CN1183258C - 一种生产大豆蛋白寡肽的方法 - Google Patents
一种生产大豆蛋白寡肽的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1183258C CN1183258C CNB03110987XA CN03110987A CN1183258C CN 1183258 C CN1183258 C CN 1183258C CN B03110987X A CNB03110987X A CN B03110987XA CN 03110987 A CN03110987 A CN 03110987A CN 1183258 C CN1183258 C CN 1183258C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydrolysis
- protease
- soybean
- soybean protein
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 title claims abstract description 17
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 title claims abstract description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title abstract description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title abstract description 18
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 title abstract description 12
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 title abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 49
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 44
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 24
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 9
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 108091005502 Aspartic proteases Proteins 0.000 claims description 20
- 102000035101 Aspartic proteases Human genes 0.000 claims description 20
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 20
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 17
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims description 14
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 abstract description 17
- 239000004365 Protease Substances 0.000 abstract description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 5
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 abstract description 3
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 abstract description 3
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 abstract description 3
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract 2
- CAXNYFPECZCGFK-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-2-pyridin-2-ylacetonitrile Chemical compound C=1C=CC=NC=1C(C#N)C1=CC=CC=C1 CAXNYFPECZCGFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 abstract 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 abstract 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 abstract 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 13
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 13
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 description 9
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 4
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- -1 papoid Proteins 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010266 Sephadex chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 2
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 2
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 2
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 2
- 101800000263 Acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006035 Tryptophane Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000005297 material degradation process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007483 microbial process Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 108010043535 protease S Proteins 0.000 description 1
- 230000007065 protein hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000012066 reaction slurry Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000004454 trace mineral analysis Methods 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于酶催化技术领域。主要涉及酶解大豆蛋白制备寡肽(小于10个氨基酸的肽)的方法。其主要技术特征是，以大豆浓缩蛋白、大豆分离蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种为原料，在不外加碱的pH值渐变条件下，利用碱性蛋白酶与酸性蛋白酶或/和中性蛋白酶的协同水解作用得到寡肽。蛋白酶协同作用水解条件为温度30-70℃，时间2-24小时。底物浓度20-100克/升。本发明效果和优点是整个水解过程中不用向水解液中补加碱溶液，因此简化了产品的下游处理工艺，并有利于降低寡肽的生产成本。
Description
技术领域
本发明属于酶催化技术领域，提供了一种在蛋白质水解过程中不加碱维持水解液的PH值，而是利用一种枯草杆菌碱性蛋白酶与另一种黑曲酶酸性蛋白酶的配合，从大豆蛋白出发制备小于10个氨基酸的寡肽的方法。
背景技术
近年来研究发现，人体对肽和氨基酸的吸收是通过两套完全不同的机制进行的，寡肽可以被人体直接吸收。寡肽水解物除了和氨基酸一样能为人体提供氮营养源之外，还因为其中的某些寡肽具有生理活性而表现出保健功能。
目前，大豆蛋白水解方法主要有酸解法和酶解法两种。酸解法的弊端是容易破坏色氨酸和一些羟氨酸，难以控制水解程度，水解产物以氨基酸为主，不利于寡肽制备。相比之下，酶解法条件缓和，能够克服酸解法的缺点。以下专利披露了酶解大豆蛋白的具体方法：CN1168770A(1997)披露了一种用胃蛋白酶单酶水解水解大豆蛋白的方法；CN1344138(2002)披露了一种用Amano SciyakuK.K.生产的Protease S单酶水解大豆蛋白的方法；CN1067226C(2001)也披露了一种用单酶水解大豆蛋白的方法，所使用的单酶选自1398蛋白酶(枯草杆菌中性蛋白酶)、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶。单酶水解的问题在于水解效率低。为了提高水解效率，有时需要向水解液中加入酸性或碱性物质，调节水解液的PH值，使之有利于酶解反应进行。然而，调节pH值所引入的酸性或碱性物质导致水解物中产生盐类杂质，必须在下游处理中采用复杂的脱盐除杂操作，这将增加现有方法实施的难度和产品的成本。CN1323535A(2001)披露了一种用植物混合蛋白酶(试剂酶、木瓜蛋白酶、凤梨酶等)水解大豆蛋白，制备小分子肽和氨基酸的方法。该方法由于采用了能在不同pH值下起作用的混合酶，因此可以在不调节水解液pH值的条件下得到较好的水解效率。但是，该发明使用的混合酶来源于植物，植物酶价格高，不利于工业化推广。CN1034223A(1989)也披露了一种用混合蛋白酶(选自539号及3350号酸性蛋白酶、3942号及166号和1389号中性蛋白酶、2709号碱性蛋白酶)水解大豆蛋白的方法。其中，3350号酸性蛋白酶是黑曲酶酸性蛋白酶，而2709号碱性蛋白酶是地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶。该发明所采用的是工业微生物蛋白酶，价格相对低廉，但是在该发明所采用的混合酶的水解作用下，大豆蛋白水解物中的氨基氮含量高达76.44％。氨基氮含量高，氨基酸含量也高，因此大豆蛋白在该发明所采用的混合酶的水解作用下最终主要变成了复合氨基酸。因此该发明是一种生产复合氨基酸的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种不向水解液中加碱，水解液的PH值在水解过程中自发下降情况下，利用廉价酶水解大豆蛋白制备寡肽的方法。经研究发现这一目的可以通过一种枯草杆菌碱性蛋白酶与另一种黑曲霉酸性蛋白酶配合使用实现：首先利用枯草杆菌碱性蛋白酶水解大豆蛋白，水解液的PH值随着酶解反应的进行和游离羧基的数量增多开始逐渐下降。当水解液的PH值低于碱性蛋白酶所要求的下限值，即开始呈现弱酸性时，上述碱性蛋白酶的水解活性受到抑制，但黑曲霉酸性蛋白酶被激活。于是，蛋白质在黑曲霉酸性蛋白酶的作用下继续水解。随着打开肽键数量的继续增多，水解液的PH值继续下降，黑曲霉酸性蛋白酶可以保持高水解活性。
本发明的技术方案按如下所述实现：
向带有机械搅拌装置的普通发酵罐中加入适量自来水，并按照底物浓度要求向其中加入一定量的大豆蛋白。启动机械搅拌浆，使之以适当的速度搅动浆液，同时通过水夹套或/和水蒸汽直接接触将反应浆液温度提到指定温度。用pH计和固定于发酵器内的pH计电极测定水解反应之前的浆液酸碱度。然后，向发酵罐中加入蛋白酶，开始水解反应。最后，用pH计监测水解液酸碱度的变化，并通过采样(搅拌均匀的水解液)分析不同时刻的原料降解率、蛋白质水解度和水解物中肽分子量分布。水解反应结束之后，将水解液在95℃煮沸5-10分钟使蛋白酶变性失活，终止反应。
本发明的核心是蛋白酶的选择和使用，影响本发明实施效果的水解条件包括底物浓度、水解温度和时间。
蛋白酶根据使用时所要求的pH值条件不同，可以划分为碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和中性蛋白酶。
本发明使用的蛋白酶包括一种碱性蛋白酶。常见碱性蛋白酶如：碱性霉菌蛋白酶(来源于米曲霉，使用pH值6.5-8.5，使用温度45-60℃)，碱性细菌蛋白酶(来源于地衣芽孢杆菌，使用pH值6.5-8.5，使用温度55-70℃)，Alcalase碱性细菌蛋白酶(来源于枯草杆菌，使用pH值6.5-8.5，使用温度55-70℃)。由于Alcalase碱性蛋白酶是一种广泛应用于食品工业的商品酶，价格低廉，因此本发明选择来源于枯草杆菌的Alcalase碱性蛋白酶。
本发明中使用的蛋白酶还包括一种酸性蛋白酶。常见酸性蛋白酶如：酸性霉菌蛋白酶(来源于黑曲霉，使用pH值2-5.0，使用温度45-55℃)，胃蛋白酶(来源于动物胃，使用pH值1.0-3.0，使用温度30-40℃)。由于来源于黑曲霉的酸性霉菌蛋白酶与胃蛋白酶相比价廉易得，因此本发明选择来源于黑曲霉的酸性霉菌蛋白酶。
在本发明中，碱性蛋白酶要与酸性蛋白酶配合使用。配合使用的方式包括两种：一种是一次性加入，另一种是分步加入。其中，在分步加入方式中，首先在水解反应开始之前向水解液中加入来源于枯草杆菌的Alcalase碱性蛋白酶，然后在水解反应开始之后1.0小时，再向水解液中加入来源于黑曲霉的酸性霉菌蛋白酶。
为了充分发挥碱性蛋白酶与酸性蛋白酶的催化水解作用，碱性蛋白酶和酸性蛋白酶的投放量(在本发明中表示为酶溶液与底物比，或酶固体占底物重量的百分率)可根据其活力不同，由这一领域中的工程师用惯用的方法确定。水解温度的选择主要取决于酶的使用温度。在碱性蛋白酶与酸性蛋白酶一次性加入方式中，水解温度应根据使用温度最低的酶来定。在碱性蛋白酶与酸性蛋白酶分步加入的方式中，水解温度可根据不同水解阶段所使用的酶的允许使用温度来调整。根据本发明，水解温度的选择范围为30-70℃。
本发明可采用任何大豆蛋白为原料(底物)，如大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕和豆饼等。其中，优选大豆分离蛋白和大豆浓缩蛋白。根据本发明，底物浓度的选择范围为20-100克/升。底物浓度太高时，酶的水解活性低，难以得到满意的底物降解率。另一方面，底物浓度太低，虽然酶的水解活性高，但会增加下游处理过程中蒸发、浓缩水解液的难度。当把适量的大豆分离蛋白或脱脂大豆粉在搅拌下加入自来水中并加热到如上所述的水解温度范围时，大豆蛋白浆液的初始pH值能达到7-7.5，能够满足碱性蛋白酶对酸碱度的要求。
根据本发明，大豆蛋白在以上所述的条件下水解的适宜时间范围为2-24小时。水解时间太短时，不利于得到满意的底物降解率和蛋白质水解度。相反，如果水解时间过长，则不但底物降解率和蛋白质水解度增加不明显，而且水解液容易在微生物作用下变质。
底物降解率定义为被水解的大豆蛋白原料重量占投料的大豆蛋白原料重量的百分比；水解度定义为在水解过程中打开的肽键数量占蛋白质分子总肽键数量的百分比。
降解率的测定方法如下：水解液在4000r/min下离心10min，把上层清液和固体物分离，将固体不溶物在110℃下干燥至恒重，称重。然后按下式计算底物降解率：
其中，大豆蛋白投料量折算成干基。大豆蛋白的含水量是在110℃下干燥至恒重后测定的。底物降解率越高，表示原料的单程利用率高。
蛋白质水解度的测定采用甲醛滴定法，具体测定方法如下：将水解液在4000r/min下离心10min，取5ml上层清液，用0.1M的NaOH溶液滴定到pH＝8.2，加入5ml 37％的甲醛溶液(所用甲醛溶液先用NaOH滴定到pH＝8.2)，再用0.1M的NaOH滴定到pH＝8.2。记录加入甲醛后把溶液滴定到pH＝8.2所耗碱量。pH值测量使用精密pH计。然后按照下式计算蛋白质的水解度：
其中，大豆蛋白彻底水解的方法是将大豆蛋白在6M HCl中于105-110℃下水解24个小时。蛋白质的水解度高，表示水解物的平均分子量小。
水解物中寡肽的含量可以用产品分子量分布测定。产品分子量分布采用葡聚糖凝胶层析法测定：取上述水解物的离心上清液1ml上凝胶柱(SephedaxG-25)，洗脱液为pH值为8.0的磷酸盐缓冲溶液，用蠕动泵(DESAGA)控制流速为17.3ml/h，流出液用样品馏分收集器(SF-2120)收集，每管收集体积为1.5ml。然后用紫外光谱测定280nm处的吸光度，并做出吸光度对馏分的关系图。用分子量标准物标定水解液的分子量分布。
本发明的效果和益处是，根据本发明，大豆蛋白原料的降解率可以达到70-90％，蛋白质的水解度可以达到20％以上，水解物中小于10个氨基酸的寡肽可以达到40％以上。本发明整个水解过程中不用向水解液中补加碱溶液，因此简化了产品的下游处理工艺，另外，本发明用来源于枯草杆菌的Alcalase碱性蛋白酶与来源于黑曲霉的酸性霉菌蛋白酶配合水解大豆蛋白，不但酶的成本低，而且保证了水解的高效率，特别是，采用上述两种酶的配合有利于使水解停留在寡肽阶段，因此有利于生产寡肽。
具体实施方式
以下详细叙述本发明的具体实施例
实施例1(对比实施例)
将12g大豆浓缩蛋白(干基重量)和200ml自来水加入带有水夹套的发酵罐中，在搅拌下将发酵罐内的温度提高到60℃。通过pH计测得发酵罐内料液的pH值约为7.0。然后，向发酵罐内加入240μl Alcalase碱性蛋白酶(2.4L，标示活力为2.4AU/克，丹麦NOVO公司出品)，在不断搅拌下开始水解。在本例中，底物浓度为60克大豆分离蛋白/升水，酶与底物的比为20μl Alcalase碱性酶(2.4L)/克大豆分离蛋白。总水解时间为24小时。在水解过程中对pH值、底物降解率和蛋白质水解度进行跟踪分析。分析结果为：水解液pH值在水解开始1小时后达到6.3-6.4并停止下降。底物降解率和蛋白质水解度也在水解开始1小时后分别达到约50％和约11％并停止增加。
实施例2
重复实施例1，但在加入240μl Alcalase碱性蛋白酶的同时，加入2％(以底物干基重量为基准)的黑曲霉酸性蛋白酶(酶活力3000u/g)。分析结果为：水解液pH值在水解时间内持续下降，水解进行24小时后达到约5.2。底物降解率在16-18小时后达到最高值约76％，此后变化不大，蛋白质水解度在考察时间内持续增加，当水解时间达到24小时时，水解度增加到约28％。用葡聚糖凝胶层析法测得，在水解24小时所得到的水解物中小于10个氨基酸的寡肽约占肽含量的70％。
实施例3
重复实施例2，但黑曲霉酸性蛋白酶在Alcalase碱性蛋白酶加入1小时之后才加入发酵罐，并将发酵罐的温度调整为55℃。则水解24小时的结果为：水解液pH值约5.1，底物降解率约为80％，蛋白质水解度约为25％。
实施例4
重复实施例2，但大豆蛋白原料改为大豆分离蛋白。则水解24小时的结果为：水解液pH值约4.5，底物降解率约为92％，蛋白质水解度约为30％。
Claims (1)
1.一种生产大豆蛋白寡肽的方法，是从大豆浓缩蛋白或者大豆分离蛋白出发利用蛋白酶催化水解制备小于10个氨基酸的肽的方法，所说的酶水解条件为温度30-70℃，时间2-24小时，底物浓度20-100克/升，其特征在于，水解过程中不向水解液中加碱维持PH值恒定，而是利用水解过程中水解液PH值自发下降的特点，以及一种枯草杆菌碱性蛋白酶与另一种黑曲霉酸性蛋白酶的配合对大豆蛋白原料进行水解，其中，枯草杆菌碱性蛋白酶与黑曲霉酸性蛋白酶的投料方式包括两种，一种是在水解开始时一次性加入水解液中，另一种是在水解开始时首先加入枯草杆菌碱性蛋白酶，然后当水解进行1.0小时后，再加入黑曲霉酸性蛋白酶。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB03110987XA CN1183258C (zh) | 2003-01-30 | 2003-01-30 | 一种生产大豆蛋白寡肽的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB03110987XA CN1183258C (zh) | 2003-01-30 | 2003-01-30 | 一种生产大豆蛋白寡肽的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1439720A CN1439720A (zh) | 2003-09-03 |
| CN1183258C true CN1183258C (zh) | 2005-01-05 |
Family
ID=27796803
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB03110987XA Expired - Fee Related CN1183258C (zh) | 2003-01-30 | 2003-01-30 | 一种生产大豆蛋白寡肽的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1183258C (zh) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101870737B (zh) * | 2010-05-13 | 2012-07-04 | 亳州市铜关粉皮厂 | 从绿豆淀粉废渣液中提取氨基酸复合制剂的方法 |
| CN102115774B (zh) * | 2010-11-30 | 2013-07-10 | 华东理工大学 | 一种酶法制备植物多肽的方法 |
| CN102048026B (zh) * | 2010-12-06 | 2012-12-05 | 中南林业科技大学 | 一种功能性饲料用添加剂油茶粕蛋白多肽的制备方法 |
| CN102511648A (zh) * | 2011-12-28 | 2012-06-27 | 天津滨海诺奥酶工程技术有限公司 | 一种大豆多肽粉的生产方法 |
| CN102771622A (zh) * | 2012-07-06 | 2012-11-14 | 华南理工大学 | 一种大豆蛋白的酶解方法 |
| CN102732591B (zh) * | 2012-07-12 | 2013-11-20 | 山西大学 | 一种具有保肝和抗氧化作用的大豆乳清多肽的制备方法 |
| CN102987275B (zh) * | 2012-12-28 | 2018-06-01 | 长春大学 | 一种高生物效价的大豆低聚糖肽的制备方法 |
| CN104073540B (zh) * | 2014-07-05 | 2016-08-24 | 广东润科生物工程有限公司 | 一种提高蛋白质利用率的多肽生产方法 |
| CN105368903A (zh) * | 2015-11-25 | 2016-03-02 | 青岛康原药业有限公司 | 一种制备低分子降压肽的方法 |
| CN105613941A (zh) * | 2015-12-24 | 2016-06-01 | 珠海天香苑生物科技发展股份有限公司 | 一种易吸收复合蛋白质粉及其制备方法 |
| CN106520880A (zh) * | 2016-12-05 | 2017-03-22 | 东北农业大学 | 一种利用固定化酶脱除水酶法大豆多肽苦味的方法 |
| CN106578421A (zh) * | 2016-12-16 | 2017-04-26 | 陈石良 | 一种高品质豆粕蛋白肽的制备方法 |
| CN108477620B (zh) * | 2017-12-28 | 2021-07-09 | 武汉天天好生物制品有限公司 | 一种高溶解性大豆肽口服液及其制备工艺 |
| CN108157583B (zh) * | 2017-12-28 | 2019-01-25 | 武汉天天好生物制品有限公司 | 一种高溶解性大豆多肽及其制备工艺和应用 |
| CN111920059B (zh) * | 2020-06-28 | 2022-06-14 | 华南理工大学 | 一种大豆ace抑制肽及其制备方法和应用 |
-
2003
- 2003-01-30 CN CNB03110987XA patent/CN1183258C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1439720A (zh) | 2003-09-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1183258C (zh) | 一种生产大豆蛋白寡肽的方法 | |
| CN102719510B (zh) | 一种氨基酸发酵菌体利用方法 | |
| CN1135267C (zh) | 酶法制取大豆多肽的方法 | |
| CN103146791A (zh) | 多种蛋白酶水解蛋清蛋白的方法 | |
| CN101492663B (zh) | 一种枯草芽孢杆菌脱苦氨肽酶的发酵制备与提取的方法 | |
| US20100221387A1 (en) | Hydrolyzed corn gluten meal and methods for making the same | |
| CN1298740C (zh) | 碱法提取大米蛋白的方法 | |
| CN108130354A (zh) | 一种超声、热处理辅助双酶法制备玉米肽的方法 | |
| CN113981028A (zh) | 一种多酶协同法生产小麦低聚肽的方法 | |
| CN110846351B (zh) | 利用菌体蛋白作为原料制备的苏氨酸发酵培养基 | |
| CN104745650B (zh) | 用于改善仔猪肠道营养的结合态谷氨酰胺的制备方法 | |
| CN102046782A (zh) | 产生酪蛋白水解物的方法 | |
| CN1209465C (zh) | 一种生产胶原蛋白寡肽的方法 | |
| US20220007682A1 (en) | Method for preparing an ipp- and vpp-rich hydrolysate from wheat gluten protein by enzymatic hydrolysis | |
| Cheison et al. | Comparison of a modified spectrophotometric and the pH-stat methods for determination of the degree of hydrolysis of whey proteins hydrolysed in a tangential-flow filter membrane reactor | |
| US6495342B2 (en) | Nitrogenous composition resulting from the hydrolysis of maize gluten and a process for the preparation thereof | |
| Triki-Ellouz et al. | Biosynthesis of protease by Pseudomonas aeruginosa MN7 grown on fish substrate | |
| CN112111468B (zh) | 一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用 | |
| Musa et al. | A new continuous system of enzymatic hydrolysis coupled with membrane separation for isolation of peptides with angiotensin I converting enzyme inhibitory capacity from defatted corn germ protein | |
| CN102199648A (zh) | 两种酶依次水解鹿血蛋白获取活性肽的方法 | |
| CN1234288C (zh) | 从大豆粉中制备蛋白质水解产物的方法 | |
| CN116694712A (zh) | 一种凝胶性植物蛋白肽及其制备方法和应用 | |
| CN1864516A (zh) | 一种从酵母制备饲料添加剂的方法 | |
| CN1173042C (zh) | 微生物酶法制备d-泛醇的方法 | |
| RU2617945C2 (ru) | Способ разжижения белков зерна |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Assignee: Linyi Yuwang Vegetable Protein Co., Ltd. Assignor: Dalian University of Technology Contract fulfillment period: 2006.12.1 to 2010.12.1 contract change Contract record no.: 2008990001352 Denomination of invention: Soya protein oligopeptides production Granted publication date: 20050105 License type: Exclusive license Record date: 2008.12.4 |
|
| LIC | Patent licence contract for exploitation submitted for record |
Free format text: EXCLUSIVE LICENSE; TIME LIMIT OF IMPLEMENTING CONTACT: 2006.12.1 TO 2010.12.1; CHANGE OF CONTRACT Name of requester: LINYI YUWANG VEGETABLE PROTEIN CO., LTD. Effective date: 20081204 |
|
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20050105 Termination date: 20110130 |