CN118006513B - 一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂及其应用。所述菌剂包括菌株PD‑O‑14，该菌株PD‑O‑14为非解乳糖链球菌（Streptococcus alactolyticus），于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62865。当动物处于低营养状态时，本发明提供的菌剂可以刺激动物的肠道发育，增加肠道绒毛高度和隐窝深度，使动物对食物营养物质的吸收能力更强，提高营养物质的转化率。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂及其应用。
背景技术
肠道是动物吸收营养物质的关键部位，肠道发育状态的好坏会影响营养物质的吸收，进而影响动物的生长状态。动物的生长过慢意味着所需要投入的时间成本更高，这在动物养殖当中需要特别关注。
在动物的养殖中，以往追求采用高蛋白饲料进行喂食，但是研究逐渐发现高蛋白饲料的使用不仅会带来饲料转化率低，明显增加养殖成本的问题，并且还容易引起动物的胃肠道疾病。因此，目前逐渐推广低蛋白饲料的使用。低蛋白饲料虽然可以减少以上所说的高蛋白饲料带来的问题，但是低蛋白饲料需要搭配足够含量的必需氨基酸或其他添加物，通过调整饲料中的营养物质比例来促进养殖动物的营养吸收，该做法又会一定程度上增加饲料成本，因此，目前质量较好的低蛋白饲料价格较高。
为了能降低可食用养殖动物的养殖成本，并确保可食用养殖动物的品质，不少养殖户采用半放养的养殖模式。这种养殖模式的饲料投喂量较少，可以节省大量的饲料成本，但是养殖动物在放养过程中处于低营养水平，动物容易因营养摄入不足而生长缓慢，甚至因营养不足而出现疾病，导致这种养殖模式的效益较低。
可见，现有技术还有待改进和提高。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂及其应用，旨在提高养殖动物在低营养状态下对营养物质的吸收效率。
为了达到上述目的，本发明采取了以下技术方案：
本发明第一方面提供一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂，包括：菌株PD-O-14，所述菌株PD-O-14为非解乳糖链球菌（Streptococcus alactolyticus），于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62865。
本发明第二方面提供了以上所述的用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂在提高动物低营养状态下绒毛高度的应用。
本发明第三方面提供了以上所述的用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂在提高动物低营养状态下隐窝深度的应用。
本发明第四方面提供了以上所述的用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂在制备动物饲料中的应用。
有益效果：本发明提供了一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂，所述菌剂包括菌株PD-O-14，菌株PD-O-14为非解乳糖链球菌，在动物低营养条件下可以刺激动物肠道发育，提高绒毛高度和隐窝深度，增大营养物质和肠上皮的接触面积，从而提高营养物质的吸收效率。
附图说明
图1为空白组的小鼠空肠组织切片照片。
图2为实验组的小鼠空肠组织切片照片。
图3为空白组和实验组的绒毛高度统计结果。
图4为空白组和实验组的隐窝深度统计结果。
具体实施方式
本发明提供一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂及其应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供一种用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂，包括：菌株PD-O-14，所述菌株PD-O-14为非解乳糖链球菌（Streptococcus alactolyticus），于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC NO:62865。
所述菌剂在动物处于低营养状态下时，可以刺激动物的肠道发育，提高动物的绒毛高度和隐窝深度，进而增加营养物质与肠上皮的接触面积，提高摄入蛋白以及其他营养物质的吸收率，提高低营养摄入条件下养殖动物的生长速度。
动物肠道发育改善以后，可以持久性地提高营养物质的吸收率，动物无需长期持续地使用服用菌剂，使用成本低，效益高。
本发明提供的用于低营养状态下刺激动物肠道发育的菌剂还可以应用于制备动物饲料。比如应用于制备低蛋白饲料当中，当养殖动物摄入后，增加对营养物质的摄入率，使得尽管饲料中的蛋白含量较低，但是动物的蛋白吸收量不会出现明显下降，提高了饲料转化率，并可以减少污染物的排放。
实施例1 动物实验
实验分组：选用体重相近的6周龄无菌小鼠，确保在实验开始前所有小鼠处于健康状况。将小鼠随机分为空白组（Blank group）和实验组(Experimental group），每组6只小鼠，所有小鼠单笼饲养。每组小鼠分别置于不同的无菌饲养隔离包，防止交叉感染。
饮食限制：实验开始前小鼠预饲7天，无菌小鼠从预饲开始限饲70%的低蛋白饮食，具体为每天2.6g的低蛋白饲料（饲料中的蛋白质含量为10%），蛋白质含量相对于正常蛋白质含量为18%的饲料要低，确保所有小鼠饲料全部吃完，且处于低营养水平，小鼠饮水不做限制。
灌胃处理：于第8天开始对无菌小鼠进行灌胃处理，使用灌胃针对无菌鼠灌胃缓冲液或者菌液0.3mL。其中，空白组无菌小鼠灌胃无菌PBS缓冲液，实验组无菌小鼠灌胃菌株PD-O-14的细菌悬液（菌液浓度为5×108CFU/mL）。持续灌胃两周。
样本采集：持续灌胃两周后，采用快速断颈的方式处死小鼠，取出小鼠空肠组织样本，然后立即放入4%多聚甲醛固定液中进行固定。
对小鼠空肠组织样品进行处理并检测，步骤如下：
（1）包埋：取出4%多聚甲醛固定的组织样本，经流水冲洗后，进行组织修块，放入病理包埋塑料筐中进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡和包埋。
（2）切片：采用Leica RM2235 切片机将组织切成5 µm厚的薄片，在温水中展片，并固定于载玻片上。
（3）切片脱蜡至水，依次将切片放入二甲苯Ⅰ处理20min，二甲苯Ⅱ处理20min，无水乙醇Ⅰ处理10min，无水乙醇Ⅱ处理10min，95%酒精处理5min，90%酒精处理5min，80%酒精处理5min，70%酒精处理5min，水洗。
（4）苏木精-伊红染色，染色后将切片依次放入95%酒精Ⅰ处理5min，95%酒精Ⅱ处理5min，无水乙醇Ⅰ处理5min，无水乙醇Ⅱ处理5min，二甲苯Ⅰ处理5min，二甲苯Ⅱ处理5min脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，最后中性树胶封片。
（5）用显微成像系统对空肠组织样品进行拍照。每个样品均在20倍镜下拍照。使用Image-Pro plus 6.0对每个样品照片中10个较为完整的肠绒毛的高度以及10个隐窝的深度进行测量。
部分组织切片照片如图1和图2所示，其中，图1为空白组的小鼠空肠组织切片照片，图2为实验组的小鼠空肠组织切片照片。
将图1和图2进行比较可以看出，实验组的肠绒毛的高度整体大于空白组，实验组的隐窝的深度整体大于空白组。
图3为空白组和实验组的绒毛高度统计结果，从结果可以看出，实验组小鼠的肠绒毛高度大于空白组小鼠的肠绒毛高度。说明菌株PD-O-14在小鼠低营养条件下可以通过增加小鼠的肠绒毛高度，促进营养物质的吸收。
图4为空白组和实验组的隐窝深度统计结果，从结果可以看出，实验组小鼠的隐窝深度显著大于空白组小鼠的隐窝高度（p=1.4×10-5）。说明菌株PD-O-14在小鼠低营养条件下可以通过增加小鼠的隐窝高度，促进营养物质的吸收。
综上所述，本发明提供的菌剂中，其含有的非解乳糖链球菌菌株PD-O-14可以在低营养条件下有效刺激小鼠肠道发育，促进小鼠对营养物质的吸收。所述菌剂可以进一步应用至其他养殖动物当中，提高养殖动物在低营养摄入时对营养物质的转化率。在规模化的养殖中，可以有效降低动物饲料成本，并减少含氮污染物的排放，而在半放养式养殖中，可以减少动物营养不良的发生，确保养殖动物的品质。
可以理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，而所有这些改变或替换都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。
Claims (2)
1.非解乳糖链球菌（Streptococcus alactolyticus）PD-O-14在提高动物低营养状态下绒毛高度的应用，所述非解乳糖链球菌PD-O-14于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62865。
2.非解乳糖链球菌（Streptococcus alactolyticus）PD-O-14在提高动物低营养状态下隐窝深度的应用，所述非解乳糖链球菌PD-O-14于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62865。
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