CN1187189A - 用于抑制g－蛋白功能和治疗增生性疾病的三环化合物 - Google Patents

Abstract

公开了具有通式(1.0)的新化合物。还公开了抑制Ras功能的方法,因此抑制细胞的不正常生长。该方法包括给生理体系服用通式(1.0)化合物。该方法特别抑制哺乳动物,例如人细胞的不正常生长。

Description

用于抑制G-蛋白功能和治 疗增生性疾病的三环化合物

背景

国际公开号WO 92/11034，1992年7月9日公开，发明了一种增加肿瘤对于抗肿瘤药物的敏感性的方法，该肿瘤对于抗肿瘤药物具有抗药性，即同时服用抗肿瘤药物和下述通式更增效药物：其中Y¹为H，取代的羧酸酯或取代的磺酰基，这类更有效的药物例子包括11-(4-亚哌啶基)-5H-苯并[5，6]环庚[1，2-b]吡啶，例如Loratadine。

为获得转移潜能，Ras瘤蛋白的前体必须经历位于四肽羧端的半胱氨酸残基的法尼化，因此，催化这种修饰的酶即法尼基蛋白转移酶的抑制剂表明对于Ras对转移有贡献的肿瘤是抗癌药物。在许多人类的癌症中经常发现Ras的致瘤形式，即突变，最明显的是在50％以上结肠和胰癌中经常发现(Kohl et al.，Science，Vol.260，1834 to 1837，1993)。

对于技术人员受欢迎的贡献是用于抑制法尼基蛋白转移酶的化合物。本发明提供了这一贡献。

发明概述

用本发明的三环化合物抑制法尼基蛋白转移酶早先未见报道。因此，本发明提供一种用本发明的三环化合物抑制法尼基蛋白转移酶的方法，其中：(i)体外，有效地抑制法尼基蛋白转移酶，而不抑制牻牛儿(geranylgeranyl)基蛋白转移酶I；(ii)阻断由于一种是法尼基接受体的转移Ras形态诱导的表型变化，而不阻断牻牛儿基接受体操纵的转移Ras形态诱导的表型变化；(iii)阻断为法尼基接受体的Ras细胞内过程，而不阻断牻牛儿基接受体操纵的转移Ras细胞内过程；和(iv)阻断培养中由于转移Ras诱导的细胞的不正常生长。

本发明提供了一种方法，通过服用有效量的本发明化合物抑制不正常的细胞生长，包括转移细胞。不正常的细胞生长是指不依赖正常调节机制的细胞生长(例如，丢失接触抑制)。这类不正常的细胞生长包括：(1)表达活化的Ras癌基因的肿瘤细胞(肿瘤)的不正常生长；(2)其中是别的基因中的癌基因突变造成Ras蛋白活化的肿瘤细胞的不正常生长；和(3)迷乱的Ras活化发生的其它增生疾病的良性和恶性细胞的不正常生长。

用于要求保护方法的化合物是用通式(1.0)表示的新化合物：

其中：

A和B独立选自H，卤素或C₁-C₆烷基；

Z为N或CH；

W为CH、CH₂、O或S，其中连到W的虚线代表当W为CH时存在的双键；

X为C、CH或N，其中X与三环系统连接的虚线代表当X为C时存在的双键；

R¹选自：

1)具有下述通式的基团：

或它们的二硫化物二聚体；

2)具有下述通式的基团：

3)具有下述通式的基团：其中W、A和B的定义如上所述。

4)具有下述通式的基团：5)具有下述通式的基团：其中R⁸⁰为选自H或-C(O)OR⁹⁰，其中R⁹⁰为C₁-C₆烷基(例如-C(CH₃)₃)，和R⁸⁵为C₁-C₆烷氧基(例如，p-OCH₃)；和

6)具有下述通式的基团：

其中：

(a)T选自：-SO₂-，或一根单键；

(b)x为0、1、2、3、4、5或6；

(c)每一个R^a和每一个R^b独立选自H、芳基、烷基、烷氧基、芳烷基、氨基、烷基氨基、杂环烷基、-COOR⁶⁰、-NH{C(O)}_zR⁶⁰(其中z为0或1)，或-(CH)_wS(O)_mR⁶⁰(其中w为0、1、2或3，和m为0、1或2)；或R^a和R^b一起代表环烷基，＝N-O-烷基，＝O或杂环烷基；条件是在同一个碳上，当R^b选自烷氧基、氨基、烷基氨基或-NH{C(O)}_zR⁶⁰时，R^a不选自烷氧基、氨基、烷基氨基或-NH{C(O)}_zR⁶⁰；并且当T为单键时，对于含R^a和R^b的第一个碳，条件是，R^a和R^b不选自烷氧基、烷氨基、氨基或-NHR⁶⁰(即，-NH{C(O)}_zR⁶⁰，其中z为0)(即当T为单键时，与T相连的第一个碳上的R^a和R^b不为烷氧基，烷氨基，氨基或-NHR⁶⁰)；和

(d)R⁹²可以代表H，烷基、芳基、芳氧基、芳硫基、芳烷氧基、芳烷基、杂芳基，或杂环烷基；

R⁶⁰代表H、烷基、芳基或芳烷基；

R⁴为H或C₁-C₆烷基；

R²选自H、-C(O)OR⁶、-C(O)NR⁶R⁷、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基，取代的(C₁-C₈)烷基，取代的(C₂-C₈)烯基，取代的(C₂-C₈)炔基，其中所述取代的基有一个或多个取代基，这些取代基选自：

1)芳基、芳烷基、杂芳烷基、杂芳基、杂环烷基、B-取代的芳基、B-取代的芳烷基、B-取代的杂芳烷基、B-取代的杂芳基或B-取代的杂环烷基，其中B选自C₁-C₄烷基，-C(CH)_nOR⁶、-(CH₂)_nNR⁶R⁷和卤素；

2)C₃-C₆环烷基；

3)-OR⁶；

4)-SH或-S(O)_tR⁶；

5)-NR⁶R⁷；

6)-N(R⁶)-C(O)R⁷；

7)-N(R⁶)-C(O)NR⁷R¹²；

8)-O-C(O)NR⁶R⁷；

9)-O-C(O)OR⁶；

10)-SO₂NR⁶R⁷；

11)-N(R⁶)-SO₂-R⁷；

12)-C(O)NR⁶R⁷；

13)-C(O)OR⁶；和条件是R¹为D时R²不为H，以及当R¹为D和R²为C₁-C₈烷基时，所述烷基上的取代基不为3)、4)、5)、9)或13)中的取代基；D为-C(O)-CH₂-R⁵、-C(O)-O-R⁵或-C(O)-NH-R⁵，其中R⁵为吡啶基，吡啶基N-氧化物，

或下述通式的哌啶基其中R¹¹代表H，C₁-C₆烷基，卤代烷基或-C(O)-R⁹，其中R⁹为C₁-C₆烷基，C₁-C₆烷氧基或-NH(R¹⁰)，其中R¹⁰为H或烷基，或-C(O)-R⁹基团代表天然存在的氨基酸的酰基；

R⁶、R⁷和R¹²独立选自H、C₁-C₄烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、芳基烷基(即，芳烷基)、杂芳基、杂芳烷基、杂环烷基、取代的(C₁-C₄)烷基、取代的(C₃-C₆)环烷基、取代的芳基、取代的芳烷基、取代的杂芳基、取代的杂芳烷基或取代的杂环烷基，其中所述取代的基团有一个或多个取代基(例如，1-3个取代基)选自：C₁-C₄烷氧基、芳烷基、杂芳烷基、-NO₂、C₃-C₁₀-烷氧烷氧基(例如，-O-(C₁-C₄)烷基-O-(C₁-C₄)烷基)、C₃-C₆环烷基(例如，环丙基或环己基)、芳基、-CN、硝基苯基、亚甲基二氧基苯基、杂芳基、杂环烷基、卤素、-OH、-C(O)R¹⁴、-C(O)NR⁶R⁷、-N(R⁶)C(O)R¹⁴、-S(O)_tR¹⁴(例如，-S-(C₁-C₄烷基)和-SO₂R¹⁴)或-NR⁹⁵R¹⁵；条件是所述的R⁶、R⁷或R¹²直接与杂原子连接时，R⁶、R⁷和R¹²不为-CH₂OH或-CH₂NR⁹⁵R¹⁵，进一步的条件是，对于基团4)和9)，R⁶不为H；对于基团6)，R⁷不为H；

当R⁶和R⁷连在同一个氮原子上时，R⁶和R⁷与和它们连接的氮原子一起随意形成5至7元杂环烷基环，该环随意含有O、NR⁶或S(O)_t，其中t为0、1或2；

当R⁷和R¹²连在同一个氮原子上时，R⁷和R¹²与和它们连接的氮原子一起随意形成5至7元杂环烷基环，该环随意含有O、NR⁶或S(O)_t，其中t为0、1或2；

R⁹⁵和R¹⁵独立地为H、C₁-C₄烷基或芳烷基；

R¹⁴为C₁-C₄烷基、芳基或芳烷基；

n＝0、1、2、3或4；和

t＝0、1或2；或药用可以接受的它们的盐。

本发明也提供一种通过给需要这种治疗的哺乳动物(例如，人类)服用有效量的这里描述的三环化合物而抑制肿瘤生长的方法。特别地，本发明提供一种通过服用有效量的上述化合物而抑制表达活化Ras癌基因的肿瘤生长的方法。可能抑制的肿瘤的例子包括但不限于，肺癌(例如，肺腺癌)，胰癌(例如，胰癌，例如，外分泌胰癌)，结肠癌(例如，结肠直肠癌，例如，结肠腺癌和结肠腺瘤)，骨髓性白血病(例如，急性髓性白血病(AML))，甲状腺滤泡癌，脊髓发育异常综合症(MDS)，膀胱癌和表皮癌。

可以相信，本发明还提供了一种抑制良性和恶性增生疾病的方法，其中由其它基因致癌突变造成的Ras蛋白混乱活化，-即Ras基因本身不通过突变为致癌形态而活化-所述的抑制通过给需要治疗的哺乳动物(例如，人类)服用有效量的这里描述的三环化合物完成。例如，良性增生疾病神经纤维瘤病，或由于酪氨酸激酶致癌基因的突变或过分表达而使Ras活化的肿瘤(例如，神经鞘，沉降红细胞，轴颊舌，lck和fyn)可以用这里描述的三环化合物抑制。

本发明的化合物抑制法尼基蛋白转移酶和癌基因蛋白Ras的法尼基化。本发明进一步提供了一种给哺乳动物特别是人类，服用有效量的上述的三环化合物，抑制Ras法尼基蛋白转移酶的方法。给病人服用本发明的化合物，抑制法尼基蛋白转移酶，对于治疗上述癌症是有用的。

在本发明的方法中有用的三环化合物抑制细胞不正常生长。不期望受理论束缚，可以相信这些化合物通过对G-蛋白功能的抑制而起作用，例如ras P²¹，通过阻断G-蛋白的异戊二烯化，因此，使它们用于治疗增生疾病，例如治疗肿瘤生长和癌。不期望受理论束缚，可以相信，这些化合物抑制Ras法尼基蛋白转移酶，因此显示对ras转移细胞的抗增生活性。本发明的描述

在这里引用的所有文献全部都被作为参考文献使用。

除另有说明，这里所用的术语的定义如下：

“MS”表示质谱；

“MH⁺”表示在质谱中分子离子加氢；

“Bu”表示丁基；

“Et”表示乙基；

“Tr”表示三苯甲游基，(即三苯甲基)；

“Me”表示甲基；

“Ph”表示苯基；

“BOC”表示叔丁氧羰基；

“FMOC”表示9-芴基甲氧羰基；

“烷基”(包括烷氧基、烷氨基和二烷基氨基的烷基部分)表示含1至20个碳原子的直链或支链碳链，优选为1至6个碳原子，所述的烷基是随意被1、2或3个独立选自下述基团取代的基团：羟基、烷氧基、卤素(例如，-CF₃)、氨基、烷氨基、二烷基氨基、N-酰基烷基氨基、N-烷基-N-酰基氨基，或-S(O)_m-烷基(其中m为0、1或2)，其中所述的随意基团的烷基部分定义如上。

“烯基”表示含有2至12个碳原子具有至少1个碳碳双键的直链和支链碳链，优选含2至6个碳原子，最好是3至6个碳原子；

“炔基”表示含有2至12个碳原子具有至少1个碳碳叁键的直链和支链碳链，优选2至6个碳原子；

“芳烷基”表示如上定义的烷基中烷基的1个或多个氢原子被1个或多个如下定义的芳基取代(例如，苄基和二苯甲基)；

“芳基”(包括芳氧基和芳烷基的芳基部分)表示含有6至15个碳原子，含至少1个芳环的单环、双环或三环的碳环，例如苯基、萘基、菲基、四氢萘基或茚基，碳环基团的所有可以被取代的碳原子部是可能连接的位置，所述的碳环基团可随意被1个或多个(优选1至3个)独立选自下述的基团取代：(1)卤素，(2)烷基(例如，C₁-C₆烷基)，(3)羟基，(4)烷氧基(例如，C₁-C₆烷氧基)，(5)-CN，(6)苯基，(7)苯氧基，(8)-CF₃，(9)氨基，(10)烷基氨基，(11)二烷基氨基，(12)芳基，(13)芳烷氧基，(14)芳氧基，(15)-S(O)_m-芳基(其中m为0、1或2)，(16)-COOR⁶⁰(R⁶⁰定义如上所述)，(17)-NO₂，或(18)取代的C₁-C₆烷基，其中所述的烷基被1、2或3个独立选自下述的基团取代：(a)氨基，(b)烷基氨基，(c)二烷基氨基，(d)芳基，(e)N-酰基烷基-氨基，(f)N-烷基-N-酰基氨基，(g)N-芳烷基-N-酰基氨基，(h)羟基，(i)烷氧基，(j)卤素(例如，CF₃)，或(k)杂环烷基，条件是若有2或多个羟基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基取代基在取代的C₁-C₆烷基上，那么这些取代基应取代在不同的碳原子上；另外，芳基可通过邻接的原子形成含有至多4个碳和/或杂原子的拼合环(例如，亚甲二氧基苯基、茚基、四氢萘基、二氢苯并呋喃基)；

“芳烷氧基”表示如上定义的芳烷基中的烷基通过氧原子与邻近结构位置的元素以共价键方式连接，例如，苄氧基；

“芳氧基”表示如上定义的芳基以共价键与邻近结构元素通过氧原子连接，例如，苯氧基；

“芳硫基”表示如上定义的芳基以共价键与邻近结构元素通过硫原子连接，例如，苯硫基；

“环烷基”表示饱和的或不饱和的含3至8个碳原子的非芳香碳环，优选含3至6个碳原子；

“卤素”表示氟、氯、溴和碘；

“杂环烷基”表示饱和的或不饱和的含3至15个碳原子、优选含4至6个碳原子的非芳香碳环，并含1至3个杂原子，杂原子选自O、S、-SO₂-或NR⁹⁵(适宜的杂环烷基包括四氢呋喃基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、二噁烷基、吗啉代、二氮杂-2，2，2-双环辛烷等)，其中环中任何适合于取代的碳和氮原子都可随意被1、2、3或多个独立选自下列的基团取代：C₁-C₆烷基、芳基、芳烷基、卤代烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-S(O)_m-芳基(其中m为0、1或2，芳基定义如上所述)，-C(O)R⁹(其中R⁹定义如上所述)或天然存在氨基酸的酰基；和

“杂芳基”(包括杂芳烷基的杂芳基部分)表示含2至14个碳原子，含1个或多个(优选1至3个)选自O、S或N杂原子的单环，双环或三环基团，所述杂原子插入碳环结构中并具有足够的离域π电子使其具有芳香性，例如三唑基、吡啶基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻吩基、噻唑基、吲哚基、1，5-二氮杂萘基，或吡啶N-氧化物，其中吡啶N-氧化物可以表示为：

环中所有适合于取代的碳和杂原子都可以作为可能连接的位置，所述的环基被1、2、3或多个独立选自下列的基团随意取代：卤素、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、羟基、烷氧基、苯氧基、-NO₂、-CF₃、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、和-COOR⁶⁰，其中R⁶⁰定义如上所述(例如苄基)。

如同这里所用的，术语“叔胺碱”意指DMAP，吡啶或三烷基胺，例如Et₃N或Hünigs碱；和

“氢化物还原剂”意指金属氢化物试剂，例如NaBH₄、Red-Al、DIBAL-H、L-Selectride、Vitride、LiBH₄、LiAlH₄、LiAl(OtBu)₃H、NaCNBH₃、DMAB、硼氢化锌、硼氢化钙、三乙酰氧基硼氢化钠，LiBH₄和ZnBr₂的组合或NaBH₄和LiCl的组合。

术语“天然存在的氨基酸酰基”意指通式-C(O)-R²⁹的基团，其中R²⁹为下述通式的基团：

其中R³⁰和R³¹为所述氨基酸的残基部分，例如，R³⁰和R³¹可独立选自H，烷基或M-取代的烷基，其中M为HO-、HS-、CH₃S-、-NH₂，苯基，对羟基苯基、咪唑基或吲哚基，这样一来，HO-C(O)-R²⁹为选自下列氨基酸的氨基酸：丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、苏氨酸、组氨酸、半胱氨酸或酪氨酸。

这里提到的下列溶剂和试剂用缩写表示：四氢呋喃(THF)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羟基苯并三氮唑(HOBT)；间-氯过苯甲酸(MCPBA)；三乙胺(Et₃N)；乙醚(Et₂O)；氯甲酸乙酯(ClCO₂Et)；1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(DEC)；N，N′-羰二咪唑(CDI)；1，8-二氮杂-双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)；〔O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基uronium六氟磷酸盐(HATU)；氟化四丁基铵(TBAF)；二环己基碳二亚胺(DCC)；N，N-二甲氨基吡啶(DMAP)；二异丙基乙胺(Hünigs碱)；〔2-(叔丁氧-羰氧亚氨基)-2-苯基乙腈〕(BOC-ON)；9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-Cl)；氢化双(2-甲氧乙氧基)铝钠(Red-Al)；氢化二异丁基-铝(DIBAL-H)；三仲丁基硼氢化锂(L-Selectride)；二氯甲烷(DCM)；二异丙基碳二亚胺(DIC)；和N，N-二甲基乙酰胺(DMA)。

划至环体系内的线表明指示的键可与任何可取代的环碳原子连接。

本发明的某些化合物可存在不同的异构体(例如，对映体，非对映体或几何异构体)形式。例如，通式(1.0)的化合物，其中X为CH或N，在分子的三环部分的C11可能有手性中心，C11可有S或R绝对构型，各种取代基，例如R¹、R²，也可含有手性中心。本发明预期所有这些异构体既可为纯的形式，又可为混合物，包括外消旋混合物。通式(1.0)的化合物的特殊情况，其中R²不为H，与所述的R²基团连接的碳原子可存在R或S构型。通式(1.0)的这些化合物一般只标示一种构型，本发明预期所有这些异构体既可为纯的形式，又可为混合物，包括外消旋混合物。还包括烯醇式，如同含有双键化合物一样，它们既可为E异构体，又可为Z异构体(例如，其中R²为烯基的化合物)。

一些三环化合物在自然界是酸性的，例如那些具有羧基或酚羟基的化合物。这些化合物可以形成药用可以接受的盐。这些盐的例子可包括钠盐、钾盐、钙盐、铝盐、金盐和银盐。还期望是药用可接受的胺形成的盐，这类胺如氨、烷基胺、羟基烷胺、N-甲基葡萄胺等。

一些碱性三环化合物也形成药用可以接受的盐，例如形成酸加合盐和季铵盐。例如，吡啶并-氮原子可与强酸成盐，而有碱性取代基的化合物，例如有氨基的化合物也与弱酸形成盐。形成盐的合适的酸的例子有：盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和其它矿物酸以及对于技术人员已知的羧酸。盐的制备是通过游离碱以常规方式与足够量的期望的酸接触产生盐。游离碱的形式可通过盐与合适的稀碱水溶液再生，例如用稀NaOH水溶液，稀K₂CO₃水溶液，稀氨水和稀NaHCO₃水溶液再生。虽然游离碱形式与它们各自的盐形式在某些物理性质上略有差异，例如在极性溶剂中的溶解性，但是就本发明的目标而言，酸和碱的盐与它们各自游离碱形式是等价的。

所有这些酸和碱盐成为药用可以接受的盐都在本发明的范围内，对本发明目标来说，所有酸和碱盐与相应化合物的游离形式等价。

那些技术人员懂得，若通式82.0中x大于1(例如为2、3、4、5或6)时，每个R^a和R^b，对于它们连接的碳，独立选择。因此，相邻碳上的每个R^a和R^b可以相同，也可以不同。

R¹的实例，其中R¹为通式(82.0)的基团，包括基团D的化合物，其中D为-C(O)-CH₂-R⁵，-C(O)-O-R⁵或-C(O)-NH-R⁵，其中R⁵为吡啶基，吡啶基N-氧化物或下述通式的哌啶基

其中R¹¹表示H、C₁-C₆烷基，卤代烷基或-C(O)-R⁹，其中R⁹为C₁-C₆烷基，C₁-C₆烷氧基或-NH(R¹⁰)，其中R¹⁰为H或烷基，或-C(O)-R⁹基团表示天然存在的氨基酸的酰基。

R¹取代基包括通式(82.0)那些取代基，其中：

(a)T选自-C(O)-、-SO₂，或-C(O)-C(O)-；

(b)x为0、1或2(例如，0或1)；

(c)R^a和R^b独立选自：(1)H；(2)NH{C(O)}_zR⁶⁰，其中z为0或1(例如，z为1)，和R⁶⁰为烷基(例如，甲基)；(3)-(CH)_wS(O)_mR⁶⁰，其中w为0、1、2或3(例如，w为0、1或2，例如w为2)，m为0、1或2(例如，0或2)，和R⁶⁰为烷基(例如，甲基)；(4)烷基(例如，甲基)；或(5)C₁-C₆烷氧基(例如，-OCH₃)；或R^a和R^b一起表示环烷基(例如，环戊基或环丙基)，或＝O；和

(d)R⁹²选自(1)H；(2)芳基(例如，苯基或萘基)；(3)取代的芳基，例如，具有独立选自下述取代基的芳基：(i)烷氧基(例如，-OCH₃)，(ii)二氧代亚甲基，(iii)芳烷氧基(例如，苄氧基)，(iv)芳氧基(例如，苯氧基-即C₆H₅O-)，(v)烷基(例如，-CH(CH₃)₂)，(vi)卤素(例如，Cl)，(vii)芳基(例如，苯基)或(viii)以下的杂环烷基环取代的烷基(4)芳烷基(例如，苄基和二苯甲基)；(5)芳氧基(例如，苯氧基)；(6)芳硫基(例如，C₆H₅S-)；(7)烷基(例如，甲基)；(8)杂芳基(例如，吡啶基N-氧化物，吲哚基、噻吩基、喹啉基、苯并噻吩基和吡啶基)；(9)取代的杂芳基，例如，含有独立选自下述取代基的杂芳基：(i)芳基(例如，苯基)，(ii)烷基(例如，甲基)；(iii)烷氧基(例如，甲氧基)，(iv)氨基(例如，-NH₂)，或(v)芳烷基(例如，苄基)；(10)取代的杂环烷基，例如，含有独立选自下述取代基的杂环烷基：(i)芳基(例如，苯基)或(ii)-S(O)_m-芳基，其中(例如，m为2，和芳基表示甲基取代的苯基)；或(11)取代的烷基，例如，含有独立选自-S(O)_m-烷基取代基的烷基，其中m为0、1或2(例如，-SO₂CH₃或-SCH₃取代的乙基)。

R⁹²的取代的芳基实例包括甲氧苯基，二甲氧苯基(即，(CH₃O)₂C₆H₄)，亚甲二氧基苯基，苄氧苯基，苯氧苯基(即，C₆H₅OC₆H₄)，C₆H₄CH(CH₃)₂，氯苯基，二氯苯基，和苯基苯基(即，联苯基，C₆H₅C₆H₄)。

R⁹²的取代的杂芳基实例包括苯基和甲基取代的噻唑，氨基取代的噻唑和氮上用苄基取代的吲哚。

R⁹²的取代的杂环烷基实例包括下面通式的取代基：

优选的R¹选自：(1)通式-C(O)-CH₂-R⁵的基团，其中R⁵为：(2)通式(82.0)的基团，其中T为-C(O)-，x为1或2，R⁹²为芳基或杂芳基。

R¹的实例，其中R¹为通式(82.0)的基团，还包括下述通式的基团：

R¹的实例，其中R¹为通式(82.0)的基团，还包括下述通式的基团：

R¹的实例还包括选自下述通式的基团：

R²基团的实例包括：(1)-C(O)NR⁶R⁷(例如见下面的通式84.0)。以及(2)取代的烷基，其中取代基为-C(O)NR⁶R⁷(例如，-CH₂C(O)NR⁶R⁷，例如，见下面的通式86.0)。R⁶和R⁷这些基团的实例包括：(1)H；(2)取代的烷基，例如，含有独立选自下述取代基的烷基：(i)-CN，(ii)环烷基(例如，环丙基和环己基)，(iii)烷氧基(例如，甲氧基)，(iv)-S-烷基(例如，-SCH₃)，(iv)芳基(例如，苯基和萘基)，(v)取代的芳基(例如，氯苯基，硝基苯基和甲氧苯基)，(vi)杂环烷基(例如，四氢呋喃基)，(vii)亚甲二氧基苯基，(viii)-O-烷基-O-烷基(例如，-O-(CH₂)₂OCH₃)；(3)烷基(例如，甲基，异丙基，-CH₂CH(CH₃)₂，和正丁基)，(4)环烷基(例如，环丙基)，(5)杂芳烷基(例如，-CH₂-吡啶基，-(CH₂)₃-咪唑基，-CH₂-噻吩基，和-CH₂-呋喃基)，和(6)芳烷基，其中所述的芳基被取代(例如，-(CH₂)₂C₆H₄OCH₃和-(CH₂)₂-C₆H₄(OCH₃)₂)。

上述R⁶和R⁷基团中取代的烷基例子包括：-(CH₂)₂CN，-CH₂-环丙基，-(CH₂)₂OCH₃，-(CH₂)₃OCH₃，-(CH₂)₂SCH₃，-CH₂CH(C₆H₅)₂，-(CH₂)₂C₆H₅，-(CH₂)₄C₆H₅，-CH₂C₆H₅，-CH₂-萘基，-(CH₂)₂C₆H₄Cl，-CH₂C₆H₄Cl，-CH₂-四氢呋喃基，-CH₂-环己基，-(CH₂)₃O(CH₂)₂OCH₃，(即-CH₂-亚甲二氧基苯基)，和-CH₂-硝基苯基。

优选的R²选自-C(O)NR⁶R⁷或-CH₂C(O)NR⁶R⁷，其中优选的R⁶和R⁷独立选自H，烷基，环烷基，杂芳烷基或杂芳基，最优选的R⁶和R⁷独立选自H，烷基，环烷基或杂芳烷基。

R²的实例包括具有下述通式的基团：

其中通式(84.0)和(86.0)中R⁶⁵独立选自：

R²基团的实例还包括：(1)烷基，(2)取代的烷基，例如具有独立选自下述基取代的烷基：(i)芳基，(ii)-OR⁶，(iii)-S(O)_tR⁶，和(iv)-N(R⁶)-C(O)R⁷；和(3)-C(O)OR⁶。这类R²基团的实例包括下述基团：CH₃(CH₂)₃-，C₆H₅CH₂-，CH₃O(CH₂)₂-，CH₃S(CH₂)₂-，CH₃O(CH₂)₃-，n-C₃H₇O(CH₂)₂-，CH₃CONH(CH₂)₄-，-CH₂OH，-C(O)OC₂H₅，

R²基团的实例还包括：

技术人员认识到，R¹的二硫化物二聚物可以用下述通式表示：

通式(1.0)的某些化合物包含巯基(即-CH₂SH)，该巯基可以反应形成二硫键，生成二聚化合物。这类二聚体的实例为通式(Ia)的二硫化物。所述的巯基还可以与象谷胱甘肽一类的其它硫-醇形成二硫化物。二硫化物包括但不限于通式(Ia)的二硫化物，既包括在本发明的范围之内也包括在通式(1.0)的结构中。

通式(1.0)的化合物通常按反应式I说明的方法，由通式(2.0)的胺制备。

                    反应式I

制备通式(1.0)的化合物时，其中R¹和与之连接的氮原子一起构成酰胺，例如其中R¹为-C(O)-CH₂-R⁵时，在偶联剂，例如DEC、CDI或DCC的存在下，胺(2.0)与通式R²⁰-C(O)-OH的羧酸反应，其中R²⁰-C(O)-为R¹。反应典型地在适宜的有机溶剂，例如DMF、THF或CH₂Cl₂中进行，反应温度为-10℃至100℃，优选为0℃至50℃，最好是在大约室温进行，若偶联试剂为DCC或DEC时，反应优选在HOBT和N-甲基吗啉存在下进行。

另外，胺(2.0)可与通式R¹-L的化合物反应，形成通式(1.0)的化合物，通式中的R¹定义同上，L为离去基团，例如为Cl、Br、I、-O-C(O)-R⁴⁰，其中R⁴⁰为C₁-C₆烷基或苯基，或通式-OSO₂-R²⁰的磺酸根基，其中R²⁰选自：C₁-C₆烷基，苯基，CF₃，对甲苯磺酰基和对溴苯基。反应在碱的存在下进行，优选的碱为叔胺碱，例如Et₃N，DMAP，吡啶或Hünigs碱。

如同反应式2中所说明的，制备通式(1.0)的化合物时，化合物中R¹和与之连接的氮原子一起构成胺，例如，R¹为下述通式的基团：

将胺(2.0)与通式R²¹-CHO的醛反应形成通式(3.0)的亚胺，醛中的R²¹选择时应使R¹对应于R²¹-CH₂-，例如为下述通式的醛，通式(3.0)中R²¹定义如上。这类醛中-NH₂和-SH基团通常被保护，例如分别保护成N-BOC和S-Tr基。亚胺(3.0)在适宜的反应条件下还原形成通式(1.0)的化合物，优选的还原用氢化物还原剂进行，例如用三乙酰氧基硼氢化钠或NaCNBH₃，反应优选在分子筛存在下。

                反应式2

当反应如上描述进行时，其中R¹包括化学反应性基团，例如氨硫醇基时，这类基团通常一定用适宜的保护基保护，这种保护基随后可以除去，完成通式(1.0)化合物的合成，例如，胺优选用BOC保护基保护，硫醇可以用三苯甲基(即三苯基甲基)保护基保护。然后脱保护，即除去保护基，通常在合成通式(1.0)这类化合物的最后一步进行。

制备通式(1.0)的化合物时，化合物中R¹为-C(O)-NH-R⁵，用技术人员已知的方法将通式(2.0)的化合物与通式R⁵-N＝C＝O的异氰酸酯反应，反应在适宜的溶剂中进行，例如在DMF，THF或CH₂Cl₂中进行。

另外，按反应式3说明的，胺(2.0)与光气反应形成通式(4.0)的氯甲酸酯中间体，氯甲酸酯(4.0)通常不分离，与通式R⁵-NH₂的胺反应，其中R⁵如上定义，形成通式(1.0)的化合物，其中R¹为-C(O)-NH-R⁵。

                    反应式3

通式(1.0)的化合物，其中R¹为-C(O)-O-R⁵可以通过通式(2.0)的化合物与通式R⁵-O-C(O)Cl的氯甲酸酯反应制备，其中R⁵的定义同上，反应在碱存在下例如在叔胺碱存在下进行，生成通式(1.0)的化合物。另外，通式(1.0)的化合物，其中R¹为-C(O)-O-R⁵，可以通过通式(4.0)的化合物与通式R⁵-OH的醇反应制备。

通式(1.0)的化合物用标准反应条件可以转变为通式(1.0)的其它化合物，例如，通式(1.0)的化合物，其中R²为-CO₂H，(即-C(O)OR⁶且R⁶为H)，可以用通式(1.0)的化合物的臭氧分解制备，其中R²为CH₂＝CH-，随后氧化得到的醛。

通式(1.0)的化合物，其中R²为-C(O)OR⁶，其中R⁶不为H，可以从通式(1.0)的化合物制备，其中R²为-CO₂H，先与SOCl₂或草酰氯反应，然后与通式R⁶OH的醇反应，其中R⁶如上定义。类似地，通式(1.0)的化合物，其中R²为-C(O)NR⁶R⁷，可以从其中R²为-CO₂H的通式(1.0)的化合物按基本相同的方法制备，不过用通式R⁶R⁷NH的胺代替醇R⁶OH。另外，通式(1.0)的化合物，其中R²为-C(O)NR⁶R⁷，可以用通式(1.0)、其中R²为-CO₂H的化合物与胺R⁶R⁷NH在偶联剂，例如DCC或DEC存在下反应制备。

用类似的方式，通式(1.0)的化合物，其中R²为被通式-C(O)OR⁶或-C(O)NR⁶R⁷基团取代的烷基，可以通过与上述方法大致相同的方法制备形成其中R²为-CO₂H，-C(O)OR⁶或-C(O)NR⁶R⁷的化合物，制备时用适当的烯基(即，通式-(CH₂)_p-CH＝CH₂基团，其中p为1、2、3、4等)，代替其中R²为CH₂＝CH-的通式(1.0)的化合物。

通式(1.0)的化合物，其中R²含有通式-S(O)_tR⁶的取代基，其中t＝1或2，可以通过通式(1.0)的类似化合物(其中R²含有通式-S(O)_tR⁶的取代基，其中t＝0)的氧化制备，用适当的氧化剂，例如用过酸，优选用MCPBA。

技术人员认识到，在一些实例中，例如在R¹为下述通式的基团的情况下

上述提到的转化可能需要在通式(1.0)导入R¹之前进行氧化。

用适当的手性原料可以制备通式(2.0)的胺的光学活性形式，或另一种方法用外消旋原料得到立体异构体化合物的混合物，然后拆分或用手性HPLC分离得到期待的化合物(2.0)。例如，化合物(2.0)和(2.10)为立体异构体的胺，可以用经典的拆分技术分离，用适宜的拆分试剂例如用手性酸分离。手性酸拆分试剂是技术人员已知的，包括例如D-或L-苹果酸，D-或L-酒石酸，二对甲苯酰基-D-酒石酸，二对甲苯酰基-L-酒石酸，二苯甲酰基-D-酒石酸和二苯甲酰基-L-酒石酸。另外，立体异构体的胺(2.0)和(2.10)可以用手性HPLC柱通过标准方法分离。

例如，在通式(2.0)和(2.10)的化合物情况中，其中X为N或CH，所述的化合物至少可以存在四个立体异构体，即通式(2.20)、(2.21)、(2.22)和(2.23)的化合物。

非对映异构体，例如化合物(2.20)和(2.22)，或(2.21)和(2.23)用方便的方法经典地分离，例如用色谱方法分离。

对映体例如化合物(2.20)和(2.21)，或(2.22)和(2.23)的分离需要用拆分方法。

通式(2.1)的胺，即通式(2.0)的胺(其中X为N)的制备是通过反应式4说明的方法，用通式(5.0)的哌嗪衍生物(其中R²的定义如上所述)和通式(6.0)的化合物(其中L为如上定义的离去基，A、B、W和Z的定义同上)来制备。

                    反应式4

在反应式4的方法中，在碱，例如叔胺碱的存在下，哌嗪(5.0)与化合物(6.0)反应形成通式(7.0)的化合物。化合物(7.0)用适宜的酸，例如TFA，HCl或H₂SO₄，在象二氧六环或CH₂Cl₂一类的溶剂中水解，得到胺(2.1)。

通式(2.2)的胺，即其中X为C或CH的通式(2.0)的胺的制备可以用通式(8.0)的氨基甲酸酯化合物水解来进行，其中R²²为C₁-C₆烷基，优选为乙基或叔丁基，R²、A、B、W和Z定义同上。水解用适当的酸，例如用HCl，在象二氧六环溶剂中进行。

通式(2.3)的胺，即通式(2.0)的胺(其中X为CH)的制备是通过通式(2.4)，即通式(2.0)的胺(其中X为C)的胺还原进行。还原典型地用适当的还原剂，例如DIBAL-H或LiAlH₄，在象THF或甲苯溶剂中进行，优选的反应温度为30℃至100℃。

用通式(9.0)的N-甲基化合物，其中X为C或CH、A、B、W和Z定义同上，与通式R²²OC(O)Cl的氯甲酸烷基酯，其中R²²为C₁-C₆烷基，优选乙基，反应可以制备通式(8.0)氨基甲酸酯，制备时采用与U.S.专利4,282,233和4,335,036描述的基本相同的方法。

通过U.S.专利3,326,924公开的方法和PCT国际公开号WO/92/20681和WO 93/02081公开的方法通常可以制备通式(9.1)的化合物，即通式(9.0)的化合物，其中X为C。

按反应式5说明的方法，用通式(12.0)的格氏试剂和通式(14.0)的酮，其中A、B、W和Z定义同上，可以制备通式(9.1)的化合物。

                    反应式5

在反应式5的方法中，格氏试剂(12.0)与酮(14.0)反应形成通式(15.0)的化合物。反应通常在无水条件下，在惰性溶剂，例如THF，乙醚或甲苯中，在0℃至75℃下完成，得到的中间体水解，典型地用酸水溶液，例如HCl水溶液水解，得到醇(15.0)。另外，其它有机金属试剂可以用来代替格氏试剂，例如，有机锂试剂(即通式(12.0)的化合物，其中MgX¹用Li代替)。

通式(15.0)化合物脱水，例如，与酸，例如与H₂SO₄，反应形成通式(9.1)的化合物。

通式(1.40)的酮是已知的或可用J.Med.Chem.4238(1992)，U.S.专利5,089,496和在PCT国际公开号WO 92/20681和WO 93/02081中描述的方法制备。例如，通式(11.0)如下定义的腈分子内环化，用强酸，例如用CF₃SO₃H，温度在-15℃至100℃，形成亚胺中间体，该中间体再用水或酸水溶液水解形成酮(14.0)。

另外，通式(16.0)的酰氯的分子内Friedel-Crafts酰化也可以得到需要的通式(14.0)的酮。反应在通常的Friedel-Crafts条件下，在惰性溶剂中，在Lewis酸例如在AlCl₃的存在下进行。

通式(14.3)的酮化合物，即通式(14.0)的化合物，其中W为CH₂，与SeO₂在乙酸中加热可以制备通式(14.1)的酮，即通式(14.0)的化合物，其中W为CH。

通式(11.0)的化合物经典地与酸水溶液(例如，HCl水溶液)加热水解成相应的羧酸，按照技术人员已知的方法，在标准条件下(例如，与SOCl₂或草酰氯反应)，将酸转变成(16.0)的酰氯，得到通式(16.0)的酰氯。

通式(11.1)的化合物，即通式(11.0)的化合物，其中W为CH₂，或为已知化合物或用反应式6说明的方法通常可以制备。根据反应式6的方法，通式(17.0)的化合物(其中A如上定义)的叔丁醇溶液在浓H₂SO₄的存在下加热形成通式(18.0)的叔丁酰胺。叔丁酰胺(18.0)与烷基锂试剂反应，例如与正丁基锂反应，反应温度为-100℃至0℃，优选为-60℃至-20℃，然后与NaBr和通式(19.0)的卤化苄反应，其中X¹为Cl、Br或I，B的定义同上，形成通式(41.0)的化合物。化合物(41.0)在适当的溶剂，例如在甲苯，在30°至120℃，优选回流下与PDCl₃反应形成化合物(11.1)。

                    反应式6

通式(9.1)的化合物还可以用通式(10.0)的酮(其中R²、A、B、Z和W定义同上)环化制备。通过化合物(10.0)与超酸，例如HF/BF₃，CF₃SO₃H或CH₃SO₃H/BF₃反应进行环化。反应不需溶剂或在适当的惰性溶剂，例如在CH₂Cl₂的存在下完成。若HF/BF₃用于环化反应，反应通常在-60°至10℃，优选在-50°至5℃进行，反应时间控制在使HF与产物(9.1)反应引起最小副反应为宜。若用的超酸是CF₃SO₃H，反应经典地在25°至150℃，优选在40°至120℃进行。通常用过量的超酸，通常用1.5当量至30当量超酸。

通式(11.0)的化合物，其中A、B、Z和W定义同上，与通式(12.0)的格氏试剂，其中X¹为Cl，Br或I，R²的定义同上，进行反应可以制备通式(10.0)的化合物。反应通常在无水条件下，在惰性溶剂，例如在THF，乙醚或甲苯中，在0°至75℃的温度下进行，得到的中间体水解，经典地用酸水溶液水解，例如用HCl水溶液水解，形成酮(10.0)。另外，其它有机金属试剂例如有机锂试剂可以代替格氏试剂。

格氏试剂(12.0)可以从相应的卤素化合物(13.0)，其中X¹为Cl，Br或I，R²定义同上，用金属Mg按照技术人员已知的方法制备。类似地，有机锂化合物类似物可以从卤化物(13.0)按照标准方法，例如按照金属交换反应，用烷基锂化合物，例如用叔丁基锂制备。

按照反应式7说明的方法，可以制备通式(2.5)的胺，其中X²为Br或I，即通式(2.0)的胺，其中A为Br或I，X为CH或C。

                    反应式7步骤A：

步骤B：步骤C：步骤D：

在反应式7的步骤A中，通式(8.1)的化合物，即通式(8.0)的化合物，其中A为H，与硝酸四烷基铵(例如与硝酸四丁基铵)和TFAA反应，反应在适当的溶剂中，例如在CH₂Cl₂中，在-30°至20℃，优选在大约0℃下进行，形成通式(20.0)的化合物、其中R²²、B、W、Z和R²定义同上。

步骤B中，化合物(20.0)与适当的还原剂，例如与Fe和CaCl₂的组合，在极性溶剂中，例如在C₁-C₄醇中，优选在乙酸中，在40℃至100℃温度共热，优选在50°至80℃共热，形成通式(21.0)的化合物，其中R²²、B、W、Z和R²定义同上。

步骤C中，化合物(21.0)转变为卤化物(8.2)，其中X²为Br或I，R²²、B、W、Z和R²定义同上。制备通式(8.2)的化合物，其中X²为Br，是用化合物(21.0)与Br₂和HBr反应，反应温度为-30℃至15℃，优选为-10℃至10℃，形成溴化物(即化合物(8.2)，其中X²为Br)。制备通式(8.2)的化合物，其中X²为I，化合物(21.0)与I₂在适当溶剂中反应，例如在苯中反应，反应温度为30°至100℃，优选为50°至70℃，形成碘化物(即化合物(8.2)，其中X²为I)。

步骤D中，按照与上面描述的制备化合物(8.0)和(7.0)基本相同的方法，胺(8.2)水解得到通式(2.5)的胺。

用反应式8说明的方法，从通式(14.0)的酮可以制备通式(6.0)的化合物。

                    反应式8

在反应式8的方法中，酮(14.0)还原成醇(22.0)，用氢化物作还原剂，优选用LiAlH₄，NaBH₄，LiBH₄或NaCNBH₃，反应在适当的溶剂例如在THF，Et₂O，或C₁-C₄的醇中进行，反应温度为-80°至80℃，优选为-40℃至60℃，选择使用的温度和溶剂时应根据使用的具体的还原剂而定。通常，硼氢化物，例如NaBH₄和NaCNBH₃应与醇溶剂及0℃至50℃配套，而更活泼的氢化铝例如LiAlH₄，应与THF或乙醚一类的溶剂及-40℃至60℃温度一起使用。

醇(22.0)转变为通式(6.0)的化合物。制备通式(6.0)的化合物(其中L为卤素)时，醇(22.0)与卤化试剂反应，例如与PCl₃、PCl₅、POCl₃、SOCl₂、SOBr₂、I₂、PBr₃、PBr₅反应，或与Ph₃P和I₂或和Br₂组合反应。制备通式(6.0)的化合物(其中L为通式-OC(O)-R⁴⁰或-OS(O)₂R²²的基团时，醇(22.0)分别与通式R⁴⁰C(O)Cl的酰氯或通式R⁴⁰C(0)OC(O)R⁴⁰的酸酐反应，或与通式R²²S(O)₂Cl的磺酰氯反应。反应在碱的存在下进行，优选在叔胺碱存在下进行。

通式(5.0)的化合物可以按照PCT国际公开号WO 95/00497中描述的基本相同的方法制备。

反应式12描述了2-取代的哌嗪的合成，其中R²为H，烷基、烯基或炔基；还描述了2-取代的哌嗪的合成，其中R²为烷基，烯基或炔基，它们被定义同上的取代基1)、2)、3)、5)、6)和4)取代，其中t＝0，不过R⁶和R⁷不可以是被-C(O)R¹⁴或-SO₂R¹⁴取代的基团。

                    反应式12

反应式12中，BOC-保护的氨基酸(32.0)原料或为市场上可以购到，或可以用技术人员已知的方法制备。氨基酸(32.0)可偶联到N-苄基甘氨酸乙酯，使用的偶联剂为例如DCC或DEC，偶联反应在适当的溶剂中(例如，DMF，CHCl₃或CH₂Cl₂)进行，生成通式(33.0)的化合物。通常，该反应在0°至35℃进行，优选在大约25℃进行。

BOC保护的化合物(33.0)按照标准方法水解，例如与酸反应，优选与TFA或HCl反应，在适当的溶剂中，例如CHCl₃或二氧六环，在0°至50℃优选在大约25℃反应，并且脱保护的二肽通过与碱反应环化，产生通式(34.0)的化合物。

化合物(34.0)用氢化物还原剂还原，优选用LiAlH₄，在乙醚或THF中回流，得到通式(35.0)的哌嗪。哌嗪(35.0)用技术人员已知的方法用BOC基团保护，得到通式(36.0)的化合物。

化合物(36.0)的N-苄基基团用催化氢化反应脱除(例如，用Pd/C和氢气，在1至10psi压力下，优选在大约60psi脱保护，得到通式(5.0)的化合物)。

通式(5.0)的化合物，其中R²代表被取代基1)、3)、5)或4)取代的其中t＝0，烷基，烯基或炔基，其中R⁶或R⁷为被-C(O)R¹⁴或-S(O)₂R¹⁴取代，可根据反应式13说明的方法制备。通式5.0的化合物也根据反应式2的方法制备，其中R²表示被定义同上的基团6)、7)、8)、9)、10)、11)、12)、13)或4)取代的-C(O)NR⁶R⁷或-C(O)OR⁶，或其中R²表示烷基，烯基或炔基，其中t＝1或2。反                   反应式13

  在反应式13中，作原料的通式(37.0)的氨基酸可从商业买到，或用技术人员已知的方法制得，其中R²⁷为被-OH基团或-COOH基团(或它的相应酯)取代的烷基，烯基或炔基。根据反应式12的前4步描述的方法，化合物(37.0)进行反应，产生通式(40.0)的化合物，其中R²⁸为羟基取代的烷基，烯基或炔基。

然后化合物(40.0)用BOC基团保护，然后根据反应式12步骤5和6描述的方法脱苄基化，产生通式(5.10)的化合物，即通式(5.0)的化合物，其中R²为羟基取代的烷基，烯基或炔基。

通式(5.10)的化合物，其中R²⁸为-CH₂OH，可被氧化，产生相应的羧基，即其中R²为-COOH。然后该羧基可用技术人员已知的方法酯化产生其中R²为-C(O)OR⁶的化合物，或转变为酰胺，产生其中R²为-C(O)NR⁶R⁷的化合物。

通式(5.10)的化合物的R²⁸的羟基可用技术人员已知的技术转变为离去基，例如转变为氯，甲磺酰基氧基或甲苯磺酰基氧基。然后离去基团可以被各种亲核试剂代替，产生通式(5.0)的其它化合物。例如与有机金属试剂反应产生其中R²被取代基1)取代的化合物；与硫醇反应产生其中R²为被取代基4)取代的化合物，其中t＝0；与亚磺酰试剂反应产生其中R²为被取代基4)取代的化合物，其中t＝1；与亚磺酰试剂反应产生其中R²为被取代基4)取代的化合物，其中t＝2，或生成被取代10)取代的化合物；与胺反应产生其中R²为被取代基5)取代的化合物；或与醇反应产生其中R²为被取代基3)取代的化合物。化合物(5.10)的R²⁸中的羟基还可以被：酰化，例如，与适宜的氯甲酸酯化合物反应，产生化合物(5.0)，其中R²分别被取代基8)或9)取代；或烷基化产生化合物(5.0)，其中R²被3)取代。若R²⁸为多于1个碳原子的烷基或烯基或炔基时，羟基可以被氧化，如上讨论的，产生相应的羧基(即取代基13)，其中R⁶为H。该羧基可以被酯化，产生其中取代基13)为-C(O)OR⁶，其中R⁶不为H的化合物或用技术人员已知的方法，转变为酰胺产生被12)取代基取代的R²。若离去基被如上描述的胺(例如，HNR⁶R⁷)取代，产生取代基5)，对于那些其中R⁶或R⁷中至少1个是H的取代基，得到的胺取代基5)随后可用技术人员已知的方法，分别与酰基卤化物，氨基甲酰基卤化物或磺酰基卤化物反应转变为被6)、7)或11)取代的R²。

通式(5.1)的化合物(即通式(5.0)的外消旋化合物，其中R²为-C(O)NR⁶R⁷)，可以按照反应式9说明的方法，从2-哌嗪羧酸制备。

                反应式9

在反应式9的方法中，2-哌嗪羧酸与FMOC-Cl反应，反应在氢氧化物碱存在下，优选在NaOH或KOH存在下，在适宜的溶剂中，例如在二氧六环和水的混合物中进行，然后在大致相同的条件下与BOC-ON反应形成不同的保护化合物(23.0)。

化合物(23.0)与通式R⁶R⁷NH的胺反应，其中R⁶和R⁷定义同上，反应在DEC或DCC存在下，在适宜的溶剂中，例如在DMF或CH₂Cl₂中进行。

化合物(24.0)与TBAF或哌啶反应选择性地脱保护，反应在适宜溶剂，例如在DMF中进行，形成通式(5.1)的化合物。

通式(5.2)的化合物，其中E为-OR⁶或-NR⁶R⁷，(即通式(5.0)的外消旋化合物，其中R²为被通式-C(O)OR⁶或-C(O)NR⁶R⁷取代的甲基)，可以按照反应式10说明的方法制备。

                    反应式10

在反应式10的方法中，N，N′-二苄基亚乙基二胺与4-溴丁烯酸甲酯和叔胺碱，例如Et₃N，在适宜溶剂例如在甲苯中反应，形成N，N′-二苄基哌嗪衍生物(25.0)。

化合物(25.0)用催化剂，例如Pd/C，氢化形成哌嗪衍生物(26.0)。然后化合物(26.0)的4-氨基用适宜的氨保护基保护，例如用BOC基保护形成化合物(27.0)。

化合物(27.0)用氢氧化物碱，例如用NaOH或KOH，水解，游离的氨基用FMOC-Cl保护成FMOC衍生物，形成化合物(28.0)。

化合物(28.0)与通式R⁶R⁷NH的胺反应，用偶联试剂，例如DEC，在适宜的溶剂中，例如在CH₂Cl₂。或DMF中反应，然后用TBAF的DMF溶液脱保护，形成通式(5.2)的化合物，其中E为-NR⁶R⁷。另外，化合物(28.0)与氟化氰脲在叔胺碱的存在下反应被酯化，形成酰氟化物，酰氟化物与通式R⁶OH的醇反应，然后在DMF中与TBAF或哌啶反应脱保护，形成通式(5.2)的化合物，其中E为-OR⁶。

通式(13.0)的卤化合物可按照反应式11说明的方法制备为外消旋体(13.1)，(其中X和R²定义同上，其中R²为被选自6)、7)、8)、9)、10)、11)、12)、13)或4)取代基取代的烷基、烯基或炔基，其中t＝1或2的化合物除外)。

                    反应式11

在反应式11的方法中，4-甲氧吡啶与通式R²MgX¹的格氏试剂反应，其中R²和X¹定义同上，或另与通式R²Li的有机锂化合物反应，其中R²定义同上，以及与通式R²⁵OC(O)Cl的氯甲酸酯反应，其中R²⁵为苯基或苄基，形成通式(29.0)的化合物，其中R²和R²⁵定义同上。反应按照与Comins，et al.，Tet.Lett.，27.(38)4549-4552(1986)描述的大体相同的方法进行。

化合物(29.0)转变为通式(30.0)的化合物。对于其中R²⁵为苄基的通式(29.0)的化合物这一转变包括用适当的催化剂(例如Pd/C)进行化合物(29.0)的氢化，随后用适当的甲基化试剂，例如碘甲烷在碱的存在下，例如在NaH存在下进行甲基化，形成化合物(30.0)。通式(29.0)的化合物，其中R²⁵为苯基，或用酸水溶液，或用碱水溶液进行苯基氨基甲酸酯的水解，转变形成游离胺，将其用碘甲烷和NaH甲基化，然后还原，例如用适宜的催化剂，例如Pd/C氢化还原，形成化合物(30.0)。

化合物(30.0)用氢化物还原剂还原，例如用NaBH₄或NaCNBH₃还原，形成醇(31.0)。醇(31.0)然后与卤化剂反应转变为卤化物，卤化剂有：PCl₃、PCl₅、POCl₃、SOCl₂、SOBr₂、I₂、PBr₃、PBr₅，或Ph₃P和I₂或Br₂。

按照如上描述的制备通式(13.1)的化合物大体相同的方法在适宜的步骤拆分中间体便可以制备通式(13.0)的光学活性化合物。例如，用适宜的拆分试剂，例如手性酸，拆分通式(30.0)的化合物将得到通式(31.1)和(31.2)的化合物，其中R²定义同上。然后化合物(31.1)通过反应式11的剩余步骤进行反应形成通式(13.0)的化合物。

通式(17.0)和(19.0)的化合物是技术人员已知的或可以很容易地用标准方法制备。

反应式14中说明的是制备通式(1.1)的化合物，即其中X为N的通式(1.0)的化合物的另一种方法。

                    反应式14

在反应式14中，通式(6.0)的化合物与通式(42.0)的化合物(其中R¹和R²的定义同上面所述的化合物(1.0)中的定义)反应，反应在适宜的溶剂中，例如在THF中在碱的存在下，例如在叔胺碱或DBU中，优选在DBU中进行形成通式(1.1)的化合物。

                    反应式15

在反应式15中，化合物(45.0)，其中R²定义同上述化合物(1.0)中的定义，例如与TBAF或哌啶在适宜的溶剂，例如DMF中反应，选择性地脱去FMOC保护基形成通式(44.0)的化合物，然后按照将通式(2.0)的化合物转变为通式(1.0)的化合物大体相同的方法，转变为通式(43.0)的化合物。然后，化合物(43.0)脱保护，例如与酸反应，例如与TFA在适宜的溶剂中例如在CH₂Cl₂中反应形成通式(42.0)的化合物。

通式(45.0)的化合物可以按照上述描述的制备通式(24.0)，(28.0)的化合物大体相同的方法制备，即变换应用BOC和FMOC保护基的次序，或者用那些上面描述的制备通式(5.0)的化合物类似的方法，必要时另外再加保护/脱保护步骤。

通式(1.0)的化合物的编码组合库，其中X为N，R²有适合的功能基，可以用WO 94/08051(1994年4月14日公开)描述的固相的组合化学方法制备，而且可以用下面的反应式16描述的方法制备。

                    反应式16

在反应式16中，选用的树脂，例如(树脂)-F，含有功能基，(-F)，可以偶联，或与适合的连接物(A-L-B)形成共价键。合适的功能基(-F)包括一级和二级胺基，羟基、硫醇基，羧酸基，卤化物等等。连接物(A-L-B)可以是任何具有(a)互补性功能基“A”(例如胺基，羟基，硫醇基，羧酸基，卤化物等等)的化合物，该互补性功能基可以偶联，或与(树脂)-F形成共价键；(b)具有功能基“-B”(例如，羟基，一级或二级胺基，硫醇基，羧酸基等等)该B功能基能够与取代的N-保护的哌嗪(51.0)的R²中的适宜功能基例如与R²中的酰胺或羧酸基形成共价键；(c)有机或无机“L”基团，能够与功能基“A”和“B”连接。代表性的连接物包括，但不限于，4-(溴甲基)-3-硝基苯甲酸和4-(羟甲基)苯酚。在适宜的溶剂(例如DCM或甲醇)中，随意在地适合于特殊偶联反应的催化剂存在下连接物可以偶联到(树脂)-F上。

化合物的保护和脱保护的试剂和反应条件是已知的，如在T.W.Greene and P.Wuts.Protective Groups in Organic Synthesis2nd Ed，Wiley Interscience，N.Y.1991，473页中所描述的。在它的R²基团中除有适宜的功能基外，哌嗪(51.0)有保护基，P¹和P²之间以及与连接物之间互相正交。合适的保护基包括，但不限于，BOC、FMOC、CBZ，烷氧羰基(ALLOC)、苄基、邻硝基苯基等等。树脂/连接物(50.0)在适宜的溶剂中可以偶联到N-保护哌嗪(51.0)上，对于具体的偶联反应，选择在随意有合适的催化剂存在下，得到偶联的哌嗪(52.0)。基团中的“^”，例如R²^，F^和L^表明在此基团中至少有1个功能基共价连到其它功能基上。

保护基P¹用合适的脱保护剂或方法可以除去，包括用但不限于用TFA，哌啶，氢解，光解等等，得到部分脱保护的哌嗪(53.0)。哌嗪(53.0)然后再与化合物R¹Y¹反应，其中R¹定义与前面相同，Y¹为合适的离去基团，反应在适宜的溶剂中，任选地在适宜于具体反应的催化剂存在下进行，得到部分保护的哌嗪(54.0)。化合物(54.0)可以按如上描述脱保护，得到脱保护的化合物(55.0)。化合物(55.0)可用化合物(56.0)烷基化，其中A、B、W和Z定义同通式1.0中的定义，Y²为合适的离去基，得到化合物(57.0)。

化合物(1.1)可以用合适于具体键偶联的试剂和方法切断在连接物和R²^间的偶联，例如用光解，酸解，水解等等来制备。

在上面的方法中，在反应时有时需要和/或必要地保护某些R¹和R²基。在Greene，T.W.，“Protective Groups in Organic Synthesis，”JohnWiley & Sons，New York，1981，中描述的常规的保护基是合用的。例如，见列在WO 95/10516(1995年4月20日公开)的表1、60页中的基团。

用于本发明的化合物可以用在WO 95/10516中公开的方法制备，也可以用下面的实施例描述的方法制备。下面的制备实施例不应解释为限制本发明的范围。对于技术人员来说，很明显，还有其它的机理途径和类似的结构包含在本发明范围内。

                制备实施例1步骤A

6g(15.11mmol)WO 95/10516的制备实施例的标题化合物和苯合并，加2.3g(9.06mmol)的碘。混合物加热回流3小时，冷却，然后用50ml CH₂Cl₂稀释。用5％NaHSO₃水溶液(3×80ml)洗涤有机相，然后用1M NaOH水溶液(2×80ml)洗涤，MgSO₄干燥。浓缩的残留物用色谱纯化(硅胶，30％乙酸乙酯/己烷)得到3.2g(42％收率)的碘化合物产物。MS，MH⁺＝509。步骤B

步骤A的产物按照WO 95/10516步骤A实施例358描述的大体相同的方法水解，得到碘胺产物，收率89％。

                制备实施例2

WO 95/10516步骤C的制备实施例47的产物(2.42g)按照WO95/10516步骤A的制备实施例358描述的大体相同的方法水解得到1.39g(69％收率)的溴胺产物。

                制备实施例3步骤A

82.0g(0.26mol)WO 95/10516步骤G的制备实施例1的产物和1L甲苯合并，然后加入20.06g(0.53mol)的LiAlH₄，反应混合物加热回流过夜。冷却混合物到室温，加入约1L乙醚。随后滴加饱和的Na₂SO₄(水溶液)，直到沉淀形成。过滤，在MgSO₄中搅拌滤液30分钟，然后在真空下浓缩，得到产物化合物，收率83％。质谱：MH⁺＝313。

                制备实施例4步骤A：

制备实施例3步骤A的产物24.32g(74.9mmol)，500ml甲苯、83ml Et₃N和65.9ml的氯甲酸乙酯合并，加热混合物至回流过夜。冷至25℃，倾到200ml水中，用乙酸乙酯萃取。MgSO₄干燥萃取液，真空下浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，50％乙酸乙酯/己烷)，得到1.5g产物化合物。MS：MH⁺＝385。步骤B：3.2g(10.51mmol)的硝酸四正丁铵溶解在25ml CH₂Cl₂中，加入2.2g(10.51mmol，1.5ml)TFAA。冷至0℃，0℃下将混合物通过导管加到3.68g(9.56mmol)的步骤A产物与50ml CH₂Cl₂的溶液中，然后在0℃下搅拌3小时。混合物回温至25℃，同时搅拌过夜，然后用饱和NaHCO₃水溶液萃取，MgSO₄干燥。真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，30％乙酸乙酯/己烷)得到1.2g产物化合物。MS：MH⁺＝430。步骤C：

2.0g(4.7mmol)的步骤B产物和150ml的85％乙醇水溶液合并，加2.4g(42mmol)铁锉屑和0.24g(2.1mmol)CaCl₂，加热回流16小时。热混合物通过硅藻土床过滤，用热乙醇洗硅藻土。真空浓缩滤液得到100％收率的产物化合物。MS：MH⁺＝400。步骤D：

2.0g(5.2mmol)的步骤C产物和20ml的48％HBr合并，冷却混合物至-5℃，-5℃下搅拌混合物15分钟，慢慢加入1.07g(15.5mmol)的NaNO₂与10ml水的溶液。搅拌45分钟，然后用50％NaOH水溶液淬火至pH～10。用乙酸乙酯萃取，MgSO₄干燥合并的萃取液，真空浓缩得到产物化合物。MS：MH⁺＝465。步骤E：

按照WO 95/10516实施例358步骤A描述的大体相同的方法，水解4.0g步骤D的产物，得到1.39g产物化合物。MS：MH⁺＝392。

                制备实施例5

步骤A：

14.95g(39mmol)的WO 95/10516制备实施例34A的产物和150mlCH₂Cl₂合并，加入13.07g(42.9mmol)(nBu)₄NNO₃，混合物冷至0℃。1.5小时内慢慢滴加6.09ml(42.9mmol)的TFAA与20ml CH₂Cl₂的溶液。维持混合物在0℃过夜，然后依次用饱和NaHCO₃水溶液，水和饱和食盐水洗涤。Na₂SO₄干燥有机相。真空浓缩残留物，残留物用色谱纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)分别得到4.32g产物化合物5(i)和1.90g产物化合物5(ii)两个产物化合物。MS(5(i))：MH⁺＝428.2；MS(5(ii))：MH⁺＝428.3。步骤B：

按照WO 95/10516实施例358步骤A描述的大体相同的方法，将从步骤A中得到的化合物5(ii)(0.20g)水解，得到0.16g产物化合物。

用指明的原料和制备实施例5步骤B描述的大体相同的方法制备下面的产物化合物。

                制备实施例6步骤A：

从制备实施例5步骤A得到的产物5(i)22.0g(51.4mmol)，150ml85％乙醇水溶液，25.85g(0.463mol)铁粉和2.42g(21.8mmol)CaCl₂合并，混合物加热回流过夜。加12.4g(0.222mol)铁粉和1.2g(10.8mmol)CaCl₂，加热回流2小时。另外加12.4g(0.222mol)铁粉和1.2g(10.8mmol)CaCl₂，再加热回流2个多小时。热混合物通过硅藻土过滤，用50ml热乙醇洗硅藻土，真空浓缩滤液得到残留物。加100ml无水乙醇，浓缩得到残留物，色谱纯化残留物(硅胶，MeOH/CH₂Cl₂梯度洗脱)，得到16.47g产物化合物。步骤R：

从制备实施例6步骤A得到的产物16.47g(41.4mmol)和150ml 48％HBr水溶液合并，冷至-3℃。慢慢滴加18ml溴，然后慢慢滴加8.55g(0.124mol)NaNO₃与85ml水的溶液。在-3℃至0℃搅拌45分钟，然后加50％NaOH水溶液调pH＝10。用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水洗涤萃取液，Na₂SO₄干燥萃取液。浓缩得到残留物，色谱纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)，得到两个产物，分别为10.6g产物化合物6(i)和3.28g产物化合物6(ii)。MS(6(i))：MH⁺＝461.2；MS(6(ii))：MH⁺＝539；

                制备实施例7

步骤A：

1.07g(3.52mmol)硝酸四丁基铵，4ml无水CH₂Cl₂和0.743g(3.52mmol)TFAA合并，得到的混合物在室温下加到1.22g(3.20mmol)WO 95/10516制备实施例37的标题化合物与8ml无水CH₂Cl₂的溶液中。室温搅拌过夜，然后用20ml饱和NaHCO₃水溶液和20ml饱和食盐水洗涤，MgSO₄干燥。真空浓缩，色谱纯化得到的残留物(硅胶，乙酸乙酯/己烷)得到0.216g产物化合物7(i)和0.27g产物化合物7(ii)。MS(7(i))：MH⁺＝426；m.p.(7(i))97.5°-99.2℃。步骤B：

将按照WO 95/10516制备实施例47步骤B描述的大体相同的方法得到的步骤A产物7(i)还原，得到产物化合物。MS：MH⁺＝396。步骤C：

按照WO 95/10516制备实施例47步骤C描述的大体相同的方法，得到的步骤B的产物与HBr和Br₂反应，得到产物化合物。MS：MH⁺＝459。步骤D：

步骤C产物0.83g与无水乙醇和浓HCl合并并搅拌回流进行水解。冷却反应混合物至大约0℃，加KOH碱化。用CH₂Cl₂萃取，MgSO₄干燥萃取液，真空浓缩得到0.56g产物化合物。MS：MH⁺＝387。

              制备实施例8

步骤A：

7.3g(26.4mmol)原料酮(见J.Med.Chem.，4238(1992))和230ml THF混合并冷至0℃，加入溴化N-甲基哌啶-4-镁与26mlTHF的溶液，0℃至5℃搅拌4小时。加入400ml乙酸乙酯，用饱和的NH₄Cl水溶液洗涤，MgSO₄干燥。真空浓缩得到残留物，加入约200mlCH₂Cl₂，搅拌0.5小时。过滤收集得到的固体、浓缩滤液至约100ml体积，在5℃放置18小时。过滤、合并得到的固体总量为7g(19.4mmol)的产物化合物。m.p.＝153.7°-158℃；MS：(Cl)MH⁺＝376。步骤B：

5g步骤A的产物和30ml TFA混合在室温下搅拌1小时。真空浓缩得残留物，残留物溶解在CH₂Cl₂中，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。真空浓缩得到4.64g产物化合物。m.p＝136.7°-138℃；MS：(FAB)MH⁺＝358.1。步骤C：

0.6g(1.75mmol)步骤B产物和25ml甲苯混合，加入0.73ml(5.27mmol)Et₃N和1.34ml(14mmol)ClCO₂Et，加热至80℃2小时。再加入0.7ml的ClCO₂Et，再加热1小时，然后冷至25℃，真空浓缩得到残留物，残留物溶于乙酸乙酯，先用1N NaOH水溶液洗，再用饱和食盐水洗。MgSO₄干燥，减压浓缩，得到的残留物色谱纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到0.55g产物化合物。MS：(FAB)MH⁺＝416.2。步骤D：

5g(12.5mmol)步骤C的产物溶解在30％HBr的HOAc溶液中，40℃加热24小时，然后小心地将混合物加到冷的25％NaOH水溶液中。用CH₂Cl₂(3×100ml)萃取，浓缩萃取液得残留物，色谱纯化(硅胶，5％-30％MeOH/CH₂Cl₂)，得2.18g产物化合物。m.p.＝159.5°-160.8℃；MS：(FAB)MH⁺＝344.1。

                制备实施例9

步骤A

16.25g(40 83mmol)WO 95/10516制备实施例47，步骤B的产物7 14g(61.11mmol)NOBF₄的100ml CH₂Cl₂的浆状物合并搅拌该混合物30小时。加入100ml邻二氯苯，加热5小时，从混合物中蒸馏除去CH₂Cl₂。真空浓缩得残留物，加入200ml CH₂Cl₂，用水(2×200ml)洗涤。用MgSO₄干燥，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)，得4.1g产物化合物9(i)和4.01g产物化合物9(ii)。MS(9(i))：MH⁺＝418；MS(9(ii))：MH⁺＝401。步骤B：

按照WO 95/10516实施例358描述的大体相同的方法，步骤A产物9(i)水解得到产物化合物。MS：MH⁺＝346。

                制备实施例10步骤A：

10g(60.5mmol)4-哌啶乙酸乙酯和120ml无水CH₂Cl₂在-20℃混合，加入10.45g(60.5mmol)MCPBA，先于-20℃搅拌1小时，然后在25℃搅拌67小时。另加3.48g(20.2mmol)MCPBA，25℃搅拌24小时。用CH₂Cl₂稀释，用饱和的NaHCO₃水溶液洗，然后用水洗涤。MgSO₄干燥，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，2％-5.5％(10％NH₄OH的甲醇溶液)/CH₂Cl₂)得8.12g产物化合物。MS：MH⁺＝182.15。步骤B：

3.5g(19.3mmol)步骤A产物，17.5ml EtOH和96.6ml 10％NaOH水溶液合并，混合物在67℃加热2小时。加2N HCl水溶液调pH＝2.37，真空浓缩得残留物。加200ml无水EtOH，通过硅藻土过滤，用无水乙醇(2×50ml)洗滤液。合并的滤液真空浓缩得2.43g标题化合物。

                制备实施例11

10g(65.7mmol)3-甲氧羰氨基吡啶与50ml CH₂Cl₂混合，冷至0℃，0℃下在1小时内慢慢滴加13.61g(78.84mmol)MCPBA与120ml CH₂Cl₂的溶液。混合物在25℃搅拌5天，然后依次用饱和NaHCO₃水溶液和水洗涤，MgSO₄干燥，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，2％-5％(10％NH₄OH的甲醇溶液)/CH₂Cl₂)得产物化合物。MS：MH⁺＝169。

                制备实施例12

5g(36.0mmol)异烟酸1-N-氧化物和150ml无水DMF合并，加5.5ml(39.6mmol)Et₃N。0℃搅拌0.5小时，在0℃10分钟内慢慢滴加8.5ml(39.6mmol)二苯基磷酰基叠氮化物。0℃搅拌1小时，然后在25℃搅拌24小时(如在Pavia等人，Journal of MedicinalChemistry，33，854-861(1990)中的一般描述)，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，0.5％-1％MeOH/CH₂Cl₂)得5.9g产物化合物。

用制备实施例12描述的大体相同的方法，用烟酸1-N-氧化物制备下面的化合物：

            制备实施例13步骤A：

用WO 95/10516制备实施例15描述的方法25g(144mmol)3-吡啶乙酸盐酸盐氢化144小时，得20g产物化合物。MS：MH⁺＝144。步骤B：

用WO 95/10516制备实施例13的步骤B描述的方法，12g(83.8mmol)步骤B的产物反应148小时，得17.5g产物化合物。MS：MH⁺＝244.25。

制备实施例14

25g(164.4mmol)3-吡啶基氨基甲酸甲酯和163.3ml 1N HCl水溶液合并，搅拌至固体溶解，然后在25℃，55psi，用10％Pd/C氢化220小时。过滤，用水洗固体，合并的滤液用150ml BiORad AG 1×8离子交换树脂(OH^-)处理，过滤，用水洗树脂，浓缩滤液至100ml体积。加入16.43ml(197.3mmol)37％甲醛水溶液，用10％Pd/C在25℃，55psi下氢化89小时，过滤，用水洗固体，真空浓缩得24.3g标题化合物。MS：MH⁺＝173.2。

                制备实施例15

50.0g(20.5mmol)的8-氯-5，6-二氢-1H-苯并[5，6]环庚[1，2-b]吡啶-11-酮冷至0℃，用20分钟的时间慢慢加入75ml(93.69mmol)硫单氯化物，然后用15分钟的时间慢慢加入25ml(48.59mmol)Br₂。于95℃加热20小时，加入12.5ml(24.3mmol)Br₂然后再加热24小时。冷却混合物，0℃下慢慢加至CH₂Cl₂和1NNaOH水溶液的混合物中。用水洗涤有机相，MgSO₄干燥，真空浓缩得残留物。色谱纯化残留物(硅胶，500ml CH₂Cl₂，然后0.2％-5％(10％NH₄OH的甲醇溶液)/CH₂Cl₂)，然后再用色谱纯化(硅胶，3％-8.5％EtOAc/己烷)，得8.66g产物化合物，MS：MH⁺＝322。

                    制备实施例16

0.16g(0.46mmol)4-(8-甲基-5，6-二氢-11H-苯并[5，6]环庚[1，2-b]吡啶-11-ylidine)-1-乙氧羰基-哌啶溶解在2mlEtOH中，加入4ml 12N HCl。溶液在85℃加热3小时，然后冷至25℃，用50％NaOH水溶液调pH＝10，用50ml乙酸乙酯萃取几次。合并有机相，MgSO₄干燥，真空浓缩得产物化合物。

                制备实施例17步骤A：

按照Comins，et al.，Tet.Lett，27，(38)4549-4552(1986)上描述的大体相同的方法，4-甲氧吡啶与正丁基格氏试剂和氯甲酸苯酯反应形成需要的不饱和的酮哌啶产物。步骤B：

按照WO 95/10516的制备实施例34C描述的大体相同的方法，步骤A的产物水解得到胺产物。步骤C：

室温下步骤B的产物与碘甲烷和NaH反应进行甲基化形成N-甲基产物。步骤D：

步骤C的产物用10％Pd/C氢化形成产物化合物。步骤E：

室温下步骤D的产物在乙醇中与NaBH₄反应形成醇产物。步骤F：

步骤E的产物与过量SOCl₂在吡啶中反应得到4-氯哌啶。

按照制备实施例17步骤A-F描述的大体相同的方法，用适当的格氏试剂代替正丁基格氏试剂，还可以制备下述化合物：

实施例1

步骤A：

在无水二氯甲烷(11.85ml)中，WO 95/10516制备实施例40的标题化合物(1当量)(1.0g)与三氟乙酸(30.5当量)(5.92ml)反应，溶液在25℃搅拌0.5小时。混合物蒸发至干，然后再蒸发至干得到三氟乙酸盐。后者溶于无水DMF(15ml)中，滴加三乙胺直到pH达到6.2。加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.81当量)(0.98g)和粉碎的活化的4分子筛(1.48g)，混合物在0℃氩气下搅拌。2(R)-N-叔丁氧羰氨基-3-三苯甲基丙醛(0.91当量)(1.037g)与无水DMF(8ml)的溶液滴加至上述溶液中，历时40分钟。混合物用2小时回温至室温。混合物过滤，蒸发至干，残留物溶入乙酸乙酯中，用饱和的NaHCO₃洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤，蒸发至干。残留物用硅胶柱色谱纯化，0.5-4％(10％浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷洗脱，得到异构体A和异构体B的非对映体混合物混合产量：0.9073g，MH⁺825.2。

起始反应物的N-甲酰基衍生物也分离到(产量：0.4945g)。在上面的反应中用二氯乙烷代替DMF作溶剂，可避免N-甲酰基衍生物的形成。

非对映异构体A和B的混合物(0.683g)用硅胶柱分离，用5％丙酮的二氯甲烷溶液洗脱得到纯样品异构体A和(89.2mg)异构体B(66.4mg)与两个异构体重叠的混合物(384.1mg)。步骤B：

用实施例21步骤B基本相同的方法，上面步骤A的标题化合物(异构体A和B)(1当量)(1.024g)与三乙基硅烷(0.089ml)和三氟乙酸(1.043ml)在二氯甲烷(10.24ml)中反应，得到标题化合物为盐酸盐。产量：0.5303g；MH⁺483.0。¹H NMR数据(D₂O)：芳香质了信号在7.28、7.37(2H)、8.23、8.68。

                    实施例2

实施例1B的标题化合物(为游离碱)溶解在含碘的甲醇中，25℃搅拌30分钟，蒸发至干，溶解在CH₂Cl₂中，依次用饱和NaHCO₃和饱和食盐水洗涤。CH₂Cl₂层用MgSO₄干燥，过滤，蒸发至干，得到标题化合物。标题化合物用硅胶柱纯化，用3％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物。

                实施例3

步骤A：

WO 95/10516制备实施例40制备的11-羟基中间体(1当量)(1g)按照WO 95/10516制备实施例7B描述的方法反应，得到11-氯中间体。后者与PCT国际公开号WO 95/00497实施例3C描述制备的1-叔丁氧羰基-2(S)-正丁基哌嗪(1.1当量)(1.1314g)反应，方法与WO 95/10516制备实施例7C描述的基本相同，得到标题化合物。产量：1.7862g；MH⁺550。步骤B：

上面步骤A的标题化合物(1.6406g)的甲醇溶液(16.4ml)与10％(v/v)浓硫酸的二氧六环(41ml)溶液反应，混合物在25℃搅拌4小时。溶液用BioRad AG 1×8(OH^-)树脂中和，过滤。树脂用甲醇和CH₂Cl₂洗涤，合并滤液蒸发至干。残留物用硅胶柱色谱纯化，用1％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物。产量1.2451g；MH⁺450。步骤C：

按上面实施例1A描述的方法，步骤B的标题化合物反应得到标题化合物。后者用硅胶柱色谱纯化，用0.5％-1％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得到标题化合物。步骤D：

上面步骤C的标题化合物按上面实施例1B描述的方法反应得到标题化合物的HCl盐。

                    实施例4-8

用技术人员已知的标准条件，WO 95/00497实施例13A的标题化合物与苄氧羰酰氯反应，得到上面说明的N-Cbz保护的醇。用通常的方式纯化后，后者可与表1栏1中说明的各种试剂反应，得到相应的N-Cbz保护的中间体，其中R的定义与表1栏2相同。用通常的方式纯化后，后者用技术人员已知的温和的催化氢化方法脱保护，适当纯化后得到表1栏2中说明的最后需要的中间体。

表1

                    实施例9

用技术人员已知的标准方法，通过上述说明的步骤，WO 95/00497的实施例27D的标题化合物转变为1-BOC-2(S)-(4-乙酰氨基丁基)-哌嗪。

                    实施例10-19

用上面实施例3基本相同的方法，但用下面表2栏1的化合物代替1-BOC-2(S)-正丁基哌嗪，可得到下述通式的化合物：其中R²列在表2栏2中：

表2

                实施例20

步骤A：

WO 95/10516制备实施例40的标题化合物(1当量)(1g)，N，N′-双-BOC-L-胱氨酸(0.45当量)(0.501g)，DEC(0.9当量)(0.4366g)，HOBT(0.9当量)(0.3078g)和N-甲基吗啉(0.9当量)(0.2304g)溶解在无水DMF(25ml)中，混合物在25℃氩气下搅拌68小时。混合物蒸发至干，溶解在CH₂Cl₂中，依次用饱和NaHCO₃水溶液和水洗涤。CH₂Cl₂层用MgSO₄干燥，过滤，蒸发至干。残留物用硅胶柱色谱纯化(60×2.5cm)，用0.5％-1％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱得到标题化合物。产量：1.09g；MH⁺1189.7。步骤B：

上面步骤A的标题化合物(1当量)(0.944g)加到甲醇(10ml)中。加入10％(v/v)浓H₂SO₄的二氧六环(20ml)溶液，反应溶液25℃下在氩气下搅拌2小时，混合物用BioRad AG 1×8(OH^-)树脂中和。过滤掉树脂，用MeOH和CH₂Cl₂洗涤，合并的滤液蒸发至干，残留物用硅胶柱(110×2.5cm)色谱纯化，用5％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得到标题化合物。产量：0.6879g；MH⁺989。

步骤B产物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：31.3，31.4，(b)CH：147.9，142.1，133.3，127.1，131.4，79.7，和(c)C：120.9，141.7，135.0，136.1，137.6，156.3；(2)哌嗪：(a)CH₂：46.2，52.6，52.0，43.0；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：45.0，(b)CH：51.0，和C：172.2。步骤C：

上面步骤B的标题化合物溶解在无水MeOH和THF的混合物中，加入NaBH₄，混合物在氩气下25℃搅拌2小时。溶液蒸发至干，残留物溶解在CH₂Cl₂中，用水洗涤。CH₂Cl₂层用MgSO₄干燥，过滤，蒸发至干，得到残留物用WO 95/00497的实施例1E描述的大体相同的方法纯化，得到标题化合物为HCl盐。

另外，上面的还原反应中，可以用锌粉和1.0N HCl代NaBH₄作用。

                    实施例21步骤A：

WO 95/10516制备实施例40的标题化合物(1当量)(1g)，N-BOC-S-三甲苯基-L-半胱氨酸(1.34当量)(1.584g)，DEC(1.34当量)(1.5g)，HOBT(1.34当量)(0.4618g)，和N-甲基吗啉(1.34当量)(0.1048ml)溶解在无水DMF(25ml)中，混合物在氩气下25℃搅拌68小时。该溶液蒸发至干，残留物溶解在CH₂Cl₂中，先用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，然后用水洗涤，CH₂Cl₂层用MgSO₄干燥，过滤，蒸发至干，残留物用硅胶柱(60×2.5cm)色谱纯化，用0.5％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得到标题化合物。产量：2.04g，MH⁺837.6。步骤B：

上面步骤A的标题化合物(1当量)(0.5g)溶解在无水二氯甲烷(5ml)中，在氩气保护下加入三乙基硅烷(4.07当量)(282.1mg)(0.388ml)。加入三氟乙酸(2.5ml)，反应溶液在25℃搅拌1小时。溶液蒸发至于。残留物在水和己烷之间分配。分出水层，过BiORad AG3×4(Cl^-)树脂(100ml)，树脂用水洗。合并洗脱液和洗涤液冷冻干燥得到标题化合物，为盐酸盐。产量：306.9mg，MH⁺497.2。上面描述的方法与WO 95/00497的实施例1E描述的方法基本相同。H¹NMR(D₂O)：芳香质子信号在7.00(2H)，7.17，7.50，8.21。步骤C：

上面步骤A的标题化合物(1当量)(30mg)溶解在无水CH₂Cl₂(1ml)中，加入三乙基硅烷(4当量)(16.93mg)(0.0233ml)，随后加TFA(1ml)。混合物在氩气保护下，25℃搅拌1小时，然后用BioRad AG 1×8(OH^-)树脂中和。滤掉树脂，用甲醇和CH₂Cl₂洗涤。合并的滤液蒸发至干得标题化合物。步骤D：

上面步骤B的标题化合物用上面实施例步骤20步骤C描述的方法还原，得标题化合物。步骤E：

上面步骤A的标题化合物(1当量)(1.2g)加到甲醇中(10ml)，加入10％浓H₂SO₄的二氧六环(v/v)(30ml)溶液。混合物在25℃，氩气保护下搅拌2小时。混合物用CH₂Cl₂和甲醇稀释，用BioRad AG 1×8(OH^-)树脂中和。滤掉树脂，用甲醇洗涤，随后用CH₂Cl₂洗涤。合并的滤液蒸发至干得到固体残留物，该固体残留物用硅胶柱色谱纯化，用2％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱得到标题化合物。产量：1.0g，MH⁺739.2。

                实施例22

步骤A：

WO 95/10516制备实施例3E的标题化合物在上面实施例1A描述的相同条件下反应得到标题化合物，用通常的方式纯化。步骤B：上面步骤A的标题化合物在上面实施例1B描述的那些类似的条件下脱保护得到标题化合物。

                    实施例24

步骤A：

WO 95/10516制备实施例20A的标题化合物在WO 95/10516制备实施例2D和2E描述的基本相同的条件下，与来自上面实施例23的取代的格氏试剂反应，得到标题化合物。步骤B：

上面步骤A的标题化合物在WO 95/10516制备实施例1F和1G描述的基本相同的条件下反应，得标题化合物。步骤C：

上面步骤B的标题化合物用上面实施例1A描述的方法反应，得到标题化合物。步骤D：

上面步骤C的标题化合物用上面实施例1B描述的方法反应，得到标题化合物。

                    实施例25步骤A：

上面实施例24B的标题化合物用WO 95/10516制备实施例34A描述的方法，与CF₃SO₃H反应，得到标题化合物。步骤B：

上面步骤A的标题化合物用上面实施例1A描述的方法反应，得到标题化合物。步骤C：

上面步骤B的标题化合物用上面实施例1B描述的方法反应，得到标题化合物。

                    实施例26

步骤A：

上面实施例24B的标题化合物或者与LiAlH₄在甲苯中回流反应，或优选与DIBAL-H在甲苯中回流反应，得到标题化合物。步骤B：

上面步骤A的标题化合物用上面实施例1A描述的方法反应，得到标题化合物。步骤C：

上面步骤B的标题化合物用上面实施例1B描述的方法反应，得到标题化合物。

                实施例27

步骤A：

上面实施例3B的标题化合物在上面实施例21A描述的基本相同的条件下，与2-S-三苯甲基-3-N-BOC-异半胱氨酸反应，得到标题化合物。保护的异半胱氨酸用技术人员已知的来自“异半胱氨酸”(Gustavson，et al.，Syn.Comm.，21(2)265-270(1991))的方法制备。步骤B：

上面步骤A的标题化合物用上面实施例1B描述的方法反应，得到标题化合物。

                    实施例28步骤A：

WO 89/10369制备实施例4的标题化合物用类似于WO 89/10369描述的那些方法变成标题化合物。步骤B：

上面步骤A的标题化合物在类似于WO 89/10369描述的那些条件下，与来自于上面实施例4的取代的哌啶反应，得到标题化合物。步骤C：

上面步骤B的标题化合物用上面实施例3B描述的方法反应，得到标题化合物。步骤D：

上面步骤C的标题化合物用上面实施例1A描述的方法反应，得到标题化合物。步骤E：

上面步骤D的标题化合物用上面实施例1B描述的方法反应，得到标题化合物。

                    实施例29步骤A：上面实施例3B的标题化合物与下式的酸

(用US 4,470,972和E M.Smith.et al.，J.Med，Chem.，32、1600(1989)描述的方法制备)在类似于实施例20A描述的那些条件下反应，得到标题化合物。步骤B：

上面步骤A的标题化合物与碱反应得到标题化合物。

                    实施例30

0.5g WO 95/10516制备实施例1步骤G的产物，0.54g N-BOC-S-(对甲氧苄基)-L-半胱氨酸，0.321g DEC，0.226g HOBT，0.176g N-甲基吗啉和15ml DMF在0℃混合，然后在室温下混合物搅拌3天。真空浓缩得残留物，该残留物溶CH₂Cl₂中，依次用饱和NaHCO₃水溶液和饱和食盐水溶液洗涤。MgSO₄干燥有机相，真空浓缩得残留物。色谱纯化(硅胶，98％CH₂Cl₂/MeOH+NH₄OH)，得标题化合物。MS：MH⁺＝634。

                    实施例31

0.1g实施例30的产物，4ml THF和2ml 4N HCl的二氧六环溶液合并，混合物在室温下搅拌过夜。真空浓缩得0.06g产物化合物。MS：MH⁺＝534。

                    实施例32

步骤A：

5.25g(25.85mmol)2-哌嗪羧酸·2HCl溶解在160ml 1∶1二氧六环/水中，用50％NaOH水溶液调pH至11。缓慢加(分次)7.21g(29.28mmol)BOC-ON与40ml 1∶1二氧六环/水的溶液，其间用50％NaOH水溶液维持pH在11。在室温下搅拌5小时，然后冷至0℃，用50％NaOH水溶液调pH至9.5。缓慢加(分次)7.34g(28.37mmol)FMOC-Cl与40ml二氧六环的溶液，加入期间用50％NaOH水溶液维持pH在9.5。混合物回温至室温并搅拌20小时，有乙醚(3×150ml)洗涤，用6N HCl(水溶液)调至pH＝2-3，用甲苯(3×150ml)萃取。用Na₂SO₄干燥合并的萃取液，真空浓缩至150ml体积。冷至-20℃过夜，过滤收集得到的固体，用己烷洗涤，固体在真空中干燥，得5.4g产物化合物。步骤B：

缓慢将2.0g(9.26mmol)2-硝基溴苄加到37ml 2M的CH₃NH₂的THF溶液中，然后在室温下搅拌16小时。用200ml EtOAc稀释，用水(3×60ml)洗涤，然后有机相用MgSO₄干燥，真空浓缩得1.53g产物化合物。步骤C：

2.74g(6.05mmol)步骤A的产物，4.22ml的Hunigs碱，2.76g(7.26mmol)HATU和1.00g(6.05mmol)步骤B的产物与25ml CH₂Cl₂的溶液合并，室温下搅拌16小时。用75ml EtOAc稀释，依次用10％HCl水溶液(2×40ml)，饱和的NaHCO₃水溶液(2×40ml)和40ml饱和食盐水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，2％MeOH/CH₂Cl₂)，得2.71g产物化合物。步骤D：

1.00g(1.67mmol)步骤C的产物，8ml DMF和0.18ml(1.83mmol)哌啶合并，室温下搅拌4小时。真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，4％MeOH/CH₂Cl₂)得0.34g产物化合物。步骤E：

0.30g(0.789mmol)步骤D的产物与8ml CH₂Cl₂合并，然后加入0.164g(0.947mmol)3-吡啶乙酸·HCl，0.116g(0.947mmol)DMAP和0.195g(0.947mmol)DCC，室温搅拌16小时。色谱纯化(硅胶，4％MeOH/CH₂Cl₂)，得0.37g产物化合物。步骤F：

0.5ml TFA加到0.25g(0.502mmol)步骤E的产物与5ml CH₂Cl₂的溶液中，室温搅拌4小时。真空浓缩得残留物，加60ml EtOAc，依次用饱和K₂CO₃水溶液(2×20ml)和30ml饱和食盐水洗涤。有机相用Na₂SO₄干燥，真空浓缩得0.170g产物化合物。步骤G：

0.096g(0.242mmol)步骤F的产物，0.083g(0.242mmol)WO 95/10516制备实施例40步骤B的产物氯化物与1ml THF合并，然后与0.037g(0.242mmol)DBU合并，在60℃加热6小时。真空浓缩得残留物，色谱纯化(2％至5％MeOH/CH₂Cl₂)，得0.035g标题化合物(实施例32)以及0.042g具有下述通式的产物：

                    实施例32-A

实施例32的分析数据：¹H NMR(CDCl₃)：2.01-3.08(m，9H)；3.55-3.86(m，4H)；3.90-4.10(m，2H)；4.21-4.38(m，2H)；5.23-5.39(m，2H)；7.09-7.31(m，5H)；7.44(t，1H)；7.527.70(m，3H)；8.09(br.d，1H)；8.37-8.52(m，3H).

实施例32-A的分析数据：¹H NMR(CDCl₃)：1.85-2.21(m，3H)；2.44-2.86(m，5H)；3.01-3.46(m，3H)；3.52-4.50(m，5H)；5.01(br.s，1H)；5.48-5.68(m，1H)；7.07-7.99(m，3H)；7.24-7.31(br.s，1H)；7.55-7.65(m，2H)；8.32-8.57(m，3H).

用实施例32步骤A-G描述的大体相同的方法，但是用指定的胺代替步骤B中的CH₃NH₂，或用指定的酸代替步骤E中的3-吡啶乙酸，下面的化合物也可以制备：

实施例32-B的分析数据：¹H NMR(CDCl₃)：0.9-1.07(m，6H)；1.80-2.23(m，2H)；2.36-2.89(m，3H)；2.97-3.38(m，2H)；3.47-4.10(m，5H)；4.08-4.18(m，1H)；4.41(br.d，1H一个非对映异构体)；4.90(br.s，1H一个非对映异构体)；5.17-5.25和5.60-5.65(m，2H)；7.00-7.13(m，3H)；7.16-7.23(br.s，1H)；7.50-7.60(m，2H)；8.27-8.49(m，3H)。

实施例32-C的分析数据：¹H NMR(CDCl₃)：0.98-1.11(m，6H)；1.82-2.21(m，2H)；2.40-2.82(m，3H)；3.10(t，1H)；3.17-3.40(m，1H)；3.50-3.62(m，1H)；3.70-4.32(m，5H)；4.49(br.d，1H一个非对映异构体)；4.98(br.s.1H一个非对映异构体)；5.20-5.36和5.61-5.69(m，2H)；7.05-7.20(m，5H)；7.54-7.62(m，1H)；8.32-8.38(m，1H)；8.52-8.59(m，2H)。

                实施例33步骤A：

12.05g(48.5mmol)1-N-苄基-2-哌嗪-羧酸乙酯与100mlTHF的溶液与10.59g(48.5mmol)二叔丁基二碳酸酯合并，室温搅拌3小时。真空浓缩得到17.17g产物化合物。步骤B：

17.17g步骤A的产物化合物，150ml MeOH；7.5ml HOAc和3.4g 10％Pd/C合并，室温下用H₂(50psi)氢化18小时。通过硅藻土过滤，用甲醇洗涤滤饼，真空浓缩滤液得残留物。残留物溶解在300mlEtOAc中，依次用饱和Na₂CO₃水溶液(2×150ml)和100ml饱和食盐水洗涤。MgSO₄干燥，真空浓缩得到11.54g产物化合物。步骤C：

0.26g(1mmol)步骤B产物化合物，1ml CH₂Cl₂；0.174g(1mmol)3-吡啶基乙酸，0.147g(1.2mmol)DMAP与0.248g(1.2mmol)合并，室温搅拌40小时。真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，5％MeOH/CH₂Cl₂)得0.315g产物化合物。步骤D：

0.196g(0.521mmol)步骤C的产物化合物和0.5ml TFA合并，室温搅拌40小时。真空浓缩得残留物，加50ml EtOAc，用10ml 1NNa₂CO₃水溶液洗涤。Na₂SO₄干燥，真空浓缩得0.077g产物化合物。步骤E：0.075g(0.272mmol)步骤D的产物化合物，0.091g(0.265mmol)WO 95/10516制备实施例40步骤B的氯化物产物，2ml THF与0.40g(0.265mmol)DBU合并，50℃搅拌24小时。冷至25℃，真空浓缩得残留物，色谱纯化(硅胶，5％MeOH/CH₂Cl₂)，得0.034g产物化合物。¹H NMR(CDCl₃)：1.12和1.14(t，3H)；1.55-1.82(m，1H)；1.92-2.50 2H)；2.53-2.81(m，2H)；3.03-3.25(m，1H)；3.28-3.45(m，1H)；3.53-3.71(m，2H)；3.74(s，2H)；3.85-4.19(m，3H)；4.31 and 4.32(s，1H)；5.10-5.18(m，3H).

                    实施例34

步骤A：

12ml(50mmol)N，N-′二苄基亚乙基二胺，14ml(100mmol)Et₃N与250ml甲苯在0℃合并，加入7ml(50mmol)4-溴丁烯酸甲酯，缓慢回温至室温，搅拌24小时，过滤，真空浓缩滤液得残留物，加10％HCl水溶液(300ml)处理。再过滤，用EtOAc(2×100ml)洗滤液。用K₂CO₃碱化滤液，用EtOAc(3×150ml)萃取，用饱和食盐水洗涤合并的滤液，MgSO₄干燥，真空浓缩得13.7g产物化合物。

¹H NMR(CDCl₃)2.28-2.50(m，4H)，2.5-2.75(m，4H)，3.1(bs，1H)，3.42(d，2H)，3.52(d，1H)，3.6(s，3H)，3.75(do 1H)，7.15-7.35(m，10H).步骤B：

13.7g(40mmol)步骤A的产物，150ml MeOH，50ml 1N HCl水溶液与3g 10％Pd/C合并，用H₂(50psi)氢化24小时。过滤，真空浓缩滤液，除去大部分MeOH，用K₂CO₃碱化至pH＝9-10。0℃缓慢加入9.8g(40mmol)BOC-ON，0℃搅拌1小时。缓慢回温至室温，搅拌2小时，用EtOAc萃取(2×200ml)。用50ml 10％HCl水溶液处理合并的萃取液，用EtOAc洗涤水层，用K₂CO₃碱化，用EtOAc萃取3次。用饱和食盐水洗涤合并的有机相，MgSO₄干燥，真空浓缩得7.89g产物化合物。¹H NMR(CDCl₃)：1.4(s，9H)，2.31(dd，1H)，2.37(dd，1H)，2.55(b，1H)，2.69-3.02(m.4H)，3.75(s，3H)，3.88(b，2H).步骤C：

5.2g(20mmol)步骤B的产物，60ml THF，60ml 1N NaOH水溶液合并，室温下搅拌6小时。冷至0℃，加入10％HCl水溶液调至pH＝9-10，然后加入5.2g(20mmol)FMOC-Cl，室温搅拌6小时(加1N NaOH(水溶液)维持pH＝9-10)，然后用10％HCl酸化至pH＝1，萃取2次，有饱和食盐水洗涤合并的有机层，MgSO₄干燥，真空浓缩得8.56g产物化合物。compound.¹H NMR(CDCl₃)：1.4(s，9H)，2.5-3.0(m，5H)，3.9-4.2(m，6H)，4.5(m，1H)，7-25(t，4H)，7.32(t，4H)，7.48(d，4H)，7.75(d，4H).步骤D：

460mg(1mmol)步骤C的产物，5ml CH₂Cl₂，230mg(1.2mmol)DEC与130μL(1.5mmol)异丙基胺合并，25℃搅拌6小时。用10ml1N HCl水溶液处理，用30ml  EtOAc萃取，用饱和NaHCO₃水溶液萃取，Na₂SO₄干燥。真空浓缩得454.6mg产物化合物。步骤E：

150mg(0.3mmol)步骤D的产物与DMF的溶液与142mg(0.45mmol)TBAF合并，25℃搅拌0.5小时。用5ml 1N HCl水溶液处理，用10mlEtOAc洗涤。用饱和K₂CO₃碱化，用EtOAc萃取3次，MgSO₄干燥合并的萃取液。真空浓缩得残留物。残留物与3-吡啶基乙酸按照实施例33步骤C描述的大体相同的方法反应，得106.2mg产物化合物。步骤F：

40mg(0.1mmol)步骤E的产物，2ml CH₂Cl₂与1ml TFA合并，在25℃搅拌0.5小时。真空浓缩得残留物，残留物与90μL(0.6mmol)DBU与2ml THF的溶液合并，加入40mg(0.12mmol)WO 95/10516制备实施例40步骤B的产物，60℃搅拌8小时。真空浓缩得残留物，色谱纯化得48.2mg产物化合物。

                    实施例36

上面实施例3B的标题化合物(1当量)(0.5g)与制备实施例10B的标题化合物(1.5当量)(0.2559g)和DEC(1.5当量)(0.3203g)，HOBT(1.5当量)(0.169g)和N-甲基吗啉(1.5当量)(0.245ml)在无水DMF，25℃反应22小时。反应用实施例20A描述的方法进行后处理，产物用硅胶柱纯化，用2.25％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物。产量：609.4mg，MH⁺ 585.0。

标题化合物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：29.7/29.8/29.9/30.0/30.2/30.4，(b)CH：146.6/146.7，140.6/140.9，132.1，129.8/129.9/130.0/130.1，125.9，78.3/78.4/78.5，和(c)C：119.6，140.2/140.4，134.6，136.2/136.3，136.4，154.6/154.7/154.9/155.0；(2)哌嗪：(a)CH₃：13.5/13.6，(b)CH₂：22.0/22.1，28.7，27.6/27.9，37.0/37.1/38.0/38.5，41.4/41.5，50.8/51.6，53.1/53.2/53.5/53.8/53.9，和(c)CH：49.0；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：51.2，(b)CH：126.3，126.3，138.5，和(c)C：133.8，166.4/166.7。

                    实施例37步骤A：

上面的实施例3B的标题化合物(1当量)(0.658g)与WO 95/10516制备实施例17D的标题化合物(1.3当量)(0.4637g)和DEC(1.3当量)(0.3654g)，HOBT(1.3当量)(0.2575g)和N-甲基吗啉(1.3当量)(0.21ml)在无水DMF(25ml)中25℃下反应25小时。产物用实施例20A描述的方法分离，直接用于下面的步骤B中。步骤B：

上面步骤A的标题化合物溶解在甲醇(5ml)中，加入10％(v/v)浓硫酸的二氧六环(15ml)溶液进行反应。用实施例20B描述的方法进行后处理，得标题化合物。产量：0.312g，MH⁺575.4。步骤C：

上面步骤B的标题化合物(1当量)(0.310g)溶解在无水CH₂Cl₂(5ml)中，加入三甲基硅基异氰酸酯(6当量)(0.3733g)(0.439ml)。混合物在25℃，氩气保护下搅拌77小时。另再加入三甲基硅基异氰酸酯(6当量)(0.3733g)(0.439ml)，反应整个过程历时106小时。混合物用CH₂Cl₂稀释，依次用饱和NaHCO₃水溶液，饱和食盐水洗涤，然后用MgSO₄干燥。滤液随后蒸发得标题化合物，用硅胶柱纯化，用2％(10％浓NH₄OH的MeOH溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物，产量：0.1758g，MH⁺618.2。

标题化合物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：29.8，30.1，(b)CH：146.6/146.7，140.8/140.9，132.1，125.8/125.9，128.9/129.9/130.0/130.1，78.5/78.6，and(c)C：119.6，140.2/140.4，133.7/133.8，134.7/134.8，136.2/136.3，155.0/155.7；(2)哌嗪：(a)CH₃：13.5/13.6，(b)CH₂：40.9/41.0，51.1/51.4/51.9，53.2/53.3/53.4/53.9/54.2，36.5，22.1/22.2，27.7/27.8，和(c)CH：48.4；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：44.0，31.5，31.5，44.0，39.1，(b)CH：32.6，和(c)C：157.5，169.1/169.4。

                    实施例38

上面实施例11B的标题化合物(1当量)(0.4g)与制备实施例10B的标题化合物(1.5当量)(0.2038g)和DEC(1.5当量)(0.2552g)，HOBT(1.5当量)(0.1346g)和N-甲基吗啉(1.5当量)(0.195ml)在无水DMF(15ml)，25℃反应17小时。反应混合物用实施例20A描述的方法进行后处理，产物用硅胶柱纯化，用3％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物，产量：539.6mg，MH⁺587。

标题化合物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：29.8/30.0，30.0/30.2，(b)CH：146.6/146.7/146.8，140.8，132.1/132.3，129.9/130.0，125.9/126.3，78.4/78.5，和(c)C：119.6，140.2/140.3，133.8，134.3/134.4/134.6，136.2/136.3，154./154.8；(2)哌嗪：(a)CH₃：58.2，(b)CH₂：50.9/51.2/51.6，54.3/54.4/54.7，37.4/37.6，39.3/42.3，67.6/67.7/69.6，和(c)CH：50.0；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：36.6/36.8，(b)CH：138.4/138.5，126.4，126.4，138.4/138.5，和(c)C：133.8.

                实施例39

步骤A：

上面实施例11B标题化合物(1当量)(2.7g)与WO 95/10516制备实施例17D标题化合物(1.3当量)-(1.89g)和DEC(1.3当量)(1.49g)，HOBT(1.3当量)(1.05g)和N-甲基吗啉(1.3当量)(0.7876g)(0.8561ml)在无水DMF(80ml)在25℃反应24小时。产物按照实施例20A描述的方法分离，用硅胶柱色谱纯化，用0.5％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物，产量：1.49g，MH⁺677。步骤B：

上面步骤A的标题化合物(1.38g)溶解在甲醇(10ml)中，加入10％(v/v)浓H₂SO₄的二氧六环(30ml)溶液进行反应，用实施例20B描述的方法进行后处理。产物用硅胶柱色谱纯化，用6-8％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物，产量：0.7175g，MH⁺577。

标题化合物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：29.9/30.0，30.1/30.2.(b)CH：146.6/146.7，140.7/140.8，132.1/132.2，125.8/125.9，129.9/130.0，78.6，和(c)C：119.5/119.6，140.3/140.7，133.7，134.7/134.8，136.2/136.4，155.0/155.1；(2)哌嗪：(a)CH₃：58.1，(b)CH₂：39.8/39.9/40.9，51.3/51.5/51.9，54.3/54.8/55.1，36.2，67.9/68.0/69.7/69.8，和(c)CH：49.7/49.8；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：45.9，32.7，45.9，39.0，(b)CH：32.9；和(c)C：169.7/170.2。步骤C：

上面步骤B的标题化合物(1当量)(0.582g)溶解在无水CH₂Cl₂(6ml)中，加入三甲基硅基异腈酸酯(6当量)(0.6985g)(0.821ml)。混合物在25℃，在氩气保护下搅拌48小时，混合物用CH₂Cl₂稀释，依次用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，然后用MgSO₄干燥。滤液随后蒸发得到标题化合物，用硅胶柱色谱纯化，用3％(10％浓NH₄OH的甲醇溶液)-CH₂Cl₂洗脱，得标题化合物。产量：0.4926g，MH^-1＝620。

标题化合物的碳谱数据(δc(CDCl₃))：(1)三环的：(a)CH₂：29.9/30.0，30.1，(b)CH：146.6/146.7，140.7/140.8，132.1/132.2，125.8/125.9，130.0，78.6，和(c)C：119.5/119.6，140.3，133.8，134.8，136.2/136.4，154.9/155.0；(2)哌嗪：(a)CH₃：58.1/58.2，(b)CH₂：38.2/38.3，51.2/51.5/51.8，54.3/54.7/55.1，36.2，67.8/67.9/69.6/69.8，和(c)CH：49.7；和(3)哌嗪N-取代物：(a)CH₂：43.9/44.0，40.8/40.9，40.8/40.9，43.9/44.0，39.1，(b)CH：32.5；和(c)C：157.5，169.3/169.9。

                    实施例40步骤A：

往Merrifield悬浮的Tentagel S氨基树脂(Rapp Polymere Gmbh，Germany)(1.0g，0.28mmol/g负载，0.28mmol)的DCM(10mL)中加入4-(溴甲基)-3-硝基苯甲酸(1.12mmol，0.29g)，HOBT(1.12mmol，0.15g)和DIC(1.68mmol，0.21g，0.26mL)。树脂在室温下振动16小时，然后用DCM(4×10mL)和THF(3×10mL)洗涤。步骤B

树脂(0.28mmol理论负载)悬浮在THF(10mL)中，在室温下与(氨甲基)环丙烷(5.6mmol，0.40g，0.49mL)反应16小时，然后树脂用THF(2×10L)洗涤。步骤C：

树脂(0.28mmol理论负载)悬浮在DCM(10mL)中，与1-N-FMOC-4-BOC哌嗪-2-乙酸(1.12mmol，0.52g)HATU(1.12mmol，0.43g)和N，N-二异丙基乙胺(2.24mmol，0.29g，0.39mL)反应。室温下树脂振摇16小时，然后用DCM(4×10mL)洗涤。树脂然后再与相同的混合物试剂进行第二次偶联循环16小时。然后树脂用DCM(6×10mL)洗涤。步骤D：

树脂(0.28mmol理论负载)用DMF(10mL)洗涤1次，然后与30％哌啶的DMF(总体积＝10mL)溶液在室温下反应30分钟。然后树脂用DMF(10mL)，甲醇(2×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤。步骤E：

树脂(0.28mmol理论负载)悬浮在DCM(10mL)中与(S)-(+)-α-甲氧基苯基乙酸(1.12mmol，0.19g)，HATU(1.12mmol，0.43g)玫N，N-二异丙基乙胺(2.24mmol，0.29g，0.39mL)反应。树脂在室温下振摇16小时，然后用DC(4×10mL)洗涤。步骤F：

树脂(0.28mmol理论负载)与30％的TFA的DCM(10mL)溶液在室温下反应1小时。然后树脂用DCM(2×10mL)和甲醇(3×10mL)洗涤，然后与20％的三乙胺的甲醇(3×10mL)洗涤，然后与20％的三乙胺的甲醇(10mL)溶液反应30分钟。然后树脂用甲醇(2×10mL)和DCM(4×10mL)洗涤。步骤G：

树脂(0.28mmol理论负载)悬浮在圆底烧并中的DCM(10mL)中与下式的化合物

(1.12mmol，0.38g)(来自于WO 95/10516制备实施例40)，和1，2，2，6，6-五甲基哌啶(1.12mmol，0.17g，0.20mL)反应。树脂在45℃温和搅拌16小时，然后过滤，用DCM(5×10mL)DMF(3×10mL)和甲醇(3×10mL)洗涤。步骤H：

树脂(0.28mmol理论负载)从滤斗中用甲醇(10mL)洗至25mL圆底浇并中，光解(UVP Blak-Ray灯，360nm)3小时。树脂过滤，用甲醇(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤。溶剂和洗涤液合并，真空蒸发至干燥化合物H。

用上面描述的以及WO 94/08051描述的方法，正如实施例40说明的，下述通式的化合物：

可制备，其中R¹和R²定义在下面的表3中。

表3

                    实施例56A

制备实施例2的反应产物按照实施例，步骤A的方法反应得到化合物(56A(i))。化合物56A(i)(320mg)，CH₂CL₂(2mL)，TFA(2mL)和(C₂H₅)₃SiH(249μL)装入烧瓶中，反应混合物在室温搅拌大约3小时。全部溶剂旋转蒸发仪上除去。加入HCl(1N)溶解产物，得到的溶液用己烷洗涤，该溶液旋转蒸发仪上蒸去溶剂，然后加入HCl(1N)，得到的溶液冷干，得到标题化合物(56(ii))。质谱：M+1＝480。

用体外测定FPT的抑制下面表4-7中的化合物显示生物活性浓度低于大约10μM。在所用的检测方案中，有一些本发明的范围内的化合物没有显示活性。可以确认这些化合物在不同的检测方案中将显示活性。例如，一些化合物，其中R¹为：

在检测浓度下不显示活性。

                实施例57-210下述通式的化合物

用类似于实施例40的那些方法制备，其中R¹和R²在下表4中定义。在表4中，R¹栏中的数字指上面例举的R¹基团的通式号。在表4中，R²为-C(O)R⁶⁵(即通式(84.0))。R²栏中的数字指上面例举的R⁶⁵基团的通式号。在表4中，标记“EX”栏指实施例号。

                                    表4

EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1
									57	201.0	(S)-110.0	58	201.0	143.0	59	201.0	147.0
60	202.0	101.0	61	202.0	103.0	62	202.0	104.0
									63	202.0	105.0	64	202.0	136.0	65	202.0	137.0
66	202.0	152.0	67	202.0	153.0	68	202.0	157.0
									69	202.0	160.0	70	202.0	161.0	71	202.0	136.0
72	203.0	101.0	73	203.0	102.0	74	203.0	103.0
									75	203.0	104.0	76	203.0	105.0	77	203.0	106.0
78	203.0	(S)-110.0	79	203.0	113.0	80	203.0	118.0
									81	203.0	120.0	82	203.0	124.0	83	203.0	125.0
84	203.0	137.0	85	203.0	143.0	86	203.0	152.0
									87	203.0	153.0	88	203.0	154.0	89	203.0	156.0
90	203.0	157.0	91	203.0	160.0	92	203.0	161.0
									--	--	--	94	204.0	101.0	95	204.0	102.0
96	204.0	103.0	97	204.0	104.0	98	204.0	105.0
									99	204.0	106.0	100	204.0	(R)-110.0	101	204.0	123.0
102	204.0	124.0	103	204.0	129.0	104	204.0	136.0
									105	204.0	137.0	106	204.0	152.0	107	204.0	154.0

108	204.0	157.0	--	--	--	--	--	--
									111	205.0	101.0	112	205.0	120.0	113	205.0	124.0
114	205.0	157.0	115	206.0	101.0	116	206.0	102.0
									117	206.0	104.0	118	206.0	105.0	119	206.0	122.0
120	208.0	125.0	121	206.0	1370	122	206.0	139.0
									123	206.0	152.0	124	206.0	157.0	--	--	--
126	207.0	101.0	127	207.0	122.0	128	207.0	137.0
									129	208.0	101.0	130	208.0	103.0	131	208.0	104.0
132	208.0	106.0	133	208.0	112.0	134	208.0	124.0
									135	208.0	137.0	136	208.0	152.0	137	208.0	153.0
138	208.0	155.0	139	208.0	157.0	140	209.0	104.0
									141	209.0	137.0	142	209.0	157.0	143	210.0	101.0
144	210.0	102.0	145	210.0	104.0	146	210.0	105.0
									147	210.0	120.0	148	210.0	124.0	149	210.0	125.0
150	210.0	136.0	151	210.0	137.0	152	210.0	149.0
									153	210.0	150.0	154	210.0	153.0	155	210.0	155.0
156	210.0	157.0	157	212.0	137.0	158	214.0	137.0
									159	214.0	148.0	160	215.0	125.0	161	216.0	124.0
162	216.0	157.0	163	(S)-217.0	101.0	164	(S)-217.0	103.0
									165	(S)-217.0	107.0	166	(S)-217.0	137.0	167	(S)-217.0	138.0
168	(S)-217.0	152.0	169	(S)-217.0	157.0	170	(S)-217.0	160.0
									--	--	--	172	(R)-217.0	122.0	173	(R)-217.0	136.0
174	(R)-217.0	137.0	175	(R)-217.0	157.0	176	(R)-217.0	161.0
									177	219.0	147.0	178	220.0	157.0	179	221.0	117.0
180	223.0	124.0	181	225.0	101.0	182	225.0	102.0
									183	225.0	103.0	184	225.0	105.0	185	225.0	106.0
186	225.0	107.0	187	225.0	108.0	188	225.0	109.0
									189	225.0	(R)-110.0	190	225.0	(S)-110.0	191	225.0	112.0
192	225.0	113.0	193	225.0	119.0	194	225.0	120.0
									195	225.0	136.0	196	225.0	137.0	197	225.0	151.0

198	225.0	152.0	--	--	--	200	226.0	106.0
									202	227.0	108.0	202	227.0	(R)-110.0	203	227.0	148.0
--	--	--	205	229.0	157.0	206	230.0	131.0
									207	230.0	137.0	208	230.0	161.0	209	231.0	137.0
210	231.0	145.0	211	231.0	157.0	--	--	--

                    实施例211-248下述通式化合物：

用类似于实施例40的方法制备，其中R¹和R²在下表5中定义。在表5中，R¹栏中的数字指上面例举的R¹基团的通式号。在表5中，R²为-CH₂C(O)R⁶⁵(即通式(86.0))。R²栏中的数字指上面例举的R⁶⁵基团的通式号。在表5中，标记“EX”栏指实施例号。

                                                  表5

EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1
									211	202.0	105.0	212	202.0	120.0	213	202.0	140.0
214	202.0	157.0	215	203.0	102.0	216	203.0	104.0
									217	203.0	120.0	218.0	203.0	124.0	219	203.0	137.0
220	203.0	138.0	221	203.0	140.0	222	203.0	153.0
									223	203.0	156.0	224	205.0	138.0	225	205.0	152.0
226	205 0	157.0	227	205.0	161.0	228	207.0	158.0
									229	208 0	120.0	230	208.0	146.0	231	208.0	157.0
232	209 0	150.0	233	209.0	161.0	--	--	--
									235	209.0	120.0	236	213.0	147.0	237	214.0	139.0
238	216.0	101.0	239	216.0	132.0	240	(S)-217.0	148.0
									241	(R)-217.0	102.0	242	(R)-217.0	103.0	243	219.0	128.0
244	221.0	125.0	--	--	--	246	226.0	103.0
									247	226.0	127.0	248	229.0	155.0	--	--	--

                    实施例249-280下述通式化合物：

用类似于实施例40的方法制备，其中R¹和R²在下面表6中定义。在表6中，R¹栏中的数字指上面例举的R¹基团的通式号。在表6中，R²为-C(O)R⁶⁵(即(84.0))。R²栏中的数字指上面例举的R⁶⁵基团的通式号。在表6中，标记“EX”栏指实施例号。

                                                表6

EX	R2(R63)	R1	EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1
									249	202.0	157.0	250	203.0	129.0	251	203.0	157.0
252	204.0	109.0	253	204.0	157.0	254	205.0	124.0
									255	210.0	154.0	256	215.0	112.0	257	(S)-217.0	106.0
258	(R)-217.0	120.0	259	(R)-217.0	143.0	260	219.0	106.0
									261	219.0	115.0	262	221.0	146.0	263	222.0	108.0
264	222.0	132.0	265	222.0	151.0	266	225.0	101.0
									267	225.0	102.0	268	225.0	103.0	269	225.0	104.0
270	225.0	106.0	271	225.0	108.0	272	225.0	(R)-110.0
									273	225.0	112.0	274	225.0	124.0	275	225 0	136.0
276	225.0	141.0	277	225.0	143.0	278	225.0	152.0
									279	225.0	157.0	280.0	228.0	101.0	--	--	--

                    实施例281-288下面通式化合物：

用类似于实施例40的那些方法制备，其中R¹和R²在下面表7中定义，在表7中，R¹栏中的数字指上面例举的R¹基团的通式号。在表7中，R²为-CH₂C(O)R⁶⁵(即通式(86.0))。R²栏中的数字指上面例举的R⁶⁵基团的通式号。在表7中，标记“EX”栏指实施例号。

                                             表7

EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1	EX	R2(R65)	R1
									281	202 0	102.0	282	202.0	151.0	283	202.0	157.0
284	203 0	157.0	285	212.0	150.0	286	(S)-217.0	105.0
									287	221.0	159.0	288	223.0	149.0	--	--	--

                    实施例289-306下面通式化合物：

可用类似于实施例40的方法制备，可得下面的化合物，其中R¹和R²在下表8中定义。在表8中，R¹栏中的数字指上面例举的R¹基团的通式号。在表8中，R²为-C(O)R⁶⁵(即(84.0))或-CH₂C(O)R⁶⁵(即(86.0))。R²栏中的数字指上面例举的R⁶⁵基团的通式号。在表8中，标记“EX”栏指实施例号。

                        表8

EX	R2(-C(O)R65)(R65)	R2(-CH2C(O)R65)(R65)	R1
				289	203.0	--	124.0
290	204.0	--	121.0
				291	204.0	--	122.0
292	204.0	--	125.0
				293	206.0	--	136.0
294	217.0	--	125.0
				295	217.0	--	157.0
296	225.0	--	142.0
				297	228.0	--	125.0
298	228.0	--	109.0
				299	--	209.0	136.0
300	--	209.0	137.0
				301	--	225.0	140.0
302	--	225.0	141.0

检测

在一些检测中，FPT IC₅₀(法尼基蛋白转移酶的抑制，体外酶检测)用WO 95/10516中描述的方法测定。COS细胞IC₅₀(基于细胞的检测)和细胞簇检测用WO 95/10516描述的方法检测。GGPT IC₅₀(牻牛儿基蛋白转移酶，体外酶检测)和体外肿瘤活性可用WO 95/10516公开的方法测定。

在一些检测中，抑制法尼基蛋白转移酶的检测用测量[³H]法尼基从[³H]法尼基焦磷酸转移到生长素化Ras-多肽(生物素-KKSKTKCVIM)测定每个检测的96-井板都用下面描述的条件。

检测缓冲液，40mM Hepes，pH7.5；5mM二硫苏糖醇；20mM氯化镁和0.01(v/v)％Igepal非离子洗涤剂制备。

A SPA(scintillation proximity assay)珠的悬浮液，用含有50mgStreptavidin SPA珠(Amersham Life-Science)悬浮在2.5ml PBS(磷酸缓冲的生理盐水)中制备。在进行检测之前立即制备终止溶液，该终止溶液用含有480μl SPA珠悬浮液与6720μl含有250mM EDTA(pH8.0)和0.5％牛血清白蛋白(组分V，96-99％白蛋白)的溶液混合即得。

在一些测定FPT IC₅₀的检测中，用480μl检测缓冲液和3052.8μl水制备检测混合物。该混合物搅动至均匀，加入48μl Ras多肽。搅动该混合物，加入15.36μl FPP和3.84μl〔³H〕FPP，再搅动混合物。然后将37.5μl该检测混合物在2.5μl被检测化合物的DMSO溶液(按检测浓度配制)加到Costar聚丙烯U型底部微量滴定板的每个井中。该板在37℃进行声处理15分钟，然后在板振荡器上振摇15分钟，用BeckmanBiomek 2000将10μl酶(重组人法尼基蛋白转移酶)加至每个井中。该板在室温下孵育20分钟，然后用75μl的终止溶液淬火。然后用Beckman Biomek 2000将每个井中的100μl淬火的反应混合物转移到Wallac不交叉的微量滴定板上。在Wallac 1450 Microbefa加液闪计数仪上测量放射性。计算相对于没有抑制的空白的百分抑制率。

在一些检测中，用480μl检测缓冲液，3052.8μl水和240μl DMSO制备检测混合物，测定法尼基转移酶的抑制，该组合物搅动至均匀，加入48μl Ras多肽。搅动该混合物，加15.36μl FPP和3.84μl〔³H〕FPP，再搅动混合物。然后将40μl该检测混合物加到Costas聚丙烯U型底部微量滴定板的每个井中，板的每个井中都含有被检测化合物的干燥样品。该板在37℃进行声处理15分钟，然后在板振荡器上振摇15分钟。用Beckman Biomek 2000将10μl酶(重组人法尼基蛋白转移酶)加至每个井中。该板在室温下孵育20分钟，然后用75μl终止溶液淬火。然后用Beckman Biomek 2000将每个井中的100μl淬火的反应混合物转移到Wallac不交叉微量滴定板上。用Wallac 1450 Microbefa加液闪计数仪上测量放射性。计算相对于没有抑制的空白的百分抑制率。

用上面的方法得到下面的结果：

被测化合物	FPT抑制IC50(μM)	RAS处理的COS活性抑制IC50(μM)	细胞生长抑制MAT检测
					肿瘤细胞IC50(μM)	正常细胞IC50(μM)
			实施例1	＞100			----	----	----
实施例20，步骤B	0.01-10	----			----	----
			实施例21，步骤B	0.01-10			----	----	----
实施例30	0.01-10	0			＞50	＞50
			实施例31	0.01-10			0	12.5	18
实施例32-A	0.01-10	----			----	----
			实施例32-B	0.01-10			----	----	----
实施例32-C	0.01-10	----			----	----
			实施例33	0.01-10			----	----	----
实施例34	0.01-10	----			----	----
			实施例36	0.01-10			0.01-10	1.6	＞25
实施例37，步骤C	0.01-10	0.01-10			3.1	18
			实施例38	0.01-10			0.01-10	----	----
实施例39，步骤B	0.01-10	----			----	----
			实施例39，步骤C	0.01-10			0.10-10	＜1.6	＞25
实施例41	0.01-10	----			----	----
			实施例43	0.01-10			----	----	----
实施例44	0.01-10	----			----	----
			实施例46	0.01-10			----	----	----
实施例47	0.01-10	----			----	----
			实施例48	10-100			----	----	----
实施例50	0.01-10	----			----	----
			实施例51	0.01-10			----	----	----
实施例54	0.01-10	----			----	----
			实施例55	0.01-10			----	----	----
实施例56	0.01-10	----			----	----
			实施例56A	＞100			----	----	----

用本发明描述的化合物，惰性的药用可以接受的载体，制备药物组合物可以是固体，也可以是液体。固体形式制剂包括粉剂，片剂，分散颗粒利，胶囊，扁囊剂和栓剂。粉剂和片剂可由大约5％至大约70％活性成分组成。适宜的固体载体是技术人员已知的，例如，碳酸镁，硬脂酸镁，滑石，蔗糖，乳糖。片剂，粉剂，扁囊剂和胶囊可作为适宜于口服的固体剂型。

制备栓剂时，低熔点石蜡，例如脂肪酸甘油酯或可可油的混合物先熔化，然后将活性成分通过搅拌均匀地分散在里面。然后将熔化的均匀的混合物倾到合适尺寸的模具中，冷却，固化。

液体形式制剂包括溶液剂，悬浮剂和乳剂。可以提到的例子有用于非肠道注射的水或水-丙烯甘醇溶液。

液体形式制剂还包括用于鼻内给药的溶液。

气雾剂适宜吸入，可包括溶液和粉末型固体，它可与药用可以接受的载体，例如与惰性压缩气体组合。

还包括的一些固体形式制剂有在使用之前倾向于很快转变为或者口服，或者非肠道给药的液体剂型的制剂。这些液体形式包括溶液，悬浮液和乳剂。

本发明的化合物也可以透皮释放。透皮组合物可以是膏剂、洗剂、气雾剂和/或乳剂，可以是在技术上适合于本目标的包括基质或贮器型的透皮膏药。

优选地，化合物用于口服。

优选地，药物制剂是单位剂量形式。在这种形式中，制剂分成含有适当量活性成分的单位剂量，例如，达到需要目的的有效量。

制剂的活性化合物单位剂量可以是变化的，从大约0.1mg变或调到1000mg，更优选地根据特殊应用，从大约1mg到300mg。

使用的实际剂量可以根据病人的需要和治疗病情的严重性变化。根据特殊情形确定合适的剂量是技术人员的事。通常，开始治疗用不高于化合物的最佳剂量的小剂量。随后，小量多次增加剂量，直到在这种情形下达到最佳疗效。为了方便，需要时全天剂量可分开，在一天内分次服用。

本发明的化合物和药用可以接受的它们的盐的服用的量和次数根据治疗的临床医生考虑多种因素的判断调节，例如，根据病人的年龄。病情和体重，以及治疗症状的严重性加以调节。典型推荐剂量方案是每天口服10mg到2000mg，优选的为每天10到1000mg，分成2到4次剂量阻断肿瘤生长。该化合物在服用剂量范围内是非毒性的。

下面是含本发明化合物的药用剂型的例子。本发明在它的药用组合物方面的范围不受所提供的例子限制。

            药物剂量形式实施例

                实施例A

                 片剂

No.	成分	mg/片	mg/片
				1.	活性化合物	100	500
2.	乳糖USP	122	113
				3.	玉米淀粉，食品级，10％纯净水糊状物	30	40
4.	玉米淀粉，食品级	45	40
				5.	硬脂酸镁	3	7
总  量		300	700

生产方法

在适宜的混合器中将上面条款Nos.1和2混合10-15分钟。将该混合物与上面条款No.3制粒。如果需要，通过粗筛(例如，1/4″，0.63cm)压碎潮湿的颗粒。干燥潮湿颗粒。如果需要，干燥的颗粒过筛并与上条款No.4混合10-15分钟。加入上条款No.5，混合1-3分钟。在适合的压片机中将混合物压成适宜尺寸和重量的片。

                   实施例B

                    胶囊

No.	成分	mg/胶囊	mg/胶囊
				1.	活性化合物	100	500
2.	乳糖USP	106	123
				3.	玉米淀粉，食品级	40	70
4.	硬脂酸镁NF	7	7
				总    量		253	700

生产方法

在适宜的掺合机中，将上面条款Nos.1、2和3混合10-15分钟。加入上面条款No.4，混合1-3分钟。在合适的填充胶囊机中将混合物填充到两片合一粒的硬明胶胶囊内。

虽然连同前面所述的特定的具体化已经描述了本发明，但对于技术人员来讲很明显会有很多例外，修饰和改变。但所有这些例外，修饰物和改变都属于本发明的精神和范围之内。

Claims (19)

1.下述通式的化合物

其中：

A和B独立选自H，卤素或C₁-C₆烷基；

Z为N或CH；

W为CH、CH₂、O或S，其中连到W的虚线代表当W为CH时存在双键；

X为C、CH或N，其中X与三环系统连接的虚线代表当X为C时存在双键；

R¹选自：

1)具有下述通式的基团：

或它们的二硫化物二聚体；

2)具有下述通式的基团：

3)具有下述通式的基团：

其中W、A和B的定义如上所述。

4)具有下述通式的基团：

5)具有下述通式的基团：其中R⁸⁰选自H或-C(O)OR⁹⁰，其中R⁹⁰为C₁-C₆烷基，和R⁸⁵为C₁-C₆烷氧基；和

6)具有下述通式的基团：

其中：(a)T选自：

-SO₂-，或一根键；

(b)x为0、1、2、3、4、5或6；

(c)每一个R^a和每一个R^b独立选自H、芳基、烷基、烷氧基、芳烷基、氨基、烷基氨基、杂环烷基、-COOR⁶⁰、-NH{C(O)}_zR⁶⁰(其中z为0或1)，或-(CH)_wS(O)_mR⁶⁰(其中w为0、1、2或3，和m为0、1或2)；或R^a和R^b一起代表环烷基，＝N-O-烷基，＝O或杂环烷基，条件是在同一个碳上，当R^b为选自烷氧基、氨基、烷基氨基或-NH{C(O)}_zR⁶⁰时，R^a不选自烷氧基、氨基、烷基氨基或-NH{C(O)}_zR⁶⁰；当T为单键时，对于含R^a和R^b的第一个碳，条件是，R^a和R^b不选自烷氧基、烷氨基、氨基或-NHR⁶⁰；和

(d)R⁹²可以代表H，烷基、芳基、芳氧基、芳硫基、芳烷氧基、芳烷基、杂芳基，或杂环烷基；

R⁶⁰代表H、烷基、芳基或芳烷基；

R⁴为H或C₁-C₆烷基；

R²选自H、-C(O)OR⁶、-C(O)NR⁶R⁷、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基，取代的(C₁-C₈)烷基，取代的(C₂-C₈)烯基，取代的(C₂-C₈)炔基，其中所述的取代的基团有1个或多个取代基，这些取代基选自：

1)芳基、芳烷基、杂芳烷基、杂芳基、杂环烷基、B-取代的芳基、B-取代的芳烷基、B-取代的杂芳烷基、B-取代的杂芳基或B-取代的杂环烷基，其中B选自C₁-C₄烷基，-C(CH)_nOR⁶、-(CH₂)_nNR⁶R⁷和卤素；

2)C₃-C₆环烷基；

3)-OR⁶；

4)-SH或-S(O)_tR⁶；

5)-NR⁶R⁷；

6)-N(R⁶)-C(O)R⁷；

7 )-N(R⁶)-C(O)NR⁷R¹²；

8)-O-C(O)NR⁶R⁷；

9)-O-C(O)OR⁶；

10)-SO₂NR⁶R⁷；

11)-N(R⁶)-SO₂-R⁷；

12)-C(O)NR⁶R⁷；

13)-C(O)OR⁶；和条件是R¹为D时R²不为H，以及当R¹为D和R²为C₁-C₈烷基时，所述烷基的取代基不为3)、4)、5)、9)或13)的基；D为-C(O)-CH₂-R⁵、-C(O)-O-R⁵或-C(O)-NH-R⁵，其中R⁵为吡啶基，吡啶基N-氧化物，或下述通式的哌啶基

其中R¹¹代表H，C₁-C₆烷基，卤代烷基或-C(O)-R⁹，其中R⁹为C₁-C₆烷基，C₁-C₆烷氧基或-NH(R¹⁰)，其中R¹⁰为H或烷基，或-C(O)-R⁹基团代表天然存在的氨基酸的酰基；

R⁶、R⁷和R¹²独立选自H、C₁-C₄烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环烷基、取代的(C₁-C₄)烷基、取代的(C₃-C₆)环烷基、取代的芳基、取代的芳烷基、取代的杂芳基、取代的杂芳烷基或取代的杂环烷基，其中所述的取代的基团有一个或多个取代基，这些取代基选自：C₁-C₄烷氧基、芳烷基、杂芳烷基、-NO₂、C₃-C₁₀烷氧烷氧基、C₃-C₆环烷基、芳基、-CN、硝基苯基、亚甲二氧基-苯基、杂芳基、杂环烷基、卤素、-OH、-C(O)R¹⁴、-C(O)NR⁶R⁷、-N(R⁶)C(O)R¹⁴、-S(O)_tR¹⁴或-NR⁹⁵R¹⁵；所述的R⁶、R⁷或R¹²直接与杂原子连接时，R⁶、R⁷和R¹²不为-CH₂OH或-CH₂NR⁹⁵R¹⁵，进一步的条件是，对于基团4)和9)，R⁶不为H；对于基团6)，R⁷不为H；

当R⁶和R⁷连在同一个氮原子上时，R⁶和R⁷与和它们连接的氮原子一起随意形成5至7元杂环烷基环，该环随意含有O、NR⁶或S(O)_t，其中t为0、1或2；

当R⁷和R¹²连在同一个氮原子上时，R⁷和R¹²与和它们连接的氮原子一起随意形成5至7元杂环烷基环，该环随意含有O、NR⁶或S(O)_t，其中t为0、1或2；

R⁹⁵和R¹⁵独立地为H、C₁-C₄烷基或芳烷基；

R¹⁴为C₁-C₄烷基、芳基或芳烷基；

n为0、1、2、3或4；和

t为0、1或2；或药用可以接受的它们的盐。

2.权利要求1的化合物，其中对于R¹：

(a)T选自-C(O)-、-SO₂或-C(O)-C(O)-；

(b)x为0、1或2；

(c)R^a和R^b独立选自：(1)H；(2)NH{C(O)}_zR⁶⁰，其中z为0或1，R⁶⁰为烷基；(3)-(CH)_wS(O)_mR⁶⁰，其中w为0、1、2或3，m为0、1或2，R⁶⁰为烷基；(4)烷基；或(5)C₁-C₆烷氧基；或(6)R^a和R^b一起代表环烷基；和

(d)R⁹²选自(1)H；(2)芳基；(3)取代的芳基；(4)芳烷基；(5)芳氧基；(6)芳硫基；(7)烷基；(8)杂芳基；(9)取代的杂芳基；(10)取代的杂环烷基；或(11)取代的烷基；和

其中R²为选自：(1)-C(O)NR⁶R⁷，和(2)取代的烷基，其中取代基为-C(O)NR⁶R⁷；和

其中对于所述R²基团，R⁶和R⁷选自：(1)H；(2)取代的烷基；(3)烷基；(4)环烷基；(5)杂芳烷基；和(6)芳烷基，其中所述芳基是取代的。

3.权利要求1的化合物，其中R¹为基团D，其中D为-C(O)-CH₂-R⁵、-C(O)-O-R⁵或-C(O)-NH-R⁵，其中R⁵为吡啶基，吡啶基N-氧化物，

下述通式的哌啶基

其中R¹¹代表H、C₁-C₆烷基，卤代烷基或-C(O)-R⁹，其中R⁹为C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基或-NH(R¹⁰)，其中R¹⁰为H或烷基，或-C(O)-R⁹基团代表天然存在的氨基酸的酰基。

4.权利要求1的化合物，其中R¹为选自下列通式的基团：101.0，102.0，103.0，104.0，105.0，106.0，107.0，108.0，109.0，110.0，112.0，113.0，115.0，117.0，118.0，119.0，120.0，121.0，122.0，123.0，124.0，125.0，127.0，128 0，129.0，131.0，132.0，135.0，136.0，137.0，138.0，139.0，140.0，141.0，142.0，143.0，145.0，146.0，147.0，148.0，149.0，150.0，151.0，152.0，153.0.154.0，155.0，156.0，157.0，158.0，159.0，160.0，或161.0。

5.权利要求1的化合物，其中R¹选自：

6.权利要求1的化合物，其中R²为下述通式的基团：其中R⁶⁵选自下列通式的基团：201.0，202.0，203.0，204.0，205.0，206.0，207.0，208.0，209.0，210.0，211.0，212.0，213.0，214.0，215.0，216.0，217.0，218.0，219.0，220.0，221.0，222.0，223.0，224.0，225.0，226.0，227.0，228.0，229.0，230.0，或231.0；或

R²选自下列通式的基团：CH₃(CH₂)₃-、C₆H₅CH₂-、

7.权利要求4的化合物，其中R²为下列通式的基团：其中R⁶⁵选自下列通式的基团：201.0，202.0，203.0，204.0，205.0，206.0，207.0，208.0，209.0，210.0，211.0，212.0，213.0，214.0，215.0，216.0，217.0，218.0，219.0，220.0，221.0，222.0，223.0，224.0，225.0，226.0，227.0，228.0，229.0，230.0，或231.0。

8.权利要求1-7的任何化合物，其中A选自H或卤素，B为卤素，和Z为N。

9.权利要求8的化合物，其中A为H，B为Cl，或A为Br，B为Cl。

10.权利要求9的化合物，其中W为-CH₂。

11.选自下列实施例化合物的化合物：20步骤B、21步骤B、30、31、32、32-A、32-B、32-C、33、34、36、37、38、39步骤B、39步骤C、41、43、44、46、47、50、51、54、55或56步骤B。

12.抑制细胞不正常生长的方法，包括服用含有有效量的权利要求1的化合物。

13.权利要求12的方法，其中被抑制细胞是表达活化的ras瘤形成(oncogene)的肿瘤细胞。

14.权利要求12的方法，其中抑制的细胞是胰的肿瘤细胞、肺癌细胞、骨髓性白血病肿瘤细胞、甲状腺滤泡的肿瘤细胞、脊髓发育不良的肿瘤细胞、表皮癌肿瘤细胞、膀胱癌肿瘤细胞，或结肠肿瘤细胞。

15.权利要求12的方法，其中通过抑制剂法尼基蛋白转移酶，抑制发生的细胞不正常生长。

16.权利要求12的方法，其中抑制的是肿瘤细胞，该肿瘤细胞中Ras蛋白被活化是Ras基因以外的基团中的癌基因突变的结果。

17.抑制细胞的不正常生长的药用组合物，该组合物包括有效量的权利要求1的化合物与药用可以接受的载体的结合。

18.权利要求1的化合物在抑制细胞的不正常生长中的应用。

19.权利要求1的化合物在生产抑制细胞的不正常生长的药物中的应用。