CN1234214A - 离心法制备角膜胶原膜 - Google Patents

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Abstract

一种离心法制备角膜胶原膜,由胶原样品、模具的制出,其特点是将胶原样品与成膜材料聚乙烯醇混合后置入模具上端的凹型球面内,模具与转数为200—800转/分钟的旋转装置的轴的上方垂直固定联接,并且使模具轴与旋转装置的轴在同一轴线上,其装置置入温度在30℃的恒温箱内干燥,工作1.3—2小时后,离心、干燥成透明、中央薄、周边厚的角膜胶原膜,配戴此膜可减少角膜乏氧机会和角膜刺激症状,有利患者使用。

Description

离心法制备角膜胶原膜
本发明是属于形成角膜胶原膜的加工工艺。
目前生产角膜胶原膜的方法较多,但生产出的胶原膜有其不足,不能满足患者的需要,配戴后易使患者角膜中央乏氧,水肿产生刺激症状,如静止干燥法加工出的胶原膜较厚,膜中央厚度大于周边厚度,内表面不光滑,胶原膜戴在角膜上,使角膜中央乏氧机会增加;封闭冲压法,形成的胶原膜易破裂,膜边缘不光滑,切削成膜时间长,程序繁琐。
本发明的目的是提出一种离心法制备角膜胶原膜,将提取纯化的胶原与一定比例的成膜材料聚乙烯醇混合后加入模具上端,置于旋转装置的轴上方,利用旋转轴的离心力的作用,加工成胶原膜,此膜的特点是中央薄,周边厚,患者戴后减少角膜乏氧机会和角膜刺激症状。
本发明是采用离心法制备角膜胶厚膜。首先制备胶原样品:取消过毒的新鲜猪巩膜,制成匀浆,经中性盐溶液前提取后离心20分钟,将沉淀用蒸馏水洗涤、除盐,再放入0.3%乙酸溶液中,在4℃的温度中放置48小时后,加入胃蛋白酶;在4℃放置24小时后超速离心20分钟,取其上清液加盐搅拌,待充分析出胶原液再超速离心20分钟,收集稠密的沉淀物,置于透析袋中,于蒸馏水透析,获得纯化的胶原紫外分光吸收峰值232nm,SDS-PAGE电泳显示α、β、γ谱带组成成分为大量Ⅰ型,少量Ⅲ型胶原;PH中性胶原留作样品备用,将胶原样品加入少量成膜材料聚乙烯醇加工而成角膜胶原膜;其特征在于:将胶原样品及成膜材料聚乙烯醇的混合液置入模具上端的凹型球面内,模具与转数为200-800转/分钟的旋转装置的轴的上方直垂固定联接,并且使模具轴与旋转装置的轴在同一轴线上,旋转装置位于温度在30℃的恒温干燥箱内,旋转装置的轴带动模具旋转1.3-2小时后,离心、干燥成透明、中央薄、周边厚的角膜胶原膜。
本发明的工作原理:本发明是利用离心力的作用,在成型的模具上形成中央薄、周边厚、透明的角膜胶原膜。其胶原样品是同其它制备胶原膜用的原料一样,经过提取、纯化处理、检验为合格的胶原样品。在制备胶原膜时,再加入成膜材料聚乙烯醇混合成液。将此混合液放入不锈钢制成的模具上端凹型球面内,模具固定在旋转装置如旋转轴的上方,并垂直联接,保证装置的轴的轴线与模具的轴线是同一轴线上,这样才能保证模具与旋转装置在同一轴线上旋转,使模具上端凹型球面内的混合液在旋转装置的轴的离心力作用下,其转数为200-800转/分,在恒温30℃的干燥箱内,离心干燥成中央薄、周边厚、透明的角膜胶原膜。
本发明与现有的技术相比,由于此方法是采用离心力的作用,将模具直接与旋转装置的轴固定垂直联接,保证在同一轴线旋转,并选择200-800转/分,防止混合液飞溅;同时除了原料一样又加入成型材料聚乙烯醇,在离心干燥下形成中央薄、周边厚、透明的角膜胶原膜。此膜成膜时间短,效率高,制成的膜均匀、光滑、透明,可以通过改变旋转装置的转数,改变其膜的中央及周边厚度,满足需要。配戴此膜后,可以减少角膜乏氧机会和角膜刺激症状,有利于患者使用。
发明离心法与静止法制出的胶原膜中央与周边厚度比较:
方  法  膜数       中央厚度(mm)X±S       周边厚度(mm)X±S    差数L检验t P
     静止法  15    0.0391±0.0034    0.0244±0.0014   15.137  <0.01
      ≤200转/分离心法≤600转/分  1515    0.0279±0.00050.0207±0.0089    0.0246±0.00160.0317±0.0178   9.204.31  <0.01<0.01
本发明的实施例:
首先制取胶原样品(原料);取消毒过的新鲜猪巩膜,制成匀浆;经过中性盐溶液前提取后,离心20分钟,把沉淀用蒸馏水洗涤、除盐,再放入0.3%乙酸溶液中,4℃放置48小时后加入胃蛋白酶,4℃放置24小时超速离心20分钟,取其上清液加盐搅拌,待充分析出胶原液再超速离心20分钟,收集稠密的沉淀物,置于透析袋中,于蒸馏水透析,获得纯化的胶原,取PH中性胶原做样品备用。取出胶原溶液150μl,加入150μl聚乙烯醇混合。取不锈钢材料加工成的高为30毫米的圆柱体,上端面凹球面曲率半径为9毫米,周边相接部弦长12毫米,周边缘的弦14.5毫米的模具,将模具垂直与SYB-E输液泵的轴上端固定联接,泵转数为300转/分。泵与模具置入恒温在30℃的干燥箱内,工作1.5小时后,即可形成中央薄、周边厚、透明的角膜胶原膜。

Claims (1)

1、一种离心法制备角膜胶原膜,包括胶原样品、模具的制出,其特征在于:将胶原样品及成膜材料聚乙烯醇的混合液置入模具上端的凹型球面内,模具与转数为200-800转/分钟的旋转装置的轴的上方垂直固定联接,并且使模具轴与旋转装置的轴在同一轴线上,旋转装置位于温度在30℃的恒温干燥箱内,旋转装置的轴带动模具旋转1.3-2小时后,离心、干燥成透明、中央薄、周边厚的角膜胶原膜。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN1314461C (zh) * 2004-02-27 2007-05-09 四川大学 生物活性人工角膜及其制备方法
CN105412974A (zh) * 2015-11-27 2016-03-23 广州市朴道联信生物科技有限公司 一种双层结构角膜修复材料的制备方法
CN107213510A (zh) * 2017-05-16 2017-09-29 暨南大学 一种高强度曲率胶原膜的制备方法

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