CN1255135C - 防治母畜不孕症的中药灌注液 - Google Patents

Abstract

本发明为一种防治母畜不孕症的中药灌注液，定名为新型中药促孕灌注液。组分药主要有黄柏，益母草、淫羊藿、红花、硼砂和元明粉等。临床试验证明，本方治疗奶牛子宫内膜炎的总有效率97.3%，受胎率70.3%，与抗菌素和氯前列烯醇的效果接近；治疗母猪子宫内膜炎的效果更好，且比用西药疗程短、费用低；预防母猪子宫内膜炎，能显著降低发病率、缩短发情间隔；对奶牛的卵巢静止和持久黄体性不孕症、以及黄牛、猪、犬、羊等母畜的产后乏情和屡配不孕症也有较好的疗效，并能提高猪、犬的产仔率。该药无毒副作用，无食品安全隐患，符合绿色药品要求，已通过江苏省新兽药审评。

Description

防治母畜不孕症的中药灌注液

一、技术领域

本发明一种防治母畜不孕症的中药灌注液，定名为新型中药促孕灌注液，属于防治母畜子宫内膜炎、卵巢静止和持久黄体性不孕症的新型中兽药。

二、技术背景

母畜不孕症，在各种母畜有很高的发生率，造成巨大的经济损失。尤其是奶牛的不孕症成为影响奶牛业发展的一大障碍，也是奶牛业经营亏损的重要原因，成为一个主要的世界性经济问题。调查结果表明，由子宫内膜炎引起的不孕症所占的比例最高，其次是卵巢静止和持久黄体。

对于子宫内膜炎的治疗，西兽医主要应用抗生素类和防腐消毒类药物进行子宫冲洗和灌注。这种方法虽有疗效，但须反复使用。而且，药物的刺激会使一些母畜出现疼痛、努责、废食、发热和生产能力下降等现象。同时，频繁使用抗生素会导致某些细菌产生抗药性，不但治疗效果越来越差，而且导致抗菌素的用量越来越大。长期使用抗生素又会增加畜产品中的残留量，带来食品安全问题。

对卵巢静止和持久黄体性不孕症的治疗，西兽医主要采用激素疗法。Braun认为，激素方法很难达到预期效果，在发情周期的不同阶段和卵巢发生囊肿时，垂体前叶对促性腺激素的反应有显著差异。雌激素类药品虽然对中枢神经及生殖道有直接兴奋作用，可以引起母畜表现明显的外表发情征象，但对卵巢无刺激作用，不能引起卵泡发育及排卵；促性腺激素虽然可以促进卵泡发育和排卵，但对卵泡发育波产生不好的环境，使黄体期缩短，发情表现弱或不发情。

再者，激素的毒副作用也不可忽视。Meredith认为，激素制剂已广泛用于治疗不发情，但只是在刺激静止卵巢方面有作用，如卵巢有功能的时候，应用激素就会产生有害的影响。对牛长期应用雌激素或者一次用量过大，可以引起卵泡囊肿或慕雄狂，有时可以引起卵巢萎缩或发情周期停止，甚至使骨盆韧带及其周围组织松弛，而导致阴道或直肠脱出。Refsal研究发现，注射雌二醇或重复注射ACTH可诱发成年不泌乳奶牛的卵巢囊肿，孕酮可引起母犬的子宫蓄脓。

第三，给家畜应用激素制剂，也易造成畜产品中的激素残留。国外已有实验证明，乳、肉类等畜产品中含有一定量的激素时，会危害人类的健康，如己烯雌酚有致癌的危险。国家已明文规定限制某些激素在食品动物中使用。

本课题组1987年研制成功中药促孕灌注液，每1000ml含益母草400g、淫羊藿400g、红花200g。见《中国兽药典·二○○○年版二部》第394页。该药治疗牛马卵巢静止和持久黄体性不孕症效果较好，而且克服了西药的诸多弊端。但其不足之处在于不能治疗子宫内膜炎，而子宫内膜炎又是不孕症中发病率最高的疾病。

三、发明内容

技术问题  本发明针对现有技术中急需绿色药品和原促孕灌注液治疗范围较窄、不能治疗子宫内膜炎的问题，提供一种既能治疗和预防母畜子宫内膜炎、又能治疗卵巢静止和持久黄体的新型中药促孕灌注液。达到药效可靠，无毒副作用，无药残，保障食品安全的目的。

技术方案  一种防治母畜不孕症的中药灌注液，其特征在于，

每1000ml药液的处方量药材为：黄柏600g，益母草500g，淫羊藿500g，红花200g，硼砂100g，元明粉100g。

生产每1000ml药液的工艺流程为：用水提醇沉法。将前四味药材饮片，加10倍水煎煮两次，每次1小时，合并煎液，过滤，将滤液浓缩，加入酒精使含醇量达到75％(体积比)，沉淀，抽滤，回收乙醇，加入蒸馏水稀释至1000ml，冲入硼砂、元明粉，搅拌溶解，静置沉淀24小时，精滤，分装，高压灭菌。

有益效果

1996～1998年，本研究室在江苏省96农业科技重点攻关项目的资助下开始研究，根据中兽医学理论和不孕症的病理，以原促孕灌注液为基本方，添加善清下焦湿热的黄柏、消肿止痛的硼砂和元明粉组成新方，通过反复比较、调整处方配比，研制成功新型促孕灌注液。新型促孕灌注液既保留了原促孕灌注液的催情促孕效果和其他优点，又增加了防治子宫内膜炎的功效，取得一药能治三种(子宫内膜炎、卵巢静止和持久黄体)发病率最高的不孕症的效果。

药效试验证明(表1～表3)，新型促孕灌注液治疗奶牛子宫内膜炎的总有效率达97.3％、受胎率70.3％，与抗菌素和氯前列烯醇的疗效接近；治疗母猪子宫内膜炎的效果更好，且比用西药疗程短、费用低；预防母猪子宫内膜炎能显著降低发病率、缩短发情间隔；治疗奶牛卵巢静止、持久黄体性不孕症效果确实。推广验证结果表明(表4)，该药对黄牛、猪、犬、羊等母畜的产后乏情和屡配不孕症也有较好的疗效，并能提高猪、犬的产仔率。药理试验证实，该药具有较强的抑菌作用，以杀灭子宫内病原微生物；能适度兴奋子宫，以促进子宫的净化、复原；能调节生殖内分泌激素的平衡，以加速炎症的消退；正是三种作用的协同，形成消炎促孕之功效。

本发明已通过江苏省新兽药审评，与现有技术相比，优点如下：

1.与原促孕灌注液相比，该药的治疗范围扩大，既能治疗和预防母畜子宫内膜炎、又能治疗卵巢静止和持久黄体，对母畜不明原因的产后乏情和屡配不孕症也有较好的疗效，达到一药多用，有效地防治多种不孕症。

2.与同类西药相比，该药剂由纯中药制成，无毒副作用，无药残隐患，符合绿色药品要求，保障动物源食品安全，而且功效好，治疗费用低；生产无三废，对环境无污染，符合绿色环保的要求。

3.与其他给药方式相比，该药通过宫腔灌注法给药，作用更直接，给药较方便，对动物不会产生不良应激反应。

综上所述，本发明达到了专利中所要求的创新性、科学性和实用性的标准。

四、具体实施方式

新型中药促孕灌注液每1000ml药液的处方量药材为：黄柏600g，益母草500g，淫羊藿500g，红花200g，硼砂100g，元明粉100g。

生产每1000ml药液的工艺流程为：用水提醇沉法。将前四味药材饮片，加10倍水煎煮两次，每次1小时，合并煎液，过滤，将滤液浓缩，加入酒精使含醇量达到75％(体积比)，沉淀，抽滤，回收乙醇，加入蒸馏水稀释至1000ml，冲入硼砂、元明粉，搅拌溶解，静置沉淀24小时，精滤，分装，高压灭菌。

(一)新型中药促孕灌注液(简称新促孕液)药效试验

1.新促孕液治疗奶牛子宫内膜炎试验

试验方法  按家畜产科学诊断标准，选择子宫分泌物呈粘液脓性或脓性，直肠检查子宫膨大或敏感性差，卵巢硬小或有黄体，发情迟缓或虽发情但屡配不孕，综合诊断为急、慢性子宫内膜炎者列入试验。先后选择47头病牛进行4批对照试验，实验组37头，按直肠把握法每次向子宫内灌注新促孕液30～50ml，隔天用药1次，连用3次为一疗程。对照组10头，分别为空白对照(不用任何药物)2头、等体积生理盐水灌注对照3头、等体积长效抗菌剂(新型氧四环素，江西民星兽药厂生产)灌注对照2头和氯前列烯醇(上海市计划生育科学研究所产品)0.2mg肌肉注射对照2头，用药者均与实验组同步。在每次灌药前先抽取少量子宫分泌物观察其肉眼变化(并进行细菌计数佐证疗效)，同时直肠检查卵巢、子宫的状态。以后连续观察3个情期，记录发情配种受孕情况。按以下标准综合判定其临床疗效。

最终有效(/痊愈并受孕)：用药后病牛子宫粘液变清，子宫位置、大小和敏感性恢复正常，卵巢活动，黄体消退，明显发情，经配种后在3个情期内受胎。

临床痊愈：临床症状显著改善，发情明显，配种，但因其他疾病或条件的影响在3个情期内未能受胎。

总有效率＝最终有效率+临床痊愈率

无效：临床症状无明显改善，或休情时间超过3个情期。

试验结果实验组37头，用药后子宫粘液和子宫的大小、位置、敏感性较快恢复正常，卵巢活动，有黄体的一般在用药1～2次后消退，发情配种。37头病牛痊愈并受胎26头，占70.3％；临床痊愈10头，占27.0％，总有效率97.3％(子宫分泌物细菌计数结果证实细菌数很快下降动近零)。空白对照组2头均无效。生理盐水对照组3头(用药前症状稍轻，生产单位为减少损失)，用药后2头无效、1头临床痊愈。抗菌素对照组3头，用药后2头痊愈并受胎、1头临床痊愈。氯前列烯醇对照组2头，用药后痊愈并受胎、临床痊愈各1头。由此表明新促孕液对奶牛子宫内膜炎有较好的疗效，与抗菌素和氯前列烯醇接近。(表1)。

2.新促孕液治疗母猪子宫内膜炎试验

试验方法动物选自连云港市禽蛋开发公司种猪场3～5胎次经产种母猪，品种有二花脸、新梅山、纯长白、长约克。选择子宫分泌物呈粘液脓性或脓性，并有明显的全身症状(体温升高，少食或不食)的12头病猪列入试验。随机分出9头为实验组，每次向子宫内灌注新促孕液10～15ml，隔天灌药一次，连用三次为一疗程。

给药方法：将试验猪前低后高保定，用0.1％新洁尔灭溶液清洗外阴后，将消毒后的橡皮导管插入子宫颈内，用无菌注射器抽取新促孕液10～15ml，接上导管注入子宫，然后注入适量生理盐水以冲洗注射器和导管中残留的药液。然后抽出导管，堵住猪外阴部让其站立活动5分钟以上，使药液充分充满子宫腔，最后解除保定。

3头为对照组，按本地区常规方法用西药治疗，即先用0.3％高锰酸钾溶液冲洗子宫，排尽消毒液后，灌入青霉素320万单位、链霉素200万单位，隔两天冲洗、灌药一次，同时每天两次肌肉注射青霉素800万～1200万单位、链霉素600万～800万单位，逐日观察症状的变化，比较两组康复时间和治疗成本。

试验结果  12头子宫内膜炎病猪治疗前体温在38.7～40.8℃之间，少食或不食；其中4头子宫分泌物呈粘液脓性，8头呈脓性。实验组9头用中药灌注一次后症状明显减轻，体温下降到38.5～39.5℃，停食者开始吃食，少食者食量增加；子宫分泌物开始减少、性状改善。用药两次后2头病猪康复，疗程3天；其余7头体温基本恢复正常，食量增加，子宫分泌物很少。用药三次后病猪全部康复，疗程5天。9头病猪均在康复后17～48天内发情、配种，总有效率100％，其中7头均在一情期受胎，受胎率77％。西药对照组3头随着用药次数的增加症状逐步减轻，共子宫冲洗、抗菌素灌注2次，肌肉注射抗菌素5天，6～7天后康复，疗程6～7天，其中2头在一情期受胎，受胎率66％(表2)。从治疗成本来看，用中药花费15元左右，西药需70元左右。由此可见，新促孕液对子宫内膜炎有较好的疗效，且比西药治疗疗程缩短，省时省力省钱。

3.新促孕液预防母猪子宫内膜炎的效果观察

试验方法  选择上一胎次有发情延迟和子宫内膜炎病史的12头母猪，于产后12小时第一次灌药，以后隔天灌药一次，连续给药三次，观察用药后子宫内膜炎的发生率、发情间隔(分娩至发情时间)和受孕情况，并与自身上一胎次的发病率和发情间隔进行比较。

试验结果  预防给药的12头母猪，仅1例在用药一次后出现子宫内膜炎症状，但此例经后两次用药结束后迅速康复；而往常本地母猪产后子宫内膜的发病率大多在25％以上，可见新促孕液能够明显降低子宫内膜炎的发病率，有较好的预防子宫内膜炎的效果。12头母猪前一胎次的发情间隔在16～130天，平均50.75±34.57天；用药后的发情间隔除1头延长4天外，其余11头均缩短到10～49天，总平均缩短到24.7±12.58天；后者较前者极显著(P＜0.01)提前，平均提前26.58±27.88天。对黑猪，一般可提早10～15天；而对纯长白猪或长约杂交一代，提前效果尤为明显，最好的可提早94天。12头母猪均在一情期配种受孕，受胎率100％。表明新促孕液能够显著缩短母猪的发情间隔，具有显著的催情促孕效果(表3)。

4新促孕液治疗奶牛卵巢静止、持久黄体的效果验证

选择4头空怀、乏情8～9个月的卵巢静止病牛和3头空怀8～10个月、乏情4～10个月的持久黄体病牛，按促孕灌注液的治疗方案给予新促孕液，即一次向子宫内灌注新促孕液30～50ml，观察10天未见发情者再灌注1～2次，记录配种受孕情况，验证新促孕液治疗奶牛卵巢静止、持久黄体的疗效。

试验结果  4头卵巢静止病牛用药后均发情配种受孕。其中2头仅用药1次，分别在用药后第4、6天发情；1头用药2次，在第二次用药后第5天发情，这3头经配种后在第一情期受胎；另1头用药4次，在第四次用药后40天发情，第一情期配种后出现返情，再次配种后在第二情期受胎。3头持久黄体病牛用药前空怀8～10个月，分别乏情4、8、10个月，均用药2次，分别在用药后第6、10、18天发情，经配种后均在第一情期受胎。此结果表明，新促孕液对卵巢静止、持久黄体的疗效亦较确实。

(二)推广验证

新促孕液研制期间，先后在江苏、安徽等地试用验证。据98年3月到98年9月反馈资料表统计，用新促孕液治疗各种经产母畜不孕症244例，其中奶牛87头，黄牛35头，猪113头，羊4只，犬7只。牛的受胎率在75％以上，猪的受胎率稍高于牛(部分结果见表4)。其中有用其他药治疗近3年未愈的脓性子宫内膜炎病牛、连配3次未孕的母猪，用新促孕液治疗后均治愈。有三个单位反映能明显提高猪和犬的产仔率。

此后，应用户要求，该药在广东省农科院种猪场、宁夏巴浪湖农场、四川成都凤凰山奶牛场、安徽濉溪县兽医院、南京农业大学种公牛站、江苏无锡市兽医站、常州、江阴、苏州等地进一步试用示范，普遍反映效果可靠。

(三)新型中药促孕灌注液药效总结

经过临床试验和多年多点推广验证，证明新型中药促孕灌注液药效可靠、适应症较广、适用母畜种类较多，既能治疗和预防母畜子宫内膜炎，又能治疗卵巢静止和持久黄体，治疗奶牛子宫内膜炎的总有效率达97.3％、受胎率70.3％，与抗菌素和氯前列烯醇的疗效接近；治疗母猪子宫内膜炎的效果更好，且比用西药疗程短、费用低；预防母猪子宫内膜炎能显著降低发病率、缩短发情间隔；对奶牛的卵巢静止和持久黄体性不孕症、以及黄牛、猪、犬、羊等母畜的产后乏情和屡配不孕症也有较好的疗效，并能提高猪、犬的产仔率。本药剂经过多年的示范应用，其效果得到了各地使用者的肯定。

                表1新促孕液治疗奶牛子宫内膜炎的疗效

试验批次	组别	头数n	药物	最终有效		临床痊愈		总有效率		无效
												n	％	n	％	n	％	n	％
				1	实验	8	新促孕液	6	75.0	2	25.0									8	100	0	0
对照	2	-	0									0	0	0	0	0	2	100
					2	实验	9	新促孕液	6	66.7	3								33.3	9	100	0	0
对照	3	生理盐水	0	0								1	33.3	1	33.3	2	66.7
						3	实验	10	新促孕液	7	70.0							2	20	9	90	1	10
对照	3	抗菌素	2	66.7	1							33.3	3	100	0	0
							4	实验	10	新促孕液	7						70.0	3	30.0	10	100	0	0
对照	2	氯前列烯醇	1	50	1	50						2	100	0	0
								合计	实验	37	新促孕液					26	70.3	10	27.0	36	97.3	1	2.7
对照	10	-	3	30.0	3	30.0	6					60	4	40.0

                  表2新促孕液治疗猪子宫内膜炎的疗效

组别	品种	用药前症状(d0 *)			每次用药量(ml)	第一次用药后症状(d2)			第二次用药后症状(d4)			第三次用药后症状(d5)	康复至发情间隔(天)	受胎与否
															子宫分泌物	体温(℃)	采食	子宫分泌物	体温(℃)	采食	子宫分泌物	体温(℃)	采食
		实验组	长二杂	粘液脓性		39.8	停止	15	减少	38.5	稍食													很少	39.0	增加	康复	28	受胎
新梅山	脓性微红				39.8							停止	15	减少，稀	39.3	稍食	很少	38.5	增加	康复	23	受胎
			二花脸	脓性		38.7	减少	10	减少，稀	38.7	增加												很少	38.5	增加	康复	19	-
长约克	脓性				40.8							停止	15	减少	38.8	稍食	很少	38.8	增加	康复	48	受胎
			新梅山	脓性		39.3	停止	15	减少	39.0	稍食												很少	38.5	增加	康复	32	-
二花脸	脓性				39.0							减少	10	减少	39.0	增加	很少	38.2	增加	康复	27	受胎
			二花脸	脓性		39.7	减少	10	减少	39.5	增加												很少	39.0	增加	康复	19	受胎
二花脸	粘液脓性				39.2							停止	10	减少	38.5	增加	康复			-	17	受胎
			长约克	脓性		38.9	减少	15	减少	38.9	增加												康复			-	32	受胎
对照组	新悔山				粘液脓性							39.0	减少	均用0.3％高锰酸钾子宫冲洗、灌注青、链霉素各320万、200万单位两次，每天两次肌肉注射青、链霉素各800万单位5天，前2头第6天、后1头第7天康复。								51							受胎
		二花脸	脓性	39.7		减少	29	-
	长约克				粘液脓性				39.8	停止	45	受胎

*第一次用药当天记为d₀，以后类推，第二、三次用药分别在d₂、d₄。

        表3母猪产后预防灌注新促孕液前后两胎次的发情间隔(天)

猪号	长约1438	长约1502	二花脸826	纯长2303	梅山7124	纯长2301	纯长2302	梅山7432	二花脸810	二花脸888	梅山7242	二花脸828	总平均
														用药前	89	45	23	130	34	71	81	35	29	16	32	24	50.75±34.57
用药后	30	49	14	36	19	36	36	16	15	15	10	14	24.70±12.58*
														比用药前缩短	59	-4	9	94	15	35	45	19	14	1	22	10	26.58±27.88

*与用药前相比P＜0.01。

                表4.98年3月到98年9月部分反馈资料表统计

试用单位	母畜种类	试用头数	痊愈并受胎头数	受胎率(％)
					铜山县绿色食品开发示范园区	黄牛羊	121	121	100100
睢宁县高效持续农业综合试验示范基地	黄牛猪	1619	1217	7589.5
					江宁县双闸镇兽医站	奶牛(空怀160天以上)	10	8	80
江都吴桥乡兽医站	猪	12	11	90
					邳州八义集兽医站	猪	5	5	100
安徽濉溪县兽医院	黄牛猪犬	5127	5127	100100100

Claims (2)

1.一种防治母畜不孕症的中药灌注液，其特征在于，

每1000ml药液的是由下述重量的药材制成的：黄柏600g，益母草500g，淫羊藿500g，红花200g，硼砂100g，元明粉100g。

2.权利要求1所述一种防治母畜不孕症的中药灌注液的制备方法，其特征在于，将前四味药材饮片加10倍水煎煮两次，每次1小时，合并煎液，过滤，将滤液浓缩，加入酒精使体积含醇量达到75％，沉淀，抽滤，回收乙醇，加入蒸馏水稀释，冲入硼砂、元明粉，搅拌溶解，静置沉淀24小时以上，精滤，分装，高压灭菌。