CN117886881A

CN117886881A - 一种用于bcl-2蛋白靶向降解的嵌合体化合物、其制备方法及其在医药上的应用

Info

Publication number: CN117886881A
Application number: CN202311324583.9A
Authority: CN
Inventors: 董平; 李心; 蒋宏健; 曹虎; 贺峰
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2022-10-14
Filing date: 2023-10-13
Publication date: 2024-04-16

Abstract

本公开涉及一种用于BCL‑2蛋白靶向降解的嵌合体化合物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本公开涉及一种通式(I)所示的杂环类化合物、其制备方法及含有该杂环类化合物的药物组合物以及其作为治疗剂的用途，特别是作为BCL‑2降解剂的用途和在制备用于治疗和/或预防BCL‑2介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

Description

一种用于BCL-2蛋白靶向降解的嵌合体化合物、其制备方法及其在医药上的应用

技术领域

本公开属于医药领域，是关于一种新型蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)化合物，其制备方法，及其在医药上的应用。具体而言，本公开涉及一种通式(I)所示的杂环类化合物、其制备方法及含有该杂环类化合物的药物组合物以及其作为治疗剂的用途，特别是作为BCL-2降解剂的用途和在制备用于治疗和/或预防BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

背景技术

PROTAC(Proteolysis Targeting Chimera)是一种杂合双功能小分子化合物。其结构中含有两种不同配体:一个是泛素连接酶E3配体,另一个是与靶蛋白结合配体,两个配体之间由连接臂相连。PROTAC通过将靶蛋白和细胞内的泛素连接酶E3拉近,形成靶蛋白-PROTAC-E3三元复合物,接着E3泛素连接酶给靶蛋白标记泛素化蛋白标签,随后启动细胞内强大的泛素化—蛋白酶体系统，特异性地降解靶蛋白，进而达到抑制相应蛋白信号通路的作用(Cell Biochem Funct.2019,37,21-30)。与传统的小分子抑制剂相比，PROTAC展现出了独特的优势:1、PROTAC不需要与目标靶蛋白长时间和高强度的结合,并且降解靶蛋白过程类似于催化反应,可循环结合，降解靶蛋白。从而降低药物的系统暴露量，减少毒副作用的发生。2、靶蛋白被降解后需要重新合成才能恢复功能,因此降解靶蛋白比抑制其活性显示出更加高效、持久的抗肿瘤作用，且不易发生因靶蛋白突变而产生的耐药性。3、对于目前认为不可成药的靶点，例如转录因子，支架蛋白和调控蛋白等，PROTAC也具有治疗潜力(Cell Chem.Biol.2018,25,67-77)。

抑制凋亡信号通路可促进肿瘤的发生。BCL-xL和BCL-2属于抗凋亡BCL-2(B-celllymphoma 2,BCL-2)蛋白家族，通过保护肿瘤细胞不发生凋亡，在促进肿瘤起始、进展和耐药发展中发挥重要作用。在许多恶性血液病(如非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病等)中可检测到BCL-2基因异常扩增；BCL-xL在许多实体肿瘤细胞(如结直肠癌、宫颈癌等)和恶性血液病细胞的亚群中过表达[Cancer Discov.2022；12(5):1217-1232；Mol Cancer.2015；14:126]。因此，靶向BCL-2和BCL-xL的药物具有广阔的肿瘤治疗前景。

目前，BCL-2选择性小分子抑制剂维奈托克已获批用于成人慢性淋巴细胞性白血病或小淋巴细胞淋巴瘤，以及联合阿扎胞苷、地西他滨或小剂量阿糖胞苷治疗成人(大于75岁)新诊断的急性髓系白血病或有合并症不能使用强化诱导化疗的患者，临床取得了较好的疗效[Nat Rev Cancer.2022；22(1):45-64]。但是部分病人经过一段时间治疗后会产生耐药，主要是由于BCL-2突变(如G101V、D103Y突变等)、上调BCL-xL等。此外，维奈托克对实体肿瘤的治疗作用有限，因为大多数实体肿瘤细胞不依赖BCL-2存活[J Hematol Oncol2022；15(1):75；Nat Commun.2018；9(1):3513]。因此，开发靶向BCL-2/xL的药物可能克服维奈托克治疗疾病的局限性，扩大适应症，并且能克服耐药性。

虽然BCL-xL是目前最重要的癌症靶点之一，但由于BCL-xL是血小板存活所必需的[Cell Death Dis 2015；6(4):e1721]，目前未有安全有效的靶向BCL-xL药物获批上市。ABT-263作为BCL-2，BCL-xL和BCL-w的抑制剂，临床前研究数据显示出优异的抑制肿瘤效果。但在临床实验中，因抑制BCL-xL而诱导靶向性和剂量限制性血小板减少的严重毒性而未获批准[Lancet Oncol.2010；11(12):1149-59]。如何规避靶向BCL-xL导致的血小板毒性成为药物研发的关键。由于血小板中E3连接酶低表达，可以利用PROTAC技术减少靶向BCL-xL引起的血小板减少。通过开发BCL-2/xL PROTAC，同时靶向BCL-2和BCL-xL，达到增强抗肿瘤活性，降低血小板毒性的效果。因此BCL-2/xLPROTAC可能成为更有潜力的肿瘤治疗方法。

已公开的BCL-2蛋白靶向降解PROTAC化合物的专利申请包括WO2019144117A1、WO2017184995A1、WO2021222114A1和WO2020163823A2等。

发明内容

本公开的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物或其可药用的盐：

其中：

环A选自*端与L相连，+端与苯基相连；

环A’为环烷基或杂环基；

R¹选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

R^1a选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

R^1b、R^1c、R^1d、R^1e和R^1f相同或不同，且各自独立地选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

R²选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、氰基、羟基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

环B选自环烷基、杂环基和*端与环C相连；

环B¹为芳基或杂芳基；

环B²为环烷基或杂环基；

环C选自芳基、杂芳基和*端与Y相连；

环C¹为芳基或杂芳基；

环C²为环烷基或杂环基；

R³和R⁴相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；或者，R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基；所述环烷基或杂环基各自独立地任选被选自氧代基、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基中的一个或多个取代基所取代；

各个R^3a和各个R^4a相同或不同，且各自独立地选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

Y为键或C(O)；

X为O或NH；

R⁵选自-S(O)R^5a、-S(O)₂R^5a、卤素、硝基、氰基和卤代烷基；

R^5a选自烷基、卤代烷基、环烷基和环烷基烷基；

R选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基；

环D选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；

各个R^b相同或不同，且各自独立地选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、-C(O)R^2c、-C(O)OR^2c、-C(O)NR^2aR^2b和环烷基；

R^2a和R^2b相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基；

R^2c选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基和环烷基烷基；

L为连接单元；

A选自

R⁹选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氨基、氰基、环烷基、杂环基、环烷基烷基和杂环基烷基；

R¹⁰选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基和杂芳基；

R¹¹选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、硝基、环烷基和杂环基；

环E为芳基或杂芳基；所述芳基或杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、氰基、硝基、氨基、-NHCH₃、-N(CH₃)₂和环烷基中的一个或多个取代基所取代；

环F为环烷基或杂环基；所述环烷基或杂环基各自独立地任选被选自氧代基、卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、氰基、硝基、氨基、-NHCH₃、-N(CH₃)₂和环烷基中的一个或多个取代基所取代；

环G为芳基或杂芳基；

各个R¹²相同或不同，且各自独立地选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、硝基、氨基、-NHCH₃、-N(CH₃)₂和环烷基；

R¹³选自氢原子、卤素和烷基；

R¹⁴选自氢原子、卤素、烷基和氰基；

---为单键或双键；

W¹为C或N；

W²为C或N；

n为0、1、2或3；

s、x、y、v、u、m、h、j、k和r各自独立地为0、1、2或3。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中当A为(A-18)时，以下条件至少满足一条：

1、不为/>

2、不为/>

3、环A不选自

4、L¹为NR^A-亚烷基，亚烷基端与L²相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L为L¹与环A相连，L⁵与A相连；

其中：

L¹、L²、L³和L⁴各自独立地选自键、NR^A、O、S、C(O)、C(S)、S(O)₂、C(O)NR^A、NR^AC(O)、NR^AC(O)NR^B、NR^A-亚烷基、亚烷基-NR^A、C(O)O、OC(O)、亚烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、杂环基-亚烷基、亚烷基-杂环基、芳基、杂芳基、亚烷基-O、O-亚烷基、亚烷基-O-亚烷基、亚烷基-O-亚烷基-O-亚烷基、亚烷基-环烷基-亚烷基、亚烷基-杂环基-亚烷基、亚烷基-芳基-亚烷基、亚烷基-杂芳基-亚烷基、亚烷基-O-芳基-O-亚烷基、 *端与通式(X)中右侧基团相连；所述亚烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自氧代基、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基中的一个或多个取代基所取代；

p为0至5的整数；

q为0至5的整数；

f为0至10的整数；

L⁵选自键、亚烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、杂环基-亚烷基、亚烷基-杂环基、芳基、杂芳基、O、S、S(O)₂、NR^A、C(O)、C(S)、O-亚烷基、亚烷基-O、C(O)NR^A、NR^AC(O)、C(O)O、OC(O)、C(O)-亚烷基、亚烷基-C(O)、NR^A-亚烷基、亚烷基-NR^A、NR^A(CH₂)_0-3O(CH₂)_0-3O、O(CH₂)_0-3O(CH₂)_0-3NR^A、NR^AC(O)(CH₂)_0-3NR^B、NR^B(CH₂)_0-3C(O)NR^A和所述亚烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自氧代基、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基中的一个或多个取代基所取代；R^A和R^B相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或通式(X)所示的化合物或其可药用的盐，其中R^A为氢原子或C_1-6烷基；优选地，R^A为甲基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、通式(X)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与L²相连；优选地，L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与L²相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、通式(X)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中L¹为NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与L²相连；优选地，L¹为N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与L²相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、通式(X)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中L²为3至12元杂环基；优选地，L²为4至7元杂环基；更优选地，L²选自

进一步优选地，L²选自/> 进一步优选地，L²为最优选地，L²为/>*端与L³相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或通式(X)所示的化合物或其可药用的盐，其中L³为C(O)。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或通式(X)所示的化合物或其可药用的盐，其中L⁴为C_1-10亚烷基；在一些实施方案中，L⁴为(CH₂)_t，t为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；在一些实施方案中，L⁴为(CH₂)_t，t为3、4、5或6；在一些实施方案中，L⁴为(CH₂)₄或(CH₂)₆。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、通式(X)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中L⁵选自键、O和O-C_1-6亚烷基，且O-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与A相连；优选地，L⁵选自键、O和OCH₂，OCH₂中CH₂与A相连；更优选地，L⁵为键或O。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或通式(X)所示的化合物或其可药用的盐，其中L³为C(O)；和/或L⁴为C_1-10亚烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L为L¹与环A相连，L⁵与A相连；L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与L²相连；L²为4至7元杂环基；L³为C(O)；L⁴为C_1-10亚烷基；L⁵选自键、O和O-C_1-6亚烷基，且O-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与A相连；在一些实施方案中，L为/>L¹与环A相连，L⁵与A相连；L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与L²相连；L²为/> *端与L³相连；L³为C(O)；L⁴为(CH₂)₄或(CH₂)₆；L⁵为键或O；优选地，L选自 *端与A相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L为L¹与环A相连，L⁵与A相连；L¹为NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与L²相连；L²为4至7元杂环基；L³为C(O)；L⁴为C_1-10亚烷基；L⁵为键或O；优选地，L为/>*端与A相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L选自亚烷基-杂环基-C(O)-亚烷基、亚烷基-杂环基-C(O)-亚烷基-O、NR^A-亚烷基-杂环基-C(O)-亚烷基和NR^A-亚烷基-杂环基-C(O)-亚烷基-O，R^A为氢原子或烷基；在一些实施方案中，L选自(CH₂)_t1-4至7元杂环基-C(O)-(CH₂)_t、(CH₂)_t1-4至7元杂环基-C(O)-(CH₂)_t-O和NR^A-(CH₂)_t1-4至7元杂环基-C(O)-(CH₂)_t，R^A为氢原子或C_1-6烷基，t1为0、1、2、3、4、5或6，t为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；

在一些实施方案中，L选自 U为CH或N，V为CH或N，t1为0、1、2、3、4、5或6，t为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；R^A为氢原子或C_1-6烷基，*键与A连接。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其为通式(II)所示的化合物或其可药用的盐：

其中：

环L²为3至12元含氮杂环基；所述3至12元含氮杂环基任选被选自氧代基、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、羟基、氰基、硝基、-(CH₂)_sNR^2aR^2b、环烷基和环烷基烷基中的一个或多个取代基所取代；

t为0至10的整数；

环A、环B、环C、环D、R、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R^2a、R^2b、R^b、Y、X、v、s、n、x、y和A如通式(I)中所定义；L¹和L⁵如通式(X)中所定义。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或(II)所示的化合物或其可药用的盐，其中X为NH。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或(II)所示的化合物或其可药用的盐，其中R为氢原子。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或(II)所示的化合物或其可药用的盐，其中X为NH；和/或R为氢原子。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)或(II)所示的化合物或其可药用的盐，其为通式(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐：

其中：

---为单键或双键；

环A、环B、环C、环D、环E、环F、环G、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R^b、R⁹、R¹⁰、R¹²、W¹、W²、Y、L¹、环L²、L⁵、A、u、v、x、y、t和n如通式(II)中所定义。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环B为其中环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基；---为单键或双键；优选地，环B为/> 更优选地，环B为/>*端与环C相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环B为5或6元杂环基；优选为更优选为/>*端与环C相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环B为3至12元杂环基或环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基；---为单键或双键；优选地，环B为5或6元杂环基或/>环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基；---为单键或双键；更优选地，环B选自进一步优选地，环B选自进一步优选地，环B为/>*端与环C相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C选自苯基、10元杂芳基和其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基；*端与Y相连；---为单键或双键；优选地，环C为苯基；在一些实施方案中，环C选自苯基、/>*端与Y相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C为6至10元芳基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C为5至10元杂芳基；优选地，环C为10元杂芳基；更优选地，环C选自进一步优选地，环C为*端与Y相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C为其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基；---为单键或双键；优选地，环C选自Z为N或CH；更优选地，环C为/>*端与Y相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)和(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C为10元杂芳基或其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基；---为单键或双键；优选地，环C选自/>

Z为N或CH；更优选地，环C为*端与Y相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中R³和R⁴均为氢原子；或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基；在一些实施方案中，R³和R⁴均为氢原子；或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成6或7元含氧杂环基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中R³和R⁴均为氢原子。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基；优选地，R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成6或7元含氧杂环基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中各个R^3a相同或不同，且各自独立地选自C_1-6烷基、卤素、C_1-6羟烷基和C_1-6卤代烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中各个R^4a相同或不同，且各自独立地选自C_1-6烷基、卤素、C_1-6羟烷基和C_1-6卤代烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中x为0或1，优选为0。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中y为0或1，优选为0。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/>/> 优选选自更优选选自在一些实施方案中，/>选自

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中为/>优选为R^3a、R^4a、x和y如通式(I)中所定义；更优选选自/>进一步优选选自

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/>R^3a、R^4a、x和y如通式(II-4)中所定义；优选选自/> />

更优选选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(X)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；和/或环L²为*端与C(O)相连；和/或L⁵为键或O。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-1)、(II-2)所示的化合物或其可药用的盐，其中L⁵为O或OCH₂，OCH₂中的CH₂与结构A相连；优选地，L⁵为O。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中L⁵为键。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中A选自 ---、W¹、W²、环E、环F、环G、R⁹、R¹⁰、R¹²和u如通式(I)中所定义。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中A选自 ---、W¹、W²、环E、环F、环G、R⁹、R¹⁰、R¹²和u如通式(I)中所定义；在一些实施方案中，A为 ---、W¹、W²、环E、环F、环G、R⁹、R¹⁰、R¹²和u如通式(I)中所定义。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R⁹为氢原子或C_1-6烷基；优选地，R⁹为氢原子或甲基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹⁰为C_1-6烷基；优选地，R¹⁰为叔丁基或异丙基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-1)或(II-2)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹⁰为异丙基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹⁰为叔丁基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环E为5或6元杂芳基；优选为5元杂芳基；更优选选自最优选地，环E为/>*端与L或L⁵相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中各个R¹²相同或不同，且各自独立地选自卤素、C_1-6烷基和C_1-6卤代烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中u为0或1；优选为0。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环F为6或7元杂环基；在一些实施方案中，环F为6元杂环基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环G为5元杂芳基；优选地，环G为噻唑基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/> 优选为更优选为/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中A选自 />

/>优选选自/> /> 更优选选自在一些实施方案中，A选自/> 在一些实施方案中，A选自

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R^1a选自氢原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基C_1-6烷基；优选地，R^1a为氢原子或C_1-6烷基；更优选地，R^1a为氢原子或甲基；最优选地，R^1a为甲基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R^1b、R^1c、R^1d、R^1e和R^1f相同或不同，且各自独立地选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6羟烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中m、h、j、k和r各自独立地为0。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A’为3至8元杂环基；优选地，环A’为4元杂环基；更优选地，环A’为氮杂环丁烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A为R^1e和m如通式(I)中所定义；优选地，环A为/>*端与L或L¹相连，+端与苯基相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A为环A’为3至8元杂环基；R^1c、R^1d、j和k如通式(I)中所定义；优选地，环A为/>*端与L或L¹相连，+端与苯基相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A为环A’为3至8元杂环基；R^1e、R^1c、R^1d、m、j和k如通式(I)中所定义；优选地，环A为/>*端与L或L¹相连，+端与苯基相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自/>优选为/>更优选为/>*端与L或L¹相连，+端与苯基相连。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹为卤素，优选为Cl。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R²为氢原子或羟基，优选为氢原子。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹为卤素；和/或R²为氢原子。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)示的化合物或其可药用的盐，其中R^5a为C_1-6烷基或C_1-6卤代烷基，优选为三氟甲基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)示的化合物或其可药用的盐，其中R⁵为-S(O)₂R^5a；R^5a如通式(I)中所定义；优选为C_1-6卤代烷基磺酰基；更优选为-S(O)₂CF₃。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中n为1。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中t为1至10的整数；优选地，t为4、5或6；更优选地，t为4或6。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中t1为1或2。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中各个R^b相同或不同，且各自独立地选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6羟烷基；优选地，R^b为C_1-6羟烷基；更优选地，R^b为羟甲基或-CH₂CH₂OH。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中v为0或1；在一些实施方案中，v为1。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环D为5或6元杂环基；优选地，环D选自吗啉基、哌嗪基和哌啶基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环D为5或6元杂环基；和/或R^b为C_1-6羟烷基；和/或v为0或1。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中为/>Z¹为N或CH；R^c选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6羟烷基；优选地，/>为/>Z¹为N或CH；R^c为C_1-6羟烷基；更优选地，/>为/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)或(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中Z¹为N或CH；R^c选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6羟烷基；优选地，/>选自更优选地，/>为/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；R³和R⁴均为氢原子，或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基；R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；n为1；x为0；y为0；环B为5或6元杂环基或/>其中环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基，*端与环C相连；环C选自苯基、10元杂芳基和其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基，*端与Y相连；---为单键或双键；Y为键或C(O)；环D为5或6元杂环基；R^b为C_1-6羟烷基；v为0或1；L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与环L²相连；t为1至10的整数；环L²为3至12元含氮杂环基；L⁵为O或OCH₂，OCH₂中的CH₂与环E相连；环E选自5元杂芳基；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；R³和R⁴均为氢原子，或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基；R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；n为1；x为0；y为0；环B为5或6元杂环基或/>其中环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基，*端与环C相连；环C选自苯基、10元杂芳基和其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基，*端与Y相连；---为单键或双键；Y为键或C(O)；环D为5或6元杂环基；R^b为C_1-6羟烷基；v为0或1；L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与环L²相连；t为1至10的整数；环L²为3至12元含氮杂环基；L⁵为O或OCH₂，OCH₂中的CH₂与环E相连；环E选自5元杂芳基；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基；

选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；R³和R⁴均为氢原子，或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基；R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；n为1；x为0；y为0；环B为5或6元杂环基或/>其中环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基，*端与环C相连；环C选自苯基、10元杂芳基和其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基，*端与Y相连；---为单键或双键；Y为键或C(O)；环D为5或6元杂环基；R^b为C_1-6羟烷基；v为0或1；L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与环L²相连；t为1至10的整数；环L²为3至12元含氮杂环基；L⁵为键；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基；/>选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L或L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；x为0；y为0；Y为键或C(O)；R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；n为1；环D为5或6元杂环基；R^b为C_1-6羟烷基；v为0或1；L¹为C_1-6亚烷基或NR^A-C_1-6亚烷基，R^A为氢原子或C_1-6烷基，且NR^A-C_1-6亚烷基中的C_1-6亚烷基端与环L²相连；t为1至10的整数；环L²为3至12元含氮杂环基；L⁵选自键、O和OCH₂，OCH₂中的CH₂与结构A相连；A选自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)和(a-21)。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中为/>Z¹为N或CH；R^c选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6羟烷基；n为1；X为NH；R为氢原子；R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；Y为键或C(O)；选自/>/>

R¹为卤素；R²为氢原子；环A选自/> *端与L或L¹相连，+端与苯基相连；

L选自 U为CH或N，V为CH或N，t1为0、1、2、3、4、5或6，t为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；R^A为氢原子或C_1-6烷基，*键与A连接；A选自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)和(a-21)。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；/>选自/>

*端与Y相连；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；X为NH；n为1；R为氢原子；/>选自/> L选自 *端与A相连；A选自/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；/>选自/>

*端与Y相连；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；X为NH；n为1；R为氢原子；/>选自/>L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；环L²为/>*端与C(O)相连；t为4、5或6；L⁵为键或O；A选自/>/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；/>选自/>

*端与Y相连；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；n为1；/>选自/>L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；环L²为/> *端与C(O)相连；t为4、5或6；L⁵为O；环E为/>*端与L⁵相连；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基。

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；/>选自/>

*端与Y相连；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；n为1；/>选自/>L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；环L²为/> *端与C(O)相连；t为4、5或6；L⁵为O；环E为/>*端与L⁵相连；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基；为/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；/>选自/> *端与Y相连；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；n为1；/>选自L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；环L²为/> *端与C(O)相连；t为4、5或6；L⁵为键；R⁹为氢原子或C_1-6烷基；R¹⁰为C_1-6烷基；/>为/>

在本公开一些实施方案中，所述的通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自*端与L¹相连，+端与苯基相连；R¹为卤素；R²为氢原子；x为0；y为0；Y为键或C(O)；R⁵为-S(O)₂CF₃；n为1；/>选自L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；环L²为/>*端与C(O)相连；t为4、5或6；L⁵为键或O；A选自/>

表A本公开的典型化合物包括但不限于：

/>

本公开提供一种通式(II-1B)所示的化合物或其盐：

其中：

环E、L⁵、R⁹、R¹⁰和t如通式(II-1)中所定义。

本公开提供一种通式(II-2B)所示的化合物或其盐：

其中：

---为单键或双键；

环E、环F、环G、L⁵、W¹、W²、R⁹、R¹⁰、R¹²、u和t如通式(II-2)中所定义。

本公开提供一种通式(II-3B)所示的化合物或其盐：

其中：

---为单键或双键；

环F、环G、W¹、W²、R⁹、R¹⁰、R¹²、L⁵、u和t如通式(II-3)中所定义。

本公开提供一种通式(II-4A)所示的化合物或其盐：

其中：

环A、环D、L¹、环L²、R¹、R²、R^3a、R^4a、R⁵、R^b、Y、v、n、x和y如通式(II-4)中所定义。

表B本公开的典型中间体化合物包括但不限于：

/>

本公开的另一方面涉及一种制备通式(II)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括：

通式(IIA)所示的化合物或其盐与通式(IIB)所示的化合物或其盐，发生缩合反应得到通式(II)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

环A、环B、环C、环D、R、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R^b、Y、X、x、y、n、v、t、L¹、环L²、L⁵和A如通式(II)中所定义。

本公开的另一方面涉及一种制备通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-1B)所示的化合物或其盐，发生缩合反应得到通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

环A、环B、环C、环D、环E、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R⁹、R¹⁰、R^b、L¹、环L²、L⁵、Y、v、n、x、y和t如通式(II-1)中所定义。

本公开的另一方面涉及一种制备通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-2B)所示的化合物或其盐，发生缩合反应得到通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

---为单键或双键；

环A、环B、环C、环D、环E、环F、环G、W¹、W²、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R⁹、R¹⁰、R¹²、R^b、L¹、环L²、L⁵、Y、v、n、u、x、y和t如通式(II-2)中所定义。

本公开的另一方面涉及一种制备通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-3B)所示的化合物或其盐，发生缩合反应得到通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

---为单键或双键；

环A、环B、环C、环D、环F、环G、W¹、W²、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R⁹、R¹⁰、R¹²、R^b、Y、L¹、环L²、L⁵、v、n、u、x、y和t如通式(II-3)中所定义。

本公开的另一方面涉及一种制备通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括：

通式(II-4A)所示的化合物或其盐与通式(IIB)所示的化合物或其盐，发生缩合反应得到通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

环A、环D、R¹、R²、R^3a、R^4a、R⁵、R^b、Y、v、n、x、y、t、L¹、环L²、L⁵和A如通式(II-4)中所定义。

本公开的另一方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有本公开上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

本公开进一步涉及上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于降解BCL-2蛋白的药物中的用途。

本公开进一步涉及上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗和/或预防由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

本公开进一步涉及上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗和/或预防骨髓纤维化或癌症的药物中的用途；所述的癌症为实体瘤或血液恶性肿瘤，优选选自白血病、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤等)、多发性骨髓瘤、脑癌、滑膜肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、肺癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨瘤、肉瘤、骨软骨瘤、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌、甲状腺癌、真性红细胞增多症、输尿管肿瘤、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神经细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肝胚细胞瘤、肾母细胞瘤等)；所述白血病优选选自慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病；所述淋巴瘤优选选自非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤。

本公开还涉及一种降解受试者体内的BCL-2蛋白的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。

本公开还涉及一种治疗和/或预防由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。

本公开还涉及一种治疗和/或预防骨髓纤维化或癌症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物；所述的癌症为实体瘤或血液恶性肿瘤，优选选自白血病、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤等)、多发性骨髓瘤、脑癌、滑膜肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、肺癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨瘤、骨软骨瘤、肉瘤、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌、甲状腺癌、真性红细胞增多症、输尿管肿瘤、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神经细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肝胚细胞瘤、肾母细胞瘤等)；所述白血病优选选自慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病；所述淋巴瘤优选选自非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤。

本公开进一步涉及一种上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作药物。

本公开进一步涉及一种上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作降解受试者体内的BCL-2蛋白的药物。

本公开进一步涉及一种上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作治疗和/或预防由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症的药物。

本公开进一步涉及上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于降解受试者体内的BCL-2蛋白。

本公开进一步涉及上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗和/或预防由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症。

本公开进一步涉及一种上述通式(I)、(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)或表A所示的化合物或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗和/或预防骨髓纤维化或癌症；所述的癌症为实体瘤或血液恶性肿瘤，优选选白血病、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤等)、多发性骨髓瘤、脑癌、滑膜肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、肺癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨瘤、骨软骨瘤、肉瘤、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌、甲状腺癌、真性红细胞增多症、输尿管肿瘤、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神经细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肝胚细胞瘤、肾母细胞瘤等)；所述白血病优选选自慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病；所述淋巴瘤优选选自非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤。

优选地，本公开中所述的由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症为骨髓纤维化或癌症；所述的癌症为实体瘤或血液恶性肿瘤，优选选自白血病、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤等)、多发性骨髓瘤、脑癌、滑膜肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、肺癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨瘤、骨软骨瘤、肉瘤、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌、甲状腺癌、真性红细胞增多症、输尿管肿瘤、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睾丸癌、成神经细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肝胚细胞瘤、肾母细胞瘤等)；所述白血病优选选自慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病；所述淋巴瘤优选选自非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤。

“癌症”包括但不限于血液恶性肿瘤(例如，淋巴瘤、白血病、骨髓瘤)和实体恶性肿瘤。

在一些实施方案中，本公开所述“癌症”包括但不限于T细胞白血病、T细胞淋巴瘤、急性成淋巴细胞淋巴瘤(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性单核细胞白血病(AML)、多发性骨髓瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、伯基特淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤和实体肿瘤，例如，非小细胞肺癌(NSCLC，例如，EGF突变型NSCLC、KRAS突变型NSCLC)、小细胞肺癌(SCLC)、乳腺癌、成神经细胞瘤、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤(例如，BRAF突变型黑色素瘤、KRAS突变型黑色素瘤)、胰腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌和结肠癌(例如，KRAS突变型结肠癌、BRAF突变型结肠癌)。

在一些实施方案中，本公开所述“癌症”包括但不限于急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、肾上腺皮质癌、AIDS相关癌症、AIDS相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤(儿童小脑或大脑)、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干胶质瘤、脑肿瘤(小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤/恶性胶质瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、视觉通路和下丘脑胶质瘤、乳腺癌、支气管腺瘤/类癌瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤(儿童、胃肠)、未知的原发性癌、中枢神经系统淋巴瘤(原发性)、小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤/恶性胶质瘤、宫颈癌、儿童癌症、绒毛膜癌、慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性骨髓增生性病症、结肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、促结缔组织增生小圆细胞瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、食管癌、肿瘤的尤因家族中的尤因氏肉瘤、颅外生殖细胞肿瘤(儿童)、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、眼癌(眼内黑色素瘤、成视网膜细胞瘤)、胆囊癌、胃的(胃)癌、胃肠类癌瘤、胃肠基质肿瘤、生殖细胞肿瘤(儿童颅外、性腺外、卵巢)、妊娠滋养细胞肿瘤、成胶质细胞瘤、胶质瘤(成人、儿童脑干、儿童大脑星形细胞瘤、儿童视觉通路和下丘脑)、胃类癌瘤、毛细胞白血病、头颈癌、肝细胞(肝)癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、下丘脑和视觉通路胶质瘤(儿童)、眼内黑色素瘤、胰岛细胞癌、卡波西肉瘤、肾癌(肾细胞癌)、喉癌、白血病(急性成淋巴细胞性、急性骨髓性、慢性淋巴细胞性、慢性骨髓性、毛细胞)、唇和口腔癌、肝癌(原发性)、肺癌(非小细胞、小细胞)、淋巴瘤(AIDS相关的、伯基特、皮肤T细胞、霍奇金、非霍奇金、原发性中枢神经系统)、巨球蛋白血症(瓦尔登斯特伦)、骨的恶性纤维组织细胞瘤/骨肉瘤、髓母细胞瘤(儿童)、黑色素瘤、眼内黑色素瘤、Merkel细胞癌、间皮瘤(成人恶性、儿童)、具有潜隐原发性的转移性鳞状颈癌、口癌、多发性内分泌瘤形成综合征(儿童)、多发性骨髓瘤/浆细胞赘生物、蕈样霉菌病、脊髓发育不良综合征、脊髓发育不良/骨髓增生性疾病、骨髓性白血病(慢性)、骨髓性白血病(成人急性、儿童急性)、多发性骨髓瘤、骨髓增生性病症(慢性)、鼻腔和鼻旁窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肾盂移行细胞癌、尿道癌、子宫癌(子宫内膜)、子宫肉瘤、阴道癌、视觉通路和下丘脑胶质瘤(儿童)、外阴癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症和Wilms肿瘤(儿童)。

在一些些实施方案中，癌症选自滑液肉瘤、伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、成胶质细胞瘤、小细胞肺癌、胰腺癌、肝细胞(肝)癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤/骨的恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌(肾细胞癌)、甲状腺癌和白血病(急性淋巴细胞、急性骨髓性、慢性淋巴细胞性和慢性骨髓性)。__

本公开单独使用的BCL-2指BCL-2蛋白质家族的成员，包括BCL-2、BCL-xL、MCL-1和BCL-W等。

优选地，本公开中所述的BCL-2为BCL-2和/或BCL-xL；更优选地，本公开中所述的BCL-2为BCL-2和BCL-xL。

可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本公开化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。

作为一般性指导，合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。

本公开的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量％的活性化合物。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。

也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒混合的软明胶胶囊提供口服制剂。

水混悬液含有活性物质和用于混合的适宜制备水混悬液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂、分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些组合物。

本公开的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油、矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。

本公开的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳，可通过局部大量注射将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本公开化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。

本公开的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何调和固定油。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本公开化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合、疾病的严重性等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、化合物的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

术语说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和的直链或带有支链的脂肪族烃基，其具有1至20个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)碳原子(即C_1-20烷基)。所述烷基优选具有1至12个碳原子的烷基(即C_1-12烷基)，更优选具有1至6个碳原子的烷基(即C_1-6烷基)。非限制性的实例包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“亚烷基”指二价烷基，其中烷基如上所定义，其具有1至20个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)碳原子(即C_1-20亚烷基)。所述亚烷基优选具有1至12个碳原子的亚烷基(即C_1-12亚烷基)，更优选具有1至10个碳原子的亚烷基(即C_1-10亚烷基)；进一步更优选具有1至6个碳原子的亚烷基(即C_1-6亚烷基)；进一步优选具有4至6个碳原子的亚烷基(即C_4-6亚烷基)。非限制性的实例包括：-CH₂-、-CH(CH₃)-、-C(CH₃)₂-、-CH₂CH₂-、-CH(CH₂CH₃)-、-CH₂CH(CH₃)-、-CH₂C(CH₃)₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂CH₂-等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“烯基”指分子中含有至少一个碳碳双键的烷基，其中烷基的定义如上所述，其具有2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个)碳原子(即C_2-12烯基)。所述烯基优选具有2至6个碳原子的烯基(即C_2-6烯基)。非限制性的实例包括：乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“炔基”指分子中含有至少一个碳碳三键的烷基，其中烷基的定义如上所述，其具有2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个)碳原子(即C_2-12炔基)。所述炔基优选具有2至6个碳原子的炔基(即C_2-6炔基)。非限制性的实例包括：乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。非限制性的实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基等。烷氧基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和的单环全碳环(即单环环烷基)或多环系统(即多环环烷基)，其具有3至20个(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即3至20元环烷基)。所述环烷基优选具有3至12个环原子的环烷基(即3至12元环烷基)，更优选具有3至8个环原子的环烷基(即3至8元环烷基)，最优选具有3至6个环原子的环烷基(即3至6元环烷基)。

所述的单环环烷基，非限制性的实例包括：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基和环辛基等。

所述的多环环烷基包括：螺环烷基、稠环烷基和桥环烷基。

术语“螺环烷基”指环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环系统，其环内可以含有一个或多个双键，或其环内可以含有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，条件是至少含有一个全碳环且连接点在该全碳环上，其具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即5至20元螺环烷基)。所述螺环烷基优选具有6至14个环原子的螺环烷基(即6至14元螺环烷基)，更优选具有7至10个环原子的螺环烷基(即7至10元螺环烷基)。所述螺环烷基包括单螺环烷基和多螺环烷基(如双螺环烷基等)，优选单螺环烷基或双螺环烷基，更优选3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/3元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、5元/7元、6元/3元、6元/4元、6元/5元、6元/6元、6元/7元、7元/5元或7元/6元单螺环烷基。非限制性的实例包括：

其连接点可在任意位置；

等。

术语“稠环烷基”指环之间共享毗邻的两个碳原子的多环系统，其为单环环烷基与一个或多个单环环烷基稠合，或者单环环烷基与杂环基、芳基或杂芳基中的一个或多个稠合，其中连接点在单环环烷基上，其环内可以含有一个或多个双键，且具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即5至20元稠环烷基)。所述稠环烷基优选具有6至14个环原子的稠环烷基(即6至14元稠环烷基)，更优选具有7至10个环原子的稠环烷基(即7至10元稠环烷基)。所述稠环烷基包括双环稠环烷基和多环稠环烷基(如三环稠环烷基、四环稠环烷基等)，优选双环稠环烷基或三环稠环烷基，更优选3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/3元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、5元/7元、6元/3元、6元/4元、6元/5元、6元/6元、6元/7元、7元/5元或7元/6元双环稠环烷基。非限制性的实例包括：

，其连接点可在任意位置；

等。/>

术语“桥环烷基”指环之间共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环系统，其环内可以含有一个或多个双键，且具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)碳原子(即5至20元桥环烷基)。所述桥环烷基优选具有6至14个碳原子的桥环烷基(即6至14元桥环烷基)，更优选具有7至10个碳原子的桥环烷基(即7至10元桥环烷基)。所述桥环烷基包括双环桥环烷基和多环桥环烷基(如三环桥环烷基、四环桥环烷基等)，优选双环桥环烷基或三环桥环烷基。非限制性的实例包括：

其连接点可在任意位置。

环烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氧代基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和的单环杂环(即单环杂环基)或多环杂环系统(即多环杂环基)，其环内至少含有一个(例如1、2、3或4个)选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，且具有3至20个(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即3至20元杂环基)。所述杂环基优选具有3至12个环原子的杂环基(即3至12元杂环基)；优选具有4至11个环原子的杂环基(即4至11元杂环基)；进一步优选具有3至8个环原子的杂环基(即3至8元杂环基)；更优选具有6至7个环原子的杂环基(即6或7元杂环基)或4至7个环原子的杂环基(即4至7元杂环基)或或5至8个环原子的杂环基(即5至8元杂环基)；最优选具有5或6个环原子的杂环基(即5或6元杂环基)。

所述的单环杂环基，非限制性的实例包括：吡咯烷基、四氢吡喃基、1,2,3,6-四氢吡啶基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、吗啉基、硫代吗啉基和高哌嗪基等。

所述的多环杂环基包括螺杂环基、稠杂环基和桥杂环基。

术语“螺杂环基”指环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环系统，其环内可以含有一个或多个双键，且其环内至少含有一个(例如1、2、3或4个)选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，条件是至少含有一个单环杂环基且连接点在该单环杂环基上，其具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即5至20元螺杂环基)。所述螺杂环基优选具有6至14个环原子的螺杂环基(即6至14元螺杂环基)，更优选具有7至11个环原子的螺杂环基(即7至11元螺杂环基)。所述螺杂环基包括单螺杂环基和多螺杂环基(如双螺杂环基等)，优选单螺杂环基或双螺杂环基，更优选3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/3元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、5元/7元、6元/3元、6元/4元、6元/5元、6元/6元、6元/7元、7元/5元或7元/6元单螺杂环基。非限制性的实例包括：

等。

术语“稠杂环基”指环之间共享毗邻的两个原子的多环杂环系统，其环内可以含有一个或多个双键，且其环内至少含有一个(例如1、2、3或4个)选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，其为单环杂环基与一个或多个单环杂环基稠合，或者单环杂环基与环烷基、芳基或杂芳基中的一个或多个稠合，其中连接点在单环杂环基上，且具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即5至20元稠杂环基)。所述稠杂环基优选具有6至14个环原子的稠杂环基(即6至14元稠杂环基)，更优选具有7至10个环原子的稠杂环基(即7至10元稠杂环基)。所述稠杂环基包括双环和多环稠杂环基(如三环稠杂环基、四环稠杂环基等)，优选双环稠杂环基或三环稠杂环基，更优选3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/3元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、5元/7元、6元/3元、6元/4元、6元/5元、6元/6元、6元/7元、7元/5元或7元/6元双环稠杂环基。非限制性的实例包括：

等。

术语“桥杂环基”指环之间共用两个不直接连接的原子的多环杂环系统，其环内可以含有一个或多个双键，并且其环内至少含有一个(例如1、2、3或4个)选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，其具有5至20个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个)环原子(即5至20元桥杂环基)。所述桥杂环基优选具有6至14个环原子的桥杂环基(即6至14元桥杂环基)，更优选具有7至10个环原子的桥杂环基(即7至10元桥杂环基)。根据组成环的数目可以分为双环桥杂环基和多环桥杂环基(如三环桥杂环基、四环桥杂环基等)，优选双环桥杂环基或三环桥杂环基。非限制性的实例包括：

等。

杂环基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氧代基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的单环全碳芳环(即单环芳基)或多环芳环系统(即多环芳基)，其具有6至14个(例如6、7、8、9、10、11、12、13或14个)环原子(即6至14元芳基)。所述芳基优选具有6至10个环原子的芳基(即6至10元芳基)。所述的单环芳基，例如苯基。所述的多环芳基，非限制性的实例包括：萘基、蒽基、菲基等。所述多环芳基还包括苯基与杂环基或环烷基中的一个或多个稠合，或萘基与杂环基或环烷基中的一个或多个稠合，其中连接点在苯基或萘基上，并且在这种情况下，环原子个数继续表示多环芳环系统中的环原子个数，非限制性的实例包括：

等。

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氧代基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“杂芳基”指具有共轭的π电子体系的单环杂芳环(即单环杂芳基)或多环杂芳环系统(即多环杂芳基)，其环内至少含有一个(例如1、2、3或4个)选自氮、氧和硫的杂原子(所述的氮可任选被氧化，即形成氮氧化物；所述的硫可任选被氧代，即形成亚砜或砜，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-)，其具有5至14个(例如5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个)环原子(即5至14元杂芳基)。所述杂芳基优选具有5至10个环原子的杂芳基(即5至10元杂芳基)，更优选具有5或6个环原子的杂芳基(即5或6元杂芳基)或10元杂芳基。

所述的单环杂芳基，非限制性的实例包括：呋喃基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、呋咱基、吡咯基、N-烷基吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡啶酮基、N-烷基吡啶酮(如等)、吡嗪基、哒嗪基等。

所述的多环杂芳基，非限制性的实例包括：吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、酞嗪基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹唑啉基、苯并噻唑基、咔唑基等。所述多环杂芳基还包括单环杂芳基与一个或多个芳基稠合，其中连接点在芳香环上，并且在这种情况下，环原子个数继续表示多环杂芳环系统中的环原子个数。所述多环杂芳基还包括单环杂芳基与环烷基或杂环基中的一个或多个稠合，其中连接点在单环杂芳环上，并且在这种情况下，环原子个数继续表示多环杂芳环系统中的环原子个数。非限制性的实例包括：

等。

杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点被取代，取代基优选选自D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个。

术语“环烷基烷基”指烷基被一个或多个环烷基取代，其中环烷基、烷基如上所定义。

术语“杂环基烷基”指烷基被一个或多个杂环基取代，其中杂环基、烷基如上所定义。

术语“烷氧基烷基”指烷基被一个或多个烷氧基取代，其中烷氧基、烷基如上所定义，非限制性的实例包括：甲氧基甲基。

术语“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基如上所定义。

术语“卤代烷氧基”指烷氧基被一个或多个卤素取代，其中烷氧基如上所定义。

术语“羟烷基”指烷基被一个或多个羟基取代，其中烷基如上所定义。

术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

术语“羟基”指-OH。

术语“氨基”指-NH₂。

术语“氰基”指-CN。

术语“硝基”指-NO₂。

术语“氧代”或“氧代基”指“＝O”。

术语“羰基”指C＝O。

TBS指叔丁基二甲基硅基。

术语“氨基烷基”指烷基被一个或多个氨基取代，其中氨基、烷基如上所定义。

术语“泛素连接酶”是指促进泛素向特异性底物蛋白质转移、靶向底物蛋白质用于降解的蛋白质家族。例如，小脑蛋白是单独或与E2泛素结合酶组合导致泛素连接到标靶蛋白质上的赖氨酸并且随后靶向特异性蛋白质底物用于通过蛋白酶体降解的E3泛素连接酶蛋白质。因此，E3泛素连接酶单独或与E2泛素结合酶复合是泛素向标靶蛋白质转移的原因。一般来说，泛素连接酶参与聚泛素化，以便第二泛素连接到第一泛素，第三泛素连接到第二泛素，等等。聚泛素化标记蛋白质用于通过蛋白酶体降解。然而，存在一些限于单泛素化的泛素化事件，其中仅单一泛素通过泛素连接酶添加到底物分子。单泛素化蛋白质不被靶向到蛋白酶体用于降解，但可能反而在其细胞位置或功能方面改变，例如经由结合具有能够结合泛素的结构域的其它蛋白质。让事情更复杂的是，泛素上的不同赖氨酸可以由E3靶向以制备链。最常见赖氨酸是泛素链上的Lys48。这是用以制备聚泛素的赖氨酸，其由蛋白酶体识别。

术语“靶蛋白”是指具有任何生物功能或活性(包括结构、调节、激素、酶促、遗传、免疫、收缩、储存、运输和信号转导)的蛋白质和肽。在一些实施方案中，靶蛋白质包括结构蛋白质、受体、酶、细胞表面蛋白质、与细胞的集成功能相关的蛋白质，包括以下各者中涉及的蛋白质：催化活性、芳香酶活性、运动活性、螺旋酶活性、新陈代谢过程(合成代谢和分解代谢)、抗氧化活性、蛋白水解、生物合成、具有激酶活性的蛋白质、氧化还原酶活性、转移酶活性、水解酶活性、裂解酶活性、异构酶活性、连接酶活性、酶调节因子活性、信号转导因子活性、结构分子活性、结合活性(蛋白质、脂质碳水化合物)、受体活性、细胞运动性、膜融合、细胞通讯、生物过程调节、发育、细胞分化、剌激反应、行为蛋白质、细胞粘附蛋白、细胞死亡中涉及的白质、转运中涉及的蛋白质(包括蛋白质转运活性、核转运、离子转运活性、通道转运活性、载体活性)、通透酶活性、分泌活性、电子转运活性、发病原、伴随蛋白调节因子活性、核酸结合活性、转录调节因子活性、细胞外构造和生物起源活性、转译调节因子活性。所述蛋白质包括来自真核生物和原核生物的蛋白质，所述真核生物和原核生物包括微生物、病毒、真菌和寄生虫以及众多其它者，包括作为药物疗法标靶的人类、微生物、病毒、真菌和寄生虫，其它动物包括家养动物)、用于测定抗生素的标革巴的微生物和其它抗微生物药和植物和甚至病毒以及众多其它者。

在一些实施方案中，所述的药物组合物的单位剂量为0.001mg-1000mg。

在某些实施方案中，基于组合物的总重量，所述的药物组合物含有0.01-99.99％的前述化合物或其可药用的盐或其同位素取代物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.1-99.9％的前述化合物或其可药用的盐或其同位素取代物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的前述化合物或其可药用的盐或其同位素取代物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有1％-99％的前述化合物或其可药用的盐或其同位素取代物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有2％-98％的前述化合物或其可药用的盐或其同位素取代物。

在某些实施方案中，基于组合物的总重量，所述的药物组合物含有0.01％-99.99％的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.1％-99.9％的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有1％-99％的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有2％-98％的药学上可接受的赋形剂。

本公开化合物可以存在特定的立体异构体形式。术语“立体异构体”是指结构相同但原子在空间中的排列不同的异构体。其包括顺式和反式(或Z和E)异构体、(-)-和(+)-异构体、(R)-和(S)-对映异构体、非对映异构体、(D)-和(L)-异构体、互变异构体、阻转异构体、构象异构体及其混合物(如外消旋体、非对映异构体的混合物)。本公开化合物中的取代基可以存在另外的不对称原子。所有这些立体异构体以及它们的混合物，均包括在本公开的范围内。可以通过手性合成、手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(-)-和(+)-异构体、(R)-和(S)-对映异构体以及(D)-和(L)-异构体。本公开某化合物的一种异构体，可以通过不对称合成或者手性助剂来制备，或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，得到纯的异构体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过色谱法完成。

本公开所述化合物的化学结构中，键表示未指定构型，即如果化学结构中存在手性异构体，键/>可以为/>或者同时包含/>两种构型。对于所有的碳-碳双键，即使仅命名了一个构型，Z型和E型均包括在内。

本公开的化合物可以以不同的互变异构体形式存在，并且所有这样的形式包含在本公开的范围内。术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指平衡存在并且容易从一种异构形式转化为另一种异构形式的结构异构体。其包括所有可能的互变异构体，即以单一异构体的形式或以所述互变异构体的任意比例的混合物的形式存在。非限制性的实例包括：酮-烯醇、亚胺-烯胺、内酰胺-内酰亚胺等。内酰胺-内酰亚胺平衡实例如下所示：

如当提及吡唑基时，应理解为包括如下两种结构中的任何一种或两种互变异构体的混合物：

所有的互变异构形式在本公开的范围内，且化合物的命名不排除任何互变异构体。

本公开的化合物包括其化合物的所有合适的同位素衍生物。术语“同位素衍生物”是指至少一个原子被具有相同原子序数但原子质量不同的原子替代的化合物。可引入到本公开化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘等的稳定和放射性的同位素，例如分别为²H(氘，D)、³H(氚，T)、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²p、³³p、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹²⁹I和¹³¹I等，优选氘。

相比于未氘代药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本公开的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本公开的范围之内。与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换，其中氘的替换可以是部分或完全的，部分氘的替换是指至少一个氢被至少一个氘替换。

当一个位置被特别地指定为氘D时，该位置应理解为具有大于氘的天然丰度(其为0.015％)至少1000倍的丰度的氘(即至少15％的氘掺入)。示例中化合物的具有大于氘的天然丰度可以是至少1000倍的丰度的氘(即至少15％的氘掺入)、至少2000倍的丰度的氘(即至少30％的氘掺入)、至少3000倍的丰度的氘(即至少45％的氘掺入)、至少3340倍的丰度的氘(即至少50.1％的氘掺入)、至少3500倍的丰度的氘(即至少52.5％的氘掺入)、至少4000倍的丰度的氘(即至少60％的氘掺入)、至少4500倍的丰度的氘(即至少67.5％的氘掺入)、至少5000倍的丰度的氘(即至少75％的氘掺入)、至少5500倍的丰度的氘(即至少82.5％的氘掺入)、至少6000倍的丰度的氘(即至少90％的氘掺入)、至少6333.3倍的丰度的氘(即至少95％的氘掺入)、至少6466.7倍的丰度的氘(即至少97％的氘掺入)、至少6600倍的丰度的氘(即至少99％的氘掺入)、至少6633.3倍的丰度的氘(即至少99.5％的氘掺入)或更高丰度的氘。

“任选的”或“任选”是指随后所描述的事件或环境可以但不必然发生，其包括该事件或环境发生或不发生两种情形。例如“任选被卤素或者氰基取代的C_1-6烷基”包括烷基被卤素或者氰基取代的情形和烷基不被卤素或氰基取代的情形。

“取代”或“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选1至6个，更优选1至3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下(通过实验或理论)确定可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和键的碳原子(如烯)结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其可药用的盐与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用的盐”是指本公开化合物的盐，可选自无机盐或有机盐。这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。可以在化合物的最终分离和纯化过程中，或通过使合适的基团与合适的碱或酸反应来单独制备。通常用于形成药学上可接受的盐的碱包括无机碱，例如氢氧化钠和氢氧化钾，以及有机碱，例如氨。通常用于形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸以及有机酸。

针对药物或药理学活性剂而言，术语“治疗有效量”是指足以达到或至少部分达到预期效果的药物或药剂的用量。治疗有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的治疗有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

本文所用的术语“药学上可接受的”是指这些化合物、材料、组合物和/或剂型，在合理的医学判断范围内，适用于与患者组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，具有合理的获益/风险比，并且对预期的用途是有效。

本文所使用的，单数形式的“一个”、“一种”和“该”包括复数引用，反之亦然，除非上下文另外明确指出。

当将术语“约”应用于诸如pH、浓度、温度等的参数时，表明该参数可以变化±10％，并且有时更优选地在±5％之内。如本领域技术人员将理解的，当参数不是关键时，通常仅出于说明目的给出数字，而不是限制。

本公开化合物的合成方法

为了完成本公开的目的，本公开采用如下技术方案：

方案一

本公开通式(II)所示的化合物或其可药用的盐的制备方法，其包括以下步骤：

通式(IIA)所示的化合物或其盐与通式(IIB)所示的化合物或其盐，在缩合剂和碱性试剂的作用下，发生缩合反应，得到通式(II)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

方案二

本公开通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐的制备方法，其包括以下步骤：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-1B)所示的化合物或其盐，在缩合剂和碱性试剂的作用下，发生缩合反应，得到通式(II-1)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

方案三

本公开通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐的制备方法，其包括以下步骤：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-2B)所示的化合物或其盐，在缩合剂和碱性试剂的作用下，发生缩合反应得到通式(II-2)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

方案四

本公开通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐的制备方法，其包括以下步骤：

通式(II-1A)所示的化合物或其盐与通式(II-3B)所示的化合物或其盐，在缩合剂和碱性试剂的作用下，发生缩合反应得到通式(II-3)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

---为单键或双键；

方案五

本公开通式(II-4)化合物或其可药用的盐的制备方法，其包括以下步骤：

通式(II-4A)所示的化合物或其盐与通式(IIB)所示的化合物或其盐，在缩合剂和碱性试剂的作用下，发生缩合反应得到通式(II-4)所示的化合物或其可药用的盐；

其中：

上述合成方案中，所述的缩合剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷；优选地，所述的缩合剂为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)。

上述合成方案中，所述碱性试剂包括有机碱类和无机碱类；所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、N,N-二甲基乙基胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钾、乙酸钠、乙醇钠、叔丁醇钠或叔丁醇钾；所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂一水合物、氢氧化锂和氢氧化钾；优选地，所述碱性试剂为N,N-二异丙基乙胺或三乙胺，更优选三乙胺。

上述合成方案优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：乙二醇二甲醚、醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、水、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺及其混合物。

具体实施方式

以下结合实施例用于进一步描述本公开，但这些实施例并非限制着本公开的范围。

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪或Bruker AVANCE NEO 500M，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定用Agilent 1200/1290DAD-6110/6120Quadrupole MS液质联用仪(生产商：Agilent，MS型号：6110/6120Quadrupole MS)。

waters ACQuity UPLC-QD/SQD(生产商：waters，MS型号：waters ACQuity QdaDetector/waters SQ Detector)

THERMO Ultimate 3000-Q Exactive(生产商：THERMO，MS型号：THERMOQExactive)

高效液相色谱法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高效液相色谱仪。

手性HPLC分析测定使用Agilent 1260DAD高效液相色谱仪。

高效液相制备使用Waters 2545-2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson GX-281制备型色谱仪。

手性制备使用Shimadzu LC-20AP制备型色谱仪。

CombiFlash快速制备仪使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。

本公开的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。

实施例中无特殊说明，反应均能够在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷/甲醇体系，B：正己烷/乙酸乙酯体系，C：石油醚/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。

实施例1

(2S,4R)-1-((2S)-2-(8-(4-((4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺1

第一步

1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪1b

将2-(哌嗪-1-基)乙醇1a(2.0g，15.36mmol，上海毕得)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入咪唑(1.67g，24.58mmol，上海泰坦)，叔丁基二甲基氯硅烷(1.52g，18.43mmol，上海泰坦)，搅拌反应2小时。减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物1b(3.0g，产率：80％)。

MS m/z(ESI):245.7[M+1]。

第二步

(±)-4-(4-((4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸1d

将(±)-4-((4’-氯-6-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯1c(1000mg，1.54mmol，采用专利申请CN113660937A中说明书第120页的实施例26的中间体1.16公开的方法制备而得)加入水(10mL)，四氢呋喃(10mL)和甲醇(10mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(193mg，4.60mmol)，加热至50℃搅拌反应10小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物1d(外消旋体，600mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):623.4[M+1]

第三步(R)-4-(苯基硫基)-3-((4-氨基磺酰基-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)甲磺酸丁酯1f

将(R)-4-((4-羟基-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺1e(1g，2.06mmol，采用专利申请WO2014028381A1中说明书第119页实施例14f公开的方法制备而得)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入吡啶(408mg，5.16mmol)，对二甲氨基吡啶(25mg，0.204mmol，上海韶远)，甲基磺酸酐(539mg，3.09mmol，上海毕得)，室温搅拌反应4小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物1f(1.12g，产率：96％)。

MS m/z(ESI):561.0[M-1]。

第四步(R)-4-((4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-

基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺1g

将化合物1b(978mg，4mmol)溶于乙腈(20mL)中，加入三乙胺(180mg，1.79mmol)和化合物1f(500mg，0.89mmol)，加热至75℃搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物1g(300mg，产率：47％)。MS m/z(ESI):711.6[M+1]。

第五步

4-((6-((4-(4-(((4-(((R)-4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基(甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯1h

将化合物1g(80mg，0.113mmol)，化合物1d(100mg，0.160mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(92mg，0.48mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(20mg，0.16mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(48mg，0.47mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物1h(非对映异构体混合物，160mg，产率：76％)。MS m/z(ESI):1315.6[M+1]。

第六步

4-(4-((4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(((R)-4-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺1i

将化合物1h(80mg，0.061mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物1i(60mg，非对映异构体混合物)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1100.8[M+1]。

第七步(2S,4R)-1-((2S)-2-(8-(4-((4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺1

将8-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酸1j(33mg，55μmol，采用专利申请WO2020163823A2中说明书第61页的中间体16公开的方法制备而得)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入化合物1i(60mg，54μmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’N’-四甲基脲六氟磷酸酯(23mg，60μmol)和三乙胺(55mg，544μmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物1(两个非对映异构体混合物，20mg，产率：22％)。

MS m/z(ESI):1683.3[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD-d₄):8.88(s,1H),8.56(d,1H),8.27(s,1H),8.04(d,1H),7.88-7.79(m,2H),7.48-7.37(m,3H),7.39(d,2H),7.34(d,2H),7.28(t,2H),7.21(t,1H),7.10(d,2H),6.87(d,2H),6.81(d,1H),5.02(q,1H),4.65(d,1H),4.62-4.55(m,2H),4.48-4.41(m,1H),4.10-4.00(m,2H),3.90(d,1H),3.80-3.72(m,3H),3.65-3.52(m,5H),3.27-3.19(m,4H),3.06-2.84(m,6H),2.70-1.91(m,28H),1.71-1.56(m,6H),1.55-1.48(m,3H),1.42-1.25(m,11H),1.05(s,6H),1.00(s,3H)。

实施例2

(S)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)-氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺2

第一步

(R)-4’-氯-4-(羟甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸乙酯2b

将(R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸乙酯2a(2.0g,4.739mmol,采用Journal of Medicinal Chemistry,2021,vol.64,#19,p.14230-14246中第14234页的Scheme 3，化合物15公开的方法制备而得)加入四氢呋喃(20mL)，加入盐酸(5mL,3mol/L)，室温搅拌12小时，加水淬灭，用碳酸氢钠溶液中和，经乙酸乙酯萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2b(1.2g，产率：85％)。

MS m/z(ESI):309.2[M+1]。

第二步

(R)-4’-氯-4-(甲酰基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸乙酯2c

将草酰氯(776mg，6.113mmol)加入二氯甲烷(10mL)中，氮气保护，在干冰乙醇浴下降温至-70℃，滴加二甲基亚砜(955mg,12.223mmol)，搅拌30分钟，将化合物2b(1.2g,3.896mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，滴加至反应液，搅拌30分钟，滴加三乙胺(2.06g,20.357mmol)，缓慢升至室温，搅拌反应1小时后加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤并收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2c(1g,产率：83％)。

MS m/z(ESI):307.2[M+1]。

第三步(R)-4-((4’-氯-6-(乙氧基羰基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯2d

将化合物2c(1.0g,3.257mmol)，哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.817g,9.772mmol，韶远)，钛酸四异丙酯(1.850g,6.514mmol)溶于1,2-二氯乙烷(20mL)中，升温至80℃，氮气氛下搅拌反应12小时，反应冷却至30℃，分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.452g,16.286mmol)，室温搅拌3小时后，加水淬灭，过滤并收集滤液，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2d(1.2g,产率：80％)。MS m/z(ESI):477.1[M+1]

第四步

(R)-4-((4’-氯-6-(羟甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯2e

将化合物2d(1.2g,2.515mmol)溶于四氢呋喃(15mL)中，冰浴下滴加1M的氢化锂铝四氢呋喃溶液(3mL)，室温搅拌反应3小时，加入十水硫酸钠淬灭，过滤后收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2e(875mg,产率：80％)。

MS m/z(ESI):435.1[M+1]

第五步

(S)-4-(4-溴-2-氟苯基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯2h

将(S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯2f(10.0g，46.24mmol，上海毕得)和4-溴-1,2-二氟苯2g(8.9g，46.24mmol，上海韶远)溶于二甲亚砜(150mL)，加入氢氧化钾(10.38g，184.95mmol)搅拌反应16小时，反应液中加水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并收集滤液，减压浓缩，得到粗品标题化合物2h(17g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):389.0[M+1]。

第六步

(S)-8-溴-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3(4H)-羧酸叔丁酯2i

将化合物2h(17g，43.67mmol)溶入四氢呋喃(120mL)中，0℃下加入1M的双(三甲基硅基)氨基锂的四氢呋喃溶液(59mL，59mmol)，搅拌反应0.5小时，加热至60℃搅拌反应1小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2i(1.2g，产率：9％)。

MS m/z(ESI):313.0[M-55]。

第七步

3-(叔丁基)8-甲基(S)-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3,8(4H)-二羧酸酯2j

将化合物2i(130mg，0.35mmol)，1,3-双(二苯膦基)丙烷(44mg，0.11mmol)，醋酸钯(24mg，0.11mmol)，三乙胺(356mg，3.52mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)和甲醇(3mL)的混合溶剂中，在一氧化碳气氛下加热至100℃反应18小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2j(20mg，产率：16％)。

MS m/z(ESI):349.1[M+1]。

第八步

(S)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯2k

将化合物2j(160mg，0.46mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物2k(100mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):249.4[M+1]。

第九步(S)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯2l

将化合物2e(165mg,0.38mmol)，三乙胺(115mg,1.14mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(52mg,0.45mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后收集滤液，减压浓缩，残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入化合物2k(94mg,0.38mmol)，碳酸钾(157mg,1.14mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物2l(70mg，产率：28％)。

MS m/z(ESI):665.6[M+1]。

第十步(S)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸2m

将化合物2l(70mg，0.105mmol)加入水(1mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(44mg，1.05mmol)，加热至50℃搅拌反应16小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后收集滤液，减压浓缩得标题化合物2m(60mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):651.4[M+1]。

第十一步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-(((S)-8-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪

-3(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯2o

将化合物2m(70mg，0.107mmol)，(R)-4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺2n(48mg，0.087mmol，采用Journal of MedicinalChemistry,2008,vol.51,#21,p.6902-6915中第6905页的Scheme 2，化合物20b公开的方法制备而得)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(62mg，0.323mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(13mg，0.105mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(33mg，0.326mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物2o(70mg，产率：55％)。MS m/z(ESI):1186.9[M+1]。

第十二步

(S)-3-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺2p

将化合物2o(70mg，0.059mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物2p(60mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1085.8[M+1]。

第十三步(S)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)-氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺2

将化合物1j(46mg，77μmol，采用专利申请WO2020163823A2中说明书第61页的中间体16公开的方法制备而得)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入化合物2p(70mg，64μmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(32mg，84μmol)和三乙胺(65mg，642μmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物2(30mg，产率：28％)。

MS m/z(ESI):1668.4[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.70(s,1H),8.35(s,1H),8.12(d,1H),7.56-7.42(m,1H),7.45-7.22(m,10H),7.09-6.94(m,3H),6.67(d,1H),6.61(d,1H),6.39-6.30(m,1H),5.16-5.05(m,1H),4.75-4.72(m,1H),4.64-4.60(m,1H),4.52-4.48(m,1H),4.16-4.09(m,2H),3.92-3.80(m,2H),3.76-3.33(m,12H),3.20-2.93(m,4H),2.87-2.75(m,4H),2.74-1.40(m,40H),1.06(s,9H),0.96(s,3H)。

实施例3

(R)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)-氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺3

第一步

(R)-4-(4-溴-2-氟苯基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯3b

将(R)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯3a(10.0g，46.24mmol，上海毕得)和化合物2g(8.9g，46.24mmol)溶于二甲亚砜(150mL)，加入氢氧化钾(10.38g，184.95mmol)搅拌反应16小时，向反应液中加水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，收集滤液，减压浓缩，得到粗品标题化合物3b(18g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。MS m/z(ESI):389.1[M+1]。

第二步

(R)-8-溴-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3(4H)-羧酸叔丁酯3c

将化合物3b(18g，46.24mmol)溶于四氢呋喃(200mL)中，0℃下加入1M的双(三甲基硅基)氨基锂的四氢呋喃溶液(60mL，60mmol)，搅拌反应0.5小时后，加热至60℃搅拌反应1小时，反应液冷却至室温，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物3c(2.7g，产率：16％)。

MS m/z(ESI):313.0[M-55]。

第三步

3-(叔丁基)8-甲基(R)-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3,8(4H)-二羧酸酯3d

将化合物3c(2.5g，6.77mmol)，1,3-双(二苯膦基)丙烷(600mg，1.45mmol)，醋酸钯(300mg，1.34mmol)，三乙胺(7.26g，71.75mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)和甲醇(10mL)的混合溶剂中，在一氧化碳气氛下加热至100℃反应18小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物3d(550mg，产率：23％)。

MS m/z(ESI):349.1[M+1]。

第四步

(R)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯3e

将化合物3d(230mg，0.66mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物3e(190mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):249.4[M+1]。

第五步(R)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯3f

将化合物2e(180mg,0.41mmol)，三乙胺(126mg,1.25mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(57mg,0.50mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后滤液减压浓缩，残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入化合物3e(103mg,0.41mmol)，碳酸钾(172mg,1.24mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物3f(150mg，产率：54％)。

MS m/z(ESI):665.6[M+1]。

第六步(R)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联

苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸3g

将化合物3f(150mg，0.225mmol)加入水(1mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(92mg，2.25mmol)，加热至50℃搅拌反应16小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3,用二氯甲烷萃取，分液，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题化合物3g(140mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):651.4[M+1]。

第七步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-(((R)-8-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)(甲酰氨基)-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯3h

将化合物3g(146mg，0.224mmol)，化合物2n(87mg，0.157mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(129mg，0.673mmol)，对二甲氨基吡啶(28mg，0.227mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(68mg，0.672mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物3h(150mg，产率：56％)。

MS m/z(ESI):1186.9[M+1]。

第八步

(R)-3-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺3i

将化合物3h(150mg，0.126mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物3i(130mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1086.6[M+1]。

第九步(R)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺3

将化合物1j(68mg，113μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入化合物3i(137mg，126μmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(57mg，150μmol)和三乙胺(127mg，1255μmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物3(45mg，产率：21％)。

MS m/z(ESI):1669.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.68(s,1H),8.33(d,1H),8.10(d,1H),7.50(d,1H),7.41-7.23(m,13H),7.09-6.96(m,3H),6.66(d,1H),6.34(d,1H),6.10(d,1H),5.12(q,1H),4.75(t,1H),4.63(d,1H),4.55-4.48(m,1H),4.19-4.09(m,2H),3.96-3.80(m,2H),3.73-3.65(m,10H),3.31-2.98(m,4H),2.92-2.73(m,4H),2.67(d,1H),2.63-1.54(m,42H),1.49(d,3H),1.06(s,6H),0.96(s,3H)。

实施例4

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁

-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺4

第一步(R)-N-(7-溴喹唑啉-4-基)-4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺4b

将7-溴-4-氯喹唑啉4a(130mg，0.535mmol，上海韶远)和化合物2n(230mg,0.416mmol)溶于二甲基亚砜(4.0mL)中，加入氢碳酸钾(115mg，0.833mmol，国药)，升温至90℃搅拌反应1小时。向反应液中加入水(200mL)，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(50mL×3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物4b(320mg，产率：101％)。

MS m/z(ESI):760.0[M+1]。

第二步(R)-4-(4-((4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯4c

将化合物4b(300mg，0.394mmol)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.537mmol，韶远)溶于无水二氧六环(10mL)中，加入碳酸铯(330mg,1.01mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦基-2’,6’-二异丙氧基-1,1’-联苯)(2-氨基-1,1’-联苯-2-基)钯(II)(50mg,0.597mmol)，升温至110℃，氮气氛下微波反应1小时。将反应液倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物4c(300mg，产率：87％)。

MS m/z(ESI):866.6[M+1]。

第三步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯4d

将化合物4c(300mg,0.346mmol)溶于氯化氢/二氧六环溶液(4mL,4.0M)，搅拌反应0.5小时，浓缩得粗品A。

将化合物2e(160mg,0.368mmol)，三乙胺(110mg,1.09mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(50mg,0.436mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品B。

将所得粗品A和B溶于二甲基甲酰胺(5mL)中，加入碳酸钾(150mg,1.08mmol)，加热至75℃反应24小时，反应液冷却至室温，加水(30mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物4d(250mg，产率：60％)。MS m/z(ESI):1182.5[M+1]。

第四步

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺4

将化合物4d(100mg，0.0845mmol)溶于氯化氢/二氧六环溶液(2mL,4.0M)中，搅拌反应1小时，浓缩所得粗品与化合物1j(55mg,0.0915mmol)溶于二甲基甲酰胺(3.0mL)中，加入三乙胺(70mg，0.692mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(41mg,0.108mmol)，室温反应1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈35％-60％，流速:30mL/min)得到标题化合物4(20mg，产率：13％)。

MS m/z(ESI):1664.7[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ11.77(s,1H),8.69(s,1H),8.31(s,1H),8.16(d,1H),8.02(s,1H),7.91(d,1H),7.56-7.21(m,12H),7.10-6.89(m,3H),6.62(d,1H),6.23(d,1H),5.16-5.04(m,1H),4.77-4.75(m,1H),4.60(d,1H),4.56-4.48(s,1H),4.16(d,1H),4.00-3.23(m,12H),3.12-3.04(m,2H),2.87-2.83(m,2H),2.67-1.85(m,20H),1.84-1.41(m,22H),1.38-1.22(m,6H)1.06(s,9H),0.98(s,3H).

实施例5-1和实施例5-2

(S)-3-(((R)-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺5-1

(S)-3-(((R)-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺5-2

/>

第一步

2-溴-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯酚5b

将2-溴-5-(羟甲基)苯酚5a(6g，29.55mmol)和咪唑(2.3g，33.34mmol)溶于二氯己烷(90mL)和四氢呋喃(30mL)的混合溶剂中，反应在0℃下滴加叔丁基二甲基氯硅烷(5.0g，33.31mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液，随后在0℃下搅拌2小时。向反应液中加水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物5b(8.2g，产率：84.5％)。

MS m/z(ESI):339.0[M+23]。

第二步

4-((2-溴-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯氧基)甲基)噻唑5d

将化合物5b(8.2g,25.84mmol)，噻唑-4-基甲醇5c(4.5g,38.73mmol，毕得)，三正丁基膦(10.5g,51.70mmol)溶于甲苯(100mL)中，氮气氛下滴加偶氮二甲酰二哌啶(13.1g,51.72mmol)的甲苯(40mL)溶液，滴加完毕后，升温至60℃下搅拌0.5小时。将反应液冷却至室温，减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物5d(7.7g，产率：71.9％)。

MS m/z(ESI):414.2[M+1]。

第三步

7-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-4H-色烯并[3,4-d]噻唑5e

将化合物5d(500mg,1.21mmol)，无水碳酸钾(501mg,3.63mmol)，三苯基膦(317mg,1.21mmol)和醋酸钯(135mg,601.31μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，升温至100℃，在氮气氛下搅拌反应12小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物5e(225mg，产率：55.9％)。

MS m/z(ESI):334.0[M+1]。

第四步

(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲醇5f

将化合物5e(225mg,0.67mmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，室温下滴加1M的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2.0mL，2.02mmol)，搅拌2小时。反应液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5f(62mg，产率：41.9％)。

MS m/z(ESI):220.1[M+1]。

第五步

4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-甲醛5g

将化合物5f(760mg,3.46mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，室温下加入戴斯-马丁氧化剂(2.2g,5.19mmol)，搅拌1小时。反应液过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤两遍，收集滤液，减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5g(750mg，产率：99.6％)。

MS m/z(ESI):218.0[M+1]。

第六步

(E)-N-((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺5h

将化合物5g(750mg,3.45mmol)，叔丁基亚磺酰胺(1.3g,10.40mmol)和碳酸铯(5.6g,17.19mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，室温搅拌16小时。反应液过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤两遍后收集滤液，减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5h(1.1g，产率：99.4％)。

MS m/z(ESI):321.2[M+1]。

第七步

(±)-N-(1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺5i

将化合物5h(1.1g,3.43mmol)溶于二氯甲烷(25mL)中，0℃氮气氛下滴加3M甲基溴化镁的2-甲基四氢呋喃溶液(5.7mL，17.19mmol)，滴加完毕后，将反应液升至室温搅拌3小时。向反应液中加入冰饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5i(外消旋体，789mg，产率：68.3％)。

MS m/z(ESI):337.2[M+1]。

第八步(2S,4R)-2-((1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯5k

将化合物5i(789mg,2.34mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液(3mL)中，室温搅拌0.5小时，反应液减压浓缩，所得残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸5j(600mg,2.59mmol，毕得)和N,N-二异丙基乙胺(910mg,7.04mmol)，溶液澄清后，加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(1.1g,2.89mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5k(两个非对映异构体混合物，1.0g，产率：95.7％)。

MS m/z(ESI):446.3[M+1]。

第九步((2S)-1-((2S,4R)-2-((1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-

基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯5m

将化合物5k(1.1g,2.40mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液(10mL)中，室温搅拌0.5小时，反应液减压浓缩，所得残余物溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入化合物5l(666mg,2.88mmol)和三乙胺(1.2g,12.00mmol)，溶液澄清后，加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(1.4g,3.60mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5m(两个非对映异构体混合物，1.3g，产率：97.0％)。MS m/z(ESI):559.1[M+1]。

第十步((S)-1-((2S,4R)-2-(((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷

-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯5n-1

((S)-1-((2S,4R)-2-(((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷

-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯5n-2

化合物5m(1.3g，2.33mmol)经高效液相制备色谱法纯化(Shimadzu lc-20ap，色谱柱：Sharpsil-T Prep C18,50*250mm,8μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈40％-60％，流速：80mL/min)得到标题化合物(300mg，收率：22.3％)和标题化合物(400mg，收率：29.8％)。

MS m/z(ESI):559.3[M+1]。

单一构型化合物(较短保留时间，保留时间：1.83min，300mg，产率：22.3％)；MS m/z(ESI):559.4[M+1]。

单一构型化合物(较长保留时间，保留时间：1.88min，400mg，产率：29.8％)。

第十一步

(2S,4R)-N-((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺5o-1

(2S,4R)-N-((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺5o-2

将化合物5n-1，5n-2中保留时间较短的化合物(150mg，0.27mmol)加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(5mL)中，室温搅拌反应0.5小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物5o-1或5o-2(123mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。MS m/z(ESI):459.3[M+1]。

将化合物5n-1，5n-2中保留时间较长的化合物(150mg，0.27mmol)加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(5mL)中，室温搅拌反应0.5小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物5o-1或5o-2(123mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应MS m/z(ESI):459.3[M+1]。

第十二步

8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酸甲酯5p-1

8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酸甲酯5p-2

将粗品化合物5o-1或5o-2(123mg,0.27mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较短的化合物制得)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(174mg,1.35mmol)，原料全部溶解后，加入辛二酸单甲酯(61mg,0.32mmol)和O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(153mg,0.40mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5p-1或5p-2(168mg，产率：99.6％)。

MS m/z(ESI):629.4[M+1]。

将粗品化合物5o-1或5o-2(123mg,0.27mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较长的化合物制得)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(174mg,1.35mmol)，原料全部溶解后，加入辛二酸单甲酯(61mg,0.32mmol)和O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(153mg,0.40mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物5p-1或5p-2(168mg，产率：99.6％)。

MS m/z(ESI):629.4[M+1]。

第十三步

8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酸5q-1

8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酸5q-2

将粗品化合物5p-1或5p-2(168mg，0.27mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较短的化合物制得)溶于甲醇(3mL)，水(3mL)和四氢呋喃(3mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(113mg，2.69mmol)，室温搅拌3小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用1M的稀盐酸调节体系pH至5～6，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题化合物5q-1或5q-2(150mg)。

MS m/z(ESI):615.4[M+1]。

将粗品化合物5p-1或5p-2(168mg，0.27mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较长的化合物制得)溶于甲醇(3mL)，水(3mL)和四氢呋喃(3mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(113mg，2.69mmol)，室温搅拌3小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用1M的稀盐酸调节体系pH至5～6，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题化合物5q-1或5q-2(120mg)。

MS m/z(ESI):615.4[M+1]。

第十四步(S)-3-(((R)-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]

吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺5-1

(S)-3-(((R)-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-2-(((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)甲酰氨基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]

吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺5-2

将化合物5q-1或5q-2(30mg,0.05mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较短的化合物制得)和化合物2p(33mg,0.03mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(18mg,0.18mmol)，原料全部溶解后加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(20mg,0.05mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩后残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号：Gilson 281色谱柱：Sharpsil-T，Prep30×250mm；5μm；C18流动相：水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈57％-77％，流速：30mL/min)得到标题化合物5-1或5-2(12mg，产率：21.2％)。MS m/z(ESI):1682.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.67(s,1H),8.34(d,1H),8.11(dd,1H),7.45-7.22(m,9H),7.14(dd,1H),7.07(dd,1H),7.02-6.92(m,3H),6.68(d,2H),6.62(d,2H),6.30(d,1H),5.47-5.38(m,2H),5.00(q,1H),4.79-4.71(m,2H),4.58-4.46(m,2H),4.18-4.08(m,2H),3.96-3.82(m,2H),3.72-3.49(m,7H),3.48-3.37(m,2H),3.23-3.01(m,3H),2.87-2.78(m,3H),2.70(d,1H),2.60-1.38(m,35H),1.30-1.21(m,6H),0.94(s,3H),0.87(s,9H)。

将化合物5q-1或5q-2(30mg,0.05mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较长的化合物制得)和化合物2p(33mg,0.03mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(18mg,0.18mmol)，原料全部溶解后加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(20mg,0.05mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩后残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号：Gilson 281色谱柱：Sharpsil-T，Prep30×250mm；5μm；C18流动相：水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈50％-70％，流速：30mL/min)得到标题化合物5-1或5-2(15mg，产率：26.4％)。MS m/z(ESI):1682.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.68(s,1H),8.34(s,1H),8.11(dd,1H),7.60-7.21(m,9H),7.19(d,1H),7.06(d,1H),6.99(d,2H),6.94(d,1H),6.69(d,1H),6.61(d,1H),6.40(d,1H),5.48-5.40(m,2H),5.03(q,1H),4.75-4.65(m,1H),4.60(d,1H),4.51-4.45(m,1H),4.14(d,2H),3.94-3.77(m,2H),3.74-3.52(m,7H),3.45-3.33(m,2H),3.19-2.97(m,3H),2.85-2.76(m,3H),2.70(d,1H),2.63-1.75(m,26H),1.72-1.47(m,8H),1.45(d,3H),1.39-1.22(m,8H),1.05(s,6H),0.96(s,3H)。

实施例6-1和实施例6-2

(2S,4R)-N-((R)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺6-1

(2S,4R)-N-((S)-1-(4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)乙基)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺6-2

/>

第一步

(R)-4-((4’-氯-6-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯6b

将化合物2e(1.0g,2.30mmol)，三乙胺(465mg,4.30mmol)加入二氯甲烷(10mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(394mg,3.44mmol)，搅拌2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，将残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯6a(669mg,2.98mmol,上海毕得)，碳酸钾(635mg,4.59mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物6b(1.3g，产率：88％)。

MS m/z(ESI):651.2[M+1]。

第二步

(R)-4-(4-((4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸6c

将化合物6b(1.3g，2.00mmol)加入水(4mL)，四氢呋喃(4mL)和甲醇(4mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(251mg，3.00mmol)，加热至80℃搅拌3小时，反应液减压浓缩，残余物用稀盐酸调pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物6c(1.0g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):623.2[M+1]。

第三步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯6d

将化合物6c(250mg，0.401mmol)，化合物2n(155mg,，0.280mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(230mg，1.20mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(49mg，0.397mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入三乙胺(81mg，0.800mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物6d(300mg，产率：64％)

MS m/z(ESI):1158.6[M+1]。

第四步

4-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺盐酸盐6e

将化合物6d(160mg，0.138mmol)溶于氯化氢/二氧六环溶液中(2mL,4.0M)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物6e(150mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1058.4[M+1]

第五步

将化合物6e(40mg，0.0365mmol)与化合物5q-1或5q-2(30mg,0.0488mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较短的化合物制得)溶于二甲基甲酰胺(3.0mL)中，加入三乙胺(30mg，0.232mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(20mg,0.0526mmol)，室温反应1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈35％-60％，流速:30mL/min)得到标题化合物6-1或6-2(30mg，产率：50％)。

MS m/z(ESI):1654.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.69(s,1H),8.35(d,1H),8.12(d,1H),7.70(d,2H),7.50-7.20(m,6H),7.14(d,1H),7.10-6.90(m,4H),6.77(d,2H),6.62(d,1H),6.39-6.26(m,1H),5.55-5.29(m,2H),5.07-4.93(m,1H),4.80-4.66(m,1H),4.55-4.50(m,2H),4.11(d,1H),3.98-3.82(m,1H),3.78-2.95(m,14H),2.92-2.75(m,2H),2.69-1.15(m,46H),1.07-0.66(m,12H).

将化合物6e(40mg，0.0365mmol)与5q-1或5q-2(30mg,0.0488mmol,由化合物5n-1，5n-2中保留时间较长的化合物制得)溶于二甲基甲酰胺(3.0mL)中，加入三乙胺(30mg，0.232mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(20mg,0.0526mmol)，室温反应1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈35％-60％，流速:30mL/min)得到标题化合物6-1或6-2(35mg，产率：58％)。

MS m/z(ESI):1654.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.69(s,1H),8.35(s,1H),8.12(d,1H),7.70(d,2H),7.57-7.47(m,1H),7.44-7.23(m,7H),7.20(d,1H),7.11-6.90(m,4H),6.77(d,2H),6.62(d,1H),6.40-6.30(m,1H),5.57-5.23(m,2H),5.09-4.95(m,1H),4.78-4.67(m,1H),4.66-4.56(m,1H),4.55-4.46(m,1H),4.14(d,1H),3.97-3.84(m,1H),3.77-3.50(m,5H),3.49-3.37(m,2H),3.31-3.19(m,3H),3.16-2.99(m,2H),2.93-2.77(m,2H),2.71-1.16(m,50H),1.07(s,6H),0.96(s,3H).

实施例7

(S)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]

吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺7

第一步

4-苄基1-(叔丁基)(S)-2-(((2-溴-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯7b

将4-溴-3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(3.692g,11.988mmol,上海毕得医药科技有限公司)，4-苄基1-(叔丁基)(S)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯7a(3.50g,9.988mmol,采用专利申请WO2019183133A1中说明书第29页的化合物13公开的方法制备而得)，三氟甲磺酸银(7.711g,30.004mmol)，2,6-二叔丁基吡啶(5.739g,30.004mmol)加入二氯甲烷(50mL)中，室温搅拌12小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物7b(1.9g，产率：33％)。

MS m/z(ESI):577.5[M+1]。

第二步

(S)-3-(((2-溴-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯7c

将化合物7b(1.9g,3.290mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中，加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(5mL)，搅拌反应3小时，反应液减压浓缩，将所得粗品溶于水，用碳酸氢钠中和，乙酸乙酯萃取，分液，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物7c(1.5g,产率：95％)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):477.1[M+1]。

第三步

3-苄基9-甲基(S)-1,2,4a,5-四氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-3,9(4H)-

二羧酸酯7d

将化合物7c(1.5g,3.315mmol)，甲磺酸(2-二环己基膦基-2’,6’-二异丙氧基-1,1’-联苯基)(2-氨基-1,1’-联苯-2-基)钯(II)(281mg,0.335mmol)，碳酸铯(3.3g,10.128mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，在封管中氮气氛下于118℃搅拌反应12小时，反应液冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物7d(1.1g,产率：83％)。

MS m/z(ESI):397.5[M+1]

第四步(S)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-羧酸甲酯7e

将化合物7d(1.1g,2.775mmol)，钯碳(300mg,0.277mmol,含量10％)溶于甲醇(10mL)中，氢气氛下室温搅拌反应5小时，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物7e(700mg,产率：96％)。

MS m/z(ESI):263.3[M+1]

第五步

(S)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮庚环-9-羧酸甲酯7f

将化合物2e(419mg,0.963mmol)，三乙胺(267mg,2.638mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(120mg,1.047mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，将残余物溶于二甲基甲酰胺(5mL)，加入化合物7e(230mg,0.877mmol)，碳酸钾(366mg,2.633mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物7f(380mg，产率：63％)。

MS m/z(ESI):679.2[M+1]。

第六步

(S)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-羧酸7g

将化合物7f(380mg，0.559mmol)加入水(2mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(235mg，5.601mmol)，加热至50℃搅拌反应10小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3，经二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物7g(270mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):665.2[M+1]。

第七步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-(((S)-9-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)-1,2,4a,5-四氢-7H-苯并[e]吡嗪[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-3(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯7h

将化合物7g(200mg，0.301mmol)，化合物2n(117mg，0.211mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(172mg，0.901mmol)，三乙胺(152mg，1.502mmol)，4-二甲氨基吡啶(37mg，0.301mmol)，室温搅拌12小时，反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物7h(260mg，产率：72％)。

MS m/z(ESI):1200.8[M+1]。

第八步

(S)-3-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)-氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰

基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺7i

将化合物7h(260mg，0.216mmol)加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(3mL)中，搅拌反应3小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物7i(150mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1100.7[M+1]。

第九步

(S)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺7

将化合物7i(130mg，0.118mmol)，化合物1j(71mg，0.118mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(53mg，0.139mmol)，三乙胺(60mg，0.593mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈45％-55％，流速:30mL/min)得到标题化合物7(50mg，产率：25％)。

MS m/z(ESI):1682.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃Cl₃):δ8.70(s,1H),8.35(d,1H),8.11(d,1H),7.75(d,2H),7.61(s,1H),7.49(t,1H),7.45-7.37(m,3H),7.36-7.23(m,5H),7.11-7.04(m,1H),7.01(d,2H),6.83(d,1H),6.64(d,1H),6.30(d,1H),5.12(q,1H),4.80-4.60(m,3H),4.57-4.49(m,1H),3.97-3.87(m,1H),3.79-2.80(m,17H),2.73-1.40(m,52H),1.05(s,6H),0.95(s,3H).

实施例8

(R)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺8

第一步

4-苄基1-(叔丁基)(R)-2-(((2-溴-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯8b

将4-溴-3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(2.652g,8.605mmol,上海毕得医药科技有限公司)，4-苄基1-(叔丁基)(R)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯8a(2.5g,7.134mmol,上海毕得医药科技有限公司)，三氟甲磺酸银(5.511g,21.493mmol)，2,6-二叔丁基吡啶(4.112g,21.493mmol)加入二氯甲烷(50mL)中，室温搅拌12小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，有机相加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物8b(1.3g，产率：32％)。

MS m/z(ESI):577.5[M+1]。

第二步

(R)-3-(((2-溴-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯8c

将化合物8b(1.3g,2.251mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中,加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(5mL)，搅拌反应3小时，反应液减压浓缩，粗品溶于水，用碳酸氢钠中和，乙酸乙酯萃取，分液，收集有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题化合物8c(1.0g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):477.3[M+1]。

第三步

3-苄基9-甲基(R)-1,2,4a,5-四氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-3,9(4H)-

二羧酸酯8d

将化合物8c(1.0g,2.095mmol)，甲磺酸(2-二环己基膦基-2’,6’-二异丙氧基-1,1’-联苯基)(2-氨基-1,1’-联苯-2-基)钯(II)(176mg,0.210mmol)，碳酸铯(2.06g,6.322mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气氛下封管中118℃搅拌反应12小时，反应液冷却至室温，过滤收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物8d(400mg,产率：48％)。

MS m/z(ESI):397.4[M+1]

第四步

(R)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-羧酸甲酯8e

将化合物8d(400mg,1.009mmol)，钯碳(100mg,0.101mmol,含量10％)溶于甲醇(10mL)中，氢气氛下室温搅拌反应5小时，过滤收集滤液，减压浓缩得到标题化合物8e(200mg,产率：76％)。

MS m/z(ESI):263.3[M+1]

第五步(R)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-羧酸甲酯8f

将化合物2e(390mg,0.896mmol)，三乙胺(232mg,2.29 3mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，冰浴滴加甲烷磺酰氯(96mg,0.915mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤收集滤液，减压浓缩，残余物溶于二甲基甲酰胺(5mL)中，加入化合物8e(200mg,0.762mmol)，碳酸钾(530mg,3.813mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物8f(350mg，产率：67％)。

MS m/z(ESI):679.2[M+1]。

第六步(R)-3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-羧酸8g

将化合物8f(200mg，0.294mmol)加入水(2mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(62mg，1.477mmol)，加热至50℃搅拌反应10小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤收集滤液，减压浓缩得粗品标题化合物8g(150mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):665.2[M+1]。

第七步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-(((R)-9-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)-1,2,4a,5-四氢-7H-苯并[e]吡嗪[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-3(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯8h

将化合物8g(200mg，0.301mmol)，化合物2n(133mg，0.241mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(172mg，0.901mmol)，三乙胺(152mg，1.502mmol)，4-二甲氨基吡啶(37mg，0.301mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物8h(200mg，产率：55％)。

MS m/z(ESI):1200.8[M+1]。

第八步

(R)-3-((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)-氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰

基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺8i

将化合物8h(200mg，0.166mmol)加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(3mL)中，搅拌反应3小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物8i(160mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1100.7[M+1]。

第九步(R)-3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢-7H-苯并[e]

吡嗪并[2,1-c][1,4]氧氮杂庚环-9-甲酰胺8

将化合物8i(160mg，0.145mmol)，化合物1j(88mg，0.145mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(56mg，0.147mmol)，三乙胺(75mg，0.741mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈45％-55％，流速:30mL/min)得到标题化合物8(10mg，产率：4％)。

MS m/z(ESI):1682.4[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD-d₄):δ8.88(s,1H),8.55(d,1H),8.28(s,1H),8.02(d,1H),7.89(d,1H),7.82(d,1H),7.73(s,1H),7.47-7.32(m,7H),7.25(t,2H),7.21-7.08(m,3H),6.82(d,2H),5.02(q,1H),4.81(d,1H),4.65(d,1H),4.59(t,1H),4.49-4.40(m,1H),4.07-3.97(m,1H),3.90(d,1H),3.82-3.72(m,2H),3.72-3.49(m,11H),3.30-3.03(m,6H),2.73-1.89(m,32H),1.72-1.47(m,11H),1.08-1.99(m,12H).

实施例9-1和实施例9-2

(2S,4R)-1-((S)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9-1

(2S,4R)-1-((R)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9-2

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第一步(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9b

将化合物9a(2.1g，4.87mmol，采用专利申请WO2020142227A1中说明书第42页的实施例1，化合物56公开的方法制备而得)溶于4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(20mL)中，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，粗品溶于40mL二氯甲烷和甲醇(V/V＝1:1)混合溶剂中，加入过量的碳酸钾搅拌15分钟，过滤收集滤液，减压浓缩除去溶剂，所得残留物溶于二氯甲烷(40mL)中，加入咪唑(3.3g，48.47mmol)，搅拌至反应液澄清，室温下滴加叔丁基二甲基氯硅烷(1.1g，7.30mmol)，室温搅拌16小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物9b(1.4g，产率：65.1％)。

MS m/z(ESI):446.3[M+H]。

第二步

(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-(2-(3-羟基异噁唑-5-基)-3-甲基丁酰基)-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9d(非对映异构体混合物)

将化合物9b(157mg，0.35mmol)，2-(3-羟基异噁唑-5-基)-3-甲基丁酸9c(65mg，0.35mmol，采用专利申请WO2019084030A1中说明书第225页的实施例2，中间体2公开的方法制备而得)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(267mg，0.70mmol)，三乙胺(143mg，1.41mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物9d(75mg，产率：43.6％)。

MS m/z(ESI):613.6[M+1]。

第三步

5-((5-(1-((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸甲酯9e(非对映异构体混合物)

将化合物9d(75mg，0.12mmol)，5-溴戊酸甲酯(36mg，0.18mmol)和无水碳酸钾(34mg，0.25mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，升温至70℃，搅拌2小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物9e(70mg，产率：78.7％)。

MS m/z(ESI):727.3[M+1]。

第四步

5-((5-(1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷

-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸9f(非对映异构体混合物)

将化合物9e(70mg，0.1mmol)和一水合氢氧化锂(41mg，1.0mmol)溶于四氢呋喃(2.5mL)，水(2.5mL)和甲醇(2.5mL)的混合溶剂中，反应在室温下搅拌12小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用稀盐酸(1M)调节pH至3～4，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，有机相加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物9f(44mg，产率：76.3％)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):599.1[M+1]。

第五步(2S,4R)-1-(2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-

基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9g(非对映异构体混合物)

将化合物6e(137mg,0.13mmol)，化合物9f(100mg,0.17mmol)和三乙胺(170mg,1.68mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(96mg,0.25mmol)，室温下搅拌1小时。反应液用二氯甲烷(30mL)稀释，水(10mL×2)洗涤，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题化合物9g(250mg)。

MS m/z(ESI):1638.6[M+1]。

第六步(2S,4R)-1-((S)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-

基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9-1

(2S,4R)-1-((R)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-

基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺9-2

化合物9g(250mg，0.13mmol)用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号：WatersAutopurification-SQD2色谱柱：Welch Xtimate Phenyl-hexyl，Prep 30×250mm；5μm；C18流动相：水(10mM碳酸氢铵)和甲醇，梯度配比：甲醇80％-95％，流速：30mL/min)得到标题化合物(10mg，产率：4.0％)和标题化合物(10mg，产率：4.0％)。单一构型化合物(较短保留时间，保留时间2.44分钟，10mg，产率：4.0％)：MS m/z(ESI):1638.5[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.70(s,1H),8.36(s,1H),8.14(d,1H),7.70(d,1H),7.55(d,1H),7.47-7.22(m,4H),7.18-7.06(m,7H),7.03-6.96(m,4H),6.80(d,2H),6.64(d,1H),5.91-5.78(m,2H),5.41-5.29(m,2H),5.06(s,1H),5.03-4.90(m,2H),4.80-4.73(m,1H),4.72-4.65(m,1H),4.64-4.57(m,1H),4.22(t,2H),4.08(t,2H),3.95-3.86(m,1H),3.79-3.22(m,11H),3.18-2.99(m,2H),2.95-2.81(m,3H),2.75-0.66(m,44H)。

单一构型化合物(较长保留时间，保留时间2.46分钟，10mg，产率：4.0％)：MS m/z(ESI):1638.4[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.70(s,1H),8.36(s,1H),8.12(d,1H),7.69(d,2H),7.60(d,1H),7.56(d,1H),7.45-7.23(m,6H),7.18-6.94(m,7H),6.75(d,2H),6.63(d,1H),5.87-5.82(m,2H),5.40-5.28(m,1H),5.17-4.90(m,4H),4.72-4.61(m,1H),4.61-4.52(m,1H),4.26-4.12(m,2H),4.11-4.00(m,3H),3.94-3.85(m,1H),3.79-3.38(m,10H),3.29-3.21(m,3H),3.13-2.99(m,2H),2.63-2.31(m,18H),2.08-1.89(m,9H),1.78-1.63(m,9H),0.90-0.87(m,9H)。

实施例10

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-基)哌啶-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺10

第一步(R)-4-((4’-氯-4-甲基-6-((4-氧代哌啶-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯10a

将化合物2e(300mg，0.69mmol)和三乙胺(140mg，1.38mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(103mg，0.90mmol)，室温搅拌反应1小时。加水(10mL)淬灭，用二氯甲烷(10mL×3)萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤后滤液减压浓缩，残余物溶于二甲基甲酰胺(5mL)，加入4-哌啶酮(188mg，1.39mmol，毕得)，碳酸钾(243mg，1.76mmol)，加热至75℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物10a(200mg，产率：56.2％)。

MS m/z(ESI):516.6[M+1]。

第二步

(R)-4-((4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯10c

将4-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯10b(190mg,0.70mmol，乐研)，化合物2n(390mg,0.70mmol)，碳酸铯(322mg,0.99mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(65mg,0.07mmol)和2-二环己膦基-2'-(N,N-二甲胺)-联苯(84mg,0.21mmol)溶于二氧六环(10mL)中，氮气氛下微波180℃反应0.5小时。反应液过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，所得滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物10c(300mg，产率：54.1％)。

MS m/z(ESI):787.1[M+1]。

第三步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-基)哌啶-1-基)甲

基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯10d

将化合物10c(200mg，0.25mmol)溶于4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(10mL)中，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，残余物溶于二氯甲烷(6mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入乙酸钠(96mg,1.17mmol)，室温搅拌10分钟，加入化合物10a(100mg,0.19mmol)，继续搅拌0.5小时，加入氰基硼氢化钠(48mg,0.80mmol)，反应在室温搅拌16小时。反应液过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，所得滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物10d(190mg，产率：82.6％)。

MS m/z(ESI):1186.7[M+1]。

第四步

N-(7-(1-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌啶-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺10e

将化合物10d(80mg,67.4024μmol)溶于4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(10mL)中，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得粗品标题化合物10e(73mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1086.7[M+1]。

第五步(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-基)哌啶-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺10

将化合物10e(73mg,0.07mmol)和三乙胺(70mg,0.69mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入化合物1j(45mg,0.07mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(34mg,0.08mmol)，室温搅拌1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号：Gilson 281色谱柱：Sharpsil-T，Prep 30×250mm；5μm；C18流动相：水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈55％-75％，流速：30mL/min)得到标题化合物10(20mg，产率：17.8％)。

MS m/z(ESI):1668.6[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.66(s,1H),8.31(s,1H),8.17(s,1H),7.88(d,1H),7.52(d,1H),7.42-7.34(m,8H),7.02-6.92(m,3H),6.59(d,1H),6.35(d,1H),5.17-5.02(m,1H),4.80-4.68(m,1H),4.65-4.55(m,1H),4.50(s,1H),4.15-4.04(m,1H),3.93-3.82(m,1H),3.67-3.43(m,12H),3.10-2.98(m,3H),2.90-1.99(m,33H),1.89(d,1H),1.81-1.22(m,22H),1.04(s,9H),0.94(s,3H)。

实施例11

(2S,4R)-1-((2S)-2-(8-(4-(((4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺11

第一步

5-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-氧代环己烷-1-羧酸甲酯11b

将甲基(4-氧代环己基)氨基甲酸叔丁酯11a(5.0g，22.00mmol，上海毕得)溶于四氢呋喃(30mL)中，0℃下分批加入氢化钠(2.64g，66.00mmol，60％)，搅拌0.5小时，随后滴加入碳酸二甲酯(5.9g，66.00mmol)，滴加完毕后升温至65℃下搅拌3小时。反应液冷却至室温，倒入过量冰饱和氯化铵水溶液中淬灭，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物11b(5.6g，产率：89％)。

MS m/z(ESI):284.2[M-1]。

第二步

5-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-1-烯-1-羧酸甲酯11c

将化合物11b(2.0g，7.01mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(4.5g，36.05mmol)，-78℃下滴加三氟甲磺酸酐(3.0g，10.5mmol)，滴加完毕后缓慢升温至室温搅拌4小时。向反应液中加入水(50mL)淬灭，分液，水相用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物11c(2.3g,产率：79％)。

MS m/z(ESI):418.5[M+1]。

第三步

4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-4’-氯-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸甲酯11d

将化合物11c(2.5g，5.99mmol)，4-氯苯硼酸(1.2g，7.79mmol)，四(三苯基磷)钯(543mg，0.48mmol)和碳酸钠(1.9g，17.97mmol)溶于甲苯(30mL)，乙醇(10mL)和水(6mL)的混合溶剂中，在氮气氛下90℃搅拌12小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物11d(2.0g,产率：88％)。

MS m/z(ESI):380.1[M+1]。

第四步

4’-氯-4-(甲基氨基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸甲酯11e

将化合物11d(1000mg，2.63mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(15mL)，搅拌反应2小时，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物11e(736mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):280.1[M+1]。

第五步

4-(((4’-氯-6-(甲氧基羰基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯11f

化合物11e(1.0g,3.16mmol)，4-甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(674mg，3.16mmol，上海毕得)溶于1,2-二氯乙烷(20mL)中，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.0g,9.49mmol)，氮气氛下室温搅拌3小时，加水淬灭，过滤收集滤液，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物11f(1.3g,产率：86％)。

MS m/z(ESI):477.2[M+1]

第六步

4-(((4’-氯-6-(羟甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯11g

将化合物11f(500mg，1.05mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，0℃下滴加1M的氢化锂铝的四氢呋喃溶液(1.27mL，1.27mmol)，反应液在0℃下搅拌15分钟。向反应液中加入十水硫酸钠淬灭，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤两遍，合并有机相，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物11g(450mg，产率：96％)。

MS m/z(ESI):449.2[M+1]。

第七步

4-(((4’-氯-6-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-

基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯11h

将化合物11g(200mg，0.45mmol)，三乙胺(135mg，1.33mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，滴加甲烷磺酰氯(61mg，0.53mmol)，搅拌0.5小时，加水(15mL)淬灭，用二氯甲烷(30mL×2)萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于二甲基甲酰胺(5mL)，加入4-哌嗪-1-基苯甲酸乙酯(104mg，0.44mmol，上海毕得)，碳酸钾(185mg，1.34mmol)，加热至75℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物11h(130mg，产率：44％)。

MS m/z(ESI):665.3[M+1]。

第八步

4-(4-((4-(((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)氨基)-4’-氯-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸11i

将化合11h(130mg，0.195mmol)溶于水(5mL)，四氢呋喃(5mL)和甲醇(5mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(82mg，1.95mmol)，反应在室温下搅拌16小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用稀盐酸(1M)调节至pH至4～5，有白色固体析出，过滤，滤饼水洗两次，干燥得到标题化合物11i(120mg，产率：96％)。

MS m/z(ESI):636.9[M+1]。

第九步

4-(((4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基(甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯11j

将化合物11i(88mg，0.14mmol)，化合物2n(54mg，0.098mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，分别加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(80mg，0.417mmol)，三乙胺(42mg，0.415mmol)，4-二甲氨基吡啶(17mg，0.138mmol)，室温搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物11j(100mg，产率：62％)。

MS m/z(ESI):1171.9[M+1]。

第十步

4-(4-((4’-氯-4-(甲基(哌啶-4-基甲基)氨基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺11k

将化合物11j(100mg，0.085mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物11k(91mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1071.9[M+1]。

第十一步

(2S,4R)-1-((2S)-2-(8-(4-(((4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢

-[1,1’-联苯]-4-基)(甲基)氨基)甲基)哌啶-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺11

将化合物11k(91mg，0.085mmol)和化合物1j(61mg，0.101mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(86mg，0.85mmol)，反应在室温搅拌至原料全部溶解，随后加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(42mg，0.11mmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物11(25mg，产率：18％)。

MS m/z(ESI):1654.4[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.68(s,1H),8.35(s,1H),8.05(d,1H),7.82(d,2H),7.44-7.21(m,10H),6.99(dd,1H),6.91(d,1H),6.72(d,2H),6.57(d,1H),6.41-6.33(m,1H),5.16-5.05(m,1H),4.75-4.68(m,1H),4.64(d,1H),4.56(d,1H),4.53-4.48(m,1H),4.12(d,1H),3.90-3.74(m,2H),3.69-3.55(m,4H),3.26-2.93(m,6H),2.88-2.79(m,2H),2.76-2.59(m,4H),2.54(s,3H),2.49-1.40(m,41H),1.40-1.22(m,5H),1.05(s,9H).

实施例12

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-((4’-氯-2-((4-(4-(((4--(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-[1,1’-联

苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基

-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺12

第一步

4-(4-溴-3-(甲氧基羰基)苄基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯12b

将2-溴-5-(溴甲基)苯甲酸甲酯12a(1.00g,3.24mmol,上海毕得医药科技有限公司)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺(985mg,9.73mmol)，哌嗪-1-羧酸叔丁酯(725mg,9.73mmol，上海阿达玛斯)，室温搅拌12小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物12b(1.30g，产率：96％)。MS m/z(ESI):413.0[M+1]。

第二步

4-((4’-氯-2-(甲氧基羰基)-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯12c

将化合物12b(1.30g，3.14mmol)溶于二氧六环(20mL)，水(2mL)中，加入4-氯苯硼酸(983mg,6.28mmol)，碳酸钠(1.00g,9.43mmol)，[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(230mg，0.31mmol)，升温至100℃，氮气氛下搅拌3小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物12c(1.20g，产率：85％)。

MS m/z(ESI):445.1[M+1]。

第三步

4-((4’-氯-2-(羟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯12d

0℃下，将化合物12c(1.20g,2.69mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，滴加1M的氢化锂铝四氢呋喃溶液(2.68mL),室温搅拌反应2小时，加入十水硫酸钠淬灭，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物12d(1.00g,产率：88％)。

MS m/z(ESI):417.1[M+1]

第四步

4-((4’-氯-2-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-

羧酸叔丁酯12e

将化合物12d(1.00g,2.39mmol)，三乙胺(485mg,4.79mmol)加入二氯甲烷(20mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(412mg,3.59mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(730mg,3.11mmol)，碳酸钾(662mg,4.79mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物12e(800mg,产率：52％)。

MS m/z(ESI):633.4[M+1]

第五步

4-(4-((4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸12f

将化合物12e(800mg，1.26mmol)加入水(3mL)，四氢呋喃(3mL)和甲醇(3mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(159mg，3.78mmol)，升温至75℃搅拌反应16小时，反应液冷却至室温，减压浓缩，用稀盐酸调节pH至4，经二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物12f(700mg,产率：91％)。

MS m/z(ESI):605.4[M+1]

第六步(R)-4-((4’-氯-2-((4-(4-(((4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯12g

将化合物12f(200mg，0.33mmol)，化合物2n(128mg，0.23mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(190mg，0.99mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(40mg，0.32mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(66mg，0.65mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物12g(200mg，产率：53％)。

MS m/z(ESI):1140.5[M+1]。

第七步(R)-4-(4-((4’-氯-4-(哌嗪-1-基甲基)-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-((4-吗啉

-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺12h

将化合物12g(200mg，0.17mmol)加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(4mL)中，搅拌反应1小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物12h(200mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1040.6[M+1]。

第八步

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-((4’-氯-2-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-[1,1’-联

-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺12

将化合物12h(100mg，0.092mmol)，化合物1j(55mg，0.091mmol)溶于DMF(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(49mg，0.12mmol)，三乙胺(93mg，0.91mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈45％-55％，流速:30mL/min)得到标题化合物12(40mg，产率：26％)。

MS m/z(ESI):1622.3[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.68(s,1H),8.34(s,1H),8.11(d,1H),7.77(m,1H),7.49(s,1H),7.44-7.18(m,13H),7.07-7.06(m,1H),6.79(d,2H),6.62(d,2H),6.36(d,1H),5.32(s,1H),5.10(q,1H),4.73(t,1H),4.66(d,1H),4.52(s,1H),4.16(d,1H),3.92-3.88(m,1H),3.74-3.54(m,7H),3.52-3.41(m,4H),3.31-3.23(m,3H),3.14-3.01(m,2H),2.59-1.99(m,25H),1.73-1.54(m,7H),1.48(d,3H),1.38-1.23(m,6H),1.06(s,6H)。

实施例13

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((2-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁

-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷

-2-甲酰胺13

第一步

2-(4-(乙氧基羰基)苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯13b

将2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯13a(4.57g，21.84mmol，上海毕得)溶于1,4-二氧六环(100mL)中，加入4-溴苯甲酸乙酯(5.0g，21.80mmol，上海韶远)，碘化亚铜(624mg，3.27mmol，Adamas)，(1R,2R)-N,N’-二甲基-1,2-环己二胺(621mg，4.36mmol，上海毕得)，碳酸铯(7.11g，21.84mmol，国药)，氮气氛下，120℃搅拌反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物13b(3.1g，产率：40％)。

MS m/z(ESI):358.1[M+1]。

第二步

4-(5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)苯甲酸乙酯13c

将化合物13b(220mg，0.615mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，加入氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mL，4.0M，4mmol)，室温搅拌反应16小时，反应液减压浓缩，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物13c(168mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):258.2[M+1]

第三步

(R)-4-((4’-氯-6-((2-(4-(乙氧基羰基)苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯13d

将化合物2e(219mg,0.50mmol)，三乙胺(102mg,1.01mmol)加入二氯甲烷(5mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(87mg,0.76mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入化合物13c(168mg,0.65mmol)，碳酸钾(139mg,1.01mmol)，加热至75℃反应16小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物13d(135mg，产率：39％)。

MS m/z(ESI):674.6[M+1]。

第四步(R)-4-(5-((4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)苯甲酸13e

将化合物13d(135mg，0.20mmol)加入水(2mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(36mg，0.60mmol)，加热至60℃搅拌反应16小时，反应液减压浓缩，稀盐酸调节pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物13e(121mg，产率：94％)。

MS m/z(ESI):646.3[M+1]。

第五步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((2-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯13f

将化合物13e(121mg，0.20mmol)，化合物2n(73mg，0.13mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(108mg，0.56mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(23mg，0.19mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(95mg，0.94mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体A纯化得到标题化合物13f(194mg，产率：88％)。

MS m/z(ESI):1181.1[M+1]。

第六步

4-(5-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺13g

将化合物13f(90mg，0.076mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物13g(82mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1081.2[M+1]。

第七步(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((2-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁

-2-甲酰胺13

将化合物1j(46mg，76μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入化合物13g(82mg，76μmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(31mg，81μmol)和三乙胺(77mg，761μmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物13(12mg，产率：10％)。

MS m/z(ESI):1663.8[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.69(s,1H),8.36(s,1H),8.04(d,1H),7.80(m,2H),7.58(d,1H),7.46-7.13(m,11H),7.09(d,2H),6.91(d,1H),6.64(d,1H),6.30(s,1H),5.11(q,1H),4.76(t,1H),4.60(d,1H),4.53(s,1H),4.08(d,1H),3.97-3.57(m,9H),3.44-3.25(m,3H),3.18-2.97(m,2H),2.74-1.92(m,31H),1.85-1.59(m,4H),1.56-1.38(m,6H),1.36-1.26(m,4H),1.24-1.18(m,3H),1.15-0.97(m,9H)。

实施例14

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(2-(7-(4-氯苯基)-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-基)乙基)哌嗪-1-基)-8-氧代庚酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基

-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺14

第一步

2-叔丁基-6-甲基-7-羟基-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2,6-二羧酸酯14b

将7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯14a(3.9g，16.42mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中，0℃下分批加入氢化钠(2.1g，49.35mmol，60％)，搅拌0.5小时，随后滴加入碳酸二甲酯(4.4g，49.29mmol)，滴加完毕后升温至65℃下搅拌3小时。反应液冷却至室温，倒入过量冰饱和氯化铵水溶液中淬灭，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物14b(3.6g，产率：73.11％)。MS m/z(ESI):298.1[M+1]。

第二步

2-(叔丁基)6-甲基7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2,6-二羧酸酯14c

将化合物14b(3.6g，12.01mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(4.7g，36.06mmol)，-78℃下滴加三氟甲磺酸酐(5.1g，18.0mmol)，滴加完毕后缓慢升温至室温搅拌4小时。向反应液中加入水(50mL)淬灭，分液，水相用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物14c(4.5g,产率：87.1％)。

MS m/z(ESI):430.2[M+1]。

第三步

2-(叔丁基)6-甲基7-(4-氯苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2,6-二羧酸酯14d

将化合物14c(4.5g，10.46mmol)，4-氯苯硼酸(2.1g，13.62mmol，上海毕得)，四(三苯基磷)钯(1.2g，1.05mmol)和碳酸钠(3.3g，31.42mmol)溶于甲苯(75mL)，乙醇(25mL)和水(25mL)的混合溶剂中，反应在90℃氮气氛下搅拌16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物14d(3.8g,产率：92.7％)。

MS m/z(ESI):336.2[M-55]。

第四步

7-(4-氯苯基)-6-(羟甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-羧酸叔丁酯14e

将化合物14d(1.0g，2.55mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，0℃下滴加2.5M的氢化锂铝的四氢呋喃溶液(1.53mL，3.83mmol)，搅拌15分钟。向反应液中加入十水硫酸钠淬灭，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤两遍，合并有机相，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体B纯化得到标题化合物14e(750mg，产率：80.8％)。MS m/z(ESI):364.2[M+1]。

第五步

7-(4-氯苯基)-6-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-羧酸叔丁酯14f

将化合物14e(520mg，1.43mmol)，三乙胺(435mg，4.30mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，室温滴加甲烷磺酰氯(246mg，2.15mmol)，搅拌反应0.5小时，加水(15mL)淬灭，用二氯甲烷(30mL×2)萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于二甲基甲酰胺(10mL)，加入4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(436mg，1.86mmol，毕得)，碳酸钾(593mg，4.29mmol)，加热至75℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物14f(569mg，产率：68.6％)。

MS m/z(ESI):580.4[M+1]。

第六步

4-(4-((7-(4-氯苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-6-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯14g

将化合物14f(569mg，0.98mmol)溶于二氯甲烷(15mL)中，加入三氟甲酸(5mL)，室温搅拌1小时。减压浓缩，所得残余物溶于二氯甲烷(40mL)中，用过量饱和碳酸氢钠溶液洗涤，分液，所得水相用二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得粗品标题化合物14g(470mg，产率：99.8％)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):480.3[M+1]。

第七步

4-(2-(7-(4-氯苯基)-6-((4-(4-(乙氧基羰基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-

烯-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯14h

将4-(羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1000mg，4.34mmol，乐研)，三乙胺(1320mg，13.0mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，室温下滴加甲烷磺酰氯(746mg，6.51mmol)，搅拌反应0.5小时，加水(15mL)淬灭，用二氯甲烷(30mL×2)萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于乙腈(20mL)，加入化合物14g(430mg，0.90mmol)，碳酸钾(432mg，3.13mmol)，加热至75℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物14h(350mg，产率：56％)。

MS m/z(ESI):692.3[M+1]。

第八步

4-(4-((2-(2-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)乙基)-7-(4-氯苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-6-

基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸14i

将化合14h(400mg，0.58mmol)溶于水(5mL)，四氢呋喃(5mL)和甲醇(5mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(242mg，5.77mmol)，室温搅拌16小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用稀盐酸(1M)调节pH至4～5，有白色固体析出，过滤，滤饼水洗两次，干燥得到标题化合物14i(300mg，产率：78％)。MS m/z(ESI):664.3[M+1]。

第九步(R)-4-(2-(7-(4-氯苯基)-6-((4-(4-(((4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基(甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯14j

将化合物14i(150mg，0.23mmol)，化合物2n(100mg，0.18mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(130mg，0.68mmol)，三乙胺(68mg，0.67mmol)，4-二甲氨基吡啶(28mg，0.23mmol)，室温搅拌16小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物14j(120mg，产率：44％)。

MS m/z(ESI):1199.6[M+1]。

第十步(R)-4-(4-((7-(4-氯苯基)-2-(2-(哌嗪-1-基)乙基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-6-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-((4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺14k

将化合物14j(120mg，0.10mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物14k(100mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1099.4[M+1]。

第十一步(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(2-(7-(4-氯苯基)-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-基)乙基)哌嗪-1-基)-8-氧代庚酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基

-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺14

将化合物14k(120mg，0.11mmol)和化合物1j(66mg，0.11mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(110mg，1.09mmol)，反应在室温搅拌至原料全部溶解，随后加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(62mg，0.16mmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-ExrsC18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物14(30mg，产率：16％)。

MS m/z(ESI):1681.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.68(s,1H),8.33(s,1H),8.05-7.86(m,2H),7.54-7.20(m,11H),7.01(d,2H),6.81(d,1H),6.64(d,1H),6.54(d,1H),6.32(d,1H),5.09(q,1H),4.73(t,1H),4.61(d,1H),4.53-4.47(m,1H),4.36-4.22(m,2H),4.10(d,1H),3.90-3.81(m,1H),3.75-3.16(m,11H),3.15-1.84(m,45H),1.71-1.43(m,7H),1.40-1.22(m,7H),1.05(s,6H).

实施例15

(2S,4R)-1-((S)-2-(8-(4-(((R)-4’-氯-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-

基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-8-氧代辛酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-

甲酰胺15

第一步(R)-4-((4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺15b

将化合物1f(550mg,0.977mmol)，4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶15a(730mg,3.420mmol,采用专利WO2020264499A1申请中说明书第903页中间体BEH的第一步公开的方法制备而得)，三乙胺(197mg,1.951mmol)，加入乙腈(10mL)中，加热至80℃搅拌12小时，反应液冷却至室温，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物15b(350mg，产率：51％)。MS m/z(ESI):696.2[M+1]。

第二步

4-(((R)-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-

基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯15c

将化合物15b(345mg,0.496mmol)和化合物6c(387mg,0.621mmol)溶于二氯甲烷(15mL)中，依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(356mg，1.857mmol)，三乙胺(315mg，3.113mmol)，4-二甲氨基吡啶(77mg，0.625mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物15c(500mg，产率：62％)。

MS m/z(ESI):1300.9[M+1]

第三步

4-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(((R)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺15d

将化合物15c(500mg,0.384mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中，加入4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液(5mL)，搅拌反应3小时，反应液减压浓缩，得粗品标题化合物15d(350mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1086.0[M+1]。

第四步

甲酰胺15

将化合物15d(350mg，0.322mmol)，化合物1j(188mg，0.313mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(178mg，0.468mmol)，三乙胺(158mg，1.564mmol)，室温搅拌反应12小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Gilson 281色谱柱:X-Bridge，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈45％-55％，流速:30mL/min)得到标题化合物15(260mg，产率：50％)。MS m/z(ESI):1669.3[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃Cl₃):δ8.69(s,1H),8.31(s,1H),8.00(d,1H),7.84(d,2H),7.53(d,1H),7.45-7.16(m,6H),7.00(d,2H),6.90-6.83(m,1H),6.76(d,2H),6.71-6.64(m,1H),6.37(d,1H),5.15-5.06(m,1H),4.73(t,1H),4.61(d,1H),4.53-4.46(m,1H),4.20-4.04(m,3H),4.00-3.88(m,1H),3.66-2.98(m,14H),2.93-2.64(m,4H),2.62-1.70(m,34H),1.68-1.39(m,10H),1.37-1.22(m,7H),1.05(s,6H),0.95(s,3H)。

实施例16

3-(((R)-4’-氯-4-((4-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)甲酰氨基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-8-氧代辛酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺16

第一步

4-(4-溴-2-氟苯基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯16b

将3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯16a(10.0g，46.24mmol，上海毕得)和化合物2g(8.9g，46.24mmol)溶于二甲亚砜(150mL)中，加入氢氧化钾(3.89g，69.37mmol)搅拌反应16小时，向反应液中加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，滤液减压浓缩，残余物得到粗品标题化合物16b(外消旋体，11g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):389.0[M+1]。

第二步

8-溴-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3(4H)-羧酸叔丁酯16c

将化合物16b(11g，28.26mmol)溶入四氢呋喃(60mL)中，0℃下加入1M的双(三甲基硅基)氨基锂的四氢呋喃溶液(38mL，38mmol)，搅拌反应0.5小时，加热至60℃搅拌反应1小时，反应液冷却至室温，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(300mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物16c(外消旋体，8.0g，产率：76％)。

MS m/z(ESI):313.0[M-55]。

第三步

3-(叔丁基)8-甲基1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-3,8(4H)-二羧酸酯16d

将化合物16c(468mg，1.49mmol)，1,3-双(二苯膦基)丙烷(123mg，0.30mmol)，醋酸钯(67mg，0.30mmol)，三乙胺(1512mg，14.94mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(7.5mL)和甲醇(7.5mL)的混合溶剂中，在一氧化碳气氛下加热至100℃反应18小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物16d(外消旋体，200mg，产率：38％)。

MS m/z(ESI):349.1[M+1]。

第四步

1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯16e

将化合物16d(160mg，0.46mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(5mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物16e(外消旋体，190mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):249.4[M+1]。

第五步

3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸甲酯16f

将化合物2e(150mg,0.34mmol)，三乙胺(104mg,1.03mmol)加入二氯甲烷(3mL)中，冰浴下滴加甲烷磺酰氯(47mg,0.41mmol)，搅拌反应2小时，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入化合物16e(86mg,0.35mmol)，碳酸钾(143mg,1.03mmol)，加热至75℃反应12小时，反应液冷却至室温，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系C纯化得到标题化合物16f(两个非对映异构体混合物，200mg，产率：87％)。

MS m/z(ESI):665.6[M+1]。

第六步

3-(((R)-4-((4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)甲基)-4’-氯-4-甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-羧酸16g

将化合物16f(100mg，0.15mmol)加入水(1mL)，四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(64mg，1.53mmol)，加热至50℃搅拌反应16小时，反应液减压浓缩，用稀盐酸调节pH至3，用二氯甲烷萃取，分液，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题化合物16g(两个非对映异构体混合物，80mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):651.4[M+1]。

第七步

4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((8-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰氨基)-1,2,4a,5-四氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪

-3(4H)-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯]-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯16h

将化合物16g(100mg，0.154mmol)，化合物2n(60mg，0.108mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(89mg，0.464mmol，上海韶远)，对二甲氨基吡啶(19mg，0.154mmol，上海韶远)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(47mg，0.464mmol)，室温搅拌反应16小时，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物16h(两个非对映异构体混合物，100mg，产率：55％)

MS m/z(ESI):1186.9[M+1]。

第八步

3-(((R)-4’-氯-4-甲基-4-(哌嗪-1-基甲基)-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-基)甲基)-N-((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]噁嗪-8-甲酰胺16i

将化合物16h(90mg，0.076mmol)溶于4M的氯化氢二氧六环溶液中(3mL)，搅拌反应2小时，减压浓缩得到粗品标题化合物16i(两个非对映异构体混合物，80mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):1088.5[M+1+2]。

第九步

将化合物1j(53mg，88μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入化合物16i(80mg，74μmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(36mg，95μmol)和三乙胺(74mg，731μmol)，室温反应16小时，反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(Waters-2545，色谱柱：YMC Triart-Exrs C18,30*150mm,5μm；流动相：水相(10mmol/L碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈30％-45％，流速：30mL/min)得到标题化合物16(两个非对映异构体混合物，35mg，产率：28％)。MS m/z(ESI):1668.3[M+1]。

¹H NMR(500MHz,MeOD-d₄):δ8.89(s,1H),8.28(s,1H),8.04(d,1H),7.92-7.88(m,3H),7.49-7.32(m,6H),7.28(t,2H),7.24-7.17(m,1H),7.10(d,2H),6.87(d,2H),6.82(d,1H),5.12-5.07(m,1H),4.68-4.55(m,3H),4.47-4.42(m,2H),4.10-3.99(m,2H),3.93-3.80(m,3H),3.79-3.72(m,4H),3.64-3.52(m,4H),3.48-3.44(m,1H),3.27-3.18(m,6H),3.07-2.86(m,6H),2.71-1.89(m,27H),1.82-1.55(m,6H),1.52(d,3H),1.44-1.24(m,3H),1.06(s,6H),1.03(s,3H)。

实施例17-1或17-2

(2S,4R)-N-((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)-1-((S)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰胺基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯基]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺17-1

或

(2S,4R)-N-((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)-1-((R)-2-(3-((5-(4-(((R)-4’-氯-4-甲基-6-((4-(4-(((4-(((R)-4-吗啉-1-(苯基硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)甲酰胺基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-2,3,4,5-四氢-[1,1’-联苯基]-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-基)-3-甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺17-2

/>

第一步

N-((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺17a

将化合物5h(94mg，0.29mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，0℃下加入硼氢化钠(20mg,0.53mmol)，室温反应10分钟，向反应液中加水(10mL)，经乙酸乙酯(10mL×3)萃取，收集有机相并干燥，过滤，滤液浓缩得到粗品标题化合物17a(94mg)。产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):323.2[M+1]。

第二步(2S,4R)-2-(((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)甲酰胺基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯17b

将化合物17a(94mg，0.29mmol)溶于氯化氢/二氧六环溶液(2mL,4.0M)中，搅拌反应0.5小时，浓缩得粗品。将粗品与(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸(70mg,0.30mmol,上海韶远)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(110mg,0.85mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(135mg,0.36mmol)，室温反应1小时。反应液倒入水(50mL)中，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤收集滤液，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物17b(110mg，产率：87％)。

MS m/z(ESI):432.3[M+1]。

第三步

(2S,4R)-N-((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺17c

将化合物17b(5.00g，11.58mmol)溶于氯化氢/二氧六环溶液(50mL,4.0M)中，搅拌反应1小时，浓缩得粗品。将粗品用三乙胺调节pH至中性，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物17c(3.8g，产率：98％)。MS m/z(ESI):332.1[M+1]。

第四步

(±)-5-((5-(1-甲氧基-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸叔丁酯17e

将(±)-2-(3-羟基异噁唑-5-基)-3-甲基丁酸甲酯17d(1.00g，5.02mmol，采用专利申请WO2019084030A1中说明书第226页的实施例3，中间体3公开的方法制备而得)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，分别加入5-溴戊酸叔丁酯(1.78g，7.50mmol，上海韶远)和无水碳酸钾(2.08g，15.05mmol)，升温至70℃，搅拌反应2小时。反应液冷却至室温，加入水(30mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系B纯化得到标题化合物17e(外消旋体，1.00g，产率：56.0％)。

MS m/z(ESI):354.1[M-1]。

第五步

(±)-2-(3-((5-(叔丁氧基)-5-氧代戊基)氧基)异噁唑-5-基)-3-甲基丁酸17f

将化合物17e(1.00g，2.81mmol)溶于甲醇(5mL)，水(5mL)和四氢呋喃(5mL)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(590mg，14.1mmol)，室温搅拌2小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得水相用1M的稀盐酸调节体系pH至3～4，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题化合物17f(外消旋体，900mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):340.1[M-1]。

第六步

5-((5-((S)-1-((2S,4R)-2-(((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)甲酰胺基)-4-羟基吡咯烷

-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸叔丁酯17g-1

5-((5-((R)-1-((2S,4R)-2-(((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)甲酰胺基)-4-羟基吡咯烷

-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸叔丁酯17g-2

将化合物17f(400mg,1.17mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入化合物17c(504mg,1.52mmol)和N,N-二异丙基乙胺(454mg,3.51mmol)，溶液澄清后，加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(890mg,2.34mmol)，室温搅拌2小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱体系A纯化得到标题化合物粗品，经手性制备柱分离(仪器型号：Gilson-281色谱柱：ChiralPak IE,5μm,20mm×250mm；流动相：A-正己烷；B-乙醇，(40％乙醇和60％正己烷)比例洗脱，流速：15mL/min)得标题化合物17g-1和17g-2(110mg，产率14.3％；160mg，产率20.8％)。

单一构型化合物(较短保留时间)：(保留时间：8.849min，110mg，产率：14.3％)；MSm/z(ESI):655.1[M+1]。

手性HPLC分析：保留时间8.849分钟，纯度：100％(色谱柱:CHIRALPAK IE 150×4.6mm,5μm；流动相：乙醇，正己烷，梯度配比：乙醇：正己烷＝40％:60％)。单一构型化合物(较长保留时间)：(保留时间：16.75min，160mg，产率：20.8％)。MS m/z(ESI):655.1[M+1]。

手性HPLC分析：保留时间16.75分钟，纯度：99.5％(色谱柱:CHIRALPAK IE 150×4.6mm,5μm；流动相：乙醇，正己烷，梯度配比：乙醇：正己烷＝40％:60％)。

第七步

5-((5-((S)-1-((2S,4R)-2-(((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)甲酰胺基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸17h-1

或

5-((5-((R)-1-((2S,4R)-2-(((4H-色烯并[3,4-d]噻唑-7-基)甲基)甲酰胺基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)异噁唑-3-基)氧基)戊酸17h-2

将化合物17g-1和17g-2中保留时间较长的化合物(160mg，0.27mmol)加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(5mL)中，室温搅拌反应2小时，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物17h-1或17h-2(140mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI):599.4[M+1]。

第八步

或

将化合物6e(100mg，0.094mmol)与化合物17h-1或17h-2(56mg,0.094mmol，由17g-1，17g-2中保留时间较长的化合物制备所得)溶于二甲基甲酰胺(3.0mL)中，分别加入N,N-二异丙基乙胺(37mg，0.29mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(54mg,0.14mmol)，室温反应1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备色谱法纯化(仪器型号:Waters-2545色谱柱:YMC Triart-Exrs，Prep 30×150mm；5μm；C18，流动相:水(10mM碳酸氢铵)和乙腈，梯度配比：乙腈50％-70％，流速:30mL/min)得到标题化合物17-1或17-2(15mg，产率：10％)。

MS m/z(ESI):1638.6[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.69(s,1H),8.33(d,1H),8.08(d,1H),7.73(d,2H),7.64-7.57(m,1H),7.42-7.34(m,2H),7.33-7.22(m,3H),7.14(d,1H),7.04-6.96(m,3H),6.88(s,2H),6.70(d,2H),6.61(m,1H),5.84(s,1H),5.42(s,2H),4.67-4.57(m,2H),4.43-4.40(m,2H),3.93-3.38(m,12H),3.26(s,3H),3.14-2.98(m,4H),2.57-2.21(m,23H),2.03-1.90(m,2H),1.81-1.59(m,8H),1.01-0.81(m,12H).

生物学评价

以下结合测试例进一步描述解释本公开，但这些测试例并非意味着限制本公开的范围。

测试例1、本发明化合物对BCL-xL与Bim之间结合的抑制作用。

以下方法用来测定本发明化合物对BCL-xL与Bim之间结合的抑制作用。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.Recombinant Human Bcl-xL(minus C-Terminus)，CF(R&D，894-BX-050)

2.BIM,biotinylated(APExBIO，A4463)

3.MAb Anti 6His-Eu cryptate Gold(cisbio，61HI2KLA)

4.High grade XL665-conjugated streptavidin(cisbio，611SAXLA)

5.Binding Domain Detection buffer(cisbio，62DB1FDG)

6.Binding Domain diluent buffer(cisbio，62DLBDDF)

7.384孔板(Corning，4513)

8.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

9.微量振荡器(德国IKA，MTS2/4S25)

二、实验步骤

将待测样品用DMSO稀释至0.2mM，然后3倍梯度稀释成10个浓度，并用DMSO设置空白孔板中。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液1μL加入到99μL的Binding Domaindiluent buffer中配制成含化合物的实验浓度。将BCL-xL protein用Binding Domaindiluent buffer稀释至0.5nM，4μL/孔加入到384孔板中。然后取2μL实验浓度的化合物加入到384孔板中，振荡混匀后离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中预孵育60分钟。

用Binding Domain diluent buffer稀释BIM至5nM，4μL/孔加入到上述384孔板中，振荡混匀后离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中孵育120分钟。

用Binding Domain Detection buffer分别稀释XL665-conjugatedstreptavidin至2nM、稀释EU-anti-His至1test浓度(1nM)，然后各5μL/孔分别加入到384孔板中。振荡混匀后离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中孵育120分钟。

用PHERAstar酶标仪的HTRF程序读取信号值，使用Graphpad Prism 9软件处理数据。

三、实验数据

表1本公开化合物对BCL-xl与Bim之间结合的抑制作用

/>

结论：本公开化合物对BCL-xl与Bim之间结合具有明显抑制作用。

测试例2、本发明化合物对BCL-2与Bim之间结合的抑制作用。

以下方法用来测定本发明化合物对对BCL-2与Bim之间结合的抑制作用。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.Bcl-2 Protein,Human,Recombinant(His Tag)(北京义翘神州科技股份有限公司，10195-H08E)

2.BIM,biotinylated(APExBIO，A4463)

3.MAb Anti 6His-Eu cryptate Gold(cisbio，61HI2KLA)

4.High grade XL665-conjugated streptavidin(cisbio，611SAXLA)

5.Binding Domain Detection buffer(cisbio，62DB1FDG)

6.Binding Domain diluent buffer(cisbio，62DLBDDF)

7.384孔板(Corning，4513)

8.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

9.微量振荡器(德国IKA，MTS2/4S25)

二、实验步骤

将待测样品用DMSO稀释至0.2mM，然后3倍梯度稀释成10个浓度，并用DMSO设置空白孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液1μL加入到99μL的Binding Domain diluentbuffer中配制成含化合物的实验浓度。将BCL-2protein用Binding Domain diluentbuffer稀释至1nM，4μL/孔加入到384孔板中。取2μL实验浓度的化合物加入到384孔板中，振荡混匀后离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中孵育60分钟。

用Binding Domain diluent buffer稀释BIM至2.5nM，4μL/孔加入到上述384孔板中，振荡混匀后离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中孵育120分钟。

用Binding Domain Detection buffer分别稀释XL665-conjugatedstreptavidin至1nM、稀释EU-anti-His至1test浓度(1nM)，然后分别加入到384孔板中各5μL/孔。振荡混匀离心，贴上封板膜，在25℃恒温箱中孵育120分钟。

三、实验数据

表2本公开化合物对BCL-2与Bim之间结合的抑制作用

/>

结论：本公开化合物对BCL-2与Bim之间结合具有明显抑制作用。

测试例3、本发明化合物对MOLT-4细胞的增殖抑制效应。

以下方法用来测定本发明化合物对MOLT-4细胞的增殖抑制效应。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.MOLT-4细胞(南京科佰生物科技有限公司，CBP60525)

2.96孔细胞培养板(Corning，3903)

3.U型底96孔板(Corning，3795)

4.Fetal Bovine Serum(Corning，35-081-CV)

5.RPMI 1640培养基(Gibco,11875093)

6.Luminescent Cell Via.Assay(Promega,G7571)

7.White Adhesive Bottom Seal for 96-well(PerkinElmer,6005199)

8.二氧化碳培养箱(Thermo，i160)

9.细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司，IC1000)

10.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

二、实验步骤

MOLT-4细胞培养在完全培养基(含10％FBS的RPMI1640培养基)中，一周传代2～3次，传代比列1:5。传代时，将细胞转移至离心管中，1200rpm离心3分钟，弃去上清培养基残液，用完全培养基重悬细胞。

实验时，将细胞转至离心管中，1200rpm离心3分钟，弃去上清培养基残液，用完全培养基重悬细胞。用细胞计数仪计数后调整密度为2.2×10⁵细胞/mL，90μL/孔加入到96孔板中，37℃恒温5％CO₂培养箱中培养过夜。

将待测样品用DMSO稀释至0.2mM，然后3倍梯度稀释成10个浓度，并设置空白孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液5μL加入到95μL完全培养基中稀释20倍。取10μL上述含化合物的培养基加入到96孔板中，在37℃恒温5％CO₂培养箱中培养72小时。

每孔加入50μL CellTiter-Glo溶液，室温孵育10分钟，使用PHERAstar酶标仪的化学发光程序读板。使用Graphpad Prism 9软件处理数据。

三、实验数据

表3本公开化合物对MOLT-4细胞的增殖抑制作用

结论：本公开化合物对MOLT-4细胞的增殖具有明显抑制作用。

测试例4、本发明化合物对MOLT-4细胞中BCL-xL蛋白的降解效应。

以下方法用来测定本发明化合物MOLT-4细胞中BCL-xL蛋白的降解效应。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.MOLT-4细胞(南京科佰生物科技有限公司，CBP60525)

2.RPMI1640培养基(Gibco，11875093)

3.Fetal Bovine Serum(Corning，35-081-CV)

4.U型底96孔板(Corning，3795)

5.V型底96孔板(Axygen，AXYP96450VCS)

6.48孔细胞培养板(Corning，3548)

7.BCA protein assay kit(ThermoFisher,23225)

8.Human/Mouse Total Bcl-xL DuoSet IC ELISA (R&D,DYC894-5)

9.DuoSet ELISAAncillary Reagent Kit 2(R&D,DY008)

10.EDTA(Invitrogen，AM9260G)

11.TritonTM X-100(Sigma，T8787-100ML)

12.PBS(meilunbio，PWL050)

13.二氧化碳培养箱(Thermo，i160)

14.恒温培养箱(ThermoFisher,NAPCO 6500TC)

15.离心机(ThermoFisher,ST16)

16.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

17.细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司，IC1000)

二、实验步骤

实验时，将细胞转移至离心管中，1200rpm离心3分钟，弃去上清后，用完全培养基重悬细胞。用细胞计数仪计数后调整密度为1.78×106细胞/mL，225μL/孔加入到48孔细胞培养板中(每孔40万个细胞)，置37℃恒温5％CO2培养箱中。

将待测样品用DMSO稀释至0.1mM，然后在U型底96孔板中3倍梯度稀释成8个浓度，并DMSO设置空白孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液5μL加入到95μL完全培养基中稀释20倍。取25μL上述含化合物的培养基加入到48孔细胞培养板中，在37℃恒温5％CO2培养箱中培养16小时。

将细胞转移至96孔V底板中，2000rpm离心3分钟，弃去上清，加入预冷的PBS洗一遍，2000rpm离心3分钟，弃去上清，然后加入130uL/孔的细胞裂解液(1mM EDTA，0.5％Triton X-100in PBS，pH 7.2-7.4)，放在冰上裂解20分钟。

裂解结束后，在4℃2000g离心5分钟，然后按照“BCA protein assay kit”说明书进行BCA法测定蛋白浓度。然后每孔取20μg蛋白加入ELISA板中进行ELISA检测。ELISA实验按照“Human/Mouse Total Bcl-xL DuoSet IC ELISA”试剂盒说明书进行操作。最后使用PHERAstar酶标仪的OD450/OD540程序读取信号值，使用Graphpad Prism 9软件处理数据。

三、实验数据

表4本公开化合物对MOLT-4细胞中BCL-xL蛋白的降解效应

结论：本公开化合物对MOLT-4细胞中BCL-xL蛋白具有明显降解作用。

测试例5、本发明化合物对MV-4-11细胞的增殖抑制效应。

以下方法用来测定本发明化合物对MV-4-11细胞的增殖抑制效应。

实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.MV-4-11细胞(ATCC，CRL-9591)

2.96孔细胞培养板(Corning，3903)

3.U型底96孔板(Corning，3795)

4.Fetal Bovine Serum(Corning，35-081-CV)

5.IMDM(Gibco,12440053)

6.Luminescent Cell Via.Assay(Promega,G7571)

7.White Adhesive Bottom Seal for 96-well(PerkinElmer,6005199)

8.恒温培养箱(ThermoFisher,NAPCO 6500TC)

9.离心机(ThermoFisher,ST16)

10.细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司，IC1000)

11.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

二、实验步骤

MV-4-11细胞培养在完全培养基(含10％FBS的IMDM)中，一周传代2～3次，传代比例1：5。

实验时，将细胞后转至离心管中，800rpm离心3分钟，弃去上清培养基残液，用完全培养基重悬细胞。用细胞计数仪计数后调整密度为1.33×10⁵细胞/mL，90μL/孔加入到96孔板中(每孔12000个细胞)，37℃恒温5％CO₂培养箱中培养过夜。

将待测样品用DMSO稀释至2mM，然后3倍梯度稀释成10个浓度，并设置空白孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液5μL加入到95μL完全培养基中稀释20倍。取10μL上述含化合物的培养基加入到96孔板中，在37℃恒温5％CO₂培养箱中培养72小时。

每孔加入50μL CellTiter-Glo溶液，室温孵育10分钟，化学发光法读板。使用GraphPad软件处理数据。

三、实验数据

表5本公开化合物对MV-4-11细胞的增殖抑制效应

结论：本公开化合物对MV-4-11细胞的增殖具有明显抑制作用。

测试例6、本发明化合物对MV-4-11细胞中BCL-2蛋白表达的降解效应。

以下方法测定本发明化合物对MV-4-11细胞中BCL-2蛋白表达的降解效应。

实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.MV-4-11细胞(ATCC，CRL-9591)

2.48孔细胞培养板(Corning，3548)

3.U型底96孔板(Corning，3795)

4.Fetal Bovine Serum(Corning，35-081-CV)

5.IMDM(Gibco,12440053)

6.BCAprotein assay kit(ThermoFisher，23225)

7.Human/Mouse Total Bcl-2 DuoSet IC ELISA(R&D，DYC827B-5)

8.DuoSet ELISAAncillary Reagent Kit 2(R&D，DY008)

9.Phospho-Total protein lysis buffer 1(4X)(Cisbio，64KL1FDF)

10.Cocktail(Bimake,B14002)

11.恒温培养箱(ThermoFisher，NAPCO 6500TC)

12.离心机(ThermoFisher，ST16)

13.细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司，IC1000)

14.酶标仪(BMG labtech，PHERAstar FS)

二、实验步骤

实验时，将细胞后转至离心管中，800rpm离心3分钟，弃去上清培养基残液，用完全培养基重悬细胞。用细胞计数仪计数后调整密度为3.33×10⁵细胞/mL，180μL/孔加入到48孔板中(每孔6万个细胞)，37℃恒温5％CO₂培养箱中培养。

将待测样品用DMSO稀释至0.2mM，然后3倍梯度稀释成8个浓度，并设置空白孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液5μL加入到95μL完全培养基中稀释20倍。取20μL上述含化合物的培养基加入到48孔板中，在37℃恒温5％CO₂培养箱中培养48小时。

将细胞转移至96孔V底板中，2000rpm离心3min，弃上清，加入预冷的PBS洗一遍，2000rpm离心3min，弃上清，每孔加入120uL 1xCell Lysis buffer(4xLysis buffer用ddH2O稀释4倍，并加入Cocktail)，冰上裂解20min。

裂解结束后，2000g(4℃)离心5min，转移至新板中，然后按照“BCA protein assaykit”说明书进行BCA法测定蛋白浓度定量。10μg蛋白/孔加入ELISA板中进行检测。

ELISA实验按照“Human/Mouse Total Bcl-2 DuoSet IC ELISA”试剂盒说明书进行操作。使用Graphpad Prism处理数据。

三、实验数据

表6本公开化合物对MV-4-11细胞中BCL-2蛋白表达的降解效应

编号	DC₅₀(nM)
		2	15.09

结论：本公开化合物对MV-4-11细胞中BCL-2蛋白的表达具有明显的降解作用。

Claims

1.一种通式(I)所示的化合物或其可药用的盐：

其中：

环A选自*端与L相连，+端与苯基相连；

环A’为环烷基或杂环基；

环B选自环烷基、杂环基和*端与环C相连；

环B¹为芳基或杂芳基；

环B²为环烷基或杂环基；

环C选自芳基、杂芳基和*端与Y相连；

环C¹为芳基或杂芳基；

环C²为环烷基或杂环基；

Y为键或C(O)；

X为O或NH；

R⁵选自-S(O)R^5a、-S(O)₂R^5a、卤素、硝基、氰基和卤代烷基；

R^5a选自烷基、卤代烷基、环烷基和环烷基烷基；

环D选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；

R^2a和R^2b相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基；

L为连接单元；

A选自

R¹⁰选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基和杂芳基；

环G为芳基或杂芳基；

R¹³选自氢原子、卤素和烷基；

R¹⁴选自氢原子、卤素、烷基和氰基；

为单键或双键；

W¹为C或N；

W²为C或N；

n为0、1、2或3；

s、x、y、v、u、m、h、j、k和r各自独立地为0、1、2或3。

2.根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L为L¹与环A相连，L⁵与A相连；

其中：

p为0至5的整数；

q为0至5的整数；

f为0至10的整数；

3.根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L²为3至12元杂环基；优选地，L²为4至7元杂环基；更优选地，L²为 *端与L³相连。

4.根据权利要求1至3任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L³为C(O)；和/或L⁴为C_1-10亚烷基。

5.根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其为通式(II)所示的化合物或其可药用的盐：

其中：

t为0至10的整数；

环A、环B、环C、环D、R、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R^2a、R^2b、R^b、Y、X、v、s、n、x、y、L¹、L⁵和A如权利要求2中所定义。

6.根据权利要求1至5任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中X为NH；和/或R为氢原子。

7.根据权利要求1至6任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中环B为5至6元杂环基或环B¹为5或6元杂芳基，环B²为5或6元杂环基；/>为单键或双键；优选地，环B选自/> 更优选地，环B为/>*端与环C相连。

8.根据权利要求1至7任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中环C选自苯基、10元杂芳基和其中环C¹为5或6元杂芳基，环C²为5或6元环烷基或5或6元杂环基；/>为单键或双键；优选地，环C选自苯基、/>更优选地，环C为苯基；*端与Y相连。

9.根据权利要求1至8任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中R³和R⁴均为氢原子；或者R³和R⁴与其各自相连的碳原子一起形成5至8元杂环基。

10.根据权利要求1至9任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中选自/>

11.根据权利要求5至10任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中L¹选自CH₂、CH₂CH₂和N(CH₃)CH₂，N(CH₃)CH₂中的CH₂端与环L²相连；和/或环L²为*端与C(O)相连；和/或L⁵为键或O。

12.根据权利要求1至11任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中A选自优选选自

13.根据权利要求1至12任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中环A选自优选为/>更优选为/>*端与L或L¹相连，+端与苯基相连。

14.根据权利要求1至13任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中R¹为卤素；和/或R²为氢原子。

15.根据权利要求1至14任一项所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中R⁵为C_1-6卤代烷基磺酰基；优选地，R⁵为-S(O)₂CF₃。

16.根据权利要求1至15所述的通式(I)所示的化合物或其可药用的盐，其中环D为5或6元杂环基；和/或R^b为C_1-6羟烷基；和/或v为0或1；优选地，选自

17.化合物或其可药用的盐，其选自以下化合物或其可药用的盐：

/>

18.一种通式(II-1B)、(II-2B)、(II-3B)或(III-4A)所示的化合物或其盐：

/>

其中：

为单键或双键；

环A、环D、环E、环F、环G、W¹、W²、R¹、R²、R^3a、R^4a、R⁵、R⁹、R¹⁰、R¹²、R^b、Y、L¹、环L²、L⁵、v、u、t、n、x和y如权利要求5中所定义。

19.化合物或其盐，其选自：

/>

20.一种制备根据权利要求5所述的通式(II)所示的化合物或其可药用的盐的方法，其包括以下步骤：

其中：

环A、环B、环C、环D、R、R¹、R²、R³、R^3a、R⁴、R^4a、R⁵、R^b、Y、X、x、y、n、v、t、L¹、环L²、L⁵和A如权利要求5中所定义。

21.一种药物组合物，所述药物组合物含有根据权利要求1至17中任一项所述的化合物或其可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

22.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物或其可药用的盐或根据权利要求21所述的药物组合物在制备用于降解BCL-2蛋白的药物中的用途。

23.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物或其可药用的盐或根据权利要求21所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防由BCL-2介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

24.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物或其可药用的盐或根据权利要求21所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防骨髓纤维化或癌症的药物中的用途；其中所述的癌症为实体瘤或血液恶性肿瘤，优选选自白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、脑癌、滑膜肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、肺癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨瘤、骨软骨瘤、肉瘤、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、绒毛膜癌、肾癌、甲状腺癌、真性红细胞增多症、输尿管肿瘤、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤；所述白血病优选选自慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病；所述淋巴瘤优选为非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤。