CN1251530A - 具有催产素活性的物质在制备用于创伤愈合的药剂方面的应用 - Google Patents

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Abstract

具有催产素活性的物质可被用于制备供祛病治疗或预防创伤(例如慢性创伤)的药物组合物。创伤愈合效果可通过将催产素与雌激素组合而增强或延长。

Description

具有催产素活性的物质在制备用于 创伤愈合的药剂方面的应用
本发明涉及催产素的新应用。
可能由下列因素而引起损伤或创伤：或者由外部损伤(即因意外事故或手术操作而引起创伤)；或者由组织中的病理过程而引起创伤。溃疡(例如消化性溃疡和骨溃疡)主要指皮肤或膜中的创伤。损伤还包括其它各种组织中的伤害，例如骨折。在本说明书中，“创伤”这个术语被用于人体或动物体中的各种损伤。创伤可被分成急性创伤或慢性创伤。
创伤愈合的机制大体上可分成四个阶段，即止血、发炎、增殖和成熟。在发炎的过程中，白细胞聚集以便对抗细菌，并且脉管壁的渗透性被增大从而导致膨胀。所述物质有很多还促进导致充血和发热的改善的微循环。如果未发炎，则白细胞数将会减少并且被单细胞代替，所述单细胞是释放生长因子(细胞因子)和一些化学物质的巨噬细胞和淋巴细胞，其中所述化学物质例如有组胺、5-羟色胺、前列腺素，它们是创伤愈合过程的开始和继续的主要调节剂。最重要的调节细胞是巨噬细胞。在增殖阶段中形成结缔组织，其中生长新血管，于是受损伤的组织获得再生。约一周后，成纤维细胞是优势细胞，发炎减少了，于是创伤的抗力迅速增大了。最后在成熟期，组织蛋白胶原被稳定化，于是形成疤痕组织。该阶段可能持续一长段时间，在此期间，例如神经组织的强度得到改善，并且再生在继续。为了达到最佳创伤愈合，应充分供应各种维生素和痕量元素以及营养物，并且氧的供应也应充分。
非妥协的细胞体内平衡是创伤愈合和修复的基本因素，并且在愈合组织中需要某些条件而在形成肉芽组织和上皮芽生。体内平衡条件包括：水合度、足够的血液灌流、各种生长因子的可获得性、适当的氧分压、非病原性微生物区系的可接受的程度以及创伤和邻近的正常皮肤之间电位梯度的维持。在体内平衡环境中，细胞被泡在便于正常生长和修复过程的体液中。
慢性创伤或无痛的、未愈合的创伤可能由不同的原因而引起，包括感染、异物或毒性刺激物的存在、灼伤、长期施加于皮肤的压力和受损伤的循环引起的血液供应不足。在慢性创伤中，组织体内平衡和创伤环境被调和，于是，或者不出现愈合，或者愈合刚开始就停止了。所述条件中涉及的因素有：组织坏死、脱水、慢性创伤水肿、纤维化硬结和小血管病。
腿溃疡是一种慢性创伤，见于很大一部分人中，随年龄增大而增多。该病程可持续从两三个月到数十年，并且会给社会造成重大的代价以及使个体患者遭受很大的痛苦。压力溃疡(即褥疮性溃疡或褥疮)是另一类慢性创伤，它主要伤害老年人。慢性非治愈性溃疡是糖尿病患者中的严重问题。
为了提供体内平衡环境，可用被设计成保持创伤湿润的闭塞敷料覆盖创伤。然而，这将带来促使创伤感染的危险。
一种用于治疗慢性开口创伤的最古老的疗法是水疗法，该方法现今可在涡流浴中进行。通过这样可浸掉敷料并清创坏死的组织。
在慢性皮肤溃疡和无痛溃疡中，如果坏死的、脱水的组织阻塞它，则可能不会出现细胞从创伤周围迁移。坏死的组织妨碍肉芽组织的形成并且防止上皮细胞迁移穿过创伤。因此需要清创(即从伤口消除坏死的组织)，不但为了除去上面生存了细菌的死组织从而能进行肉芽生成和胶原(上皮细胞可在其上迁移从而闭合伤口)成纤维样沉积的愈合过程，而且为了除去很多可能存在的微生物。该清创作用可通过局部施用酶、促进自溶(即通过自然存在于创伤液中的酶自身消化坏死的组织)、应用合成敷料或通过手术切除来进行。一经清创后，伤口通常将经历肉芽生成、收缩和上皮形成。
有一些局部治疗剂可能对创伤愈合速度有很深的影响。局部抗菌剂和清洁剂通常在创伤治疗中被滥用，导致有害的细胞毒性效果以及最小的抗菌效果和清洁效果。作为这类治疗剂的实例值得一提的有碘附、次氯酸钠溶液、过氧化氢和氧化锌。
已假定损伤的创伤愈合可能是由生长因子适当刺激的缺乏而引起的。实际上，生长因子已被用于临床试验而检测它们是否能改善患慢性未愈合创伤的患者的伤口闭合。最近用生长因子对创伤愈合进行了有希望的动物实验，但对人的慢性创伤的局部施用尚未成功。已建议应用与蛋白酶抑制剂组合的数种不同的生长因子。
另一种方法是单独移植上皮细胞或者与成纤维细胞和胞外基质成分一起移植。还推测了将调节治愈性多肽的合成的基因用于移植的细胞或者直接施用在伤口上。
大体上，促细胞分裂生长因子或者趋化生长因子或者促进一种或多种参与修复受损伤皮肤的细胞的分化的生长因子可促进皮肤愈合。成纤维细胞生长因子(FGFs)是九种已知的同源促细胞分裂原的一族，所述促细胞分裂原通过至少四种单一跨膜酪氨酸激酶受体及其备选的转录变体刺激中胚层和外胚层来源的细胞。酸性FGF(aFGF或FGF-1)似乎是鉴定了的FGFs中独特的，是由于它高亲和性地结合所有已知的FGF受体的能力。该广范围的受体专一性可能促成它的体外多细胞靶和组织修复的动物模型中多样的治疗相关的生物活性。aFGF是一种短多肽，它是来自皮肤成纤维细胞、血管内皮细胞和表皮角质形成细胞(皮肤中的主细胞)的有效的促细胞分裂原。此外，aFGF在体外对血管内皮细胞有趋化性并且诱导体内新血管生长。在大鼠和小鼠中，外源性应用的aFGF促进全厚皮肤创伤的愈合并导致暂时增大切开的创伤中的抗张强度。Liying Sun等，“用aFGF cDNA的转染改善了创伤愈合”，皮肤病学研究杂志(Journal of Investigative Dermatology)，Vol.108，No.3，1997。然而，aFGF的应用受到限制，这是因为需要施用较大量的重组aFGF，它通常由于焦痂的原因而受阻不能到达靶组织。aFGF的短半寿期是局部施用的另一个缺点，它要求频繁施用。频繁高剂量施用aFGF而克服扩散问题费用会很大。
另一族生长因子是转化生长因子β，TGF-β包括种类繁多具有多生物活性的多肽。已阐述了TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3在创伤修复中的重要作用。TGF-β1是皮肤形态发生和皮肤创伤修复的重要调节子，并且已证实对创伤的外部施用可加速动物的创伤愈合过程。为了弄清TGF-β1的机制，已鉴定并克隆了培养的角质形成细胞中由该因子调节的作用基因，参见B.Munz等，“依钙结合蛋白I亚基膜联蛋白II和pll在培养的角质形成细胞中和在创伤修复期间的差异表达”，皮肤病学研究杂志，Vol.108，No.3，1997。此外，所述物质还通过表皮生长因子(EGF)和角质形成细胞生长因子(KGF)而增多，这两种因子都刺激角质形成细胞增殖。
P.Luppi等在“NGF在人妊娠期间被释放入血浆；是催产素介导的响应吗？”，神经报导(Neuroreport)，4(8)，1063～5，1993中，已阐述了生物活性神经生长因子(NGF)在妇女妊娠、劳动和哺乳期间的外周循环中增加五倍。由于在雌性大鼠中静脉内注射催产素也引起下丘脑中NGF量的增多，所以人们推测循环NGF量的增加可能与血浆中高含量的催产素或者与下丘脑-垂体-肾上腺轴的活化有关。
G.Jansen等在“针刺后的大鼠中局部缺血性肌皮瓣存活率的增加”，斯堪的纳维亚生理学学报(Acta Physiol.Scand.)，135，555～558，1989中研究了针刺疗法对大鼠皮瓣存活率的影响，证实手工针刺和电针刺使所述皮瓣的存活率与未处理的对比物相比显著增高了。
现已意外地发现了催产素具有创伤愈合效果。该愈合效果至少部分是由于这一事实，即催产素激活对不同组织的愈合重要的生长因子。尤其现已发现，FGF型生长因子和/或它们的受体通过施用催产素而被活化。
本发明涉及具有催产素活性的物质在制备用于祛病治疗或预防包括人在内的哺乳动物创伤的药物组合物方面的应用。
一个优选的应用是治疗皮肤、骨、粘液、腱、肌、神经、脉管和结缔组织中的创伤。
本发明另一个优选的应用是治疗慢性创伤。
催产素是待分离和测序的第一肽激素之一。它是一种具有两个半胱氨酸残基的九肽，如下式所示，所述两个半胱氨酸残基在位置1和位置6之间形成二硫键
Figure A9880376600081
曾经在很长一段时间中认为催产素的作用只是它对排乳和子宫收缩的刺激效果，但在近数十年中，证实了催产素在CNS中产生的宽范围的效果。有人提出，催产素参与控制记忆和学习过程和各种行为(例如摄食、运动)，以及母性行为和性行为。还有人认为催产素参与心血管功能、体温调节、痛觉阈和流体平衡的控制。还有迹象表明，催产素与各种免疫过程的控制有关。最近已证实，在重复施用后，催产素注射引起血压降低和体重增加的长期效果。
有合成催产素的不同方法，工业方法例如被描述于美国专利2,938,891和3,076,797中。
在人体内，催产素是在下丘脑的室旁核(PVN)和视上核(SON)中产生的。它与加压素(它也是在这些核中产生的)不同之处仅在于两个氨基酸。SON和PVN的大细胞的催产素能神经元将投射物送入垂体后叶腺(催产素或加压素就是从该腺体分泌入循环的)。发源于PVN中的小细胞神经元投射入中枢神经系统(CNS)中的多区。产生催产素的细胞受神经支配，即受胆碱能神经元、儿茶酚胺能神经元和肽能神经元的支配。催产素在脑外不同组织(例如子宫、卵巢、睾丸、胸腺、肾上腺髓质和胰腺)中的存在已被证实，并且人们认为催产素在这些器官内产生局部效果。
催产素平行分泌入大脑区和分泌入循环是响应某种刺激(例如哺乳)而发生的，但其它刺激作用可引起催产素能神经元的独立的活化，在大脑或垂体中终止。
在这里，催产素，只要适用，除了指催产素外还指表现相同性能的前体、代谢衍生物、催产素兴奋剂或类似物。
本发明具有催产素活性的物质可通过通式I描述
Figure A9880376600091
其中W选自Ile、Cha、Val、Hoph和Phe；X选自Gln、Ser、Thr、Cit、Daba和Arg；Y选自Leu、Ile、Arg、Hos、Daba、Cit和Val；其中Leu、Ile和Val给出催产素类似物，而Arg、Hos、Daba和Cit则给出加压素类似物；以及Z选自Gly和Ala。
所述物质中的非天然氨基酸具有下列结构：Cha(环己基丙氨酸)
Figure A9880376600092
Hoph(高苯丙氨酸)
Figure A9880376600093
Cit(瓜氨酸)
Figure A9880376600101
Daba(二苯基丁酸)Hos(高丝氨酸)
Figure A9880376600103
所述氨基酸全部可商购，例如可从Bachem和Sigma商购。
本发明的物质中的氨基酸可以是L-氨基酸或D-氨基酸。
本发明的物质还包括具有带反向肽键的序列的九肽。这些序列优选是反向序列，更优选包括D-氨基酸。
认为式I的九肽由于与具有下式的催产素的结构相似性而表现出催产素活性：
Figure A9880376600104
在该催产素结构中，位置1、2、5、6和7保持未变，也就是说，所述二硫键和被认为是稳定所述键因而对性能至关重要的氨基酸(即位置2中的Tyr、位置5中的Asn和位置7中的Pro)保持未变。在位置3中，疏水性Ile可用其它疏水性氨基酸更换，并且在位置4中，亲水性Gln可用其它亲水性氨基酸更换。在位置8中，如果Leu被疏水性氨基酸Ile或Val更换则获得催产素类似物；并且如果用亲水性氨基酸Arg、Hos、Cit或Daba更换Leu则获得加压素类似物。本发明的九肽已通过下列文献中所述方法而编译了：S.Hellberg等，“肽定量结构-活性关系，一种多变的方法”，医疗化学杂志(J.Med.Chem.)，1987，30，1126以及J.Jonsson等，“55个编码的和非编码的氨基酸的多变量参数化”，Quant.Struct.-Act.Relat.，8，204～209(1989)。所述肽可按已知方法合成[例如由Streitwieser和Heathcock在“有机化学导论”(Introduction to OrganicChemistry)(第3版)，p.949～950中描述的‘Merrifields固相合成法’]。具有反向肽键的序列也可通过例如‘向后-逆向修饰’(retro-inversomodification)(例如参见S.Muller等，PNAS Vol 94，No.97，12545～12550)制备。
催产素的应用构成本发明优选的实施方案。
本发明另一个优选的实施方案是具有下列结构式的物质即鸟催产素、硬骨鱼催产素、加压素或8-精加压催产素的应用：
Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Ile-Gly-NH2(鸟催产素)
(当在式I中时W＝Ile，X＝Gln，Y＝Ile和Z＝Gly)
Cys-Tyr-Ile-Ser-Asn-Cys-Pro-Ile-Gly-NH2(硬骨鱼催产素)
(当在式I中时W＝Ile，X＝Ser，Y＝Ile和Z＝Gly)
Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2(加压素)
(当在式I中时W＝Phe，X＝Gln，Y＝Arg和z＝Gly)
Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2(8-精加压催产素)
(当在式I中时W＝Ile，X＝Gln，Y＝Arg和Z＝Gly)用于本发明的应用的其它优选的物质有：
Cys-Tyr-Cha-Cit-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Val-Thr-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2
Cys-Tyr-Hoph-Thr-Asn-Cys-Pro-Val-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Phe-Cit-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Cha-Arg-Asn-Cys-Pro-Hos-Ala-NH2，
Cys-Tyr-Val-Daba-Asn-Cys-Pro-Daba-Ala-NH2，
Cys-Tyr-Hoph-Daba-Asn-Cys-Pro-Cit-Ala-NH2和
Cys-Tyr-Phe-Arg-Asn-Cys-Pro-Val-Ala-NH2.
实验已证明，催产素通过中枢作用的方式提高大鼠中的中枢α2受体的活性。这些受体具有抑制作用并且对抗脑中主要经由α1受体(它们激活环化AMP)介导的去甲肾上腺素的活化方面。当α2受体刺激超过α1受体刺激时，则活性通过舒张而交换，能量朝向生长和愈合分流传送，即能量未被用于应力或肌收缩和活动。结果，副交感神经音超过交感神经音，于是，肌肉系统就松弛了。可推测催产素也在人体中产生类似的效果。在乳房喂养(一种以重复分泌催产素为特征的情况)过程中，见到了在重复施用催产素后的实验动物中观察到的所有效果。不知道催产素对α2受体的作用是如何被介导的，但可能不是通过传统的催产素受体介导的作用。
催产素的效果可这样延长或增强：与增大催产素和/或一些受体(例如雌激素)的释放的药物或具有α2兴奋效果的药物(例如可乐定)组合施用。
本发明还涉及与雌激素组合的催产素在制备用于治疗性或预防性创伤愈合的药物组合物方面的应用。催产素和雌激素或者被一起施用或者先施用雌激素再施用催产素。雌激素增大催产素的释放和合成、催产素受体的合成，并且它还上调α2受体的活性。
催产素的短期效果(例如短期解痛、短期镇静和激素释放)是通过催产素拮抗剂逆转的，于是可被描述成直接效果。
长期效果(达数天～数月的减轻，是在数周～数月的时间间隔重复治疗3～10天、优选5～8天后获得的)从一般观点来看也是出乎意外的，并且以前尚未报道过其它任何药物在患者中的长期效果。当获得所述效果之后，例如可通过每周一次的治疗而保持它。该长期效果是通过α2拮抗剂逆转和通过α2兴奋剂增强的。
所述含催产素的药物组合物可被配制成供局部的、离子电渗疗法的、鼻的、肺内的、肠胃外的(例如皮下的、腹膜内的或静脉内的、鞘内的或脑室内的)施用。优选的施用方式是局部用药和鼻内用药。肠胃外的组合物例如是供皮下、肌内或静脉内注射的溶液或乳液。局部组合物可以是洗剂、乳膏、软膏或凝胶(例如被掺入膏药)。
局部施用中应给出的剂量可以是1～1000μg/cm2，优选10～100μg/cm2；肠胃外施用中为0.05～1mg/kg；而鼻内施用中则是1～100IU/天，优选是25～50IU/天。1IU(或国际单位)相当于2μg。对于患脐绞痛的儿童来说，优选的剂量可以是20～50IU/天、更优选25～30IU/天(经鼻施用)，优选在1～2小时中施用2～3次。在i.c.v或i.t.施用中，剂量一般是肠胃外剂量的1/10～1/1000。
市场上现在有供注射和喷鼻的商品溶液供应。
图1是在皮下施用催产素和催产素拮抗剂后大鼠的肌皮瓣存活率的条线图。生物试验
一个已有的创伤愈合模型旨在研究大鼠的肌皮瓣存活率。在整形外科学中，重构问题通常是通过外科皮瓣解决的。手术皮瓣的主要缺点是其造成局部缺血和最后远端部分坏死的倾向。该并发症最终会破坏手术后看来优良的结果。进行了很多研究致力于解释外科皮瓣存活的机制以及如何预防和消除既成的局部缺血。
为了研究皮肤创伤治愈剂对慢性未愈合皮溃疡的效果，已产生突变型C57BL/Ks-db/db糖尿病小鼠作为可能相关的愈合-损伤的模型。这些基因上纯合的糖尿病小鼠发展成胰岛素抗性的肥胖和高血糖症，它与人II型糖尿病相似。它们还显示糖尿病迹象，例如过量饮水和排尿以及大为升高的尿葡萄糖含量。这些小鼠中的创伤在细胞浸润、肉芽组织形成和伤口闭合方面表现出显著延迟。以前的研究应用了该模型来评定aFGF的制剂。试验1.施用催产素后大鼠中皮瓣的存活率。
本研究的目的是研究催产素对大鼠肌皮瓣存活率的影响。
将71只雌性白化大鼠(Sprague-Dawley，重180～220g)用水合氯醛(0.4g/kg)麻醉，剃光背部，隆起一块基于颅背侧的标准皮瓣(2×7cm)然后在适当位置缝合。所述皮瓣是从肌的深筋膜处隆起的并且包括表面筋膜、肉膜、皮下组织和皮肤。分别在手术前24小时和1小时以及手术后24小时用1mg/kg催产素(s.c.)(n＝20)、催产素拮抗剂[即1-脱氨基-2-D-Tyr-(OEt)-4-Thr-8-Orn-催产素，以1mg/kg的量(n＝15)]、用1mg/kg所述催产素拮抗剂处理这些大鼠；再在30分钟后用1mg/kg催产素(n＝16)或者用盐水(n＝20)处理。
在手术后六天估测所述皮瓣的存活率。与盐水处理的对比组(p＜0.05)相比，催产素处理过的大鼠具有高得多的皮瓣存活率。当先施用催产素拮抗剂再注射催产素时，则该效果被消除了。与盐水处理过的大鼠(不显著，p＝0.13)和催产素处理过的大鼠(p＜0.05)相比，单独的催产素拮抗剂降低了皮瓣存活率。
该研究的结果被阐述于图1中，图1示出皮下处理过的大鼠肌皮瓣的存活率，即用盐水(NaCl)、催产素(Ox)、催产素拮抗剂(OxA)和催产素拮抗剂+催产素(OxA+Ox)处理过。结果以平均值±SD表示。用单向ANOVA接着通过学生t-检验进行了统计估测。试验2.施用催产素后的糖尿病小鼠中创伤的愈合
11周大小的雌性C57BL/Ks-db/db糖尿病小鼠得自JacksonLaboratories(Bar Harbor，ME)。将小鼠关在具有无菌水和垫层的无菌微型隔离盒中(每盒四只)，并且保持在半封闭的检疫设施内。在引起创伤后用电热板以每盒一半提供增补的热从而防止降温并减小死亡率。
腹膜内注射每kg体重为110mg的氯胺酮和9mg的赛拉嗪而麻醉小鼠。剃光背中部和胸廓的皮肤，并用2％氯己定外科擦洗液接着用70％乙醇消毒。在中背区应用一块直径为1.6cm的模板标记一个2.0cm2的圆圈，用已灭菌的弯曲虹膜剪通过平端摘除造成一个全厚伤口。在损伤后不久，伤口面积一般增大到约2.3cm2，可能是因为真皮沿伤口周边收缩的缘故。应用完全无菌的技术在层流罩超静台中进行所有的外科操作和随后的愈合分析操作。在损伤前连续5天，以及损伤后第0、3和7天施用剂量。分别以不同的剂量(0.001、0.01、0.1、1.0、10.0和100.0μg/cm2)给每个剂量为16只小鼠的组施用催产素。用半透明Bioclusive敷料(Johnson & Johnson Products，New Brunswick，NJ)覆盖伤口从而保护伤口、保持湿润的环境和防止形成痂。在损伤后第10天取伤口液体样并进行需氧微生物和厌氧微生物培养。从本研究分析中排除表现出每个伤口多于50个菌落的动物。防止甚至轻度的或亚临床的感染导致一致的最大愈合损害，于是为评定治疗效果提供大的创伤愈合窗。
用照相方法记录伤口外观并将伤口周边印在无菌载玻片上，即在预先用一滴无菌生理盐水润湿后直接将所述载玻片印在裸露的伤口表面。在引起创伤后立即地并且随后一周两次地进行测定直至伤口完全闭合。应用计算机化图象分析从载玻片印迹测定伤口面积和周长。应用不成对的两尾学生t-检验(unpaired two-tailed Student t-test)估算组间差异的统计显著性。
以初始面积减小的百分数表示的愈合被转化成从伤口周边的线性内生长，方法是以时序间隔将伤口面积的差值除以平均伤口周长。在特定时间总的内生长值是直到该时刻为止增加的内生长距离之和。该转化将闭合作为时间的函数线性化，于是能以随时间恒定的动力学速度表述愈合。
当不再出现湿肉芽组织(指示一层功能性表皮水渗透性屏障)时，就认为创伤(每周两次地检查从而监测全部闭合的时间)完全愈合了。还从组织学上进一步证实闭合。通过用耶兹矫正的x2-统计分析愈合伤口对未愈合伤口分数的时间点对比，并且通过不成对的两尾学生t-检验分析各只动物完全闭合的绝对天数的组对比。
作为对在引起创伤后第一周内施用的三次各为10μg/cm2(初始伤口面积)的剂量的响应，直径为1.6cm的全厚皮切口闭合得比用相应的介质对照的处理组快得多。早在损伤后第7天就见到并且在整个试验期间继续见到处理过的伤口愈合速度的统计显著性的增强(p≤0.01)。从损伤后第14天，在催产素处理过的伤口和介质处理过的伤口之间出现50％的最大差异(以初始面积的百分数计)。该差异相当于在第14天，处理过的小鼠伤口尺寸与接受相应的PBS/肝素介质的小鼠相比要小10倍。虽然接受液体介质的创伤比未接受任何物质的创伤愈合得稍快些，但用PBS或生理盐水处理后的愈合速度与用含肝素的PBS介质处理过的相当(未示出数据)。
伤口闭合作为时间的函数是非线性的，所以催产素处理的效果大小似乎随时间而变。由于这些全厚伤口是通过从伤口周边逐渐愈合而闭合的，所以我们将所述数据从初始伤口面积的百分数转变为从初始伤口周边开始的平均线性愈合长度。该计算将初始3天延迟后的平均愈合速度线性化了。在全部时间间隔，用催产素处理显著(p≤0.01)增大了从伤口周边愈合的线性速度。对每只动物测定了作为时间的函数的累积线性愈合长度的斜率。按处理分组的这些斜率表明，10μg/cm2催产素将平均线性愈合速度从0.18mm/天(在介质处理过的组中观测到的)增大到0.45mm/天(p≤0.01)。
用所述剂量的催产素处理还明显减少了达到整个伤口闭合的时间。在第14天见到整个闭合中统计显著性(p≤0.05)增大了。完全闭合的中间时间从介质处理过的创伤的52天减少到在损伤后第一周中用三次催产素剂量处理过的创伤的仅仅23天(p≤0.0001)。
三次局部施用氧(每次剂量在1～100μg/cm2范围内，在损伤后第一周中施用)导致愈合速度比成对的介质对比组显著剂量相关的增大。0.001μg/cm2、0.01μg/cm2和0.1μg/cm2的剂量都无效，于是确定“无效”量在0.001～1μg/cm2之间。
剂量响应关系还从伤口完全闭合的时间看出。施用每次剂量为1～100μg/cm2显著减少了这些伤口完全闭合所需的时间。在1.0～10.0μg/cm2的剂量范围内，创伤愈合得比它们各自的介质对比组大约快10天。该闭合速度、0.001μg/cm2(未示出)和0.01μg/cm2剂量在减少达到完全闭合的时间方面是无效的。
在损伤后7天，比较了从用10μg/cm2催产素处理过的十只小鼠和用PBS处理过的十只小鼠的损伤区(“溃疡”)取的皮肤活组织检查中FGF的浓度。结果表明，催产素处理过的小鼠合成的FGF-1比用PBS介质处理过的小鼠合成的多162％。该浓度的增大具有高度的显著性(p＜0.001)并且有力地支持了这一假设，即催产素通过FGF-1的增大的表达和合成加速了创伤愈合。

Claims (13)

1.具有催产素活性的物质在制备用于祛病治疗或预防包括人在内的哺乳动物创伤的药物组合物方面的应用。
2.权利要求1的物质的应用，其特征在于，该物质具有下式I的结构：
Figure A9880376600021
其中W选自Ile、Cha、Val、Hoph和Phe；X选自Gln、Ser、Thr、Cit、Daba和Arg；Y选自Leu、Ile、Arg、Hos、Daba、Cit和Val；其中Leu、Ile和Val给出催产素类似物，而Arg、Hos、Daba和Cit则给出加压素类似物；以及Z选自Gly和Ala；以及具有反向肽键的序列。
3.权利要求1或2的应用，其特征在于，所述物质是催产素。
4.权利要求1或2的应用，其特征在于，所述物质是鸟催产素、硬骨鱼催产素、加压素或8-精加压催产素。
5.权利要求1或2的应用，其特征在于，所述物质选自下组序列：
Cys-Tyr-Cha-C1t-Asn-Cys-pro-Arg-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Val-Thr-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Hoph-Thr-Asn-Cys-Pro-Val-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Phe-Cit-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2，
Cys-Tyr-Cha-Arg-Asn-Cys-Pro-Hos-Ala-NH2，
Cys-Tyr-Val-Daba-Asn-Cys-Pro-Daba-Ala-NH2，
Cys-Tyr-Hoph-Daba-Asn-Cys-Pro-Cit-Ala-NH2和
Cys-Tyr-Phe-Arg-Asn-Cys-Pro-Val-Ala-NH2.
6.权利要求1～5任一项的催产素在治疗皮肤、骨、粘液、腱、肌、神经、脉管和结缔组织中的创伤方面的应用。
7.权利要求1～6的催产素在治疗慢性创伤方面的应用。
8.权利要求1-8任一项的与雌激素组合的催产素的应用。
9.权利要求1～8任一项的应用，其中所述药物组合物包括与药物惰性载体组合的催产素。
10.权利要求1～9任一项的应用，其中所述药物组合物被配制供鼻或局部施用。
11.权利要求1～10任一项的应用，其中所述药物组合物呈鼻喷雾剂的形式。
12.治疗创伤的方法，该方法包括施用治疗有效剂量的具有催产素活性的物质或催产素兴奋剂，尤其是催产素。
13.权利要求12的方法，该方法包括每天经鼻施用5～100IU、优选25～50IU的催产素。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107456570A (zh) * 2017-07-31 2017-12-12 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 催产素在促进缺血超长随意皮瓣存活中的作用

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080004224A1 (en) * 1994-05-04 2008-01-03 Hlavka Joseph J Dermatological uses of tri-, tetra-, penta-, and polypeptides
SE9701184D0 (sv) * 1997-04-01 1997-04-01 Karolinska Innovations Ab Substanser för att åstadkomma preferens och skapa acceptans
SE9803272D0 (sv) * 1998-09-25 1998-09-25 Kerstin Uvnaes Moberg A drug for cell regeneration
SE0001440D0 (sv) * 2000-04-18 2000-04-18 Entretech Medical Ab A drug against climacteric disorders
SE0100684D0 (sv) * 2001-02-28 2001-02-28 Kerstin Uvnaes Moberg New subject-matter
KR100441167B1 (ko) * 2001-12-27 2004-07-21 씨제이 주식회사 마이크로에멀젼 예비 농축액 조성물
ATE410170T1 (de) * 2003-03-27 2008-10-15 Pantarhei Bioscience Bv Verwendung von estrogenen zur behandlung von männerunfruchtbarkeit
JO2937B1 (en) 2004-08-11 2016-03-15 فيرينغ.بي.في Tight muscles of the peptide vascular tensioner receptor
JP4747364B2 (ja) * 2005-04-04 2011-08-17 独立行政法人産業技術総合研究所 紫外線皮膚炎抑止剤およびアトピー性皮膚炎抑止剤
US7660413B2 (en) * 2005-04-08 2010-02-09 Shahram Partovi Secure digital couriering system and method
US20090317377A1 (en) * 2005-08-26 2009-12-24 Yeomans David C Therapy procedure for drug delivery for trigeminal pain
ES2535434T3 (es) * 2006-02-10 2015-05-11 Ferring B.V. Agonistas del receptor de vasopresina V1a
US20080004223A1 (en) * 2006-05-17 2008-01-03 Hlavka Joseph J Dermatological uses of the tripeptide melanocyte stimulating inhibitory factor (mif)
US9050286B2 (en) * 2007-08-14 2015-06-09 Ferring B.V. Use of peptidic vasopression receptor agonists
CA2699101A1 (en) * 2007-09-11 2009-04-02 Dorian Bevec Use of a peptide as a therapeutic agent
JP2010538994A (ja) * 2007-09-11 2010-12-16 モンドバイオテック ラボラトリーズ アクチエンゲゼルシャフト 例えば肺炎連鎖球菌感染症を治療するためのｂｆｇｆ１−２４および任意での（ａｒｇ８）バソプレシンの使用
KR20100057641A (ko) * 2007-09-11 2010-05-31 몬도바이오테크 래보래토리즈 아게 인터메딘 ４７ 및 ５３ 펩티드의 치료적 용도
KR20100061677A (ko) * 2007-09-11 2010-06-08 몬도바이오테크 래보래토리즈 아게 치료제로서의 ｔｙｒ-ｗ-ｍｉｆ-1 및 유로코르틴 2의 용도
WO2009033820A2 (en) * 2007-09-11 2009-03-19 Mondobiotech Laboratories Ag Use of a peptide as a therapeutic agent
CN101855235B (zh) * 2007-10-29 2013-04-24 赫里克斯生物医疗公司 保护性皮肤护理四肽
WO2011140608A1 (en) * 2010-05-14 2011-11-17 Keating Charlotte L Neuropsychopharmacological treatment regimes for treating psychological disorders
ES2667532T3 (es) * 2010-06-18 2018-05-11 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Neogénesis del folículo piloso
WO2012016229A2 (en) 2010-07-30 2012-02-02 The Regents Of The University Of California Oxytocin treatment to improve memory and modify blood glucose
SE536091C2 (sv) 2011-04-14 2013-04-30 Pep Tonic Medical Ab Farmaceutisk komposition innehållande oxytocin eller fragment eller varianter därav och åtminstone en icke-jonisk cellulosaeter
US20130045958A1 (en) 2011-05-13 2013-02-21 Trimel Pharmaceuticals Corporation Intranasal 0.15% and 0.24% testosterone gel formulations and use thereof for treating anorgasmia or hypoactive sexual desire disorder
US9757388B2 (en) 2011-05-13 2017-09-12 Acerus Pharmaceuticals Srl Intranasal methods of treating women for anorgasmia with 0.6% and 0.72% testosterone gels
US20130040923A1 (en) 2011-05-13 2013-02-14 Trimel Pharmaceuticals Corporation Intranasal lower dosage strength testosterone gel formulations and use thereof for treating anorgasmia or hypoactive sexual desire disorder
DE102011118016A1 (de) * 2011-10-26 2013-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Kosmetische Mittel enthaltend Oxytocin und Riechstoffe
US9387183B2 (en) 2011-12-28 2016-07-12 Kuwait University Method of treating diabetes-related impaired wound healing
US11744838B2 (en) 2013-03-15 2023-09-05 Acerus Biopharma Inc. Methods of treating hypogonadism with transnasal testosterone bio-adhesive gel formulations in male with allergic rhinitis, and methods for preventing an allergic rhinitis event
AU2014259787B2 (en) 2013-05-03 2018-03-08 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Skin substitutes and methods for hair follicle neogenesis
CA2949173A1 (en) * 2014-06-03 2015-12-10 Caterina Bissantz Peptides as oxytocin agonists
SI3242676T1 (sl) 2015-01-07 2024-02-29 Tonix Pharma Limited Formulacije oksitocina, ki vsebujejo magnezij in načini uporabe

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3274060A (en) * 1962-05-23 1966-09-20 Armour Pharma Treatment of multiple sclerosis with oxytocin
NL129421C (zh) * 1963-08-30 1900-01-01
EP0300036A4 (en) 1987-01-30 1989-06-14 Biomed Res Consultants Ltd PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS BASED ON VASOPRESSIN.
US5175144A (en) * 1988-11-29 1992-12-29 The Johns Hopkins University Method of retarding the progression of chronic renal failure
SE9701161D0 (sv) * 1997-03-27 1997-03-27 Karolinska Innovations Ab New use I

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107456570A (zh) * 2017-07-31 2017-12-12 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 催产素在促进缺血超长随意皮瓣存活中的作用

Also Published As

Publication number Publication date
WO1998043661A1 (en) 1998-10-08
SE9701162D0 (sv) 1997-03-27
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ES2194308T3 (es) 2003-11-16
AU6755098A (en) 1998-10-22
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DE69811371D1 (de) 2003-03-20

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