CN101254212A - 美洲大蠊有效部位的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种美洲大蠊有效部位在制备抑制疱疹病毒(HSV)感染和防治口腔溃疡和/或生殖器疱疹药物中的应用。本发明的美洲大蠊有效部位由蜚蠊科美洲大蠊(Periplaneta americana)虫体鲜品或干品经醇水提取、大孔吸附树脂柱层析、醇溶剂洗脱精制而成，本发明得到的美洲大蠊有效部位具有明显的抑制单纯疱疹病毒活性，可以用于制备抑制单纯疱疹病毒感染和防治相关疾病或症状的药物或保健品。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体而言，涉及一种美洲大蠊，即蟑螂的有效部位提取物的抑制单纯疱疹病毒的功能，及其预防和治疗单纯疱疹病毒感染、口腔溃疡和/或生殖器疱疹的医药用途。
背景技术
单纯疱疹病毒直径约为120-150微米，含有DNA的核位于中间，向外依次由包膜、体被、衣壳三种同心结构组成，衣壳表面为162个壳微粒组成的3∶3∶2轴对称的20面体，在低温下可生存数月，湿热50℃及干燥90℃30分钟灭活。单纯疱疹病毒可分为I型和II型二种，I型疱疹病毒(HSV-1)主要感染腰以上部位的皮肤粘膜和器官，HSV-1主要通过呼吸道、皮肤和粘膜密切接触传播，99％的口唇粘膜、鼻前庭、眼结膜、咽喉部的炎症及疱疹，口和口周围发生的疱疹都是由I型疱疹病毒感染引起的。II型疱疹病毒(HSV-2)主要存在于女性宫颈、阴道、外阴皮肤及男性的阴茎、尿道等处，是引起生殖器发炎和疱疹的罪魁祸首。
口腔溃疡易反复发作，目前尚无特效治疗方法，临床上主要的治疗措施包括局部治疗和全身治疗，西医治疗以局部用碘甘油及维生素B1、B2和维生素C口服，一般疗效不甚明显。严重、顽固的口腔溃疡则需内服激素类药品、抗菌素类药品等，使用此类药物又存在较大的毒副作用和易使病人产生耐药性和菌群失调的不足之处。中药外用药可用包括锡类散、冰硼散等外用制剂，但治疗效果不十分理想；内服药包括牛黄解毒丸、牛黄上清丸等，又对本病症无显著的针对性。近期出现的不少新的口腔含片类药物制剂如西瓜霜含片、华素片和溶菌酶含片等分别在口感、杀菌、抗炎方面有所进步。但是有些又不适于哺乳期妇女、甲状腺功能亢进患者和碘过敏者。因此，应用现代病毒药理学技术、利用现代分离纯化手段，从中医药宝库中发掘出新的治疗口腔溃疡天然药物尤其是创新型中药是迫在眉睫的。
HSV-2经性器官接触后，潜伏约2-20天(平均6天)，有免疫缺陷或免疫功能不全的人，如应用免疫抑制剂、肾移植、严重烧伤、重度营养不良、血液淋巴系统恶性肿瘤病人等感染后症状加重，可出现疱疹性湿疹、复发性角膜溃疡，甚至全身播散性疱疹而致命。感染1-3周后体内产生中和抗体及补体结合抗体，残存的病毒向周围神经沿神经轴转入骶神经节，并长期潜伏，进入静止状态。当某种诱发因素如焦虑、精神创伤、受凉、日晒、吹风、创伤、感染、药物过敏、高热、月经、妊娠等破坏身体生理平衡时，神经细胞中出现病毒增殖所需的特异性转录酶，激活病毒而引起复发，体液抗体不能制止疱疹病毒复发，细胞免疫减弱对复发有重大影响。
HSV-2感染引起的生殖器疱疹临床表现中可分为原发和复发两种，患病部位先有烧灼感，很快在红斑基础上发生3-10个成群的红色丘疹，伴有瘙痒，丘疹很快变成小水疱，3-5天后变为脓疱，破溃后形成大片的糜烂和溃疡，自觉疼痛，最后结痂愈合。整个病程可持续20天左右。男性好发于龟头、冠状沟、尿道口、阴茎、阴囊、大腿和臂部等处。女性好发于阴唇、阴阜、阴蒂、肛周或阴道。约90％的病人，病毒可同时侵犯子宫颈，出现阴道分泌物增多或下腹痛，并可并发宫颈炎和子宫炎。大多数男女病人双侧腹股沟淋巴结肿大。后期炎症波及尿道、膀胱时，可出现排尿困难、尿痛、尿频、严重者可发生尿潴留等现象。此外，还可能有其它症状同时出现，如发热、全身不适、头痛、颈项强直、脑膜炎和骶部神经系统功能不全。
生殖器疱疹病毒与生殖器恶性肿瘤关系密切，引起生殖器疱疹的II型疱疹病毒可能是宫颈癌的潜在致癌因子。研究发现，患过生殖器疱疹的妇女比未患过者得宫颈癌的危险性大5-10倍，并且，在宫颈癌组织、剥脱细胞或癌前期细胞中发现了II型疱疹病毒特异抗原，从而表明II型疱疹病毒在宫颈癌的发生过程中起了重要作用。另外，从阴茎癌病人的活检材料中也观察到单纯疱疹病毒样颗粒。此外，近年来人们也注意到孕妇与II型疱疹感染的严重性。对妊娠的患者或无症状排毒来说，最严重的是传染给新生儿，孕妇患生殖器疱疹可导致胎儿畸形、流产、死产。
对HSV-2感染引起的病毒性疾病目前尚无特效治疗方法，临床上主要的治疗措施为采用阿昔洛韦等抗病毒药物。此外，人白细胞干扰素也可抑制病毒繁殖，减少生殖器疱疹的复发率。然而使用此类激素类药品、抗菌素类药品药物存在较大的毒副作用和易使病人产生耐药性和菌群失调的不足之处。
中医将II型单纯性疱疹感染疾病称为“阴疮”，其病性早期属热证、实证，为湿热、毒火阻滞肝脉；后期则伴有肝肾不足。中药外用药可用包括外用1％氯锌油，紫草油等方法，但治疗效果不十分理想；常用方药为清毒神圣汤加减、牛黄解毒丸、六味地黄丸加减和龙胆泻肝汤等，但对本病症无显著的针对性。
因此，应用现代病毒药理学技术、利用现代分离纯化手段，从中医药宝库中发掘出新的抑制II型单纯疱疹病毒感染和防治生殖器疱疹天然药物，尤其是创新型中药是迫在眉睫的。
美洲大蠊(Periplaneta americana)为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，俗称“蟑螂”，其入药始载于《神农本草经》，其中把它列为中品，谓“味：咸、寒；治：血瘀症坚寒热、破积聚、喉咽闭、内寒无子”[文献：孙星衍等，《神农本草经》，商务印书馆，1955：90]。“蟑螂”为其俗名首见于《本草纲目拾遗》，也称其为石姜、滑虫；各地方有其不同的称法，如：偷油婆、茶婆子、灶蚂子等。蜚蠊科(Blattidae)是一个庞大的昆虫家族，在地球上已生存了3.2亿年，与恐龙属同一时代出现的生物。无疑它是世界上生命力最强、最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一，而蟑螂是其中少数几种家居蜚蠊品种之一。蟑螂作为害虫是城市卫生防疫部门和海关检疫部门重点防治对象之一。然而，在科技日新月异的今天，面对上千种针对它的各种杀灭剂，这一昆虫群体依然十分活跃，这表明其体内必应具有某些特殊的物质和其特有的作用机制。
随着我国对传统中医药资源研究开发的重视，学者们对这一几千年来无法根绝的害虫进行了应用开发方面的研究，发掘出了这一传统意义上的害虫的正面价值。以美洲大蠊醇提物纯化制成的产品“康复新”，在烧伤、烫伤等外伤创面的良好疗效。从美洲大蠊醇提物中纯化精制而成的“心脉龙注射液”，具强心升压，改善微循环，兴奋呼吸，利尿，增加心、脑、肺、肾的血流量。“心脉龙注射液”主治：右心衰，也可治急慢性心衰，失血性休克，低血压，室性早博，病窦性综合症，心脑缺血性疾病，为2004年通过国家食品药品监督管理局审批的国家二类新药(中药)。
中科院昆明动物研究所所完成的人体外试验证实：从蜚蠊中提取的氨基酸以及粘多糖的化合物具有显著的抗艾滋病病毒的作用，该所研究人员进行的合胞体试验结果表明：此类化合物对艾滋病病毒的治疗指数高达4264，是目前国际上抗艾滋病病毒一线用药AZT治疗指数的十分之一左右。由于从蜚蠊中提取的抗艾滋病药物至今还未发现毒副作用，所以，研究人员目前还对其治疗乙型肝炎进行了临床试验。
上述研究结果提示蟑螂药材作为抗病毒活性成分的可能性，经查新发现，以往均无由美洲大蠊醇提物经柱层析后中大极性的提取物作为主药进行配制的用于防治I型和II型单纯疱疹病毒感染药物制剂的相关报道或专利。据此，我们针对蟑螂提取物与疱疹病毒的抑制作用间的关系进行了研究，并发现了蟑螂药材中抑制I型和II型单纯疱疹病毒的有效部位。
发明内容
本发明的目的是提供美洲大蠊有效部位在制备抑制疱疹病毒感染的药物中的应用。
本发明的另一个目的是提供美洲大蠊有效部位在制备抑制单纯疱疹病毒感染的药物中的应用。
本发明的再一个目的是提供美洲大蠊有效部位在制备治疗生殖器疱疹药物中的应用。
本发明所涉及的药物具有体外强效抑制I型和II型单纯疱疹病毒的作用，说明其对病毒性HSV感染的口腔溃疡和/或生殖器疱疹有着显著的治疗作用。
本发明的又一个目的是提供了一种防治HSV感染口腔溃疡和/或生殖器疱疹的药物或药物组合物。所述药物的制剂形式包括擦剂、散剂、片剂和喷雾剂。
本发明所述的美洲大蠊有效部位的制备方法如下：用溶剂提取经粉碎或未粉碎的美洲大蠊虫体、浓缩提取回收溶剂、大孔吸附树脂柱层析、水洗、醇水溶液梯度洗脱方法纯化；得到的抑制单纯疱疹病毒活性有效部位经减压浓缩至无醇味、减压浓缩或冷冻干燥，粉碎得产品。
本发明中的动物药材可以是美洲大蠊任一部位，即可以是美洲大蠊(Periplaneta americana)头、身、翅，也可以是它们的混合物，优选全虫。可以是干燥全虫，也可以是未经干燥的全虫或活体全虫。
本发明人发现，本发明得到的美洲大蠊醇提物经大孔吸附树脂柱层析后中大极性的提取物具有重要的生物活性，该有效部位对单纯疱疹病毒有着强效的抑制作用，从而可以开发成为抑制病毒性疱疹感染和防治口腔溃疡和/或生殖器疱疹的药物。
美洲大蠊醇提物经大孔吸附树脂柱层析后中大极性的提取物可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到具有单纯疱疹病毒生长抑制活性从而可以用于防治单纯疱疹病毒感染、口腔溃疡和/或生殖器疱疹的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用散剂、口服液、喷雾剂、阴道贴膜、注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。
本发明的特点是：对常见家居蜚蠊科昆虫蟑螂的各提取部位的抗单纯性疱疹病毒(HSV)活性进行了系统研究，以HSV-1、HSV-2感染的Vero细胞载体筛选出蟑螂提取物抗单纯性疱疹病毒的有效部位。最终发现，蟑螂的醇提物经大孔吸附树脂柱层析分段后得到的中大极性的部位具有明显的抑制HSV感染的Vero细胞复制活性；急性毒性试验进一步证实，ICR小鼠口服该有效部位具有相当的安全性。可以预期作为抑制单纯疱疹病毒感染和防治口腔溃疡和/或生殖器疱疹的药物用途。
具体实施方案
下面通过实施例进一步说明本发明。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的百分数是重量百分数。
为了更好地理解本发明的实质，下面分别以实施例的方式说明用蟑螂醇提物经柱层析富集制备抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉原料。药理实施例则说明了蟑螂提取物药效部位对单纯疱疹病毒抑制作用的药理实验结果。实验结果说明蟑螂提取物有效部位在抗单纯疱疹病毒、抑制口腔溃疡和生殖器疱疹的药物研究领域中的用途；并用该活性提取物进行了ICR小鼠的口服灌胃急性毒性试验，说明该有效部位对动物的毒性，由此来反映在人体使用时的安全性。
实施例1：美洲大蠊醇提物经聚酰胺富集的制备方法
1.1美洲大蠊醇提物的制备美洲大蠊药材3公斤，加55％乙醇10000毫升，室温浸泡提取，提取3次，每次24小时。合并提取液，减压浓缩至干，真空干燥，即得美洲大蠊醇提物。
1.2聚酰胺分段不同提取物的制备美洲大蠊醇提物20克，用30克聚酰胺(10～30目)吸附拌样，上柱，先用水洗脱至无色。续用10％乙醇-水溶液洗脱至无色；再用30％乙醇-水溶液洗脱至无色，取洗脱液10毫升减压浓缩至干，冷冻真空干燥，即得提取物(I-30)[美洲大蠊醇提物30％醇洗液]；续用60％乙醇-水溶液洗脱至无色，取洗脱液10毫升减压浓缩至干，冷冻真空干燥，即得提取物(I-60)[美洲大蠊醇提物60％醇洗液]。
实施例2：用D-101大孔吸附树脂富集蟑螂有效部位冻干粉原料
2.1美洲大蠊醇提物的制备美洲大蠊药材3公斤，加55％乙醇10000毫升，室温浸泡提取，提取3次，每次24小时。合并提取液，减压浓缩至干，真空干燥，即得美洲大蠊醇提物。
2.2D-101大孔吸附树脂柱层析分段不同提取物的制备美洲大蠊醇提物20克，用30克D-101大孔吸附树脂吸附拌样，上200克D-101大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至无色，续用30％乙醇-水溶液洗脱至无色，取洗脱液10毫升减压浓缩至干，冷冻真空干燥，即得提取物(II-30)[美洲大蠊醇提物D-101大孔吸附树脂柱层析30％醇洗液]；续用60％乙醇-水溶液洗脱至无色，取洗脱液10毫升减压浓缩至干，冷冻真空干燥，即得提取物(II-60)[美洲大蠊醇提物D-101大孔吸附树脂柱层析60％醇洗液]。
美洲大蠊药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉原料，即蟑螂醇提物经大孔吸附树脂柱层析富集得到的中大极性的提取物，以及各种制剂具有重要的生物活性，本发明采用微量细胞病变抑制(CPE)法研究蟑螂的有效部位冻干粉原料对单纯疱疹病毒的抑制作用，试验中以阿昔络韦(ACV)为阳性对照药。研究发现：蟑螂药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉在体外具有较强抑制HSV的作用。
本发明的蟑螂抗单纯性疱疹病毒有效部位提取物及制剂还可以与现已上市的治疗单纯疱疹病毒感染、口腔溃疡和/或生殖器疱疹的常用药物联合使用，制备得到具有治疗单纯疱疹病毒感染、口腔溃疡和/或生殖器疱疹的组合物或复方制剂。
实施例3：微量细胞病变抑制(CPE)法研究蟑螂提取物I-60和II-60对HSV-1的抑制作用试验：
1.细胞培养和病毒传代：
将Vero细胞培养于含10％灭活小牛血清，100U/毫升青霉素和100微克/毫升的RPMI1640培养基中，置37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养。将HSV-1加入长有的Vero的细胞瓶中，置37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养，收集培养上清，置低温下保存。
2.实验方法：
2.1采用MTT法测定蟑螂提取物I-60和II-60对Vero细胞生长的抑制作用：
(1)测试药物：蟑螂提取物I-60，即根据实施例1制备得到的美洲大蠊醇提物经聚酰胺富集的精致物；蟑螂提取物II-60，即根据实施例2制备得到的美洲大蠊醇提物经大孔树脂富集的有效部位；阿昔洛韦(ACV)为阳性对照药物。
(2)取对数生长期的Vero细胞，用培养基将细胞稀释成1×105/ml，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养24小时后加入用培养基稀释的I-60和II-60，浓度分别为200微克/毫升，40微克/毫升和8微克/毫升，置于培养箱中培养，培养72小时后，每孔加入MTT试剂10微升，继续培养4小时，弃去培养基，每孔加入二甲亚砜200微升，用振荡器振荡20分钟，在570nm波长下用酶标仪测定OD值。以只加培养基的培养孔为对照孔。抑制率(％)＝(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。实验重复三次。根据不同浓度下对细胞生长的抑制率，计算对细胞生长的半数抑制浓度(TD50)。
2.2用微量细胞病变抑制法测定样品对病毒生长抑制作用：取对数生长期的Vero细胞，用培养基将细胞稀释成1×105/毫升，接种于96孔细胞培养板，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养24小时，加入100TCID50的病毒100微升，倾出病毒，分别加入不同浓度的I-60和II-60，同时设正常细胞对照和病毒感染对照，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养48小时后在倒置显微镜下观察细胞病变。以五级标准作为判断细胞病变的标准：-：细胞无变化，分值为8分；+：25％以下细胞出现病变，分值为6分；++：25％～50％细胞出现病变，分值为4分；+++：50％～75％细胞出现病变，分值为2分；++++：75％以上细胞出现病变，分值为0分。计算半数抑制浓度(IC50)。同时用阿昔洛韦作为阳性对照药。计算样品治疗指数：TI＝半数中毒浓度/半数抑制浓度。
3.实验结果：结果如表一显示，美洲大蠊药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉(II-60)能显著抑制HSV-1的复制，其对HSV-1的半数抑制浓度和治疗指数如表所示。
表一.美洲大蠊药材有效部位冻干粉抑制HSV-1的复制作用
| 样品 | TD50(微克/毫升) | IC50(微克/毫升) | TI(治疗指数) |
| I-60 | ＞200 | 13.1 | ＞14 |
| II-60 | ＞200 | 8.6 | ＞10 |
| 阳性对照药(阿昔洛韦) | ＞200 | 3.91×10-2 | ＞5115 |
注：TD50：样品对细胞生长的半数抑制浓度(微克/毫升)；IC50：样品对病毒复制的半数抑制浓度(微克/毫升)；TI：治疗指数，TI＝TD50/IC50。
4.结论：上述试验结果说明，美洲大蠊药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉(II-60)对I型单纯疱疹病毒有着强效的抑制作用，从而可以开发成为抑制口腔病毒性疱疹和口腔溃疡的药物。
实施例4：微量细胞病变抑制(CPE)法研究实施例2制备得到的有效部位提取物冻干粉原料对HSV-2的抑制作用
1实验目的
以HSV-2感染的Vero细胞为模型，筛选抗HSV药物，其中样品来自实施例2样品II-60。
2材料
2.1病毒和细胞
2.1.1病毒：HSV-2由浙江大学药学院中药与天然药物研究室提供；
2.1.2细胞：Vero细胞购自中科院上海细胞生物学研究所。
2.2试剂
2.2.1RPMI 1640培养基：Gibco公司产品；
2.2.2L-谷胺酰氨：AMRESCO产品，上海生工生物工程技术服务有限公司分装；
2.2.3MTT：AMRESCO产品，上海生工生物工程技术服务有限公司分装；
2.2.4胎牛血清：Gibco公司产品；
2.2.5青霉素钠：江西东风药业股份有限公司产品；
2.2.6硫酸链霉素：华北制药股份有限公司产品；
2.2.7阳性对照药：阿昔洛韦(ACV)，湖北科益药业股份有限公司，0.25g/支。
2.3仪器
2.3.1CO2培养箱：美国Shellab公司产品；
2.3.2XD-2倒置显微镜：重庆光电仪器有限公司产品；
2.3.3生物安全柜：美国LABCONCO公司产品；
2.3.4Synergy HT酶标仪：美国BIO-TEK公司产品；
2.3.5LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸汽灭菌器：上海申安医疗器械厂产品。
3.方法
3.1病毒毒力测定：在长成单层的细胞中加入10倍连续倍比稀释的病毒液，从10-1到10-9等共9个浓度，在37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度条件下培养48小时，然后用MTT法比色，测定病毒的毒力，以TCID50表示。
3.2样品毒性测定：用培养基将药物连续稀释成4个浓度(100微克/毫升，10微克/毫升，1微克/毫升)，分别加入细胞已长成单层的96孔培养板中，每孔200微升，置于37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养，培养72小时后用MTT法测定样品对细胞的毒性，计算半数中毒浓度(TD50)。
3.3细胞病变抑制法测定样品对病毒生长抑制作用：细胞接种96孔培养板，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养24小时，加入2×100TCID50的病毒100微升，吸附2小时，倾出病毒，分别加入最大浓度为无毒浓度的不同浓度样品，每浓度3孔，同时设正常细胞对照和病毒感染对照，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养72小时后在倒置显微镜下观察细胞病变。以五级标准作为判断细胞病变的标准：-：细胞无变化，分值为8分；+：25％以下细胞出现病变，分值为6分；++：25％～50％细胞出现病变，分值为4分；+++：50％～75％细胞出现病变，分值为2分；++++：75％以上细胞出现病变，分值为0分。计算半数抑制浓度(IC50)。
3.4计算样品治疗指数：TI＝半数中毒浓度/半数抑制浓度
4.结果
实验表明，HSV-2对Vero细胞的TCID50为10-4.7/100微升，在后续的抗病毒实验中，采用了2×100TCID50的病毒量感染细胞，到实验结束时，绝大部分的细胞感染，符合药效研究的规定。
根据样品的溶解度和预实验测定的样品对细胞的毒性，确定了正式实验时的样品浓度，然后再按1∶2连续倍比稀释，作为实际上样浓度，样品在25微克/毫升时无毒性。当感染量在2×100TCID50时ACV的IC50为0.2314微克/毫升。实验结果见表2。
表二.美洲大蠊药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉抑制HSV-2的复制作用
注：TD50：样品对细胞生长的半数抑制浓度(微克/毫升)；IC50：样品对病毒复制的半数抑制浓度(微克/毫升)；TI：治疗指数，TI＝TD50/IC50。
5结论
上述试验结果说明，美洲大蠊药材抗单纯性疱疹病毒有效部位冻干粉对II型单纯疱疹病毒有着强效的抑制作用，从而可以开发成为抑制II型单纯疱疹病毒感染和生殖器疱疹的药物。
实施例5：美洲大蠊醇提物提取物(II-60)的急性毒性(LD50)试验1实验材料：
待试样品：美洲大蠊醇提物提取物(II-60)；
溶媒：0.5％CMC-Na；
动物：ICR小鼠，雌雄兼用，19.0～20.9克，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。
2实验方法：
2.1制备样品混悬液：称取美洲大蠊醇提物提取物(III-60)样品制成浓度为50毫克/毫升的混悬液。
2.2给药：将12只小鼠(雌雄各半)，灌胃给予美洲大蠊醇提物提取物(II-60)混悬液；给药容积为40毫升/公斤，给药剂量为2000毫克/公斤。
2.3观察记录：观察并记录给药后小鼠的反应情况。
3实验结果：连续观察给药后10天的动物进食与活动情况，未见小鼠呈任何异常反应，未有死亡现象发生。
4实验结论：一般来说，治疗肿瘤药物急性毒性测试中，半数致死剂量＞2.0克/公斤者一半视为毒性较小，或者基本无毒。美洲大蠊醇提物提取物(II-60)满足这一要求，所以属于低毒或基本无毒的有效部位。预期临床使用具有较高的安全系数。
Claims (6)
1.美洲大蠊提取物有效部位在制备抑制疱疹病毒感染的药物中的应用，通过以下方法获得：用溶剂提取经粉碎或未粉碎的美洲大蠊虫体，浓缩提取回收溶剂，大孔吸附树脂柱层析，水洗，用醇水溶液梯度洗脱方法纯化，得到的抑制单纯疱疹病毒活性有效部位经减压浓缩至无醇味，减压浓缩或冷冻干燥，粉碎得产品。
2.根据权利要求1所述的美洲大蠊有效部位在制备抑制单纯疱疹病毒感染的药物中的应用。
3.根据权利要求1所述的美洲大蠊有效部位在制备治疗生殖器疱疹药物中的应用。
4.根据权利要求1-3任一所述的美洲大蠊有效部位，其特征是：选用美洲大蠊虫体的任一部位，或它们的混合物。
5.根据权利要求4所述的美洲大蠊有效部位，其特征是：选用美洲大蠊干燥全虫、未经干燥的全虫或活体全虫。
6.根据权利要求1-3任一所述的药物的制剂形式包括散剂、口服液、喷雾剂、阴道贴膜、注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂、控释或缓释剂型或纳米制剂。
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