CN1335161A - 全鹿骨粉胶囊 - Google Patents
全鹿骨粉胶囊 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1335161A CN1335161A CN01123954A CN01123954A CN1335161A CN 1335161 A CN1335161 A CN 1335161A CN 01123954 A CN01123954 A CN 01123954A CN 01123954 A CN01123954 A CN 01123954A CN 1335161 A CN1335161 A CN 1335161A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- medicine
- radix
- group
- bone powder
- deer bone
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种具有延缓衰老和免疫调节作用的保健药物,它包括全鹿骨粉和任选的其它成分。经动物实验证明,本发明的药物能够降低小鼠心肌脂褐素含量,提高它们的全血谷胱甘肽过氧化物酶活力单位数和血清SOD活力;延长果蝇寿命;提高小鼠的碳廓清指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。
Description
发明领域
本发明涉及一种具有保健作用的药物，更具体涉及一种具有延缓衰老和免疫调节作用的胶囊。
背景技术
目前市场上有许多用于延缓衰老和调节免疫的保健药品销售，但大多数效果不明显或者甚至不能肯定，因此，开发出具有延缓衰老和调节免疫等作用的保健制品具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有延缓衰老和免疫调节作用的药物。经动物实验证明，本发明的药物能够降低小鼠心肌脂褐素含量，提高它们的全血谷胱甘肽过氧化物酶活力单位数和血清SOD活力；延长果蝇寿命；和提高小鼠的碳廓清指数，巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。
本发明的另一个目的是提供上述具有保健作用的药物在预防和治疗早衰、肿瘤、免疫力低下、免疫性疾病(如乙肝、红斑狼疮、经常性感冒)等疾病中的用途。
本发明的保健制剂包括全鹿骨粉和任选的其它成分。在有其它成分的情况下，其它成分的量优选低于50wt％，更优选低于30wt％，基于药物的总重量。任选的其它成分包括一些具有补益气血阴阳、健脾安神等作用的中药，例如酸枣仁、枸杞、冬虫夏草、人参、当归、白芍、沙参、菟丝子、淫羊藿、女贞子、山茱萸、刺五加、甘草、白术、黄芪、补骨脂、茯苓、杏仁、黄连、黄芩、鹿茸、党参等中的一种或多种；和药物学上可以接受的载体，如赋形剂。这些中药优选是用水或醇如乙醇提取后再喷雾干燥得到的提取物。
其中全鹿骨粉是由去肉鹿骨煮沸后，晾干，和烘干粉碎至所需粒度得到的产物；其中优选的是，去肉鹿骨采用碱水煮沸，再用盐酸浸泡中和处理，然后取出，再烘干粉碎至所需粒度，这样有利于去除油脂、杂质等。
制备方法包括将所述全鹿骨粉与任选的其它成分充分混合，再装入胶囊即可。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明药物包括下述原料：
150-700重量份全鹿骨粉
25-120重量份枸杞提取物
10-50重量份酸枣仁提取物
全鹿骨粉如上所定义。
枸杞提取物是枸杞用水或醇如乙醇提取，提取液然后进行干燥所得到的产物。
酸枣仁提取物是酸枣仁用水或醇如乙醇提取，提取液再进行干燥所得的产物。
例如，全鹿骨粉可由以下工序制得：将新鲜的鹿骨去除残留的肉，用碱水煮沸1-3小时左右，晾干，然后用盐酸中和处理两次，烘干粉碎至需要的粒度。其中盐酸浸泡的时间优选为5-15分钟。
例如，枸杞提取物可按照以下工序制得：枸杞子用水或醇如乙醇浸泡1.5-3小时，煮沸提取0.5-2小时过滤，残渣再用水(或醇)提取25分钟-1小时，过滤，合并两次的滤液，喷雾干燥而成。
例如，酸枣仁提取物可按照以下工序制得：酸枣仁用水或醇如乙醇浸泡2小时，煮沸提取0.5-2小时后过滤，残渣再用上述溶剂提取25分钟-1小时，过滤，合并两次滤液，喷雾干燥而得到酸枣仁提取物。
制备上述药物的方法包括：将上述原料按所述配比均匀混合，再装入胶囊。
实施例
实施例1
取150公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取枸杞150公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥即为枸杞提取物。
取酸枣仁60公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥即为酸枣仁提取物。
按全鹿骨粉∶枸杞提取物∶酸枣仁提取物＝320∶70∶20的比例将三种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例2
取150公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取枸杞160公斤，用水浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用水提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥即为枸杞提取物。
取酸枣仁80公斤，用水浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用水提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥即为酸枣仁提取物。
按全鹿骨粉∶枸杞提取物∶酸枣仁提取物＝210∶40∶20的比例将三种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例3
取150公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取淫羊藿150公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥。
取麦冬60公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥。
按全鹿骨粉∶淫羊藿提取物∶麦冬提取物＝320∶70∶20的比例将三种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例5
取150公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取刺五加150公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥。
取茯苓80公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥。
按全鹿骨粉∶刺五加提取物∶茯苓提取物＝320∶70∶20的比例将三种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例6
取150公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取冬虫夏草150公斤，用水浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用水提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥即为冬虫夏草提取物。
取白芍100公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥即为白芍提取物。
取黄芩50公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥即为黄芩提取物。
按全鹿骨粉∶冬虫夏草提取物∶白芍提取物；黄芩提取物＝320∶60∶20∶10的比例将四种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例7
取180公斤新鲜鹿骨，去除残留的肉，用碱水煮沸2小时，晾干，然后用5％盐酸溶液浸泡二次，再烘干粉碎至200目的粒度。
取党参150公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时，过滤，合并两次的滤液，然后喷雾干燥。
取白术80公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥。
取茯苓80公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥。
取甘草40公斤，用乙醇浸泡2小时，煮沸提取1小时后过滤，残渣再用乙醇提取半小时后过滤，合并两次滤液，然后喷雾干燥。
按全鹿骨粉∶党参提取物∶白术提取物∶茯苓提取物∶甘草提取物＝320∶40∶20∶20∶10的重量比将五种物质均匀混合，装入胶囊即为本发明全鹿骨粉胶囊。
实施例1样品经北京大学医学部公共卫生学院中心仪器室检测(测试方法ICP-MS)，微量元素含量如下所示：
Mo32ng/g Cu0.42ug/g Ga0.38ug/g
Cr＜20ng/g Zn48.8ug/g La0.014ug/g
Ge＜20ng/g Rb0.64ug/g Ce0.042ug/g
Na374ug/g Sr123ug/g Pr0.002ug/g
Mg0.2％ Y0.02ug/g Nd0.026ug/g
Al39.7ug/g As0.03ug/g
P6.6％ Ba57.8ug/g
K288.6ug/g Pb0.89ug/g
Co0.3ug/g Ti1.6ug/g
Ca11.2％ Mn1.4ug/g
Ni1.2ug/g Fe148.3ug/g
有机物经中科院化工冶金研究所分析室分析，结果如下：
Ca21.4％ Co0.0011％ Ni0.00060
试验一：全鹿骨粉胶囊延缓衰老作用实验报告
一、材料与方法
1、样品描述
实施例1的全鹿骨粉胶囊，内容物为褐色粉末，胶囊0.45g/粒。
2、实验动物
本实验选用中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供的健康二级昆明种10月龄雌性小鼠。随机分为4组，组间体重经t检验无显著差异。[合格证书：医动字第01-3001号]。上海铁道大学医学院提供的美国野生型黑腹果蝇(Origen K)。
3、剂量选择
受试物是人体推荐剂量为1.8g/日/60kg体重的定型产品。小鼠的等效剂量相当于人体推荐剂量的10倍。分别以人体推荐剂量的5倍、10倍和30倍(0.15/60kg.bw)、中(0.30/日/kg.bw)、高(0.90g/日/kg.bw)剂量。采取灌胃法，每日灌胃一次，对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给予受试物59天后，测定各项指标。
4、仪器
752分光光度计，AE100电子天平，电热三用水箱，960型荧光分光光度计J2-SH高速冰冻离心机，KA-1000型台式离心机，80-2型台式离心机，高压蒸气消毒器，生化培养箱，广视野显微镜
5、试剂
(1)、叠氮钠磷酸缓冲液(PH7.0) (2)谷胱甘肽缓冲液(1mmol/L)
(3)H2O2溶液(1.5mmol/) (4)DTNB显色液
(5)Na2HPO4(0.32mol/l) (6)氯仿-甲醇混合液(2∶1v/v)
(7)硫酸奎宁溶液(1μg/mL) (8)乙醚 (9)苯甲酸
SOD测试盒(南京建成生物工程研究所生产)
MDA测试盒(南京建成生物工程研究所生产)
6、检测方法
6.1心肌脂褐质含量测定
取出心肌，去除结缔组织和脂肪后，称重。在匀浆器中加入氯仿甲醇提取液(2∶1)匀浆，提取脂褐质2-3次。将几次提取液合并起来，定容至7ml。将提取液以3000转/分钟离心10分钟，取上清液用于测定荧光强度。激发波长360nm，放射波长450nm，以硫酸奎宁(1μg/mL，0.1mol/L硫酸)为标准对照，其荧光强度定为50单位(Is)。在该条件下测定样品荧光强度(Ix)，氯仿甲醇溶液为空白对照。
6.2血清过氧化脂质含量的测定
| 试剂 | 标准管mL | 标准空白管mL | 测定管mL | 测定空白管mL |
| 标准品(10nmol/mL) | 0.1 | - | - | - |
| 无水乙醇 | - | 0.1 | - | - |
| 血清 | - | - | 0.1 | - |
| 1、2、3号混合试剂 | 4 | 4 | 4 | 4 |
混匀后，95℃水浴(开盖煮沸)40分钟，取出后3500-4000r/min离心10min，蒸馏水调零，532nm处比色。
6.3血清超氧化物歧化酶活力测定
| 试剂 | 测定管 | 对照管 |
| 试剂1(mL) | 1.0 | 1.0 |
| 血清(uL) | 30.0 | - |
| 试剂2(mL) | 0.1 | 0.1 |
| 试剂3(mL) | 0.1 | 0.1 |
| 试剂4(mL) | 0.1 | 0.1 |
| 双蒸水(mL) | 0.5 | 0.5 |
| 混匀，37℃恒温水浴40min | ||
| 试剂5、试剂6、冰醋 | 2.0 | 2.0 |
| 酸混合液(mL) | ||
| 混匀10min后，倒入1cm光径比色杯，蒸馏水调零，530nm比色测定OD值 | ||
每mL反应液中SOD抑制率达50％时所对应的SOD量为一个单位。
6.4全血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力测定
取鼠血10ul加入到1mL双蒸水中，充分振摇，制成血样稀释液。
| 试剂 | 样品管 | 非酶管 | 空白管 |
| GSH(mL) | 0.4 | 0.4 | - |
| 血样稀释液(mL) | 0.4 | - | - |
| 双蒸水(mL) | - | 0.4 | - |
| 37℃水浴5分钟 | |||
| H2O2(mL)37℃预温 | 0.2 | 0.2 | - |
| 37℃水浴准确反应3分钟 | |||
| 偏磷酸沉淀液(mL) | 4 | 4 | - |
| 3000r/min离心10min | |||
| 离心上清液(mL) | 2 | 2 | - |
| 双蒸水(mL) | - | - | 0，4 |
| 偏磷酸沉淀液(mL) | - | - | 1.6 |
| Na2HPO4(mL) | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| DTNB显色液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 显色反应1min，于420nm波长，读0.D值 | |||
全血GSH-Px活力单位：规定1m全血在1mL内，扣除非酶反应的1g〔GSH〕降低后，使1g〔GSH〕降低1为一个活力单位。
7、果蝇寿命实验
7.1实验材料
上海铁道大学医学院提供的美国野生型黑腹果蝇(Origen K)。
7.2剂量选择
设一个空白对照组和4个剂量组，各剂量组饲料含受试物浓度分别为0％、0.033％、0.1％、0.3％、0.9％。
7.3果蝇基础饲料：
玉米粉8.5％、红糖6.5％、琼脂0.75％、丙酸0.5％、干酵母粉0.75％水83％。pH＝7。
7.4检测方法
卵、幼虫、蛹及成虫均培养在25±1℃，相对湿度40-70％的生化培养箱中。将常用基础饲料煮成粥后，分装于无菌培养试管中。每支培养管用无菌海绵塞封口。成虫基础饲料每4天更换一次。将培养管平放在培养箱内饲养。收集6小时内孵出的成虫进行分组。在此时间范围内孵出的果蝇均未交配。用乙醚麻醉后称重分组。选择个体大小相似的果蝇，每管20只，雌雄分养。每组雌雄果蝇各200只。在成虫期给受试物，受试物掺入到预先熔化的50℃基础饲料中，并保持各组PH值一致。每天定时统计果蝇存活数和死亡数。直至全部死亡。每组最后死亡的20只果蝇存活天数的平均数为该组的最高寿命。实验结果，计算平均寿命和最高寿命以及半数死亡时间。
8、实验数据用方差分析进行统计。
二、结果
1、对老龄小鼠心肌脂褐素的影响
表1全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠心肌脂褐素含量的影响(X±SD)
| 分组 | 受试物剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 心肌脂褐素(ug/g组织重) | P值 |
| 对照组 | 0 | 12 | 22.8±2.7 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 18.8±3.3** | 0.0035 |
| 中剂量组 | 0.30 | 12 | 18.2±2.4*** | 0.0002 |
| 高剂量组 | 0.90 | 12 | 16.7±1.4*** | 3.697×10-7 |
**：与空白对照组相比有非常显著差异(P＜0.01)
***：与对照组比较有极显著差异(P＜0.001)
表1表明，经口给予老龄小鼠不同剂量受试物59天后，与空白对照组相比，低、中、高剂量组心肌脂褐素含量分别降低18％(P＜0.01)、20％(P＜0.001)和27％(P＜0.001)。
2、对老龄小鼠血清脂质过氧化物含量的影响
表2全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠血清脂质过氧化物含量的影响(X±SD)
| 分组 | 受试物剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 血清脂质过氧化物含量(nmol/ml) | P值 |
| 对照组 | 0 | 12 | 32.2±3.3 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 31.5±2.6 | 0.5837 |
| 中剂量组 | 0.30 | 12 | 30.4±2.8 | 0.1728 |
| 高剂量组 | 0.90 | 12 | 29.9±3.1 | 0.0954 |
表2表明，经口给予老龄小鼠不同剂量受试物59天后，与空白对照组相比，各剂量组血清脂质过氧化物含量均无显著变化(P＞0.05)。
2、对老龄小鼠血清SOD活力的影响
表3全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠血清SOD活力的影响(X±SD)
| 分组 | 受试物剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 血清SOD(NU/ml) | P值 |
| 对照组 | 0 | 12 | 95.2±13.9 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 110.9±18.4* | 0.0279 |
| 中剂量组 | 0.30 | 12 | 105.9±10.7* | 0.0460 |
| 高剂量组 | 0.90 | 12 | 97.4±8.2 | 0.6448 |
*：与对照组比较有显著差异(P＜0.05)
表3表明，经口给予老龄小鼠不同剂量受试物59天后，与空白对照组相比，低、中剂量组血清SOD活力分别提高16％(P＜0.05)、11％(P＜0.05)。
4、对老龄小鼠全血谷胱甘肽过氧化酶活力的影响
表4全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠全血谷胱甘肽过氧化酶活力的影响(X±SD)
| 分组 | 受试物剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | GSH-PX(活力单位数) | P值 |
| 对照组 | 0 | 12 | 29.6±0.7 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 30.0±0.9 | 0.2946 |
| 中剂量组 | 0.30 | 12 | 32.5±1.4*** | 3.505×10-6 |
| 高剂量组 | 0.90 | 12 | 33.5±0.6*** | 2.051×10-12 |
***：与对照组有极显著差异(P＜0.001)
表4表明，经口给予老龄小鼠不同剂量受试物59天后，与空白对照组相比，中、高剂量组小鼠全血谷胱甘肽过氧化酶活力分别提高10％(P＜0.001)、和13％(P＜0.001)。
5、全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠体重的影响
表5全鹿骨粉胶囊对老龄小鼠体重的影响(X±SD)
| 分组 | 受试物剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 实验前体重(克) | P值 | 实验后体重(克) | P值 |
| 对照组 | 0 | 12 | 45.8±2.2 | - | 47.8±2.4 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 45.1±2.0 | 0.4365 | 46.8±1.5 | 0.2753 |
| 中剂量组 | 0.30 | 12 | 44.4±3.0 | 0.1980 | 45.9±2.9 | 0.1046 |
| 高剂量组 | 0.90 | 12 | 44.8±3.0 | 0.3653 | 46.7±2.5 | 0.3002 |
表5表明，经口给予老龄小鼠不同剂量受试物59天后，与空白对照组相比，低、中、高剂量组体重均无显著差异(P＞0.05)。
6、对果蝇寿命的影响
表6全鹿骨粉胶囊对果蝇寿命的影响(X±SD)
| 组别受试物浓度％ | 性别 | 样本数 | 平均寿命(d) | P值 | 最高寿命(d) | P值 |
| 0 | ♀ | 200 | 66±10 | - | 75±2 | - |
| ♂ | 200 | 59±13 | - | 74±1 | - | |
| 0.02 | ♀ | 200 | 64±12 | 0.1645 | 78±6** | 0.0261 |
| ♂ | 200 | 60±12 | 0.3420 | 78±6** | 0.0028 | |
| 0.06 | ♀ | 200 | 66±15 | 0.9266 | 88±2*** | 1.311E-24 |
| ♂ | 200 | 59±14 | 0.7876 | 75±3* | 0.0423 | |
| 0.18 | ♀ | 200 | 64±15 | 0.2325 | 90±6*** | 1.641E-10 |
| ♂ | 200 | 61±12 | 0.0933 | 78±5** | 0.0026 | |
| 0.54 | ♀ | 200 | 68±15 | 0.0746 | 94±2*** | 1.223E-26 |
| ♂ | 200 | 60±13 | 0.6105 | 76±4** | 0.0050 |
*：与对照组比较有显著差异 (P＜0.05)
**：与对照组比较有非常显著差异 (P＜0.01)
***：与对照组比较有极显著差异 (P＜0.001)
表7全鹿骨粉胶囊对果蝇寿命的影响
| 组别受试物浓度％ | 性别 | 样本数 | 每管平均体重(mg) | P值 | 半数死亡时间(d) |
| 0 | ♀ | 200 | 18.5±0.8 | - | 68 |
| ♂ | 200 | 12.4±0.4 | - | 65 | |
| 0.02 | ♀ | 200 | 18.5±0.7 | 0.9290 | 65 |
| ♂ | 200 | 12.3±0.5 | 0.9244 | 63 | |
| 0.06 | ♀ | 200 | 18.2±0.9 | 0.4111 | 68 |
| ♂ | 200 | 12.5±0.5 | 0.5273 | 65 | |
| 0.18 | ♀ | 200 | 18.3±0.7 | 0.6305 | 66 |
| ♂ | 200 | 12.3±0.5 | 0.6949 | 64 |
| 0.54 | ♀ | 200 | 18.4±0.5 | 0.7310 | 69 |
| ♂ | 200 | 12.6±0.6 | 0.3637 | 62 |
表6、表7表明，与空白对照组相比(受试物浓度0％)，受试物浓度0.02％的雌性果蝇最高寿命延长4％(P＜0.05)，雄性果蝇最高寿命延长5％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.06％的雌性果蝇最高寿命延长17％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长1％(P＜0.05)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.18％的雄性果蝇最高寿命延长20％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长5％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.54％的雌性果蝇最高寿命延长25％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长3％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。与空白对照组体重均无显著差异(P＞0.05)。
结果总结
经口给予老龄小鼠不同剂量的全鹿骨粉胶囊59天，与空白对照组相比：低剂量组(0.15g/日/kg.bw)心肌脂褐素活力降低18％(P＜0.01)，血清SOD活力提高16％(P＜0.05)，血清脂质过氧化物含量和全血谷胱甘肽酶活力无显著差异(P＞0.05)。中剂量组(0.30g/日/kg.bw)心肌脂褐素含量降低20％(P＜0.001)，血清SOD活力提高11％(P＜0.05)，全血谷胱甘肽过氧化物酶活力单位提高10％(P＜0.001)，血清脂质过氧化物含量无显著差异(P＞0.05)。高剂量组(0.90g/日/kg.bw)心肌脂褐素含量降低27％(P＜0.001)，全血谷胱甘肽过氧化物酶活力单位数提高13％(P＜0.001)，血清脂质过氧化物含量和血清SOD活力无显著差异(P＞0.05)。
与空白对照组相比(受试物浓度0％)，受试物浓度0.02％的雌性果蝇最高寿命延长4％(P＜0.05)，雄性果蝇最高寿命延长5％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.06％的雌性果蝇最高寿命延长17％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长1％(P＜0.05)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.18％的雄性果蝇最高寿命延长20％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长5％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。受试物浓度0.54％的雌性果蝇最高寿命延长25％(P＜0.001)，雄性果蝇最高寿命延长3％(P＜0.01)，其它指标均无显著差异(P＞0.05)。与空白对照组体重均无显著差异(P＞0.05)。
试验二：免疫调节作用实验报告
一、材料与方法
1、样品描述：实施例2的全鹿骨粉胶囊为胶囊制品，0.45g/粒。内容物为黄色粉末。保存期18个月。
2、实验动物
本实验选用中国医学院动物中心繁育场提供的昆明1月龄雌性二级小鼠，体重18-22g〔合格证：医动字第01-3001号〕按体重随机分为4组，组间体重经T检验无显著差异(P＞0.05)。
3、剂量选择
受试物是人体推荐就1.8g/日/60kg体重的定型产品。小鼠的等效剂量相当于人体推荐剂量的10倍。分别以人体推荐剂量的5倍、10倍和30倍作为低(0.15g/日/kg体重)、中(0.3g/日/kg体重)、高(0.9g/日/kg体重)剂量组。采取灌胃法，每日灌胃一次，对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给予受试物30天后，测定各项指标。
4、仪器与试剂
752分光光度计，AE100电子天平，电热三用水箱，隔水式恒温培养箱，螺旋测微器，KA-1000型台式离心机，80-2台式离心机，玻片架，二氧化碳培养箱，超净工作台，24孔培养板，显微镜
绵羊红细胞(SRBC)，Hank’s液，印度墨汁，碳酸钠，豚鼠血清，生理盐水，SA缓冲液，RPM1640培养液，小牛血清，2-巯基乙醇(2-ME)，青霉素，链霉素，刀豆蛋白A(ConA)，盐酸，异丙醇，MTT，PBS缓冲液(PH7.2-7.4)，鸡红细胞，丙酮，甲醇，Giemsa染液
5、检测方法
5.1胸腺/体重、脾脏/体重
5.2ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验(MTT法)
小鼠无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，轻轻研磨成单个细胞悬液。经200目筛过滤，用Hank’s液洗涤3次，每次离心10min(1000r/min)。将脾细胞悬液浮于2mL的1640完全培养液中，镜检计数，调整细胞浓度为2×106个/mL。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，其中一孔加0.05mL(0.1mg/mL)ConA液，置于二氧化碳培养箱中37℃培养72h，二氧化碳浓度为5％。培养结束前4h加入MTT(5mg/mL)。培养结果后加入1mL酸性异丙醇中，吹打混匀，570nm处测量光密度值。用加ConA孔的光密度值减去不加ConA孔的光密度值代表淋巴细胞的增殖能力。
5.3迟发型变态反应(DTH)(足趾增厚法)
腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。免疫4d后，用螺旋测微器测量左后足趾厚度，然后在测量部位皮下注射0.2mL2％SRBC，24h后测量左后足趾厚度。同一部位测量三次，取平均值。以攻击前后足趾厚度的差值来表示DTH的程度。
5.4抗体生产细胞(PFC)检测
腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5d后，取小鼠脾脏制成细胞浓度为5×106个/mL的脾细胞液。溶解琼脂糖制成1％的溶液，于48℃水浴保温，与等量2倍浓度的Hank’s液混合，分装至小试管中。每管0.5mL，加入0.05mL10％SRBC和0.01mL脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒在玻片上。于37℃恒温箱中温育1h，将补体加在玻片槽中，再温育1.5h。计数空斑。
5.5血清溶血素的测定
腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5天后，摘眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，收集血清。小鼠血清用SA液稀释400倍，依次加入稀释的小鼠血清1mL、10％(v/v)的SRBC0.5mL、补体(用SA液1∶10稀释)1mL。另设不加血清的对照管(SA液代替)。置37℃水浴20min后冰水浴终止反应。2000r/min离心10min。取上清液1mL，加入试剂后，540nm波长处测定光密度值。实验结果以半数溶血值(HC50)表示。
5.6小鼠碳廓清实验
对每只小鼠尾静脉注射稀释4倍的印度墨汁，0.1mL/10g体重。待墨汁注入后立即计时。分别于注入墨汁后1、10min取血0.02mL加至2ml碳酸钠溶液中，600nm波长处测定光密度值，以碳酸钠溶液作对照。另取肝脏和脾脏称重。以吞噬指数来表示巨噬细胞吞噬功能。
5.7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验
小鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死动物，剪开腹壁皮肤，腹腔注入生理盐水2mL。按揉腹腔，吸出腹腔洗液1mL，分别滴于2张载玻片上，37℃恒温箱中温育30min然后经1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％(v/v)Giesma-磷酸缓冲液染色，再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数巨噬细胞，每张片计数100个。以吞噬百分率和吞噬指数表示小鼠巨噬细胞的吞噬能力。
6、实验数据用方差分析进行统计二、结果
8、对正常小鼠胸腺/体重、脾脏/体重及体重的影响
表8全鹿骨粉胶囊对正常小鼠胸腺/体重比值的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 胸腺/体重比值(mg/g) | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 2.36±0.58 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 2.08±0.29 | 0.1604 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 2.37±0.42 | 0.9562 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 2.19±0.63 | 0.5018 |
由表8可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，各剂量组胸腺/体重比值均无显著差异(P＜0.05)。
表9全鹿骨胶囊对正常小鼠胸腺/体重比值的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 胸腺/体重比值(mg/g) | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 5.36±0.58 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 4.80±0.29 | 0.3652 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 4.82±0.42 | 0.3434 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 4.50±0.63 | 0.1105 |
由表9可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，各剂量组胸腺/体重比值均无显著差异(P＞0.05)。
表10全鹿骨粉胶囊对正常小鼠胸腺/体重比值的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 实验前体重(g) | P值 | 实验后体重(g) | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 22.4±1.4 | - | 38.5±3.4 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 22.0±1.4 | 0.5097 | 37.5±3.8 | 0.4881 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 22.2±1.4 | 0.7638 | 38.3±2.1 | 0.8246 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 22.3±1.4 | 0.8256 | 38.5±4.2 | 0.9916 |
由表10可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，各剂量组体重均无显著差异(P＞0.05)。
2、对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化的影响
表11全鹿骨粉胶囊对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 淋巴细胞增殖能力 | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 0.055±0.033 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 0.044±0.027 | 0.3933 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 0.069±0.051 | 0.4338 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 0.079±0.078 | 0.3352 |
由表11可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，各剂量组胸腺/体重比值均无显著差异(P＜0.05)。
3、对正常小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
表12全鹿骨粉胶囊对正常小鼠迟发型变态反应的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 淋巴细胞增殖能力 | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 0.78±0.20 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 1.03±0.25* | 0.0137 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 0.90±0.15 | 0.1205 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 0.92±0.14 | 0.0569 |
*：与对照组比较有显著差异(P＜0.05)。
由表12可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，低剂量组的足跖肿胀提高32％(P＜0.05)。
4、对正常小鼠抗体生成细胞的影响影响
表13全鹿骨粉胶囊对正常小鼠PFC的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | PFC | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 5.38±0.30 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 5.37±0.32 | 0.9335 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 5.42±0.20 | 0.7233 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 5.39±0.24 | 0.9147 |
由表13可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，各剂量组的PFC数量均无显著差异(P＞0.05)。
7、对正常小鼠血清溶血素的影响
表14全鹿骨粉胶囊对正常小鼠血清溶血素的影响
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | HC50 | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 10 | 111.7±85.8 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 10 | 149.1±82.1 | 0.3321 |
| 中剂量组 | 0.3 | 10 | 150.1±62.5 | 0.2679 |
| 高剂量组 | 0.9 | 10 | 185.4±68.0* | 0.0472 |
*：与对照组比较有显著差异(P＜0.05)
由表14可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，高剂量组的HC50提高66％(P＜0.05)。
8、对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
表15全鹿骨粉胶囊对正常小鼠的碳廓清的影响(X±SD)
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | a | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 10 | 6.25±1.15 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 10 | 7.29±0.64* | 0.0229 |
| 中剂量组 | 0.3 | 10 | 7.35±0.63* | 0.0161 |
| 高剂量组 | 0.9 | 10 | 7.17±0.55* | 0.0340 |
*：与对照组比较有显著差异(P＜0.05)
由表15可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，低、中、高剂量组的碳廓清指数提高17％(P＜0.05)、18％(P＜0.05)、15％(P＜0.05)。
表16全鹿骨粉胶囊对正常小鼠的巨噬细胞吞噬率的影响
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 吞噬率(％) | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 20.8±15.2 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 23.7±19.2 | 0.6844 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 44.7±18.3** | 0.0021 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 33.6±12.2* | 0.0336 |
*：与对照组比较有显著差异(P＜0.05)
**：与对照组比较有非常显著差异(P＜0.01)
由表16可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，中、高剂量组的吞噬率分别提高115％(P＜0.01)、62％(P＜0.05)。
表17全鹿骨粉胶囊对正常小鼠的巨噬细胞吞噬指数的影响
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 吞噬率(％) | P值 |
| 空白对照组 | 0 | 12 | 0.40±0.35 | - |
| 低剂量组 | 0.15 | 12 | 0.48±0.46 | 0.6593 |
| 中剂量组 | 0.3 | 12 | 0.92±0.48** | 0.0063 |
| 高剂量组 | 0.9 | 12 | 0.68±0.32 | 0.0518 |
**：与对照组比较有非常显著差异(P＜0.01)
由表17可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组比较，中剂量组的吞噬率指数提高130％(P＜0.01)。
结果总结
经口给予小鼠不同剂量的全鹿骨粉胶囊30天后，与对照组比较，低剂量组(0.15g/kg.bw)的足跖肿胀提高32％(P＜0.05)，碳廓清指数提高17％(P＜0.05)；实验前体重与给予受试物30天后体重、胸腺/体重比值、淋巴细胞增殖能力、抗体生成细胞数量、HC50、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均无显著差异(P＞0.05)中剂量组(0.3g/kg.bw)的碳廓清指数提高18％(P＜0.05)，巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别提高115％(P＜0.01)、130％(P＜0.01)；实验前体重与给予受试物30天后体重、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、淋巴细胞增殖能力、足跖肿胀度、抗体生成细胞数量、HC50均无显著差异(P＞0.05)。高剂量组(0.9g/kg.bw)d HC50提高66％(P＜0.05)，碳廓清指数提高15％(P＜0.05)，巨噬细胞吞噬率提高62％(P＜0.05)，实验前体重与受试物30天后体重胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、淋巴细胞增殖能力、足跖肿胀度、抗体生成细胞数量、巨噬细胞指数均无显著差异(P＞0.05)。
由试验1和2的结果可知，本发明的药物具有显著的延缓衰老和免疫调节作用。
Claims (10)
1、一种具有延缓衰老和免疫调节作用的药物，其特征在于它含有全鹿骨粉和任选的其它成分。
2、权利要求1的药物，其中所述全鹿骨粉是由去肉鹿骨煮沸后，晾干，再烘干粉碎至所需粒度所得到的产物。
3、权利要求1的药物，其中所述其它成分选自酸枣仁、枸杞、冬虫夏草、人参、当归、白芍、沙参、菟丝子、淫羊藿、女贞子、山茱萸、刺五加、甘草、白术、黄芪、补骨脂、麦冬、茯苓、杏仁、黄连、黄芩、鹿茸、党参中的一种或多种。
4、一种具有延缓衰老和免疫调节作用的药物，其特征在于它包括下述原料：
150-700重量份全鹿骨粉
25-120重量份枸杞提取物
10-50重量份酸枣仁提取物。
5、根据权利要求4的药物，其中全鹿骨粉是由去肉鹿骨煮沸后，晾干，再烘干粉碎至所需粒度所得到的产物。
6、根据权利要求4的药物，其中全鹿骨粉是由去肉鹿骨用碱水煮沸后，晾干，再用盐酸中和处理，烘干粉碎至所需粒度所得到的产物。
7、根据权利要求4的药物，其中枸杞提取物是枸杞用水或醇提取，提取液再进行干燥所得的产物。
8、根据权利要求4的药物，其中酸枣仁提取物是酸枣仁用水或醇提取，提取液再进行干燥所获得的的产物。
9、制备权利要求4的药物的方法，包括将所述原料按所述配比均匀混合，再装入胶囊。
10、权利要求1-8中任一项的药物在预防和治疗早衰、肿瘤、免疫力低下和免疫性疾病中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN01123954A CN1335161A (zh) | 2001-08-08 | 2001-08-08 | 全鹿骨粉胶囊 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN01123954A CN1335161A (zh) | 2001-08-08 | 2001-08-08 | 全鹿骨粉胶囊 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1335161A true CN1335161A (zh) | 2002-02-13 |
Family
ID=4665389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN01123954A Pending CN1335161A (zh) | 2001-08-08 | 2001-08-08 | 全鹿骨粉胶囊 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1335161A (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100381127C (zh) * | 2006-06-21 | 2008-04-16 | 山东师范大学 | 一种鹿髓液及其应用 |
| CN100389679C (zh) * | 2006-06-21 | 2008-05-28 | 山东师范大学 | 一种鹿骨颗粒剂 |
| CN100396296C (zh) * | 2006-10-09 | 2008-06-25 | 内蒙古健元鹿业有限责任公司 | 具有补钙、健脾、益肾和增强机体免疫力作用的保健品胶囊 |
| CN103349711A (zh) * | 2013-07-29 | 2013-10-16 | 天津尖峰弗兰德医药科技发展有限公司 | 含有白藜芦醇的抗衰老组合物及其制备方法 |
| CN103893543A (zh) * | 2012-12-27 | 2014-07-02 | 师秀玉 | 参茸抗痨散 |
| CN105412903A (zh) * | 2015-12-03 | 2016-03-23 | 东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院 | 一种治疗骨质疏松的药物及其制备工艺 |
| CN107126512A (zh) * | 2016-02-24 | 2017-09-05 | 天津禾盛医药技术开发有限公司 | 一种辅助治疗乳腺癌的中药丸及其制备方法 |
| CN110974903A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-04-10 | 重庆希尔安药业有限公司 | 一种有助于增强免疫力的组合物及其制备方法 |
-
2001
- 2001-08-08 CN CN01123954A patent/CN1335161A/zh active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100381127C (zh) * | 2006-06-21 | 2008-04-16 | 山东师范大学 | 一种鹿髓液及其应用 |
| CN100389679C (zh) * | 2006-06-21 | 2008-05-28 | 山东师范大学 | 一种鹿骨颗粒剂 |
| CN100396296C (zh) * | 2006-10-09 | 2008-06-25 | 内蒙古健元鹿业有限责任公司 | 具有补钙、健脾、益肾和增强机体免疫力作用的保健品胶囊 |
| CN103893543A (zh) * | 2012-12-27 | 2014-07-02 | 师秀玉 | 参茸抗痨散 |
| CN103349711A (zh) * | 2013-07-29 | 2013-10-16 | 天津尖峰弗兰德医药科技发展有限公司 | 含有白藜芦醇的抗衰老组合物及其制备方法 |
| CN103349711B (zh) * | 2013-07-29 | 2014-10-29 | 天津尖峰弗兰德医药科技发展有限公司 | 含有白藜芦醇的抗衰老组合物及其制备方法 |
| CN105412903A (zh) * | 2015-12-03 | 2016-03-23 | 东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院 | 一种治疗骨质疏松的药物及其制备工艺 |
| CN107126512A (zh) * | 2016-02-24 | 2017-09-05 | 天津禾盛医药技术开发有限公司 | 一种辅助治疗乳腺癌的中药丸及其制备方法 |
| CN110974903A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-04-10 | 重庆希尔安药业有限公司 | 一种有助于增强免疫力的组合物及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1390594A (zh) | 改善血液循环的混合物 | |
| CN1955280A (zh) | 潜能再生细胞及其培养方法 | |
| CN1843377A (zh) | 一种羊胎素及其制备方法 | |
| CN1706280A (zh) | 一种能增强免疫力的保健食品及其制备方法 | |
| CN1233387C (zh) | 一种治疗失眠症的中药复方制剂及其制备方法 | |
| CN1335161A (zh) | 全鹿骨粉胶囊 | |
| CN1698878A (zh) | 一种补肾的药物组合物及其制备方法和新用途 | |
| CN101036716A (zh) | 一种用于治疗妇科疾病的中药组合物的制备方法 | |
| CN1559495A (zh) | 鹿胎颗粒中药制剂及生产工艺 | |
| CN101036722A (zh) | 一种缓解疲劳、改善男性更年期综合征的保健食品及制备 | |
| CN1535700A (zh) | 一种补血药物组合物 | |
| CN1562337A (zh) | 治疗肾阳虚的中药及其制备方法 | |
| CN1679648A (zh) | 脉络宁注射制剂及其制备方法和它的质量控制方法 | |
| CN1593482A (zh) | 一种治疗中老年记忆力减退的药物及其制备方法 | |
| CN1194743C (zh) | 一种治疗类风湿性关节炎的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN1116891C (zh) | 一种治疗乙型肝炎的药物及其制备方法 | |
| CN100336897C (zh) | 营养型松年酒及其配制方法 | |
| CN1184229C (zh) | 呋甾皂甙的类似物、分离方法和用途 | |
| CN1562295A (zh) | 一种具有延年益寿、调节内分泌作用的中药组合物 | |
| CN1730083A (zh) | 元合片及其制备方法 | |
| CN1457852A (zh) | 一种治疗跌打损伤、胸胁疼痛的中药组合物及其制备方法 | |
| CN1626103A (zh) | 一种含三七总皂苷和淫羊藿苷的药物组合物及其用途 | |
| CN1562144A (zh) | 治疗肠易激综合症的中药组合物及其制备方法 | |
| CN1788775A (zh) | 一种提高免疫力的中药组合物及制备方法和质量控制方法 | |
| CN1126616A (zh) | 含蜗牛、甲鱼等生物制品及中药制剂的口服液及其制法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |