CN104824672B - 一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种通过乳酸菌吸附和/或抑制去除丙烯酰胺的方法,涉及一种降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法;同时提供一种提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌专用培养基,为本领域人员进一步研究乳酸菌的丙烯酰胺吸附特性提供研究基础,使人体通过摄入富含乳酸菌的酸奶或饮料等食品而实现体内丙烯酰胺去除成为可能;本发明创造性将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌三种菌按照特定比例进行组合,取得了难以预料的技术效果;意外发现,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2,泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1,效果更佳。
Description
技术领域
本发明属于食品加工、食品化学及食品微生物技术领域,涉及一种通过乳酸菌吸附和/或抑制去除丙烯酰胺的方法,涉及降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法,以及提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌培养基。
背景技术
2002年4月,瑞典国家食品管理局和斯德哥尔摩大学研究员首次向世人公布:含淀粉量高的许多食品在高温烹调过程中会产生丙烯酰胺,如薯片、饼干、面包等,这些食品中丙烯酰胺含量一般在1000μg/kg以上,最高可达12800μg/kg。这一发现立刻引起了全世界食品科学研究工作者、食品工业以及国际相关食品卫生安全组织的广泛关注。因此,有效抑制食品中丙烯酰胺生成或去除食品中的丙烯酰胺不仅是食品中化学污染物防治的热点问题,更是重要的民生问题。近年来,随着人们对食品安全的重视和对化学防腐剂安全性的顾虑,生物吸附法以其高效、无副作用的特点成为食品科学工作者的研究热点。生物吸附法又称接触稳定法,是利用生物吸附剂的物理吸附作用去除污染物的一种方法。生物吸附剂对污染物有天然的亲和力,其优点是受pH值影响小,无二次污染,吸附效果显著等。生物吸附法将是处理有毒污染物的常用方法。
研究表明乳酸菌可以作为一种生物吸附剂有效吸附去除黄曲霉毒素B1、苯并芘等食品中的有毒物质。但目前国内外尚未发现利用乳酸菌作为生物吸附剂去除丙烯酰胺的相关研究报道,可能是由于丙烯酰胺具有很强的生物渗透性,乳酸菌吸附丙烯酰胺时存在吸附稳定性弱等诸多问题,因此,该领域工作者一般不会想到使用乳酸菌吸附丙烯酰胺,对于乳酸菌吸附丙烯酰胺的影响因素以及何种方式下处理乳酸菌对丙烯酰胺吸附效果更好的研究国内外还都处于空白阶段。目前,国内外对于丙烯酰胺都处于丙烯酰胺抑制剂研究阶段,非生物吸附,例如,中国农业大学陈芳等人,研究了由鱼胶原蛋白肽和大豆多肽、甘氨酸、氯化钙和氯化钠中至少一种物质构成的丙烯酰胺抑制剂。贵阳学院的刘晓燕等人研究出了以蓝莓花色苷、维生素C和柠檬酸为组分的丙烯酰胺抑制剂。浙江大学张英研究了以竹叶抗氧化物为主要组分的丙烯酰胺抑制剂,但这些丙烯酰胺抑制剂只能用于抑制丙烯酰胺的大量生成,对于已经生成的丙烯酰胺没有明显的去除作用。
发明内容
发明目的:提供一种通过乳酸菌吸附和/或抑制去除丙烯酰胺的方法,提供一种降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法;同时提供一种提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌培养基。
本发明解决的技术问题:提供一种通过乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法。为后续结合模拟胃肠环境试验、在人体内去除已形成的丙烯酰胺提供坚实的理论基础,使人体通过摄入富含乳酸菌的酸奶或饮料等食品而实现体内丙烯酰胺去除成为可能。同时提供一种能够有效降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法;还提供一种提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌专用培养基,为本领域人员进一步研究乳酸菌的吸附特性提供研究基础。
本发明的技术方案:
一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,其特征在于按照以下步骤进行:
(1)乳酸菌活化:将乳酸菌以3%的接种量接入25mLMRS或M17肉汤或其它任何适宜的培养基中,37℃培养24h,连续活化两次,菌株活力得到充分恢复;
(2)菌悬液的制备:将活化后的乳酸菌以2%-3%的接种量接种到100mL MRS培养基或M17肉汤培养基中,在37-42℃下培养24h,将培养液8000r/min离心5min,收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL,该菌悬液于4℃保存待用;
(3)热处理:将步骤(2)保存待用的菌悬液在100℃下加热15min灭活菌体,进一步优选121℃下加热15min灭活菌体,即得到灭活后的菌悬液,并于4℃保存待用;
(4)吸附:取900μL热处理后的菌悬液加入100μL浓度为6μg/mL丙烯酰胺工作液或标准液,调整体系pH值4-6,体系钙离子浓度为0.5-0.7mol/L,30-45℃条件下共同反应6-10h;然后8000r/min离心5min,得到去除丙烯酰胺的上清液。
本发明步骤(2)所述活化后的乳酸菌特别优选植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的混合物,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例混合;进一步优选先在40-45℃条件下培养24h,再在35-37℃条件下培养24h。
本发明MRS或M17肉汤培养基由特定培养基替代,所述特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。
所述的乳酸菌培养基在提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力上予以应用。
本发明提供一种降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法,其特征在于按以下步骤进行,
(1)取新鲜土豆清洗去皮,将土豆进行切片,控制厚度为1mm-1.5mm,清水冲洗去除表面淀粉;
(2)将步骤(1)所得冲洗后的土豆片,按照固液比1:3-5放入乳酸菌菌悬液中浸泡,37-39℃浸泡30-60min,每隔10分钟搅拌一次;
(3)油炸:160-180℃,油炸60-90s;得油炸薯片;
其中,所述乳酸菌菌悬液的制备方法如下:将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌分别使用MRS培养基连续活化两次,使菌株活力得到充分恢复;然后,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例将三种菌混合,然后在特定培养基中进行培养,先在42℃条件下培养12h,再在37℃条件下培养12h;之后将培养液8000r/min离心5min收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL;优选进一步将菌悬液加热灭活,菌悬液在100℃下加热15min或121℃下加热15min灭活菌体,即得步骤(2)所述的乳酸菌菌悬液;特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。
丙烯酰胺的检测方法:HPLC分析检测
仪器:岛津LC-20A
色谱柱:Inertsil ODSP-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)
进样量:20μL 流速:1mL/min
流动相:甲醇:水=5:95
进样温度:30℃ 检测波长:205nm
丙烯酰胺标准曲线的绘制
丙烯酰胺标准溶液的配制:准确秤取丙烯酰胺标准品0.100g,用超纯水溶解定容至100mL,得到浓度为1mg/mL的丙烯酰胺储备液,移取此储备液1mL至10mL容量瓶中用超纯水定容,得到浓度为0.1mg/mL的丙烯酰胺中间溶液,置于-20℃冰箱中避光保存。分别取适量丙烯酰胺标准液用超纯水配制成浓度为0、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.60μg/mL、0.80μg/mL、1.00μg/mL系列丙烯酰胺标准溶液。依次将配制的不同浓度标准系列工作液注入高效液相色谱,测定相应的丙烯酰胺的峰面积。以质量浓度(μg/mL)为横坐标,以峰面积(mAU*s)为纵坐标绘制标准曲线。
丙烯酰胺吸附率测定
取900μL菌悬液加入100μL浓度为6μg/mL丙烯酰胺工作液,使丙烯酰胺的终浓度为0.6μg/mL,37℃共同反应6h;然后离心(8000r/min,5min),取上清。以不加菌悬液的丙烯酰胺工作液为空白对照。吸附率按下式计算:吸附率(%)=[(空白样中丙烯酰胺的浓度-上清液中丙烯酰胺的浓度)/空白样中丙烯酰胺的浓度]×100%。每个试验可以重复三次,差异显著性(P<0.05)分析使用SPSS软件。
本发明可以还可以使用本领域其他任意常规或不常规的方法测定丙烯酰胺。本发明的乳酸菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜热链球菌可以为任意常规菌,可以市购,也可以自行分离,也可以为基因工程加强菌。
本发明的有益效果:
(1)本发明克服本领域中乳酸菌不易用于吸附丙烯酰胺的偏见,提供一种通过乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法。目前国内外尚未发现利用乳酸菌作为生物吸附剂去除丙烯酰胺的相关研究报道,对于乳酸菌吸附丙烯酰胺的影响因素以及何种方式下处理乳酸菌对丙烯酰胺吸附效果更好的研究国内外还都处于空白阶段。可能是由于丙烯酰胺具有很强的生物渗透性,乳酸菌吸附丙烯酰胺时存在菌体细胞容易受到破坏、吸附稳定性弱等诸多问题,因此,该领域工作者一般不会想到使用乳酸菌吸附丙烯酰胺,而本发明克服本领域中乳酸菌不易用于吸附丙烯酰胺的偏见,提供一种通过乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,由于乳酸菌本身作为人体肠道内存在的菌群,对人体有很多的益生功能,同时富含乳酸菌的食品众多,结合模拟胃肠环境试验、为后续在人体内去除已形成的丙烯酰胺提供坚实的理论基础,使人体通过摄入富含乳酸菌的酸奶或饮料等食品的实现体内丙烯酰胺去除成为可能。
(2)同时提供一种能够有效降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法;还提供一种提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌专用培养基,为本领域人员进一步研究乳酸菌的吸附特性提供研究基础。由于乳酸菌本身作为人体肠道内存在的菌群,对人体有很多的益生功能。乳酸菌在去除有毒物质时,菌体本身与有毒物质会形成复合物,通过离心或者过滤的方法可将此复合物与食品分离,最终获得脱毒食品。此种方法安全,简单,经济,不会产生二次污染,同时对食品感官性状几乎没有响。
(3)本发明创造性将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌三种菌进行组合,以活菌数计,植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1,先在40-45℃条件下培养24h,再在35-37℃条件下培养24h;三种菌互惠共生,协同生长,发酵初期,温度更适于嗜热链球菌生长,其产生的甲酸、叶酸和丙酮能够促进杆菌生长,同时嗜热链球菌产粘更多,产生更多胞外多糖多聚物,而该多胞外多糖多聚物是影响吸附作用的重要因素,后期杆菌大量产酸等,又为链球菌的继续生长提供营养物质,这种协同发酵方式大大提高了乳酸菌的吸附性和吸附稳定性,可能三种菌之间的协同培养更多改变细胞壁的结构和性能,促使了更多胞壁多糖的产生,而胞壁多糖可能是重要的吸附因子,同时使胞壁肽聚糖层的疏松,使细胞壁肽聚糖层的交联度降低,出现“小孔”,增加了丙烯酰胺与细胞壁甚至是细胞膜相互作用的机会,为丙烯酰胺提供了大量吸附位点,非共价键吸附作用也相对变强,增加了吸附稳定性。通常单独使用嗜热链球菌,该菌吸附性能较差,但与植物乳杆菌、干酪乳杆菌配合使用后,混合菌整体吸附效产生了1+1+1远远大于3的效果。
组配了特定培养基,该培养基能够提高乳酸菌吸附性能,取得了预料不到的效果,可能与改变细胞壁的结构和组成有关。本发明选用特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.05mg磷酸氢二钾,0.05mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;意外发现,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2,泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1,效果更佳,可能相互之间产生协同作用,发明人后续将进一步研究。
试验:
试验1:不同乳酸菌比较试验
按本申请乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,即权利要求1所述方法,培养基均选择MRS培养基,其它条件相同,选择100℃下加热15min灭活菌体,A组:乳酸菌选择植物乳杆菌;B组:乳酸菌选择干酪乳杆菌;C组:乳酸菌选择嗜热链球菌。D组:植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例,结果见表1:
表1
不同菌株对丙烯酰胺的吸附率有显著性差异(P<0.05)
试验2:不同菌种不同处理方式的比较试验
即权利要求1所述方法,其它条件相同,加热加压灭活组是121℃下加热15min,结果见表2:
表2:不同菌种不同方式处理下丙烯酰胺吸附率比较
不同菌株对丙烯酰胺的吸附率有显著性差异(P<0.05)
试验3:不同培养基的比较试验
按本申请乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,权利要求1所述方法,培养基均选择不同,其它条件相同,均选择植物乳杆菌,结果见表3:
表3:不同培养基丙烯酰胺吸附率比较
不同菌株对丙烯酰胺的吸附率有显著性差异(P<0.05)
实施例1:一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,其特征在于按照以下步骤进行:
(1)乳酸菌活化:将乳酸菌以3%的接种量接入25mL MRS或M17肉汤培养基中,37℃
培养24h,连续活化两次,菌株活力得到充分恢复;
(2)菌悬液的制备:将活化后的乳酸菌以3%的接种量接种到100mL MRS培养基或M17肉汤培养基中,在42℃下培养24h,将培养液8000r/min离心5min,收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL,该菌悬液于4℃保存待用;
(3)热处理:将步骤(2)保存待用的菌悬液在100℃下加热15min灭活菌体;
(4)吸附:取900μL热处理后的菌悬液加入100μL浓度为6μg/mL丙烯酰胺工作液,调整体系pH值4-6,体系钙离子浓度为0.5-0.7mol/L,30-45℃条件下共同反应6-10h;然后8000r/min离心5min,得到去除丙烯酰胺的上清液。乳酸菌为植物乳杆菌;丙烯酰胺吸附率63.99%。
实施例2:一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,其特征在于按照以下步骤进行:(1)乳酸菌活化:将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌分别以3%的接种量接入25mL特定培养基中,37℃培养24h,连续活化两次,菌株活力得到充分恢复;三菌种分别活化;(2)菌悬液的制备:将活化后的乳酸菌以2%-3%的接种量接种到100mL MRS培养基或M17肉汤培养基中,先在42℃条件下培养24h,再在35℃条件下培养24h,将培养液8000r/min离心5min,收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度为109cfu/mL,该菌悬液于4℃保存待用;用于接种的乳酸菌为植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌的混合物,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例混合;(3)热处理:将步骤(2)保存待用的菌悬液在121℃下加热加压15min灭活菌体,即得到灭活后的菌悬液,并于4℃保存待用;(4)吸附:取900μL热处理后的菌悬液加入100μL浓度为6μg/mL丙烯酰胺工作液或标准液,调整体系pH值5,体系钙离子浓度为0.6mol/L,37℃条件下共同反应8h;然后8000r/min离心5min,得到去除丙烯酰胺的上清液;所述特定培养基由以下组分及用量配制而成,110g脱脂乳粉、20g乳糖、50g葡萄糖糖浆、5g胰蛋白胨,5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。丙烯酰胺吸附率88.36%。
实施例3:一种降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法,其特征在于按以下步骤进行,
(1)取新鲜土豆清洗去皮,将土豆进行切片,控制厚度为1mm-1.5mm,清水冲洗去除表面淀粉;
(2)将步骤(1)所得冲洗后的土豆片,按照固液比1:3-5放入乳酸菌菌悬液中浸泡,37-39℃浸泡30-60min,每隔10分钟搅拌一次;
(3)油炸:160-180℃,油炸60-90s;得油炸薯片。
其中,所述乳酸菌菌悬液的制备方法如下:将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌分别使用MRS培养基连续活化两次,使菌株活力得到充分恢复;然后,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例将三种菌混合,然后在特定培养基中进行培养,先在42℃条件下培养12h,再在37℃条件下培养12h;之后将培养液8000r/min离心5min收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL;优选进一步将菌悬液加热灭活,菌悬液在100℃下加热15min或121℃下加热15min灭活菌体,即得步骤(2)所述的乳酸菌菌悬液;特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。经测定,薯片中的丙烯酰胺含量大大降低,比较试验显示,抑制率达到60%。
Claims (6)
1.一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,其特征在于按照以下步骤进行:
(1)乳酸菌活化:将乳酸菌以3%的接种量接入25mL MRS或M17肉汤培养基中,37℃培养24h,连续活化两次,菌株活力得到充分恢复;
(2)菌悬液的制备:将活化后的乳酸菌以2%-3%的接种量接种到100mL MRS培养基或M17肉汤培养基中,先在40-45℃条件下培养24h,再在35-37℃条件下培养24h,将培养液8000r/min离心5min,收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL,该菌悬液于4℃保存待用;其中乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的混合物,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例混合;
(3)热处理:将步骤(2)保存待用的菌悬液在121℃下加热15min灭活菌体,即得到灭活后的菌悬液,并于4℃保存待用;
(4)吸附:取900μL热处理后的菌悬液加入100μL浓度为6μg/mL丙烯酰胺工作液或标准液,使丙烯酰胺的终浓度为0.6μg/mL,调整体系pH值4-6,体系钙离子浓度为0.5-0.7mol/L,30-45℃条件下共同反应6-10h;然后8000r/min离心5min,得到去除丙烯酰胺的上清液。
2.根据权利要求1所述一种乳酸菌吸附去除丙烯酰胺的方法,其特征在于,MRS或M17肉汤培养基由特定培养基替代,所述特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙 的比例为1:1。
3.一种能够提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力乳酸菌培养基,其特征在于,培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。
4.如权利要求3所述的乳酸菌培养基在提高乳酸菌吸附丙烯酰胺能力上的应用。
5.一种降低丙烯酰胺含量的油炸薯片的生产方法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)取新鲜土豆清洗去皮,将土豆进行切片,控制厚度为1mm-1.5mm,清水冲洗去除表面淀粉;
(2)将步骤(1)所得冲洗后的土豆片,按照固液比1:3-5放入乳酸菌菌悬液中浸泡,37-39℃浸泡30-60min,每隔10分钟搅拌一次;
(3)油炸:160-180℃,油炸60-90s;得油炸薯片;
其中,所述乳酸菌菌悬液的制备方法如下:将植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌分别使用MRS培养基或其它任意适宜的培养基连续活化两次,使菌株活力得到充分恢复;然后,以活菌数计,按植物乳杆菌︰干酪乳杆菌︰嗜热链球菌=3︰2︰1的比例将三种菌混合,然后在特定培养基中进行培养,先在42℃条件下培养12h,再在37℃条件下培养12h;之后将培养液8000r/min离心5min收集菌体,用无菌去离子水离心洗涤两次,并重悬于无菌去离子水中,保证菌株浓度不低于109cfu/mL;将菌悬液加热灭活,菌悬液在100℃下加热15min或121℃下加热15min灭活菌体,即得步骤(2)所述的乳酸菌菌悬液;特定培养基由以下组分及用量配制而成,86-110g脱脂乳粉、20g乳糖、40-60g葡萄糖糖浆、3-5g胰蛋白胨,3-5g的牛肉粉或牛肉膏、1mg的尿嘧啶和黄嘌呤、1mg丝氨酸和半胱氨酸,0.005mg叶酸、1mg泛酸钙和碳酸钙、1g番茄汁、0.5mg的核黄素、0.005mg磷酸氢二钾,0.005mg七水硫酸镁,0.01g的甲酸,加入蒸馏水并定容至1000mL;其中,尿嘧啶和黄嘌呤的比例为3:2;丝氨酸和半胱氨酸的比例为1:2;泛酸钙和碳酸钙的比例为1:1。
6.按权利要求5所述方法得到的降低丙烯酰胺含量的油炸薯片。
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