CN1246694C - 白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 - Google Patents
白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1246694C CN1246694C CN 200310111788 CN200310111788A CN1246694C CN 1246694 C CN1246694 C CN 1246694C CN 200310111788 CN200310111788 CN 200310111788 CN 200310111788 A CN200310111788 A CN 200310111788A CN 1246694 C CN1246694 C CN 1246694C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peak
- atractylodes rhizome
- medicinal material
- finger
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000132012 Atractylodes Species 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 41
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- WZZZLJRMAKAVNX-UHFFFAOYSA-N chloroform;cyclohexane;ethyl acetate Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O.C1CCCCC1 WZZZLJRMAKAVNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 14
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 238000010276 construction Methods 0.000 claims description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 4
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 3
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 4
- 238000000079 presaturation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 abstract 2
- 238000007605 air drying Methods 0.000 abstract 1
- ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N ethanol;sulfuric acid Chemical compound CCO.OS(O)(=O)=O ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 abstract 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 abstract 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 abstract 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 241000092665 Atractylodes macrocephala Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 description 1
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 description 1
- UGAPHEBNTGUMBB-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethyl acetate Chemical compound CC(O)=O.CCOC(C)=O UGAPHEBNTGUMBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011759 adducin Human genes 0.000 description 1
- 108010076723 adducin Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002567 autonomic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 239000010956 nickel silver Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及白术药材TLC指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。首先,取白术药材粉末,加水超声提取,滤过,滤液加95%乙醇,静置过夜,滤过,滤液回收乙醇,水提醇沉液以乙酸乙酯提取,乙酸乙酯蒸干,定容,作为供试品溶液;吸取供试品溶液,点于硅胶G薄层板上,以环己烷-氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂,预饱和20min,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰;再进行荧光扫描,测定波长λ=330nm;获得白术药材指纹图谱。并通过对11批白术药材的TLC指纹图谱进行比较,确定了其共有指纹特征,得到白术药材的标准指纹图谱。本发明为白术药材质量控制和真伪鉴别提供了一种全新的方法。
Description
技术领域
本发明涉及白术药材指纹图谱的构建方法,本发明还涉及由此方法所得到的白术药材标准指纹图谱。
背景技术
我国中药材品种繁多,来源复杂,由于地方差异,药材中同名异物、同物异名的现象十分常见。市场上以假乱真、以次充优的情况时有发生,即使对同一种药材,由于各地的生长环境、种植技术等的不同,质量也会有很大的差异。因此,采用什么方法对药材进行合理、有效的评价,是一项重要的任务。
传统的药材评价方法是用单一的化学成分作为评价指标,具有很大的局限性。中药指纹图谱为解决这一问题提供了钥匙。由于中药具有成分复杂、有效成分不完全明确的特点,指纹图谱的整体性和模糊性可以有效地反映同一物种个体的相似性。通过指纹图谱的特征性,能有效地鉴别中药的真伪,通过指纹图谱主要特征峰面积或比例的制定,能有效地控制中药的质量,确保其质量的相对稳定性,对有效地控制中药质量具有重要意义。国外对植物药指纹图谱也有相似的应用,德国银杏提取物制剂就是其中十分突出的一个例子。
白术为菊科(Compositae)植物白术Atractylodes macrocephala Koedz.的干燥根茎,产于浙江、安徽等地,具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎的功效,在中药领域多有应用。本发明用薄层色谱法构建了白术药材的指纹图谱,为白术药材质量控制和真伪鉴别提供了一种全新的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种白术药材指纹图谱的构建方法,以及由此方法所得到的白术药材标准指纹图谱。
本发明的白术药材指纹图谱的构建方法包括下列步骤:
(1).供试品溶液的制备:精密称取白术药材粉末,加水超声提取,滤过,滤液加95%乙醇静置过夜,滤过,回收乙醇,转移至分液漏斗用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯蒸干,转移至刻度试管,定容,作为供试品溶液;
(2).薄层层析:精密吸取供试品溶液,点于硅胶G薄层板上,以体积比为20∶5∶8的环己烷-氯仿-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰;
(3).薄层扫描测定:对薄层斑点进行扫描测定,计算各峰的比移值Rf,并以面积归一化法计算各峰的相对峰面积,得到白术药材的指纹图谱;扫描测定条件为扫描波长330nm;扫描灯:氘灯;测定模式:荧光。
按照上述本发明的方法,在制备供试品溶液时,加水超声提取时的加水量一般不少于5倍生药重量;提取时间一般不少于10min;滤液中加入95%乙醇的量以与水混合后乙醇浓度以体积计一般不小于50%。
按照上述本发明的方法,可得到白术药材的TLC指纹图谱。通过对多批(10批以上)白术药材的TLC色谱图进行比较,确定其共有特征峰,可得到由其共有特征峰构成的白术药材标准指纹图谱。
本发明通过对11批白术药材的TLC色谱图进行比较,确定其共有特征峰,得到了由其共有特征峰构成的白术药材标准指纹图谱。该标准指纹图谱有10个特征峰,各峰Rf值和相对峰面积范围分别为:峰1:0.10,9.58~26.66%;峰2:0.13、1.00~9.10%;峰3:0.19、4.38~14.90%;峰4:0.33、4.30~12.55%;峰5:0.41、12.13~24.32%;峰6:0.50、3.66~9.44%;峰7:0.56、3.13~9.20%;峰8:0.70、15.18~31.24%;峰9:0.84、2.78~8.45%;峰10:0.93、1.28~3.37%。
本发明的优点如下:由于中药具有成分复杂、有效成分不明确的特点,白术药材其成分的研究方面较少,没有一种能够较好地控制其质量的方法。而本指纹图谱的构建,将白术作为一个整体来对待,通过指纹图谱中主要特征峰面积或比例的制定,能有效地用来检测和控制白术的质量,为白术药材质量控制和真伪鉴别提供了一种全新的方法。且本发明具有方法简便可行、直观、稳定、重现性好、易于操作等特点。
下面结合实施例和附图对本发明做进一步的说明。
附图说明
图1是11批白术药材样品的TLC图;
图2是11批白术药材样品薄层扫描三维图谱;
图3是白术药材标准指纹图谱。
具体实施方式
本发明的实施例如下。
1仪器与试药
1.1仪器:CAMAG AUTOMATIC TLC SAMPLER薄层自动点样仪;CAMAG TLCSCANNER 3薄层色谱扫描仪;CAMAG REPROSTAR 3薄层成像系统;CAMAG TLCPLATE HEATER III薄层板加热器;CAMAG双槽展开缸(瑞士CAMAG公司);KQ3200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2试药:白术药材(共11批)由广州中一药业有限公司提供,分别来自于浙江、安徽、江苏等地。经鉴定均系《中国药典》所指定的品种。实验所用试剂均为分析纯。
2白术药材指纹图谱的构建
2.1供试品溶液的制备:分别精密称取每批白术药材粉末(过40目筛)2g,加水20ml,超声提取30min,加95%乙醇34ml,静置过夜,滤过,滤液回收乙醇,至余液约为5ml,移至分液漏斗,用10ml蒸馏水洗涤,洗涤液并入分液漏斗,以乙酸乙酯20ml提取,乙酸乙酯提取液50℃蒸干,乙酸乙酯溶解转移入5ml刻度试管,定容至3ml,作为供试品溶液。
2.2薄层层析:分别精密吸取每批白术药材供试品溶液3μ1点于Merck预制板(20cm×20cm)上,以环己烷-氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂,预饱和20min,展开,取出,晾干,喷以以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。
2.3薄层扫描:扫描波长λ=330nm;扫描灯:氘灯;光束狭缝:5.00mm×0.1mm;扫描速度:25mm/s;测定模式:荧光。得到的11批白术药材样品的TLC图和三维扫描图分别如图1和图2所示。
2.4指纹特征的确定:通过对比11批药材的薄层扫描图,选取1~10号峰作为白术药材的指纹特征峰,构成白术药材的标准指纹图谱(见图3)。
各样品Rf值、相对峰面积见表1~表3。
表1白术样品Rf值
样品 | 峰1 | 峰2 | 峰3 | 峰4 | 峰5 | 峰6 | 峰7 | 峰8 | 峰9 | 峰10 |
1234567891011 | 0.100.100.100.100.090.090.100.100.100.100.10 | 0.130.130.130.130.130.130.130.130.130.130.14 | 0.190.190.190.190.190.190.200.200.190.200.20 | 0.320.320.320.320.320.330.320.330.330.330.34 | 0.390.390.400.410.410.410.410.430.410.420.44 | 0.470.480.470.490.510.510.500.510.510.500.51 | 0.550.540.550.550.560.560.570.580.580.580.59 | 0.690.660.670.680.690.690.700.710.710.720.74 | 0.840.810.820.830.840.830.840.840.850.860.87 | 0.940.930.930.930.930.930.930.930.930.930.94 |
表2白术样品相对峰面积值(%)
样品 | 峰1 | 峰2 | 峰3 | 峰4 | 峰5 | 峰6 | 峰7 | 峰8 | 峰9 | 峰10 |
1234567891011 | 14.8726.6623.7113.429.899.5815.7515.0719.1814.4022.82 | 9.101.003.894.896.485.754.645.054.415.046.37 | 4.388.278.196.696.805.229.1510.9112.5914.2614.90 | 12.554.308.666.4711.738.337.039.407.918.279.61 | 24.3215.2012.1317.4419.6722.9918.0015.2015.3913.9312.75 | 4.063.668.159.406.708.556.718.877.689.447.51 | 4.183.136.747.844.626.536.335.729.206.956.50 | 21.0831.2419.7422.0327.4623.6023.4722.3515.6418.2715.18 | 4.184.695.508.455.296.767.015.685.736.332.78 | 1.281.853.283.371.372.701.901.752.273.111.57 |
表3特征峰Rf值及相对峰面积范围
特征峰 | Rf值 | 相对峰面积(%) |
峰1峰2峰3峰4峰5峰6峰7峰8峰9峰10 | 0.100.130.190.330.410.500.560.700.840.93 | 9.58~26.661.00~9.104.38~14.904.30~12.5512.13~24.323.66~9.443.13~9.2015.18~31.242.78~8.451.28~3.37 |
Claims (2)
1.一种白术药材TLC指纹图谱的构建方法,依次包括以下步骤:
(1).供试品溶液的制备:精密称取自术药材粉末,加水超声提取,滤过,滤液加95%乙醇静置过夜,滤过,回收乙醇,转移至分液漏斗用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯蒸干,转移至刻度试管,定容,作为供试品溶液;
(2).薄层层析:精密吸取供试品溶液,点于硅胶G薄层板上,以体积比为20∶5∶8的环己烷-氯仿-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰;
(3).薄层扫描测定:对薄层斑点进行扫描测定,计算各峰的比移值Rf,并以面积归一化法计算各峰的相对峰面积,得到白术药材的指纹图谱;扫描测定条件为扫描波长330nm;扫描灯:氘灯;测定模式:荧光;
(4).测定10批以上白术药材的TLC色谱图并进行比较,得到由其共有特征峰构成的白术药材标准指纹图谱,该指纹图谱有10个特征峰,各峰Rf值和相对峰面积范围分别为:峰1:0.10,9.58~26.66%;峰2:0.13、1.00~9.10%;峰3:0.19、4.38~14.90%;峰4:0.33、4.30~12.55%;峰5:0.41、12.13~24.32%;峰6:0.50、3.66~9.44%;峰7:0.56、3.13~9.20%;峰8:0.70、15.18~31.24%;峰9:0.84、2.78~8.45%;峰10:0.93、1.28~3.37%。
2.按照权利要求1所述的方法,其特征是:在制备供试品溶液时,加水超声提取时的加水量不少于5倍生药重量;提取时间不少于10min;滤液中加入95%乙醇的量以与水混合后乙醇浓度以体积计不小于50%。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200310111788 CN1246694C (zh) | 2003-10-16 | 2003-10-16 | 白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200310111788 CN1246694C (zh) | 2003-10-16 | 2003-10-16 | 白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1529162A CN1529162A (zh) | 2004-09-15 |
CN1246694C true CN1246694C (zh) | 2006-03-22 |
Family
ID=34304799
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 200310111788 Expired - Fee Related CN1246694C (zh) | 2003-10-16 | 2003-10-16 | 白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1246694C (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101078713B (zh) * | 2007-06-28 | 2010-08-11 | 上海现代中医药技术发展有限公司 | 一种加入内标物的绞股蓝药材指纹图谱检测方法 |
CN101474229B (zh) * | 2007-12-18 | 2012-05-30 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种茵陈配方颗粒及其制备方法和质量控制方法 |
CN102680631B (zh) * | 2012-05-24 | 2014-02-26 | 成都中医药大学 | 一种白术药材的检测方法 |
CN107315062A (zh) * | 2017-08-01 | 2017-11-03 | 安徽九洲方圆制药有限公司 | 一种白术饮片与麸炒白术饮片及其配方颗粒的鉴别方法 |
-
2003
- 2003-10-16 CN CN 200310111788 patent/CN1246694C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1529162A (zh) | 2004-09-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109596751B (zh) | 一种清热养阴活血祛瘀的脉络宁口服液成分检测方法 | |
CN1707260B (zh) | 当归、川芎中药材指纹图谱的建立方法 | |
CN102998411B (zh) | 一种藿香正气滴丸的检测方法 | |
CN105891353A (zh) | 一种痰热清胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
CN109580857A (zh) | 白术特征图谱构建方法和质量检测方法 | |
CN109507311A (zh) | 一种黄芩的鉴定方法及其应用 | |
CN105259295A (zh) | 参枝苓口服液的质量检测方法 | |
CN108896681B (zh) | 一种安神补脑液多指标定量指纹图谱建立方法及其应用 | |
CN101444589A (zh) | 一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法 | |
CN110187041A (zh) | 一种痰热清注射液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
CN109444290A (zh) | 车前草药材uplc特征图谱的构建方法和检测方法 | |
CN1246694C (zh) | 白术药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 | |
CN110579548B (zh) | 一种野菊花药材质量评价方法及应用 | |
CN109765322A (zh) | 荆芥的特征图谱构建方法和质量检测方法 | |
Sun et al. | The quality assessment of compound liquorice tablets by capillary electrophoresis fingerprints | |
CN109991330A (zh) | 一种林下山参的指纹图谱的检测方法 | |
CN104792915B (zh) | 一种巴戟天耐斯糖含量测定方法 | |
CN105510488A (zh) | 一种止痛贴剂的指纹图谱及其质量检测方法 | |
CN107449849A (zh) | 一种中药鉴别方法 | |
CN111796047A (zh) | 热炎宁制剂指纹特征图谱的建立方法及应用 | |
Long et al. | A simple and effective method for identification of Fraxini Cortex from different sources by multi‐mode fingerprint combined with chemometrics | |
CN106153805A (zh) | 一种元胡止痛胶囊指纹图谱的构建方法及其应用 | |
CN1369704A (zh) | 刺五加叶的质量检测方法 | |
CN1931343A (zh) | 冠心七味片质量标准及其检验方法 | |
CN1246695C (zh) | 田基黄药材tlc指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |