CN1192772C - 表没食子儿茶素3－没食子酸酯在治疗hpv感染中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及表没食子儿茶素3-没食子酸酯的药物应用，特别是在制备用于治疗HPV感染的药物中的应用。

Description

表没食子儿茶素3-没食子酸酯在治疗HPV感染中的应用

发明领域

本发明涉及表没食子儿茶素3-没食子酸酯的药物应用，特别是在制备用于治疗HPV感染的药物中的应用。

发明背景

表没食子儿茶素3-没食子酸酯，英文名称：Epigallocatechin3-Gallate缩写为EGCG，分子式为C22H18011。

EGCG为一种从绿茶中提取的多酚类提取物，具有降血脂、抑制细菌和病毒、抗氧化、抗突变、抗肿瘤等多方面的生理功能(见氨基酸和生物资源1998，20(4)：51-54)

EGCG对超氧阴离子自由基有较强的清除作用。Egcg可以保护生物大分子，维护细胞膜的流动性，具有纯天然、高效能、无毒副作用的显著特点。

EGCG具有防癌、抗癌、抗突变和抗辐射的功效，可作为癌症的预防及治疗用药；EGCG还能够抑制一些混合致癌物(烟草雾浓缩物、煤焦油、X射线)的致突变作用。EGCG有助于促进心脑细胞代谢：具有预防和治疗高血脂、动脉硬化、脑血栓的作用。同时还可以预防和延缓老年性痴呆症的发生。

发明内容

本发明提供EGCG在制备HPV感染的药物中的应用，特别是提供对尖锐湿疣、扁平疣、生殖器疱疹、皮炎、湿疹、荨麻疹、药疹、病毒疣、真菌性皮肤病、红斑狼疮、软下疳以及皮肤癌等等皮肤性疾病，以及各种癌症(主要为：肝癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、肠癌、血癌、肾癌等)和作为目前各种抗肿瘤药物的生化调节剂(即为：既增加目前抗肿瘤药物的药效，同时又降低目前抗肿瘤药物对人体的毒副作用)的药物组合物的应用。所述组合物可以是含有作为主要组分的茶多酚的组合物，其治疗功效随茶多酚中的EGCG含量的提高呈现量效正比例的关系，但茶多酚中的EGCG含量不能低于30％，所述组合物也可以用EGCG纯品作为活性成分，用量一般在1mg-1000mg，本发明的组合物，各组分的比例可以是表没食子儿茶素3-没食子酸酯0.1-50％，各基质组份为1-30％，乳化剂为1-20％，保湿剂为2-15％，防腐剂为0.01-0.5％。本发明的组合物，最优选的组成为：

EGCG 200mg，或含有EGCG的复合物(其中EGCG含量应不低于25％)200mg，乙醇6000mg，丙二醇2000mg，卡波姆200mg，硫柳汞2mg，

蒸馏水至11g，该药物没有副作用，而且可以易于患者本人施用或插入到感染部位，特别对HPV病毒(人类乳头瘤病毒)有良好的杀灭效果，即能有效制止尖锐湿疣、生殖器疱疹的复发，临床预后良好。

本发明的组合物的活性成分可以用如下方法制备：绿茶经①浸泡、②浓缩、③干燥成绿茶提取物，该绿茶提取物④用有机溶剂作流动相，⑤经大孔吸附树脂或葡剂糖凝胶层析后得成品。如果含量不高，可重复④⑤过程，直至成品。

本发明的药物组合物可以制成不同的剂型，如：片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、软膏剂、油膏剂、霜剂、栓剂、注射剂、贴剂等本发明的组合物可以加入不同的药物可接受的载体，以利于制剂的形成，这些药物可接受的载体可以是：

淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、纤维素类、硬脂酸镁、吐温-80、卡波姆、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、甘油、明胶、聚乙二醇、硫柳汞、尼泊金丙酯、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、三氯叔丁醇、苯甲酸钠、硼砂、新洁尔灭、山梨醇、丙二醇异丙醇，月桂氮桌酮，异丙醇/丙二醇(1∶1)，异丙醇/(1∶2)和异丙醇/丙二醇(2∶1)、三乙醇胺、氢氧化钠凡士林、硬脂酸、液状石蜡、羊毛脂、十八醇、十六醇。单硬脂酸甘油酯、月桂醇硫酸钠、司盘60、平平加0。

本发明优选的剂型是凝胶剂和软膏剂，通过局部涂抹使药物作用与病灶部位，达到治疗疾病的目的。

本发明的软膏剂可以使用如下方法制备：

取油相组份，在80℃加热使熔化，将EGCG加入水相成分中，在80℃加热使溶液解，再将水相成份加入油相成分中搅拌均匀，即得。

上述制备方法中主药含量为0.2-10％，最佳含量为1-5％，各基质组份为1-30％，乳化剂为1-20％，保湿剂为2-15％，防腐剂为0.01-0.5％。

上述制备方法中所用基质为白凡士林、硬脂酸、液状石蜡、羊毛脂、十八醇、十六醇。

上述制备方法中乳化剂为单硬脂酸甘油酯、三乙醇胺、月桂醇硫酸钠、吐温80、司盘60、平平加0。

上述制备方法中保湿剂为丙二醇、甘油。

上述制备方法中防腐剂为山梨酸、尼泊金乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、硫柳汞、三氯叔丁醇、苯甲酸钠、硼砂、新洁尔灭。

本发明的凝胶剂可以使用如下方法制备：

取凝胶基质，加蒸馏水溶解，另加透皮吸收促进剂和防腐剂辅料混合均匀，调节PH7-8，待交联完成后，加入混匀，分装即得。

透皮促进剂可以是异丙醇，月桂氮桌酮，异丙醇/丙二醇(1∶1)，异丙醇/(1∶2)和异丙醇/丙二醇(2∶1)。

上述制备方法中所述的凝胶基质为卡波姆、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、甘油明胶和聚乙二醇。

上述制备方法中所述的防腐剂为：硫柳汞、尼泊金丙酯、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、三氯叔丁醇、苯甲酸钠、硼砂、新洁尔灭和山梨醇。

上述制备方法中所述的PH调节剂为三乙醇胺、氢氧化钠。

本发明的软膏剂经过临床研究具有良好的治疗尖锐湿疣的作用

以下是对498例的尖锐湿疣病人的临床研究结果

组合物采用50％EGCG含量的茶多酚为活性成分，另添加有快速疣体去除制剂而制成的药物(以下暂称“消疣一号”)。

尖锐湿疣又名生殖器疣或性病疣，是一种人类乳头瘤病毒(HPV)6型、11型、16型、18型及33感染引起的性传播疾病(STD)。临床表现以形成局部疣状增生性病变为主，其中HPV16、18型长期感染与女怀宫颈癌的发生有关。该病主要通过性接触传染。近几年来世界各地的发病率急剧增加，在部分国家甚至成为最常见的性传播疾病。国内近年业的发病率亦呈逐渐上升趋势，在性传播疾病中发病率仅次于于淋病。并且，复发率高，较难根治。

[临床资料]

观察对象均为本院门诊尖锐湿疣患者。性别：男性386例，女性112例。年龄：最小10岁最大68岁。病程：最短发现5天即来诊，最长2年，平均21天。皮损部位：单纯发于阴茎包皮皮肤者37例，包皮粘膜59例，龟头129例，尿道口29例，冠状沟87例，肛周2例，冠状沟、包皮粘膜等多个部位多发疣体者53例。阴唇31例，阴蒂25例，阴唇系带18例，阴道26例宫颈12例。

[诊断]

(1)有婚外性生活史或配偶患尖锐湿疣史；(2)具有典型的临床表现；(3)皮损不典型的病例借助病理检查加以确诊。

[鉴别诊断]

(1)珍珠样阴茎丘疹：1好发于青年人；2多与房事频繁、经常磨擦有关；3不痛不痒；4损害呈白色或粉红色半透明珍珠状小丘疹，互不融合；5好发于龟头冠状沟侧，损害成行排列。

(2)扁平湿疣：1好发于肛周及外生殖器部位；2不痛不痒；3表现为粉红色或灰白色增生性盘状损害，浸润明显；4损害中能找到梅毒螺旋体；5梅毒血清学反应阳性。表面有一定光泽或呈绒毛状外观。

[纳入观察病例标准]

1.经鉴别诊断确认为尖锐湿疣患者，患者未曾用其他方法治疗，愿意采用“消疣一号”进行单一药物治疗。

2.物理检查：患病部位有淡红色或污灰色的疣丘疹，呈菜花样、蕈样或乳头样，有蒂或无蒂。

3.醋酸白实验：用浸泡过5％醋酸溶液的棉签涂患处并按压患处5分钟后赘生物明显变白。

[治疗方法]

患者取站位或臣卧位，绷紧患部皮肤，使病灶部位充分暴露，用药前先用75％酒精清洁患部，后用牙签沾本品少许直接涂抹疣体，稍候即可用棉棒轻轻抹去，如疣体过大或过多则连续抹至疣体消除。

[治疗结果]

1、疣体脱情况：所治498例湿疣患者经涂抹“消疣一号”后疣体全部在1-5分钟内脱落。

2、脱落后的愈合情况：患者在接受治疗后均未对创面进行任何处理。但嘱患者暂停性生活一周时间，注意患部卫生。3天后患者均全部愈合。瘙痒、分泌物增多等症状消失，愈合后创面无红肿无瘢痕，无任何并发症，全部病例均一次性治愈。

3、治疗的疼痛情况：在治疗时，绝大多数患者诉治疗部位无疼痛感，少数患者诉有轻微疼痛感，但不影响治疗。所有患者均未进行麻醉。治疗结束后，患者均无治疗部位的明显不适感。

4、全身不良反应：在治疗期间和治疗后1周内，均没有患者诉治疗后出现的全身不适。

136例进行血液、肝肾功能化验的患者，治疗前后谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌肝、尿素氮等各项指标均无显著变化。

5、复发率：所有患者均随访半年，有13例于治疗后的2-3个月复发，有7例在治疗后半年内复发，复发率仅为4.01％。对复发病例仍然用上述方法治疗，仍然同样有效，且在三个月内未再复发。

表：本发明组合物与现用治疗手段治疗尖锐湿疣的比较表

治疗效果	本发明组合物	现用手段	治疗效果	本发明组合物	现用手段
						治愈率复发率治疗时间愈合时间	98％4.00％10-20分钟3天	30％-54％40％-70％半小时-半月7天-30天	愈后创面安全性治疗费用操作要求	无疤痕无毒不伤皮肤300-500元自己	有疤痕有毒伤害皮肤1000-9000元医生

以下通过本实施例对本发明作进一步的描述：

实施例

实施例一

活性成分的制备

取100g茶叶加入500g热水，加入100g甲醇搅拌，室温冷却后，过滤，滤液经减压蒸馏得粗提取物，将粗提取物先用浓盐酸处理，再用二氯甲烷多次萃取，在加盐(氯化钠)饱和，将水层转移到乙酸乙酯中抽提，流出物再用乙醚处理，处理物在摄氏40度-48度左右用旋转蒸发器分离，然后再上柱(内装SephadexLH20葡聚糖凝胶<安发玛西亚生物技术公司出品>)，柱内流动相为乙醇、甲醇混合物或纯乙醇，然后再上柱，此柱内流动相为纯乙醇，然后冷冻干燥，即可得到50mgEGCG。

实施例二

EGCG胶囊剂处方

EGCG                 240g

微晶纤维素菜         40g

滑石粉               1.4％

3％聚维酮乙醇溶液    适量

共制成               1000粒

将EGCG粉碎，取处方量EGCG与处方量微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，50℃干燥30-45分钟(所得颗粒用手紧握干颗粒，手放松致颗粒不应粘结成团，手掌也不应有细粉粘附或以食指和拇指颗粒捻搓时应立即粉碎，无潮湿感)整粒，加入滑石粉，混匀，充于1号胶囊中，即得每粒含240mg胶囊。

实施例三：

EGCG片剂处方

EGCG                 240g

微晶纤维素菜         40g

滑石粉               1.4％

3％聚维酮乙醇溶液    适量

共制成               1000粒

将EGCG粉碎，取处方量EGCG与处方量微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，50℃干燥30-45分钟(所得颗粒用手紧握干颗粒，手放松致颗粒不应粘结成团，手掌也不应有细粉粘附或以食指和拇指颗粒捻搓时应立即粉碎，无潮湿感)整粒，加入滑石粉，混匀，压片。

实施例四

EGCG颗粒剂  处方

EGCG               240g

微晶纤维素菜       40g

滑石粉             1.4％

3％聚维酮乙醇溶液  适量

共制成             500袋

将EGCG粉碎，过80目筛，取处方量EGCG与处方量微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，50℃干燥30-45分钟(所得颗粒用手紧握干颗粒，手放松致颗粒不应粘结成团，手掌也不应有细粉粘附或以食指和拇指颗粒捻搓时应立即粉碎，无潮湿感)整粒，装袋

实施例五

软膏的制备

取白凡士林2400克，单硬脂酸甘油酯1700克和甘油1500克。硬脂酸3和吐温-80 600克于水浴加热至80℃左右，使全部溶化；取EGCG200克和山梨酸40克加蒸馏水10560克于80℃加热溶解后，在等温下将水相缓缓倒入油相中，不断搅拌，至呈乳白色半固体状冷凝后，分装，即得。

实施例六

取硬脂酸1200克，吐温-80 880克，司盘-60 120克，硬酯醇1200克，液状石蜡1800克，白凡士林1200克和甘油2000克于水浴上加热熔化至80℃左右；取EGCG200克和山梨酸40克，加蒸馏水11360克，于80℃加热溶解后，加入熔化的油相中，边加边不断顺向搅拌，至呈乳白色半固体状，冷凝后，分装，即得。

实施例七

取平平加0500克，十六醇2000克，液状石蜡1200克和白凡士林2000克、甘油1000克于80℃加热至溶化，取EGCG200克和尼泊金乙酯20克，加蒸馏水13080克于80℃热溶解后，加入同温度油相中，边加边搅拌，至呈乳白色半固体状，冷凝后分装即得。

实施例八

取硬脂酸2400克、单硬脂酸甘油酯700克，液状石蜡1200克，凡士林200克和羊毛脂100克于80℃加热至熔化，取EGCG200克和三乙醇胺80克，加蒸馏水15120克于80℃加热溶解后，加入同温度油相中，边加边搅拌，至呈乳白色半固体状，冷凝后分装即得。

实施例九

取十八酸5000克，白凡士林5000克，月桂醇酸钠200克和丙三醇2400克于80℃加热至溶化；取EGCG200克、尼泊金甲酯5克，尼泊金乙酯3克，加蒸馏水7192克于80℃加热溶解后，加入同温度油相边加热边搅拌，至呈乳白色半固体状，冷凝后分装即得。

实施例十

凝胶剂的制备

称取主药EGCG200克，加适量蒸馏水溶解，遂加入乙醇6000克，丙二醇2000克，卡波姆200克混溶后，再加入防腐剂硫柳汞2克使溶解，补加新鲜蒸馏水至11600克，放置过夜，待卡波姆完全溶解后，滴加三乙醇胺溶液适量，调PH7-8，使凝胶完成交联，呈均匀透明状，分装，即得。

实施例十一

取丙二醇2000克，加入防腐剂硫柳汞2克使溶液解，加新鲜蒸馏水至11600克，加入卡波姆200克，滴加入三乙酸胺溶液适量，调PH7-8，交联完成后，将EGCG200克加入6000克乙醇中溶解的溶液，加入已交联好的空白凝胶中，混合均匀，分装，即可。

实施例十二

称取EGCG100克，加适量蒸馏水溶解，逐加入丙二醇1000克，乙醇4000克，混合后，加入新解蒸馏水至14700克，加入卡波姆200克，滴加三乙醇胺溶液适量，调PH7-8，交联完成后，旦均匀透明状，分装，即得。

实施例十三

取丙二醇1000克加入新鲜蒸馏水至14700克，加入波姆200克，滴加三乙醇胺溶液适量，调PH7-8，交联完毕后，将EGCG100克加入4000克乙醇中溶解的溶液，加入已交联好的空白凝胶中混合均匀，分装，即可。

实施例十四

使用方法举例

取0.2g左右的EGCG凝胶，涂于尖锐湿疣患者患处(物理疣体应除去，方法很多，如用快速疣体去除制剂、激光、冷冻、手术等)，每日一次，每个疗程为3天，疗程之间停药3天，至疾患部位痊愈。

Claims (2)

1.含有表没食子儿茶素3-没食子酸酯的药物组合物在制备治疗尖锐湿疣的药物中的应用，其中表没食子儿茶素3-没食子酸酯组合物的组成如下：表没食子儿茶素3-没食子酸酯0.1-50％，基质组份为1-30％，乳化剂为1-20％，保湿剂为2-15％，防腐剂为0.01-0.5％，组合物中各组分百分含量之和为100％。

2.权利要求1的应用，其组合物是凝胶剂、软膏剂、油膏剂、霜剂或栓剂。