CN1267120C - 一种鱼腥草冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鱼腥草冻干粉针剂及其制备方法，其特征在于从中药鱼腥草中得到鱼腥草挥发油为活性成分，经2-羟丙基-β-环糊精包合，提高了鱼腥草挥发油的稳定性、溶解度、溶出度、生物利用度，与药用辅料混合，制备成冻干粉针剂。药理实验结果表明，本发明的鱼腥草挥发油冻干粉针剂，具有更强的药理作用。
Description
所属技术领域
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种鱼腥草冻干粉针剂及其制备方法。
技术背景
鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜Houttuyniacordata Thunb的全草，始载于《名医别录》。味辛、性凉，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋等功效。因具有抗菌、抗病毒、抗过敏、抗肿瘤、抗炎止痛、增强机体免疫功能、抗钩端螺旋体、利尿等作用而广泛应用于临床，现代药理研究表明，鱼腥草的作用有：1.呼吸系统疾病应用；2.消化系统疾病应用；3.泌尿系统疾病应用；4.妇科疾病应用；5.五官科疾病应用；6.肿瘤疾病应用；7其他疾病的应用，如水痘、带状疱疹、腮腺炎、银屑病。
鱼腥草有效成分主要为挥发油中的鱼腥草素，其易于聚合失效[上海药品检验所.鱼腥草有效成分癸酰乙醛分析的初步研究.新医药杂志，1973，(8)：33.]，常被制成亚硫酸钠加成物，实验表明，鱼腥草素水溶液易混浊，甚至出现油状物，显示其在水中溶解性能不佳及不稳定，又由于该药具有强烈鱼腥气味，使其注射液制剂和应用受到一定限制[刘启泰，秀绍宗，赵胜利，等.鱼腥草注射液质量的研究.中草药通讯，1979，(11)23.]。近年来报道，药剂学上新型辅料2-羟丙基-β-环糊精能与多种化合物形成包合物，可增强药物的稳定性，提高溶解度及溶出度，降低药物挥发性，掩盖不良气味。随着制剂研究的深入，β-环糊精本身固有的水溶解度低、毒性大等缺点和不足显示出来，2-羟丙基-β-环糊精是β-环糊精经过人工合成的衍生物，与β-环糊精比较，2-羟丙基-β-环糊精的水溶性显著提高，热稳定性好，溶血作用显著降低，2-羟丙基-β-环糊精的毒性与葡萄糖相近[国外医药—合成药、生化药、制剂分册，1996第17卷第2期]。因此，应用2-羟丙基-β-环糊精对鱼腥草提取物进行包合比用β-环糊精包合具有显著的实际意义。
现在临床广泛应用的鱼腥草制剂包括鱼腥草注射液和与鱼腥草素钠制剂，前者是以鱼腥草提取的挥发油为制剂原料制备成的注射液，因为鱼腥草挥发油的性质，使其制剂经常出现浑浊、出现油滴等情况，使其质量和药理药效大大降低；后者属于合成类化学药品，临床中常常出现鱼腥草素钠不稳定导致的不良反应，给患者带来巨大痛苦；专利申请号为96117459“一种鱼腥草注射液及其制备方法”的专利采用水蒸气蒸馏法提取鱼腥草有效部位，制备成注射液，从提取工艺上本发明的新颖性较差，从制剂上，本发明制备成注射液，同样具有制剂质量不稳定和药理药效降低的缺点。
发明内容
基于上述原因，本发明采用超临界提取法从鱼腥草中提取纯化有效部位，最大程度的提高了有效成分的含量，再用2-羟丙基-β-环糊精与提取物按照特定比例进行包合，使得有效成分在包合物中含量达到最大，同时也使挥发油成分提取物更加趋于稳定，最后与药用辅料混合制备成冻干粉针剂。本发明的鱼腥草冻干粉针剂具有很好的稳定性、溶解度、溶出度、生物利用度，与同类品种比较具有更好的药理作用。
本发明通过以下实验方案实现的。
一.工艺制法
(1)取鱼腥草粉碎，过30-50目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为15-25Mpa，萃取温度为30℃-50℃，流量为50-60Kg/h，解析釜1、2的压力为3-5Mpa，解析温度为20℃-30℃，萃取60-100分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶4-10的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间40-80分钟，取出冷却20-24小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥36-48小时，得到鱼腥草挥发油包合物；
(2)本发明的制剂的处方为：
鱼腥草挥发油包合物为10-30重量份，药用辅料为70-90重量份；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂。
二.检测分析
采用气相色谱法进行检测分析
1.实验药物：本发明鱼腥草冻干粉针剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)市售鱼腥草注射液(正大青春宝药业有限公司制药分公司生产，北京白塔寺医药公司提供)
2.实验方法：将本发明冻干粉针剂用注射用水溶解成与市售鱼腥草注射液密度相同的溶液，按照标准号为WS3-B-3264-98鱼腥草注射液中的检测分析项进行检测分析。
3.实验结果：按照上述方法进行检测分析，计算结果见表1：
表1各组制剂的含量比较
| 组别 | 市售鱼腥草注射液 | 本发明冻干粉针剂 |
| 甲基正壬酮(ug/ml) | 0.93 | 1.15 |
结论：通过上述检测分析实验我们可以得知本发明鱼腥草冻干粉针剂的有效成分含量提高，充分说明本发明的工艺具有实际意义。
三.稳定性实验
(一)市售鱼腥草注射液与本发明鱼腥草冻干粉针剂比较
1.实验药物：本发明鱼腥草冻干粉针剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)市售鱼腥草注射液(正大青春宝药业有限公司制药分公司生产，北京白塔寺医药公司提供)
2.实验方法：采用加速实验方法进行稳定性实验，将市售鱼腥草注射液和本发明冻干粉针剂放置在室温37℃，相对湿度为75％的条件保存，每月进行一次检测分析，连续3个月。
3.实验结果见表2
表2各组制剂的含量变化
| 组别 | 市售鱼腥草注射液 | 本发明冻干粉针剂 |
| 1个月甲基正壬酮(ug/ml) | 0.95 | 1.16 |
| 2个月甲基正壬酮(ug/ml | 0.81 | 1.13 |
| 3个月甲基正壬酮(ug/ml | 0.58 | 1.09 |
结论：通过上述稳定性实验我们可以观察到本发明的鱼腥草冻干粉针剂的含量在3个月内变化较小，市售鱼腥草注射液的的含量变化较大，充分说明本发明鱼腥草粉针剂稳定性较好。
(二)β-环糊精包合的鱼腥草冻干粉针剂与本发明鱼腥草冻干粉针剂稳定性比较
1.实验药物：本发明鱼腥草冻干粉针剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)β-环糊精包合的鱼腥草冻干粉针剂(按照本发明工艺制法的要求，用β-环糊精包合鱼腥草提取物后制备成冻干粉针剂，进行实验研究。)
2.实验方法：同上。
3.实验结果：见表3
表3各组制剂的含量变化
| 组别 | β-环糊精包合鱼腥草冻干粉针剂 | 本发明冻干粉针剂 |
| 1个月甲基正壬酮(ug/ml) | 0.89 | 1.21 |
| 2个月甲基正壬酮(ug/ml | 0.74 | 1.15 |
| 3个月甲基正壬酮(ug/ml | 0.62 | 1.11 |
结论：通过上述稳定性实验我们可以观察到本发明的鱼腥草冻干粉针剂的含量在3个月内变化较小，β-环糊精包合的鱼腥草冻干粉针剂的含量变化较大，充分说明本发明鱼腥草粉针剂稳定性较好。
四.鱼腥草提取物用β-环糊精包合和2-羟丙基-β-环糊精包合的包和率和包结率的比较。
实验方法：(1)取本发明工艺的2-羟丙基-β-环糊精包合的鱼腥草包合物置圆底烧瓶中，加入蒸馏水150ml及少许沸石蒸馏4h，用挥发油测定器提取挥发油，待冷却30min后测定挥发油体积，进行三次实验。(注：经测定，1ml混合挥发油重0.9218g)
(2)取本发明工艺的鱼腥草提取物，按照本发明包合工艺将其与β-环糊精进行包合后，按照方法(1)进行实验。(注：经测定，1ml混合挥发油重0.9218g)
包结率＝(回收的挥发油体积/加入的挥发油体积×空白回收率)×100％
[空白回收率分别(1)为91.2％(2)为91.0％]
包合率＝〔包合物的重量/(β-环糊精重量或者2-羟丙基-β-环糊精重量+加入挥发油的重量))×100％。根据公式计算，见表4
表4包合物包和率和包结率的比较
| 组别 | 鱼腥草提取物(V/ml) | β-环糊精重量或者2-羟丙基-β-环糊精重量(mg) | 包合物量(mg) | 包和率(％) | 回收挥发油量(V/ml) | 包结率(％) |
| 2-羟丙基-β-环糊精包合 | 1.000 | 8.055 | 7.332 | 81.7 | 0.6872 | 75.4 |
| β-环糊精 | 1.000 | 8.008 | 6.091 | 68.2 | 0.5823 | 64.0 |
| 包合 |
结论：本发明工艺制备的2-羟丙基-β-环糊精包合物与传统的包合物β-环糊精比较，可以得到包合物的包和率和包结率均有明显提高，充分说明本发明工艺具有实际意义。
五.药理实施例
抑菌作用研究
1.实验药物：本发明鱼腥草冻干粉针剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)市售鱼腥草注射液(正大青春宝药业有限公司制药分公司生产，北京白塔寺医药公司提供)
2.实验菌种：金黄葡萄球菌(Staphylococcusaureus)
大肠杆菌(Escherichiacoli)
枯草杆菌(Bacillussubitilis)
青霉菌(Penicilliumsp)
黑曲霉(Aspergillusniger)
啤酒酵母菌(Saccaromycescerevisiae)
上述菌种均由北京大学微生物教研室提供
4.实验方法：滤纸片法测定抑菌作用：取直径6m m的滤纸片，放入药物中浸泡16h，120℃下湿热灭菌备用。将上述供试菌液各取0.5ml与相应固体培养基，在超净工作台内制成含菌平板，取含浸出汁的滤纸片贴在含菌平板上，每皿贴5片，每菌做3次重复，细菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培养箱内培养48h，测定24h、48h后滤纸片的抑菌圈大小，比较抑菌效果见表5：
最低抑菌浓度(Mic)测定：配制上述菌种分别所需的培养基，准确量取9ml分装试管，准确加入8％、4％、2％、1％、0.5％、0.25％药物系列浓度溶液1ml，配成系列培养基，120℃高压湿热灭菌，冷却后，每系列接种一个菌种，每系列做3次重复，细菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培养箱内培养48h，观察菌种生长情况，以完全没有菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度，见表6：
表5对供试菌种的抑制效果
| 供试菌种 | 市售鱼腥草注射液 | 本发明冻干粉针剂 |
| 抑菌直径mm24h 48h | 抑菌直径mm24h 48h | |
| 金黄葡萄球菌 | 9.0 9.0 | 9.5 9.5 |
| 大肠杆菌 | 10.0 10.3 | 10.9 11.3 |
| 枯草杆菌 | 5.8 5.8 | 6.3 6.3 |
| 青霉菌 | 6.5 5.7 | 7.2 6.9 |
| 黑曲霉菌 | 5.7 3.6 | 6.5 5.2 |
| 酵母菌 | 7.0 6.0 | 7.8 7.3 |
表6最低抑制浓度
| 供试菌种 | 市售鱼腥草注射液 | 本发明冻干粉针剂 |
| 最低抑制浓度 | 最低抑制浓度 | |
| 金黄葡萄球菌 | 0.5％ | 0.25％ |
| 大肠杆菌 | 1％ | 0.5％ |
| 枯草杆菌 | 0.5％ | 0.25％ |
| 青霉菌 | 4％ | 2％ |
| 黑曲霉菌 | 8％ | 4％ |
| 酵母菌 | 8％ | 4％ |
结论：通过上述药理实验表明，本发明的鱼腥草冻干粉针剂与市售鱼腥草注射液比较具有更好的药理作用。
六.制备实施例
实施例1
(1)取鱼腥草10000克粉碎，过30目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为15Mpa，萃取温度为30℃，流量为50Kg/h，解析釜1、2的压力为3Mpa，解析温度为20℃，萃取60分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以20ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶4的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间40分钟，取出冷却20小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥36小时，得到鱼腥草挥发油包合物1099.8mg；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为1克，药用辅料甘露醇为9克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂100支。
实施例2
(1)取鱼腥草粉碎100公斤，过50目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为25Mpa，萃取温度为50℃，流量为60Kg/h，解析釜1、2的压力为5Mpa，解析温度为30℃，萃取100分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以30ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间80分钟，取出冷却24小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥48小时，得到鱼腥草挥发油包合物11.732克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为10克，药用辅料为蔗糖90克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
实施例3
(1)取鱼腥草100公斤粉碎，过40目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为18Mpa，萃取温度为35℃，流量为52Kg/h，解析釜1、2的压力为4Mpa，解析温度为25℃，萃取65分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以25ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶5的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间50分钟，取出冷却22小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥40小时，得到鱼腥草挥发油包合物11.389克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为11克，药用辅料甘露醇为89克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
实施例4
(1)取鱼腥草200公斤粉碎，过40目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为20Mpa，萃取温度为40℃，流量为55Kg/h，解析釜1、2的压力为4Mpa，解析温度为25℃，萃取80分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以26ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶6的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间55分钟，取出冷却23小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥42小时，得到鱼腥草挥发油包合物23.482克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为20克，药用辅料蔗糖为80克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
实施例5
(1)取鱼腥草300公斤粉碎，过45目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为25Mpa，萃取温度为45℃，流量为55Kg/h，解析釜1、2的压力为4Mpa，解析温度为28℃，萃取75分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以28ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶8的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间70分钟，取出冷却24小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥36小时，得到鱼腥草挥发油包合物35.149克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为30克，药用辅料乳糖为70克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
实施例6
(1)取鱼腥草200公斤粉碎，过45目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为20Mpa，萃取温度为40℃，流量为55Kg/h，解析釜1、2的压力为4Mpa，解析温度为25℃，萃取85分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以25ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶9的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间75分钟，取出冷却20小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥48小时，得到鱼腥草挥发油包合物19.856克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为19克，药用辅料蔗糖为81克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
实施例7
(1)取鱼腥草100公斤粉碎，过40目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为20Mpa，萃取温度为45℃，流量为60Kg/h，解析釜1、2的压力为4Mpa，解析温度为25℃，萃取95分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以25ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温，按照鱼腥草提取物：2-羟丙基-β-环糊精＝1∶8的比例(v/g)加入鱼腥草提取物，搅拌时间70分钟，取出冷却22小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥46小时，得到鱼腥草挥发油包合物12.489克；
(2)本发明的制剂处方为：
鱼腥草挥发油包合物为12克，药用辅料甘露醇为88克；
(3)按照本发明制剂处方取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂1000支。
Claims (3)
1.一种鱼腥草冻干粉针剂，其特征在于其活性成分为从中药鱼腥草提取的挥发油，用2-羟丙基-β-环糊精进行包合，再与药用辅料混合制备成冻干粉针剂，制剂中鱼腥草挥发油包合物为10-30重量份，药用辅料为70-90重量份。
2.根据权利要求1所述的一种鱼腥草冻干粉针剂的制备方法，其特征包括以下步骤：
(1)取鱼腥草粉碎，过30-50目筛，放入CO2超临界提取器中的萃取釜中，调整萃取釜压力为15-25MPa，萃取温度为30℃-50℃，流量为50-60Kg/h，解析釜1、2的压力为3-5Mpa，解析温度为20℃-30℃，萃取60-100分钟，合并解析釜1、2的物料，备用；
(2)取上述解析釜1、2的物料，采用饱和水溶液法用2-羟丙基-β-环糊精进行包合：称取2-羟丙基-β-环糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加热溶解，冷至室温；按照鱼腥草提取物与2-羟丙基-β-环糊精以1∶4-10v/g的比例，加入鱼腥草提取物，搅拌时间40-80分钟，取出冷却20-24小时，离心，过滤，滤渣常温下干燥36-48小时，得到鱼腥草挥发油包合物；
(3)取鱼腥草挥发油包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的滤芯过滤，滤液注入西林瓶中，冷冻干燥，得到鱼腥草冻干粉针剂。
3.根据权利要求1，2的一种鱼腥草冻干粉针剂，所述的药用辅料为甘露醇、乳糖和蔗糖的一种。
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2004
- 2004-06-10 CN CN 200410046098 patent/CN1267120C/zh not_active Expired - Fee Related
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