CN117925479A - 一种复合乳酸菌发酵剂及其应用、金线莲发酵液的生产方法及产品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种复合乳酸菌发酵剂及其应用、金线莲发酵液的生产方法及产品。所述复合乳酸菌发酵剂包括植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌J IAN和副干酪乳杆菌YYS‑69，采用复合菌发酵剂发酵金线莲液，产酸能力更强、活菌数更高，且能够显著提高金线莲液的抗氧化活性、总多酚和黄酮含量、增强降糖功能活性的效果，同时在感官上也得到很好的提升。本发明中的复合乳酸菌发酵剂，应用于发酵中药，能提高中药发酵液抗氧化能力，有效功能成分含量，提升功效，对金线莲深加工产品甚至其他发酵药食同源产品领域有着很大的应用前景。

Description

一种复合乳酸菌发酵剂及其应用、金线莲发酵液的生产方法 及产品

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种复合乳酸菌发酵剂及其应用、金线莲发酵液的生产方法及产品。

背景技术

金线莲(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.)是华南地区重要特色中草药，近年来金线莲广泛应用于医药、保健、美容等领域，其市场需求量逐年增加，长期受市场追捧，被认为是最具有价值的药用植物之一。金线莲富含生物碱、多糖、皂苷、黄酮类、酯类、挥发油等生物活性成分，具有清热凉血、解毒消肿、祛风利湿、镇惊平肝、补肾益骨、利水通淋、润肺止咳等功效，对提高人体免疫力，对肝、肾、肺等器官的慢性病康复和疗养具有一定作用，已被用于预防和治疗糖尿病、高脂血症、肝炎和肿瘤等疾病。

随着社会的发展，人们对于食品的需求越来越多样化，更加注重其营养价值及保健功能。益生菌发酵产品具有一定的益生特性并且在生理疾病的预防中的应用广泛，上世纪的研究已经证明益生菌发酵产品可以缓解消化道和胃的新陈代谢问题。随着现代生物技术的发展，乳酸菌的发酵工艺被应用于中药相关研究，以乳酸菌为发酵菌株的发酵中药被广泛报道。传统的中药发酵多利用自然环境中的微生物，通过其生长代谢改变中药材的药性，降低毒性，提高中药药效及中药资源的利用率。现代中药发酵所用菌种主要有乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等现代食品发酵工业常用菌种，以及灵芝菌、红曲霉、白僵菌等药用真菌。其中乳酸菌因其较高的安全性和市场认可度而被广泛应用于中药发酵。乳酸菌发酵类产品(如酸奶、奶酪、泡菜、纳豆等)具有改善肠道菌群微环境、抑制肠道病原菌的过度生长、保护肠道屏障、调节肠道吸收不良、减少脂质过氧化、抑制炎性细胞因子释放等功能。利用发酵的手段可将乳酸菌与中药的功能结合，可促进中药有效成分的溶出及转化，改变中药的功能。此外，利用乳酸菌的肠道菌群调节功能，可协助中药功能的发挥，并且乳酸菌在发酵过程中可提高中药的生物利用度，使其发挥出更好的药效功能。

随着功能性食品市场的扩大，乳酸菌发酵食品也成为最受关注的功能性食品之一。金线莲中生物活性物质含量丰富，但是深加工产品较少，特别是应用乳酸菌发酵金线莲少有报道，因此，采用乳酸菌发酵金线莲，用以改善其感官品质且提升其功能活性，有着广阔的应用前景和市场潜力。

发明内容

为解决乳酸菌发酵金线莲技术的不足，本发明提供的一种复合乳酸菌发酵剂及其应用、金线莲发酵液的生产方法及产品，使用复合乳酸菌发酵金线莲液，不仅可以保持金线莲的食品质量，还可以增加感官属性的原位表达，并增强其功能生物活性，以促进人类健康。

本发明提供一种复合乳酸菌发酵剂，包括植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69。

进一步的，所述植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN、副干酪乳杆菌YYS-69的质量配比为1:1:1。

进一步的，所述植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69以菌粉提供，所述植物乳植杆菌BXM2菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g，所述发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g，所述副干酪乳杆菌YYS-69菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g。需要说明的是，以上三种菌的提供形式不限于菌粉，也可以是菌液。

本发明还提供上述的复合乳酸菌发酵剂在发酵中药中的应用，尤其是发酵金线莲的应用。

进一步的，所述复合乳酸菌发酵剂至少包括以下一种作用：

(1)提升发酵速度，增加发酵后活菌数；

(2)提升抗氧化水平以及总多酚和黄酮含量；

(3)提升降糖功能活性，抑制α-淀粉酶和葡萄糖苷酶活性；

(4)提升感官水平。

本发明还提供一种金线莲发酵液的生产方法，以金线莲液为原料，利用上述的复合乳酸菌发酵剂发酵生产。

进一步的，包括如下步骤：

(1)以金线莲液为原料，调节所述金线莲液的含糖量为50～60g/L，灭菌条件为100～110℃、15～25min；优选温度为105℃；

(2)将步骤(1)灭菌后的所述金线莲液加入所述复合乳酸菌发酵剂；

(3)发酵条件为：发酵温度35～40℃，发酵时间40～50h。

进一步的，所述金线莲液的制备方法为：将金线莲清洗完成后加水煮沸30min，破碎打浆后再煮30min，过滤得到处理好的金线莲液。

优选的，所述复合乳酸菌发酵剂接种量为金线莲液质量的0.02％。

优选的，发酵条件为在37℃条件下发酵45～48h。

本发明还提供一种金线莲发酵液产品，包含由上述的生产方法制得的金线莲发酵液。可以理解的是，金线莲发酵液产品包括但不限于食品、保健品、药品。

本发明通过对比金线莲液及其发酵液的理化指标、抗氧化指标、多酚和黄酮含量、降糖功能指标和感官指标的变化，得到在金线莲液中发酵活菌数最高、自由基清除能力和多酚黄酮物质含量提升最高、对降糖功能活性增强效果最好且感官评定得分最高的发酵方式。

与现有技术相比，本发明提供的复合乳酸菌发酵剂具有如下有益效果：

本发明将含有植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69的复合乳酸菌接种用于金线莲的发酵，产酸能力更强、活菌数更高，对比单菌发酵，显著提升金线莲自由基清除能力、多酚黄酮含量、降糖功能活性、感官得分，使得发酵后的金线莲液有更强的营养价值，并且为金线莲产品提供更好的益生价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为金线莲液及其发酵液DPPH自由基清除率对比图；

图2为金线莲液及其发酵液ABTS自由基清除率对比图；

图3金线莲液及其发酵液α-淀粉酶抑制效果对比图；

图4为金线莲液及其发酵液葡萄糖苷酶抑制效果对比图；

图5为金线莲液及其发酵液感官评定得分结果图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种复合乳酸菌发酵剂，包括植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69。

其中，

植物乳植杆菌BXM2，拉丁文学名：Lactiplantibacillus plantarum，于2018年09月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.16436，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

发酵粘液乳杆菌JIAN，拉丁文学名：Lactobacillus fermentum，于2023年04月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.27027，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

副干酪乳杆菌YYS-69，拉丁文学名：Lactobacillus paracasei，于2022年09月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25837，藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

需要说明的是，2022年10月份国家卫健委正式更名“植物乳杆菌”为“植物乳植杆菌”，“发酵乳杆菌”为“发酵粘液乳杆菌”，保藏时候还未改名，因此说明书中的植物乳植杆菌BXM2与保藏证明中的植物乳杆菌BXM2为同一菌株，发酵粘液乳杆菌JIAN与保藏证明中的发酵乳杆菌JIAN为同一菌株。

所述复合乳酸菌发酵剂至少包括以下一种作用：

(1)提升发酵速度，增加发酵后活菌数；

(2)提升抗氧化水平以及总多酚和黄酮含量；

(3)提升降糖功能活性，抑制α-淀粉酶和葡萄糖苷酶活性；

(4)提升感官水平。

本发明还提供一种金线莲发酵液的生产方法的操作示例，包括如下步骤：

(1)以金线莲液为原料，调节所述金线莲液的含糖量为50～60g/L，灭菌条件为100～110℃、15～25min；

(2)在步骤(1)灭菌后的所述金线莲液中加入所述复合乳酸菌发酵剂，所述复合乳酸菌发酵剂接种量为金线莲液质量的0.02％；

(3)发酵条件为：发酵温度35～40℃，发酵时间40～50h。

需要说明的是，下述实施例中涉及的涉及的试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。

本发明实施例中菌株筛选和性能测定中所用的培养基如下：

MRS培养基(g/L)：酵母粉5，蛋白胨10，牛肉膏10，葡萄糖10，乙酸钠5，柠檬酸氢二铵2，硫酸镁0.6，硫酸锰0.3，吐温-80 1。

MRS培养基平板(g/L)：酵母粉5，蛋白胨10，牛肉膏10，葡萄糖10，乙酸钠5，柠檬酸氢二铵2，硫酸镁0.6，硫酸锰0.3，吐温-80 1，琼脂粉10。

金线莲发酵培养基:将金线莲液含糖量调整为50g/L，于高压蒸汽锅105℃灭菌10min。

在一实施例中，所述菌株发酵金线莲的发酵工艺为：将复合乳酸菌发酵剂以0.02％质量比的量接种，37℃发酵48小时。

实施例1植物乳植杆菌BXM2菌粉的制备

取活400μL的植物乳植杆菌BXM2接种于20mL MRS液体培养基中，37℃下活化2至3代，待活菌数达到10⁹CFU/mL以上活菌数时，将培养基以5000～10000rpm的条件下离心10～20min，去除上清液后，在无菌环境下加入含有15％甘油10％奶粉2％谷氨酸钠的冻干保护剂，用冻干保护剂乳化15min后，得到菌液浓度为10¹⁰CFU/mL的乳化液，将乳化液置于-40℃冰箱中预冷冻4h，-35℃冷冻干燥35h，得到活菌数为1～5×10¹¹CFU/g的活性植物乳植杆菌BXM2的冻干菌粉。

实施例2发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉的制备

取400μL的发酵粘液乳杆菌JIAN接种于20mL MRS液体培养基中，37℃下活化2至3代，待活菌数达到10⁹CFU/mL以上活菌数时，将培养基以5000～10000rpm的条件下离心10～20min，去除上清液后，在无菌环境下加入含有15％甘油10％奶粉2％谷氨酸钠的冻干保护剂，用其乳化15min后，得到菌液浓度大于10¹⁰CFU/mL的乳化液，将乳化液置于-40℃冰箱中预冷冻4h，-35℃冷冻干燥35h，得到活菌数1～5×10¹¹CFU/g的活性发酵粘液乳杆菌JIAN的冻干菌粉。

实施例3副干酪乳杆菌YYS-69菌粉的制备

取400μL的副干酪乳杆菌YYS-69接种于20mL MRS液体培养基中，37℃下活化2至3代，待活菌数达到10⁹CFU/mL以上活菌数时，将培养基以5000～10000rpm的条件下离心10～20min，去除上清液后，在无菌环境下加入含有15％甘油10％奶粉2％谷氨酸钠的冻干保护剂，用其乳化15min后，得到菌液浓度大于10¹⁰CFU/mL的乳化液，将乳化液置于-40℃冰箱中预冷冻4h，-35℃冷冻干燥35h，得到活菌数1～5×10¹¹CFU/g的副干酪乳杆菌YYS-69的冻干菌粉。

实施例4复合乳酸菌发酵剂的制备

将实施例1-3中所得冻干菌粉按照质量比1：1：1混合均匀，得到复合乳酸菌发酵剂。

实施例5金线莲液的制备

挑选没有破损、花叶完整的金线莲原料，以清水洗去金线莲表面的尘土沙粒，再用纯净水冲洗后，以1％质量比的添加量加入到水中，煮沸30分钟后，破碎打浆，破碎后再煮30min，过滤得到金线莲液。

实施例6不同菌种发酵对理化指标的影响

将上述实施例制得的植物乳植杆菌BXM2菌粉、发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉、副干酪乳杆菌YYS-69菌粉、三种菌粉中任意两种以质量比1:1混合形成的发酵剂以及复合乳酸菌发酵剂以0.02％的质量百分比接种到实施例5制得的金线莲液中37℃发酵48小时，测定发酵液基础理化指标，结果如表1所示。

其中，植物乳植杆菌BXM2菌粉与发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉按质量比1:1混合形成的发酵剂记为B+J，植物乳植杆菌BXM2菌粉与副干酪乳杆菌YYS-69菌粉按质量比1:1混合形成的发酵剂记为B+Y，发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉与副干酪乳杆菌YYS-69菌粉按质量比1:1混合形成的发酵剂记为J+Y，复合乳酸菌发酵剂记为复合菌，下同。

需要说明的是，以上发酵菌株的初始接种总量是相等的，即初始活菌总数相同。

表1金线莲及其发酵液基本理化指标测定结果

注：不同字母表示同一列数据存在显著差异(P<0.05)。

由表1可知，金线莲液中的可溶性固形物最高，接种乳酸菌后，可溶性固形物含量有不同程度下降，其中复合发酵剂发酵的样品减少了21.62％的可溶性固形物，均高于两两混合的复合菌，而BXM2和YYS-69对可溶性固形物的减少最低，仅有12.16％。不同样品的总酸和总糖测定结果比较可知，金线莲的复合发酵剂的发酵液总糖含量最少，仅为32.01g/L，而总酸含量最高，达到8.25g/L。同时经48h发酵后金线莲液中的活菌数可以看出，复合菌发酵组活菌数最高，达到9.24lg CFU/mL，这表明复合菌发酵组中乳酸菌在金线莲液中生长能力最强。综上所述，植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69均可单独在金线莲液中生长，而在相同接种量的情况下，以三菌株复合菌发酵组其菌株的生长活性更高，发酵能力更强，产酸能力更强。

实施例7不同菌种发酵对抗氧化指标的影响

基于2种自由基DPPH和ABTS，对实施例6中各发酵样品的抗氧化活性进行评价，检测各样品对DPPH及ABTS自由基的清除率。测试方法为：取0.2mL待测样品或无水乙醇对照加入0.2mL DPPH溶液，震荡混匀后在避光的条件下室温反应40min，测定其吸光度(波长517nm)，与空白对照吸光度的比值为DPPH自由基清除率，结果见图1。取0.2mL待测样品和无水乙醇对照加入ABTS自由基4.8mL，在室温下于暗处反应30min，测定734nm处吸光值，与空白对照吸光度的比值为ABTS自由基清除率，结果见图2。从图1看出对比金线莲液发酵后各产品的DPPH自由基清除率得到明显提升，而其中复合菌发酵组的自由基清除率显著高于其他组。图2中ABTS法检测自由基清除率可以看出，复合菌发酵组的ABTS自由基清除率显著最高，其次为BXM2发酵的金线莲液，而发酵粘液乳杆菌JIAN或副干酪乳杆菌YYS-69的加入对于自由基清除率的提升并没有明显帮助。乳酸菌发酵后均能提升DPPH和ABTS的自由基清除能力，原因除菌株自身所有的抗氧化性还可能是由于菌株中相关水解酶将复杂的酚类聚合物水解成更简单的形式增强产品中抗氧化性，而复合菌发酵后增强了菌株的生长代谢能力，改变菌株生长代谢环境进一步促进了抗氧化能力的增强。

实施例8不同菌种发酵对多酚黄酮含量的影响

植物中的多酚和黄酮类物质主要由游离态和结合态两种形式存在，乳酸菌具有将植物中结合态多酚和黄酮分解为游离态的作用，并使其生物活性增强，这是因为其在发酵过程中能够产生相应的酶，从而提高其抗氧化活性，将实施例6中各发酵样品的总多酚(没食子酸为当量)和总黄酮(芦丁为当量)含量结果见表2。由结果可以看出经乳酸菌发酵后的金线莲液总多酚和总黄酮含量都有着不同程度的提升，其中复合菌发酵的金线莲液总多酚和总黄酮含量均为最高。乳酸菌可以使得糖基化的酚类物质和苷类物质脱糖，并从植物细胞壁中释放出游离的多酚和黄酮物质，而这三株菌株的复合菌发酵给予菌种更适生长代谢的环境，使得其生理活动旺盛促进了这一过程。多酚和黄酮均为金线莲中功能成分，本发明复合乳酸菌发酵剂对金线莲发酵后，能显著提高其功能成分总多酚和总黄酮，也提高了金线莲发酵产品的功能性和食用价值。

表2金线莲及其发酵液总多酚和总黄酮含量测定结果

注：不同字母表示同一列数据存在显著差异(P<0.05)。

实施例9不同菌种发酵对降糖功能活性的影响

抗糖尿病的药物现大多通过抑制α-淀粉酶和葡萄糖苷酶的活性来达到调节血糖的目的，通过抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性、减少葡萄糖的产生和吸收等方式控制餐后血糖水平。金线莲已被研究证实其降糖活性，通过检测实施例6中各发酵样品与α-淀粉酶和葡萄糖苷酶活性的抑制作用。具体测试方法为：取100μLα-淀粉酶液(40mg/mL)和50μL各发酵样品，于37℃预孵化10min。然后加入100μL的可溶性淀粉溶液使反应开始，5min后加入750μLDNS溶液，沸水浴10min使反应停止，取出后冰浴至室温，取反应液稀释，在540nm吸光度下测定吸光度值，与空白对照吸光度的比值可看出淀粉酶活性抑制效果，影响结果如图3。配制0.5mmol/L底物PNPG溶液和取0.4U/mL的葡萄糖苷酶溶液40μL和各发酵样品40μL于试管中，水浴37℃加热5min，加20μL底物0.5mmol/L PNPG溶液，反应体系置于37℃水浴锅中处理30min，终止反应试剂为50μL的0.2mol/LNa2CO3溶液，室温(25℃)处理5min，于405nm处测定吸光值，与空白对照吸光度的比值可看出葡萄糖苷酶活性抑制效果，影响结果如图4。

由图3可以看出，金线莲复合菌发酵组对α-淀粉酶抑制活性最高，且在同水平下抑制率高于发酵前金线莲液221％，而在单菌种BXM2发酵的金线莲液抑制活性最高，同时由图4可以看出，复合菌发酵组对葡萄糖苷酶的抑制效果也是显著高于其他组的。因此，复合乳酸菌发酵剂能显著增强金线莲降糖功能活性，为开发功能性降糖金线莲发酵产品打下基础。

实施例10不同菌种发酵对感官指标的影响

感官评定主要由实验室的感官品评小组完成。品评小组由20名经感官评定训练选拔出的研究人员构成。在品评过程中，根据金线莲液及其发酵液感官评定表(表3)，对各样品在外观、香气、口感和典型性上进行感官评定打分，结果见图5。由感官评分结果可知，经乳酸菌发酵金线莲液后各样品较发酵前感官得分都有了显著提升，尤其是复合菌发酵后金线莲液外观变得色泽均一，香气馥郁，口感醇厚，酸甜平衡，有明显的发酵特征，总体感官得分明显高于其他。

表3金线莲及其发酵液感官评定表

根据上述实施例的结果得出，本发明提供的复合乳酸菌发酵剂在金线莲液发酵中具有以下功能和效果：

1.在金线莲液中生长能力强，在相同接种量的情况下，复合发酵剂对比单菌株发酵和双菌株混合发酵的生长活性皆为更高，发酵能力更强，产酸能力更强；

2、复合发酵剂发酵后的金线莲液对比发酵前和单菌发酵，其有着最强的抗氧化活性，其相通浓度下的DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率最高；

3、复合乳酸菌发酵剂对金线莲发酵后，能显著提高其功能成分总多酚和总黄酮，也提高了金线莲发酵产品的功能性和食用价值；

4、复合乳酸菌发酵剂能显著增强金线莲降糖功能活性，为开发功能性降糖金线莲发酵产品打下基础；

5、复合菌发酵后金线莲液外观变得色泽均一，香气馥郁，口感醇厚，酸甜平衡，有明显的发酵特征，总体感官得分明显高于发酵前金线莲液和单菌与两菌种发酵金线莲液。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种复合乳酸菌发酵剂，其特征在于：包括植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69。

2.根据权利要求1所述的复合乳酸菌发酵剂，其特征在于：所述植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN、副干酪乳杆菌YYS-69的质量配比为1:1:1。

3.根据权利要求1所述的复合乳酸菌发酵剂，其特征在于：所述植物乳植杆菌BXM2、发酵粘液乳杆菌JIAN和副干酪乳杆菌YYS-69以菌粉提供，所述植物乳植杆菌BXM2菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g，所述发酵粘液乳杆菌JIAN菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g，所述副干酪乳杆菌YYS-69菌粉活菌数为1～5×10¹¹CFU/g。

4.如权利要求1～3任一项所述的复合乳酸菌发酵剂在发酵中药中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述中药包含药食同源目录中种类。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述复合乳酸菌发酵剂至少包括以下一种作用：

(1)提升发酵速度，增加发酵后活菌数；

(2)提升抗氧化水平以及总多酚和黄酮含量；

(3)提升降糖功能活性，抑制α-淀粉酶和葡萄糖苷酶活性；

(4)提升感官水平。

7.一种金线莲发酵液的生产方法，其特征在于：以金线莲液为原料，利用权利要求1～3任一项所述的复合乳酸菌发酵剂发酵生产。

8.根据权利要求7所述的生产方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)以金线莲液为原料，调节所述金线莲液的含糖量为50～60g/L，灭菌条件为100～110℃、15～25min；

(2)在步骤(1)灭菌后的所述金线莲液中加入所述复合乳酸菌发酵剂；

(3)发酵条件为：发酵温度35～40℃，发酵时间40～50h。

9.根据权利要求8所述的生产方法，其特征在于：所述复合乳酸菌发酵剂接种量为金线莲液质量的0.02％。

10.一种金线莲发酵液产品，其特征在于：包含由权利要求7～9任一项所述的生产方法制得的金线莲发酵液。