CN1222276C

CN1222276C - 阿苯达唑脂质体及中和法制备脂质体方法

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Publication number: CN1222276C
Application number: CN 02152519
Authority: CN
Inventors: 温浩; 王建华; 牛若杰; 林筱琦; 陈迹
Original assignee: First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University
Current assignee: First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University
Priority date: 2001-11-21
Filing date: 2002-11-20
Publication date: 2005-10-12
Anticipated expiration: 2022-11-20
Also published as: CN1422611A

Abstract

一种阿苯达唑脂质体，按重量体积百分比由以下成份构成：A.有0.50至1.00%阿苯达唑粉；B.有1.00至3.00%的卵磷脂；C.有0至0.30%的苯甲酸钠；D.0至0.02%抗氧剂；E.余量为0.7至0.9%的氯化钠溶液。本发明将阿苯达唑制备成阿苯达唑脂质体，可改善阿苯达唑的溶解度，提高阿苯达唑生物利用度，增强靶向性和提高药物的临床疗效。本发明提供了一种中和法制备脂质体的新方法，特别适用于制备阿苯达唑脂质体，也可用中和法制备其它同类物质的脂质体，如：将苯并咪唑类衍生物等药物制成脂质体。在本发明的方法中，不使用氯仿、丙酮、乙醚等有机溶剂，生产中对环境污染小，易于操作和工业化生产。

Description

阿苯达唑脂质体及中和法制备脂质体方法

一、技术领域：

本发明涉及脂质体及其制备方法，是一种阿苯达唑脂质体及其中和法制备方法，特别应用于人体寄生虫防治。

二、背景技术：

将磷脂等类脂质物质分散在水中时，会形成多层囊泡，每层均为脂质的双分子层。囊泡中央和各层之间被水相隔开，这种具有类似生物膜双分子结构的囊泡称为脂质体(liposomes)(参见Rahman Y E等人的“癌症化疗上的潜在方法-包封脂质体的放线菌素D”实验生物医药领域学报，1974，146(4)：1173)。通过一定的方法和技术，可将药物包封于脂质体的双分子层中，使脂质体作为运载药物的工具即药物载体来应用。脂质体作为药物载体具有在体内可生物降解、无毒性和无免疫原性等特点，特别是它的天然靶向性、长效性等特点，使其为靶向载体被广泛应用在抗肿瘤、抗寄生虫、生物疫苗等药物的研究中。

目前制备脂质体常用和主要的方法有：薄膜法(参见Rahman Y E，等人的“固醇类化合物和链球菌溶血素S对阳离子磷脂结构渗透性的作用”分子生物学杂志，1965，13：238)、逆相蒸发法(参见Szoka F，等人的“逆相蒸发法制备内水相和高包封率脂质体的过程”美国科学国家学术学报1978，75：4194.)、注入法(参见Deamer D，等人的“乙醚蒸发法制备大单层脂质体”生物化学生物物理学学报1976，443：629)、冷冻干燥法(参见Kirby C等人编著的生物学技术，第2979页1984年)、前体脂质体法(参见Payne NI等人的“前体脂质体：一种解决老问题的新方案”药剂科学杂志1986，75：325)等。

这些方法多采用氯仿、乙醚或乙醇等将磷脂等类脂质溶解后再分散在水相中形成脂质体。阿苯达唑(Albendazole)属于苯并咪唑类衍生物，化学名为[5-(丙硫基)-1H-苯并咪唑-2-基]氨基甲酸甲酯，它不仅是一种广谱抗寄生虫药物，也是一种较为理想的治疗包虫病的药物，是世界卫生组织(WHO)推荐的抗包虫的主要药物之一。由于阿苯达唑在水中不溶，在丙酮、乙醚或氯仿中微溶，在乙醇中几乎不溶(参见中华人民共和国药典.2000年版二部.化学工业出版社第333-334页)，因此限制了阿苯达唑现有的剂型如片剂、胶囊等在体内的吸收和药效的发挥。将阿苯达唑制备成阿苯达唑脂质体，可改善其溶解度，提高生物利用度，增强靶向性和提高药物的临床疗效。但是由于阿苯达唑的难溶性使现已报道的方法很难将其制备成阿苯达唑脂质体制剂。

三、发明内容：

本发明解决了将阿苯达唑制成阿苯达唑脂质体的难题，并提供了一种中和法制备脂质体的新方法，特别适用于制备阿苯达唑脂质体，也可用中和法制备其它同类物质的脂质体。

本发明是通过以下措施实现的：

一种阿苯达唑脂质体，按重量体积百分比由以下成份构成：A.有0.50至1.00％阿苯达唑粉；B.有1.00至3.00％的卵磷脂；C.有0至0.30％的苯甲酸钠；D.0至0.02％抗氧剂；E.余量为0.7至0.9％的氯化钠溶液。

一种阿苯达唑脂质体的中和法制备方法，按下述步骤进行：首先按重量体积百分比将0.50至1.00％的阿苯达唑粉和1.00至3.00％的卵磷脂溶解在冰醋酸中，其次用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含醋酸钠的阿苯达唑脂质体；然后经透析除去中和反应中所产生的醋酸钠，经0至4℃的冰水浴和0至40分钟超声处理后，加入0至0.30％的苯甲酸钠、0至0.02％抗氧剂和余量的0.7至0.9％氯化钠溶液，得到阿苯达唑脂质体；其中，抗氧剂为维生素E或/和维生素C，冰醋酸的量等于或大于能溶解阿苯达唑粉和卵磷脂的冰醋酸量。

一种中和法制备脂质体方法，按下述步骤进行：首先按重量体积百分比将1.00至3.00％的卵磷脂溶解在冰醋酸中，其次用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含醋酸钠的脂质体；然后经透析除去中和反应中所产生的醋酸钠，经0至4℃的冰水浴和0至40分钟超声处理后，加入0至0.30％的苯甲酸钠、0至0.02％抗氧剂和余量的0.7至0.9％氯化钠溶液，得到脂质体；其中，抗氧剂为维生素E或\和维生素C，冰醋酸的量等于或大于能溶解卵磷脂的冰醋酸量。

本发明将阿苯达唑制备成阿苯达唑脂质体，可改善阿苯达唑的溶解度，提高阿苯达唑生物利用度，增强靶向性和提高药物的临床疗效。本发明提供了一种中和法制备脂质体的新方法，特别适用于制备阿苯达唑脂质体，也可用中和法制备其它同类物质的脂质体，如：将苯并咪唑类衍生物等药物制成脂质体。在本发明的方法中，不使用氯仿、丙酮、乙醚等有机溶剂，生产中对环境污染小，易于操作和工业化生产。

五、具体实施方式：

本发明不受下面实施例的限制。

实施例1：不含药的脂质体(空白脂质体)每100毫升由1.00或3.00％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将1.0克或3.0克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含有醋酸钠的空白脂质体；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.9％氯化钠水溶液至100毫升得到空白脂质体。

实施例2：阿苯达唑脂质体每100毫升由0.50％或1.00％的阿苯达唑粉、1.00％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将0.5克或1.0克阿苯达唑(药物)和1.0克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得含醋酸钠的阿苯达唑脂质体；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.90％氯化钠水溶液至100毫升即得包封率平均在29.5±4.8(％)的阿苯达唑脂质体。

实施例3：阿苯达唑脂质体每100毫升由0.50％或1.00％的阿苯达唑粉、1.50％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将0.5克或1.0克阿苯达唑(药物)和1.5克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得含醋酸钠的阿苯达唑脂质体；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.90％氯化钠水溶液至100毫升即得包封率平均在50.5±5.3(％)的阿苯达唑脂质体。

实施例4：阿苯达唑脂质体每100毫升由0.50％或1.00％的阿苯达唑粉、2.00％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将0.5克或1.0克阿苯达唑(药物)和2.0克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，得到含有醋酸钠的阿苯达唑脂质体，控制PH值为5或6或7；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.90％氯化钠水溶液至100毫升即得包封率平均在76.4±3.8(％)的阿苯达唑脂质体。

实施例5：阿苯达唑脂质体每100毫升由0.50％或1.00％的阿苯达唑粉、2.50％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将0.5克或1.0克阿苯达唑(药物)和2.5克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，得到含有醋酸钠的阿苯达唑脂质体，控制PH值为5或6或7；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.90％氯化钠水溶液至100毫升即得包封率平均在80.4±3.4(％)的阿苯达唑脂质体。

实施例6：阿苯达唑脂质体每100毫升由0.50％或1.00％的阿苯达唑粉、3.00％的卵磷脂、0或0.15％或0.30％的苯甲酸钠、0或0.01％或0.02％抗氧剂和余量的0.7％或0.9％氯化钠溶液组成。其制备方法如下：先将0.5克或1.0克阿苯达唑(药物)和3.0克磷脂等溶解在冰醋酸中，然后用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含有醋酸钠的阿苯达唑脂质体；经透析除去醋酸钠，冰水浴(0或2或4℃)，超声0或20分钟或30分钟或40分钟；加入0克或0.15克或0.30克苯甲酸钠和0克或0.01克或0.02克抗氧剂，加0.7％或0.90％氯化钠水溶液至100毫升即得包封率平均在83.7±4.1(％)的阿苯达唑脂质体。

在实施例1至6中：抗氧剂为维生素E或/和维生素C，冰醋酸的量等于或大于能溶解阿苯达唑粉和卵磷脂的冰醋酸量。

在实施例2至6中：包封率的测定方法采用葡聚糖凝胶过滤法，葡聚糖凝胶过滤法详见方福德等人主编的1995年由北京医科大学出版社出版的“现代医学实验技巧全书”第493-495页。

将实施例2至6所得阿苯达唑脂质体用负染法[参见Roger R.C.NEW主编的“脂质体-实用性研究”一书中第3章140-152页)在JEM-100CX(II)电子显微镜(日本电子公司)下观察拍照，本发明能使所得的阿苯达唑脂质体的形态经电子显微镜观察，为多层脂质体结构，粒径在0.07至0.16μm，制备中不使用氯仿、丙酮、乙醚等有机溶剂，生产中对环境污染小，易于操作和工业化生产。

Claims

1、一种阿苯达唑脂质体，其特征在于按重量体积百分比由以下成份构成：A、0.50％至1.00％阿苯达唑粉；B、1.00％至3.00％的卵磷脂；C、0至0.30％的苯甲酸纳；D、0至0.02％抗氧剂；E.余量为0.7％至0.9％的氯化钠溶液；其中，抗氧剂为维生素E或/和维生素C。

2、一种阿苯达唑脂质体的中和法制备方法，其特征在于按下述步骤进行：首先按重量体积百分比将0.50％至1.00％的阿苯达唑粉和1.00％至3.00％的卵磷脂溶解在冰醋酸中，其次用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含醋酸钠的阿苯达唑脂质体；然后经透析除去中和反应中所产生的醋酸钠，经0至4℃的冰水浴和0至40分钟超声处理后，加入0至0.30％的苯甲酸钠、0至0.02％抗氧剂和余量的0.7％至0.9％氯化钠溶液，得到阿苯达唑脂质体；其中，抗氧剂为维生素E或/和维生素C，冰醋酸的量等于或大于能溶解阿苯达唑粉和卵磷脂的冰醋酸量。

3、一种中和法制备脂质体方法，其特征在于按下述步骤进行：首先按重量体积百分比将1.00％至3.00％的卵磷脂溶解在冰醋酸中，其次用氢氧化钠溶液对酸进行中和，控制PH值为5或6或7，得到含醋酸钠的脂质体；然后经透析除去中和反应中所产生的醋酸钠，经0至4℃的冰水浴和0至40分钟超声处理后，加入0至0.30％的苯甲酸钠、0至0.02％抗氧剂和余量的0.7％至0.9％氯化钠溶液，得到脂质体；其中，抗氧剂为维生素E或/和维生素C，冰醋酸的量等于或大于能溶解卵磷脂的冰醋酸量。