CN1218473A - 抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物 - Google Patents

抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物 Download PDF

Info

Publication number
CN1218473A
CN1218473A CN97194535A CN97194535A CN1218473A CN 1218473 A CN1218473 A CN 1218473A CN 97194535 A CN97194535 A CN 97194535A CN 97194535 A CN97194535 A CN 97194535A CN 1218473 A CN1218473 A CN 1218473A
Authority
CN
China
Prior art keywords
amino
halogen
alkyl
compound
optional
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN97194535A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1069643C (zh
Inventor
金浩崙
L·C·K·陈
王维
T·斯特法纳克
T·S·曼索尔
P·恩古云－巴
J·F·拉瓦勒
G·法拉德奥
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shire Canada Inc
Original Assignee
Biochem Pharma Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biochem Pharma Inc filed Critical Biochem Pharma Inc
Publication of CN1218473A publication Critical patent/CN1218473A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1069643C publication Critical patent/CN1069643C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

本发明涉及杂环化合物,更具体地说涉及具有抗病毒活性的二氮杂萘化合物。特别是式Ⅰ化合物,其中B、W、X、Y、R1、R2、R3、R4和n如本文定义,可用于治疗和预防哺乳动物的巨细胞病毒(CMV)感染。

Description

抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物
本发明范围
本发明涉及杂环化合物，更准确地说，涉及二氮杂萘化合物及其在治疗和预防巨细胞病毒(CMV)感染中的应用。
本发明的背景
在DNA病毒中，疱疹族是人类最常见的病毒性疾病的来源。这一族由单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ型和Ⅱ型、水痘带状疱疹(VZV)、Epstein-Barr病毒(EBV)和巨细胞病毒(CMV)组成。
如同其他疱疹病毒一样，CMV感染可导致病毒与宿主的终身关系。首次感染后，病毒可排出许多年。另一方面健康个体的感染常常是无症状的，如80％的成人以潜伏方式贮藏病毒。在免疫减弱个体如化疗患者、器官移植患者和特别是AIDS患者中，潜伏的CMV能再次活化，导致小头、肝脾肿大、黄疸、可引起精神阻滞的惊厥发作、单核细胞增多症、视网膜炎和甚至死亡。在AIDS患者中，CMV是发病的主要原因。
已开发各种药物治疗疱疹病毒的感染，包括天然产生的蛋白质和合成的核苷类似物。例如，在治疗疱疹病毒感染中已使用天然抗病毒蛋白、干扰素，还有核苷类似物、胞嘧啶-阿拉伯糖苷、腺嘌呤-阿拉伯糖苷、碘酰尿苷和阿昔洛韦，目前已选择治疗单纯疱疹Ⅰ型感染。
不幸的是已证明治疗某些疱疹病毒感染有效的药物如阿昔洛韦对治疗CMV却没有足够的效果。目前用于治疗CMV感染的药物，如更昔洛韦(9-[(1,3-二羟基-2-丙氧基)甲基]鸟嘌呤)和膦甲酸(膦酰基甲酸)，缺乏可接受的副作用和已获准治疗其它疱疹病毒药物的安全性。
这样，尚需要有效治疗CMV感染的治疗和预防性的非核苷制剂、因此，本发明的目的是提供抑制哺乳动物中CMV复制的方法。本发明的目的也提供用于抑制哺乳动物CMV复制的化合物和药用组合物。
本发明的概述
一方面，本发明提供抑制哺乳动物的巨细胞病毒复制的方法，包括对所述的哺乳动物给予抗巨细胞病毒的一定量的式(Ⅰ)化合物：其中
W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4；
B选自由下式组成的基团：
Figure A9719453500102
其中；A是O或S；R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代(alkylthio)、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和与任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合的C3 -7环烷基，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R2和R2’独立为H、C1-4烷基或R1和R2共同形成任选与C6-10芳基或杂芳环稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)和任选由OH、卤素、氨基、巯基、C1-4烷基硫代、C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基、C1- 4烷氧基或羧基取代的饱和或不饱和C3-10(碳环或杂环)；R5是H、C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6酰基；和n是0、1或2。
在本发明的另一方面，根据式(Ⅰ)提供抑制巨细胞病毒的化合物和其药学上可接受的盐，前提是ⅰ)当A是
Figure A9719453500111
；和W和Y是N或NR4时，则R1不是烯丙基或2-甲氧基苄基；ⅱ)当A是 X或Z是N或NR5时，则W是N或NR5；和ⅲ)当A是 ；Z是N或NR5，则R1不是甲基。本发明详细描述
一方面，本发明提供抑制哺乳动物的巨细胞病毒复制的方法，包括对所述的哺乳动物给予一定量的抗巨细胞病毒的式(Ⅴ)化合物：
Figure A9719453500121
其中W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4；R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和与任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合的C3 -7环烷基，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R2是H、C1-4烷基或R1和R2共同形成任选与C6-10芳基或杂芳环稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基和任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R5是H、C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6酰基；和n是0、1或2。
本发明的另一方面，提供抑制哺乳动物的巨细胞病毒复制的方法，包括对所述的哺乳动物给予一定量的抗巨细胞病毒的式(Ⅵ)化合物：
Figure A9719453500131
其中W、X、Y、Z、R1至R4和n如本文定义。
本发明的另一方面，提供抑制哺乳动物的巨细胞病毒复制的方法，包括对所述的哺乳动物给予一定量的抗巨细胞病毒的式(Ⅶ)化合物：
Figure A9719453500132
其中A是O或S，和W、X、Y、Z、R1至R4和n如本文定义。
本发明的又一方面，根据式(Ⅰ)；(Ⅵ)；(Ⅵ)或(Ⅶ)提供抑制巨细胞病毒的化合物和其药学上可接受的盐。
本发明的另一方面，提供抗巨细胞病毒组合物，其包括药学上可接受的载体、稀释剂或辅助剂和式(Ⅰ)、(Ⅵ)、(Ⅵ)或(Ⅶ)化合物或其药学上可接受的盐。
本发明涉及抑制CMV复制的化合物。这些化合物的特征在于式(Ⅰ)、(Ⅴ)、(Ⅵ)或(Ⅶ)中说明的杂双环部分：
Figure A9719453500141
Figure A9719453500142
Figure A9719453500143
其中A、B、W、X、Y、Z、R1至R4和n如本文定义。
本说明书中所使用的术语“烷基”是指可以是直链或支链的饱和碳链。类似地术语“链烯基”是直链或支链碳链但含有不饱和碳原子。然而为方便起见，术语“烷氧基”、“烷基硫代”、“酰基”、“酰氧基”和“烷氧基羰基”是指饱和或不饱和及也可以是直链或支链的碳链。应指出的是上述任何碳链可具有各种取代基。应该理解，除另有说明外可有一个或多个取代基。
术语“碳环”是指饱和或不饱和的环状碳链或环。“杂环”指与取代碳的选自N、O和S杂原子结合的环。不饱和碳环和杂环可以是芳族，即，芳基如苯基或萘基或杂芳基如吡啶或喹啉。应指出的是上述任何环可具有各种取代基。应该理解，除另有说明外可有一个或多个取代基。
术语“氨基”包括伯胺，即NH2，仲胺，即NHR，或叔胺，即N(R)2，其中R是C1-4烷基。术语也包括季胺如NH3 +。
在本发明方法中，通过给予如上所示式(Ⅰ)、(Ⅴ)、(Ⅵ)和(Ⅶ)化合物抑制巨细胞病毒复制，其中：W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4。应理解，本发明的杂双环化合物可以是饱和、不饱和或部分不饱和的和W、X、Y和Z对每种条件下将具有适当的化合价。例如，当环是不饱和时，W可以是N、CH或CR3。相反，当环是饱和时，W可以是CH2、C=O、CHR3、NH或NR5。相同原则适用于X、Y和Z。
在优选实施例中n是1。
在优选实施例中W是N或NR5；
在优选实施例中X是N或NR5、而Y和Z独立是CH、CR4、CH2、C=O或CHR4。
在优选实施例中Y是N或NR5，而X和Z独立是CH、CR4、CH2、C=O或CHR4。
在优选实施例中Z是N或NR5，而X和Y独立是CH、CR4、CH2、C=O或CHR4。
在优选实施例中含有W、X、Y和Z杂双环是不饱和的。
在特别优选的实施例中，W和Y独立是N或NR5，而X和Z独立是OH、CR4、CH2、C=O或CHR4。
在特别优选的实施例中，W和Y是N而X和Z是CH或CR4和杂双环的环是不饱和的。
在最优选的实施例中，W和Y是N而X和Z是CH或CR4，杂双环的环是不饱和的和n是1，由此形成1,6-二氮杂萘环。
在优选实施例中，A是0。R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和C3-7环烷基任选与由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；
在优选的实施例中，R1是C2-6链烯基；C1-6烷基或由6元芳基取代的C3-7环烷基或任选由卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基硫代、C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷基或卤代C1- 4烷氧基取代的杂芳基或环烷基环；和C3-7环烷基任选与由卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基硫代、C1-4烷氧基羰基或卤代C1-4烷基取代的6元芳基或杂芳基环稠合。
在特别优选的实施例中，R1是苄基、吡啶甲基或任选由选自下列一个或两个取代基取代的环己甲基，这些基团包括羟基；氨基，特别是NH2或NH3 +；C1-4烷基，特别是甲基；卤素，特别是氟、氯或溴；C1-4烷氧基，特别是甲氧基或乙氧基；C1-4烷氧基羰基，特别是甲氧基羰基；C1-4烷基硫代，特别是甲硫基；C1-4卤代烷基，特别是三氟甲基。更特别优选R1是任选在环的2、3、5或6位上单或双取代的苄基和最优选在2和/或6位上具有甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、氟、溴、氯、甲氧基羰基、甲硫基、三氟甲基、三氟甲氧基、NH2或NH3 +C1-。甚至在更优选实施例中，R1是在2位上任选由氟、氯、溴、甲基、甲氧基、乙氧基、甲氧基羰基、三氟甲基或NH3 +Cl-取代的苄基。
在另一特别优选的实施例中，R1是与苯基稠合的C3-7环烷基，其中苯基任选由选自羟基、氨基、C1-4烷基、卤素、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基硫代或C1-4卤代烷基的一个或两个取代基取代。更特别优选，C3-7环烷基是环戊基或环己基。
R2和R2’独立是H、C1-4烷基或R1和R2共同形成任选与C6-10芳基或杂芳基稠合的饱和或不饱和5或6元杂环。在优选实施例中，R2是H或甲基和最优选H。R2’是H或甲基和最优选H。
在另一优选实施例中，R2与R1共同形成任选与C6-10芳基或杂芳基稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。合适的5或6元杂环包括哌啶、哌嗪、吗啉、吡咯、吡唑和咪唑。它们可以与C6-10芳基或杂芳基稠合得到合适的双环，如吲哚、嘌呤、苯并咪唑、喹啉或异喹啉。
R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基和任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基和烷氧基羰基)。应该理解，含有X、Y和Z的环可由1-4个取代基R4取代而同时含有W的环可由1-3个取代基R3取代。
R3和R4独立选自由OH、卤素、氨基、巯基、C1-4烷基、C1- 4烷氧基或羧基任选取代的饱和或不饱和C3-10(碳环或杂环)。
在另一个实施例中，R3和R4独立选自由卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代的6元芳基或杂芳基或环烷基环。
在另一个实施例中，R4是任选由卤素、羟基、C1-4烷基、C1- 4烷氧基任选取代的6元芳基或杂芳基或环烷基环。在更进一步的实施例中，R4是6元杂芳基。在更进一步的实施例中，R4是吡啶基。
在优选的实施例中，具有选自H；OH；卤素，特别是氟或氯；和C1-4烷氧基，特别是甲氧基或乙氧基的一个R3取代基。更优选，R3是H、氯、羟基或甲氧基和最优选是H。
在优选的实施例中，R4选自H、卤素、氨基、OH、任选由OH、卤素或氨基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基和烷氧基羰基)。优选具有一个或两个R4取代基和最优选具有一个R4取代基。
在更优选的实施例中，R4是氨基。
在更优选的实施例中，R4是C1-4氨基烷基。
在更优选的实施例中，R4是OH。
在更优选的实施例中，R4是卤素。
在更优选的实施例中，R4是甲氧基。
在最优选的实施例中，R4是H。
R5是H,C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的芳基。
在优选的实施例中，R5是H。
在优选的实施例中，R5是C1-4烷基和更优选甲基。
在优选的实施例中，R5是由氨基取代的C1-4烷基和更优选由NH2取代的甲基或乙基。
在优选的实施例中，R5是C1-4芳基和更优选乙酰基。
在优选的实施例中，R5是由氨基取代的C1-4芳基和更优选由NH2取代的乙酰基。
本发明优选化合物包括：化合物#1  N-(2-甲基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#2  N-苄基-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺；化合物#3  N-(2-溴苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#4  N-(2-氯代苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺；化合物#5  N-(2-溴苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#6  N-(3-溴苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#7  N-(2-氟苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺；化合物#8  N-(4-氯苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#9  N-(2-乙氧苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#10 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸-2,3-2,3-二氢化茚-1-基酰胺；化合物#11 [1,6]-二氮杂萘-2-羧酸(1,2,3,4-四氢-萘-1-基)-酰胺化合物#12 N-(3-甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#13 N-(2-三氟甲基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#14 N-(2,6-二甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#15 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(反式-2-苯基-环丙基)-酰胺；化合物#16 N-(2-氨基-6-氟苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#17 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(1-苯基-乙基)酰胺；化合物#18 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(吡啶-2-基-甲基)酰胺；化合物#19 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸环己基-甲基酰胺；化合物#20 (3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-(1,6)二氮杂萘-2-基-甲酮；化合物#21 N-(2-甲硫基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#22 N-(2-羟基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#23 N-(2-甲氧基羰基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#24 (1,6)二氮杂萘-2-羧酸烯丙基酰胺(PFC-029)；化合物#25 N-(2-甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#26 N-(2-丙氧基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘-2-甲酰胺；化合物#27 (2-{[([1,6]二氮杂萘-2-羰基)-氨基]-甲基}-苯基)-碳酸叔
      丁基酯；化合物#28 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2,3,4,5-四氢苯并[B]oxepin-5-基)-
      酰胺；化合物#29 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(苯并二氢吡喃-4-基)-酰胺；化合物#30 N-(2’-甲氧基苄基)-5-氨基-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#31 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸2,3-(亚甲基二氧基)-苄酰胺；化合物#32 7,8-二氢异喹啉-6-羧酸(2-甲氧基苄酰胺；化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙氨基苄胺)；化合物#34 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#35 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-甲氧基苄胺)；化合物#36 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#37 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙胺苄胺)；化合物#38 8-(2吡啶基)-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧苄胺)；化合物#39 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-三氟甲基苄胺；化合物#40 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#41 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-3-甲氧基苄胺；化合物#42 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#43 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-甲氧基苄酰胺；化合物#44 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-乙氧基-苄酰胺；化合物#45 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-甲氧基-环己甲基-酰胺；化合物#46 1-(2-异-丙氧基-苯基)-3-(1,6)二氮杂萘-2-基-脲；化合物#47 1-(2-异-丙氧苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#48 1-(N-boc-4-氨基丁基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#49 1-(4-氨基丁基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲盐酸盐；化合物#50 1-[(S)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#51 1-[(R)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#52 1-(2-甲氧基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#53 1-丁基-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#54 1-(2-甲氧基苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#55 1-(2-乙氧基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#56 1-(2-甲基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；和化合物#57 8-(2-吡啶基)-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)。
本发明更优选化合物包括：化合物#2  N-苄基-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺；化合物#4  N-(2-氯代苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺；化合物#12 N-(3-甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#14 N-(2,6-二甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#19 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸环己基-甲基酰胺；化合物#24 (1,6)二氮杂萘-2-羧酸烯丙基酰胺(PFC-029)；化合物#25 N-(2-甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#26 N-(2-丙氧基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘-2-甲酰胺；化合物#28 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2,3,4,5-四氢苯并[B]oxepin-5-基)-
      酰胺；化合物#31 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸2,3-(亚甲基二氧基)-苄酰胺；化合物#32 7,8-二氢异喹啉-6-羧酸(2-甲氧基苄酰胺；化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙氨基苄胺)；化合物#35 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-甲氧基苄胺)；化合物#36 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#40 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#43 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-甲氧基苄酰胺；化合物#46 1-(2-异-丙氧基-苯基)-3-(1,6)二氮杂萘-2-基-脲；化合物#47 1-(2-异-丙氧苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；和化合物#51 1-[(R)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲。
本发明最优选化合物包括：化合物#26 N-(2-丙氧基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘-2-甲酰胺；化合物#32 7,8-二氢异喹啉-6-羧酸(2-甲氧基苄酰胺；化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙氨基苄胺)；化合物#36 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#40 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#43 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-甲氧基苄酰胺；化合物#46 1-(2-异-丙氧基-苯基)-3-(1,6)二氮杂萘-2-基-脲；化合物#47 1-(2-异-丙氧苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#51 1-[(R)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲。
在更进一步优选实施例中，本发明化合物包括：化合物#26 N-(2-丙氧基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘-2-甲酰胺；化合物#32 7,8-二氢异喹啉-6-羧酸(2-甲氧基苄酰胺；化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙氨基苄胺)；化合物#40 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#46 1-(2-异-丙氧基-苯基)-3-(1,6)二氮杂萘-2-基-脲。
使用有机化学领域技术人员熟知的常规制备步骤和回收方法合成本发明化合物。制备式Ⅴ化合物的优选合成途径包括将羧酸中间体式a与氨基中间体式b偶合。反应将在适合的条件下形成酰胺键，即，在适合的偶合剂如EDC或dcc的存在下，得到最终化合物式Ⅴ。所述反应说明于图式Ⅰ中。通过与硫化试剂如Lawesson氏试剂反应将化合物式Ⅴ转化为化合物式Ⅵ。本领域熟知Lawesson氏试剂的应用(例如，见Synthesis,941(1979)；Tetrahedron,35,2433(1979)；和Tet.Letlt,21,4061(1980)。
制备双环化合物式Ⅵ的优选合成途径包括将双环氨基中间体式c与氨基部分d偶合。所述反应说明于图式2中。反应在适合的条件下形成《脲》键，即在适合的溶剂中得到化合物式Ⅶa。使用本领域熟知的方法将R2取代基引入氮原子上。将化合物与上述硫化试剂反应也可以使化合物Ⅶa和Ⅶb的脲键转化为硫脲。
图式1
Figure A9719453500221
其中X、Y、Z、R1-R4和n如上述定义。
中间体a、b和c均市场有售，例如，2-羧基-[1,6]二氮杂萘(Peakadle Fine Chemicals.Glossop.Derbyshire UK,PFC-027)；6,7-二溴-4-羟基-[1,5]二氮杂萘-2-羧酸(Pomorski et al Rocz,Chem.,1974,48(2):321)；1,2,3,4-四氢-8-羟基-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(Abe et al TetLett.,1977,9:735)。或，另外根据已建立的合成技术以制备中间体a、b和c。
图式2
Figure A9719453500231
应该理解，在合成过程中某些取代基需要保护及随后脱保护。例如，当R3或R4是羟基时必须将其转化成烷氧基或酯来保护它，随后脱保护。其它取代基的保护基团在Pertectire Group in Organic Synthesis(2nd ed.,Greene and Wuts,Tohn Wiley & Sons,New York,1991)中已有介绍。
本领域技术人员可以理解，根据取代基化合物式Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ可含有一个或多个手性中心并以许多不同的异构体、光学异构体(即对映体)和其混合物包括外消旋混合物的形式存在。所有这样的异构体，对映体和其混合物包括外消旋混合物均包括在本发明范围之内。
本发明也提供抗巨细胞病毒组合物，其包括药学上可接受的载体或辅助剂和有效抑制哺乳动物CMV复制的一定量的式Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ化合物。根据化合物的溶解度和化学性和根据标准药物应用的给药途径确定每种载体、稀释剂或辅助剂的比例。
本发明治疗和预防方法包括用这些化合物或组合物以药学可接受的方式治疗患者的步骤。这样的组合物可以是片剂、胶囊、caplets、粉剂、颗粒剂、锭(片)剂、栓剂、重组粉剂的形式或液体制剂如口服或无菌非肠道溶液或悬浮液。通过眼内植入物给予本发明化合物也可治疗CMV感染引起的视网膜炎，特别是将化合物埋入聚合物基质植入物中这将延长其释放进入眼球的时间。
为了得到给药一致性，优选本发明组合物是单位剂量形式。对口服给药的单位剂量可以是片剂和胶囊和包含常规的赋形剂。例如，粘合剂如阿拉伯树胶、明胶、山梨醇或聚乙烯吡咯烷酮；填充料，如乳糖、蔗糖、玉米-淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；片剂润滑剂如硬脂酸镁；崩解剂如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠或微晶纤维素；或药学上可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。
所述化合物可以是非胃肠道注射给药；可以是肌肉、静脉或皮下。对非肠道给药，化合物可以使用含有其它溶质的无菌溶液的形式，例如，足量的生理盐水或葡萄糖使溶液等渗。非肠道给予活性成份的量是约0.01-250mg/kg/天优选约1-10mg/kg/天，更优选约0.5-30mg/kg/天和最更优选约1-20mg/kg/天。
可以片剂、胶囊或颗粒剂形式口服给予该化合物，包括适合的赋形剂如淀粉、乳糖、白糖等等。以溶液形式口服给予化合物可包括着色剂和/或调味剂，也可以气管(tracheas)或锭剂形式舌下给予化合物，其中每种活性成份与糖或玉米糖浆、调味剂和色素混合，然后充分脱水得到混合物压成适合的固体形式。口服给予活性成份的用量取决于具体化合物的生物利用度。
通过混合、填充、压片等常规方法制备固体口服组合物。可以使用反复混合操作使活性物质分散于使用大量填充剂的组合物中，当然这样的操作在本领域中是常用的。根据一般药物应用中熟知的方法将片剂包衣，特别是肠溶衣。
口服液体制剂可以是乳液、糖浆剂或酏剂形式，或可以是干品，在使用前与水或其它适合溶媒再重新组合。这样的液体制剂可以含有或不含有常用添加剂。例如悬浮剂如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维基、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪；乳液剂如甘油一油酸脱水山梨醇酯或阿拉伯树胶；非水载体(可包括食用油)如杏仁油、分馏椰子油、选自甘油、丙二醇、乙二醇和乙醇的油酯；防腐剂如对-羟基苯甲酸甲酯、对-羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸正丙酯或山梨酸的对羟基苯甲酸正丁酯；和常用的调味或着色剂(如果需要)。
对非胃肠道给药，通过使用肽和无菌载体可以制备液体单位剂量形式和根据于所使用的浓度可以悬浮或溶解在溶媒中。一旦溶在溶液中，可以注射化合物并在装入适合的小瓶或安瓶前进行无菌过滤，随后密封容器或贮存包装。使用前可将辅助剂如局部麻醉剂、防腐剂或缓冲剂溶解在载体中。通过装入小瓶中和在真空下除去水后冷冻组合物增强药用组合物的稳定性(如冻干组合物)。除了肽悬浮于熔媒中而不是溶解外，实际上用相同的方法可以制备非胃肠道悬浮剂，另外，经过滤得不到无菌液。然而暴露于环氧乙烷后悬浮于无菌溶媒中可以将化合物灭菌。将表面活性剂或润湿剂包括在组合物中有助于将化合物均匀分布。
本发明药用组合物包括抑制巨细胞病毒复制的一定量的化合物式Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ和药学上可接受的载体、稀释剂或辅助剂。一般讲，这些组合物包含活性化合物从约0.1％-约99％(重量)和优选从约10％-约60％(重量)，这取决于所采用的给药方法。
抑制巨细胞病毒复制的用量是减缓病毒复制的发展或减少病毒负载(即若不给予所述化合物将出现病毒负载)所需要的活性化合物用量，或是减缓因CMV感染引起症状的发展或减轻其程度或其排毒所需要的活性化合物的用量。
根据实施例中详细介绍的斑点还原分析测定本发明化合物抑制巨细胞病毒的活性。在这些特殊条件下，具有活性的化合物将表现约50μg/ml或以下的IC50、优选25μg/ml或以下，更优选10μg/ml或以下和最优选小于1μg/ml。
医生将决定提供最适合的治疗剂量。剂量可以随给药方式和所选择的具体的化合物而变化。另外，剂量可以随治疗中的具体患者而变化。治疗中所使用的化合物剂量将取决于病毒量、患者体重、化合物的相对药效和主治医生的诊断而变化。这样的治疗可以间断或不间断方法进行数周或数月。
为了进一步帮助理解本发明，提供下列非限制实施例。实施例1       合成化合物#1     N-(2-甲基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
在0℃向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水THF(5ml)的混合物中加入三乙胺(44ml,0.316mmol)。5分钟后,加入氯甲酸异丙酯(0.316ml,1M甲苯的溶液，0.316mmol)。在0℃搅拌混合物20分钟，然后在0℃将2-甲基苄胺(53.46ml,0.43mmol)加入混合物中。使得到的混合物温热至室温并在室温搅拌5小时，然后用CH2Cl2(100ml)稀释。用水洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体所需的产物(29.8mg,37％):m.p.120-121℃。化合物#2 N-苄基-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
在0℃向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、苄胺(45mg,0.42mmol的无水THF(5ml)的混合物中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(60.6mg,0.316mmol)。使得到的混合物在RT搅拌。20分钟后，将DMF(2ml)加入反应混合物中并使混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层，无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体所需的产物(97mg,99％):m.p.113-115℃。化合物#3 N-(2-溴苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
向搅拌的4-溴苄胺盐酸盐(97.8mg,98％,0.431mmol的无水DMF(5ml)的溶液中加入三乙胺(60.1μl,0.431mmol)。5分钟后，依次加入2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(60.6mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。使得到的混合物在室温下搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层，无水MgSO4干燥浓缩得到粗品混合物。粗品经层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体所需的产品(97mg,99％):m.p.149-150℃。化合物#4 N-(2-氯代苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol的无水DMF(5ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol),2-氯苄胺(54.7μl,95％,0.43mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(60.6mg,0.316mmol)。使反应混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体的所需产品(83mg,97％):m.p.120-121℃。化合物#5 N-(2-溴苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
向搅拌的2-溴苄胺盐酸盐(80.7mg,95％0.345mmol)的无水DMF(5ml)溶液中加入三乙胺(51.8μl,0.345mmol)。分钟后，依次加入2-[1,6]二氮杂萘羧酸(40mg,0.229mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(34.2mg,0.253mmol)和1-(3-二甲胺-丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(48.5mg,0.253mmol)。使得到的混合物在室温下搅拌4小时。反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体的所需产品(70mg,89％):m.p.129-130℃。化合物#6 N-(3-溴苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
向搅拌的3-溴苄胺盐酸盐(77.5mg,0.345mmol的无水DMF(5ml)的溶液中加入三乙胺(51.8μl,0.345mmol)。5分钟后，依次加入2-[1,6]二氮杂萘羧酸(40mg,0.229mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(34.2mg,0.253mmol)和1-(3-二甲胺基-丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(48.5mg,0.253mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(100ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品层析(己烷∶EtOAc=1∶1至纯EtOAc)得到白色固体的所需产品(64mg,81％):m.p.112-113℃。化合物#7 N-(2-氟苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(6.3ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2-氟苄胺(51.0μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(50ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(79.2mg,98％):m.p.110-111℃。化合物#8 N-(4-氯苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol的无水DMF(6.3ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、4-氯苄胺(53.5μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(50ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水MgSO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(80.3mg,94％):m.p.110-111℃。化合物#9 N-(2-乙氧苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol的无水DMF(6.3ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2-乙氧苄胺(64.9μl,0.43lmmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(50ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水Na2SO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(85.0mg,96％):m.p.79-80℃。化合物#10 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸2,3-二氢化茚-1-基酰胺向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol的无水DMF(6.3ml)的混合物中在室温下依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、1-氨基2,3-二氢化茚(56.0μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(50ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水NaHCO3水溶液洗涤有机层，无水Na2SO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(80.1mg,96％):m.p.156-157℃。化合物#11 [1,6]-二氮杂萘-2-羧酸(1,2,3,4-四氢-萘-1-基)-酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol的无水DMF(6.3ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、1,2,3,4-四氢-1-萘胺(63.0μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂并用CH2Cl2(50ml)重新溶解得到的残留物。用NaHCO3水溶液洗涤有机层、无水Na2SO4干燥并浓缩得到粗品混合物。粗品经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(87.0mg,100％):m.p.164-165℃。化合物#12 N-(3-甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、3-甲氧基苄胺(56.6μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清，真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到澄清油状的所需产品(79.1mg,94％)。化合物#13 N-(2-三氟甲基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2-(三氟甲基)-苄胺(61.6μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(90.9mg,96％):m.p.125-127℃。化合物#14 N-(2,6-二甲氧基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2,6-二甲氧基苄胺(75.0mg,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(90.6mg,98％):mp 169-171℃。化合物#15 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(反式-2-苯基-环丙基)-酰胺
向搅拌的反式-2-苯基环丙胺盐酸盐(75.3mg,0.431)的无水DMF(1.0ml)的混合物中加入三乙胺(60.0μl,0.431mmol)。5分钟后，依次加入2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(79.2mg,95％):mp123-124℃。化合物#16 N-(2-氨基-6-氟苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2-氨基-6-氟苄胺(60.0μl)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(80.6mg,94％):mp 165(分解)。化合物#17[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(1-苯基-乙基)酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、1-苯乙胺(56.1μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到澄清油状的所需产品(78.7mg,99％)。化合物#18 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(吡啶-2-基甲基)酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、2-(氨基甲基)吡啶(45.3μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至5％甲醇/乙酸乙酯)得到浅棕色固体所需的产品(78.7mg,99％):mp 123-125℃。化合物#19 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸环己基-甲基酰胺
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、环己甲胺(57.2μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(74.9mg,97％):mp 62-63℃。化合物#20(3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-(1,6)二氮杂萘-2-基-甲基酮
在室温下向搅拌的2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中依次加入1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)、1,2,3,4-四氢异喹啉(55.6μl,0.431mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜，反应液变清。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(100％乙酸乙酯)得到白色固体的所需产品(79.1mg,95％):mp 98-100℃化合物#21 N-(2-甲硫基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺
向搅拌的2-甲磺酰基苄胺盐酸盐(81.7mg,0.431mmol)的无水DMF(1.0ml)的混合物中加入三乙胺(60.0μl,0.431mmol)。5分钟后，依次加入2-[1,6]二氮杂萘羧酸(50mg,0.287mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(42.7mg,0.316mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(61.8mg,0.316mmol)。使得到的混合物在室温搅拌过夜。真空下除去溶剂。残留物经快速柱层析(50％己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到浅棕色固体的所需产品(88.2mg,99％):mp 102-103℃。化合物#32 7,8-二氢异喹啉-6-羧酸-2-甲氧基苄酰胺步骤1
Figure A9719453500341
将三氧化铬(15.50,173.10mmol)在0℃分次加入吡啶(28ml,346.20mmol)的二氯甲烷(175ml)溶液中。移去冷浴并使混合物搅拌30分钟。然后向溶液中加入醇(cheng,C.Y.；Hsin.Lw.；Liou,J.P.Tetrahedron,1996,52,10935)(3.851g,25.85mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液。然后在室温搅拌混合物2小时并倾出溶液，除去溶剂并经层析纯化残留物，用2％MeOH的CH2Cl2洗脱。得到淡黄色固体的所需化合物(2.662g,70％)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:8.69(s,1H,H-1),8.64(d,1H,H-2,J=7.1Hz),7.78(d,1H,H-4,J=7.1Hz),2.99(t,2H,H-6,J=6.2Hz),2.73(t,2H,H-8,J=6.3Hz),2.21(t,2H,H-7,J=6.2Hz).步骤2
Figure A9719453500351
在-78℃将LiHMDS的THF液(1M,11.0ml,1mmol)加入酮(115mg,0.78mmol)的所述溶液(锂1,1,1,3,3,3-六甲基二硅氮烷)中的THF(3ml)中。15分钟后，在该温度加入氰甲酸甲酯(0.3ml,3.9mmol)并使混合物搅拌过夜。然后用饱和氯化铵中止反应并用乙酸乙酯提取。干燥(Na2SO4)后，用冷乙酸乙酯研磨残留物得到所需化合物(75mg,47％)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:11.81(s,1H,OH),8.63(d,1H,H-3,J=5.9Hz),),8.58(s,1H,H-1),8.16(d,1H,H-4,J=5.9Hz),3.93(s,3H,OCH3),3.05(t,2H,H-8,J=7.8Hz),2.74(t,2H,H-7,J=8.5Hz)步骤3
Figure A9719453500352
在钯碳(10％,350mg)存在下将来自步骤2的烯醇(350mg,1.71mmol)的甲醇(10ml)溶液在氢气压下搅拌1小时。经硅藻土过滤除去催化剂并浓缩滤液至干得到白色固体所需的化合物(350mg,100％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:8.72(s,1H,H-1),8.67(d,1H,H-3,J=5.8Hz),),7.90(d,1H,H-4,J=5.8Hz),6.6(br,1H,OH),5.02(d,1H,H-5,J=4.3Hz),3.63(s,3H,OCH3),3.0(m,2H),2.8(m,1H),2.0(m,1H),1.9(m,1H).步骤4
Figure A9719453500361
在0℃将甲基磺酰氯(0.18ml,2.37mmol)加入来自步骤3的醇(350mg,1.69mmol)和三乙胺(0.35ml,2.54mmol)的二氯甲烷(10ml)的溶液中。然后在室温搅拌混合物2小时并用水、NaHCO3洗涤溶液并使用Na2SO4干燥。然后除去溶剂，将残留物溶于二氯甲烷(5ml)中并用DBU(1,8-二氮双环[5,4,0]十一-7-烯)(0.5ml)处理。在室温搅拌溶液2小时并真空下除去溶剂，经层析纯化残留物得所需化合物(159mg,50％以醇计算)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.46(d,1H,H-3,J=4.4Hz),8.44(s,1H,H-1),7.44(s,1H,H-5),7.06(d,1H,H-4,J=4.4Hz),3.83(s,3H,OCH3),2.87(t,2H,H-8,J=8.0Hz),2.69(t,2H,H-7,J=8.0Hz).步骤5
在室温下将NaOH(1N,1.3ml,1.3mmol)加入来自步骤4的酯(159mg,0.84mmol)的二氧六环(3ml)溶液中。3小时后，浓缩混合物至约1ml并小心加入HCl(6N)到冰冷溶液中，直到pH5止。收集得到的沉淀，用水洗并真空下干燥。(92mg,62％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.42(m,2H,H-1 and H-3),7.45(s,1H,H-5),7.31(d,1H,H-4,J=4.9Hz),2.82(t,2H,H-8,J=8.2Hz),2.53(t,2H,H-7,J=7.5Hz).步骤6
Figure A9719453500371
将来自步骤5的酸(60mg,0.34mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(79mg,0.41mmol)和HOBT(1-羟基苯并三唑水合物)(55mg,0.41mmol)2-甲氧基苄胺(54μl,0.41mmol)的DMY(1ml)溶液在室温搅拌24小时。真空下除去溶剂并经层析纯化残留物，用己烷中的50-100EtAc洗脱。得到白色固体所需化合物(80mg,79％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.45(d,1H,J=4.8Hz),8.41(s,1H,H-1),7.31(m,2H),7.10(s,1H,H-5),7.03(d,1H,H-4,J=4.8Hz)6.94(br,1H,NH),4.59(d,2H,CH2,J=5.8Hz),3.91(s,3H,OCH3),2.88(t,2H,H-8,J=8.0Hz),2.64(t,2H,H-7,J=8.3Hz).化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘2-羧酸2-N-乙胺苄胺步骤1N-乙基-2-氨基苄腈
Figure A9719453500381
将锂化双(三甲基sylil)酰胺溶液(7.6ml,1M四氢呋喃)加入2-氨基苄腈(1g,8.5mmol)的四氢呋喃(10ml)和DMF(2ml)的冷(0℃)溶液中。搅拌得到的溶液30分钟，然后滴加碘乙烷(0.68ml,8.5mmol)。使溶液达到室温并搅拌过夜。用蒸发的饱和NH4Cl使反应混合物骤冷，CH2Cl2稀释，水、盐水洗涤，用Na2SO4干燥合并的有机提取物并浓缩。经硅胶层析得到的液体(30％EtOAc-Hex)得到未分离单和双烷基化化合物比例为9∶1的标题化合物。N-乙基-2-氨基苄腈：1H NMR(400MHz)(CDCl3)δ:7.41-7.33(m,2H,Ph),6.68-6.65(m,2H,Ph),4.5(s,1H,NH),3.29-3.22(m,2H,CH-2N),1.32(t,J=7Hz,3H,CH3CH2)N-二乙基-2-氨基苄腈：1H NMR(400mhz)(CDCl3)δ:7.41-7.33(m,2H,Ph),6.68-6.65(m,2H,Ph),4.5(s,1H,NH),3.41(q,4H,CH2N),1.20(t,J=7Hz,6H,CH3CH2)步骤2N-乙基-2-氨基苄胺二盐酸盐和N-二乙基-2-氨基苄胺(aminobenzamme)二盐酸盐
将N-乙基-2-氨基苄腈(0.4g,2.7mmol)、10％pd/C(100mg)加入有乙醇(15ml)的干燥烧瓶中。向溶液中加入HCl(2.7ml,4M二氧六环中)。将得到的反应物置于H2(g)气压下。经硅藻土过滤得到的溶液，蒸发、乙醚研磨，蒸发溶剂得到上述中间体。N-乙基-2-氨基苄胺二盐酸盐：1H NMR(400MHz)(DMSO)δ:8.5-8.2(m,3H,NH3),7.35-7.25(1,2H,Ph),7.34(t,J=7.5Hz,1H,Ph)7.1-6.9(m,2H,Ph),4.07(s,2H,CH2N),3.19(q,2H,J=7Hz,CH3CH2),1.27(t,J=7Hz,3H,CH3CH2)N-二乙基-2-氨基苄胺二盐酸盐：1H NMR(400MHz)(DMSO)δ:8.5-8.2(m,3H,NH3),7.35-7.25(1,2H,Ph),7.34(t,J=7.5Hz,1H,Ph)7.1-6.9(m,2H,Ph),4.07(s,2H,CH2N),3.33(q,2H,J=7Hz,CH3CH2),1.07(t,J=7Hz,3H,CH3CH2)步骤38-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸
Figure A9719453500391
在室温下用40分钟以上时间将Br2(8.96mmol)加入[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(3g,17.25mmol)的乙酸(150ml)悬浮液中。室温搅拌溶液过夜，然后用冰使混合物骤冷并搅拌1小时。蒸发悬浮液至干，然后研磨2，过滤并用少量冷水洗涤。真空下干燥得到的组合物过夜得到标题化合物，收率59％。1H NMR(400MHz)(DMSO)δ:14.1-13.8(M,1H,COOH),9.49(s,1H,H5),9.10(s,1H,E7),8.83(d,1H,J=8.5Hz,H4),8.31(d,1H,J=8.5Hz,H3)步骤48-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸-2-N-乙胺-苄胺
Figure A9719453500401
在室温下将三乙胺(0.095ml,0.68mmol)加入DMF(1.5ml)的盐(57mg,0.255mmol)的溶液中。搅拌溶液5分钟。同时加入酸(30mg,O.12mmol),HOBT(25mg,0.19mmol)和EDCT(36mg,0.19mmol)。室温搅拌反应物过夜。蒸发溶液至于，用少量CH2Cl2溶解残留物并使用快速层析纯化(50％AcOEt/己烷至100％AcOEt)得到标题化合物，收率61％。1H NMR(400MHz)(CDCl3)δ:9.27(s,1H,H5),9.05(s,1H,H7),8.65-8.55(s,1H,NH),8.55-8.45(m,2H,H4 and H3),7.3-7.2(m,2H,Ph),7.85-7.65(m,2H,Ph),4.67(d,2H,J=6.5Hz,CH2),3.25-3.15(m,2H,CH2CH3),1.4-1.3(m,3H,CH3CH2)步骤58-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸2-N-乙胺基苄胺盐酸盐
Figure A9719453500402
在室温将HCl(1ml,4M二氧六环中)加入酰胺(28.4mg,0.06mmol)的CH2Cl2(0.5ml)的溶液中。室温搅拌溶液20分钟。蒸发悬浮液至干然后在乙醚中研磨得定量收率的标题化合物。1H NMR(400MHz)(CDCl3)δ:9.27(s,1H,H5),9.05(s,1H,H7),8.65-8.55(s,1H,NH),8.55-8.45(m,2H,H4 and H3),7.3-7.2(m,2H,Ph),7.85-7.65(m,2H,Ph),4.67(d,2H,J=6.5Hz,CH2),3.25-3.15(m,2H,CH2CH3),1.4-1.3(m,3H,CH3CH2)化合物#39 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-三氟甲基苄胺
Figure A9719453500411
将Lawesson氏试剂(38mg,0.09mmol)加入搅拌的BCH-5024(30mg,0.09mmol)的甲苯(1.5ml)的溶液中。然后加热溶液至90℃ 1小时。蒸发溶剂经快速层析(50％AcOEt/He至100％AcOEt)纯化产品得到25.8mg硫代酰胺衍生物。1H NMR(400MHz,CDCl3):10.55(bs,1H),9.3(s,1H),9.0(d,J=8.5Hz,1H),8.81(d,J=6Hz,1H),8.44(d,J=8.5Hz,1H),7.90(d,J=6.0Hz,1H),7.75(d,J=7.5Hz,1H),7.68(d,J=7.5Hz,1H),7.56(t,J=7.5Hz,1H),7.46(t,J=7.5Hz,1H),5.37(d,J=6Hz,2H).化合物#46 1-(2-异-丙氧基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲
Figure A9719453500421
Figure A9719453500422
在-78℃将2-异丙氧基苯胺(400mg,2.64mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.02ml,5.82mmol)的二氯甲烷(10.0ml)溶液经套管滴加进三光气(274.7mg,0.93mmol)的二氯甲烷(6.0ml)溶液中。在-78℃搅拌溶液1小时，然后在0℃搅拌1小时，接着在室温搅拌1小时。浓缩混合物，用戊烷研磨，然后过滤。分离棕色油状所需的异氰酸酯(449.7mg,96％)：
              1H NMR(400MHz,CDCl3)δ
7.12(1H,Ph),6.99(1H,Ph),6.90(1H,Ph),6.86(1H,
Ph),4.65(septet,1H,CH,J6.5Hz),1.42(d,6H,CH3,J
6.5Hz)ppm.
         P49,37
将异氰酸酯(45.8mg,0.258)和胺(25mg,0.172)的乙腈(1ml)混合物加热回流3小时。使用旋转蒸发仪除去溶剂。用乙醚研磨残留物，过滤，用乙醚洗涤。再用乙醇洗涤固体然后用乙醚反复洗涤。分离浅棕色固体的所需产品(34.4mg,62％):mp＞200℃；  1H NMR(400 MHz,DMSO)δ11.33(bs,1H,NH),10.S6(bs,1H,NH),9.17(s,1H,H-5),8.68(d,1H,H-7,J5.8Hz),8.43(d,1H,H-4,J8.9Hz),8.16(1H,Ph),7.68(d,1H,H-8,J5.8Hz),7.50(d,1H,H-3,J8.9Hz),7.12(1H,Ph),7.03(1H,Ph),6.93(1H,Ph),4.70(septet,1H,CH,J6.0Hz),1.34(d,6H,CH3,J6.0Hz)ppm.
用相同方法制备下列化合物：化合物#22 N-(2-羟基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#23 N-(2-甲氧基羰基苄基)-2-(1,6)二氮杂萘甲酰胺；化合物#26 N-(2-丙氧基苄基)-2-[1,6]二氮杂萘-2-甲酰胺；化合物#27 (2-{[([1,6]二氮杂萘-2-羰基)-氨基]-甲基}-苯基)-碳酸叔
      丁基酯；化合物#28 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2,3,4,5-四氢苯并[B]oxepin-5-基)-
      酰胺；化合物#29 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸(苯并二氢吡喃-4-基)-酰胺；化合物#30 N-(2’-甲氧基苄基)-5-氨基-2-[1,6]二氮杂萘甲酰胺；化合物#31 [1,6]二氮杂萘-2-羧酸2,3-(亚甲基二氧基)-苄酰胺；化合物#33 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙氨基苄胺)；化合物#34 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#35 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-甲氧基苄胺)；化合物#36 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)；化合物#37 8-氯-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-N-乙胺苄胺)；化合物#38 8-(2吡啶基)-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧苄胺)；化合物#40 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-异丙氧基苄胺；化合物#41 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-3-甲氧基苄胺；化合物#42 8-溴-[1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-异丙氧基苄胺；化合物#43 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-甲氧基苄酰胺；化合物#44 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸2-乙氧基-苄酰胺；化合物#45 [1,6]二氮杂萘-2-硫代羧酸-2-甲氧基-环己甲基-酰胺；化合物#47 1-(2-异-丙氧苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#48 1-(N-boc-4-氨基丁基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#49 1-(4-氨基丁基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲盐酸盐；化合物#50 1-[(S)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#51 1-[(R)-α-甲基苄基]-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#52 1-(2-甲氧基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#53 1-丁基-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#54 1-(2-甲氧基苄基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#55 1-(2-乙氧基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；化合物#56 1-(2-甲基-苯基)-3-[1,6]二氮杂萘-2-基-脲；和化合物#57 8-(2-吡啶基)-[1,6]二氮杂萘-2-羧酸(2-异丙氧基苄胺)。
从市场可获得下列化合物(Peakdale Fine Chemicals Limited,Glossop Derbyshire,UK)：化合物#24 (1,6)二氮杂萘-2-羧酸烯丙基酰胺(PFC-029)；化合物#25 N-(2-甲氧基苄基)-2-(1,6)-二氮杂萘-甲酰胺(PFC-032)。实施例2 CMC斑点还原分析
试验化合物的抗CMV活性是用以下斑点还原分析进行评价：
在12孔组织培养皿中，将1.5×10Es或Hs68细胞(人肺纤维细胞系)铺平到每孔的2ml DMEM 10％胎牛血清中并在5％CO2/空气37℃培养过夜或细胞成形为止。除去培养基，然后在每孔中用0.5mlHCMV病毒(用DMEM 2％FBC稀释至含有200pfu/ml)接种细胞。
在30℃吸收2小时后，除去病毒，并用含有各种浓度试验化合物的DMEM 2％FBS续加到单细胞层中。然后在37℃培养细胞8天，然后用1体积(1ml)甲醛8％/水或PBSI×固定30分钟。
除去甲醛溶液，用龙胆紫2％/EtOH 20％染色单细胞层几秒钟，然后用水轻洗。
在显微镜下检查单细胞层斑点存在情况，每种化合物与未试验细胞(没有试验化合物)对照测定斑点还原百分比并确定50％抑制浓度(IC50)。更昔洛韦作为阳性对照。注：DMEM培养基含有1％谷氨酰胺和1％pen/strep实施例3 细胞毒性分析
根据下列程序评价试验化合物的细胞毒性：
分别用5×10E3 Vero-34细胞/孔和1×10E4 Hs-68或Wi-38细胞/孔铺平平底96孔平板并在37℃和5％CO2/空气培养过夜。培养后，除去上清液介质并用2％DMEM(150μl)稀释的试验化合物代替。然后将细胞在5％CO2的培养器里于37℃培养40小时。
将[3H]-甲基胸苷(特异活性约2ci/mmol)的50μl/孔的10μCi/ml溶液加入培养基中并在5％CO2的培养器里于37℃培养过夜(18小时)。
用Tomtec细胞收集器在纤维玻璃滤器(Printed Filtermat A 1450-421 Wallac)上收集细胞。对粘附细胞可直接在滤器上收集悬浮细胞，首先除去培养基，然后用PBS洗涤细胞，在收集之前受胰蛋白酶作用2-3分钟(50μl胰蛋白酶/孔)。
在37-40℃干燥滤器1小时，然后放入具有4.5ml Betascint的袋中(1450-microbeta # 1450-432 Wallac)并用Microbeta 1450Wallac(protocol 1)获得计数。
通过与对照品(没有试验化合物)对比测定细胞增殖的百分比并因此建立50％抑制浓度。
根据斑点还原分析和对更昔洛韦的有利对比发现根据本发明化合物可抑制CMV。结果列表1。与更昔洛韦前后检验化合物，一致显示IC50＞0.1＜0.5μg/ml和从约10-200μg/ml变化的CC50。
                            表1
Figure A9719453500481
Figure A9719453500491
Figure A9719453500501
Figure A9719453500511
Figure A9719453500531

Claims (20)

1．抑制哺乳动物中巨细胞病毒复制的方法，它包括给予所述哺乳动物一定量的抗巨细胞病毒的式(Ⅰ)化合物：
Figure A9719453500021
其中W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4；B选自由下列各式组成的基团：其中；A是O或S；R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代(alkylthio)、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和与任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合的C3 -7环烷基，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R2和R2’独立为H、C1-4烷基或R1和R2共同形成任选与C6-10芳基或杂芳环稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)和任选由OH、卤素、氨基、巯基、C1-4烷基硫代、C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基、C1- 4烷氧基或羧基取代的饱和或不饱和C3-10(碳环或杂环)；R5是H、C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6酰基；和n是0、1或2。
2．根据权利要求的方法，其中W是N或NR5。
3．根据权利要求1的方法，其中Y是N或NR5和X和Y独立选自CH、CR4、CH2、C=O、和CHR4。
4．根据权利要求1的方法，其中R1是任选由选自羟基、氨基、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基硫代、C1-4卤代烷基的一个或两个取代基取代的苄基。
5．根据权利要求1的方法，其中R2和R2’是H。
6．根据权利要求1-4任一项的方法，其中R3是H。
7．根据权利要求1-4任一项的方法，其中R4是H。
8．包括药学上可接受的载体，稀释剂或辅助剂和式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐的抗巨细胞病毒组合物：
Figure A9719453500041
其中W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4；B选自包括
Figure A9719453500042
其中；A是O或S；R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和与任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合的C3 -7环烷基，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R2和R2’独立为H、C1-4烷基或R1和R2共同形成与C6-10芳基或杂芳基稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)和任选由OH、卤素、氨基、巯基、C1-4烷基硫代C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或羧基取代的饱和或不饱和C3-10(碳环或杂环)；R5是H、C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6酰基；和n是0、1或2。
9．根据权利要求8的组合物，其中W是N或NR5。
10．根据权利要求8的组合物，其中Y是N或NR5和X和Y独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4。
11．根据权利要求8的组合物，其中R1是任选由选自羟基、氨基、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基硫代、C1-4卤取代烷基的一个或二个取代基取代的苄基。
12．根据权利要求8的组合物，其中R2和R2’是H。
13．根据权利要求8-12的任一项的组合物，其中R3是H。
14．根据权利要求8-13的任一项的组合物，其中R4是H。
15．式(Ⅰ)化合物和其药学上可接受的盐：
Figure A9719453500051
其中W选自CH、CR3、CH2、C=O、CHR3、N和NR5；X、Y和Z之一是N或NR5而另两个独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4；B选自由下列各式组成的基团：
Figure A9719453500061
其中；A是O或S；R1选自：C1-6烷基、C2-6链烯基或任选由OH、卤素、氨基、羧基取代的C3 -7环烷基或任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的饱和或不饱和的C3-10(碳环或杂环)、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；和与任选由OH、卤素、氨基、巯基、羧基取代的C6-10芳基稠合的C3 -7环烷基，任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-4(烷基、烷氧基、烷基硫代、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)；R2和R2’独立为H、C1-4烷基或R1和R2共同形成与C6-10芳基或杂芳基稠合的饱和或不饱和的5或6元杂环。R3和R4独立选自H、OH、卤素、氨基、氰基、任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6(烷基、烷氧基、酰基、酰氧基或烷氧基羰基)、和任选由OH、卤素、氨基、巯基、C1-4烷基硫代、C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基、C1- 4烷氧基或羧基取代的饱和或不饱和C3-10(碳环或杂环)；R5是H、C1-6烷基或任选由OH、卤素、氨基或C1-4烷氧基取代的C1-6酰基；和n是0、1或2。ⅰ)当A是
Figure A9719453500071
时；和当W和Y是N或NR5时；则R1不是烯丙基或2-甲氧苄基；ⅱ)当A是
Figure A9719453500072
时；或X或Z是N或NR5时，则W是N或NR5；和ⅲ)当A是
Figure A9719453500073
时；Z是N或NR5，则R1不是甲基。
16．根据权利要求15的化合物，其中W是N或NR5。
17．根据权利要求15的化合物，其中Y是N或NR5和X和Y独立选自CH、CR4、CH2、C=O和CHR4。
18．根据权利要求15的化合物，其中R1是任选由选自羟基、氨基、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基硫代、C1-4卤取代烷基的一个或二个取代基取代的苄基。
19．根据权利要求15的化合物，其中R2和R2’、R3和R4各自是H。
20．具有抑制巨细胞病毒活性的根据权利要求15的化合物。
CN97194535A 1996-03-15 1997-03-14 抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物 Expired - Fee Related CN1069643C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9605437.4A GB9605437D0 (en) 1996-03-15 1996-03-15 Cytomegalovirus inhibiting compounds
GB9605437.4 1996-03-15

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1218473A true CN1218473A (zh) 1999-06-02
CN1069643C CN1069643C (zh) 2001-08-15

Family

ID=10790420

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN97194535A Expired - Fee Related CN1069643C (zh) 1996-03-15 1997-03-14 抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP0984967B1 (zh)
JP (1) JP2001515464A (zh)
CN (1) CN1069643C (zh)
AT (1) ATE260279T1 (zh)
AU (1) AU722650B2 (zh)
BR (1) BR9708068A (zh)
CA (1) CA2250320A1 (zh)
DE (1) DE69727838D1 (zh)
GB (2) GB9605437D0 (zh)
TW (1) TW480258B (zh)
WO (1) WO1997034894A1 (zh)
ZA (1) ZA972292B (zh)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9711257D0 (en) 1997-05-30 1997-07-30 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
CA2314408A1 (en) 1997-12-11 1999-06-17 Biochem Pharma Inc. Antiviral compounds
CA2364652A1 (en) 1999-02-22 2000-08-31 Benoit Bachand [1,8] naphthyridine derivatives having antiviral activity
DE19912638A1 (de) * 1999-03-20 2000-09-21 Bayer Ag Naphthylcarbonsäureamid-substituierte Sulfonamide
US6562822B2 (en) 2000-07-12 2003-05-13 Pharmacia & Upjohn Company Heterocyle carboxamides as antiviral agents
US6559145B2 (en) 2000-07-12 2003-05-06 Pharmacia & Upjohn Company Heterocycle carboxamides as antiviral agents
US6730682B2 (en) 2000-07-12 2004-05-04 Pharmacia & Upjohn Company Heterocycle carboxamides as antiviral agents
AU2002218902A1 (en) * 2000-12-27 2002-07-08 Shire Biochem Inc. Macrocyclic anti-viral compounds
WO2002060382A2 (en) 2001-01-19 2002-08-08 Smithkline Beecham Corporation Novel compounds and uses thereof
WO2005033079A1 (ja) * 2003-09-30 2005-04-14 Eisai Co., Ltd. ヘテロ環化合物を含有する新規な抗真菌剤
WO2007060028A1 (en) * 2004-12-31 2007-05-31 Gpc Biotech Ag Napthyridine compounds as rock inhibitors
TWI385169B (zh) 2005-10-31 2013-02-11 Eisai R&D Man Co Ltd 經雜環取代之吡啶衍生物及含有彼之抗真菌劑
US8183264B2 (en) 2006-09-21 2012-05-22 Eisai R&D Managment Co., Ltd. Pyridine derivative substituted by heteroaryl ring, and antifungal agent comprising the same
WO2008136279A1 (ja) 2007-04-27 2008-11-13 Eisai R & D Management Co., Ltd. ヘテロ環置換ピリジン誘導体の塩またはその結晶
TW200841879A (en) 2007-04-27 2008-11-01 Eisai R&D Man Co Ltd Pyridine derivatives substituted by heterocyclic ring and phosphonoamino group, and anti-fungal agent containing same
US8258301B2 (en) * 2007-05-15 2012-09-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Urotensin II receptor antagonists
US8513287B2 (en) 2007-12-27 2013-08-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Heterocyclic ring and phosphonoxymethyl group substituted pyridine derivatives and antifungal agent containing same
US8188119B2 (en) 2008-10-24 2012-05-29 Eisai R&D Management Co., Ltd Pyridine derivatives substituted with heterocyclic ring and γ-glutamylamino group, and antifungal agents containing same
TW201425312A (zh) 2012-11-20 2014-07-01 Hoffmann La Roche 經取代１，６－□啶

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4786644A (en) * 1987-11-27 1988-11-22 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aryl-3-quinolinecarboxamide
JPH02237922A (ja) * 1989-01-24 1990-09-20 Green Cross Corp:The 抗ウィルス剤
CA2053926A1 (en) * 1989-04-28 1990-10-29 Genkichi Ohta Anti-hiv agent
US4959363A (en) * 1989-06-23 1990-09-25 Sterling Drug Inc. Quinolonecarboxamide compounds, their preparation and use as antivirals.
US5516784A (en) * 1991-08-13 1996-05-14 Schering Corporation Anti-HIV (AIDS) agents
AU5447094A (en) * 1992-10-21 1994-05-09 Regents Of The University Of Michigan, The Polysubstituted benzimidazoles as antiviral agents
DE4303657A1 (de) * 1993-02-09 1994-08-11 Bayer Ag Neue Chinolon- und Naphthyridoncarbonsäurederivate
DE4331135A1 (de) * 1993-09-14 1995-03-16 Bayer Ag Neue antiviral wirksame valinhaltige Pseudopeptide
US5543413A (en) * 1994-02-25 1996-08-06 Regents Of The University Of Michigan Heterocyclic thioamides and related analogs as antiviral agents with a unique mode of action
AU714043B2 (en) * 1994-10-03 1999-12-16 Infectio Recherche Inc. Liposome-formulations for treatment of viral diseases
AU695132B2 (en) * 1995-08-02 1998-08-06 Darwin Discovery Limited Quinolones and their therapeutic use

Also Published As

Publication number Publication date
BR9708068A (pt) 2000-01-04
GB2326412A (en) 1998-12-23
AU722650B2 (en) 2000-08-10
CA2250320A1 (en) 1997-09-25
TW480258B (en) 2002-03-21
AU1918797A (en) 1997-10-10
CN1069643C (zh) 2001-08-15
DE69727838D1 (de) 2004-04-01
EP0984967B1 (en) 2004-02-25
ATE260279T1 (de) 2004-03-15
GB9605437D0 (en) 1996-05-15
EP0984967A1 (en) 2000-03-15
ZA972292B (en) 1997-10-16
GB9819782D0 (en) 1998-11-04
WO1997034894A1 (en) 1997-09-25
JP2001515464A (ja) 2001-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1069643C (zh) 抑制巨细胞病毒的二氮杂萘及其类似物
DE69818094T2 (de) Antivirale verbindungen
CN1066447C (zh) 咪唑并[4，5-c]喹啉胺类
CN1469878A (zh) 用作hiv整合酶抑制剂的氮杂和多氮杂萘基羧酰胺类化合物
CN102471341B (zh) 治疗寄生虫疾病如疟疾的稠合咪唑化合物和含有它们的组合物
CN1056824C (zh) 改进的环丙基乙炔合成
CN1388123A (zh) 氯代嘧啶中间体
CN1185146A (zh) (－)6－氯－4－环丙基乙炔基－4－三氟甲基－1,4－二氢－2h－3,1－苯并噁嗪－2－酮的不对称合成
CN87101691A (zh) 碳环嘌呤核苷，它们的制备及应用
JPH0662623B2 (ja) 治療用ヌクレオシド
CN1236616A (zh) 苯并咪唑衍生物在制备药物中的应用
CN1303378A (zh) 3－(氨基－或氨基烷基)吡啶酮衍生物和它们在hiv相关疾病治疗中的用途
TW202035412A (zh) 雜芳基二氫嘧啶衍生物和治療ｂ型肝炎感染之方法
CN1074764C (zh) 苯并噁嗪酮多巴胺d4受体拮抗剂
CN1038415C (zh) 5－取代的吡咯并[2,3－d]嘧啶的制备方法
CN1028528C (zh) 旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰基苯基)吡唑并[1，5-α]-1，3，5-三嗪或其盐的制法
CN87100298A (zh) 制备喹啉-3-羧酸抗菌剂的改进方法
CN102741248A (zh) 新的(杂环/稠合的哌啶)-(哌嗪基)-1-烷酮或(杂环/稠合的吡咯烷)-(哌嗪基)-1-烷酮衍生物及其作为p75抑制剂的用途
CN1708482A (zh) 作为抗微生物剂的n－磺酰基－4－亚甲基氨基－3－羟基－2－吡啶酮
CN1052117A (zh) 免疫刺激性6-芳基-5，6-二氢咪唑并[2，1-b]噻唑衍生物的制备方法
CN1164855A (zh) 含有连接碳环的取代苯并咪唑碱的抗病毒核苷类似物
CN1107068C (zh) 2－氨基－7－(1－取代的－2－羟乙基)－3,5－二氢－吡咯并[3,2－d]嘧啶－4－酮
CN1022325C (zh) 咪唑烷二酮衍生物的制备方法
WO2003002558A1 (fr) Remede pour maladies infectieuses virales
CN1146564C (zh) 抗菌的磺内酰胺和磺内酯衍生的噁唑烷酮

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee