CN1256975C - 一种抗病毒复方中药及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种抗病毒复方中药及其制备方法，原料包括桑白皮∶广藿香∶知母∶连翘，比例为10-20∶5-8∶6-10∶10-20。制备为取广藿香、连翘，提取其油后，加入桑白皮、知母，加8-15倍量，50-70%乙醇浸泡1.5-2.5小时后，回流提取1.5-2.5小时，滤过，在药渣中，加入7-10倍量50-70%乙醇，回流1.5-2.5小时，过滤，合并两次滤液加入水煎液，浓缩到比重1.0-1.3，待温度降至35-40℃，通过大孔树脂柱，以两个体积蒸馏水洗注，弃去，用60%-80%的乙醇洗脱，收集洗脱部分，减压回收乙醇，并浓缩成流浸膏，干燥得干粉状提取物；将广藿香油、连翘油用环糊精进行包合，加入干粉状提取物，添加辅料制成胶囊剂、片剂、冲剂、口服液。本发明治疗效果更佳，具有抗病毒解热作用。

Description

一种抗病毒复方中药及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种抗病毒复方中药制剂及其制备方法。

背景技术：

病毒性疾病在全球呈逐步上升趋势，如肝炎病毒、疱疹病毒、流感病毒、呼吸道病毒以及免役缺陷病毒(HIV)即爱滋病毒等。因此世界抗病毒药物总需求呈现所未有的坚挺。近几年世界抗病毒药物销量猛增，我国也是一样。抗病毒药物的年增长率超过10％，但其中绝大部分为合成药物，特别是西药实际治疗中，总存在着抗病毒疗效一般，副作用大等不足。而我国有着丰富的中药资源为制成中药抗病毒药物提供了保障。

发明内容：

本发明的目的旨在提供一种治疗效果更佳，具有抗病毒解热作用的抗病毒复方中药。

本发明的另一目的旨在提供抗病毒复方中药的制备方法。

本发明的目的是通过下述实现的：

本发明的原料为桑白皮、广藿香、知母、连翘，各组分的重量配比为桑白皮∶广藿香∶知母∶连翘＝10-20∶5-8∶6-10∶10-20。

其中各组分优选的重量配比范围为桑白皮∶广藿香∶知母∶连翘＝11-18∶5-7∶6-8∶11-18。

本发明还可加入药用辅料，可以是葡萄糖、淀粉、糊精、微晶纤维素。

所述的药用辅料，还可以是单糖浆、苯甲酸钠。

本发明的制备方法为：A、按上述重量配比取广藿香、连翘，提取广藿香油、连翘油，得到药渣和水煎液，在药渣中即在提取广藿香油、连翘油后的成分中，加入上述重量配比的桑白皮、知母的药材粗粉，加8-l5倍量，50-70％的乙醇浸泡1.5-2.5小时后，回流提取1.5-2.5小时，滤过，在药渣中，加入7-10倍量的50-70％乙醇，回流1.5-2.5小时，趁热过滤，合并两次滤液，再加入水煎液，浓缩到比重1.0-1.3，待温度降至35-40℃，通过处理好的大孔树脂柱，先以两个体积蒸馏水洗注，弃去，然后用60％-80％的乙醇洗脱，收集60％-80％的乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，并浓缩成流浸膏，喷雾或减压真空干燥得到干粉状提取物；

B、将开始收集的广藿香油、连翘油用环糊精进行包合，包合物加入A步骤中得到的干粉状提取物，混均，按药用剂型添加辅料，制成胶囊剂、片剂、冲剂、口服液。

上述制备方法中优选的方法为在A步骤中加入桑白皮、知母的药材粗粉，加10倍量，60％的乙醇浸泡2小时。

上述制备方法中优选的方法为在A步骤中回流提取1.5-2.5小时，滤过，在药渣中，加入8倍量的60％乙醇，回流2小时。

上述制备方法中所用的大孔树脂柱型号可以是D101-I、AB-8、XAD-1、HP-20。

本发明的试验数据如下：

1、抗病毒试验

(一)、抗病毒复方中药抗病毒作用的试验

1)、材料和方法

供试药品：抗病毒复方中药

阳性对照药品：抗病毒口服液(89)卫药证字z-01号，沈阳药科大学提供

2)、组织培养实验(体外法)

(1)病毒毒种为：单纯疱疹病毒(HSC-3)；流感病毒(influenza-甲WS)；新城鸡瘟病毒(2系弱毒菌)；流行性乙型脑炎病毒(京卫研-A毒株)

(2)实验方法和判断标准

●病毒空斑杯碟抑制法：用直径6cm平皿培养鸡胚单层母细胞，培养24小时后将生长良好的鸡胚单层细胞用Earles液洗一次，加入适当稀释的病毒(流感病毒用鸡胚尿素代收取尿素液作为毒种、乙脑病毒用鼠脑传代，收取鼠脑作为毒种)，37℃吸附1小时后吸出病毒液加在融化的营养琼脂上层，室温凝固后在其上放置直径为7mm的钢圈，钢圈内加入0.1ml不同稀释度的抗病毒口服液和抗病毒复方中药药液，将平皿放入3％浓度缸中37℃培养3-4天，观察结果，计量红色无空斑的抑制圈和无色的毒性圈大小，判断指标为：一般抑制圈直径减去毒性圈直径≥1cm者有效，而≤1cm者为可疑或无效。

●病毒空斑记数抑制法：同上述将生长良好的鸡胚单层细胞洗一次后，加入病毒吸附，病毒浓度应以能产生分散可数而不融合的空斑为宜，吸出病毒液后，将在不同浓度抗病毒口服液和抗病毒复方中药药液0.1ml和融化的营养琼脂上层混匀，加在细胞层上，凝后37℃培养3-4天后记数给药组和病毒组的空斑数，实验组的空斑数比对照组的空斑数减少50％的最大浓度为最小抑制浓度。

最大无效浓度/最小抑制浓度＝治疗指数。

3)、动物实验(体内法)

(1)病毒毒种为：小鼠滴鼻感染的流感病毒亚甲型FM₁鼠肺适应株；小鼠流感毒素实验用流感病毒甲型粤防74-243或甲型京防75-89毒株；流行性乙型脑炎病毒(同组织培养所用毒种)。

(2)实验方法和判断效果指标：

●流感病毒滴鼻感染小鼠实验：取流感病毒亚甲型FM₁鼠肺适应株的鼠肺毒种研究后，用含0.5％乳蛋白水解物的Earles液制成悬液，离心取上清接种鸡胚收取尿素液作为实验的毒种，实验时稀释成含3-5LD₅₀病毒量的浓度滴鼻感染14-16克重小鼠。感染前后皮下或腹腔注射抗病毒口服液和抗病毒复方中药药液共给药7次，对照组感染病毒并注射离子水，不给药。此后每天观察记录死亡动物数，且观察两周，死亡结果以统计学处理其差异有无显著性。

●流感病毒小鼠静脉注射实验，体重10-13克小鼠尾静脉注射流感病毒甲型粤防72-243或甲型京75-89毒株新鲜尿素液毒种0.8-1ml，此种大量病毒注射可使小鼠在24-72小时内由于流感病毒的毒素作用而死亡，在注射病毒前后其皮下注射抗病毒口服液和抗病毒复方中药药液各三次，观察5天，给药组死亡数与病毒对照组比较，以统计学算其差异有无显著性。

●乙型脑炎动物实验：取乙型脑炎京卫研株鼠脑接种研究，用含0.5％乳蛋白的Earles液配成悬浮液，离心后稀释成适宜浓度，皮下注射10-13克小鼠，接种量为0.3ml/鼠，进行感染，另用含0.5％乳蛋白水解的Earles液注射小鼠脑内0.03ml/鼠，增加脑部刺激。抗病毒口服液和抗病毒复方中药在感染前后经腹腔注射给药7次，观察12天，记录死亡数，最后按统计学方法计算给药组和病毒对照组在死亡数上的差别有无意义。

●初步毒性预实验：小鼠每组5只(体重11-13g)腹腔注射0.4ml或0.2ml/鼠共3次，皆不死亡。另静脉注射一次0.2ml可使小鼠立即死亡，0.1ml不致死亡(用个别小鼠预试)。

4)、实验结果

(1)组织培养实验法

●病毒空斑杯碟抑制法，结果见表1和表2和表3，表1抗病毒复方中药与抗病毒口服液对流感病毒甲型WS株的空斑抑制作用比较。

表一：

[注]药物用量0.1ml/钢圈，(------)表示最小抑制圈

表2：抗病毒口服液和抗病毒复方中药对乙脑病毒和新城鸡瘟病毒的空斑抑制作用

药物名称及稀释度(0.1ml/钢圈)	抑制流行性乙脑病毒空斑形成			抑制新城鸡瘟病毒空斑形成
							抑制(cm)	毒性(cm)	最小抑制浓度	抑制(cm)	毒性(cm)	最小抑制浓度
	抗病毒口服液原液0.56mg/ml1∶2 0.28mg/ml1∶4 0.14mg/ml	3.0(------)	1.3(------)	原液	2.42.1(------)	1.41.20.7							1∶2
抗病毒复方中药原液0.56mg/ml1∶2 0.28mg/ml1∶4 0.14mg/ml							2.2(------)	1.3(------)	原液	2.62.2(------)	1.31.2(------)	1∶2

表3抗病毒口服液和抗病毒复方中药对单纯疱疹病毒空斑抑制作用

药物名称及稀释度0.1ml/钢圈	抑制(cm)	毒性(cm)	最小抑制浓度
				抗病毒口服液原液0.56mg/ml1∶2 0.28mg/ml1∶4 0.14mg/ml	1.8(------)(------)	1.6(------)(------)	(------)
抗病毒复方中药原液0.56mg/ml1∶2 0.28mg/ml1∶4 0.14mg/ml	3.02.8(------)	1.41.2(------)	1∶2

注：(----)表示没有抑制圈；------表示最小抑制圈

从上述的表1、2、3三个实验表中可见抗病毒口服液抗乙脑病毒比抗病毒复方中药强，但抗病毒复方中药抗流感病毒及单纯疱疹病毒比抗病毒口服液强。

●病毒空斑记数抑制法

一般实验对照空斑数以100-300个为适，过低太敏感，过高不易记数，敏感性较差。

结果见表4

表4抗病毒口服液和抗病毒复方中药病毒空斑数的抑制作用

药物名称	]药物稀释度(0.1ml/皿)	流感病毒FM			乙脑病毒A株
								空斑数	最小抑制浓度	治疗指数	空斑数	最小抑制浓度	治疗指数
		抗病毒口服液	原液1∶21∶41∶81∶16病毒对照	0(褪色)0278208306346	1∶4	2	111＜2533.5							1∶4	2
1∶21∶41∶81∶16对照	01279117181							1∶8	4
			抗病毒复方中药	原液1∶21∶41∶81∶16对照	0074186208254	1∶8	4

注：原液浓度为：0.56mg/ml，1∶2(0.28mg/ml)，1∶4(0.14mg/ml)

表5

	感染病毒			给药		小鼠死亡数		感染病毒			给药		小鼠死亡数
															抗病毒口服液	毒株	感染途径	病毒量	途径	剂量/鼠	实验组	对照组	毒株	感染途径	病毒量	途径	剂量/鼠	实验组	对照组
FM1	滴鼻	4.8LD50	腹腔	原液0.4ml，4次后0.2ml×2次	8/8	8/10	粤防72-243	静脉	1ml	皮下	原液0.2ml	1/12	8/10
														乙脑病毒A2		皮下	10.7	腹腔	1∶0.2ml	10/20	13/20	京防75-39	静脉	0.6ml	口服	原液0.4ml	10/109/10	9/10
抗病毒复方中药	FM1	滴鼻	4.8LD50	腹腔	原液0.4×4	8/20	9/10	粤防72-243	静脉	1ml	皮下	原液0.4ml0.2ml	3/105/10																8/108/10
														FM1	滴鼻	3.5LD50	口服	原液0.4×4	14/20	8/10	京防75-39	静脉	0.6ml	口服	原液0.4ml0.2ml	5/106/10	9/108/10
	乙脑病毒A2	皮下	10.7	皮下	原液0.4×2	12/20	8/10	京防75-39	静脉	0.6ml	口服	原液0.41∶2×0.4ml	6/107/10															9/108/10

从表4可以看出抗病毒复方中药对流感病毒与抗病毒口服液相似均具有较强的抑制作用，流感病毒对照空斑数为181时，抗病毒口服液对流感甲型WS的最小抑制浓度为1∶8，治疗指数为4。但抗病毒复方中药对乙肪病毒无作用，抗病毒口服液对乙脑病毒的抑制作用亦弱。

●小白鼠体内实验：

从表5可见抗病毒口服液无论对滴鼻感染的小鼠还是静脉注射病毒的小鼠虽然少死几个，但统计学无意义，但抗病毒复方中药救死率较大，明显优于抗病毒口服液。

小结

从以上表1-5实验数据可以得出如下结论，抗病毒口服液和抗病毒复方中药对流感病毒的抑制作用大于乙脑病毒，而抗病毒口服液对乙脑病毒无效，但对单纯疱疹病毒有效，同时抗流感病毒复方中药优于抗病毒口服液，体内实验抗病毒复方中药有统计学意义。

1、解热作用

因病毒性感染伴随有高热、发烧的现象，帮进行解热实验研究：

1、供试样品

(1)抗病毒复方中药

(2)抗病毒口服液(沈阳药科大学试制，批号890831)

(3)空白对照，生理盐水

(4)阳性对照：扑热息痛(沈阳第一制厂，批号890114)

2、实验动物：选取2-3kg未作过任何实验的家兔(雌雄均有)共24只，随机分为四组，每组6只，在实验条件下饲养3天，实验的当天早晨禁食备用。

3、实验方法：按常规测量其正常体温，求出各组的平均体温后，按体重每公斤0.5mg的剂量注射致热的三联疫苗，发热后口服灌胃给药，同时，按表8规定时间，记录体温，结果见表8。

                              表8家兔解热实验

药物		动物只数	正常体温三次均值	剂量(g/kg)	给药后体温(℃)						平均
												半小时	1小时	2小时	3小时	4小时	6小时
					抗病毒复方中药	实验组	33	39.839.7	2.85.6	40.440.3								40.140.1	39.139.2	38.738.6	38.938.8	39.038.9	39.439.3
空白对照	33	39.639.7	同体积盐水	40.840.6							41.141.5	40.640.4	40.141.3	40.240.1	39.439.8	40.140.5
						抗病毒口服液	实验组	3	39.8	5.6							40.3	40.4	40.6	40.1	39.8	39.9	40.2
空白对照	3	39.6	同体积盐水	40.2	41.3						40.6	40.0	40.6	39.8	40.4
							扑热息痛	实验组	3	39.7						0.1	40.0	38.6	38.2	39.9	40.2	39.4	38.8
空白对照	3	39.5	同体积盐水	40.1	41.2	40.8					40.1	40.0	39.6	40.3

[注]每只家兔测三次体温平均值，每个剂量组为三只，表中体温数值为3×3＝9(只次)次平均值

4、解热实验表明，抗病毒口服液不能保护家兔对三联免疫的发热，亦无明显解热作用，而抗病毒复方中药有保护家兔对三联疫苗的发热作用。抗病毒口服液不能保护对三联疫苗的发热作用，而抗病毒复方中药优于抗病毒口服液，但作用时间在服药后1-4小时内明显。

具体实施方式：

实施例1

A、取广藿香0.5Kg、连翘1.1Kg，提取广藿香油、连翘油，得到药渣和水煎液，在药渣中即在提取广藿香油、连翘油后的成分中，加入桑白皮粗粉1.1Kg、知母粗粉0.6Kg，加10倍量60％的乙醇浸泡2小时后，回流提取2小时，滤过，在药渣中，加入8倍量的60％乙醇，回流2小时。趁热过滤，合并两次滤液，再加入水煎液，浓缩到比重1.15，待温度降至35℃，通过处理好的D101-I型大孔树脂柱，先以两个体积蒸馏水洗注，弃去，然后用80％的乙醇洗脱，收集80％的乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，并浓缩成流浸膏，喷雾或减压真空干燥得到干粉状提取物；

B、将开始收集的广藿香油、连翘油用β-环糊精进包合，包合物加入A步骤中得到的干粉状提取物，混均，再加入药用辅料微晶纤维素、淀粉等混匀制成1000粒胶囊即可。

性状：本发明为棕褐色无定型粉末或疏松固体状物，味苦、涩，有引湿性。

功能主治：清热解毒，用于病毒性感冒，及病毒性肺炎等症。

用法用量：口服。每次2粒。一日三次或遵医嘱。

规格：每粒300mg。

实施例2

A、取广藿香0.25Kg、连翘0.55Kg，提取广藿香油、连翘油，得到药渣和水煎液，在药渣中即在提取广藿香油、连翘油后的成分中，加入桑白皮粗粉0.55Kg、知母粗粉0.30Kg，加8倍量70％的乙醇浸泡2.5小时后，回流提取2小时，滤过，在药渣中加入8倍量的70％乙醇，回流1.5小时。趁热过滤，合并两次滤液，再加入水煎液，浓缩到比重1.2，待温度降至35℃，通过处理好的AB-8型大孔树脂柱，先以两个体积蒸馏水洗注，弃去，然后吧80％的乙醇洗脱，收集80％的乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，并浓缩成流浸膏，喷雾或减压真空干燥得到干粉状提取物；

B、将开始收集的广藿香油、连翘油用β-环糊精进包合，包合物加入A步骤中得到的干粉状提取物，混均，加适量水，加热溶解，滤过，加入单糖浆，苯甲酸钠，再加适量的水至1000ml，冷藏，过滤，封装于10ml安瓶中，以100℃灭菌30分钟，制成1000ml。

功能主治：清热解毒，用于病毒性感冒，及病毒性肺炎等症。

用法用量：口服。每次2瓶。一日三次或遵医嘱。

规格：每瓶10ml。

实施例3：

取桑白皮1.8Kg、广藿香0.7Kg、知母0.8Kg、连翘1.8Kg，步骤同实施例1的方法提取，精制，得到提取物，加入用β-环糊精进行包合的连翘油、广藿香油，和支持剂糖粉等混匀，混法制粒，于60-80℃干燥，将干颗粒进行整粒处理后，装1000袋，即可。

性状：本发明为黄色颗粒，味略苦，有引湿性。

功能主治：清热解毒，用于病毒性感冒，及病毒性肺炎等症。

用法用量：口服。每次1袋。一日三次或遵医嘱。

规格：每袋10g。

实施例4：

取桑白皮1.1Kg、广藿香0.5Kg、知母0.6Kg、连翘1.1Kg，步骤同实施例1的方法提取，精制，得到提取物，加入用β-环糊精进行包合的连翘油、广藿香油，混匀，制粒，于60-80℃干燥，将干颗粒进行整粒处理后，加适量润滑剂压制成1000片，包衣即可。

功能主治：清热解毒，用于病毒性感冒，及病毒性肺炎等症。

用法用量：口服。每次2粒。一日三次或遵医嘱。

规格：每片350mg。

Claims (5)

1、一种抗病毒复方中药，其特征在于原料为桑白皮、广藿香、知母、连翘，各组分的重量配比为桑白皮∶广藿香∶知母∶连翘＝10-20∶5-8∶6-10∶10-20。

2、根据权利要求1所述一种抗病毒复方中药，其特征在于其中各组分的重量配比范围为桑白皮∶广藿香∶知母∶连翘＝11-18∶5-7∶6-8∶11-18。

3、根据权利要求1或2所述一种抗病毒复方中药，其特征在于还加入药用辅料：葡萄糖、淀粉、糊精、微晶纤维素。

4、根据权利要求1所述一种抗病毒复方中药，其特征在于还加入药用辅料：单糖浆、苯甲酸钠。

5、根据权利要求1所述的一种抗病毒复方中药的制备方法，其特征在于A、按比例取广藿香、连翘，提取广藿香油、连翘油，得到药渣和水煎液，在药渣中即在提取广藿香油、连翘油后的成分中，加入上述重量配比的桑白皮、知母的药材粗粉，加8-15倍量，50-70％的乙醇浸泡1.5-2.5小时后，回流提取1.5-2.5小时，滤过，在药渣中，加入7-10倍量的50-70％乙醇，回流1.5-2.5小时，趁热过滤，合并两次滤液，再加入水煎液，浓缩到比重1.0-1.3，待温度降至35-40℃，通过处理好的大孔树脂柱，先以两个体积蒸馏水洗注，弃去，然后用60-80％的乙醇洗脱，收集60-80％的乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，并浓缩成流浸膏，喷雾或减压真空干燥得到干粉状提取物；

B、将开始收集的广藿香油、连翘油用环糊精进行包合，包合物加入A步骤中得到的干粉状提取物，混均，按药用剂型添加辅料，制成胶囊剂、片剂、冲剂、口服液。