CN1232866A - 五倍子油脂及其提取方法和制药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药五倍子的油脂及其提取方法和在制备降血糖药剂中的应用。旨在解决中药五倍子药效成分及其提取和在制备药剂中的应用问题。五倍子油脂包含五倍子中性油脂、游离脂肪酸、不皂化物。其提取方法是将粉碎的五倍子粉1重量份,加入有机溶剂2～30重量份,采用冷浸法或渗漉法或热回流法提取,制得五倍子油脂。五倍子油脂用于制备降血糖的药剂,药剂具有降糖率高、疗效稳定、长期服用无毒副作用的优点。
Description
本发明涉及中药五倍子的提取物及其提取方法和在制备降血糖药剂中的应用。
糖尿病是危害人类健康的常见多发病，全世界的糖尿病患者已超过一亿人，我国接近二千万，尚有增加的趋势，糖尿病的病死率仅次于癌及心血管病，是危及人类生命的第三大疾病。糖尿病终身不愈，并发症多而且严重，由于血流中的胰岛素相对或绝对缺乏，引起糖、脂及蛋白质代谢紊乱，导致高血糖、血脂及血液粘度的升高，中期和晚期出现周身性微血管病变。糖尿病患者的70％～80％死于心血管病，中老年糖尿病患者常见的死亡原因，是糖尿病肾功能衰竭及脑血管意外。
目前对糖尿病的治疗，主要采用的药物有双胍类药、磺脲类、胰岛素等西药以及一些中成药等。但是，由于双胍类药的疗效低、副作用大，长久使用会产生高乳酸血病；磺脲类药损害肝脏、肾脏及血细胞，与磺胺药共用会产生交叉过敏，而且后期产生继发性失效；胰岛素需注射给药，久用将产生抗体，生物活性降低，剂量增加，会产生高胰岛素血症，促使微血管病变的发生和发展。而治疗糖尿病的中成药，由于未经有效的提取纯化，疗效不十分明显，患者仍然不得不依赖于西药。
五倍子是一种较常用的中药，具有敛肺降火，涩肠止泻，敛汗止血，收湿敛疮的功能。临床用于治肺虚久咳，肺热痰嗽，久泻久痢，盗汗，消渴，便血痔血；外伤出血，痈肿疮毒，皮肤湿烂。五倍子的古今应用多以原生药粉入丸散或经水煎煮提取后应用，现代药理研究证明其具有收敛、抗菌、抗生育、保肝和抗氧化作用。现代临床应用多利用五倍子鞣质的收敛作用治疗烧伤与消化道出血。在古代文献中五倍子有治消渴证的记载，但现代并未引起足够的重视，涉及五倍子降糖作用的化学与药理研究，国内外文献均未见任何报导，有关单味五倍子治疗糖尿病的临床研究亦未见有记录。本发明人通过大量的化学与药理筛选，获得五倍子具有较强降糖作用的研究效果。
本发明的目的在于提供一种五倍子的药用提取物：五倍子油脂。
本发明的另一目的是提供一种五倍子油脂的提取方法。
本发明的再一目的是提供一种五倍子油脂在制备降血糖、治疗糖尿病药剂中的应用。
本发明的五倍子油脂，包含五倍子中性油脂、游离脂肪酸、不皂化物。
上述的五倍子中性油脂包含甘油三酯、糖酯，其酯解后的脂肪酸和上述的游离脂肪酸包含十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸，上述的不皂化物包含β-谷甾醇、胆甾醇、豆甾醇等的甾醇类化合物。
上述的五倍子油脂按脂肪与脂肪油检测法测定，理化常数为：酸价2～72.4，比重0.9150～0.9826(20℃)，碘价22.5～53.4，皂化价229.0～256.1，折光率1.455～1.470(20℃)。
本发明的五倍子油脂的提取方法，是将已粉碎的五倍子粉1重量份，加入有机溶剂2～30重量份，采用冷浸法或渗漉法或热回流法提取，制得五倍子油脂。
采用上述方法提取的五倍子油脂，可以采用碱练皂化法，或采用硅胶、或氧化铝、或硅酸铝柱层析法提纯。以进一步除去色素及游离脂肪酸。
上述的有机溶剂可以是石油醚、6#抽提溶剂油、已烷、庚烷、醋酸乙酯、丙酮、乙醇等中的至少一种。
上述有机溶剂的用量，根据五倍子的含油量而定，当用量过少时，五倍子油脂的提取率会较低；当用量过多时，有机溶剂的利用不充分，但多余的有机溶剂可以回收。较适当的用量为五倍子用量的5-8重量份。
本发明的五倍子油脂的制药用途，是用于制备降血糖、治疗糖尿病的药剂。
上述的药剂可以是用五倍子油脂制成的软胶囊、或注射剂、或口服乳剂、或酒剂、或滴丸。也可以是用五倍子油脂制成固体分散体后再制成静硬胶囊、或片剂、或丸剂。
本发明具有如下的优点和效果：
一、本发明的五倍子油脂来源于天然资源中药五倍子，五倍子长期服用无毒副作用；经化学提纯富集了药物的有效成份，具有口服降糖率高、疗效稳定的优点；五倍子油脂稳定性好，易于制剂。
二、本发明的五倍子油脂的提取方法，具有工艺过程短，简便易行，成本低廉，适合工业化生产的优点。
三、本发明的用五倍子油脂制备的药剂，经毒理学研究证明，无明显毒性。小鼠一次灌胃给药测不出LD50，其最大耐受量为30g五倍子油脂/kg/24h；大鼠及Beagle犬长期毒性试验均未见明显异常毒性反应。
本发明的五倍子油脂，经动物实验证明，对四氧嘧啶和链脲佐菌素所致糖尿病动物有较强的降糖活性；并具有提高四氧嘧啶性糖尿病动物和正常动物的糖耐量的作用。采用五倍子油脂的动物实验数据，如表1、表2、表3、表4所列。
将本五倍子油脂经模压法，制成软胶囊，每粒含五倍子油脂300mg。临床口服给药，每日三次，每次1粒，一月为一疗程；对照组口服美吡达，每日三次，每次2.5mg，一月为一疗程。经大量的上述临床研究证明，五倍子油脂对糖尿病，特别是对Ⅱ型糖尿病有较好的疗效。临床试验结果见表5、表6、表7
下面，再用实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用石油醚500kg以渗漉法提取，收集渗漉液，回收石油醚后，制得五倍子油脂2.61kg。
实施例2
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油500kg以渗漉法提取，收集渗漉液，回收溶剂后，制得五倍子油脂2.55kg。
实施例3
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油以热回流法提取两次，每次用6#抽提溶剂油400kg，回流1小时，过滤，回收溶剂后，制得五倍子油脂2.7kg。
实施例4
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油以冷浸法提取三次，每次用6#抽提溶剂油400kg，浸泡24小时，其间间隔2小时搅拌10分钟，过滤，回收溶剂后，制得五倍子油脂1.95kg。
实施例5
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用丙酮700kg，以渗漉法提取，收集渗漉液，回收丙酮后，得黑棕色糖浆状物3.8kg；然后加入石油醚15kg分次溶解，过滤，回收石油醚后，制得五倍子油脂2.5kg。
实施例6
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用乙醇900kg，以渗漉法提取，收集渗漉液，回收乙醇后，得糖浆状物20kg，加水5倍量，搅拌，静置，分取上层油脂及不溶物，加石油醚15kg分次溶解，过滤，回收石油醚后，制得五倍子油脂2.1kg。
实施例7
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油以热回流法提取三次，每次用6#抽提溶剂油500kg，回收溶剂后，制得五倍子油脂2.75kg。
实施例8
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油以热回流法提取两次，每次用6#抽提溶剂油200kg，回收溶剂后，制得五倍子油脂2.40kg。
实施例9
本发明的一种五倍子油脂的提取方法。取五倍子粉100kg，用6#抽提溶剂油500kg，以热回流法提取一次，回收溶剂后，制得五倍子油脂2.42kg。
上述各实施例所制得的五倍子油脂为多元醇混合酯，含有五倍子中性油酯，游离脂肪酸，不皂化物。其中，五倍子中性油酯由甘油三酯及糖酯组成，其酯解后的脂肪酸和游离脂肪酸主要由十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸，和少量的硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸组成；不皂化物由β-谷甾醇、胆甾醇、豆甾醇等甾醇类化合物组成。
上述方法制得的五倍子油脂中含有游离脂肪酸和色素等杂质，可以以适当的方法进行进一步的纯化处理。本发明采取两种纯化方法均得到较理想的结果：
一、碱练皂化法：采用适当浓度的碱液如NaOH或KOH进行碱练皂化处理，以中和酸性成分，分离得到乳状物。再加入适量丙酮破乳，乳状物开始变成澄清物。此时再加入适量的石油醚等有机溶剂进行萃取，酸性成分转入丙酮与水层，弃去丙酮与水层，石油醚层再以1％活性炭或3％白陶土或10％氧化铝等常规吸附剂进行吸附脱色处理。回收石油醚后得中性脂粗品，倒入沸水中充分煮沸，以洗尽有机溶剂和碱和残留物，弃去水层，再真空加热100℃使油中水分挥发尽，即得纯化后的五倍子中性油脂。
二、柱层析法：采用硅胶与碱性氧化铝柱层析除游离脂肪酯和色素。
实施例10
本发明的一种五倍子油脂的提取方法，将上述实施例1-9制得的五倍子油脂进行纯化。取实施例1-9制得的五倍油脂2.5kg，加等量石油醚溶解，加2％KOH溶液10升，充分搅拌15分钟，静置至充分分层，分离得乳状物。以2～3次蒸馏水洗至乳状物显中性(PH6～7左右)后，加1∶1丙酮破乳溶液澄明，再加入适量的石油醚进行萃取，待溶液充分分层后弃去丙酮与水层，石油醚层再以1％活性炭进行吸附脱色处理，过滤回收石油醚后得中性脂粗品，倒入沸水中煮沸30分钟，静置至充分分层，分取油状物，真空加热100℃使油中水分挥发尽，得纯化后的五倍子中性油脂1.95kg。主含五倍子中性脂，它可供制备较胶囊，注射剂，口服乳剂，滴丸。
实施例11
本发明的一种五倍子油脂的提取方法，将上述实施例1-9制得的五倍子油脂进行纯化。取实施例1-9制得的五倍子油脂500g，加少量石油醚溶解，加至内装2000g硅胶的吸附柱上，用5000ml丙酮冲洗，洗脱液回收溶剂得油状物380g。用0.5N氢氧化钠水溶液浸渍氧化铝，干燥后得碱性氧化铝吸附剂，将上述380g油状物加到内装5000g碱性氧化铝的吸附柱上，用丙酮冲洗至氧化铝柱底部呈黄色为止，洗脱液回收溶剂得油状物235g。主含五倍子中性油脂，它可制备软胶囊，注射剂，口服乳剂，滴丸。
纯化后的五倍子中性油脂主要由甘油三酯及糖酯组成，按脂肪与脂肪油检测法测定，其理化常数为：酸价＜5；比重0.9150～0.9826(20℃)；碘价22.5～38.7；皂化价235.4～248.6；折光率1.455～1.465(20℃)。
本发明的五倍子油脂，可以直接或经纯化除杂后，采用通常的制药方法，制成用于降血糖的各种剂型。
实施例12
本发明的一种五倍子油脂的制药用途，按明胶∶甘油∶水=1∶1∶0.4-0.6的比例配料，使最终的制胶重量为20kg，投入化胶罐中，保持温度60-80℃，搅拌5小时，均匀后放料，装入A料桶；取五倍子油脂5kg，加0.02％抗氧剂BHT及1％抗氧增效剂柠檬酸，30-40℃保温1小时，搅拌均匀后放料，装入B料桶；将保温的A料桶与冷却至常温的B料桶送至胶囊机上，调节压丸内容物总量为300mg，压丸，干燥，分装，即得五倍子油胶丸。
表1五倍子油脂对四氧嘧啶所致家兔高血糖模型的影响
| 组别 | 例数(只) | 血 糖 | 降精率 | |||||
| 造模后3天 | 7天 | 给药3h | 3天 | 5天 | 3天 | 5天 | ||
| 模型组 | 5 | 247.0±36.2 | 285.5±38.6 | 268.3±32.8 | 276.2±35.5 | 264.3±37.1 | - | - |
| 五倍子油脂 | 5 | 243.6±34.7 | 290.5±42.5 | 284.1±42.9 | 150.6±33.0 | 95.5±26.9 | 45.47 | 63.8 |
表2五倍子油脂对链脲佐菌素所致小鼠高血糖模型的影响
| 组别 | 例数(只) | 造模2h血糖(mg/dl) | 给药一周后 | ||
| 血糖(mg/dl) | 降糖率(％) | ||||
| 模型组 | 10 | 245.06±2.75 | 263.74±41.53 | - | |
| 五倍子油脂 | (纯化前) | 10 | 239.80±44.72 | 141.02±31.64 | 46.53 |
| (纯化后) | 10 | 227.58±76.24 | 160.12±39.35 | 39.29 | |
表3五倍子油脂对四氧嘧啶性糖尿病家兔糖耐量试验的影响
| 组别 | 例数(只) | 剂量×次数(mg/jk×c) | 给药后血糖值(mg/dl) | ||
| 0.5h | 1.0h | 2h | |||
| 模型组 | 10 | 等容积N.S×3 | 396.8±82.5 | 285.0±58.3 | 193.7±42.6 |
| 五倍子油脂 | 10 | 40×3 | 311.1±68.5 | 213.2±42.4 | 166.7±46.1 |
注：与对照组比较，P＜0.05
表4五倍子油脂对正常家兔糖耐量试验
| 组别 | 例数(只) | 剂量×次数(mg/jk×c) | 给药后血糖值(mg/dl) | |||
| 0h | 0.5h | 1.0h | 2h | |||
| 模型组 | 6 | 等容积N.S×3 | 308.3±74.6 | 246.7±62.4 | 167.4±38.1 | 105.5±23.5 |
| 五倍子油脂 | 6 | 40×3 | 289.4±66.4 | 220.8±56.2 | 126.7±34.8 | 73.8±18.4 |
注：与对照组比较，P＜0.05
表5 五倍子油脂软胶囊治疗Ⅱ型糖尿病临床疗效统计
| 组别 | 例数 | 显效(％) | 有效(％) | 无效(％) | 有效率％ |
| 治疗组 | 30 | 11(36.7) | 15(50.0) | 4(13.3) | 86.7 |
| 对照组 | 30 | 20(66.7) | 10(33.4) | 0 | 100.0 |
表6 五倍子油脂软胶囊对FBG水平的影响(
X±SDmmol/L)
| 组别 | N | 治疗前 | 治疗后 | 差值 | P值 |
| 治疗组 | 30 | 11.5±1.03 | 9.17±0.64 | 2.45±0.41 | ＜0.01 |
| 对照组 | 30 | 10.92±1.36 | 8.20±0.55 | 2.85±0.33 | ＜0.01 |
表7 五倍子油脂软胶囊对PBG水平的影响(
X±SDmmol/L)
| 组别 | N | 治疗前 | 治疗后 | 差值 | P值 |
| 治疗组 | 30 | 14.7±0.56 | 11.5±0.82 | 3.16±0.41 | ＜0.01 |
| 对照组 | 30 | 14.54±1.06 | 10.01±1.16 | 4.48±1.15 | ＜0.01 |
Claims (9)
1、五倍子油脂，其特征在于包含五倍子中性油脂、游离脂肪酸、不皂化物。
2、根据权利要求1所述的五倍子油脂，其特征在于所说的五倍子中性油脂包含甘油三酯、糖酯，其酯解后的脂肪酸和所说的游离脂肪酸包含十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸，所说的不皂化物包含β-谷甾醇、胆甾醇、豆甾醇的甾醇类化合物。
3、根据权利要求1或2所述的五倍子油脂，其特征在于按脂肪与脂肪油检测法测定，理化常数为：酸价2～72.4，比重0.9150～0.9826(20℃)，碘价22.5～53.4，皂化价229.0～256.1，折光率1.455～1.470(20℃)。
4、五倍子油脂的提取方法，其特征在于将已粉碎的五倍子粉1重量份，加入有机溶剂2～30重量份，采用冷浸法或渗漉法或热回流法提取，制得五倍子油脂。
5、根据权利要求4所述的五倍子油脂的提取方法，其特征在于采用碱练皂化法，或采用硅胶、或氧化铝、或硅酸铝柱层析法提纯。
6、根据权利要求4或5所述的五倍子油脂的提取方法，其特征在于所说的有机溶剂可以是石油醚、6#抽提溶剂油、已烷、庚烷、醋酸乙酯、丙酮、乙醇中的至少一种，其加入量为5-8重量份。
7、五倍子油脂的制药用途，其特征在于用于制备降血糖、治疗糖尿病的药剂。
8、根据权利要求7所述的五倍子油脂的制药用途，其特征在于所说的药剂是用五倍子油脂制成的软胶囊、或注射剂、或口服乳剂、或酒剂、或滴丸。
9、根据权利要求7所述的五倍子油脂的制药用途，其特征在于所说的药剂是用五倍子油脂制成固体分散体后再制成的硬胶囊、或片剂、或丸剂。
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1998
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