冰片0.5g

(1)丹参，加入8倍量水煎煮2次，每次煎煮3小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达45％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5.5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用55％乙醇回流提取3次，每次2.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入卞泽-35，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例9

丹参59.5g    三七39.5g    冰片1g

(1)丹参，加入6倍量水煎煮2次，每次煎煮1.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5.5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用70％乙醇回流提取4次，每次0.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入普流罗尼，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，滤过，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例10

丹参89.5g    三七10g    冰片0.5g

(1)丹参，加入10倍量水煎煮3次，每次煎煮2小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达75％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用75％乙醇回流提取3次，每次2小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入丙二醇醇超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌，检验，即得。

实施例11

丹参59.95g    三七40g    冰片0.05g

(1)丹参，加入8倍量水煎煮3次，每次煎煮2小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至1，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至6，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用80％乙醇回流提取3次，每次2小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入丙二醇，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，冷冻干燥，无菌分装，检验，即得。

实施例12

丹参89.5g    三七10.45g    冰片0.05g

(1)丹参，加入10倍量水煎煮4次，每次煎煮1.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达60％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用65％乙醇回流提取5次，每次0.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入司盘超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例13

丹参69.8g    三七30g    冰片0.2g

(1)丹参，加入6倍量水煎煮3次，每次煎煮2小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药5g，用盐酸调节PH至4，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用60％乙醇回流提取3次，每次1小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入甘油超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例14

丹参69.8g    三七29.8g    冰片0.4g

(1)丹参，加入5倍量水煎煮5次，每次煎煮0.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达85％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药3g，用盐酸调节PH至3，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用45％乙醇回流提取4次，每次3小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入无水乙醇超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例15

丹参85g    三七14.8g    冰片0.2g

(1)丹参，加入12倍量水煎煮1次，每次煎煮3小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达40％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药3g，用盐酸调节PH至4，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用70％乙醇回流提取5次，每次1小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)冰片加入脱水山梨醇脂肪酸酯，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例16

丹参85g    三七14.9g    冰片0.1g

(1)丹参，加入7倍量水煎煮2次，每次煎煮1.5小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达55％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药3g，用盐酸调节至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用65％乙醇回流提取2次，每次2.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入聚氧乙烯脂肪酸酯，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例17

丹参84.8g    三七14.8g    冰片0.4g

(1)丹参，加入6倍量水煎煮3次，每次煎煮1小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1.5g，用盐酸调节PH至2，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至6.7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用60％乙醇回流提取3次，每次1.5小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

实施例18

丹参69.6g    三七30g    冰片0.4g

(1)丹参，加入8倍量水煎煮2次，每次煎煮1小时；合并煎煮液，浓缩；药液稍冷却至室温时加乙醇使沉淀，使含醇量达75％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药2g，用盐酸调节PH至5.5，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5.5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用45％乙醇回流提取4次，每次3小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入聚氧乙烯脂肪醇醚，研匀，加入蒸馏水中，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

Claims (11)

1、一种治疗冠心病心绞痛的注射剂，其特征在于其中制成有效成分的原料组成为：

丹参49.0％-93.6％    三七6.2％-50％    冰片0.01％-2.7％。

2、如权利要求1所述的注射液，其特征在于各原料的重量百分比为：

丹参59.5％-89.5％    三七10％-40％    冰片0.05％-1.0％。

3、如权利要求1所述的注射液，其特征在于各原料的重量百分比为：

丹参69.8％-85％    三七14.8％-30％    冰片0.1％-0.4％。

4、如权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于其成分含有：丹参总酚酸0.1-25毫克/毫升，三七总皂苷1-40毫克/毫升。

5、如权利要求4所述的注射液，其特征在于其成分含有：丹参总酚酸0.5-10毫克/毫升，三七总皂苷5-20毫克/毫升。

6、如权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于所述注射液PH值在4.0～9.0之间。

7、如权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于溶剂中加入助溶剂：醇、脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸或聚氧乙烯脂肪醇醚。

8、如权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于加入的助溶剂是低级醇。

9、如权利要求8所述的注射液，其特征在于溶剂中加入的助溶剂是丙二醇和/或乙醇。

10、如权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于它的制备工艺为：

(1)取丹参加入5-12倍量水煎煮1-5次，每次煎煮0.5-3小时；合并煎煮液，浓缩；药液加乙醇使沉淀，使含醇量达40％-85％，冷藏24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水至每1ml相当于含丹参生药1-5g，用盐酸调节PH至1-6，冷藏24小时，过滤，滤液用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，浸膏加注射用水溶解，过滤，用NaOH调节PH至5-8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得丹参水溶性提取物中间体；

(2)取三七，用40％-85％乙醇回流提取2-6次，每次0.5-3小时；合并醇回流液，减压回收乙醇并浓缩，用水饱和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇得三七总皂苷，加注射用水溶解，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，得三七水溶性总皂苷中间体；

(3)取冰片加入乙醇、丙二醇或两者混合物适量超声使溶解，慢慢加入注射用水，丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。

11、根据权利要求10所述注射液，其特征在于它的制备工艺(3)可用如下方法代替：

取冰片加入聚山梨酯，研匀，慢慢加入注射用水，不断研匀；丹参提取物中间体和三七总皂苷中间体加注射用水溶解与冰片溶液合并配至全量，过滤，精滤，充氮气灌封灭菌或冷冻干燥无菌分装，检验，即得。