CN1190990A - 一种改进的固定化青霉素g酰基转移酶 - Google Patents

一种改进的固定化青霉素g酰基转移酶 Download PDF

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Abstract

提供了一种具有令人惊奇的良好性能的新固定化青霉素G酰基转移酶。运用这种固定化酶通过母体氨基β－内酰胺和相应的酰化剂的酶促反应,可以高产率地制备β－内酰胺衍生物。

Description

一种改进的固定化青霉素G酰基转移酶
技术领域
本发明涉及一种改进的固定化青霉素G酰基转移酶。此外，本发明涉及运用所说的固定化酶通过母体氨基β-内酰胺核和相应的酰化剂的酶促酰化作用制备β-内酰胺抗生素的方法。
发明背景和领域
从下列文献已知通过用活化的侧链酸衍生物(例如酰胺或酯)酰化母体氨基β-内酰胺部分酶促制备半合成β-内酰胺抗生素的方法：荷兰专利158847、欧洲专利申请339751和473008、国际专利申请WO 92/01061和WO 93/12250、美国专利3816253和西德专利文献2163792和2621618。本领域使用的酶在大多数情况下是来源于大肠杆菌的青霉素酰基转移酶，并且固定化在各种类型的水-不溶性材料上。
用于产生阿莫西林、氨苄青霉素、头孢羟氨苄、头孢氨苄和头孢拉定的已知酶促方法的弊端是由于固定化酶的选择性引起的高成本。所说的固定化酶能够缩合活化的侧链衍生物和氨基β-内酰胺，侧链衍生物例如D(-)-苯基甘氨酸酰胺(PGA)、D(-)-苯基甘氨酸甲酯(PGM)、D(-)-4-羟苯基甘氨酸酰胺(HPGA)、D(-)-4-羟苯基甘氨酸甲酯(HPGM)、D(-)-2，5-二氢-苯基甘氨酸酰胺(DPGA)和D(-)-2，5-二氢-苯基甘氨酸甲酯(DPGM)；氨基β-内酰胺例如6-氨基-青霉烷酸、(6-APA)、7-氨基头孢菌酸(7-ACA)、7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-羧酸(7-ACCA)、7-氨基脱乙酰氧基头孢菌酸(7-ADCA)和7-氨基-3-[(Z)-1-丙烯基]-3-头孢烯-4-羧酸。另一方面，所说的固定化酶也将活化的侧链衍生物水解成无价值的侧链酸，也将所需产物水解形成侧链酸和母体氨基β-内酰胺，合成和水解之间的高比率会降低活化的侧链衍生物的成本。
从国际专利申请WO 93/12250已知，经固定化在Eupergit PCA上的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶的头孢羟氨苄和头孢氨苄合成的合成/水解比率强烈地依赖于反应条件，如pH、反应物浓度和温度。然而没有指出载体材料的性质对合成/水解比率的影响。
从欧洲专利222462已知，通过将氨基聚合物(例如藻酸胺、脱乙酰壳多糖果胶或聚乙烯亚胺)添加到载体的基质胶凝成分上，可以把氨基引入到载体材料上。
令人惊奇地是，现已发现就活化的侧链衍生物与氨基β-内酰胺的缩合反应中的合成/水解比率而言，在由胶凝剂和包含游离氨基基团的聚合物组成的载体上固定化大肠杆菌青霉素G酰基转移酶使得酶促催化剂与固定在其它载体上的青霉素G酰基转移酶比较具有良好的特性。
发明概要
本发明提供了在由胶凝剂和包含游离氨基基团的聚合物组成的载体上固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶。优选地，聚合物选自藻酸胺、脱乙酰壳多糖、果胶或聚乙烯亚胺；更优选地，胶凝剂是明胶。此外，本发明提供了通过使用这样的固定化酶经母体氨基β-内酰胺和相应的酰化剂的酶促反应制备β-内酰胺衍生物的改进的方法。特定实施方案
可以由本发明的方法产生的β-内酰胺衍生物的例子是阿莫西林、氨苄青霉素、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢罗齐、头孢氨苄和头孢拉定。酰基转移酶活性不依赖于头孢烯化合物3-位上的取代基，例如氢、卤素、(低级)烷氧基、甲基或由例如以下基团取代的甲基：(低级)烷氧基、(低级)烷酰氧基、卤素、S-R5(其中R5是(低级)烷基、(低级)烷酰基或者取代或未取代的杂环)，N+-R6(其中R6是(低级)烷基或者取代的或未取代的杂环)。低级意指1-6个碳原子。杂环定义为包含至少一个氮、硫或氧原子的不饱和环状结构。
酰化剂可以是D(-)-苯基-甘氨酸衍生物、D-(-)-4-羟苯基甘氨酸衍生物或D-2，5-二氢-苯基甘氨酸衍生物，如低级烷基(甲基、乙基、正丙基或异丙基)酯或在-CONH2基团上取代的酰胺。
相应的氨基β-内酰胺含有与所制备的β-内酰胺衍生物相同的β-内酰胺核。
一般地，本发明的方法的反应温度可以在0℃到35℃之间变化。最佳温度取决于在欧洲专利申请473008中提到的底物，在给出的比较实施例中没有最佳化。合适的pH值取决于底物的性质和浓度，典型地在5到9的范围内。为了方便操作，使用pH对照。合适的反应时间从若干分钟到若干小时，特别是从30分钟到3小时。
在涉及使用催化剂(例如酶)的商业方法中，在方法的总的经济学上催化剂的价格常常是一个重要的参数。在这样的情况下，催化剂能够再使用而不丧失催化活性是有利的。总之，具有以可再用形式的酶(例如，固定化的或截留形式的)是有利的。研究了以下固定化的大肠杆菌青霉素酰基转移酶：
A型：如国际专利申请WO 92/12782中所描述的方法分离大肠杆菌青霉素酰基转移酶。如欧洲专利申请222462中所描述的方法进行固定化。
B型：市售的来源于Recordati，意大利的固定化大肠杆菌青霉素G酰基转移酶，如欧洲专利申请473008中所描述的。
C型：市售的来源于Boehringer Mannheim GmbH，德国的固定化大肠杆菌青霉素G酰基转移酶，称为Enzygel。
合适的酶浓度可以从0.1U·ml-1到100U·ml-1(1U＝一个单位酶活性，参见以下)。使用按照本发明的方法，可以获得特别高的合成/水解比率。定义和分析方法酶活性
就青霉素G酰基转移酶活性的限定而言，使用了以下定义：一个单位(U)相当于在标准条件(100g.1-1青霉素G钾盐，0.05M磷酸钾缓冲液，pH8.0，28℃)下每分钟水解1μmole青霉素G的酶量。HPLC分析方法A(阿莫西林)
样品：用在2mM磷酸钾缓冲液(pH5)中的25％乙腈1∶10稀释
柱：Chromsphere C18，5μm(100×3.0mm)
溶剂：在包含0.2％十二烷基硫酸钠的12mM磷酸钾缓冲液(pH2.6)中的25％乙腈
流速：1ml·分钟-1
检测波长：214nm
保留时间：HPG(1.9分钟)；HPGA(3.1分钟)；6-APA(3.4分钟)；阿莫西林(4.8分钟)；HPGM(7.3分钟)方法B(头孢氨苄)
样品：用在2mM磷酸钾缓冲液中的25％乙腈(pH5)1∶10稀释
柱：Chromsphere C18，5μm(100×3.0mm)
溶剂：在包含0.2％十二烷基硫酸钠的12mM磷酸钾缓冲液(pH3.1)中的29％乙腈，
流速：1ml·分钟1
检测波长：214nm
保留时间：PG(0.8分钟)；7-ADCA(1.3分钟)；PGA(3.7分钟)；头孢氨苄(6，2分钟)；PGM(7.8分钟)方法C(头孢拉定)
样品：用在50mM磷酸缓冲液(pH3.0)中的3％1-丙醇1∶150稀释，
柱：Nucleosil 120 3 C18(250×4.0mm)
溶剂：洗脱液A：50mM磷酸缓冲液，pH3.0；洗脱液B：50％洗脱液A，50％乙腈梯度：0-5分钟：100％A；5-10分钟：从100％A到70％A；10-18分钟：70％A；18-18.1分钟：从70％A到100％A。
流速：1ml·分钟1
检测波长：220nm
保留时间：7-ADCA(5.3分钟)；DPG(6.0分钟)；DPGA(9.1分钟)；DPGM(15.9分钟)；头孢拉定(18.5分钟)方法D(头孢克洛)
样品：用在50mM磷酸缓冲液(pH3.0)中的3％1-丙醇1∶150稀释，
柱：Nucleosil 120 3 C18(250×4.0mm)
溶剂：洗脱液A：50mM磷酸缓冲液，pH3.0；洗脱液B：50％洗脱液A，50％乙腈梯度：0-5分钟：100％A；5-10分钟：从100％A到70％A；10-18分钟：70％A；18-18.1分钟：从70％A到100％A。
流速：1ml·分钟1
检测波长：220nm
保留时间：7-ACCA(3.2分钟)；PG(3.8分钟)；PGA(5.6分钟)；头孢克洛(14.9分钟)方法E(氨苄青霉素)
样品：用在3.4mM磷酸钾缓冲液(pH6.9)中的33％乙腈1∶200稀释
柱：Chromsphere C18，5μm(100×3.0mm)
溶剂：在包含0.1％十二烷基硫酸钠的5mM磷酸钾缓冲液(pH3.0)中的30％乙腈，
流速：1ml·分钟1
检测波长：214nm
保留时间：PG(1.0分钟)；6-APA(1.3分钟)；PGA(2.6分钟)；氨苄青霉素(4.5分钟)：PGM(5.8分钟)
实施例1采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从6-APA和HPGA合成阿莫西林
在21℃下，向含有10mM HPGA和30mM 6-APA的水溶液(50ml)中添加50U固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶。将pH调节至6.0，用0.05M硫酸水溶液控制pH值，使反应在氮气氛围下进行。在不同的时间间隔(参见下表)按照以上所述的方法A分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率。
时间(分钟) 5 10 15 20 25 30  60 90 120
S/H-比率 1.1 1.3 1.3 1.4 1.2 1.2 1.2 1.1 1.1
表1.1 采用A型酶合成阿莫西林
时间(分钟)   18   60   90   110   150   180
S/H-比率   0.6   0.7   0.7   0.7   0.6   0.5
表1.2 采用B型酶合成阿莫西林
时间(分钟)   18   30   60   90   120
S/H-比率   0.7   0.7   0.6   0.6   0.5
表1.3 采用C型酶合成阿莫西林实施例2采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从6-APA和HPMG合成阿莫西林
在21℃下，向含有10mM HPGM和30mM 6-APA的水溶液(50ml)中添加50U固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶。将pH调节至6.0，用0.05M硫酸水溶液控制pH值，使反应在氮气氛围下进行。在不同的时间间隔(参见下表)按照以上所述的方法A分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率。
时间(分钟)   10   20   40   60
 S/H-比率   1.6   1.4   1.3   1.2
表2.1 采用A型酶合成阿莫西林实施例3采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从7-ADCA和PGA合成头孢氨苄
在21℃下，向含有10mM PGA和30mM 7-ADCA的水溶液(50ml)中添加50U固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶。将pH调节至7.0，用0.05M硫酸水溶液控制pH值，使反应在氮气氛围下进行。在不同的时间间隔(参见下表)按照以上所述的方法B分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率。
时间(分钟)   5   10   20   30
S/H-比率   6.5   4.2   3.4   2.4
表3.1 采用A型酶合成头孢氨苄
时间(分钟)   5   10    20   30
S/R-比率   1.0   0.9    0.8   0.7
表3.2 采用B型酶合成头孢氨苄实施例4采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从7-ADCA和DPGM.HCl合成头孢拉定
向含有300mM DPGM·HCl和300mM 7-ADCA的水溶液(120ml)中添加固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶(单位在表中给出)。将pH调节至下表中给出的值，使反应在氮气氛围下进行。在不同的时间间隔按照以上所述的方法C分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率。
时间(分钟)     26     62     75     106     120
转化率(％)     40     63     63     58     54
S/H-比率     12     4.0     2.9     2.0     1.9
表4.1 采用A型酶(12U·ml-1)在pH7.5下合成头孢拉定
时间(分钟)     45     110     170     255
转化率(％)     33     49     51     68
S/H-比率     2.4     1.7     1.4     1.4
表4.1 采用B型酶(33U·ml-1)在pH7.0下合成头孢拉定实施例5采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从7-ACCA和PGA合成头孢克洛
向含有PGA和7-ACCA的水溶液(120ml)中添加固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶(浓度和酶单位在下表中给出)。将pH调节至7.7，用2.0M硫酸水溶液控制pH值，使反应进行。在不同的时间间隔(参见下表)按照以上所述的方法D分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率。
时间(分钟)     2     62     90
转化率(％)     3     58     66
S/H-比率     2.0     6.2     4.0
表5.1 采用A型酶(9U·ml-1)从PGA(0.5M)和7-ACCA(0.6M)合成头孢克洛
时间(分钟)     26     62     124     161     266
转化率(％)     25     40     50     55     58
S/H-比率     5.3     4.4     3.4     3.2     2.6
表5.2 采用B型酶(47U·ml-1)从PGA(0.6M)和7-ACCA(0.6M)合成头孢克洛实施例6采用固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶从6-APA和PGA合成氨苄青霉素
向含有500mM PGA和300mM 6-APA的水溶液(100ml)中添加100U固定化的大肠杆菌青霉素G酰基转移酶。将pH调节至7.5，用6.0M盐酸水溶液控制pH值，使反应进行。在不同的时间间隔(参见下表)按照以上所述的方法E分析各样品。从由此获得的结果计算合成/水解(S/H)摩尔比率，在下表中显示。
藻酸胺(％) 0       1.0  2.0       3.0
转化率(％) 5  5  10  5  5  10
时间(分钟) 115  54  116  151  68  135
S/H-比率 2.4  4.6  3.5  3.9  3.9  2.9
表6.1.1 采用A型酶合成氨苄青霉素(在使用聚合物藻酸胺时)
脱乙酰壳多糖(％)     0        1.0        1.5         2.0         2.5        3.0
转化率(％)     5     5    10     5     10     5     10     5    10     5    10
时间(分钟)     115     34    73     22     51     26     62     30    57     26    52
S/H-比率     2.4     2.5    2.6     2.4     2.4     2.1     2.1     2.5    2.0     3.4    3.4
表6.1.2 采用A型酶合成氨苄青霉素(在使用聚合物脱乙酰壳多糖时)
果胶(％)     0       2.0      3.0
转化率(％)     5     5     10     5     10
时间(分钟)     115     65     133     45     94
S/H-比率     2.4     2.4     1.9     3.5     2.7
表6.1.3 采用A型酶合成氨苄青霉素(在使用聚合物果胶时)
聚乙烯亚胺(％)     0          1.0          2.0          3.0
转化率(％)     5     5     10     5     10     5     10
时间(分钟)     115     64     132     49     100     43     93
S/H-比率     2.4     2.5     2.4     2.4     2.8     2.7     2.5
表6.1.4 采用A型酶合成氨苄青霉素(在使用聚合物聚乙烯亚胺时)
转化率(％)    5   10
时间(分钟)    43   92
S/H-比率    2.3   2.4
表6.2 采用B型酶合成氨苄青霉素
转化率(％)     5     10
时间(分钟)     33     69
S/H-比率     3.3     2.8
表6.3 采用C型酶合成氨苄青霉素

Claims (9)

1.在载体上固定化的青霉素G酰基转移酶，所说的载体包含胶凝剂和含有游离氨基基团的聚合物。
2.按照权利要求1的青霉素G酰基转移酶，其中所说的聚合物选自藻酸盐胺、脱乙酰壳多糖、果胶或聚乙烯酰胺。
3.按照权利要求1或2的青霉素G酰基转移酶，其中所说的胶凝剂是明胶。
4.按照以上任一权利要求的青霉素G酰基转移酶，其中所使用的酶来源于大肠杆菌(Escherichia coli)、巴氏醋杆菌(Acetobacterpasteurianum)、柑橘黄单胞菌(Xanthomonas citrii)、嗜柠檬酸克吕沃尔氏菌(Kluyvera citrophila)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)或粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)。
5.使用固定化酶通过母体氨基β-内酰胺和相应的酰化剂的酶促反应制备β-内酰胺衍生物的方法，其特征在于使用权利要求1-4之任一所限定的酶。
6.按照权利要求5的方法，其中所说的酰化剂选自D-苯基甘氨酸衍生物、D-对-羟苯基甘氨酸衍生物和D-2，5-二氢-苯基甘氨酸衍生物。
7.按照权利要求5或6的方法，其中形成的β-内酰胺衍生物选自氨苄青霉素、阿莫西林、头孢克洛、头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定和头孢罗齐。
8.按照权利要求5-7之任一的方法，其中所说的反应是在从约0到约35℃的温度范围内，优选地是在高于约10℃的温度下进行的。
9.按照权利要求5-8之任一的方法，其中所说的反应是在从约5到约9的pH值范围内进行的。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1109746C (zh) * 1998-11-10 2003-05-28 同济医科大学 一种固定化酶载体
CN1293200C (zh) * 2002-12-03 2007-01-03 罗姆两合公司 头孢氨苄的制备方法
CN102645503A (zh) * 2012-05-04 2012-08-22 联邦制药(内蒙古)有限公司 一种酶法制备阿莫西林中残留蛋白质的检测方法
CN103805672A (zh) * 2014-02-25 2014-05-21 华北制药集团先泰药业有限公司 一种酶法制备氨苄西林的工艺
CN110343734A (zh) * 2019-06-14 2019-10-18 浙江工业大学 一种l-草铵膦化学酶法生产方法

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998056944A1 (en) * 1997-06-10 1998-12-17 Dsm N.V. APPLICATION OF REDUCING SULPHUR COMPOUNDS DURING ENZYMATIC PREPARATION OF β-LACTAM COMPOUNDS
NL1009814C2 (nl) * 1998-08-06 2000-02-08 Dsm Nv Werkwijze voor de bereiding van een N-geacyleerd aminonitril.
ITMI20030042A1 (it) * 2003-01-14 2004-07-15 Univ Degli Studi Trieste Processo di sintesi enzimatica di antibiotici b lattamici.
WO2005003367A2 (en) * 2003-07-03 2005-01-13 Dsm Ip Assets B.V. Process for the preparation of cephradine
BRPI0621278A2 (pt) 2005-12-28 2011-12-06 Dsm Ip Assests Bv acilases mutantes
CZ300467B6 (cs) 2007-01-31 2009-05-27 Mikrobiologický ústav AV CR, v.v.i. Sekvence nukleotidu o velikosti 2646 bp, kódující penicilinacylázu, nové konstrukty rekombinantní nukleové kyseliny a rekombinantní mikroorganismy nesoucí tuto sekvenci
ES2365831T3 (es) * 2007-03-09 2011-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Proceso para preparar compuestos beta-lactámicos.
CN103642780B (zh) 2008-12-23 2017-06-20 中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司 突变体青霉素g酰基转移酶
WO2011073166A2 (en) 2009-12-14 2011-06-23 Dsm Ip Assets B.V. Production process for cephradine
WO2011113486A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Deretil, S.A. Process for the synthesis of hydroxyphenylglycine esters
CN103108879B (zh) 2010-09-07 2016-08-17 中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司 用于生产头孢菌素类的方法
EP2723882B1 (en) 2011-06-23 2019-05-01 Centrient Pharmaceuticals Netherlands B.V. Process for preparing 3'-thiosubstituted cephalosporins employing a penicillin g acylase
EP2723881A2 (en) 2011-06-23 2014-04-30 DSM Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. Novel crystalline cefoperazone intermediate
WO2013057197A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Dsm Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. Process for the formylation of cefamandole
WO2013057196A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Dsm Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. Process for the preparation of cefamandole nafate
WO2017186864A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Sandoz Ag Enzymatic process for the production of beta-lactam antibiotics in the presence of particulate inoculum

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL8301373A (nl) * 1983-04-19 1984-11-16 Tno Geimmobiliseerde biokatalysatoren.
GB2149816B (en) * 1983-11-14 1987-06-10 Kansai Paint Co Ltd Process for producing granular fixed enzymes or/microorganism strains
DK336987D0 (da) * 1987-07-01 1987-07-01 Novo Industri As Immobiliseringsmetode
PT83746B (pt) * 1985-11-15 1988-08-17 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos biocatalisadores imobilizados e para a producao de etanol por fermentacao
DK589389D0 (da) * 1989-11-23 1989-11-23 Novo Nordisk As Immobiliseret enzympraeparat
CZ148593A3 (en) * 1991-01-25 1994-01-19 Novo Nordisk As Process of separating a non-dissolved catalyst from one or a plurality of other non-dissolved components comprised in the same reaction mixture
PL170842B1 (pl) * 1991-12-19 1997-01-31 Gist Brocades Bv Sposób wytwarzania antybiotyków ß -laktamowych PL PL PL

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1109746C (zh) * 1998-11-10 2003-05-28 同济医科大学 一种固定化酶载体
CN1293200C (zh) * 2002-12-03 2007-01-03 罗姆两合公司 头孢氨苄的制备方法
CN102645503A (zh) * 2012-05-04 2012-08-22 联邦制药(内蒙古)有限公司 一种酶法制备阿莫西林中残留蛋白质的检测方法
CN102645503B (zh) * 2012-05-04 2014-04-02 联邦制药(内蒙古)有限公司 一种酶法制备阿莫西林中残留蛋白质的检测方法
CN103805672A (zh) * 2014-02-25 2014-05-21 华北制药集团先泰药业有限公司 一种酶法制备氨苄西林的工艺
CN103805672B (zh) * 2014-02-25 2016-05-25 华北制药集团先泰药业有限公司 一种酶法制备氨苄西林的工艺
CN110343734A (zh) * 2019-06-14 2019-10-18 浙江工业大学 一种l-草铵膦化学酶法生产方法
CN110343734B (zh) * 2019-06-14 2021-03-23 浙江工业大学 一种l-草铵膦化学酶法生产方法

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Publication number Publication date
MX9800406A (es) 1998-09-30
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