CN1228678A - 陆栖哺乳动物用2,4－二烯酸型杀虫剂系统性给药的改进方法 - Google Patents

陆栖哺乳动物用2,4－二烯酸型杀虫剂系统性给药的改进方法 Download PDF

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Abstract

通过系统性给予陆栖哺乳动物一定量的2,4－二烯酸、盐或酯的杀虫剂可控制、消除或阻止陆栖哺乳动物尤其是狗或猫皮毛中跳蚤的寄生,该杀虫剂的这一给予量对跳蚤和/或其卵是致死的,如果跳蚤或蚤卵仅仅并且直接以宿主动物的血液为食,则该给予量不足以维持宿主动物血液中对跳蚤或其卵致死的浓度。

Description

陆栖哺乳动物用2,4-二烯酸型杀虫剂 系统性给药的改进方法
发明领域
本发明属于用以控制外寄生物和内寄生物的系统活性物质的范围。
发明背景
已知多种有机化合物具有系统性杀虫剂的活性，可用于控制陆栖哺乳动物的跳蚤。用于给狗和猫口服以控制、阻止或消除猫栉头蚤(Ctenocephalides felis)和犬栉头蚤(Ctenocephalides canis)(分别为猫和狗的跳蚤)寄生的化合物尤其令人感兴趣。这些化合物包括保幼激素以及与其化学相似的化合物、苯甲酰脲衍生物，以及三嗪衍生物。保幼激素包括2,4-二烯酸以及苯氧基苯氧化合物，尤其是苯氧苯氧烷氧基杂环族化合物。2,4-二烯酸及相关化合物实例有烯虫酯(methoprene)，烯虫乙酯(hydroprene)，保幼激素(neotenin)以及epiphenonane。苯氧苯氧化合物实例有双氧威(fenoxycarb)，蚊蝇醚(pyriproxyfen)。苯甲酰脲实例有鲁分脲(lufenuron)，除虫脲(diflubenzuron),terflubenzuron，杀虫隆(triflumaron)，氟铃脲(hexaflumaron)，氟螨脲(flucycloxuron)。三嗪衍生物实例有2-环丙氨基-4,6-双(二甲氨基)-均三嗪。
最初公开的这些化合物以及其它结构相关并且活性相似的化合物可直接应用于跳蚤。其后的研究显示将这些化合物系统施用于宿主动物也可得到活性。这些研究公开在Barnett等(Ciba-Geigy公司)，美国专利号4,973,589(1990年11月27日)；Barnett等(Ciba-Geigy公司)，美国专利号5,416,102(1995年5月16日)；以及Miller(Virbac,Inc.)，美国专利号5,439,924(1995年8月8日)。在此引入的上述每个公开的专利作为参考，以用于所有应用的合法的目的。
根据这些专利及其所公开的杀虫剂供应商出版的技术文献，当亲本跳蚤以宿主动物血液为食时可阻止成蚤发育。成蚤以直接通过动物表皮获得的血液为食，而跳蚤幼虫以成蚤排泄物中的部分已消化的血液为食。维持血液中杀虫剂浓度超过最小有效浓度可有目的的得到杀虫活性。既然除了向活动物施用杀虫剂并观察对动物皮毛内跳蚤和蚤卵的影响外无其它方法能确定最低有效浓度，可假定向宿主动物施用引起对动物直接接触环境中跳蚤幼虫的杀卵活性的剂量为动物血液中的杀虫剂致死剂量。
发明概述
现在已发现经口服施于宿主动物某些杀虫剂当其杀虫剂的量在动物血液中已不能检测出之后的很长时间对跳蚤仍有效。进一步发现跳蚤直接(并且唯一)以取自宿主动物的血液为食但与动物皮毛不接触时，达到杀虫或杀卵活性必须的浓度比通过动物系统性给药以杀死跳蚤时在血液中观察到的浓度高许多。相应地，对于这些杀虫剂，本发明在于通过向宿主动物系统性给药以控制跳蚤和蚤卵，所给剂量不足以维持原先认为的血液中最低有效浓度，但仍然足以获得杀虫或杀卵效果。这样，与现有技术相反，用这些杀虫剂有效的控制跳蚤可通过以大大低于那些需要在宿主动物血液中超过最低浓度水平的系统性给药而实现。
关于本发明的这些及其它特征及优点可从以下描述中得出。
发明详述和优选实施方案
本发明适用于通式中的2,4-二烯酸、盐或酯，
Figure A9719746200071
其中，R1为C1-C6烷基；
R2为H、甲基或乙基；
R3为H或甲基；
R4为甲基或乙基；
R5为H或甲基；
R6为H或甲基；
R7为甲基或乙基；
R8为H、C1-C6烷基、C3-C6链烯基、C3-C6炔基、C3-C8环烷基、苯基、萘基、C7-C12芳烷基，或锂、钠、钾、钙、锶、铜、锰或锌阳离子；
X为Br、Cl、Fl或OR9，其中R9为H、C1-C6烷基，或C1-C6链烷酰基；
m为0、1、2或3；以及
n为0、1、2或3。
如此处使用的术语“环烷基”指一种饱和烃环，包括带有从环上碳原子分支出一或多个烷基基团的环。实例有环丙基、环苯基、环己基、甲基环己基以及环己甲基。优选环烷基基团有C3-C6环烷基，尤其优选环苯基和环己基。术语“芳烷基”指被有或无从环上碳原子分支出一或多个额外的烷基基团的芳香基团取代的烷基。芳烷基实例有苯甲基、苯乙基、萘甲基以及乙基苯甲基。优选芳烷基基团有C7-C9芳烷基，尤其优选苯甲基和苯乙基。术语“链烷酰基”指结合于羧基基团的烷基基团。实例有乙酰、丙酰、丁酰以及己酰。优选链烷酰基团有C1-C3链烷酰基，尤其优选乙酰和丙酰。
在以上2,4-二烯酸、盐和酯的通式范围内，优选某些亚类。例如一种这样的亚类定义为双键取反反或顺反构型，最优选为反反构型。另一种这样的亚类定义为：R1为甲基或乙基，R2为甲基或乙基，R7为甲基，R8为C1-C6烷基或C3-C6炔基，X为氯或OR9，m为0或1，以及n为1，所有其它各种基团如上所定义。第三种这样的亚类定义为：R1为甲基或乙基，R2为甲基，R3为H，R4为甲基，R5为H，R6为H，R7为甲基，R6为C1-C4烷基或C3-C4炔基，X为氯或OR9,m为1以及n为1。第四种优选亚类除R9为H、甲基、乙基、异丙基、叔丁基或乙酰基外与第三种亚类相同。第五种亚类除R9为甲基、乙基、异丙基，或叔丁基外与第三种亚类相同。此通式范围内的已知化合物的特异性实例有1-异丙基(反，反)-11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二双-2,4-烯酯(烯虫酯，或命名为反(2)，反(4)-异丙基11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二-2,4-双烯酯)，甲基(反，反)-3,7,11-三甲基十二双-2,4-烯酯(烯虫乙酯)，以及2-丙炔基(反，反)-3,7,11-三甲基十二-2,4-双烯酯(烯虫炔酯)。烯虫酯及特别是(S)-烯虫酯尤其令人感兴趣。对于烯虫乙酯，优选光学构型为(R,S)和(S)，而对于烯虫炔酯优选构型为(S)。
本发明的目的是实现与动物皮肤或毛接触的跳蚤至少约80％的致死率，而动物血液中活性成分的量不足以维持一定的浓度，以使来自直接以血液为食的约50％成蚤致死。在这些参数中，单次或每天给予宿主动物的活性成分的剂量可以有相当大的变化。在大多数应用中，日剂量约0.3到约10.0毫克活性成分每公斤动物体重(mg/kg)，或任何可使动物体内产生与上述剂量效果近似等同的剂量安排可以获得化合物的最有效的使用和最好结果。优选范围为约1.0到约5.0mg/kg。既然动物血液中测量到的药物浓度通常为动物整个机体内药物存在量的指标，那么优选剂量也可表示为足够维持活性成分特定血浓度的给药量。在这些术语中所表示的最佳结果一般可通过给予足够维持动物毛或脂肪组织中活性成分的致死浓度，但不足以维持血液中以体重为标准每十亿分之七十浓度的量而得到。
虽然并不意在受限于理论，认为在动物体内活性成分分配在血液中及某些组织和腺体之间，对这些组织和腺体尤其是亲脂性组织诸如脂肪细胞有优先亲和力。很有可能通过将有效成分经亲脂性组织、皮脂分泌腺和aprocrine腺而不是血液或疏水性组织传递到蚤或蚤卵从而得到显著的甚至是主要的效果。此种解释仅仅作为一种可能性，而并不意在作为对本发明范围的限制。
可用任何常规方式配制用于施于宿主动物的活性成分。制剂的选择将依赖于动物类型、动物大小以及给药方法，及其它因素诸如便捷性和费用。不同制剂的实例有诸如粉末、片剂、颗粒、胶囊以及乳剂。对于口服给药，可通过与动物饲料简单混合或者加入到食物原料的小丸、大块或颗粒中或包被于其表面而将活性成分与动物饲料结合。实例诸如饼干、treats、包被有或浸渗有活性成分的可嚼片剂，以及能分散在水中的活性成分的流体形式。进一步可在活性成分中补加常规地用作配方辅助的佐剂以及刺激动物自主消化的佐剂诸如香味剂或调味剂。用作制剂中内含物的佐剂实例为填充剂和结合剂，包括糖类诸如乳糖、蔗糖、甘露糖或山梨糖醇、纤维素制剂、磷酸钙、淀粉诸如玉米、小麦、大米或土豆淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、琼脂以及海藻酸钠。其它实例为调节流动剂和润滑剂，诸如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸及其盐，以及聚乙二醇。进一步的实例对制剂领域的技术人员是显而易见的。
也可通过非肠道或植入给药。非肠道给药可通过皮下、静脉注射或肌肉注射或通过透皮应用完成。制备植入剂通过例如，将活性成分分散在诸如固体橡胶的基质中，使其能从中渗出，或者将活性成分放入空胶囊中，活性成分可通过胶囊壁扩散。所有这样的制剂和给药方法在本领域的技术人员中是众所周知的。
本发明应用于陆栖动物的治疗，其领域和意义为畜牧动物和宠物动物领域的技术人员众所周知。这类动物包括家养宠物、家畜以及各种侣伴动物。特殊实例为狗、猫、仓鼠以及雪貂。对狗和猫尤其感兴趣，可能对狗最有兴趣。
本发明的方法适用于通过向带有这类寄生行为的动物施用药物来消灭或减少跳蚤的寄生。这些方法也适用于通过向未有寄生但被置于或将要进入不如此处理动物则易于寄生的环境的狗或猫施用药物来阻止跳蚤寄生。此处使用术语“控制跳蚤”表示对已出现的寄生的消除或减少以及在寄生发生前就进行防止。
以下实施例仅用于说明。
实施例1
以下实验证明给狗单次口服(S)-烯虫酯时其在血液中维持时间不超过48-96小时。此实验所施用的剂量与也按单次口服剂量以有效控制跳蚤14天的下述实施例2中显示的剂量相同。
使用6只健康混血狗，3只雄的3只雌的，每只狗体重为14-22kg，年龄2-5年。对于每只狗，根据狗体重制备含已测量(S)-烯虫酯体积的明胶胶囊以在单个明胶胶囊中产生每只狗50mg/kg狗体重的剂量。施用各自的胶囊前对狗禁食24小时，并且将胶囊放在每只狗喉咙后部使其吞下来完成给药。然后又另外禁食8小时，而水一直供应，并且第二天早晨喂食一次。
在每个取样时间，从每只狗的股静脉收集50mL血置于2支25mL注射器中。于给药前7天(以建立基线)、给药后3小时、1天、2天、4天以及7天取样。测每个样品的血细胞比容以确保实验期间血细胞比容下降不超过30％。
为制备血样以确定烯虫酯含量，每份25mL血样与200mL乙腈、25g无水Na2SO4以及10g CELITE在混合器中混合三次，每次1分钟。各次之间让搅拌器叶片冷却30秒。然后真空过滤混合物，包括用50mL乙腈清洗一次。滤液用石油醚抽提1分钟，然后用700mL去离子水稀释。加入50g NaCl并且用0.5N HCl将溶液酸化到pH2。然后弃除水相，石油醚相用600mL去离子水清洗两次。接着石油醚经过其上有50g Na2SO4的玻璃棉花塞过滤。然后用15mL石油醚冲洗Na2SO4，并且用30℃的水浴温度在旋转蒸发器中将抽提物浓缩到10mL。然后浓缩抽提物贮藏于冰箱中直到分析中的下一步骤。
200℃加热激活FLORISIL(硅酸镁吸收剂)24小时，接着冷却FLORISIL45分钟，每50g FLORISIL加入5mL蒸馏水，振摇混合物，并且平衡3小时以制备抽提柱。28mm内直径的玻璃柱用玻璃棉塞住并填充石油醚。缓慢往柱中倒一层1cm的Na2SO4，之后加6.5cm的FLORISIL和1.5cm Na2SO4。然后引流石油醚直至其到达Na2SO4层。接着，前述步骤得到的抽提物用玻璃移液管加样到柱的上部，用石油醚冲洗移液管并加到柱上。然后排干柱直到溶剂层在Na2SO4之上，并且弃去洗脱液。
每份样品用1L 5％乙醚/石油醚进行洗脱，并且收集175mL和825mL级分。然后将825mL级分蒸发至5mL并贮于冰箱。
为制备825mL级分以进行气相色谱分析，将1mL内标加入样品，并且样品容积用氮蒸发至约0.3mL。将每个5μL的两个等分量注入装备了带有3％OV-101 Chrom W HP 100/120筛孔填充物的6英寸乘1/4英寸玻璃柱的气相色谱(Perkin Elmer,Sigma,300，带有氢焰离子化检测器和数据系统)，使用流速为60mL/分钟的氮气作为载体气体，并且注射器、柱和检测器温度分别为300℃、166℃和280℃。
结果如以下表1所示。表Ⅰ在单次口服50mg/kg体重烯虫酯后其在狗血液中的浓度(μg/ml)时间    血液中烯虫酯的浓度(mg/mL)(小时)                                              均值SEM狗：       A       B     C      D      E      F性别       雄      雌    雌     雌     雄     雄0       0.000    0.000  0.000  0.000  0.000  0.000  0.000  0.0003       0.727    0.172  nd     nd     2.130  0.250  0.547  0.41024      0.263    0.096  0.151  nd     nd     nd     0.085  0.06248      nd       nd     0.346  0.197  0.074  0.006  0.104  0.07196      nd       nd     *      nd     nd     nd     nd     nd168     nd       nd     nd     nd     nd     nd     nd     nd
“nd”：未检测出
*：分析误差
这些结果显示六只狗中有两只经过48小时烯虫酯水平降到可检测量以下，并且在其余四只狗中，烯虫酯水平经过96小时降到可检测量以下。
实施例2
此实验证明了给狗单次口服剂量与实施例1的剂量相同或少于实施例1的剂量时(S)-烯虫酯的杀卵功效。
使用九只随机繁殖的临床健康狗，五只雄的四只雌的，体重7.5-14.9Kg，年龄7-68个月，并且毛皮从纤细到粗硬且长度为1.0-2.5cm。根据体重将狗分成三个处理组，一组指定接受安慰剂(不含(S)-烯虫酯的明胶胶囊)，第二组分别接受制备的含合适量(S)-烯虫酯的明胶胶囊，以使一粒明胶胶囊可提供25.0mg(S)-烯虫酯/kg特定狗体重，第三组分别接受制备的以提供每只狗50.0mg/kg体重的明胶胶囊。第0天给每只狗口服一粒胶囊并且第33天口服第二粒胶囊，另外有规律地喂养狗以食物和水。
在施用第一粒明胶胶囊前11天(即，第-11天)以及其后59天内每一周，每只狗用大约200只一到两周龄未给食的混合性别比例的成猫栉头蚤。沿背部释放跳蚤时将每只狗束缚约1分钟。
第-7、0、1、2、4、7天以及其后63天内每周收集蚤卵。收集卵之前，用异丙醇冲洗装狗的笼子和收集盘，关掉水，从每只笼中撤去喂食的碗和休息垫。将铺有8英寸丝网制成的筛子的盘放在笼子下面，并且在丝网下放置重白布氏纸(heavy white butcher paper)。14-16小时间隔后，清扫该纸并且将这样收集的碎屑和蚤卵移入金属浅盘。通过滤筛从卵中分离碎屑并且将卵置于半品脱塑料匣中，然后转移到10cm×10cm玻璃板上。用解剖显微镜和细尖画笔从每只狗的清扫物中数出100只蚤卵并分成每组25只卵的四个重复组。将卵放于15mm×60mm的一次性塑料培养皿中并在79-80°F和80％相对湿度下孵育。收集后72小时，确定幼虫的出现。计数死和活的幼虫以确定处理的杀卵效果。
结果记录在以下表Ⅱ中，其中每项记录代表相对于安慰剂组从蚤卵中孵化出跳蚤的抑制百分数，而且每项记录是所有重复组和特殊处理组中所有三只狗的平均值。
表Ⅱ宿主狗经口服烯虫酯系统性杀蚤卵活性
                                      蚤卵孵化抑制百分数初次施用       剂量                         50mg/kg   25mg/kg后的天数  在第0天施用一次，在第33天施用一次1                                              98.9     92.32                                             100.0     80.44                                             100.0    100.07                                              97.5     44.414                                             97.9     75.121                                             73.0     79.028                                             50.8     39.935                                            100.0    100.042                                            100.0     95.949                                             51.5     11.355                                             31.9     12.663                                             16.1     14.0
这些结果显示系统性施予宿主狗实施例1中使用的剂量以及其剂量一半的(S)-烯虫酯时对跳蚤有杀卵效果，并且杀卵功效可持续两周或两周以上，大大超过狗血液中(S)-烯虫酯浓度降到可检测水平以下的时间。
实施例3
本实验比较了狗口服(S)-烯虫酯的杀卵功效和从同一只狗中抽出并通过体外给药方式直接喂给跳蚤的血液中(S)-烯虫酯的杀卵功效。以初始剂量给予(S)-烯虫酯之后，以低速率每天给药。
对于体外实验，使用如Wade,S.E.等，J.Med.Ent.25(3):186-190(1988年5月)所述的有成猫栉头蚤的笼子的人工喂养系统。每只笼子内放入100只一周龄未给食的成猫栉头蚤。每只笼子包括用于通过PARAFILM膜与跳蚤分隔的处理过的血液的容器，以及一个含有薄纸条以支撑松散捆扎的清洁狗毛并在当跳蚤通过膜而吸食血液时为其提供立足之处的隔间。
十五只一周岁体重10.29-13.87Kg健康雄性猎犬分成三组，每组5只。一组喂食50mg/kg的(S)-烯虫酯初始剂量，之后每天喂食含0.02％(S)-烯虫酯的标准维持饮食。第二组喂食25mg/kg的(S)-烯虫酯初始剂量，之后每天喂食含0.01％(S)-烯虫酯的标准维持饮食。第三组接受相同饮食但无(S)-烯虫酯，因此作为对照。第一组中每天喂食0.02％(S)-烯虫酯共计大约3.6mg/kg，而第二组中每天喂食0.01％(S)-烯虫酯共计大约1.8mg/kg。(S)-烯虫酯在明胶胶囊中施用，对照组施用含有代替(S)-烯虫酯的植物油的明胶胶囊，并且标准饮食为科学配方维持狗饮食(Science Diet Canine Maintenance)。给初始剂量后每天喂(S)-烯虫酯，持续6星期。
给初始剂量后7天和其后除第4周外五周内的每周，从每只狗收集50mL血液于预先加有3mL 20％(重量百分比)柠檬酸钠水溶液的注射器中。每次采血时混合获自每个处理组的五个50mL样品。将从每个混合样品中取得的每个10mL等分量放于人工跳蚤喂养笼的分隔喂养箱中。
在适当的时间间隔从每个笼子收集蚤卵。在解剖显微镜下计数来自每个笼子的一百(100)只健康跳蚤，分为两个样品亚组，并且置于60mm×15mm塑料培养皿中。在78°F和85％相对湿度下孵育样品3天，然后通过解剖显微镜肉眼观察计数幼虫的孵化。将每个处理组中所有的重复组得到的数据结合起来以得到卵孵化的平均百分数，并且计算相对于对照组的卵孵化的抑制百分数。
第4周数据点的前3天，按实施例2中所述的方式将跳蚤寄生在每只狗上。在第4周，按实施例2所述的方式从狗身上收集蚤卵，并且如实施例2确定以此种方式收集的跳蚤的蚤卵孵化抑制百分数。
表Ⅲ中显示了使用人工喂养箱的体外结果，表Ⅳ中显示了体内结果。
表Ⅲ体外(S)-烯虫酯杀蚤卵活性试验开始后的周数          蚤卵孵化抑制百分数
          初始剂量：  50mg/kg   25mg/kg     对照1                            33      6            02                            --*   --            --3                            48     38            05                            38     24            06                            22     19            0*未产生足够量的蚤卵以确定孵化率
表Ⅳ 宿主狗经系统口服施用烯虫酯的杀卵活性试验开始后的周数      蚤卵孵化抑制百分数
    初始剂量： 50mg/kg  25mg/kg   对照4                  100      100       0
这些结果共同证明了直接通过血液不足以获得有效杀卵活性的血液中烯虫酯的水平和由系统性给药产生有效杀卵的血液水平相同。这证明了没有必要将血液中烯虫酯浓度维持在最小杀卵量之上以获得杀卵效果，并且此效果可通过系统性给予导致血液水平在杀卵量之下的剂量而获得。
实施例4
本实验是不在本发明范围内的一种杀卵剂的比较性实验。杀卵剂为鲁分脲(fluphenacur)，本实验中进行的检测研究了此杀卵剂的杀卵活性与其在哺乳动物血液中的浓度之间的关系。在体外人工喂养系统中，使跳蚤直接以含杀卵剂的血液为食完成实验。本实验的结果结合实施例5的结果否定了现有技术主张的杀卵机制。
使用实施例3所述的用于成猫跳蚤的人工喂养系统和笼子。喂养系统使用牛血并且每升血液中加35mL 20％柠檬酸钠溶液以防止凝固。在4.951g二甲亚砜(DMSO)中加入50.1mg成品鲁分脲得到1.0％溶液制成鲁分脲原液。在9.0mL DMSO中稀释1.0mL 1.0％溶液制备1,000ppm溶液。在9.0mL DMSO中稀释1.0mL 1,000ppm溶液制备100ppm溶液。二甲亚砜本身用作对照。为处理血液，将各种溶液(0.05mL)加到柠檬酸化的牛血(100.0mL)中得到含5.0ppm、0.5ppm、0.05ppm和0.00(0)ppm鲁分脲的牛血溶液。彻底混合每一溶液。将每一浓度的溶液10mL放入人工喂养系统的五个喂食器中作为重复组。每天将与原来相同的新鲜血溶液放入喂食器中。
于第3、5和7天从每个重复组中收集蚤卵。在解剖显微镜下从每个重复组中计数一百(100)只健康的跳蚤。每个重复组分成两个样品亚组，并放于60mm×15mm塑料培养皿中。在78°F和85％相对湿度下孵育样品3天，然后通过解剖显微镜肉眼观察计数幼虫的孵化。将每一浓度所有重复组的数据结合起来以得到卵孵化平均百分数，并且计算相对于对照组的卵孵化的抑制百分数。
结果显示在下表Ⅴ中。
表Ⅴ体外鲁分脲的杀蚤卵活性试验开始后的天数            蚤卵孵化抑制百分数
    血液中鲁分     5.0ppm   0.5ppm    0.05ppm
    脲的浓度：3                      100       80.6*     **5                      99.8      56.5      10.87                      100       63.2      6.9*对照和处理组中所产卵的低数值**无卵产生
在牛血中稀释鲁分脲并直接喂给成猫跳蚤(体外)时其杀卵活性的99％有效浓度(EC99)在0.5和5.0ppm之间。将此与下一实施例得到的结果比较。
实施例5
这是进一步对鲁分脲进行的实验以研究给宿主狗口服系统性施用鲁分脲的功效。
使用六只随机繁殖和纯种繁殖的临床健康狗，3只雄的，3只雌的。体重为5.5-17.2Kg，年龄5-42个月，皮毛从中度到粗硬，长度为1.0-5.0cm。将狗分成两个处理组，每组3只。所有狗按狗食和水的规律喂养计划来供养，两组中的一组的每只狗均给予含合适量鲁分脲的明胶胶囊以得到10mg/kg狗体重的剂量。此剂量在供应商的技术文献中被鉴定为对于狗身上狗栉头蚤的最小有效剂量以及单次给药后引起血液中0.05ppm的浓度水平持续至少14天的剂量。在第0天以及第28天给药。
第-8(给鲁分脲前8天)、-4、3、10、17、24、31、38、45、52以及59天，通过标准步骤将约100只未给食的成狗栉头蚤加到每只狗身上。收集蚤卵并且在第-4、0、1、2、4、7、14、21、28、35、42、49以及56天通过实施例2的步骤确定幼虫的出现(卵孵化)。结果记录在以下表Ⅵ中。
表Ⅵ经于第0天和第28天以单次剂量10mg/kg
向宿主狗口服施用鲁分脲的系统性杀蚤卵活性相对于初次施用的天数    蚤卵孵化的抑制百分数-4                            --0                             --1                             39.92                             70.64                             54.57                             54.114                            52.121                            10.728                             035                            48.642                             049                            72.756                            20.5
比较这些结果和上面表Ⅴ(实施例4)中的结果，向宿主狗系统性口服施用的蚤卵孵化抑制百分数比以相同血液浓度体外直接喂养蚤卵的抑制百分数高许多。这本身是令人惊讶的结果。而且，既然技术文献显示血液中鲁分脲浓度在系统性给药48小时内不象烯虫酯会降到可检测水平以下，那么实施例1和2显示的烯虫酯的持续功效更令人惊讶。
实施例6
回到(S)-烯虫酯，为和实施例4比较，本实施例显示了使用牛血体外杀蚤卵的活性。使用牛血的步骤与前面的实施例中相同。结果显示在以下表Ⅷ中。
表Ⅶ体外(S)-烯虫酯的杀蚤卵活性(利用牛血)实验开始  血液中(S)-烯    蚤卵孵化的抑制百分数后的天数  虫酯的浓度
    (ppm)：    0.5ppm    0.25    0.1     0.075    0.053                  99.1％                             47.35                            100.0   97.46                            99.0    95.77                  100.08                                            a:66.0
                                         b:78.010                 100.0     65.413                 100.0平均               99.8      99.5    96.6    72.0     56.4
实施例7
本实施例显示了大鼠体内给予(S)-烯虫酯后其在血液和脂肪组织之间的分布。
Sprague-Dawley CD VAF/PLUS购自Charles River BreedingLaboratories,Inc.,Portage,Michigan，美国。给药时大鼠体重平均为200g。除颈静脉插管的大鼠外，大鼠使用前隔离5天，接收后1到3天给药。大鼠分成三组给予14C-(S)-烯虫酯：
A组通过颈静脉单次静脉注射10mg/kg剂量的杀卵剂。三只大鼠每只给药后0.5小时、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时以及7小时处死。
B组通过强饲法单次口服10mg/kg剂量的杀卵剂。三只大鼠每只给药后1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时以及8小时处死。
C组通过强饲法单次口服100mg/kg剂量的杀卵剂。三只大鼠每只给药后1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时以及8小时处死。
给药后将大鼠各自装进笼中。室温维持在69-75℃以及相对湿度在40％-70％。所有大鼠随意进食和饮用清洁自来水。
为分析血液中的(S)-烯虫酯，从每只大鼠抽取约7mL血液加到60μL肝素和70μL对氧磷中(防止(S)-烯虫酯分解)。混合每份血样并用超声处理器溶血1分钟，然后用20mL己烷和乙醚1∶1(体积比)混合物抽提。超声处理抽提物3分钟，再旋涡混合3分钟，然后离心。此步骤重复3次。混合己烷/乙醚抽提物，进行放射性分析，在旋转蒸发器上蒸发并在氮蒸气下浓缩。通过液闪计数进行放射性分析，溶剂抽提前将100μL血液与20μL过氧化氢混合使样品脱色。使用厚0.25mm预铺硅胶G带荧光指示剂的色谱板对浓缩血样进行薄层色谱分析(TLC)。有机抽提物单独点样或与参比标准烯虫酯和烯虫酯酸共同色谱分析，然后在己烷/乙醚/乙酸50∶50∶1(体积比)中展开。使放射性条带和斑点成像并定量。
为分析脂肪中的杀卵剂，从处死的大鼠收集内脏脂肪。获自每只大鼠的脂肪样品与纤维素粉末1∶1充分混合，并和数滴水一起匀浆。每份脂肪样品的一部分(0.5g到1g)用10ml己烷/乙醚(1∶1)混合物抽提，在超声处理器上剧烈处理4分钟，然后旋涡混合2分钟并离心。此步骤重复两次。然后合并抽提物，进行放射分析，旋转蒸发并且在氮气下浓缩以用于TLC分析。加入少量甲醇沉淀脂肪以改善TLC分离。按与处理血样相同的方式进行放射性分析和TLC分析。
表Ⅷ和Ⅸ中记录了未分解的(S)-烯虫酯(如由TLC所分离的)的结果。这些表格的比较表明杀卵剂在血液和脂肪之间的分布显著不平衡，在脂肪组织中滞留的比率较大。
表Ⅷ经体内施用后大鼠血液中的(S)-烯虫酯浓度时间(小时)    血液中(S)-烯虫酯的浓度(ppm)*A组              B组            C组10mg/kg静脉注射    10mg/kg口服    100mg/kg口服0.5      0.703±0.307           --             --1        0.345±0.107      0.112±0.038   0.165±0.0702        0.113±0.028      0.264±0.122   3.487±1.3243        0.079±0.002      0.202±0.065   1.302±0.4094        0.066±0.028      0.130±0.066   1.504±0.5335        0.048±0.001      0.052±0.026   0.930±0.4496        0.046±0.027      0.045±0.014   0.527±0.3417        0.019±0.008      0.020±0.005   0.608±0.2928            --            0.021±0.009   0.483±0.221*表中每项记录为三只动物的平均值。
表Ⅸ经体内施用大鼠脂肪中(S)-烯虫酯的浓度时间(小时)    脂肪中(S)-烯虫酯的浓度(ppm)*
        A组              B组            C组
   10mg/kg静脉注射   10mg/kg口服    100mg/kg口服0.5    4.193±1.566          --              --1      6.936±3.259      0.272±0.103   1.060±0.2702      5.929±1.197      1.138±0.388   14.726±3.3713      5.233±0.457      1.715±0.680   22.868±3.3224      8.179±3.532      2.327±1.090   45.316±16.9105      7.596±3.990      2.980±0.657   38.420±2.7656      6.734±2.209      3.369±0.814   41.898±11.5687      8.077±1.082      2.921±1.345   39.393±17.9528          --            2.408±0.702   47.162±20.116*此表中每项记录除在C组1小时处为两只动物平均值外其余均为三只动物的平均值。
实施例8
此实施例比较了经口服给予(S)-烯虫酯时其在狗毛和血液之间的分布。
根据毛皮、健康状况以及各自的生活习惯选择12只不同性别中等毛长的随机繁殖的成年狗。将这12只狗分成两组每组6只。狗的体重为22.5kg-35.0kg，并且不同的体重和各种性别在每组中均有体现。每天给狗已知量的科学配方维持狗食并且随时供水。两组狗分开喂养。第1组的狗不经任何处理，而第二组的狗仅在研究开始时(第0天)每只施用一次50mg/kg工业品(S)-烯虫酯。
定期用10cc一次性注射器吸取血样，并将其转移至用50mL 1×10-2M浓度的对氧磷溶液处理的标记过的5mL肝素化EDTA真空容器(Vacutainers)中。将血样冰冻直到用于分析。取血样的同一天从狗身上剪下狗毛样品，然后置于用铝箔封口的标记过的冰冻罐中并冰冻起来。
为分析狗毛，用己烷抽提已知量(4-8g)的每份狗毛样品，将抽提物蒸发并将残余物在2mL己烷中重构。使用3cc/500mg二氧化硅柱以固相抽提法清洗1mL抽提物。然后用5％乙酸乙酯/己烷将(S)-烯虫酯从柱中洗脱。残余物在1mL乙腈中重构并在C18柱(250×4.6mm,10微米直径)上于264nm波长以二极管阵列检测进行反相高压液相色谱(HPLC)分析，流动相为90∶10的甲醇：水，流速1.5mL/分钟，注入体积为100mL。(S)-烯虫酯峰在约5.1分钟处洗脱出来。根据同时过柱的一系列标准品产生的标准曲线计算(S)-烯虫酯的浓度。定量测量的限度约为20ppb。
为分析血样，用甲基叔丁基醚抽提样品3次，蒸发，在1mL甲醇中重构，并用如狗毛分析中所用的HPLC进行分析。
狗毛实验的结果显示在表Ⅹ(A)和Ⅹ(B)中，后者呈现了对照数据。血液检测的结果显示在表Ⅹ1(A)和Ⅹ1(B)中，后者呈现了对照数据。每种情况下，均以ppb为单位报告结果，即，每十亿单位重量的狗毛或全血中所含样品的单位重量。字母“ND”表示(S)-烯虫酯的水平在检测极限以下。
表Ⅹ(A)以50mg/kg口服施用后狗毛中的(S)-烯虫酯的浓度天数    (S)-烯虫酯的浓度(ppb)
  狗No.:  #529       #528    #98     #532     #535   #600              ND*      ND      ND       ND      ND     ND1              86.6      76.6    47.4     ND      49.3   60003              82.2      199     125      62.4    424    33,9005              58.3      114     161      98.6    276    12,5007              34.5      150     126      117     294    2,40010             60.5      126     167      255     681    12,30014             85.5      103     200      350     800    5,30017             39.7      137     345      331     1092   3,60021             93.5      31.2    231      342     675    12,10028             106       47.2    287      230     461    5,200*ND：低于检测极限以下
表Ⅹ(B)未处理的狗的狗毛中(S)-烯虫酯的浓度天数                    (S)-烯虫酯的浓度(ppb)
 狗No.:#380    #527    #531    #534    #536    #5380           ND      ND      ND      ND      ND      ND1           ND      ND      ND      ND      ND      ND3           ND      ND      ND      ND      ND      ND5           ND      ND      ND      ND      ND      ND7           ND      ND      ND      ND      ND      ND10          ND      ND      ND      ND      ND      ND14          ND      ND      ND      ND      ND      ND17          ND      ND      ND      ND      ND      ND21          ND      ND      ND      ND      ND      ND28          ND      ND      ND      ND      ND      ND
表Ⅺ(A)以50mg/kg口服施用后狗血液中(S)-烯虫酯的浓度天数                    (S)-烯虫酯的浓度(ppb)
  狗No.: #529    #528    #98    #534    #535     #600             ND      ND     ND     ND       ND      ND1             172     165    97.2   146      239     1173             52.1    63.6   ND     94.2     93.3    36.05             ND      ND     ND     66.8     47.4    ND7             55.7    ND     ND     ND       ND      ND10            ND      ND     ND     ND       ND      ND14            ND      ND     ND     ND       ND      ND17            ND      ND     ND     ND       ND      ND21            ND      ND     ND     ND       ND      ND28            ND      ND     ND     ND       ND      ND
表Ⅺ(B)未处理的狗的血液中(S)-烯虫酯的浓度天数                   (S)-烯虫酯的浓度(ppb)
狗No.: #380    #527    #531    #534    #536    #5380           ND      ND      ND      ND      ND      ND1           ND      ND      ND      ND      ND      ND3           ND      ND      ND      ND      ND      ND5           ND      ND      ND      ND      ND      ND7           ND      ND      ND      ND      ND      ND10          ND      ND      ND      ND      ND      ND14          ND      ND      ND      ND      ND      ND17          ND      ND      ND      ND      ND      ND21          ND      ND      ND      ND      ND      ND28          ND      ND      ND      ND      ND      ND这些表中的数据清楚地表明，杀卵剂在毛中残留比率较大，并且在血液中已不能检测到杀卵剂之后很长时间仍存在于毛中。
提供前述内容主要意在说明。此处描述的比率、剂量、给药方法、制剂以及方法中的其它参数在不偏离本发明精神和范围时可进一步通过各种途径进行修饰或替代，这对本领域熟练的技术人员是显而易见的。

Claims (16)

1．一种控制陆栖哺乳动物毛皮中蚤类的方法，包括系统性地向上述哺乳动物施用一定量的2,4-二烯酸、盐或酯的杀虫剂，该杀虫剂的剂量，尽管不足以在上述哺乳动物血液中维持对来自直接以该血液为食的成蚤的发育蚤有大约50％致死率的浓度，但仍然对与上述哺乳动物皮肤或毛接触的发育蚤有至少大约80％的致死率。
2．一种根据权利要求1的方法，其中施用杀虫剂的量等同于从约0.3至约15.0mg/kg上述哺乳动物体重/每天的每日剂量。
3．一种根据权利要求1的方法，其中施用杀虫剂的量等同于从约1.0至约5.0mg/kg上述哺乳动物体重/每天的每日剂量。
4．一种根据权利要求1的方法，其中施用杀虫剂的量少于维持上述哺乳动物血液中以重量计每十亿单位含七十单位杀虫剂的浓度需要的量。
5．一种根据权利要求1的方法，其中杀虫剂以口服方式给药。
6．一种根据权利要求1的方法，其中上述陆栖哺乳动物为狗或猫。
7．一种根据权利要求1的方法，其中，上述陆栖哺乳动物为狗。
8．一种根据权利要求1的方法，其中上述杀虫剂为具有如下通式的化合物：
Figure A9719746200021
其中，
R1为C1-C6烷基；
R2为H、甲基或乙基；
R3为H或甲基；
R4为甲基或乙基；
R5为H或甲基；
R6为H或甲基；
R7为甲基或乙基；
R8选自H、C1-C6烷基、C3-C6链烯基、C3-C6炔基、C3-C8环烷基、苯基、萘基、C7-C12芳烷基，以及选自锂、钠、钾、钙、锶、铜、锰和锌的金属阳离子；
X选自Br、Cl、Fl以及OR9，其中R9选自H、C1-C6烷基以及C1-C6链烷酰基；
m为0、1、2或3；以及
n为0、1、2或3。
9．一种根据权利要求8的方法，其中：R1为甲基或乙基；R2为甲基或乙基；R7为甲基；R8选自C1-C6烷基和C3-C6炔基；X为氯或OR9；m为0或1；以及n为1。
10．一种根据权利要求8的方法，其中：R1为甲基或乙基；R2为甲基；R3为H；R4为甲基；R5为H；R6为H；R7为甲基；R8选自C1-C4烷基和C3-C4炔基；X为氯或OR9；m为1；以及
n为1。
11．一种根据权利要求8的方法，其中：
R1为甲基或乙基；
R2为甲基；
R3为H；
R4为甲基；
R5为H；
R6为H；
R7为甲基；
R8选自C1-C4烷基和C3-C4炔基；
X为氯或OR9，其中R9选自H、甲基、乙基、异丙基、叔丁基以及乙酰基；
m为1；以及
n为1。
12．一种根据权利要求8的方法，其中：
R1为甲基或乙基；
R2为甲基；
R3为H；
R4为甲基；
R5为H；
R6为H；
R7为甲基；
R8选自C1-C4烷基和C3-C4炔基；
X为OR9，其中R9选自甲基、乙基、异丙基和叔丁基；
m为1；以及
n为1。
13．一种根据权利要求8的方法，其中所述杀虫剂具有选自反反和顺反的构型。
14．一种根据权利要求8的方法，其中所述杀虫剂具有反反构型。
15．一种根据权利要求8的方法，其中所述杀虫剂为异丙基11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二-2,4-二烯酸、酯或盐。
16．一种根据权利要求8的方法，其中所述杀虫剂为异丙基(反，反)-(7S)-11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二-2,4二烯酸、酯或盐。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2948261B1 (fr) * 2009-07-22 2015-10-30 Sarl Herbarom Laboratoire Procede insecticide et/ou repulsif
BR112016013020B1 (pt) * 2013-12-10 2020-12-01 Intervet International B.V uso de quantidades sub-terapêuticas de fluralaner

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ221262A (en) * 1986-08-06 1990-08-28 Ciba Geigy Ag Preventing the reinfestation of dogs and cats by fleas by administering to the host a flea growth inhibiting substance orally, parenterally or by implant
US4850305A (en) * 1987-12-02 1989-07-25 Cornell Research Foundation, Inc. Artificial system and method for breeding fleas

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DE69723274D1 (de) 2003-08-07
BR9710910A (pt) 1999-08-17
IL128218A (en) 2003-02-12
CN1103544C (zh) 2003-03-26
CA2262840A1 (en) 1998-02-12
ATE243935T1 (de) 2003-07-15
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IL128218A0 (en) 1999-11-30
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PT923292E (pt) 2003-11-28
EP0923292B1 (en) 2003-07-02

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