CN1218723C - 乳酸球菌干粉制品的制作方法 - Google Patents
乳酸球菌干粉制品的制作方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及的是一种乳酸球菌干粉制品的制作方法。从商品酸奶或自然发酵食品中分离出乳酸球菌菌株；将乳酸球菌接种到特定增菌培养液中，用10%-15%的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，在32-43℃增菌培养4.0-4.7小时；发酵液进行离心处理，得到离心沉淀物；在无菌条件下与菌体特定冻干保护剂均匀混合后，进行冻干前预冷处理6-12小时；最后真空冷冻干燥，并采用充氮包装制成产品。采用本发明的产品以0.001%～0.003%接种到灭菌脱脂乳和鲜牛奶中，经3.5小时发酵，乳凝固并产酸70，组织状态、风味良好，可以作为优质的直投式发酵剂。
Description
(一)技术领域
本发明涉及的是一种发酵剂的制作方法，具体地说是一种用于乳酸菌发酵剂的乳酸球菌干粉的制作方法。
(二)背景技术
发酵乳制品的传统工艺是采用一部分发酵乳制品作鲜奶的发酵剂，以少量高质量的发酵乳制品生产为代表的天然菌株目前仍然应用于作坊式生产中，例如，保加利亚的‘Podkvasa’就是原始菌株的最好来源(Korolev和Kondratenko，1978)。自天然发酵以后，将微生物从天然栖息地分离出来，通过培养、增殖以及混合具有不同生理和代谢特征的菌种而获得不同的发酵乳制品的发酵剂。这种发酵剂就可以用于发酵乳制品工业化生产之中，是形成标准化发酵乳制品的前提。性状优良的发酵剂是保证发酵乳产品质量稳定和高品质的关键因素。Grigoroff在1905年首次对酸奶细菌学的研究，标志着人们利用自然环境中的“天然乳酸菌”的时代的结束。其中，Orla-Jensen在1919(Brian，2001)的研究奠定了发酵剂技术的基础，并在菌种的分离、鉴定和稳定性方面做了许多改进性的工作。19世纪末，丹麦的汉森(Chr.Hansen)实验室首先制备出了商品化的发酵剂。
乳制品发酵剂可分为两类，一类是成分、种属特征和噬菌体敏感性未知的发酵剂，可按要求再生，如开菲尔粒(Kefir Grain)；另一类是已知微生物的纯发酵剂，通过纯菌种得以保存，后者为发酵乳制品的主要发酵剂。目前生产酸奶等乳制品的发酵剂使用量为原料乳的3％-5％，用量大需要连续扩繁几代，期间工作繁杂易污染。用本发明技术生产的嗜热链球菌2.2×1012CFU/g，取0.001％-0.003％与保加利亚杆菌配合使用即可满足发酵乳生产的需求，达到直接使用目的。
(三)发明内容
本发明的目的在于提供一种产酸能力强、粘度高、风味好的乳酸球菌干粉制品的制作方法。本发明的目的是这样实现的：从商品酸奶或自然发酵食品中分离出乳酸球菌；将乳酸球菌置于增菌培养基中进行发酵处理，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3％-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％的乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成，发酵罐中控制温度在32-43℃，用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时；发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理；按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或胱氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。本发明还可以包括如下特征：1、发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液，其中所述的枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。2、发酵液PH值恒定在6.0-6.2是通过下列方法完成的：发酵过程中采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10-15％氢氧化钠溶液或氨水作为缓冲溶液或中和剂；并且膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理，并采用流加法补充增菌培养液。3、所述的离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或普通离心机对发酵液进行间歇式处理得到离心沉淀物。
本发明的优点在于：发酵乳制品生产过程中，发酵剂质量是致关重要的，而发酵剂中乳酸球菌的特性起着决定作用，为了得到产酸能力强、粘度高、风味好的菌株，本发明从商品酸奶或自然发酵食品中，对其中的菌株进行纯分离。从中分离出符合要求的纯产酸乳酸球菌，从降低发酵剂成本、提高活力、直接投入使用目标入手，采用了正交设计优选增菌培养基配方，对选出的乳酸球菌进行增菌培养，并采用D-最优二次饱和设计优化发酵过程的控制条件，使最终发酵菌数提高10倍以上。同时用大量实验研究了培养过程中培养基的营养物质及代谢产物对菌体生长的影响，确定在发酵过程中乳糖的消耗、产生的乳酸、多肽等均具有抑制菌体生长作用。为此，研究了补加乳糖，并添加枸杞子提取液；采用具有特异吸附乳酸(或钠盐)的D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时配合缓冲溶液或中和剂；将超过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行超滤处理，以减少代谢产物，同时以流加法补充增菌培养液补充营养成分的消耗。为了便于贮藏、邮寄，采用离心处理发酵液，同时添加发酵液等重的10％的柠檬酸钠或磷酸钠溶液，以除去过剩的蛋白质；根据实验要求采用二次旋转正交组合设计优化发酵剂菌种冻干保护剂配方；同时采用电泳技术揭示了预冷冻处理对菌体抗冻性影响。经过增菌、浓缩、冻干，得到乳酸球菌粉状物与保加利亚杆菌配合，以0.001％-0.003％接种到灭菌脱脂乳和鲜牛奶中，经3.5小时发酵(41-43℃)，乳凝固并产酸70°T，组织状态、风味良好，可以作为优质的直投式发酵剂。本发明的方法可以是用于嗜热链球菌、丁二酮乳酸链球菌、乳脂链球菌等乳酸球菌。
(四)具体实施方案
下面举例对本发明作更详细的描述：
实施例一：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出丁二酮乳酸链球菌、乳脂链球菌和乳酸链球菌等乳酸球菌；将这些乳酸球菌分别接种于增菌培养基中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3-5％的番茄汁、3-5％的麦芽糖、1-3％乳糖、0.3-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5-1％的碳酸钙和余量的水组成，发酵时控制温度在30-35℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖溶液，其乳糖补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加增菌发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其中枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。也可在发酵过程中采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例二：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出丁二酮乳酸链球菌、乳脂链球菌乳酸球菌；将乳酸球菌置于增菌培养基中进行发酵处理，增菌培养基由10％的脱脂乳粉，4％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％的番茄汁、4％的麦芽糖、1％乳糖、0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％的碳酸钙和余量的水组成，发酵罐中控制温度在34℃、用15％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的4倍，并补加占发酵液重量的8％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或胱氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例三
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例四：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由10％的脱脂乳粉，5％的胰蛋白酶水解乳清粉，5％的番茄汁、5％的麦芽糖、3％乳糖、0.5％的丝氨酸或缬氨酸、1％的碳酸钙和余量的水组成，发酵罐中控制温度在41.8℃、用15％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.1，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的4倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例五：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-1 0分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例六：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌等乳酸球菌；将乳酸球菌接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例七：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例八：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例九：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例十：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例十一：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液。其枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。发酵过程中可采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10％-20％氢氧化钠溶液或氨水作为中和剂，控制pH之恒定在6.0-6.2。将膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理以减少代谢产物积累，以流加增菌培养液的方法补充增菌发酵过程营养物质的消耗。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
实施例十二：
从商品酸奶或自然发酵食品中分离出嗜热链球菌，将其接种于增菌培养液中，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成。增菌发酵时控制温度在40.8-42.8℃、用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时。发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理。离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理；或采用普通离心机对发酵液进行间歇式离心处理。按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
Claims (4)
1、一种乳酸球菌干粉制品的制作方法，其特征是：从商品酸奶或自然发酵食品中分离出乳酸球菌；将乳酸球菌置于增菌培养基中进行发酵处理，增菌培养基由5％-12％的脱脂乳粉，3％-5％的胰蛋白酶水解乳清粉，3％-5％的番茄汁、3％-5％的麦芽糖、1％-3％的乳糖、0.3％-0.6％的丝氨酸或缬氨酸、0.5％-1％的碳酸钙和余量的水组成，发酵罐中控制温度在32-43℃，用10％-20％的氢氧化钠中和恒定发酵液pH值在6.0-6.2，发酵培养时间为3.5-4.5小时；发酵结束后，在0℃-20℃，转数为6000-15000转/分钟的条件下对发酵液进行离心处理；按离心沉淀物重量的1-2倍加入冻干保护剂，冻干保护剂的组成为：10％-20％的奶粉、1％-3％的甘油、0.2％-0.5％的维生素C、0.1％-0.2％的蛋氨酸或胱氨酸或半胱氨酸、0.5％-1％的蔗糖，冻干保护剂与菌浓缩液在无菌条件下均匀混合，在0℃-15℃温度下进行6-12小时冻干前预冷处理，经真空冷冻干燥制成乳酸球菌干粉。
2、根据权利要求1所述的乳酸球菌干粉制品的制作方法，其特征是：发酵过程中补加乳糖，其补加量为消耗的氢氧化钠的3-5倍，并补加占发酵液重量的8-10％的枸杞子提取液，其中所述的枸杞子提取液是将枸杞子加10倍的水，搅碎，在沸水浴中加热5-10分钟所得到的提取物。
3、根据权利要求1或2所述的乳酸球菌干粉制品的制作方法，其特征是：发酵液PH值恒定在6.0-6.2是通过下列方法完成的：发酵过程中采用D301型树脂吸附发酵过程中产生的乳酸钠，同时添加10-15％氢氧化钠溶液或氨水作为缓冲溶液或中和剂；并且膜过滤装置与发酵罐串联对发酵过程中的发酵液进行过滤处理，并采用流加法补充增菌培养液。
4、根据权利要求1、2或3所述的乳酸球菌干粉制品的制作方法，其特征是：所述的离心处理是采用高速管式分离机，对发酵液进行连续运行的离心处理。
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