CN117965582A

CN117965582A - 一种融合基因、融合蛋白、一株红球菌及其制品

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Publication number: CN117965582A
Application number: CN202311813422.6A
Authority: CN
Inventors: 朱佑民; 田勇; 卞金玉; 田云才; 戴钰; 王小晶; 朱胜杰; 陈旺
Original assignee: Shanghai Zhizhen Zhichen Technology Co ltd
Current assignee: Shanghai Zhizhen Zhichen Technology Co ltd
Priority date: 2023-12-26
Filing date: 2023-12-26
Publication date: 2024-05-03

Abstract

本申请公开了一种融合基因、融合蛋白、一株红球菌及其制品，所述融合基因包括：第一基因酰基辅酶a转移酶基因xjzy的片段，如SEQ ID NO.1所示；第二基因透明颤菌血红蛋白基因vhb的片段，如SEQ ID NO.2所示；以及非重复序列疏水连接肽的核苷酸序列，如SEQ ID NO.3‑5任意一项所示，所述非重复序列疏水连接肽的核苷酸序列连接所述第一基因片段和所述第二基因片段。本申请实施例提供的融合基因，其以融合蛋白的形式在以红球菌为代表的微生物中表达，不仅解决了红球菌产糖脂的限速酶不足的问题，而且提高了红球菌氧气利用率和红球菌活力，从而提高红球菌中生物糖脂的产量。本申请的红球菌及其制品也至少具有所述融合基因的有益效果。

Description

一种融合基因、融合蛋白、一株红球菌及其制品

技术领域

本申请属于合成生物学技术领域，尤其涉及一种融合基因、融合蛋白、一株红球菌及其制品。

背景技术

生物糖脂采用合成生物学方法制备得到，一般采用改造微生物的糖脂合成酶基因，制得可以稳定合成生物糖脂的微生物菌株。

生物糖脂是由微生物合成的一种小分子(分子量200-500D)糖脂类物质。其具有降低界面张力、增溶、乳化、渗透、润湿热稳定、化学稳定性、耐温耐盐、生物降解性等特点。相关技术中，生物糖脂已被广泛应用于生态农业、石油开采、环境修复、生物医用、日用化工等领域。例如，生物糖脂具有独立的羧基基团，其在适当的条件下，对某些金属离子的螯合性要大于乙二胺四乙酸和聚乙烯亚胺。

红球菌(Rhodococcus erythropolis)是一种革兰氏阴性细菌。红球菌本身糖脂产量很低，如何改造红球菌使其提高糖脂产量是本申请研究的重点方向。

发明内容

本申请实施例提供了一种融合基因、一种融合蛋白、一株红球菌及其制品和应用。所述融合基因在微生物如红球菌中表达后，可以打通糖脂等代谢产物的代谢通路，并提高微生物氧气利用率，提高菌株活力，从而提高生物糖脂的产量。

第一方面，本申请实施例提供了一种融合基因，所述融合基因包括：

第一基因酰基辅酶a转移酶基因xjzy的片段，如SEQ ID NO：1所示；

第二基因透明颤菌血红蛋白基因vhb的片段，如SEQ ID NO：2所示；以及

非重复序列疏水连接肽的核苷酸序列，如SEQ ID NO：3-5任意一项所示，所述连接肽的核苷酸序列连接所述第一基因片段和所述第二基因片段。

第二方面，本申请实施例提供了一种融合蛋白，通过所述融合基因表达翻译制得。

根据本申请一个方面的实施例，具有如SEQ ID NO：6-8所示的氨基酸序列。

第三方面，本申请实施例提供了一种重组质粒，包含权第一方面的融合基因。

第四方面，本申请实施例提供了一种转化体，包含第一方面的融合基因、包含第二方面的融合蛋白、包含第三方面的重组质粒中的至少一种。

根据本申请一个方面的实施例，转化体为红球菌。

第五方面，本申请实施例提供了一种红球菌(Rhodococcus erythropolis ThS-1)，所述红球菌的保藏编号为GDMCC NO.64140。

上述红球菌(Rhodococcus erythropolis ThS-1)的保藏日期：2023年12月11日，保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址：中国，广东，广州，广东省微生物菌种保藏中心。

第六方面，本申请实施例提供了一种复合菌剂，包含第四方面的转化体或第五方面的红球菌。

第七方面，本申请实施例提供了一种包含红球菌的制品，通过培养第五方面的红球菌或第六方面的复合菌剂制得。

根据本申请一个方面的实施例，制品包括发酵液、发酵液提取物、通过所述红球菌制得的培养物中至少一种。

本申请实施例至少具有以下有益效果：

本申请实施例提供的融合基因，其以融合蛋白的形式在以红球菌为代表的微生物中表达，不仅解决了红球菌产糖脂的限速酶不足的问题，而且提高了红球菌氧气利用率和红球菌活力，从而提高红球菌中生物糖脂的产量。本申请的红球菌及其制品也至少具有所述融合基因的有益效果。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1示出了本申请实施例和对比例的糖脂的薄层色谱(TLC)对照图。

图2示出了本申请实施例和对比例的包含糖脂的悬浊液对照图。

具体实施方式

为了使本申请的发明目的、技术方案和有益技术效果更加清晰，以下结合具体实施例对本申请进行详细说明。应当理解的是，本说明书中描述的实施例仅仅是为了解释本申请，并非为了限定本申请。

为了简便，本文仅明确地公开了一些数值范围。然而，任意下限可以与任何上限组合形成未明确记载的范围；以及任意下限可以与其它下限组合形成未明确记载的范围，同样任意上限可以与任意其它上限组合形成未明确记载的范围。此外，尽管未明确记载，但是范围端点间的每个点或单个数值都包含在该范围内。因而，每个点或单个数值可以作为自身的下限或上限与任意其他点或单个数值组合或与其它下限或上限组合形成未明确记载的范围。

在本文的描述中，需要说明的是，除非另有说明，“以上”、“以下”为包含本数，“一种或几种”中“几种”的含义是两种或两种以上。

本申请的上述发明内容并不意欲描述本申请中的每个公开的实施方式或每种实现方式。如下描述更具体地举例说明示例性实施方式。在整篇申请中的多处，通过一系列实施例提供了指导，这些实施例可以以各种组合形式使用。在各个实例中，列举仅作为代表性组，不应解释为穷举。

现有技术，在红球菌(Rhodococcus erythropolis)中表达了一个基因：酰基辅酶a转移酶xjzy基因，可以将酰基辅酶a转移到糖或其衍生物上产生糖脂。

由于在红球菌中该基因表达的比较少，也没有充分利用其他协同基因的有益效果，使得菌株内的酰基辅酶a转移能力较弱，合成糖脂的能力也较弱。

透明颤菌血红蛋白基因vhb是可以提高细胞氧气利用率和细胞活性的基因，理论上可以提高糖脂的产量，但是目前透明颤菌血红蛋白基因vhb还没有在红球菌(Rhodococcus erythropolis)中被表达。传统方法在细菌中表达两个基因时一般会分开表达。比如若是在红球菌(Rhodococcus erythropolis)中同时表达一个酰基辅酶a转移酶基因xjzy和一个透明颤菌血红蛋白基因vhb，虽然未被报道过，但是按照传统方法的思路，可以实现分别两次合成酰基辅酶a转移酶xjzy基因与透明颤菌血红蛋白基因vhb的完整表达框，分别两次构建质粒，分两次转化入红球菌。分两次合成两个基因的完整表达框时，每个基因要有单独的启动子、终止子，基因合成过程复杂，成本较高。分两次合成的两个基因要构建入两个不同的表达载体，两个载体要具有不同的抗性基因便于筛选阳性克隆，构建质粒的过程也非常复杂，成本较高。

进一步地，两个重组载体很难都是最优选择的重组载体，表达两个基因的能力不能保证全都较高。构建好的两个质粒要分两次转化入红球菌表达，转化过程复杂，成本较高。两种不同产重组载体也很难同时稳定存在于同一个菌株中。

融合蛋白技术所使用的连接肽都是比较固定的几种连接肽，如(G₄S)n和PAPAP。在选择连接肽时没有充分考虑到连接肽长度对两个蛋白空间距离的影响，也没有考虑到构成连接肽的氨基酸的亲水或疏水效果对两个蛋白空间结构的影响。连续重复的氨基酸容易使基因合成时发生错误的同源重组而使得最终的连接肽序列与预期序列不相符，因而本申请在适用时进行了考虑。

鉴于此，本申请通过酰基辅酶A转移酶基因xjzy与透明颤菌血红蛋白基因vhb通过非重复序列疏水连接肽连接的融合基因改造的红球菌，使其能提高红球菌中糖脂的产量。

融合基因

非重复序列疏水连接肽(linker)的核苷酸序列，如SEQ ID NO：3-5任意一项所示，所述非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列连接所述第一基因片段和所述第二基因片段。

根据本申请实施例，酰基辅酶a转移酶基因xjzy参与脂肪酸的合成、氧化和代谢等，是调节细胞中脂类代谢重要的功能基因，在长链脂肪酸的代谢、脂肪酸的β氧化、胆汁酸代谢、胆固醇代谢过程发挥重要作用。酰基辅酶a转移酶xjzy基因包含一个HX3DX14Y基序，在革兰氏阳性球菌中广泛保守。红球菌的xjzy可以通过将酰基辅酶a转移到糖或其衍生物上产生糖脂。酰基辅酶a转移酶是糖脂代谢的限速酶，其表达量与糖脂产量息息相关。

透明颤菌血红蛋白基因vhb最初是在一种专性好氧的革兰氏阴性丝状菌透明颤菌中发现的基因。透明颤菌血红蛋白VHb具有结合氧的特性，可以降低菌株的需氧量，使专性好氧的革兰氏阴性菌透明颤菌在贫氧环境中生长。透明颤菌血红蛋白VHb提高菌株利用氧气能力和菌活力具体可以表现为菌株发酵时达到特定OD值所需要的时间缩短。VHb可以在很多宿主细胞中表达，通过促进氧的输送增强呼吸和能量代谢，以提高许多有益的代谢产物的产量。

融合基因是指将两个或两个以上的基因序列首尾相连，共用同一套启动子和终止子。融合基因可以分为以下几类：功能基因与报告基因融合，功能基因与信号肽融合，两个功能基因融合和功能基因与抗性基因融合。两个起协同作用的功能基因融合时，可以增强基因的功能或者是增加基因的功能。融合基因只需要一次性合成、一次性构建载体和一次性转化菌株，比两个基因分别合成、构建载体和转化菌株的方法更简单更高效成本更低。因而本申请实施例的融合基因包括第一基因片段、第二基因片段和之间的非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列。

为了使融合基因合成的蛋白具有活性，本申请实施例对其进行了多种筛选。发现上述融合基因合成的蛋白具有活性，且具有明显的积极效果：提高微生物合成生物糖脂的产量。

为了保持融合的两蛋白之间的空间结构来维持蛋白的活性，常在两个蛋白之间加上连接肽。

连接肽由氨基酸构成。氨基酸既有亲水性氨基酸又有疏水性氨基酸。连接肽最好用疏水性氨基酸，因为疏水氨基酸通过排斥作用有利于两蛋白在空间上保持距离。疏水性最强的氨基酸是酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。连接肽最好避免使用连续重复的氨基酸，以免基因合成时重复序列容易发生错误的同源重组而使得最终的连接肽序列与预期序列不相符。

连接肽的氨基酸数目最好不低于6个，以确保两个蛋白之间保持足够的空间距离维持各自的构象，从而尽可能保持活性。连接肽优选为小于等于8个氨基酸，因为过长的连接肽会增加基因合成的难度和成本，而且过长的连接肽不会对保持两蛋白的空间构象有帮助，反而有可能引起连接肽的弯曲而不利于保持两蛋白的空间构象。

非重复序列的疏水性连接肽(linker)更有利于两个蛋白之间空间构象的保持，从而提高蛋白的活性，进而提高糖脂的产量。

非重复序列疏水连接肽(linker)，其包括：酪氨酸Y、苯丙氨酸F、色氨酸W、甘氨酸G、丙氨酸A、缬氨酸V、亮氨酸L、异亮氨酸I、甲硫氨酸M和脯氨酸P这10种疏水氨基酸中的任意不同的6-8种疏水氨基酸串联而成。

优选的，非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列，如SEQ ID No.3-5。依次对应的非重复序列疏水连接肽linker的氨基酸序列为如SEQ ID No.9-11所示。

融合蛋白

根据本申请实施例，通过所述融合基因在微生物中表达翻译制得的融合蛋白，经实验验证，具有活性，且其能提高微生物合成生物糖脂的产量。

在一些可选的实施方式中，具有如SEQ ID NO：6-8所示的氨基酸序列。

本申请实施例的融合蛋白可以采用本领域常用的方法进行检测。作为一个示例，可以按得到的最佳培养条件培养10ml菌液，表达结束后于50ml无菌离心管离心沉淀菌体，PBS缓冲液漂洗2次以洗去培养基杂质。加入2ml Lysis buffer(含1mg/ml溶菌酶)，在冰水中放置30min，随后放-80℃速冻完全。将速冻后的溶液放入冰水中缓慢融化，待融化完全后，使用超声波破碎(功率300W，2s/次，工作60次，每次间隔15s)。(或程序为每次3s；间隔2s；全程15min，共超声30min。)，同时制备单基因xjzy转化的菌液及阴性对照。接着分别取1ml重悬空白裂解液和表达蛋白裂解液于12000g离心5min，分别取裂解全液、、上清及沉淀进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，检测融合蛋白的表达。对得到的融合蛋白进行测序。

重组质粒

第三方面，本申请实施例提供了一种重组质粒，包含第一方面的融合基因。

根据本申请实施例，质粒是一种小型的环状DNA分子，通常存在于细菌细胞中。质粒具有自主复制的能力，允许它们在细胞中独立地复制。重组质粒携带与细胞生存无关的外源基因，在本申请实施例中，外源基因为上述融合基因。重组质粒通常包含一种选择标记，例如抗生素抗性基因。这样，当细胞被引入这些载体并在培养基中添加相应的抗生素时，只有携带重组质粒的细胞能够生存下来。为了方便插入外源基因，重组质粒通常包含多个克隆位点。这些位点是具有不同限制酶切位点的区域，可以在其中插入外源DNA。

重组质粒是用于将外源基因导入宿主细胞以进行基因工程的一种分子工具。这里的宿主细胞指本申请实施例使用的红球菌。

转化体

第四方面，本申请实施例提供了一种转化体，包含第一方面的融合基因、包含第二方面的融合蛋白、包含第三方面的重组质粒体中的至少一种。

转化体是通过将外源基因(上述融合基因)导入细菌等微生物细胞中而得到的，且使外源基因稳定维持在细胞内。外源DNA通过一种转化方法导入微生物可以采用本领域常用的方法，如热冲击法(heat shock)或电穿孔法(electroporation)等。为了确定哪些细胞成功地转化，引入了选择标记，例如抗生素抗性基因。成功转化的细胞可以通过分子生物学技术中的PCR菌检技术进行鉴定，以确保外源DNA已经整合到宿主细胞的基因组中。

在一些可选的实施方式中，转化体为红球菌。该红球菌稳定地包含上述融合基因。

在一些实施例中，包含融合基因的红球菌的制备方法包括：

(1)酰基辅酶a转移酶基因xjzy和透明颤菌血红蛋白基因vhb的融合基因的序列进行优化和合成。

序列优化和化学合成如SEQ ID No.12、SEQ ID No.13或SEQ ID No.14所示的改良的酰基辅酶a转移酶基因xjzy和透明颤菌血红蛋白基因vhb的融合基因(xjzy-linker-vhb)；

在此步骤中，此融合基因是如SEQ ID No.1所示的改良的酰基辅酶a转移酶基因xjzy与如SEQ ID No.2所示的改良的透明颤菌血红蛋白基因vhb通过如SEQ ID No.3、SEQID No.4或SEQ ID No.5所示的改良的非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列融合而成。

融合基因的序列在红球菌中进行优化。优化时应避开酶切位点为BamHl、Pst1、EcoRV、HindIII、BspD1、Cla1、Abs1和SnaB1，优选的，避开酶切位点为BamH1和HindIII；

在一些实施例中，选取两个酶切位点序列加在序列SEQ ID No.3两端。选取的两个酶切位点序列为BamH1、Pst1、EcoRV、HindIII、BspD1、Cla1、Abs1和SnaB1中的两个酶切位点序列；优选的，选取的酶切位点为BamH1和HindIII；

(2)构建重组质粒

将融合基因序列与酶切线性化的质粒一次性连接，得到包含融合基因的重组质粒；

在此步骤中，质粒带有选择标记，例如抗生素抗性基因。这样，当细胞被引入这些重组质粒并在培养基中添加相应的抗生素时，只有携带重组质粒的细胞能够生存下来。

在一些实施例中，质粒可以是pRMU824或pSMT3。

(3)转化红球菌

将重组质粒转化入红球菌感受态细胞中；

(4)筛选含有融合基因的阳性克隆菌株

通过抗性筛选出可能成功转化融合基因的红球菌；

(5)PCR菌检

通过PCR检测确认成功转化融合基因的红球菌；

(6)发酵

将上述克隆菌株接种到发酵培养基，发酵红球菌；具体地，发酵培养基的组分包括：10％正十六烷、0.3％KNO₃、0.01％MgSO₄.7H₂O、0.1％酵母提取物、0.2％磷酸钾。

(7)提纯

分离纯化获得生物糖脂：离心获得的上清液，用5mol/L的HCl将pH值调为3.5左右，静置10℃过夜，离心收集海藻糖脂沉淀。

红球菌

本申请实施例中的复合菌剂可以包含经过改造的包含融合基因的红球菌，还可以包含部分没有经过改善的红球菌。还可以包括其他菌株。

在本申请实施例中，制品中可以包含生物糖脂等红球菌代谢产物。

在一些可选的实施方式中，制品包括发酵液、发酵液提取物、通过所述红球菌制得的培养物中至少一种。上述制品可以以多种形式存在。

实施例

下述实施例更具体地描述了本申请公开的内容，这些实施例仅仅用于阐述性说明，因为在本申请公开内容的范围内进行各种修改和变化对本领域技术人员来说是明显的。除非另有声明，以下实施例中所报道的所有份、百分比、和比值都是基于重量计，而且实施例中使用的所有试剂都可商购获得或是按照常规方法进行合成获得，并且可直接使用而无需进一步处理，以及实施例中使用的仪器均可商购获得。

实施例1实施例1融合基因改造的红球菌

将改良的酰基辅酶a转移酶基因xjzy和透明颤菌血红蛋白基因vhb通过非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列进行连接，得到融合基因的序列xjzy-linker-vhb，如SEQ ID No.12。非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列，如SEQ ID No.3。

融合基因序列两端包含BamH1和HindIII酶切位点序列。

(3)融合基因片段和质粒pSMT3分别经BamH1和HindIII双酶切，酶切体系如下：

其中，质粒pSMT3含标记基因，可以抗潮霉素B，并在包含潮霉素B的培养基中可以良好存活和繁殖。

(4)将酶切后的融合基因片段与酶切后的pSMT3载体连接，连接体系如下：

(5)将连接产物转化入大肠杆菌Top10感受态细胞；

(6)涂布含潮霉素B的平板，平板培养基的组分包括：1％胰蛋白胨10g/L，0.5％酵母提取物，1％氯化钠(NaCl)10g/L，1％琼脂和0.02％潮霉素B，余量为水。

(7)PCR检测阳性克隆。菌检上游引物如SEQ ID No.15，下游引物如SEQ ID No.16；

(8)扩大培养并用质粒小提试剂盒抽提质粒，得到目的质粒p-xjzy-linker-vhb1；

(9)将质粒电转化入红球菌(Rhodococcus erythropolis ThS-1)感受态细胞中，220rpm条件下进行摇床培养1.5-2h，5000rpm离心4min收集菌体；

(10)将菌体涂布在潮霉素B平板上培养2-3天，平板培养基的组分包括1％胰蛋白胨10g/L，0.5％酵母提取物，1％氯化钠(NaCl)10g/L，1％琼脂和0.02％潮霉素B，余量为水。挑选单菌落，筛选出含有融合基因的红球菌hp-xjzy-linker-vhb1；

(11)将含有融合基因的红球菌hp-xjzy-linker-vhb1转接入一新的发酵培养基的，该发酵培养基置于带透气塞的50mL离心管中，在30℃，220rpm条件下进行摇床培养至OD600＝5；发酵培养基的组分包括：10％正十六烷、0.3％ KNO₃、0.01％ MgSO₄.7H₂O、0.1％酵母提取物、0.2％K₃PO₄，余量为水。

(12)5000rpm离心4min收集菌体；

(13)菌体重悬于与上述发酵培养基一样成分的新的培养基，220rpm条件下进行摇床培养3-4天。

实施例2

本实施与实施例1不同之处在于：连接片段的基因，如SEQ ID No.13所示。

实施例3

本实施与实施例1不同之处在于：连接片段的基因，如SEQ ID No.14所示。

对比例1单基因改造的红球菌

本对比例与实施例不同之处在于：

(1)优化改良的酰基辅酶a转移酶基因xjzy，如SEQ ID No.1；酰基辅酶a转移酶基因xjzy序列两端包含BamH1和HindIII酶切位点序列。

测试部分

1)将实施例和对比例得到的菌株，接种密度为2×10⁷个/mL的0.2mL体积放入200mL发酵培养基中，在30℃、220rpm环境中培养菌株至菌液的OD600达到5，记录下时所需要的时间。结果如表1。

对应菌株	时间(h)
		实施例1	39
对比例1	56
		未改造红球菌	53

通过表1的结果可知，实施例1的菌株的繁殖能量和菌株活力远远大于对比例1和未改造的红球菌，说明了在红球菌中融合表达酰基辅酶a转移酶基因xjzy和透明颤菌血红蛋白基因vhb，提高了细胞氧利用率和细胞活力。

2)TLC分析糖脂检测：将上述实验制得的发酵液(菌液)以5000rpm离心4min收集上清液，取相同的量(1μL)进行TLC分析糖脂分析，得到结果如图1。图1的结果说明了实施例1产生的是与标样相同的糖脂，并且在同等条件下比对比例1和未改造的红球菌合成的生物糖脂的阴影面积更大，得到如表2所示的结果。分析原因可能在于：包含上述融合基因的菌株提高了生物糖脂的产量。

对应菌株	阴影面积(mm²)
		实施例1	12.8
对比例1	6.7
		未改造	4.1

3)糖脂沉淀检测：将上述实验获得的上清液用5mol/L的HCl调至pH＝3.5；将上清液在10℃过夜；溶液变为悬浊液，得到如图2所示的结果；图2的结果说明了实施例1在同等条件下产生的悬浊液更加浑浊，分析原因可能在于：合成的生物糖脂比对比例1和未改造的红球菌多；离心去水旋蒸得到沉淀；接着称量沉淀，并换算成单位体积发酵液中的产量，得到如表3所示的结果。表3的结果说明了实施例1在同等条件下合成的生物糖脂比对比例1和未改造的红球菌多，说明了包含上述融合基因的菌株可以提高生物糖脂的产量。

表3

对应菌株	沉淀量(g/L)
		实施例1	46.7g/L
对比例1	29.3g/L
		未改造	18.1g/L

以上实验结果表明，本方法在红球菌中融合表达酰基辅酶a转移酶基因xjzy和透明颤菌血红蛋白基因vhb，既解决了红球菌产糖脂的限速酶不足的问题，又提高了细胞氧利用率和细胞活力，提高了糖脂产量。因此，本发明可用于生产糖脂。

还需要说明的是，本申请中提及的示例性实施例，基于一系列的步骤或者装置描述一些方法或系统。但是，本申请不局限于上述步骤的顺序，也就是说，可以按照实施例中提及的顺序执行步骤，也可以不同于实施例中的顺序，或者若干步骤同时执行。

以上所述，仅为本申请的具体实施方式，但本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内，可轻易想到各种等效的修改或替换，这些修改或替换都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此，本申请的保护范围应以权利要求的保护范围为准。

Claims

1.一种融合基因，所述融合基因包括：

第一基因酰基辅酶a转移酶基因xjzy的片段，如SEQ ID NO.1所示；

第二基因透明颤菌血红蛋白基因vhb的片段，如SEQ ID NO.2所示；以及

非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列，如SEQ ID NO.3-5任意一项所示，所述非重复序列疏水连接肽linker的核苷酸序列连接所述第一基因片段和所述第二基因片段。

2.一种融合蛋白，通过所述融合基因表达翻译制得。

3.根据权利要求中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，具有如SEQ ID NO：6-8任意一项所示的氨基酸序列。

4.一种重组质粒，包含权利要求1所述的融合基因。

5.一种转化体，包含权利要求1所述的融合基因、包含权利要求2或3所述的融合蛋白、包含权利要求4所述的重组质粒中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的转化体，所述转化体为红球菌。

7.一种红球菌(Rhodococcus erythropolis ThS-1)，其特征在于，所述红球菌的保藏编号为GDMCC NO.64140。

8.一种复合菌剂，其特征在于，包含权利要求5或6所述的转化体或权利要求7所述的红球菌。

9.一种包含红球菌的制品，其特征在于，通过培养权利要求7所述的红球菌或权利要求8所述的复合菌剂制得。

10.根据权利要求9的制品，其特征在于，所述制品包括发酵液、发酵液提取物、通过所述红球菌制得的培养物中至少一种。