CN117821253B - 一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，公开了一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，所述方法包括如下步骤：S1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；S2：将第一菌群在油作为唯一碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；S3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有NaCl的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群。本发明方法获得菌群对船舶中含油废水具有较好的去除能力，去油能力稳定，并且除油的方法和处理后的水质满足环保的要求。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法。
背景技术
随着世界经济发展的需要，水路运输已成为现代重要交通运输体系之一，根据相关数据显示：水路运输完成了世界80%以上的贸易总量，是当今最为经济、节能的运输方式。然而，由船舶运输而产生的船上生活污水及船舶靠岸卸载的含油废水对海洋生态环境和公众健康都造成了巨大的危害。
目前国内外船舶污水污染防治工作仍然面临着一些弊端及迫切需要解决的问题：比如船舶靠岸卸载的含油压载水/洗舱油污水/舱底油污水含油种多，乳化程度高，常规技术除油效果不稳定、抗冲击能力弱、去除范围窄、并且处理后的水质难以满足日益严格的环保要求等问题。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，本发明方法获得菌群对船舶中含油废水具有较好的去除能力，去油能力稳定，并且除油的方法和处理后的水质满足环保的要求。
本发明提供了一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，包括如下步骤：
S1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；
S2：将第一菌群在油作为唯一的碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；
S3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有NaCl（氯化钠）的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群。
进一步的，所述S1中稀释采用无菌水。
进一步的，所述S1中稀释的具体步骤为：称取10g石油污染污泥放入带玻璃珠的90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10mL第一次菌群稀释液，转移至具有90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
进一步的，所述S1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5mL，在30℃-35℃下培养48h。
进一步的，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
进一步的，所述无机盐培养基的pH值范围为7-8。
进一步的，所述无机盐培养基中还包括氢氧化钠。
进一步的，所述油包括IFO180燃油、IFO380燃油中的一种或多种。
进一步的，所述S2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
进一步的，所述S2中第一菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
进一步的，所述S2中选择培养基的pH值为7-8。
进一步的，所述S2中选择培养基中还包括氢氧化钠。
进一步的，所述S2中培养的条件为在30℃-35℃下培养48h。
进一步的，所述S3中第二菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
进一步的，所述S3中磁作用的条件为：磁场强度为10mT-20mT；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止3h-4h。
进一步的，所述S3中对未接种的选择性培养中的油含量进行测试，在磁作用过程中，每隔4h对接种后的选择性培养中的油含量进行测试，比较两次相邻的测试结果，直至选择培养中的油含量的下降速度趋于平缓，则停止继续在选择培养基中培养。
进一步的，所述S3中高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(15g/L-20g/L):(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.5g/L-0.6g/L)。
进一步的，所述S3中高盐培养基的pH值为7-8。
进一步的，所述S3中高盐培养基中还包括氢氧化钠。
进一步的，所述S3中高盐培养基中的接种量为5mL，高盐培养基的体积为1L。
进一步的，所述S3中高盐培养基的培养条件为在30℃-35℃下培养48h。
进一步的，所述S3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5mL菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻10min-15min，在30℃-35℃水浴下进行解冻。
本发明还提供了所述基于磁生物技术的微生物菌群制备方法获得菌群在去除船舶含油污水中的应用。
本发明实施例具有以下技术效果：
1.本发明方法简单方便容易实现，且获得目标菌群能对船舶含油废水有高达90%以上的除油率。
2.发明的方法中采用了磁作用、高盐培养基和冷冻处理，磁作用不仅能有利于提升目标菌群的代谢能力，还有利于目标菌群的富集，为目标菌群进一步在高盐培养基和冷冻处理做准备；高盐培养基一方面能减少目标菌群细胞内的水分，防止目标菌群在冷冻处理时的死亡，另一方面能一定程度增大目标菌群的膜通透性，从而有利于提升目标菌群对油的代谢能力；最后将高盐培养基培养后的目标菌群进行冷冻处理，提升目标菌群对油的代谢能力。
3. 本发明方法获得菌群对船舶中含油废水具有较好的去除能力，去油能力稳定，并且除油的方法和处理后的水质满足环保的要求。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述。显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施例，都属于本发明所保护的范围。
第一方面，本发明提供了基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，包括如下步骤：
S1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；
S2：将第一菌群在油作为唯一的碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；
S3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有NaCl（氯化钠）的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群。
在本发明的方法中，通过对选择性后的除油菌群进行磁作用、高盐培养以及冷冻处理，成功获得了具有高除油的目标菌群。在本发明中，通过磁作用一方面能促进微生物的生长速度，有利于具有除油能力的菌株量达到稳定，从而有利于目标菌株的筛选；另一方面，磁作用能改善目标菌群膜的通透性，促使目标菌群能快速的进行物质的交换，从而也有利于提升目标菌群对船舶含油废水中油的去除。高盐培养基一方面能进一步的改善目标菌群膜的通透性，另一方面，有利于缓解在冷冻处理时目标菌群的细胞膜被大量的冰晶刺穿。冷冻处理改善菌群的膜通透性，在磁作用、高盐培养和冷冻处理的相互配合下，在保证油脂能快速和更多的进入微生物膜内被代谢的基础上，还可以减少菌群细胞中蛋白质等物质的流出，造成目标菌群的大量死亡。
一些实施例方式中，所述S1中稀释采用无菌水。
一些实施例方式中，所述S1中稀释的具体步骤为：称取10g石油污染污泥放入带玻璃珠的90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10mL第一次菌群稀释液，转移至具有90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
一些实施例方式中，所述S1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5mL，在30℃-35℃下培养48h。
一些实施例方式中，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
在本发明中，无机盐培养基用于培养污泥中的菌群，促使菌群富集生长，为下一步进行筛选目标菌群做准备。
一些实施例方式中，所述无机盐培养基的pH值为7-8。
一些实施例方式中，所述无机盐培养基中还包括氢氧化钠。本领域技术人员应该理解的是，氢氧化钠用于调节培养基的pH值，从而有利于菌群的生长和富集，氢氧化钠浓度不受限制，能达到调节pH值范围的效果即可。
一些实施例方式中，所述油包括IFO180燃油、IFO380燃油中的一种或多种。
在本发明中，本领域技术人员可根据实际需要更换油的种类和型号。
一些实施例方式中，所述S2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
在本发明中，在无机盐培养基中加入油是为了保证目标菌群在保证能生长的基础上，进一步筛选可代谢油的目标菌群。
一些实施例方式中，所述S2中第一菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
一些实施例方式中，所述S2中选择培养基的pH值为7-8。
一些实施例方式中，所述S2中选择培养基中还包括氢氧化钠。
一些实施例方式中，所述S2中培养的条件为在30℃-35℃下培养48h。
一些实施例方式中，所述S3中第二菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
一些实施例方式中，所述S3中磁作用的条件为：磁场强度为10mT-20mT；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止3h-4h。
在本发明中采用间接式刺激方式，不仅能保证目标菌群的存活率，还可以有利于改善目标菌群膜的通透性，为高盐培养基培养和冷冻处理进一步改善目标菌群膜通透性做准备。典型非限制性的，例如，磁场强度为10mT、11mT、12mT、13mT、14mT、15mT、16mT、17mT、18mT、19mT、20mT。
一些实施例方式中，所述S3中对未接种的选择性培养中的油含量进行测试，在磁作用过程中，每隔4h对接种后的选择性培养中的油含量进行测试，比较两次相邻的测试结果，直至选择培养中的油含量的下降速度趋于平缓，则停止继续在选择培养基中培养。
一些实施例方式中，所述S3中高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(15g/L-20g/L):(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
在本发明中，高盐培养基中，盐浓度的选择一方面需要有利于目标菌群中细胞失去一部分水，为冷冻处理改善膜的通透性做铺垫；另一方面，还需要平衡目标菌群不会因为过度失水造成大量目标菌群的死亡。
一些实施例方式中，所述S3中高盐培养基的pH值为7-8。
一些实施例方式中，所述S3中高盐培养基中还包括氢氧化钠。
一些实施例方式中，所述S3中高盐培养基中的接种量为5mL，高盐培养基的体积为1L。
一些实施例方式中，所述S3中高盐培养基的培养的条件为在30℃-35℃下培养48h。
一些实施例方式中，所述S3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5mL菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻10min-15min，在30℃-35℃水浴下进行解冻。
在本发明中，冷冻时间和解冻时间的选择对保证目标菌群膜的通透性和目标菌群的存活率具有直接的关系。典型非限制性的，例如，冷冻时间为10min、11min、12min、13min、14min、15min。
第二方面，本发明还提供了所述基于磁生物技术的微生物菌群制备方法获得菌群在去除船舶含油污水中的应用。
下面结合具体实施例进一步说明。
实施例1：
S1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；
其中，稀释采用无菌水。称取10g石油污染污泥放入带玻璃珠的90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10mL第一次菌群稀释液，转移至具有90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5mL，在35℃下培养48h。
无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；硫酸铵的浓度为1 g/L、磷酸二氢钾的浓度为0.5 g/L、氯化钾的浓度为0.5 g/L、七水硫酸镁的浓度为0.5 g/L、硫酸亚铁的浓度为0.3 g/L、无水氨化钙的浓度为0.3g/L、硝酸铵的浓度比为0.5g/L。
无机盐培养基的pH值为7-8，无机盐培养基中采用氢氧化钠调整培养基的pH值。
石油污染的污泥来源于山东省滨州市博兴县吕艺镇屯田村。
S2：将第一菌群在油作为唯一的碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；
选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；油的浓度为1.5g/L、硫酸铵的浓度为1g/L、磷酸二氢钾的浓度为0.5g/L、氯化钾的浓度为0.5g/L、七水硫酸镁的浓度为0.5 g/L、硫酸亚铁的浓度为0.3g/L、无水氨化钙的浓度为0.3g/L、硝酸铵的浓度比为0.5g/L。
第一菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
选择培养基的pH值为7-8，采用氢氧化钠调整培养基的pH值；
培养的条件为在35℃下培养48h；
油为IFO180燃油。
S3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有NaCl（氯化钠）的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群。
第二菌群的接种量为5mL，选择培养基的体积为1L。
磁作用的条件为：磁场强度为15mT；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止4h。
对未接种的选择性培养中的油含量进行测试，在磁作用过程中，每隔4h对接种后的选择性培养中的油含量进行测试，比较两次相邻的测试结果，直至选择培养中的油含量的下降速度趋于平缓，则停止继续在选择培养基中培养。
高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；氯化钠的浓度为17g/L、油的浓度为1.5g/L、硫酸铵的浓度为1g/L、磷酸二氢钾的浓度为0.5g/L、氯化钾的浓度为0.5g/L、七水硫酸镁的浓度为0.5 g/L、硫酸亚铁的浓度为0.3g/L、无水氨化钙的浓度为0.3g/L、硝酸铵的浓度比为0.5g/L。
高盐培养基的pH值范围为7-8，采用氢氧化钠调整培养基的pH值。
高盐培养基中的接种量为5mL，高盐培养基的体积为1L。
高盐培养基的培养的条件为在35℃下培养48h。
S3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5mL菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻15min，在35℃水浴下进行解冻。
实施例2：
实施例2的制备方法中，磁作用强度为20mT，高盐培养基中的氯化钠的浓度为15g/L，冷冻的时间为10min，其他实验参数与实施例1一致。
实施例3：
实施例3的制备方法中，磁作用强度为10mT，高盐培养基中的氯化钠的浓度为20g/L，冷冻的时间为15min，其他实验参数与实施例1一致。
对比例1：
对比例1的制备方法仅采用磁作用，不采用高盐培养基培养和冷冻处理，其他实验参数与实施例1一致。
对比例2：
对比例2的制备方法仅采用磁作用和高盐培养基培养，不采用冷冻处理，其他实验参数与实施例1一致。
对比例3：
对比例3的制备方法仅采用磁作用和冷冻处理，不采用高盐培养基培养，其他实验参数与实施例1一致。
对比例4：
对比例4的制备方法仅采用高盐培养基培养和冷冻处理，不采用磁作用，其他实验参数与实施例1一致。
我们还将实施例和对比例获得的目标菌群用于处理船舶含油废水，测试结果如下：
（1）按照GB/T16488-1996方法，检测含油量，并计算除油率。
结果分析
表1实施例和对比例处理船舶含油废水的结果
在本发明中，通过本发明的方法成功的获得目标菌群，将目标菌群用于船舶含油废水中处理废水，测试结果如表1所示。从表1中发现，本发明实施例1-实施例3的除油率均显著优于对比例1-对比例4。
首先，在本发明中采用磁作用、高盐培养和冷冻处理，改善了目标菌群膜的通透性，促进了废水中的油进入目标菌群被代谢，从而提升了对油的代谢能力。本发明的方法在能提升油的代谢能力的基础上，还可以有利于维持菌群的存活率。采用磁作用，一方面能改善能改善菌群的膜通透性，提升微生物的代谢水平，从而有利于在选择培养中快速的筛选可代谢油的目标菌群；另一方面，也有利于目标菌群的富集，从而为接下来的高盐培养和冷冻处理保证足够多的目标菌群。为了进一步提升目标菌群膜通透性，在冷冻处理前采用高盐培养基进行培养，一方面能促使目标菌群的失水，减少目标菌群在冷冻处理时的大量死亡，另一方面，也能辅助进一步提升目标菌群的膜通透性。冷冻处理可进一步改善膜的通透性。可以通过实施例1-实施例3与对比例1-对比例4比较发现，在本发明方法之下，船舶污水中的除油率提升至90%以上。
在本发明中，在保证目标菌群对油代谢提升的情况之下，还需考虑目标菌群的存活率。如实施例1-实施例3比较发现，实施例1具有最佳的除油率。推测可能时因为磁场强度虽然能提升目标菌群的代谢和富集，但是当磁强度增强时，可能会导致菌群的大量死亡，并且目标菌群的细胞膜可能损伤严重，在高盐培养和冷冻处理，会影响菌群的存活率，最终影响除油率。当高盐培养基中的盐含量更多或更少均会影响冷冻处理效果，当盐含量较高，会直接导致细胞的失水死亡，而盐含量较低，可能会导致在冷冻处理时冰晶对细胞膜的大量损伤。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案。
Claims (7)
1.一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
S1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；
S2：将第一菌群在油作为唯一碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；
S3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有NaCl的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群；
所述S3中磁作用的条件为：磁场强度为10mT-20mT；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止3h-4h；
所述S3中高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(15g/L-20g/L):(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.5g/L-0.6g/L)；
所述S3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5mL菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻10min-15min，在30℃-35℃水浴下进行解冻。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中稀释的具体步骤为：称取10g石油污染的污泥放入带玻璃珠的90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10mL第一次菌群稀释液，转移至具有90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5mL，在30℃-35℃下培养48h，所述无机盐培养基的pH值范围为7-8。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)；
所述S2选择培养基的pH值为7-8；
所述S2中培养的条件为在30℃-35℃下培养48h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高盐培养基的pH值为7-8；高盐培养基的培养条件为在30℃-35℃下培养48h。
7.权利要求1-权利要求6任一项所述的基于磁生物技术的微生物菌群制备方法获得菌群在去除船舶含油污水中的应用。
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