CN1237968C - 抑制癌细胞的增殖和诱导其凋亡的方法 - Google Patents

抑制癌细胞的增殖和诱导其凋亡的方法 Download PDF

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Abstract

公开了一种减少腺癌细胞增殖、或者诱导腺癌细胞凋亡、或者诱导腺癌细胞分化成非癌细胞的方法。这样的方法包括，在使化合物有效抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的条件下，使腺癌细胞与该化合物接触。在另一种方法中，该方法包括使腺癌细胞与2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同族物接触。还公开了治疗患者的腺癌的方法。一种方法包括向患者给予一定量的有效抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物。另一种方法包括向患者给予2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同族物。

Description

抑制癌细胞的增殖和诱导其凋亡的方法
本发明在国家癌症协会合同第P50 CA727212号的支持下进行。联邦政府在本发明中具有一定的权力。
                             发明领域
本发明总的涉及减少癌细胞的增殖，或者诱导癌细胞的凋亡，或者诱导癌细胞分化成非癌细胞的方法，本发明还涉及治疗患者的腺癌的方法。
                             发明背景
胰腺癌是是肿瘤学家面对的最神秘和最富侵袭性的恶性肿瘤之一(Parker等人，《癌症统计，1996》(Cancer Statistics)， CA Cancer J.Clin.，46：5-27(1996)(“Parker”)〕。该病现在是导致美国男性和女性的癌症死亡的第四大杀手，它的发病率在过去20年明显增加(Parker；Trede等人，《胰管十二指肠吻合术后的生存：无操作性死亡的118例连续的切除术》(Survival AfterPancreaticoduodenectomy：118 Consecutive Resections Without an OperativeMortality)， Ann.Surg.，211：447-458(1990)；Cameron等人，《没有死亡的145例连续的胰管十二指肠吻合术》(One Hundrand and Forty-five ConsecutivePancreaticoduodenectomies Without Mortality)，Ann.Surg.，217：430-438(1993)；Horward，：《胰腺的腺癌》(Pancreatic Adenocarcinoma)， Curr.Prob.in Cancer，20：286-293(1996)(“Horward”)；Poston等人， Gut.Biology of Pancreatic Cancer，32：800-812(1991)(“Poston”)；以及Black等人，《胰腺癌的治疗：目前的限制，将来的可能性》(Treatment of Pancreatic Cancer：Current Limitations，FuturePossibilities)， Oncology，10：301-307(1996)(“Black”)〕。胰腺癌导致美国每年有27,000位患者死亡。因为缺乏早期的诊断和对胰腺癌的治疗响应性差，所有生存超过5年的患者少于2％，诊断出胰腺癌后的平均寿命期望值少于6个月(Horward、Poston和Black)。
结肠癌是美国第二种最常见的癌症(Doll等人，《相对于吸烟的死亡率：对英国男性医生的20年观察》(Mortality in relation to Smoking：20 years′Observation onMale British Doctors)， BMJ，2：1525-1536(1976)；Hruban等人，《癌症和微小转移的分子诊断》(Molecular Diagnosis of Cancer and Micrometastases)， Adv.Anat. Pathol.，5：175-178(1998)(Hruban“)；Figueredo等人，《完全切除后II期结肠癌的辅助治疗：地方性胃肠道疾病定位组》(Adjuvant Therapy for Stage II Colon CancerAfter Complete Resection.Provincial Gastrointestinal Disease Site Group)， Cancer Prev. Control，1：379-92(1997)(“Figueredo”)；Ness等人，《结肠直肠癌症的结果描述：使用患者病灶组进行的鉴别和描述》(Outcome States of Colorectal Cancer：Identification and Description Using Patient Focus Groups)，Am.J.Gastroenterol.，93：1491-7(1998)(“Ness”)；Trehu等人，《筛选结肠直肠癌的价值：团体质量筛选程序的结果和文献的综述》(Cost of Screening for Colorectal Cancer：Results of aCommunity Mass Screening Program and Review of Literature)，South Med.J.，85：248-253(1992)；和Wingo等人，《癌症统计》(Cancer Statistics》，CA Cancer J.Clin.，45：8-30(1995)(“Wingo”)〕。在美国每年大约有138,000人罹患结肠癌，并且有55,000位患者死亡(Wingo)。达到70％的结肠癌患者在死亡时发展了肝转移，这表明不可检测的微小转移在进行外科手术时即存在(Hruban；Figueredo；和Ness)。此外，转移癌常常对标准的化疗方案无应答，结果导致治疗失败(Figueredo和Ness)。晚期或者不可切除的结肠直肠癌患者对化疗剂的总应答在26-44％之间变化。例如，具有肝转移的结肠直肠癌患者中有少于1/3对诸如5-FU和亚叶酸之类的药物有响应( Id.)。
乳腺癌是女性所患任何癌症中发病率最高的癌症，诊断结果是在美国每年有275,000以上的人患此癌症(Richards等人，《延迟对乳腺癌患者的生存的影响：系统的综述》(Influence of Delay on Survival in Patients with Breast Cancer：ASystemic Review)， Lancet，353：1119-26(1999)；Norton，《辅助性乳腺癌治疗：目前的状况和将来的策略——乳腺癌的生长动力学和改进的药物治疗》(AdjuvantBreast Cancer Therapy：Current Status and future Stratefies——Growth Kinetics andthe Improved Drug Therapy of Breast Cancer)， Semin.Oncol.，26：1-4(1999)；Morrow等人，《目前在乳腺癌处理中的争议》(Current Controversies in Breast CancerManagement)， Curr.Probl.Surg.，36：163-216(1999)；和Ruppert等人，《乳腺癌的基因治疗策略》(Gene Therapy Strategies for Carcinoma of the Breast)， Breast Cancer Res.Treatment，44：93-114(1997)〕。即使5年的生存时间已增加到80％以上，但是每年还是有77,000位以上的女性死于这种疾病( Id.)。
因此，其它的用于胰腺癌、结肠癌和乳腺癌的化疗剂的方向将是非常有利的，尤其是在控制转移和不可切除性疾病方面。
                             发明概要
本发明涉及减少腺癌细胞增殖、或诱导腺癌细胞凋亡、或者诱导腺癌细胞分化成非癌细胞的方法。使含有腺癌细胞的样品在有效抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的条件下与一种化合物接触。
本发明还涉及一种治疗患者的腺癌的方法。该方法包括向患者给予有效抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的一定量的化合物。
本发明还涉及一种减少腺癌细胞增殖、或诱导腺癌细胞凋亡、或诱导腺癌细胞分化成非癌细胞的方法。该方法包括使含有腺癌细胞的样品与具有下式(式I)的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物接触：
Figure C0180932900111
式中，
R1是C1-C5烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)硫代、卤素或R2取代的苯基；
每个R2和R3独立地是氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-S(O)q-、三氟甲基，或者二-(C1-C3烷基)氨基；
X是-O-、-S-、-C(＝O)-，或者是-CH2-；Y是-O-或-CH2-；或者，当它们连在一起时，-X-Y-是-CH＝CH-或-C≡C-；
Z是直链或支链C1-C10亚烷基；
A是一个键、-O-、-S-、-CH＝CH-或者-CRaRb-，其中各个Ra和Rb独立地是氢、C1-C5烷基，或者是R7取代的苯基；或者当Ra和Rb与和它们所连接的碳原子连在一起时，形成C4-C8的环烷基环；
R4是R6，或者R4是具有下述式子之一的部分：
Figure C0180932900121
或
Figure C0180932900122
和
式中：
各R6独立是-COOH、5-四唑基、-CON(R9)2，或者-CONHSO2R10；
各R7是氢、C1-C4烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、苄基、甲氧基、-W-R6、-T-G-R6、(C1-C4烷基)-T-(C1-C4亚烷基)-O-，或者是羟基；
R8是氢或卤素；
各R9独立是氢、苯基，或者是C1-C4烷基；或者当R9与和它所连接的氮原子连在一起时，形成吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基或吡烷子基；
R10是C1-C4烷基，或者是苯基；
R11是R2、-W-R6，或者是-T-G-R6；
各W是一个键，或者是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各G是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各T是一个键、-CH2-、-O-、-NH-、-NHCO-、-C(＝O)-，或者是-S(O)q-；
K是-C(＝O)-或-CH(OH)-；
各q独立是0、1或2；
p是0或1；
t是0或1；
条件是，当X是-O-或-S-时，Y不是-O-；
另一条件是，当A是-O-或-S-时，R4不是R6；
还有一个条件是，当A是-O-或-S-，且Z是键时，Y不是-O-；
又一条件是，当p是0时，W不是键。
本发明还涉及一种治疗患者腺癌的方法。该方法包括向患者给予治疗有效量的式I的化合物，或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
                           附图的简短描述
图1A和1B是显示LTB4受体拮抗剂LY293111对胸苷掺到MiaPaCa-2胰腺癌细胞系中的浓度依赖性抑制(图1A)和随时间变化的效果(图1B)的柱形图。结果表示为对照的百分比；与对照相比，*＝p＜0.05，**＝p＜0.01，***＝p＜0.001；数据代表从四组分别的试验得到的结果。
图2显示LY293111对MiaPaCa-2胰腺癌细胞中的细胞数的随时间变化的效果。用500nM LY293111处理细胞24、48和72小时，结果(实线，■)表示为相对细胞数/孔。图中也给出对照数据(虚线，▲)。与对照相比，*＝p＜0.05，**＝p＜0.01，***＝p＜0.001；数据代表从四组分别的试验得到的结果。
图3A-3D是相差显微成像图。图3B显示相对于对照MiaPaCa-2胰腺癌细胞(图3A)，250nM LY293111在MiaPaCa-2胰腺癌细胞中12小时后诱导的形态学上变化。图3D显示与对照的LoVo结肠癌细胞相比(图3C)，250nM LY293111在LoVo结肠癌细胞中诱导的形态学上的变化。
图4A和4B是显示LTD4拮抗剂LY171883的不同浓度对胸苷掺到胰腺癌细胞系MiaPaCa-2(图4A)和HPAF(图4B)48小时后产生的影响的柱形图。结果表示为对照的百分比；与对照相比，*＝p＜0.05，**＝p＜0.01，***＝p＜0.001；数据代表从四组分离的试验得到的结果。
图5A是显示不同浓度的LTN4在24小时后对胸苷掺入MiaPaCa-2细胞中所产生的影响的柱形图。图5B和5C是显示100nM LTB4在24、48和72小时对胸苷掺入MiaPaCa-2细胞(图5B)和HPAF(图5C)产生的影响的柱形图。胸苷掺入的结果表示为cpm；与对照相比，*＝p＜0.05，**＝p＜0.01，***＝p＜0.001；数据代表从四组分别的试验得到的结果。
图6A和6B是显示250nM LY293111对100nM LTB4在24小时后对胰腺癌细胞MiaPaCa-2(图6A)和HPAF(图6B)的刺激性影响所产生的影响的柱形图。结果表示为对照的百分比；与对照相比，*＝p＜0.05，**＝p＜0.01，***＝p＜0.001；数据代表从四组分别的试验得到的结果。
图7是琼脂糖凝胶电泳图，它显示反映了LY293111诱导的MiaPaCa-2细胞中的凋亡的DNA片段化作用。细胞用250、500进而1000nM LY293111处理48小时。在1.8％琼脂糖上分离总的细胞DNA，用溴乙锭染色使其显像。结果是三个分别试验的代表。
图8A-8C是显示用250nM(图8B)和500nM(图8C)LY293111处理48小时的MiaPaCa-2胰腺癌细胞的TUNEL试验结果的点型图，图8A是对照。右上象限中荧光事件的增加是由于破碎的DNA被UTP标记的缘故，这些结果是三个分别试验的代表。
图9A-9F是显示LY293111对胰腺癌和结肠癌细胞系的增殖的影响的柱形图。图9A、9C和9D显示LY293111分别对胰腺癌细胞系MiaPaCa2、HPAF和Capan2产生的剂量影响。图9B显示LY293111对胰腺癌细胞系MiaPaCa2的时间依赖性影响。图9E和9F显示0.5μM LY293111对作为时间的函数的胰腺癌细胞系MiaPaCa2细胞数(图9E)和结肠癌细胞系LoVo细胞数(图9F)的影响。
图10A和10B是western印迹图，它们分别显示LTB4和LY293111对Bcl-2在MCF-7乳腺癌细胞中的表达的影响。
图11是外源移植了人胰腺癌细胞系AsPc-1的无胸腺小鼠的肿瘤体积图，该体积是口服LY293111(▲)的治疗时间和对照(●)的治疗时间的函数。
                           发明的详细描述
本发明涉及一种减少腺癌细胞的增殖、或者诱导腺癌细胞的凋亡、或者诱导腺癌细胞分化成非癌细胞的方法。该方法包括使包含腺癌细胞的样品与抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合的化合物接触。
“抑制”及其其它形式(如抑制的)包括任何程度的抑制作用(如，约5％以上，约10％以上，约20％以上，约30％以上，约40％以上，约50％以上，约60％以上，约70％以上，约80％以上，约90％以上，约95％以上，约98％以上，约99％以上)以及包括完全的阻止(100％抑制)。
抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合的机制对于本发明的实践并不是特别关键。抑制可以是直接的，如化合物直接干扰了白三烯B4与白三烯B4受体的结合的例子(如，通过直接与白三烯B4受体直接结合，如下文所详细描述的)，或者抑制是间接的，如化合物干扰白三烯B4和/或白三烯B4受体的产生的例子，下文将有详细的描述。
例如，化合物可通过与白三烯B4受体结合而抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合。较佳的是，化合物与白三烯B4受体的结合是特异性的，即该化合物基本上不与样品中存在的其它生物物质结合。例如，较佳的是化合物对白三烯B4受体的IC50大于该化合物对样品中所有其它生物材料的IC50的约1.1倍，更佳的是大于约1.5倍，还更佳的是大于约2倍，仍更佳的是大于约5倍，仍更佳的是大于约10倍。虽然即使在化合物与白三烯B4受体的结合程度小于白三烯B4与白三烯B4受体的结合(即IC50较低)时，也可在某些情况下获得所需的效果，但是化合物与白三烯B4受体的结合程度较佳是大于白三烯B4与白三烯B4受体的结合(即有较大的IC50)。
“结合”在本文中包括不可逆的结合和可逆的结合。结合可以是热力学的力(如有利的平衡常数)或动力学因素(如，有利的开/关比例常数)作用的结果，也可以是化学相互作用(如共价结合、离子结合、氢键、范德华力、螯合、π-δ键，和/或π-π键)或物理相互作用(如表面现象、俘获等)的结果。化合物与结合配体的“结合”(如化合物与白三烯B4受体的结合)在本文中还包括化合物与其结合配体的任何相互作用，这种相互作用导致该结合配体完成其生理功能的能力下降。例如，对于结合配体是白三烯B4受体的例子，化合物与白三烯B4受体的“结合”包括该化合物与白三烯B4受体间的任何相互作用或相互作用的组合，其结果是使白三烯B4受体中产生物理的、化学的和/或其它的变化，这种变化反过来使白三烯B4受体与白三烯B4结合的能力下降。
可使用各种化合物，通过它们与白三烯B4受体的结合来抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合。这类化合物的例子包括具有下式的那些化合物(“式I”)或其药学上可接受的盐或其溶剂合物：
R1是C1-C5烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)硫代、卤素或R2取代的苯基；每个R2和R3独立地是氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-S(O)q-、三氟甲基，或者是二-(C1-C3烷基)氨基；X是-O-、-S-、-C(＝O)-，或者是-CH2-；Y是-O-或-CH2-；或者，当它们连在一起时，-X-Y-是-CH＝CH-或-C≡C-。Z是直链或支链C1-C10亚烷基。A是一个键、-O、-S-、-CH＝CH-或者-CRaRb-，其中各个Ra和Rb独立地是氢、C1-C5烷基，或者是R7取代的苯基；或者当Ra和Rb与和它们所连接的碳原子连在一起时，形成C4-C8的环烷基环。R4是R6，或者R4是具有下述式子中的一个的部分：
Figure C0180932900171
或
Figure C0180932900172
式中：
各R6独立是-COOH、5-四唑基、-(CON(R9)2，或者-CONHSO2R10。各R7是氢、C1-C4烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、苄基、甲氧基、-W-R6、-T-G-R6、(C1-C4烷基)-T-(C1-C4亚烷基)-O-，或者是羟基。R8是氢或卤素。各R9独立是氢、苯基，或者是C1-C4烷基；或者当R9与和它所连接的氮原子连在一起时，形成吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基或吡烷子基。R10是C1-C4烷基，或者是苯基。R11是R2、-W-R6，或者是-T-G-R6。各W是一个键，或者是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基。各G是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基。各T是一个键、-CH2-、-O-、-NH-、-NHCO-、-C(＝O)-，或者是-S(O)q-。K是-C(＝O)-或-CH(OH)-。各q独立是0、1或2；p是0或1；t是0或1。较佳的是，当X是-O-或-S-时，Y不是-O-；当A是-O-或-S-时，R4不是R6；当A是-O-或-S-，且Z是键时，Y不是-O-；当p是0时，W不是键。术语“C1-C6烷基”指含1-6个碳原子的直链和支链脂族基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2，2-二甲基丙基、己基等。包括在这个定义内的术语是“C1-C3烷基”、“C1-C4烷基”、和“C1-C5烷基”。术语“C2-C5链烯基”指含一个双键含2-5个碳原子的直链和支链脂族基团，如-CH＝CH2、-CH2-CH＝CH2、-CH2-CH2-CH＝CH2、-CH-C(CH3)＝CH2、-CH2-CH＝C(CH3)2等等。术语“C2-C5炔基”指含有一个三键含2-5个碳原子的直链或支链脂族残基，如-C≡CH、-CH2-C≡CH、-CH2-CH2-C≡CH、-CH2-CH(CH3)-C≡CH、-CH2-C≡C-CH3等等。术语“C1-C4烷氧基”指如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。术语“卤素”指如氟、氯、溴和碘。术语“C1-C10亚烷基”指从C1-C10烷烃衍生得到的二价基团，如-CH2-、-CH(CH3)-、-C(CH3)2-、-CH(C2H5)-、-CH2-CH2-、-CH2-CH(CH3)-、-CH(CH3)-CH2-、-CH(CH3)-CH(CH3)-、-CH2-CH(C2H5)-、-CH2-CH2-CH2-、-CH(CH3)-CH2-CH2-、-CH2-CH(CH3)-CH2-、-CH2-CH(C2H5)-CH2-、-CH2-CH2-CH(C2H5)-、-C(CH3)2-CH2-CH2-、-CH(CH3)-CH2-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-CH2-、-CH2-C(CH3)2-CH2-CH2-、-CH2-C(CH3)2-CH2-、-CH2-CH2-CH(C2H5)-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-、-CH(CH3)-CH2-CH2-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-、-(CH2)10-等。包括在这个定义内的术语有“C1-C4亚烷基”和“C2-C4亚烷基”。术语“C4-C8环烷基”指含4-8个碳原子的环烷基，如环丁基、环戊基、环己基、4，4-二甲基环己基、环庚基、环辛基等。术语“含1-8个碳原子的直链或支链二价烃基残基”指从含1-8个碳原子的直链或支链烷烃、烯烃或炔烃衍生得到的二价基团。根据分支和碳原子的数目，有机化学家将理解，这样的部分可含有一个、两个或三个双键或三键，或者两者的组合。这样，这个术语可认为是上述定义的含有1-8个碳原子，并任选地含有一个到三个双键或三键或两种键的组合(其限定如前面的句子所述)的亚烷基。
如上述，也可使用式I的化合物的药学上可接受的碱加成盐。这类盐包括从无机碱衍生得到的盐，如铵和碱金属和碱土金属氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等等，以及从碱性有机胺衍生得到的盐，如脂族胺和芳族胺、脂族二胺、羟基烷基胺等。因此，在制备用于本发明的实践的盐中使用的这些碱包括氢氧化铵、碳酸钾、碳酸氢纳、氢氧化钙、甲胺、二乙胺、乙二胺、环己胺、乙醇胺等。特别优选钾盐和钠盐形式。
本发明包括使用单盐形式和二盐形式，前者即1∶1的式I化合物和先前所述的碱，而在后一种形式的那些物质中，式I的化合物具有两个酸性基团。此外，本发明的方法可使用式I的化合物或其盐的溶剂合物的形式进行，如乙醇溶剂合物、水合物等。
认识到在具有支链烷基、亚烷基或烃基官能度的化合物中，以及那些具有双键或三键的化合物中，可能存在各种立体异构产物。本发明的方法并不限于任何具体的立体异构体，而包括所有可能的单独异构体及其混合物。术语“5-四唑基”指两种互变异构体，即(1H)-5-四唑基和(2H)-5-四唑基。
可用于本发明方法的实践的阐述性化合物包括2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸、3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-6-(4-羧基-苯氧基)苯基)丙酸、1-(4-(羧基-甲氧基)苯基)-1-(1H-四唑-5-基)-6-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)己烷、3-(4-(7-羧基-9-氧代-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)-9H-呫吨))丙酸、5-(3-(2-(1-羰基)-乙基)-4-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯基)-4-戊炔酸、其药学上可接受的盐或溶剂合物、或这些化合物的组合、盐、和/或溶剂合物。较佳的是，本发明使用2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物进行。
可采用已经建立的方法合成式I的化合物，如Baker等人的美国专利第5,462,954号和Fleisch等人的美国专利第5,910,505号中所述的那些方法，本文将这些专利纳入作为参考。
可通过它们自身与白三烯受体的结合来抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的其它化合物包括其它的白三烯B4受体拮抗剂，如下述文献中所述的那些拮抗剂：Fleisch等人的美国专利第5,998,454号；Fleisch等人的美国专利第5,914,340号；Fleisch等人的美国专利第5,817,864号；Anderskewitz等人的美国专利第6,037,377号；Perchonock等人的《一系列5-芳基4，6-二硫杂壬二酸(dithianonanedioic)和相关的化合物的合成和结构活性关系研究：一类新的白三烯拮抗剂》(Synthesisand Structure-Activity Relationship Studies of a Series of 5-Aryl-4，6-dithianonanedioicAcids and Related Compounds：A Novel Class of Leukotriene Antagonists)， J.Med. Chem.，29：1442-1452(1986)；Gleason等人，《与编者的联系》(Communication tothe Editor)，J.Med.Chem.，30：959-961(1987)；Konno等人，《一系列的作为一类新的白三烯B4拮抗剂的取代的苯基丙酸的合成和结构活性研究》(Synthesis andStructure-activity Relationships of a Series of Subsitituted-phenylpropionic acids as aNovel Class of Leukotriene B4 Antagonists)”， Adv.Prosraglandin Thromboxane Leukot. Res.，21A：411-414(1991)；Daines等人，《(E)-3-[[[[6-(2-羰基乙烯基)-5-[[8-(4-甲氧基苯基)辛基]氧基]-2-吡啶基]-甲基]硫代]甲基]苯甲酸：一种新颖的高亲和力白三烯B4受体拮抗剂》((E)-3-[[[[6-(2-carboxythenyl)-5-[[8-(4-methoxyphenyl)octyl]oxy]-2-pyridinyl]-methyl]thio]methyl]benzoic Acid：A NovelHigh-affinity Leukotriene B4 Receptor Antagonist)，J.Med.Chem.，36(18)：2703-2705(1993)(已出版的勘误出现在J.Med.Chem.，36(25)：4130(1993)；Showell等人，《有利的和选择性的白三烯B4拮抗剂CP-195543的临床前药物学特征》(ThePreclinical Pharmacological Profile of the Potent and Selective Leukotriene B4Antagonist CP-195543)，J.Pharmacol.Exp.Ther.，285(3)：346-954(1998)；和Hullot等人，《新颖的白三烯B4受体拮抗剂(1S*，3S*)-1-羟基-3-[(3R*S*，E)-3-羟基-7-苯基-1-庚-1-基]-1-环己烷醋酸钠的合成和生化/药物学特性》(Synthesis andBiochemical/Pharmacological Profile of the Novel Leukotriene B4 Receptor AntagonistSodium(1S*，3S*)-1-hydroxy-3-[(3R*S*，E)-3-hydroxy-7-phenyl-1-heten-1-yl]-1-cyclohexane acetate)， Arzneimittelforschung，47(1)：51-58(1997)，本文将这些文献纳入作为参考。
可通过与白三烯B4受体结合来抑制白三烯B4由白三烯B4受体的结合的其它化合物包括抗体(单克隆或多克隆的)以及肽药物，如识别并与白三烯B4受体结合的拟表位(mimotope)。制备和使用这类抗体和拟表位的方法对于本领域熟练的技术人员来说是已知的，这些方法将在下面涉及制备识别白三烯A4水解酶并与其结合的抗体和拟表位的内容中进行描述。
或者，可使用与白三烯B4结合的化合物，以形成如不能与白三烯B4受体结合的复合物，从而抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合。较佳的是，该化合物与白三烯B4的结合是特异性的，即该化合物基本上不与样品中存在的其它生物材料结合。例如，较佳的是该化合物与白三烯B4的IC50大于该化合物与样品中的其它生物材料的IC50的约1.1倍，更佳的是大于约1.5倍，还更佳的是大于约2倍，仍更佳的是大于约5倍，仍更佳的是大于约10倍。虽然即使在化合物与白三烯B4受体的结合程度小于白三烯B4与白三烯B4受体的结合(即IC50较低)时，也可在某些情况下获得某些效果，但是化合物与白三烯B4受体的结合程度较佳是大于白三烯B4与白三烯B4受体的结合(即有较大的IC50)。
或者，可通过抑制白三烯B4的生产而抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合。例如，可通过抑制白三烯B4合成途径中的一个或多个步骤抑制白三烯B4的产生。
例如，该化合物可以是抑制白三烯A4转变为白三烯B4的化合物。
举个例，可通过使样品和与白三烯A4结合的化合物接触，形成如不受或不易于被白三烯A4水解酶水解的复合物，从而抑制白三烯A4向白三烯B4转变。
再举一例，可通过使样品与抑制白三烯A4水解酶的活性的化合物接触，从而抑制白三烯A4向白三烯B4转化。
本领域熟练的技术人员将理解，使样品与结合白三烯A4水解酶的化合物接触，可抑制白三烯A4水解酶的活性。这种白三烯A4水解酶抑制剂可以是传统的小分子或其药学上可接受的盐。这类白三烯A4水解酶抑制剂的例子包括3-环氧乙基苯甲酸及其衍生物；Rhone-Poulenc Roere RP-64996；2-氨基-3-苯基丙烷衍生物，如(2S)-2-氨基-3-苯基丙基硫醇、2-氨基-3-(4′-苄基氧基)苯基丙基硫醇和盐酸(2S)-3-(4-(2-萘基甲基氧基)苯基)-1，2-二氨基-丙烷及其相应的4′-苄氧基衍生物。其它白三烯A4水解酶抑制剂的例子在下述文献中描述：如，Djuric等人的美国专利第5990326号；Isakson等人的美国专利第5990148号；Yuan等人的美国专利第5445271号；国际专利出版WO96/11192和WO96/1099；Evans等人，Prostaglandins，Leukotrienes and Medicine，23：167-171(1986)；Yuan等人，《大鼠中白三烯A4水解酶抑制剂SC-57461的代谢物的分离和鉴别》(Isolation and Identification ofMetabolites of Leukotriene A4 Hydrolase Inhibitor SC-57461 in Rats)， Drug Metab. Dispos.，24(10)：1124-1133(1996)；Tsuji等人，《白三烯A4水解酶抑制剂SA6541以及吲哚美辛对角叉菜聚糖诱导的鼠皮炎的影响》(Effects of SA 6541，aLeukotriene A4 Hydrolase Inhibitor，and Indomethacin On Carrageenan-inducedMurine Dermatitis)， Eur.J.Pharmacol.，346(1)：81-85(1998)：Penning等人，《一种有力的白三烯A(4)(LTA(4))水解酶抑制剂1-[2-(4-苯基苯氧基)乙基]吡咯烷(SC-22716)的结构-活性关系研究》(Structure-activity Relationship Studies On 1-[2-(4-Phenylphenoxy)ethyl]pyrrolidine(SC-22716)，a Potent Inhibitor of Leukotriene A(4)(LTA(4))Hydrolase)， J.Med.Chem.，43(4)：721-735(2000)，本文在此将这些文献纳入作为参考。
白三烯A4水解酶抑制剂也可成肽药物产品的形式。通常可参见Bevan等人，Trends in Biotechnology，13(3)：115-121(1995)；Sepetov等人， Proc.Natl.Acad.Sci. USA，92：5426-5430(1995)；O′Connor等人， Cancer Chemother.Pharmacol.，34：225-229(1994)；和Webber等人， J.Med.Chem.，36：733-746(1993)，本文在此将它们纳入作为参考。
可采用本领域已知的各种方法制备药物，如肽药物。一种方法是利用表位库的发展和噬菌体库的生物淘选技术(biopanning)。简言之，为限定各种单克隆抗体的结合位点作出的努力已使表位库得到发展。Parmley等人， Gene，73：305-318(1988)(“Parmley”)描述了可在其表面上显示外来表位的噬菌体表达载体，本文在此将其纳入作为参考。这种载体可用于构建大的噬菌体集合，这个集合实际上可包括一条短肽(如6个氨基酸)的所有可能的序列。Parmley还描述了生物淘选技术，这是一种使用特异性的抗体根据亲和力来纯化那些显示外来表位的噬菌体的方法，本文将此文纳入作为参考。例如还可参见Parmley；Cwirla等人， Proc.Natl. Acad.Sci.USA，87：6378-6382(1990)；Scott等人， Science，249：386-390(1990)；Christian等人， J.Mol.Biol.，227：711-718(1992)；和Smith等人， Methods in Enzymology，217：228-257(1993)(“Smith”)，本文将这些文献纳入作为参考。
在发展了表位库后，Smith建议使用Parmley的噬菌体表达载体和生物淘选技术来鉴别给定长度的所有可能的序列的表位也应该是可能的，本文在此将这两篇文献纳入作为参考。这就产生了通过生物淘选表位库鉴别抗体的表位配体的想法，这种想法可用于疫苗设计、表位绘图、基因鉴别以及其它的应用中(Parmley；和Scott， Trends in Biochem.Sci.，17：241-245(1992)，本文将其纳入作为参考〕。
使用表位库和生物淘选技术，搜索表位序列的研究者发现了模拟该表位的非肽序列，即不识别连续的线性天然序列或根本没必要出现在天然的蛋白质序列中的序列。这些模拟的肽称为拟表位(mimotope)。以这种方法，已发现各种结合位点/蛋白质的拟表位。LaRocca等人， Hybridoma，11：191-201(1992)描述了人乳腺上皮粘蛋白串联重复子在大肠杆菌中的表达，本文将其纳入作为参考。Balass等人， Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90：10638-10642(1993)(“Balass”)鉴别了模拟乙酰胆碱受体的构象依赖性结合位点的六肽，本文在此将该文纳入作为参考。Hobart等人，Proc.R.Soc.London.B，252：157-162(1993)公开了模拟C6表位(补体的第6种成分的表位)的拟表位的分离，本文将该文纳入作为参考。
从定义上来说，这些和其它拟表位的序列并不识别连续的线性天然序列或不总是以任何方式出现在天然的分子，如天然的蛋白质中。拟表位的序列仅仅形成在功能上模拟天然蛋白质上的结合位点的肽。例如，Balass描述的拟表位模拟乙酰胆碱受体的结合位点。
许多这些拟表位是短肽。可采用本发明的方法开发易于大量合成并可模拟天然序列(即结合位点)的短肽。
例如，采用本技术，可鉴别针对识别白三烯A4水解酶的单克隆抗体的拟表位。这些拟表位的序列代表可在随后用于各种用途中的短肽，如用作结合白三烯A4水解酶并减少该酶的活性的肽药物。一旦测定了该拟表位的序列，即可化学合成这些肽药物。
针对白三烯A4水解酶的抗体代表用于抑制白三烯A4向白三烯B4转化的另一类化合物，这类化合物通过抑制白三烯A4水解酶的活性而抑制这种转化。“抗体”在本文中包括抗体片段，如Fab、Fab2和Fd片段，以及其人源化形式。可采用本发明已知方法中的一种产生人源化形式的抗体，如嵌合作用(chimerization)。抗体与白三烯A4水解酶结合，降低了其活性。合适的抗体包括多克隆抗体和单克隆抗体。
可使用杂交瘤生产与白三烯A4水解酶结合的单克隆抗体。杂交瘤是无限繁殖的细胞系，它能分泌一种特殊的单克隆抗体。
总之，制备多克隆抗体和单克隆抗体以及能生产所需抗体的杂交瘤的技术在本领域中是周知的。例如可参见：Campbell，《单克隆抗体技术：生物化学和分子生物学中的实验技术》(Monoclonal antibody Technology：Laboratory Techniques inBiochemistry and Molecular Biology)，Amsterdam，荷兰：Elsevier SciencePubilshing(1984)(“Campbell”)；和St.Groth等人， J.Immunol.Methods.，35：1-21(1980)，本文将它们纳入作为参考。可用抗原性白三烯A4水解酶(或其抗原性片段)免疫已知其能产生抗体的任何动物(小鼠、兔等)。免疫的方法在本领域中是已知的。这些方法包括皮下或腹膜内注射该酶。本领域熟练的技术人员将认识到，用于免疫的酶的量将根据所免疫的动物、酶的抗原性以及注射位点而改变。
为了增强用作免疫原的酶的抗原性，可将其修饰，或者将其加到佐剂中后再给药。增强酶的抗原性的方法在本领域中是周知的，包括但不限于使酶与异源的蛋白质(如球蛋白或β-半乳糖苷酶)偶联，或者在免疫时使用佐剂。
对于单克隆抗体，从经免疫的动物取出脾细胞，使其与骨髓瘤细胞如SP2/O-Ag15骨髓瘤细胞融合，然后使其成为产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
可采用本领域已知的大量方法中的任何一种来鉴别产生具有所需的特性的抗体的杂交瘤细胞。这些方法包括使用如ELISA检测、western印迹分析或放射性免疫检测来筛选杂交瘤。例如可参见Lutz等人，Exp.Cell Res.，175：109-124(1988)，本文将该文纳入作为参考。
将分泌所需抗体的杂交瘤克隆，采用本领域已知的方法测定其类别和亚类，这些方法如Campbell中所述的方法，本文将该文纳入作为参考。
对于多克隆抗体，从经免疫的动物中分离出含有抗体的抗血清，然后采用一种上述方法对具备所需特性的抗体的存在进行筛选。
阐述性地说，可通过使样品与编码白三烯A4水解酶的核酸分子结合，从而降低白三烯A4水解酶的表达的核酸化合物接触，从而抑制白三烯A4向白三烯B4转化。
合适的核酸分子包括，如反义核酸分子和核酶。反义核酸分子与编码白三烯A4水解酶的mRNA的至少一部分互补。白三烯A4水解酶的核酸序列和氨基酸序列是已知的。例如可参见：Medina等人，《小鼠白三烯A-4水解酶cDNA的分子克隆和表达》(Molecular Cloning and Expression of Mouse Leukotriene A-4Hydralse cDNA)， Biochem.Biophys.Res.Commun.，176：1516-1524(1991)；Minami等人，《编码人白三烯A-4水解酶的cDNA的分子克隆：类二十烷酸合成中涉及的酶的完整的一级结构》(Molecular Cloning of a cDNA Coding for HumanLeukotriene A-4 Hydrolase：Complete Primary Structure of an Enzyme Involved inEicosanoid Syhtnesis)， J.Biol.Chem.，262：13873-13876(1987)；Funk等人，《白三烯水解酶的分子克隆和氨基酸序列》(Molecular Cloning and Amino Acid Sequenceof Leukotriene Hydrolase)， Proc.Natl.Acad.Sci.USA，84：6677-6681(1987)；Mancini等人，《人白三烯A4水解酶基因的克隆和表征》(Cloning and Characterization of theHuman Leukotriene A4 Hydrolas Gene)， Eur.J.Biochem.，231(1)：65-71(1995)；Makita等人，《采用聚合酶链式反应进行大鼠白三烯A4水解酶的分子克隆和功能表达》(Molecular Cloning and Functional Expression of Rat Leukotriene A4 Hydrolase Usingthe Polymerase Chain Reaction)， FEBS Lett.，293(3)：273-277(1992)；Genbank登记号M63848(小鼠mRNA和氨基酸序列)，GenBank登记号J03459、J02959和U27293(人mRNA和氨基酸序列)；GenBank登记号S87522(大鼠mRNA和氨基酸序列)，本文将这些文献纳入作为参考。反义核酸分子可以是RNA或单链DNA，也可以与编码白三烯A4水解酶的整个mRNA分子(即核苷酸长度与完整的分子相同)互补。但是，可能更希望使用较短的分子。在这个例子中，反义分子可与编码白三烯A4水解酶的完整mRNA分子的一部分互补。这些较短的反义分子能与编码该完整的分子的mRNA杂交，并且较佳的是，这些分子由至少15个核苷酸到约100个以内核苷酸组成。可使这些反义分子与具有与白三烯A4水解酶的mRNA的至少一部分互补的RNA或单链DNA分子的细胞接触(如将反义分子引入样品中)，从而降低白三烯A4水解酶的水平。反义分子可与白三烯A4水解酶的mRNA发生碱基配对，阻止mRNA翻译成蛋白质。因此，针对白三烯A4水解酶的反义分子可阻止编码白三烯A4水解酶的mRNA翻译成功能性白三烯A4水解酶，从而减少细胞中白三烯A4水解酶的活性。
可采用任何合适的方法使反义分子与细胞接触。根据本发明的方法，所述细胞是腺癌细胞，如前列腺癌细胞、肺癌细胞、胃癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞和胰腺癌细胞。在一个实施例中，通过将反义ENA分子直接注射到细胞质中，而使该分子与细胞接触，在胞质中该RNA分子干扰了翻译。也可使用载体将反义分子引入细胞中。这些载体包括如各种质粒和病毒载体。还可使用脂质体将反义分子引入细胞中。对于反义分子及其用途的概括性讨论，可参见Han等人， Proc. Natl.Acad.Sci.USA，88：4313-4317(1991)(“Han”)；和Rossi， British Medical Bulletin，51(1)：217-225(1995)，本文将这些文献纳入作为参考。
还可使用一类特殊的反义RNA分子来抑制A4水解酶的活性，这类分子即已知的核酶，它们具有与编码白三烯A4水解酶的mRNA的特殊区域互补的识别序列。核酶不仅仅通过互补反义序列与靶序列复合，它还催化模板mRNA分子的水解或断裂。
核酶在细胞中的表达可抑制基因的表达(如白三烯A4水解酶的表达)。更具体而言，具有与编码白三烯A4水解酶的mRNA的特殊区域互补的识别序列的核酶可用于减少白三烯A4水解酶的表达。选择具有第一表达水平的白三烯A4水解酶的细胞，然后将核酶引入该细胞。该核酶在该细胞中减少该细胞白三烯A4水解酶的表达，这通常是由编码白三烯A4水解酶的mRNA被解离因而不能翻译引起。
根据本发明方法，可采用任何合适的方法使核酶与癌细胞接触。例如，可直接将核酶注射到细胞质中，在那里核酶切断mRNA，从而干扰翻译过程。或者，可使用载体将核酶引入细胞。这类载体包括各种质粒和病毒载体。在此，应注意的是，编码核酶的DNA不需要被掺入宿主细胞的基因组中；反之，例如，编码核酶的DNA分子可在被病毒载体感染的宿主细胞中与表达该核酶的载体表达。还可使用脂质体将核酶分子引入细胞。对于核酶及其用途的概括性讨论，可参见如Chrisey等人， Antisense Research and Development，1(1)：57-63(1991)；Rossi等人， AIDS Research and Human Retroviruses，8(2)：183-189(1992)；和Christoffersen等人， Journal of Medicinal Chemistry，38(12)：2023-2037(1995)，本文将这些文献纳入作为参考。
如上所述，转化细胞的一些方法最好是使用中间质粒载体进行。Cohen等人的美国专利第4237224号(本文在此将其纳入作为参考)描述使用限制酶切割和DNA连接酶连接产生重组质粒的形式的表达系统。然后通过转化将这些重组质粒引入，并使它们在含有在组织培养物中生长的原核生物和真核生物细胞的单细胞培养物中复制。采用本领域已知的标准克隆方法将该DNA序列克隆到质粒载体中，如Sambrook等人，《分子克隆——实验室手册》(Molecular Cloning：A LaboratoryManual)，第二版，Cold Spring Harbor，纽约：Cold Spring Harbor LaboratoryPress(1989)，本文在此将该文纳入作为参考。
如上所述，可通过将反义构建物或核酶构建物引入细胞中，从而降低腺癌细胞如前列腺癌细胞、肺癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞或胰腺癌细胞中白三烯A4水解酶的水平。反义构建物阻断编码白三烯A4水解酶的mRNA翻译成白三烯A4水解酶。核酶构建物将编码白三烯A4水解酶的mRNA切割，因而也阻止功能性白三烯A4水解酶的表达。为了减低白三烯A4水解酶的体内表达，可利用各种基因治疗技术将反义构建物或核酶构建物引入所需的细胞中。可能需要采用已知的方法将该构建物靶向该所需的细胞(如前列腺癌细胞、肺癌细胞、胃癌细胞、胰腺癌细胞、结肠癌细胞或乳腺癌细胞)，因为在患者的其它细胞中，白三烯A4水解酶表达的减少可能不是需要的。
如上所述，通过抑制白三烯B4的产生，可抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合。上面还提到，通过如抑制白三烯B4合成途径中的一个或多个步骤，可抑制白三烯B4的产生。抑制白三烯B4合成途径的另一方法涉及抑制白三烯A4的产生，例如，使腺癌细胞样品与5-脂氧化酶抑制剂接触，从而实现抑制。5-脂氧化酶抑制剂在本文中指直接或间接抑制5-脂氧化酶的活性的任何化合物。这类5-脂氧化酶抑制剂的例子包括5-脂氧化酶激活蛋白的抑制剂〔如，3-(1-(4-氯苄基)-3-叔丁基-硫代-5-异丙基-2-基)-2，2-二甲基丙酸和/或去甲二氢愈创木酸〕，以及使5-脂氧化酶表达减少的核酸分子。关于这些化合物的进一步描述在申请人的未授权美国专利申请系列号09/111343中讨论到，本文将其纳入作为参考。
或者，可使用抑制白三烯B4与白三烯B受体的结合，但不抑制白三烯A4的生产的化合物实施本发明的方法。例如，可使用不是5-脂氧化酶抑制剂、不是5-脂氧化酶-激活蛋白抑制剂、不是3-(1-(4-氯苄基)-3-叔丁基-硫代-5-异丙基-2-基)-2，2-二甲基丙酸和/或不是去甲二氢愈创木酸的抑制剂的化合物实施本发明的方法。
如上所述，使用抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物实施本发明。通过减少白三烯B4受体的表达，可实施这种方法，或者或除此之外的上述各种方法。上面讨论的关于减少白三烯A4水解酶表达的方法在此同样可以应用。更具体而言，所述化合物可以是与编码白三烯B4受体的核酸分子结合的核酸分子，如靶向编码白三烯B4受体的核酸分子的反义核酸分子和核酶。可用来设计适当的反义核酸分子和核酶的白三烯B4受体的核酸和氨基酸序列在下述文献中公开：如Martin等人，《小鼠和人白三烯B4受体转染的细胞中HIV共受体功能的白三烯结合、发信号和分析》(Leukotriene Binding，Signaling，and Analysis if HIVCoreceptor Function in Mouse and Human Leukotriene B4 Receptor-transfectedCells)，J.Biol.Chem.，274：13)：8597-8603(1999)；Yokomizo等人，《介导趋化性的白三烯B4的G蛋白偶联受体》(A G-protein-coupled Receptor for Leukotriene B4That Mediates Chemotaxis)，《自然》，387(6633)：620-624(1997)；Toda等人，《大鼠白三烯B(4)受体的克隆和表征》(Cloning and Characterization of RatLeukotriene B(4)Receptor)，Biochem.Biophys.Res.Commun.，262(3)：806-812(1999)；GenBank登记号AF077673(小鼠基因和氨基酸序列)；GenBank登记号D89078和D89079(人基因和氨基酸序列)，以及GenBank登记号AB025230(大鼠基因和氨基酸序列)，本文将这些文献纳入作为参考。
在鉴别了可用于抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合的各种化合物后，本发明的方法以这些化合物减少腺癌细胞的增殖、和/或诱导腺癌细胞的凋亡、和/或诱导腺癌细胞分化成非癌细胞的发现为基础。术语“增殖”、“凋亡”和“分化”的含义在本领域中易于理解。检测增殖、凋亡或分化的阐述性方法将在下面的实施例中给出，并且这些方法都在申请人的待授权美国专利申请系列号09/111343中也有描述，本文将该文纳入作为参考。可采用这些方法鉴别抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合的其它化合物，以及“减少”增殖、“诱导”凋亡和/或“诱导”分化的那些化合物。
上面的讨论描述了本发明关于抑制白三烯B4与腺癌细胞上的白三烯B4受体结合的化合物的影响这方面的概念，所述腺癌细胞尤其是癌上皮细胞，如前列腺癌细胞、肺癌细胞、胃癌细胞、乳腺癌细胞、胰腺癌细胞和结肠癌细胞。本发明的方法可在体外或体内进行。
例如，可在体外实施本发明的方法，以筛选可潜在地用于治疗腺癌(如前列腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌和/或胰腺癌)的化合物；评估化合物在治疗腺癌中的功效；或者研究化合物抵抗腺癌的机制(如不论该化合物通过诱导凋亡、诱导分化、减少增殖等方式还是其它方式)。例如，一旦鉴别出一种化合物为抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物，则本领域熟练的技术人员可在体外应用本发明的方法来评估该化合物诱导凋亡、诱导分化和/或减少癌细胞增殖的程度；或者，本领域熟练的技术人员可应用本发明的方法测定该化合物是通过诱导凋亡发挥作用，还是通过诱导分化、通过减少增殖、或者通过组合这些方式而发挥作用。
或者，可在体内实施本发明的方法，以治疗腺癌，如前列腺癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌和结肠癌。对于在体内实施本发明方法的例子，例如，在人患者中存在腺癌细胞的例子中，可通过向该患者给予治疗有效量的化合物而实现接触，例如，直接将该化合物注射到肿瘤中。关于本发明方法的给予化合物的内容将在下文描述。
本发明的另一方面涉及治疗患者中的腺癌的方法，如前列腺癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌或涉及上皮细胞的其它癌症。该方法包括向该患者给予一定量的有效抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物。
合适的患者包括如哺乳动物，如大鼠、小鼠、猫、狗、猴和人。合适的人患者包括如那些先前已确定为存在患前列腺癌、肺癌、胃癌。胰腺癌、结肠癌和/或乳腺癌的风险的患者，以及已诊断出患有前列腺癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌和/或乳腺癌的那些患者。较佳的是，该患者没有患有口腔鳞状细胞癌，或者没有被指定为治疗口腔鳞状细胞癌的候选人。在确定具有患腺癌的风险(较佳的是，没有患口腔鳞状细胞癌)的患者中，较佳是在有效减少增殖和/或诱导凋亡和/或诱导腺癌细胞在它们发展的事件中分化的条件下，向该患者给予抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物。这种预防性治疗(并不是绝对的100％地预防)可用在高危个体中，只要给予抑制白三烯B4与白三烯B4受体的结合的化合物所产生的不利的副作用没有超过其预防性的潜在利益即可。
上述任何一种化合物可用在本发明的治疗方法中。例如，抑制白三烯B4与白三烯B4受体结合的化合物，如在本文中公开的直接与白三烯B4受体结合的传统的化学药物和肽药物，可以单独的方式给予，或以与匹配的载体组合为组合物的方式给予。匹配的载体包括合适的药学载体或稀释剂。应选择稀释剂或载体的成分，以使它们不减小本发明中使用的化合物的治疗效果。
本文的组合物可制成适用于所需用途的任何适当形式。合适的剂型包括口服的、肠道外的或局部的剂型。
口服用的合适剂型包括片剂、分散的粉末、粒剂、胶囊、悬浮液、糖浆和酏剂。用于片剂的惰性稀释剂和载体包括，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖和滑石粉。片剂也可含有：造粒剂和崩解剂，如淀粉和藻酸；结合剂，如淀粉、明胶和阿拉伯树胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石粉。片剂可以是未包衣的，或可采用已知的技术将片剂包衣，以延迟其崩解和吸收。可用在胶囊中的惰性稀释剂和载体，包括如碳酸钙、磷酸钙和高岭土。悬浮液、糖浆和酏剂可含有常规的赋形剂，例如，甲基纤维素、黄蓍胶、藻酸钠；增湿剂，如卵磷脂和聚氧乙烯硬脂酸酯；和防腐剂，如对羟基苯甲酸乙酯。
适合于肠道外给药的剂型包括溶液、悬浮液、分散剂、乳剂等。它们也可制成无菌固体组合物的形式，这种组合物可在要使用前溶解或悬浮在无菌的可注射的介质中。它们可含有本领域已知的悬浮剂或分散剂。肠道外给药的例子是心室内、大脑内、肌肉内、静脉内、腹膜内、直肠内和皮下给药。
除了上面所述的以外，还包括上述制剂的通常无活性成分，这些制剂可包括其它的活性物质，尤其是已鉴别为可用在前列腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌和/或其它腺癌的治疗中的活性物质。这些活性物质是广谱的抗癌症制剂，这样它们还可用于治疗其它类型的癌症(即，除了腺癌以外的癌症)，或者它们可在如其它活性成分是用于治疗腺癌而不是治疗口腔鳞状细胞癌的情况下更有特异性。其它的活性成分除了具有抗腺癌特性外，还可具有非抗癌药学特性。例如，其它的活性成分可具有抗炎症特性，或者它们没有这种抗炎症特性。
将可理解，根据本发明给予的化合物，其实际的优选量将根据具体的化合物、具体配制的组合物以及给药的方式而改变。本领域熟练的技术人员将考虑到可能改变化合物的作用的许多因素(如体重、性别、饮食、给药的时间、给药的途径、排泄、患者的状况、药物组合以及反应敏感性和严重性)。可在最大耐受剂量的范围内连续或间断给药。对于给定的条件，最好的给药速率可由本领域熟练的技术人员采用常规的剂量给药试验来确定。
本发明将结合下述实施例进行进一步的阐述。
                             实施例
实施例1——材料和方法
在下面的实施例中使用到下述材料和方法。
材料.从Sigma Chemicals(St.Louis，密苏里)购得DMEM、MEM和McCoy 5A培养基、青霉素-链霉素溶液、胰蛋白酶-EDTA溶液、蛋白酶K、碘化丙锭、RNA酶A和苯酚/氯仿。从Atlanta Biologicals(Norcross，佐治亚)购得胎牛血清(“FBS”)。从Pharmingen(San Diego，加利福尼亚)购得用于TUNEL检测的APO-BRDU试剂盒。从Cayman Chemicals(Ann Arbor，密歇根)购得白三烯B4(“LTB4”)。由Eli Lilly及其公司(Indianapolis，印第安纳)提供LTB4的拮抗剂2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-苯氧基)苯甲酸(下文称为“LY293111”)。从Biomol Research Laboratories(Plymouth Meeting，Pehhsylvania)购得LTD4的拮抗剂1-(2-羟基-3-丙基-4-(4-(1H-四唑-5-基)丁氧基)苯基)乙醇。
细胞培养物.使用下述胰腺癌细胞系：MiaPaCa-2和PANC-1(分化很差)；Capan-1和Capan-2(分化很好)；和HPAF和AsPC-1(多形的，pleomorphic)。这些细胞系从美国典型培养物保藏中心(Rockville，马里兰州)购得。使PANC-1和MiaPaCa-2在DMEM培养基中生长；使HPAF和AsPC-1在MEN培养基中生长；使Capan-1和Capan-2在McCoy培养基中生长。培养基用10％FBS补充，细胞在37℃下，在95％O2和5％CO2的潮湿气氛中生长。将细胞有规则地接种到75cm2的烧瓶中，隔天换一次培养基。对于试验，当细胞铺满80％时，用胰蛋白酶-EDTA消化，然后适当地以50,000个/ml的浓度接种在12孔或24孔平板上。
[3H]-胸苷掺入的DNA合成.将细胞接种在12孔或24孔平板上。细胞铺满70％后，将它们放在无血清培养基中培育24小时，然后用新配制的无血清培养基替换，该培养基可含有适当浓度的白三烯B4受体拮抗剂LY293111(62.5-1000nM)、LTB4(100-400nM)或两者，或者都不含有。培育适当的时间后，加入0.5μCi/孔的[3H]-甲基-胸苷，另外培育2小时，检测细胞的DNA合成。然后，用PBS洗涤细胞两次，用10％三氯乙酸(“TCA”)固定30分钟，然后将0.4M NaOH加到各孔中增溶。加入闪烁混合物，并在闪烁计数器(LKB RackBeta，Wallac，Turku，Finland)上计数，测定表明3H-胸苷掺入DNA中的放射性。
细胞增殖检测.将胰腺癌细胞接种到24孔微平板上，在37℃下培育。24小时后，在有或没有250nM LY293111的无血清培养基中培育这些细胞24、48和72小时。在各个时间段结束时，用胰蛋白酶处理这些细胞，以产生单独的细胞悬浮液，用Z1-Coulter计数器(Luton，Bedfordsire，英国)测定各孔中的细胞数。
使用光学显微镜测定形态学变化.用不同浓度的LY293111处理75cm2烧瓶中生长的胰腺癌细胞不同的时间。然后用相差显微镜观察这些细胞，并拍照。
DNA断裂检测.对于采用琼脂糖凝胶电泳进行的DNA断裂分析，用胰蛋白酶-EDTA使经处理的胰腺癌细胞从75cm2烧瓶中分离，用PBS洗涤二次，再悬浮在1ml裂解缓冲液(25mM EDTA、10mM Tris、0.5％Triton X-100和1％SDS)中，然后使其在-80℃下冻融过夜。然后，将等体积的PEG/NaCl原液加到该裂解物中，得到最终浓度为0.25％的PEG和1M的NaCl，在4℃以13,200g离心所得溶液30分钟。然后在37℃使含有断裂的小分子量DNA的上清液与RNA酶A(0.3mg/ml)培育1小时，然后再与蛋白酶K(10mg/ml)培育3小时。然后用苯酚-氯仿抽提样品，用70％乙醇沉淀过夜。然后将含有DNA的沉积物再悬浮在50ml的TE缓冲液中，在含有溴乙锭(1mg/ml)的1.8％琼脂糖凝胶上进行电泳，用UV灯观察，并使用分子分析凝胶记录系统(Molecular Analyst Gel Documentation system，Bio-radLaboratories，Hercules，加利福尼亚)进行分析。
TUNEL检测.进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸酯缺口端标记(“TUNEL”)检测，由流式细胞计数法测量凋亡。用LY293111处理细胞适当的时间，然后用胰蛋白酶-EDTA消化，用冰冷的PBS洗涤两次，在冰上用10％低聚甲醛固定20分钟。然后用PBS洗涤细胞，用70％乙醇渗透至少4小时，再次用PBS洗涤，并使其在37℃与2.5单位的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT酶)和100pmol的Br-dUP的DNA标记溶液中培育1小时。然后清洗细胞2次，在暗处再悬浮在0.1ml荧光素标记的抗BrdU抗体溶液中30分钟。然后加入0.5ml碘化丙锭/RNA酶A溶液，在488nm激励用流式细胞计数法分析这些细胞。
统计学分析.通过使用Dunnett的用于多种比较的Bonderroni校正分析变量(“ANOVA”)，从而对数据进行适当的分析。使用Prism软件包(GraphPad，SanDiego，加利福尼亚)进行这种分析。数据以平均值±SEM表示。
实施例2——LY293111对胰腺癌细胞的作用
白三烯B4受体拮抗剂LY293111在MiaPaCa-2胰腺癌细胞系中导致胸苷掺入的浓度依赖性抑制(图1A)〔F(5，30)＝77.30，P＜0.0001〕和时间依赖性抑制(图1B)〔F(3，20)＝331.1，P＜0.0001〕细胞数(图2)的时间依赖性抑制。使用5种其它的胰腺癌细胞系(HPAF、Capan-1、Capan-2、AsPC-1和PANC-1)进行试验，24小时后的结果也显示LY293111以浓度依赖性的方式抑制了增殖。这些试验的结果列在表I中，其中结果表示为对照的百分比(平均值±SEM)，*＝P＜0.05，**＝P＜0.01，***＝P＜0.001。
                             表1
                             LY293111(nM)，24小时，对照百分比
 浓度   62.5nM   125nM   250nM   500nM   1000nM
 HPAF   103.6±21.8   97.6±24.5   49.3±9.0**   10.3±3.0***   2.3±1.4***
 Capan-1   99.1±4.8   56.9±4.9**   16.4±2.0***   15.7±3.4***   0.2±0.3***
 Capan-2   95.4±8.7   67.3±6.8**   51.2±5.8**   15.8±9.6***   8.9±2.1***
 AsPC-1   90.6±4.6   72.8±5.4*   44.5±7.7**   18.4±6.9***   7.3±1.2***
 PANC-1   89.4±4.4   65.2±3.8**   43.5±5.7**   12.4±3.1***   5.6±1.0***
此外，使用这5种其它的胰腺癌细胞系(HPAF、Capan-1、Capan-2、AsPC-1和PANC-1)研究了LY293111对细胞增殖的时间影响。结果列在表II中，这些结果显示，500nM的LY293111以时间依赖性的方式抑制这些细胞系中的每一种的细胞增殖。在表II中，结果表示为对照的百分比(平均值±SEM)，*＝P＜0.05，**＝P＜0.01，***＝P＜0.001。
                               表II
                       LY293111(500nM)，对照百分比
时间   6小时   12小时   24小时
HPAF   67.5±11.6**   35.7±8.9***   12.4±3.3***
Capan-1   70.5±8.7**   44.5±10.2**   15.7±3.4***
Capan-2   57.8±4.3**   32.1±5.6***   10.9±6.0***
AsPC-1   65.8±7.7**   44.7±4.1**   16.7±2.1***
PANC-1   60.2±6.5**   48.9±5.3**   13.6±1.0***
LY293111在浓度为250nM时抑制至少50％的增殖，在浓度为1000nM时抑制95％以上的增殖。相差显微术揭示，与未处理对照(图3A)相比，经处理的MaiPaCa-2胰腺癌细胞早在用250nM的LY293111处理后4小时时即具有明显的形态学变化(图3B)。经处理的细胞随着时间而变圆，并出现膜渗漏、染色质浓缩、核破裂以及最终与微平板分离。这些形态学变化先前已经被解释为反应性凋亡。如图3C(经LY293111处理)和图3D(对照)所示，类似的结果也在结肠细胞系LoVo中发现。
实施例3——LY171883对胰腺癌细胞的作用
与LTB4拮抗剂LY293111的作用不同，特异性LTD4受体拮抗剂LY171883在MiaPaCa-2〔F(5，6)＝1.875，P＝0.2316〕和HPAF〔F(5，6)＝1.940，P＝0.2217〕胰腺癌细胞中使用时仅仅在最高浓度(10mM)影响增殖。但是，这有可能反映了毒性作用。MiaPaCa-2和HPAF胰腺癌细胞的结果分别显示在图4A和4B中。
实施例4——白三烯B4对胰腺癌细胞增殖的作用
白三烯B4以浓度依赖性和时间依赖性这两种方式刺激MiaPaCa-2〔F(3，8)＝64.02和F(3，8)＝50.31，P＜0.0001〕和HPAF〔F(3，8)＝30.06，P＜0.0001〕胰腺癌细胞系的增殖。图5A显示不同浓度的LTB4对胸苷掺入MiaPaCa-2细胞的影响，这个结果在处理24小时后测得。图5B和5C显示100nM LTB4对胸苷掺入MiaPaCa-2细胞(图5B)和HPAF细胞(图5C)的影响，这些结果分别为第24、48和72小时测得的。在用100nM浓度处理72小时时，与对照相比，LTB4使两倍以上的胸苷掺入。
实施例5——LY293111对LTB4对胰腺癌细胞增殖的刺激性效果的作用
LTB4消除了白三烯B4受体拮抗剂LY293111对MiaPaCa-2(图6A)和HPAF(图6B)胰腺癌细胞系的增殖的影响。在用100nM的LTB4处理24小时后，与对照相比增殖有25％的增加，而250nM的LY293111则导致增殖减少50％。当用LTB4及其拮抗剂LY293111组合处理时，增殖几乎回复到对照的水平。
实施例6——DNA断裂试验
进行DNA断裂试验，以研究经LY293111处理的胰腺癌细胞的凋亡。在用250、500和1000nM的LY293111处理MiaPaCa-2细胞48小时后，将细胞的DNA加到1.8％琼脂糖凝胶上进行电泳，可以看到明显的DNA梯级，而在对照细胞中则没有观察到这样的梯级(图7)。类似的结果在所测试的其它胰腺癌细胞系中也获得。
实施例7——TUNEL试验
还进行TUNEL试验评估LY293111诱导的胰腺癌细胞系凋亡。用250nM和500nM的LY293111处理MiaPaCa-2细胞24小时，结果分别将凋亡大大地增加到12.6％和18.6％。相反，对照细胞种群中的凋亡程度则非常低(1.5％)。结果在图8A-8C给出，其中右上象限中荧光事件的增加是由于断裂DNA被UTP标记的缘故。类似的凋亡在所研究的其它胰腺癌细胞系、结肠癌细胞系和乳腺癌细胞系中也被诱导。
实施例8——LY293111对胰腺癌细胞和结肠癌细胞的增殖的作用
通过测量胸苷掺入和细胞数来研究LY293111对癌细胞增殖的影响。LY293111对所研究的所有的胰腺癌细胞系、结肠癌细胞系和乳腺癌细胞系的增殖都产生显著的浓度依赖性和时间依赖性抑制。结果列在图9A-9F中。图9A和9B显示的是胰腺癌细胞系MiaPaCa2；图9C显示的是胰腺癌细胞系HPAF；图9D显示的是胰腺癌细胞系Capan2。图9A、9C和9D各显示LY293111对这些胰腺癌细胞系的剂量影响。此外，图9B显示LY293111对胰腺癌细胞系MiaPaCa2的时间依赖性影响。图9E和9F显示，与对照相比，0.5μM LY293111对作为时间的函数的胰腺癌细胞系MiaPaCa2(图9E)和结肠癌细胞系LoVo(图9F)的细胞数的影响。
实施例9——LTB4和LY293111对Bcl2的影响
如图10A所示，使用Bcl-2特异性抗血清进行的western印迹的结果揭示，LTB4(100nM)增加MCF-7乳腺癌细胞中凋亡前蛋白Bcl-2的表达。相反，如图10B所示，LY293111(500nM)抑制MCF-7乳腺癌细胞中的凋亡前蛋白Bcl-2的表达。
实施例10——LY293111对外源植入无胸腺小鼠的AsPc-1人胰腺癌肿瘤细胞系的 生长的影响
给无胸腺小鼠皮下注射50μl含3百万个癌细胞的无血清培养基。在此试验中使用高度恶性和侵袭性的胰腺癌肿瘤细胞系。先使肿瘤建立并生长4天，然后在用小鼠的饮用水中加入LY293111，使其浓度为0.01％，用此溶液进行治疗。图11显示作为治疗时间的函数的肿瘤大小(mm3)。结果显示，在它们的饮用水中含有LY293111的小鼠的肿瘤比对照组的小。
虽然本文对优选的实施例进行了叙述和描述，但是本领域熟练的技术人员应明白，在不偏离本发明的实质的情况下可进行各种修改、添加、取代等，这些都被认为是包括在下述权利要求所定义的本发明范围之内。

Claims (20)

1.具有下式结构的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备减少腺癌细胞增殖、诱导腺癌细胞凋亡用的制剂中的用途：
Figure C018093290002C1
式中：
R1是C1-C5烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)硫代、卤素或R2取代的苯基；
每个R2和R3独立地是氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-S(O)q-、三氟甲基，或者二-(C1-C3烷基)氨基；
X是-O-、-S-、-C(＝O)-，或者是-CH2-；Y是-O-或-CH2-；或者，当它们连在一起时，-X-Y-是-CH＝CH-或-C≡C-；
Z是直链或支链C1-C10亚烷基；
A是一个键、-O-、-S-、-CH＝CH-或者-CRaRb-，其中各个Ra和Rb独立地是氢、C1-C5烷基，或者是R7取代的苯基；或者当Ra和Rb与和它们所连接的碳原子连在一起时，形成C4-C8的环烷基环；
R4是R6，或者R4是具有下述式子之一的部分：
Figure C018093290002C2
或
Figure C018093290003C4
和
式中：
各R6独立是-COOH、5-四唑基、-CON(R9)2，或者-CONHSO2R10；
各R7是氢、C1-C4烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、苄基、甲氧基、-W-R6、-T-G-R6、(C1-C4烷基)-T-(C1-C4亚烷基)-O-，或者是羟基；
R8是氢或卤素；
各R9独立是氢、苯基，或者是C1-C4烷基；或者当R9与它所连接的氮原子连在一起时，形成吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基或吡烷子基；
R10是C1-C4烷基，或者是苯基；
R11是R2、-W-R6，或者是-T-G-R6；
各W是一个键，或者是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各G是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各T是一个键、-CH2-、-O-、-NH-、-NHCO-、-C(＝O)-，或者是-S(O)q-；
K是-C(＝O)-或-CH(OH)-；
各q独立是0、1或2；
p是0或1；
t是0或1；
条件是，当X是-O-或-S-时，Y不是-O-；
另一条件是，当A是-O-或-S-时，R4不是R6；
还有一个条件是，当A是-O-或-S-，且Z是键时，Y不是-O-；
又一条件是，当p是0时，W不是键。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物选自：2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸、3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-6-(4-羧基-苯氧基)苯基)丙酸、1-(4-(羧基-甲氧基)苯基)-1-(1H-四唑-5-基)-6-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)己烷、3-(4-(7-羧基-9-氧代-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)-9H-呫吨))丙酸、5-(3-(2-(1-羧基)-乙基)-4-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)苯基)-4-戊炔酸、其药学上可接受的盐或溶剂合物，或它们组合。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-6-(4-羧基-苯氧基)苯基)丙酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是1-(4-(羧基-甲氧基)苯基)-1-(1H-四唑-5-基)-6-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)己烷或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是3-(4-(7-羧基-9-氧代-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)-9H-呫吨))丙酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是5-(3-(2-(1-羧基)-乙基)-4-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)苯基)-4-戊炔酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物是2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物，且其中所述2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物是所述药剂中仅有的活性成分。
9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述腺癌细胞包括前列腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌的细胞和它们的组合。
10.有效量的下式化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备治疗患者腺癌的药剂中的用途：
式中：
R1是C1-C5烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)硫代、卤素或R2取代的苯基；
每个R2和R3独立地是氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-S(O)q-、三氟甲基，或者二-(C1-C3烷基)氨基；
X是-O-、-S-、-C(＝O)-，或者是-CH2-；Y是-O-或-CH2-；或者，当它们连在一起时，-X-Y-是-CH＝CH-或-C≡C-；
Z是直链或支链C1-C10亚烷基；
A是一个键、-O-、-S-、-CH＝CH-或者-CRaRb-，其中各个Ra和Rb独立地是氢、C1-C5烷基，或者是R7取代的苯基；或者当Ra和Rb与和它们所连接的碳原子连在一起时，形成C4-C8的环烷基环；
R4是R6，或者R4是具有下述式子之一的部分：
Figure C018093290005C2
Figure C018093290006C2
Figure C018093290006C3
Figure C018093290006C4
或
Figure C018093290006C5
和
式中：
各R6独立是-COOH、5-四唑基、-CON(R9)2，或者-CONHSO2R10；
各R7是氢、C1-C4烷基、C2-C5链烯基、C2-C5炔基、苄基、甲氧基、-W-R6、-T-G-R6、(C1-C4烷基)-T-(C1-C4亚烷基)-O-，或者是羟基；
R8是氢或卤素；
各R9独立是氢、苯基，或者是C1-C4烷基；或者当R9与和它所连接的氮原子连在一起时，形成吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基或吡烷子基；
R10是C1-C4烷基，或者是苯基；
R11是R2、-W-R6，或者是-T-G-R6；
各W是一个键，或者是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各G是直链或支链的含1-8个碳原子的二价烃基；
各T是一个键、-CH2-、-O-、-NH-、-NHCO-、-C(＝O)-，或者是-S(O)q-；
K是-C(＝O)-或-CH(OH)-；
各q独立是0、1或2；
p是0或1；
t是0或1；
条件是，当X是-O-或-S-时，Y不是-O-；
另一条件是，当A是-O-或-S-时，R4不是R6；
还有一个条件是，当A是-O-或-S-，且Z是键时，Y不是-O-；
又一条件是，当p是0时，W不是键。
11.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物选自：2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸、3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-6-(4-羧基-苯氧基)苯基)丙酸、1-(4-(羧基-甲氧基)苯基)-1-(1H-四唑-5-基)-6-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)己烷、3-(4-(7-羧基-9-氧代-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)-9H-呫吨))丙酸、5-(3-(2-(1-羧基)-乙基)-4-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)苯基)-4-戊炔酸、其药学上可接受的盐或溶剂合物，或它们组合。
12.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)-6-(4-羧基-苯氧基)苯基)丙酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
13.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是1-(4-(羧基-甲氧基)苯基)-1-(1H-四唑-5-基)-6-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)己烷或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
14.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是3-(4-(7-羧基-9-氧代-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)-9H-呫吨))丙酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
15.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是5-(3-(2-(1-羧基)-乙基)-4-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)-丙氧基)苯基)-4-戊炔酸或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
16.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
17.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述化合物是2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物，且其中所述2-(2-丙基-3-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羟基苯氧基)丙氧基)苯氧基)苯甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物是所述药剂中仅有的活性成分。
18.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述患者是人。
19.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述患者不患有口腔鳞状细胞癌。
20.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述腺癌选自前列腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌和它们的组合。
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