CN1864516A - 一种从酵母制备饲料添加剂的方法 - Google Patents

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Abstract

一种从酵母制备饲料添加剂的方法,本发明以各种酵母乳液,包括鲜酵母乳液或由干酵母粉调配的乳液为原料,通过加氢氧化纳溶液进行稀碱法处理后,先后通过加入蛋白酶和五磷酸二酯酶进行两次酶解反应,最后将酶解液离心分离出上清液和渣浆,再将清液和渣浆分别浓缩干燥,可得到含有4种核苷酸(AMP、GMP、CMP、UMP)单体(含量达到8~24%)及蛋白水解物(含量高达50~60%)的饲料添加剂产品1和含有β-萄聚糖的饲料添加剂产品2的两种产品。

Description

一种从酵母制备饲料添加剂的方法
技术领域
本发明涉及一种从酵母原料中制取含有核苷酸单体和蛋白水解物的混合物的饲料添加剂与含β-萄聚糖的饲料添加剂的方法。
背景技术
现已公开的由酵母菌体制取核苷酸的技术有多种,如CN1370837公开了一种从啤酒废酵母中提取核苷酸的方法;CN1049521公开了一种利用酒厂废酵母生产5’核酸的方法;CN13970779公开了从味精废液中提核苷酸的方法。以上这些公开的技术均属于发酵生产酵母或从啤酒酵母等中提取核苷酸精制产品,工艺复杂,成本高。尚未见有用简单且低成本从酵母菌体直接生产含有4个核苷酸单体(AMP、GMP、UMP、CMP)、蛋白水解物以及含β-萄聚糖的饲料添加剂的报导。
发明内容
本发明的目的是提出一种使用双酶法直接从各种酵母乳液制取含有蛋白水解物(肽、氨基酸)及核苷酸和β-萄聚糖的饲料添加剂的方法。
本发明以各种酵母乳液,包括鲜酵母乳液或由干酵母粉调配的乳液为原料,原料乳液中含酵母细胞(干重)8~12%。从酵母乳液制备饲料添加剂的工艺过程如下:(1)将原料酵母乳液迅速升温至90~95℃杀酶,然后降至室温;(2)加氢氧化纳溶液,使乳液氢氧化钠浓度为0.25N,搅拌30~60分钟后加盐酸调pH至7.0~7.5,保温50~60℃;(3)取样测定乳液中的酵母细胞及核糖核酸含量;(4)根据所测定的酵母细胞含量向乳液加蛋白酶,所加入的蛋白酶为乳液中所含酵母细胞重量的0.1~0.3%,于温度50~60℃水解3~6小时,然后迅速升温至90~95℃杀酶,停止反应;(5)将上述水解液用盐酸调pH至5.5~5.8,保温63~65℃,再根据所测定的核糖核酸含量向水解液加入五磷酸二酯酶,每克核糖核酸加入2500~5000u(活力单位)五磷酸二酯酶,进行酶解,搅拌2~3小时,然后迅速升温至90~95℃杀酶;(6)将上述酶解液经离心分离出清液及渣浆,再将清液及渣浆分别干燥,其中清液干燥得含蛋白水解物和核苷酸混合物饲料添加剂,渣浆干燥得含β-萄聚糖的饲料添加剂。
在本发明的步骤(4)中,所加入的蛋白酶可为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或诺和诺德(中国)生物技术有限公司生产的Alcalase 2.4L蛋白酶,以Alcalase 2.4L蛋白酶最佳。
本发明的酵母乳液原料可采用:(1)啤酒厂沉淀酵母泥,调pH至8~9,再经洗涤得到湿酵母,将其调配成含酵母细胞(干重)8~12%的酵母乳液。
(2)白地霉压榨块调至含菌丝体(干重)8~12%的酵母乳液。
(3)将面包酵母乳液调配成含酵母细胞(干重)8~12%的酵母乳液。
(3)将热带假丝酵母乳液调配成含酵母细胞(干重)8~12%的酵母乳液。
本发明的酵母乳液原料,如采用干酵母粉调配的乳液则无需灭酶,如采用鲜酵母乳液均需经迅速升温到90~95℃灭酶。
本发明通过双酶法,能直接从酵母制取得到含有4种核苷酸(AMP、GMP、CMP、UMP)单体及蛋白水解物的饲料添加剂和含有β-萄聚糖(酵母细胞壁干燥物)的饲料添加剂两种产品。在这两种产品中,前者所含的蛋白水解物、肽类化合物和氨基酸含量高达45~60%,4种核苷酸(Amp、Gmp、Cmp、Ump)单体的含量也达到8~24%。该饲料添加剂产品,因含高核苷酸,可以作为幼畜、幼禽、奶牛、鱼、虾及其他水产养殖物的饲料添加剂,有提高免疫能力、加速幼畜、幼禽生长,加快病畜恢复健康的功效;同时,该产品中所含的高蛋白水解物、肽类化合物、氨基酸等又是助鲜剂,与核苷酸在一起时,可以改善饲料的口感,并增加蛋白质的供应量。而所得到的含有β-萄聚糖的饲料添加剂产品也是鱼、虾等水产养殖物的良好饲料添加剂,具有促进甲壳生长的功效。
本发明由于其工艺简单,生产成本很低,产品营养效果好,因而具有重大的推广应用价值。
具体实施方式
实施例一1、取含10%干重的发酵面包酵母乳液1000ml,迅速升温至95℃,灭酶,降至室温;2、加入氢氧化钠,使乳液含氢氧化钠浓度为0.25N,于20℃以上,搅拌30~60分钟;3、测定酵母细胞及核糖核酸含量;4、用盐酸调pH至7.5,保温55℃;根据测定的酵母细胞含量按所含酵母细胞重量的0.2%加入Alcalase 2.4L蛋白酶,慢速搅拌,酶解4小时后,迅速升温至95℃,灭酶;5、再以盐酸调pH至5.6,保温65℃;根据测定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入3000u五磷酸二酯酶,慢速搅拌,酶解3小时后,迅速升温至95℃,灭酶;
6、将酶解液用管式离心机离心,将上清液与渣浆分离后分别真空减压干燥得含核苷酸与蛋白质水解物混合物的饲料添加剂1和含β-萄聚糖的饲料添加剂产品2二种产品。
实施例二1、将啤酒厂沉淀酵母泥,调pH至8~9,再经洗涤得到湿酵母,将其调配成含酵母细胞(干重)12%的酵母乳液1000ml;迅速升温至95℃,灭酶,降至室温;2、加入氢氧化钠,使乳液含氢氧化钠浓度为0.25N,于20℃以上,搅拌30~60分钟;3、测定酵母细胞及核糖核酸含量;4、用盐酸调pH至7.0,保温55℃;根据测定的酵母细胞含量按所含酵母细胞重量的0.1%加入木瓜蛋白酶,慢速搅拌,酶解5小时后,迅速升温至95℃,灭酶;5、再以盐酸调pH至5.8,保温65℃;根据测定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入5000u五磷酸二酯酶,慢速搅拌,酶解3小时后,迅速升温至95℃,灭酶;6、将酶解液用管式离心机离心,将上清液与渣浆分离后分别真空减压干燥得含核苷酸与蛋白质水解物混合物的饲料添加剂1和含β-萄聚糖的饲料添加剂产品2二种产品。
实施例三1、将白地酶压榨块调制成含酵母10%(干重)的细胞悬液1000ml,迅速升温至95℃,灭酶,降至室温;2、加入氢氧化钠,使乳液含氢氧化钠浓度为0.25N,于20℃以上,搅拌30~60分钟;3、测定酵母细胞及核糖核酸含量;4、用盐酸调pH至7.0,保温55℃;根据测定的酵母细胞含量按所含酵母细胞重量的0.3%加入菠萝蛋白酶,慢速搅拌,酶解6小时后,迅速升温至95℃,灭酶;5、再以盐酸调pH至5.5,保温65℃;根据测定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入2500u五磷酸二酯酶,慢速搅拌,酶解3小时后,迅速升温至95℃,灭酶;6、将酶解液用管式离心机离心,将上清液与渣浆分离后分别真空减压干燥得含核苷酸与蛋白质水解物混合物的饲料添加剂1和含β-萄聚糖的饲料添加剂产品2二种产品。

Claims (3)

1.一种从酵母制备饲料添加剂的方法,以含酵母细胞干重8~12%的酵母乳液为原料,其制备工艺过程如下:(1)将原料酵母乳液迅速升温至90~95℃杀酶,然后降至室温;(2)加氢氧化纳溶液,使乳液氢氧化钠浓度为0.25N,搅拌30~60分钟后加盐酸调pH至7.0~7.5,保温55~60℃;(3)取样测定乳液中的酵母细胞及核糖核酸含量;(4)根据所测定的酵母细胞含量向乳液加蛋白酶,所加入的蛋白酶为乳液中所含酵母细胞重量的0.1~0.3%,于温度55~60℃水解3~6小时,然后迅速升温至90~95℃杀酶;(5)将上述水解液用盐酸调pH至5.5~5.8,保温63~65℃,再根据所测定的核糖核酸含量向水解液加入五磷酸二酯酶,每克核糖核酸加入2500~5000u五磷酸二酯酶,进行酶解,搅拌2~3小时,然后迅速升温至90~95℃杀酶;(6)将上述酶解液经离心分离出清液及渣浆,再将清液及渣浆分别干燥,其中清液干燥得含蛋白水解物和核苷酸混合物饲料添加剂,渣浆干燥得含β-萄聚糖的饲料添加剂。
2.根据权利要求1所述的从酵母制备饲料添加剂的方法,其特征在于步骤(4)所加的蛋白酶为Alcalase 2.4L蛋白酶。
3.根据权利要求1所述的从酵母制备饲料添加剂的方法,其特征在于所说的酵母乳液原料为啤酒废酵母经洗涤得到的湿酵母调配而成的酵母乳液、面包酵母乳液调配成的酵母乳液、白地霉压榨块调配成的酵母乳液和热带假丝酵母乳液调配成的酵母乳液中的任一种。
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