CN104013683B - 一种治疗高脂血症的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗高脂血症的药物组合物及其制备方法，该药物组合物的组分为大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物、藿香总黄酮，由药材大黄、广藿香提取而得。本发明以提取物为配方基础，并以药理学为指标调整筛选了三种组分降血脂的优化比例，与原配方黄香颗粒自然得到的各提取物相比，将藿香挥发油包合物及藿香总黄酮的比例减少50％，根据动物药理实验，结果表明，对降低血脂效果显著。

Description

一种治疗高脂血症的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗高脂血症的药物组合物，属于医药技术领域。

背景技术

高脂血症是指多种原因引起的血脂水平增高的一种病症，可引起严重的心脑血管疾病，根据其临床表现可归入中医的痰湿、淤血的范畴。传统医学具有辨证论治的特色和毒副作用少的优势，应用单味中药或中药复方制剂治疗高脂血症具有广阔的应用前景。

黄香颗粒收载于国家药品标准部分，标准编号：WS-10902(ZD-0902)-2002，由大黄和广藿香制成，具有活血化浊降脂的功效，用于瘀浊湿阻所致的高脂血症。根据其传统制备方法，黄香颗粒的有效组分仅包含大黄乙醇粗提物和广藿香挥发油。专利(CN1297255C)公开了黄香滴丸的制备方法，其制作方法是按照黄香颗粒中原料的提取方法进行提取，浓缩的，与黄香颗粒类似。

上述黄香制剂的工艺简单，杂质过多，药效成分不确切，且仅对藿香进行挥发油提取，没有对黄酮类进行提取，而研究发现，其中的黄酮类也是重要的功效成分。

发明内容

本发明提供了一种治疗高脂血症的药物组合物，并提供这种药物组合物有效部位的制备方法。

本发明技术方案如下：

一种治疗高脂血症的药物组合物，由如下组分及重量份组成：大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份。

其中，所述的

(1)大黄总蒽醌由如下方法制备：取药材大黄，加体积百分比80％的乙醇提取三次，第一次加药材总重量的10倍量，提取1小时，第二、三次各加药材总重量的8倍量，各提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，离心，上清液用水配置成药材总重量的4倍量体积，以5倍BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得大黄总蒽醌；

(2)藿香挥发油包合物由如下方法制备：取药材广藿香，加药材总重量8倍量的水，采用水蒸汽蒸馏法，提取藿香挥发油5h，收集藿香挥发油，得藿香挥发油；将藿香挥发油溶于等量无水乙醇中，将藿香挥发油的无水乙醇溶液加入重量体积百分比为6％的β-环糊精水溶液中，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，搅拌条件下，保持温度50℃，搅拌3h，0-4℃冷藏过夜，抽滤，得沉淀，50℃真空干燥，得藿香挥发油包合物；

(3)藿香总黄酮由如下方法制备：将上述广藿香提取挥发油后的水提液滤过，减压浓缩至50℃下相对密度为1.15-1.25的清膏，加乙醇调成体积百分比70％醇浓度，2-10℃静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，至无醇味，得醇沉浓缩液；提取挥发油后的药渣加体积百分比70％的乙醇提取二次，第一次加药渣总重量的8倍量，提取2小时，第二次加药渣总重量的8倍量，提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味,得醇提浓缩液；合并上述醇沉浓缩液及醇提浓缩液，加水配置成药材总重量的4倍量体积，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得藿香总黄酮。

上述药物组合物的制备方法，包括上述大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物及藿香总黄酮的制备方法，并按重量份取大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份，混合均匀即得。

本发明的有益效果如下：

1、本发明以提取物为配方基础，并以药理学为指标重新调整筛选了三种组分降血脂的优化比例，即大黄总蒽醌15份，藿香挥发油包合物7.5份，并增加了原方没有的藿香总黄酮2.5份。

2、与原配方自然得到的各提取物相比，将藿香挥发油包合物的比例减少50％，将藿香总黄酮的比例减少50％，上述比例系根据动物药理实验及其结果进行调整的，经实验，降脂效果显著，更利于治疗高脂血症。

具体实施方式

下述实施例和实验例仅用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1、大黄总蒽醌的大孔树脂纯化工艺实验

大黄总蒽醌的纯化中，现有技术中大多以大孔树脂进行富集，本发明以总蒽醌的吸附率及解吸率为指标，筛选了大黄总蒽醌的最佳树脂工艺。

1.树脂型号筛选

表1不同型号树脂对大黄总蒽醌吸附性能的比较

树脂型号	吸附率(％)	解吸率(％)
			S-8	68.04	64.37
D101	64.21	72.27
			AB-8	65.96	75.15
X-5	56.47	78.58
			DA-201	61.40	71.39

由表1实验结果综合比较可以看出AB-8树脂的吸附率、解吸率均较高，因此选取AB-8作为纯化大黄总蒽醌的树脂。

2.各树脂参数考察

表2不同参数对吸附率的影响

表3不同参数对解吸率的影响

结果：通过实验,由表2、表3实验数据最终确定大黄总蒽醌树脂纯化工艺为：以4ml药液/g药材的浓度，5BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，最后200g大黄制备得到大黄总蒽醌15.25g，含量35％。

实验例2、藿香挥发油包合工艺实验

本发明对藿香挥发油包合工艺进行了研究，以藿香挥发油包封率、包合物得率为指标，对β-环糊精用量、加水量、包合温度、包合时间等因素进行了考察，结果表明选用重量体积百分比为6％的β-环糊精水溶液，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，包合时间3小时，包合温度为50℃时，包合物得率以及藿香挥发油包合率在90％以上，可满足需求。最后200g广藿香制得挥发油包合物14.92g。

实验例3、藿香总黄酮的树脂纯化工艺实验

本发明以总黄酮的吸附率及解吸率为指标，筛选了藿香总黄酮的最佳树脂工艺。

1.树脂型号筛选

表4不同型号树脂对藿香总黄酮吸附性能的比较

树脂型号	吸附率(％)	解吸率(％)
			S-8	78.25	60.58
D101	73.06	68.14
			ADS-8	60.06	74.37
X-5	70.23	66.48
			DA-201	56.37	81.59

由表4实验结果综合比较可以看出D101树脂的吸附率、解吸率均较高，因此选取D101作为纯化藿香总黄酮的树脂。

2.各树脂参数考察

表5不同参数对吸附率的影响

表6不同参数对解吸率的影响

结果：通过实验,由表5、表6实验数据最终确定藿香总黄酮树脂纯化工艺为：以4ml药液/g药材的浓度，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，最后200g广藿香制得藿香总黄酮5.12g，含量45％。

实验例4、三种组分对降血脂的最优比例筛选

本实验对三种配方组分的最佳配比进行了优选，因藿香挥发油与藿香总黄酮来自于同一药材广藿香，两者比例相对固定为3:1，所以实验过程将两者作为一个整体，调整了其与大黄总蒽醌的比例。

一、大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物、藿香总黄酮的制备

1、大黄总蒽醌的制备：取大黄200g，加体积百分比为80％的乙醇提取三次，第一次加药材总重量的10倍量，提取1小时，第二、三次各加药材总重量的8倍量，各提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，离心，上清液用水配置成药材总重量的4倍量体积，以5倍BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得大黄总蒽醌15.25克；

2、藿香挥发油包合物的制备：广藿香100g，加药材总重量8倍量的水，采用水蒸汽蒸馏法，提取藿香挥发油5h，收集藿香挥发油，得藿香挥发油2.5ml；将藿香挥发油溶于等量无水乙醇中，将藿香挥发油的无水乙醇溶液加入重量体积百分比6％的β-环糊精水溶液中，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，搅拌条件下，保持温度50℃，搅拌3h，0-4℃冷藏过夜，抽滤，得沉淀，50℃真空干燥，得藿香挥发油包合物14.92克；

3、藿香总黄酮的制备：将广藿香提取挥发油后的水提液滤过，减压浓缩至50℃下相对密度为1.15-1.25的清膏，加乙醇调成体积百分比70％醇浓度，2-10℃静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，至无醇味,得醇沉浓缩液；提取挥发油后的药渣加体积百分比70％的乙醇提取二次，第一次加药渣总重量的8倍量，提取2小时，第二次加药渣总重量的8倍量，提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，得醇提浓缩液；合并上述醇沉浓缩液及醇提浓缩液，加水配置成药材总重量的4倍量体积，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得藿香总黄酮5.12克。

二、药理实验

1、实验材料

实验动物：雄性SD大鼠，体重200±20g。

仪器：OLYMPUSAU-2700型全自动生化分析仪。

动物高脂饲料配方：2％胆固醇、10％猪油、0.2％丙基硫氧嘧啶及87.8％基础饲料混合后做成固体饲料。

样品药物：本实验例制备的大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物、藿香总黄酮三种组分样品粉末，分别按6:3:1、3:3:1、1.5:3:1、9:3:1、12:3:1、1:0:0六种比例混合，依次记为样品1～样品6。

阳性对照药物：黄香颗粒，由金诃藏药股份有限公司生产，批号：20130501

2、方法

2.1高脂血症大鼠模型制备：SD大鼠60只，随机分为6组：空白组、模型组、阳性对照组、三种组分不同比例样品组，每组10只。除空白组外，其余各模型组均饲喂高脂饲料造模。在实验环境下大鼠喂饲观察5周，经模型组与空白组采血比较，血清TC和TG均明显升高(P＜0.05)，说明造模成功。

2.2动物给药及标本检测

2.2.1考察大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物、藿香总黄酮三者比例对血脂的影响

将样品1～样品3分别加蒸馏水配成混悬液，剂量各为47mg/kg；阳性对照组(黄香颗粒组)，剂量为1.34g/kg；以上各组每天灌胃1次，共治疗4周，每周称量动物体重以调整灌胃量。空白组和模型组不予任何治疗药物。于末次给药后将各组大鼠禁食(不禁水)15小时，称重并以20％乌拉坦(5mL/kg)腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，离心(3000r/min，10分钟)，留取血清，-20℃冻存备检。TC、TG、HDL、LDL均用OLYMPUSAU-2700型全自动生化分析仪测定。

2.2.2考察大黄总蒽醌比例对血脂的影响

将样品4～样品6分别加蒸馏水配成混悬液，剂量各为47mg/kg；阳性对照组为样品1，以上各组每天灌胃1次，共治疗4周，每周称量动物体重以调整灌胃量。空白组和模型组不予任何治疗药物。于末次给药后将各组大鼠禁食(不禁水)15小时，称重并以20％乌拉坦(5mL/kg)腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，离心(3000r/min，10分钟)，留取血清，-20℃冻存备检。TC、TG、HDL、LDL均用OLYMPUSAU-2700型全自动生化分析仪测定。

2.3统计学方法：用SPSS17.0统计软件，结果以均数±标准差表示，显著性检验采用单因素方差分析，检验水准α＝0.05。

3、实验结果

3.1三种组分不同比例比例对血脂的影响：

给药前，与空白组比较，各组大鼠血脂水平升高，有显著意义(P＜0.05)，示造模成功，且各组间无明显区别(P＞0.05)。

给药后，与模型组相比，各组大鼠TC、TG、LDL水平均明显降低(P＜0.05)，HDL水平明显升高(P＜0.05)；与阳性对照组比较，样品1组能明显降低TC、TG、LDL水平，且能升高HDL水平(P＜0.05)，效果优于阳性对照组，样品2组和3组效果与阳性对照组效果相当。结果见表7。

表7三种组分不同比例比例对大鼠血清TC、TG、HDL、LDL的影响

注：△表示与空白组比较，P＜0.05；*表示与模型组比较，P＜0.05；▲表示与阳性对照组比较，P＜0.05。

由以上结果可知，样品1组降血脂效果最好，优于原制剂黄香颗粒，而三个样品组中，以样品1组中大黄总蒽醌比例最高，为了确定降脂效果对大黄总蒽醌是否有依赖性，本实验继续对大黄总蒽醌的比例进行研究。

3.2大黄总蒽醌比例对血脂的影响

与模型组相比，除样品6组外，各给药组大鼠TC、TG、LDL水平均明显降低(P＜0.05)，HDL水平明显升高(P＜0.05)；与阳性对照组(样品1组)比较，样品4组与其效果相当，样品5组及6组效果稍差。结果见表8。

表8大黄总蒽醌对大鼠血清TC、TG、HDL、LDL的影响

注：△表示与空白组比较，P＜0.05；*表示与模型组比较，P＜0.05；▲表示与样品1组比较，P＜0.05。

由以上结果可以看出，并非大黄总蒽醌含量越高，降脂效果越好，根据本实验结果看出当大黄总蒽醌、藿香挥发油包合物、藿香总黄酮三种组分按6:3:1比例混合时，效果最佳。

以下实施例均能实现实验例的效果。

实施例1、一种治疗高脂血症的药物组合物

重量份组成如下：大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份。

其制备方法为

(1)大黄总蒽醌的制备：取药材大黄，加体积百分比80％的乙醇提取三次，第一次加药材总重量的10倍量，提取1小时，第二、三次各加药材总重量的8倍量，各提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，离心，上清液用水配置成药材总重量的4倍量体积，以5倍BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得大黄总蒽醌；

(2)藿香挥发油包合物的制备：取药材广藿香，加药材总重量8倍量的水，采用水蒸汽蒸馏法，提取藿香挥发油5h，收集藿香挥发油，得藿香挥发油；将藿香挥发油溶于等量无水乙醇中，将藿香挥发油的无水乙醇溶液加入重量体积百分比为6％的β-环糊精水溶液中，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，搅拌条件下，保持温度50℃，搅拌3h，0-4℃冷藏过夜，抽滤，得沉淀，50℃真空干燥，得藿香挥发油包合物；

(3)藿香总黄酮的制备：将上述广藿香提取挥发油后的水提液滤过，减压浓缩至50℃下相对密度为1.15-1.25的清膏，加乙醇调成体积百分比70％醇浓度，2-10℃静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，至无醇味，得醇沉浓缩液；提取挥发油后的药渣加体积百分比70％的乙醇提取二次，第一次加药渣总重量的8倍量，提取2小时，第二次加药渣总重量的8倍量，提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味,得醇提浓缩液；合并上述醇沉浓缩液及醇提浓缩液，加水配置成药材总重量的4倍量体积，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70％乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得藿香总黄酮；

(4)按重量份取大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份，混合均匀即得。

实施例2、一种治疗高脂血症的药物组合物

重量份组成如下：大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份。

其制备方法为：

按重量份取大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份，混合均匀即得。

Claims (2)

1.一种治疗高脂血症的药物组合物，其特征在于：该药物组合物由如下组分及重量份组成：大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份；其制备方法如下：

所述的大黄总蒽醌由如下方法制备：取药材大黄，加体积百分比80%的乙醇提取三次，第一次加药材总重量的10倍量，提取1小时，第二、三次各加药材总重量的8倍量，各提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，离心，上清液用水配置成药材总重量的4倍量体积，以5倍BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得大黄总蒽醌；

所述的藿香挥发油包合物由如下方法制备：取药材广藿香，加药材总重量8倍量的水，采用水蒸汽蒸馏法，提取藿香挥发油5h，收集藿香挥发油，得藿香挥发油；将藿香挥发油溶于等量无水乙醇中，将藿香挥发油的无水乙醇溶液加入重量体积百分比为6%的β-环糊精水溶液中，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，搅拌条件下，保持温度50℃，搅拌3h，0-4℃冷藏过夜，抽滤，得沉淀，50℃真空干燥，得藿香挥发油包合物；

所述的藿香总黄酮由如下方法制备：将上述广藿香提取挥发油后的水提液滤过，减压浓缩至50℃下相对密度为1.15-1.25的清膏，加乙醇调成体积百分比70%醇浓度，2-10℃静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，至无醇味，得醇沉浓缩液；提取挥发油后的药渣加体积百分比70%的乙醇提取二次，第一次加药渣总重量的8倍量，提取2小时，第二次加药渣总重量的8倍量，提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味,得醇提浓缩液；合并上述醇沉浓缩液及醇提浓缩液，加水配置成药材总重量的4倍量体积，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得藿香总黄酮。

2.根据权利要求1所述的药物组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）大黄总蒽醌的制备：取药材大黄，加体积百分比80%的乙醇提取三次，第一次加药材总重量的10倍量，提取1小时，第二、三次各加药材总重量的8倍量，各提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味，离心，上清液用水配置成药材总重量的4倍量体积，以5倍BV的药液量，2BV/h的流速通过AB-8大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得大黄总蒽醌；

（2）藿香挥发油包合物的制备：取药材广藿香，加药材总重量8倍量的水，采用水蒸汽蒸馏法，提取藿香挥发油5h，收集藿香挥发油，得藿香挥发油；将藿香挥发油溶于等量无水乙醇中，将藿香挥发油的无水乙醇溶液加入重量体积百分比为6%的β-环糊精水溶液中，藿香挥发油与β-环糊精的体积重量比为1ml:6g，搅拌条件下，保持温度50℃，搅拌3h，0-4℃冷藏过夜，抽滤，得沉淀，50℃真空干燥，得藿香挥发油包合物；

（3）藿香总黄酮的制备：将上述广藿香提取挥发油后的水提液滤过，减压浓缩至50℃下相对密度为1.15-1.25的清膏，加乙醇调成体积百分比70%醇浓度，2-10℃静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，至无醇味，得醇沉浓缩液；提取挥发油后的药渣加体积百分比70%的乙醇提取二次，第一次加药渣总重量的8倍量，提取2小时，第二次加药渣总重量的8倍量，提取1小时，合并提取液，减压回收乙醇，至无醇味,得醇提浓缩液；合并上述醇沉浓缩液及醇提浓缩液，加水配置成药材总重量的4倍量体积，以4倍BV的药液量，2BV/h的流速通过D101大孔树脂柱进行吸附，吸附后先用3BV的水洗脱，流速2BV/h，弃去水洗液，再用4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速1BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得藿香总黄酮；

（4）按重量份取上述大黄总蒽醌15份、藿香挥发油包合物7.5份、藿香总黄酮2.5份，混合均匀即得。